Калицивирус морских львов. Вирус поксвирусной инфекции морских млекопитающих

Размещено на http://www.allbest.ru//

ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии -- МВА им. К.И.Скрябина»

Кафедра радиобиологии и вирусологии имени академиков А.Д. Белова и В.Н. Сюрина

РЕФЕРАТ

по дисциплине «Вирусология»

«Калицивирус морских львов. Вирус поксвирусной инфекции морских млекопитающих»

Исполнитель:

Смирнова Варвара

Москва, 2019

Введение

Калицивирус морских львов обнаружен в 1972 г. на острове Сан-Мигель и назван вирусом морских львов Сан-Мигель. По основным свойствам он не отличается от ранее хорошо известного вируса везикулярной экзантемы свиней и близок по спектру хозяев, а также антигенным свойствам. Патогенный для свиней калицивирус был выделен также от океанской рыбы, в связи с чем было установлено, что морские львы, а также другие ластоногие могут служить естественным резервуаром для калицивируса. Его изучение имеет большое значение, т.к морские млекопитающие могут заражать домашних и сельскохозяйственных животных. Например, при употреблении свиньями зараженных морских млекопитающих, калицивирус способен вызывать везикулярную экзантему вируса свиней, т.к данные вирусы почти идентичны.

Характеристика вируса

Таксономия

Семейство Caliciviridae объединяет большую группу сходных по морфологии и отличных по антигенным свойствам РНК-позитивных однонитевых вирусов, вирионы которых имеют характерную морфологию с чашеобразными углублениями на сферической поверхности капсида, откуда происходит их название (calyx, или chalice - чаша).

В составе семейства 4 рода: везивирусы, лаговирусы, Норфолк-подобные вирусы (норовирусы) и Саппоро-подобные вирусы (саповирусы). Первые два рода включают вирусы, патогенные для животных, последние два рода включают в основном вирусы, патогенные для человека. Совсем недавно считали, что калицивирусы имеют ограниченный круг хозяев и поражают только свиней, кошек и морских львов. Однако за последнее время получены изоляты от моржей, людей, обезьян, телят, цыплят, норок, рептилий, амфибий и насекомых. Патогенность одних калицивирусов для естественного хозяина доказана, для других -- требует выяснения. Некоторые из них еще недостаточно изучены.

Большинство калицивирусов океанского происхождения первоначально выделялись на одной из двух клеточных линий. Это клетки почек свиньи и клетки почек африканской зеленой мартышки. Были получены непрерывные клеточные линии, восприимчивые к инфекции широкого спектра вирусов, но калицивирус преимущественно реплицировался в клетках обезьяны. Клетки морских млекопитающих, как правило, не относятся к клеткам распространяющим калицивирус. Исследования с различными клеточными линиями показали, что клетки человека и приматов часто являются предпочтительными, клетки собаки и кошки обычно заражаются, клеточные линии, полученные из травоядных, иногда становятся инфицированными, и клеточные линии грызунов почти никогда не поддерживают вирусную репликацию. Его предпочтения в отношении клеточных линий, полученных человеком и приматом, были ранним ключом к широкому диапазону хозяев и возможному зоонозному качеству этих агентов.

Морфология вириона

Вирионы шаровидной формы, представляют собой безоболочечный нуклеокапсид кубической симметрии, диаметром 35-40 нм. Они содержат 180 идентичных молекул белка (м. 60 000), собранных в димеры, формирующие 90 дугообразных структурных единиц, которые образуют 32 чашеобразных поверхностных углублений, придающих вирионам уникальный вид. На проекции вириона видны 10 выступов, представляющих собой края чашеобразных углублений. Обычно принятое понятие о капсомерах считается неприемлемым для калицивирусов.

Геном представлен одной молекулой линейной, одноцепочечной РНК, размером 7,4-7,6 пн. 5'-конец генома кэппирован ковалентно связанным белком VPg, а 3'-конец полиаденилирован. Геномная РНК и несколько субгеномных РНК образуются в процессе репликации; зрелые белки образуются двумя путями расщеплением полиопротеина и трансляцией субгеномных мРНК. Геномная РНК инфекционна. Вирусы относительно устойчивы к нагреванию и детергентам, но чувствительны к низким рН (>99% инактивируются при рН=3,0).

Этапы репродукции

Прикрепление к рецепторам клеток хозяина, эндоцитоз.

Раздевание, и высвобождение вирусной РНК в цитоплазму

VPg удаляется из вирусной РНК, а затем транслируется в обработанный ORF1 полипротеин для получения реплицирующих белков

Репликация происходит на вирусных фабриках. Геном dsRNA синтезируется из геномной ssRNA (+)

Геном dsRNA транскрибируется (реплицируется), тем самым обеспечивая вирусные мРНК (новые ssRNA (+) геномы).

Трансляция субгеномной РНК приводит к появлению капсидного белка и VP2

Сборка новых вирусных частиц и их высвобождение путем лизиса клеток.

Антигенная структура и антигенная вариабельность

У переболевших животных обнаруживают вируснейтрализующие антитела. Штаммы калицивирусов морских львов в антигенном соотношении родственны. Они не имеют антигенного родства с пикорнавирусами человека, хотя по некоторым биологическим свойствам сходны с пикорнавирусами групп Коксаки и ЕСНО.

Гемагглютинирующие и гемадсобрибующие свойства

Вирус способен агглютинировать эритроциты человека, овец, птиц.

Титр агглютинации снижается при обработке хлороформом и повторном замораживании и оттаивании вирусосодержащего материала.

Особенности культивирования

В лабораторных условиях культивирование вируса возможно только на естественно восприимчивых животных, а также в перевиваемои? линии клеток почки морского льва с образованием ЦПД после 2 пассажеи?. В организме репродукция вируса происходит в цитоплазме зараже?нных клеток.

Органный патогенез

При поражении вирусом эпителия слизистой оболочки ротовой полости вначале на ней образуются гладкие полусферические, четко отграниченные пузырьки диаметром 5-10 мм. Пузырьки появляются главным образом в области верхней и боковых поверхностей языка, на твердом нёбе по обе стороны от его средней линии, а также вне ротовой полости -- на наружных частях ноздрей. Пузырьки вскоре лопаются. На их месте образуются эрозии, которые могут углубляться и изъязвляться, что чаще отмечают на слизистой оболочке твердого нёба, особенно у кошек, питающихся сухим кормом. В течение 2 недель слизистая оболочка в местах эрозий регенерирует. Особенно активное размножение калицивируса происходит в эпителиальных клетках крипт миндалин, которые под его действием подвергаются дистрофии и некрозу. В криптах возбудитель может находиться еще в течение нескольких недель после выздоровления животного. Отдельные штаммы вируса размножаются в легочных альвеоцитах, вызывая некроз этих клеток и воспалительную реакцию.

Диагностика болезни

Постановка предварительного диагноза

Анализ эпизоотологических данных

Знания о вирусах в дикой фауне по-прежнему едва изучены. Иногда вирусные инфекции ассоциируются с эпидемиями у морских млекопитающих. Кроме того, морские млекопитающие могут иногда подвергаться воздействию людей, сельскохозяйственных животных или домашних животных, что может представлять риск передачи трансмиссионных патогенов и зоонозов с перекрестными видами. Например, трансграничная передача вируса морского льва Сан-Мигель, который заражает морских млекопитающих. Этот калицивирус почти идентичен везикулярной экзантеме вируса свиней, искорененному у свиней с 1956 года, и он способен вызывать одинаковое заболевание у свиней, кормящих зараженными трупами ластоногих.

Клинические признаки

У больных животных наблюдают появление на коже везикул диаметром от 1 до 30 мм, которые располагаются преимущественно на спинной поверхности передних плавников.

Язвы на языке и твердом нёбе

Выделения из носа и глаз.

Аборты

Патанатомические изменения

При вскрытии павших животных: поражения на слизистой оболочке ротовой полости, нередко в грудной полости, а также интерстициальная пневмония. Чаще всего поражены краниовентральные участки передних и средних долей легких. Воспаленная легочная ткань уплотнена, окрашена в ярко-красный цвет.

Гистологическим исследованием устанавливают некроз клеток слизистой оболочки, а при глубоком поражении респираторного тракта --некроз альвеолярной перегородки с инфильтрацией лейкоцитов.

Патматериал

Для лабораторных исследовании? от павших животных направляют свежие трупы целиком, абортированные плоды, печень.

От живых животных: Соскобы из язв ротовои? полости, смывы со слизистои? конъюнктивы глаз, смывы со слизистои? носа и ротоглотки

Этапы лабораторной диагностики

Диагноз основан на анализе эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных, а также результатов лабораторных исследований.

Вирус этого рода чаще диагностируют, выделяя в культуре клеток почки, и дифференцируют в РН, РИФ.

Индикация вируса с помощью прямой РИФ Реакция имунной флуоресценции бывает в двух вариантах, прямой и непрямой. При прямом варианте вирусный антиген взаимодействует со спецефическим конъюгат-комплексом. Признаком положительной реакции будет свечение.

Изоляция вируса

Для изоляции вируса в культуре клеток отбирают пробы биоматериала (смывы с носовой и ротовой полости). Для получения первично трипсинизированной культуры клеток используют почки эмбриона, родители которого тестировались на наличие калицивируса. Цитопатогенное действие проявляется в округлении клеток, истончении и разрыве монослоя клеток (полное разрушение за 24 часа). Конечная картина ЦПД выражалась в гибели клеток и отслоении их в питательную среду. Все изоляты чувствительны к хлороформу, эфиру, трипсину и нагреванию до 50°С, не обладают гемагглютинирующими и гемадсорбирующими свойствами в отношении эритроцитов морской свинки, т.е. проявляют свойства, характерные для калицивируса.

Идентификация вируса Берут мазок глазной или носовой жидкости для лабораторных исследований, в которых, вирус определяется методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) - методом, позволяющим выявить генетические особенности вируса.

Серологические реакции

При взятии патматериала (печени): в лаборатории из печени готовят 25%-ную суспензию, добавляют хлороформ в соотношении 1:5 на 15 мин. при постоянном встряхивании. Затем суспензию осветляют и надосадочную жидкость используют в качестве антигена.

Реакция Нейтрализации

Принцип реакции нейтрализации заключается в том, что берут вирусный антиген и антитело к нему и проводят биопробу на живой системе (культура клеток, куриный эмбрион, лабораторные животные). Если биопроба будет отрицательной, значит реакция нейтрализации прошла (положительный результат). В сомнительных случаях ставят биопробу. При этом зараженные котята (они выступают в качестве лабораторных животных) погибают через 20 дней.

Специфическая профилактика

В настоящее время, диких морских котиков не профилактируют, но может использоваться вакцина, сделанная из ослабленного возбудителя. У кошек же имеется широкий спектр вакцин: Феловакс (Fel-O-Vax), Мультифел, Леукорифелин, Квадрикат, Нобивак Трикат (Nobivac Tricat и другие).

калицивирус котик антигенный

Характеристика вируса

ПОКСВИРУСЫ (Poxviridae), семейство ДНК-содержащих вирусов, вызывающих у животных и человека оспенные и оспоподобные болезни.

Семейство подразделяется на 2 подсемейства: Chordopoxvirinae (П. позвоночных) и Entomopoxvirinae (П. насекомых).

П. позвоночных включают 6 родов: Orthopoxvirus (возбудители оспы человека, обезьян, аластрима, оспы коров, осповакцины, инфекц. эктромелии, оспы кроликов, верблюдов, буйволов, лошадей); Avipoxvirus (возбудители оспы птиц отр. куриных, голубиных и воробьиных); Capripoxvirus (возбудители оспы овец, коз и кожной бугорчатки кр. рог. скота типа Нитлинг); Leporipoxvirus (возбудители фибромы Шопа у кроликов, миксомы кроликов, фибромы зайцев, белок и калифорнийской миксомы); Parapoxvirus (вирусы ОРФ, эктимы овец, контагиозной эктимы антилоп, папулёзного стоматита и псевдооспы коров, оспы морских львов и др.); Suipoxvirus (вирус оспы свиней).

Таксономия:

Семейство: Chordopoxvirinae (П. позвоночных)

Род: Parapoxvirus (вирусы ОРФ, эктимы овец, контагиозной эктимы антилоп, папулёзного стоматита и псевдооспы коров, оспы морских львов и др.)

Вид: PXV (sealpox virus - вирус оспы тюленей).

Морфология вириона: Окруженный яйцевидный вирион длиной 220-300 нм и шириной 140-170 нм. Поверхностная мембрана отображает поверхностные нити. Существуют две различные инфекционные вирусные частицы: внутриклеточный зрелый вирус (IMV) и внеклеточный вирус (EEV). Суперкапсид содержит гемагглютинины. Капсид имеет форму кирпича с закругленными углами, двояковогнутый (рис. 1-2). Снаружи капсида в местах вдавлений располагаются латеральные тела овальной формы. Капсид спирального типа симметрии образован протеиновой нитью, уложенной в зависимости от рода поксвирусов строго или неправильно спирально. Геном поксвирусов представлен линейной нефрагментированной двухниточной ДНК длиной 145-220*103 пар нуклеотидов. Вирионы поксвирусов содержат до 15 свободных ферментов, в том числе ДНК-зависимую РНК-полимеразу, киназы, изомеразы, нуклеазы, фосфатазы, трасферразы, щелочную протеазу. В состав вирионов, кроме белков и ДНК, входят нейтральные жиры, фосфолипиды, углеводы. Нуклеопротеид NP является общим антигеном для всех поксвирусов.

Этапы репродукции:

Присоединение вирусных белков к хозяину гликозаминогликанам (GAG) опосредует эндоцитоз вируса в клетке-хозяине.

Слияние с плазматической мембраной для высвобождения ядра в цитоплазму хозяина.

Ранняя фаза: ранние гены транскрибируются в цитоплазме с помощью вирусной РНК-полимеразы. Ранняя экспрессия начинается через 30 минут после заражения.

Ядро полностью не покрыто, так как ранняя экспрессия заканчивается, вирусный геном теперь свободен в цитоплазме.

Промежуточная фаза: промежуточные гены экспрессируются, вызывая репликацию геномной ДНК приблизительно через 100 минут после заражения.

Поздняя фаза: поздние гены экспрессируются от 140 минут до 48 часов после заражения, продуцируя все структурные белки.

Сборка потомственных вирионов начинается на цитоплазматических вирусных фабриках, образуя сферическую незрелую частицу. Эта вирусная частица созревает во внутриклеточный зрелый вирион в форме кирпича (IMV).

Вирион IMV может высвобождаться при лизисе клеток или может приобретать вторую двойную мембрану из транс-Гольджи и почки в качестве внешнего вириона с оболочкой (EEV).

Гемагглютинирующие свои?ства. Вирус агглютинирует эритроциты кур при +37°С.

Культивирование вируса осуществляют на ХАО куриного эмбриона с образованием диффузных и геморрагических оспин, а также в культуре клеток почки крупного рогатого скота и ку- риного эмбриона (мутные бляшки). Большие заражающие дозы летальны для эмбрионов.

Органный патогенез: При введении вируса в кожу или тестикулы появляется специфические высыпания на коже, развивается архит, а иногда генерализация процесса. Могут наблюдаться незначительные местные поражения.

Диагностика болезни

постановка предварительного диагноза

Анализ эпизоотологических данных

Данные диких животных недостаточно изучены. Поксвирусные инфекции ластоногих выделяют в одну группу и присущи серым и береговым тюленям. Ортопоксвирус в 2006 году был выделен Т. Kuiken из оспоподобных повреждений кожи серых тюленей. Эта патология наиболее ярко проявляется у тюленей при содержании их в условиях неволи. Оспоподобное заболевание тюленят, содержащихся в неволе, возникает после отъёма их от самок.

Клинические признаки:

угнетенное состояние;

конъюктивит и опухание век;

появления сыпи на туловище, конечностях;

потеря аппетита;

гиперемия слизистой оболочки носа;

гнойно-слизистые истечения из глаз;

Патанатомические изменения

На коже и слизистых оболочках -- характерные поражения. При вскрытии трупа обнаруживают признаки аутоинтоксикации и истощения. В цитоплазме эпидермиса кожи и на слизистой оболочке характерны оспенные включения, имеющие диагностическое значение.

Патматериал: содержимое везикул, целые папулы и пустулы, иссеченные вместе с субэпидермальной отечной тканью

Этапы лабораторной диагностики

Индикация вируса

При типичном клиническом проявлении болезни для постановки диагноза вполне достаточно анализа клинико-эпизоотологических данных. В затруднительном случае проводят микроскопическое исследование материала из свежих папул, окрашенного по методу М. А. Морозова. (При микроскопии в препаратах обнаруживают множество мелких частиц кокковидной формы, расположенных поодиночке, парами или в виде скоплений. При окраске по Морозову оспенные частицы имеют темно-коричневый цвет). При световой микроскопии таких препаратов на желтом фоне мазка заметны темно-коричневые элементарные тельца размером от 2 до 20 мкм.

Идентификация

При атипичной форме болезни, а также с целью идентификации возбудителя оспы ставят биопробу на восприимчивых животных путем внутрикожного введения патматериала.

Серологические реакции: Реакция нейтрализации:

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), т.е происходит связывание комплемента комплексом антиген - антитело. Если же комплекс антиген - антитело не образуется, то комплемент остается свободным.

Для специфическои? профилактики используют медицинскую осповакцину, которую наносят на свежескарифицированную кожу в области промежности или внутреннеи? поверхности уш- нои? раковины. После естественного переболевания иммунитет сохраняется пожизненно.

Профилактика и меры борьбы. Для предупреждения заболевания соблюдают общие вет.-сан. меры и применяют специфическую иммунизацию. При обнаружении оспы территорию объявляют неблагополучной, накладывают карантин. Больных и подозрительных по заболеванию млекопитающих изолируют и лечат или убивают. рекомендуют применять мед. оспенный детрит вируса осповакцины. Его вводят в кожу методом скарификации или под кожу. Трупы животных, павших с клиническими признаками оспы, вместе со шкурой и шерстью сжигают. Шкуры и шерсть, снятые с животных без клинических, убитых в период заболевания в неблагополучных районах дезинфицируют и реализуют только после снятия карантина и ограничений.

Заключение

Калицивирус морских котиков был выявлен относительно недавно и находится в одном роде с возбудителем калицивироза кошек.

Это PHK одноцепочный зоонозный вирус. Для диагностики используют несколько видов реакций, а в качестве лабораторных животных лучше всего подходят котята, так как они чувствительны к данному семейству вирусов. В настоящее время не вакцинируют диких животных, но для кошек имеется масса неспецефичных вакцин.

Вирус поксвирусной инфекции морских млекопитающих (вирус оспы) еще не достаточно изучено, в связи со сложностью выявления данного заболевания (клиническая картина похожа на многие другие инфекции). Семейство поксвирусов включает в себя 2 подсемейства, 6 родов и огромное количество видов, поражающих человека, домашних и диких животных.

Из морских млекопитающих поксвирусная инфекция наиболее хорошо изучена у тюленей. Заболевание не является смертельным, но может осложняться вторичной бактериальной инфекцией.

В целом, оба вируса изучены не достаточно хорошо и могут привести к заболеваниям у человека: при употреблении в пищу продукции от зараженных сельскохозяйственных животных или при личном контакте с инфецированными морскими млекопитающими.

Список используемой литературы

Березин В.В. Проблемы охраны здоровья морских млекопитающих.// Морские млекопитающие. Тез. док. X Всесоюзн. совещ. по изучению, охране и рациональному использованию морских млекопитающих (г.Светлогорск, 2-5 окт. 1990 г.). - 1990.- С. 19-21

Биркун А.А. Вирусы китов и дельфинов.// Микробиол. журнал. - 1996.- 58, N5. - С.100-106.

Барышников П.И. Ветеринарная вирусология: учебное пособие / П.И. Барышников. Барнаул: Изд-во АГАУ, 2006. 113 с.

Эпизоотология с микробиологией: Учебник - Мн.:РИПО, 2017. - 543 с.: ISBN 978-985-503-704-1

Бессарабов Б.Ф., Вашутин А.А., Воронин Е.С. Инфекционные болезни животных М.: КолосС, 2007. - 671 с.Степанова О.А. Вирусные инфекции морских млекопитающих.// Экология, физиология и ветеринария морских млекопитающих. - Севастополь, 1997. - С.204-209.

Госманов, Р. Г. Ветеринарная вирусология [Текст] : учебник для студ. вузов, обуч. по спец. 111201 "Ветеринария" / Р. Г. Госманов, Н. М. Колычев. - 2-е изд., перераб. и доп. - М. : КолосС, 2006. - 93c.

Павлович С. А. Микробиология с вирусологией и иммунологией [Текст] : учеб. пособие / Павлович С. А. - 3-е изд., испр. - Минск: Выш. шк., 2013. - 388 с.

Viralzone.com

http://www.vetpomosh.ru/article61.php «МОРЖИ, ТЮЛЕНИ, НЕРПЫ И МОРСКИЕ КОТИКИ: ОСОБЕННОСТИ СОДЕРЖАНИЯ, КОРМЛЕНИЯ, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА БОЛЕЗНЕЙ»

Размещено на Allbest.ru