Влияние FeCl3, CuSO4, CoCh, ZnSO4 и NiSO4 на желатинолитическую активность протеиназ мицелиальной культуры вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus)

Изучение влияния FeCl3, CuSO4, CoCl2, ZnSO4 и NiSO4 в концентрации 10-8-10-2 М на желатинолитическую активность внутриклеточных протеиназ 14-ти суточной мицелиальной культуры Pleurotus ostreatus. Роль протеиназ в регуляции внутриклеточных процессов.

Рубрика Биология и естествознание
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 22.02.2023
Размер файла 194,1 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

ВЛИЯНИЕ FeCl3, CuSO4, CoCh, ZnSO4 И NiSO4 НА ЖЕЛАТИНОЛИТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПРОТЕИНАЗ МИЦЕЛИАЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ ВЕШЕНКИ ОБЫКНОВЕННОЙ (PLEUROTUS OSTREATUS)

И.А. ИЛЬЮЧИК, В.Н. НИКАНДРОВ,

А.Д. КУЛЬГАВЕНЯ, М.В. ТОРЧИЛО,

Д.Д. БЕЛЕВИЧ, А.Л. КОЗЛОВА-КОЗЫРЕВСКАЯ

Аннотация

Изучено влияние FeCl3, CuSO4, CoCl2, ZnSO4 и NiSO4 в концентрации 10-8-10-2 М на желатинолитическую активность внутриклеточных протеиназ 14-ти суточной мицелиальной культуры Pleurotus ostreatus. При рН 5,8 все соли угнетали активность в пределах 30%. Лишь сульфат цинка в нескольких концентрациях способствовал слабому росту активности протеиназ: до 16%.

Для желатинолитической активности при рН 7,6 характерен активаторный эффект сульфата меди во всем диапазоне концентраций достигавший 25-67%. Желатинолитическая активность при добавлении хлорида кобальта угнеталась сильнее, чем в кислой среде при концентрации CoCl2 10-6Мна 53%. В то же время при двух максимальных концентрациях этого эффектора желатинолиз возрастал на 25 и 31%. Максимальный активаторный эффект сульфата никеля проявился при концентрации 10Г2Ми достигал 137%, тогда как при концентрациях 10-4 и 10-5Мпротеолиз подавлялся на 26 и 22%.

При рН 9,2 четкое активаторное действие (до 157% по отношению к контролю) практически во всем концентрационном диапазоне оказал CuSO4. Эффект остальных солей не превышал 24%. Ключевые слова: желатинолитические внутриклеточные протеиназы, мицелиальная культура гриба, влияние FeCl3, CuSO4, CoCl2, ZnSO4, NiSO4.

Annotation

FeCls, CuSO4, C0CI2, ZnSO4 AND NiSO4 EFFECT ON A GELATINOLYTIC ACTIVITY OF PROTEINASES OF PLEUROTUS OSTREATUS MYCELIAL CULTURE

ILYUCHYK I.A, NIKANDROV V.N., KULGAVENYA A.D,TORCHILO M.V., BELEVICH D.D., KOZLOVA-KOZYREVSKAYA A.L.

The effect of FeCl3, CuSO4, CoCl2, ZnSO4 and NiSO4 at a concentration of 10^8-10-2 M on the gelatinolytic activity of intracellular proteinases from in 14 days mycelial culture of Pleurotus ostreatus was studied. At pH 5.8, all salts inhibited activity within 30%. Only zinc sulfate in several concentrations contributed to a weak increase in proteinase activity: up to 16%.

The gelatinolytic activity at pH 7.6 is characterized by the activating effect of copper sulfate in the entire range of concentrations, reaching 25-67%. The gelatinolytic activity upon the addition of cobalt chloride was suppressed more strongly than in an acidic medium at a CoCl2 concentration of 10-6M, by 53%. At the same time, at two maximum concentrations of this effector, gelatinolysis increased by 25 and 31%.

The maximum activator effect of nickel sulfate manifested itself at a concentration of 10-2 M and reached 137%, while at concentrations of 10-- and 10-5M, proteolysis was suppressed by 26 and 22%.

At pH 9.2, CuSO4 had a clear activating effect (up to 157% relative to control) in almost the entire concentration range. The effect of other salts did not exceed 24%.

Keywords: gelatinolytic intracellular proteases, fungal mycelium culture, effect of FeCl3, CuSO4, CoCl2, ZnSO4, NiSO4

Введение

Согласно прогностическим данным, к 2050 году человечеству потребуется ежегодно 1,250 млн тонн мяса и молочных продуктов [цит. по 1]. Дефицит белков в рационах населения и сельскохозяйственных животных настоятельно диктует необходимость изыскания альтернативных источников белка. Одним из таковых являются грибы, содержащие 30-50% белков с аминокислотным составом, сопоставимым с рекомендациями ФАО (FAO). Грибы также достаточно богаты витаминами, в первую очередь группы В, и целым рядом других биологически активных соединений [2].

К числу таких грибов относится вешенка обыкновенная - Pleurotus ostreatus, занимающая по объему выращивания в мире третье место среди грибов.

В качестве белковой добавки в рационы скота перспективно использование мицелия этого гриба, что ставит проблему эффективного глубинного культивирования его мицелия. А интенсификация глубинного культивирования выдвигает на первый план уяснение биологии продуцента и механизмов регуляции его метаболизма. К числу важнейших механизмов регуляции жизнедеятельности практически всех живых организмов относятся реакции протеолиза.

Между тем, проведенный анализ данных мировой литературы о состоянии исследований набора протеиназ P. ostreatus продемонстрировал наличие весьма немногочисленных публикаций о протеолитическом потенциале указанного гриба [3], тем более что набор протеиназ существенно зависит от состава питательной среды и условий культивирования.

В предыдущих исследованиях нами было показано, что мицелиальная культура упомянутого гриба наделена достаточно активным и разнообразным, судя по данным ингибиторного анализа, арсеналом протеиназ [1].

Следует отметить, что экстрацеллюлярные протеиназы выполняют функцию, скорее всего, обеспечения мицелия источниками питания - аминокислотами и малыми пептидами. В то же время функция внутриклеточных протеиназ довольно сложна и, в большей степени (если не всецело), играет важную роль в регуляции внутриклеточных процессов метаболизма и физиологии мицелия. Это выдвигает следующую масштабную задачу - раскрытие функционально-структурных свойств компонентов набора протеолитических энзимов мицелия вешенки.

Катионы металлов влияют на активность различных протеиназ - в частности, это было продемонстрировано в экспериментах с хлоридом марганца [4], к тому же ряд пептидогидролаз являются металлоэнзимами.

Поэтому первым шагом в данном направлении было показано, что БеС13, Си804, СоС12, 2и804 и №804 в концентрации 10"8-10" 2 М вызвали, как правило, увеличение желатинолитической активности экстрацеллюлярных протеиназ мицелиальной культуры вешенки при рН 7,6 и 5,8 [5]. Был получен неожиданный эффект перечисленных выше солей металлов - рост желатинолической активности, проявлявшийся даже при их максимальной концентрации эффекторов.

Цель настоящей статьи - выявить специфику влияния катионов металлов на желатинолитическую активность, прежде всего, ряда внутриклеточных протеиназ мицелиальной культуры вешенки, а также экстрацеллюлярной протеиназы, активной при рН 9,2.

Материалы и методы

протеиназа желатинолитический pleurotus ostreatus

Исследования проведены на «диком» штамме Pleurotus ostreatus, выделенном кандидатом биологических наук Е.О. Юрченко в 2014 г. из плодовых тел, растущих на культурном тополе (Populus sp.) в г. Минске.

В работе использовали бактоагар (Melford, USA), желатин (Fluka, Germany). Остальные реактивы были квалификации «хч» производства стран СНГ.

Гриб культивировали на картофельносахарозной среде в течение 14 дней. Подробно культивирование мицелия вешенки описано в предыдущих статьях [1, 6].

По окончании культивирования отбирали пробы культуральной жидкости (1 мл) и мицелия вешенки. Биомассу гриба отмывали, максимально просушивали на фильтровальной бумаге, навески по 0,5 г гомогенизировали при 4° С в течение 2 мин в 1 мл бидистилированной воды, центрифугировали в течение 10 мин при 4 °С и 8000 об/мин. Осветленный гомогенат использовали для дальнейших исследований. Культуральную жидкость использовали без дополнительного разведения.

В качестве растворителя при приготовлении белок-агаровых пластин использовали 0,15 М раствор NaCl рН 7,4. К исследуемым образцам культуральной жидкости или гомогената мицелия вешенки добавляли 0,2 M ацетатный буфер рН 5,8 или 0,05 M трис-HCl буфер рН 7,6, или 0,1 М боратный буфер рН 9,2, учитывая рН-зависимость желатинолитических протеиназ гриба [1].

Водные растворы FeCl3, CuSO4, CoCl2, ZnSO4 и NiSO4 добавляли к образцам культуральной жидкости или гомогенатов мицелия вешенки до конечной концентрации 10-8-10-2 М.

Протеолитическую активность определяли по расщеплению желатина в тонком слое агарового геля как подробно описано ранее [7]. Объем наносимых образцов составлял 10 мкл, объем растворов солей - 10 мкл.

Количество белка в образцах определяли колориметрическим методом [8].

Все исследования проведены не менее чем восьмикратно, результаты обработаны статистически с использованием программ ^їаїШіса 6.0 по 1-критерию Стьюдента.

Результаты и обсуждение

На желатинолитическую активность мицелиальных (интраклеточных) протеиназ Р. ostreatus при различных значениях рН использованные соли металлов оказали неодинаковое действие.

Для протеолиза желатина при рН 5,8 был, в частности, характерен эффект угнетения активности, однако он не превышал 30% (таблица 1, рисунок 1а). Примечательно, что хлорид железа, сульфаты меди и никеля вызвали подобное действие при минимальных концентрациях в реакционной системе. Дополнительно снижение активности было выявлено также при добавлении Си804 и №804 в концентрациях 10-4 и 10-5 М соответственно. В отличие от этого ингибиторное влияние СоС12 проявилось при концентрациях 10-2 и 10-5 М. Эффект же остальных использованных солей при их максимальной концентрации был невелик. И лишь сульфат цинка в нескольких концентрациях способствовал росту желатинолитической активности протеиназ, но не более чем на 16%.

Воздействие избранных нами эффекторов на желатинолитическую активность мицелиальных протеиназ Р. ostreatus при рН 7,6, на наш взгляд, заметно отличалось от описанного для рН 5,8. Здесь был характерен активаторный эффект сульфата меди, проявившийся во всем диапазоне концентраций, а при концентрации 10-3-10-8 М достигавший 2567% с максимумом эффекта роста при 10-4 и 10-7 М: 66,9 и 62,2% соответственно (таблица 1, рисунок 1б). Увеличение желатинолитической активности вызвал и хлорид железа, причем ее рост на 48% наблюдался при концентрации этой соли 10-3 М.

Таблица 1

Влияние солей металлов на желатинолитическую активность (мм2 зон лизиса) при различной величине рН гомогенатов мицелия глубинной культуры вешенки (п=8)

Концентрация солей, М

БеСЬ

Си804

С0СІ2

2и804

N1804

активность

при рН 5,8

Контроль

262,5 ± 8,1

233,6 ± 5,2

186,2 ± 3,4

210,4 ± 3,8

180,8 ± 5,5

10-2

247,5 ± 7,5

206,5 ± 4,9*

137,4 ± 5,5*

240,5 ±10,3*

167,7 ± 6,0

10-3

233,9 ± 12,7

224,5 ± 3,7

155,1 ± 4,9*

214,6 ± 10,7

148,1 ± 4,4*

10-4

210,8 ± 7,5*

168,3 ± 7,1*

181,4 ± 8,5

244,1 ± 9,4*

165,3 ± 7,2

10-5

234,8 ± 10,1

256,7 ± 5,0

139,5 ± 3,2*

241,6 ±10,5*

137,3 ±7,03*

10-6

227,8 ±10,6*

251,6 ± 12,0

154,1 ± 6,3*

210,4 ± 6,4

180,0 ± 5,9

10-7

224,4 ± 8,6*

198,4 ± 5,8*

152,8 ± 4,4*

207,7 ± 9,2

138,1 ± 6,5*

10-8

202,1 ± 7,7*

177,0 ± 7,2*

162,2 ± 7,7*

183,1 ± 6,7*

127,2 ± 6,3*

активность

при рН 7,6

Контроль

145,1 ± 2,7

121,1 ± 2,6

147,5 ± 6,4

115,4 ± 3,1

177,8 ± 4,6

10-2

149,8 ± 26,0

137,8 ± 7,3*

183,8 ±10,2*

126,1 ± 6,6*

244,0 ± 4,5*

10-3

215,0 ±13,1*

152,0 ± 3,6*

193,1 ± 2,7*

132,7 ± 4,6*

164,2 ± 6,8

10-4

161,2 ± 6,8*

202,1 ± 5,3*

148,4 ± 2,7

119,2 ± 4,4

130,8 ± 2,5*

10-5

154,4 ± 3,7

158,6 ± 7,2*

139,5 ± 3,9

128,8 ± 6,9*

138,4 ± 5,4*

10-6

164,2 ±10,0*

151,5 ± 3,8*

69,0 ± 2,8*

126,0 ± 5,6*

187,1 ± 6,3

10-7

124,1 ± 4,4*

196,4 ± 3,7*

172,8 ± 7,8*

136,5 ± 7,3*

166,7 ± 9,7

10-8

144,5 ± 5,9

159,8 ± 4,5*

137,8 ± 8,9

141,3 ± 4,2*

171,6 ± 2,9

активность

при рН 9,2

Контроль

87,4 ± 4,3

43,87 ± 1,9

67,94 ± 3,1

74,4 ± 2,9

59,9 ± 2,8

10-2

70,8 ± 3,3*

48,68 ± 2,9

71,16 ± 3,6

64,5 ± 2,6*

72,9 ± 2,5*

10-3

83,3 ± 3,4

56,36 ± 2,4*

56,50 ± 2,1*

62,1 ± 3,1*

67,7 ± 3,0*

10-4

66,5 ± 2,9*

68,94 ± 3,8*

60,16 ± 1,8

86,3 ± 4,2*

74,1 ± 2,7*

10-5

71,9 ± 2,9*

55,21 ± 2,6*

70,50 ± 2,5

67,0 ± 3,7

62,7 ± 2,6

10-6

73,8 ± 3,3*

55,00 ± 3,4*

56,87 ± 2,0*

77,9 ± 4,6

64,1 ± 2,7

10-7

68,9 ± 10,1*

65,16 ± 3,1*

58,28 ± 1,7*

71,2 ± 1,7

68,0 ± 3,0*

10-8

84,1 ± 4,0

66,57 ± 3,0*

68,96 ± 2,9

70,5 ± 3,4

75,8 ± 3,4*

Примечание -*Здесь и далее изменения статистически достоверны при р < 0,05

Отличалось от описанного для рН 5,8 действие СоС12 и №804. Угнетение желатинолитической активности при добавлении хлорида кобальта проявилось сильнее, чем в кислой среде при концентрации СоС12 10-6 М - 53%. В то же время при двух максимальных концентрациях этого эффектора желатинолиз возрастал на 25 и 31% соответственно. Максимальный же активаторный эффект сульфата никеля проявился при его концентрации 10-2 М и достигал 137%, тогда как при концентрациях 10-4 и 10-5 М выявлено угнетение протеолиза на 26 и 22% соответственно. Примечательно, что при рН 7,6 и сульфат цинка в минимальной концентрации вызвал повышение протеолитической активности на 22%.

Отличительной особенностью действия использованных солей металлов на расщепление желатина мицелиальными протеиназами Р. ostreatus при рН 9,2 явилось слабое ингибиторное действие СоС12 и 2и804, не превысившее 16% (таблица 1, рисунок 1в).

Рисунок 1 Влияние ГвС13 (1), Си804 (2), СоС12 (3), ZnSO4 (4), N№04 (5) на желатинолитическую активность (% к контролю, принятому за 100%) при рН 5,8 (а), 7,6 (б) и 9,2 (в) гомогената мицелия глубинной культуры вешенки

Влияние сульфата никеля выразилось в активации желатинолиза, но по величине эффекта не превосходило таковое для описанных процессов при рН 5,8 и 7,6, причем концентрационная зависимость эффекта также имела сложный характер. Ингибиторное действие хлорида железа было довольно слабым и лишь при его концентрациях 10-4 и 10-7 М угнетение составило 24 и 21% соответственно. При этом значении рН также, как и при рН 7,6, четкое активаторное действие практически во всем концентрационном диапазоне оказал Си804. А при концентрациях 10-4 и 10-8 М усиление желатинолитической активности достигало 157 и 152% по отношению к контролю соответственно.

Но в целом, эти материалы свидетельствуют о довольно умеренном и слабом эффекте (причем в целом ряде случаев ингибиторном) изучаемых солей металлов на желатинолитическую активность протеиназ мицелия.

Данная картина существенно отличается от той, которую мы наблюдали при действии этих же эффекторов на желатинолитическую активность экстрацеллюлярных протеиназ мицелиальной культуры вешенки [5].

Так, при рН 7,6 рост желатинолитической активности при добавлении СоС12, 2п804 и Кі804 в концентрации 10-8 и 10-5 М достигал в сравнении с контролем 1,51-1,83 и 1,702,00 раз соответственно. С дальнейшим ростом концентрации эффект возрастал в 2,032,10 раз. Увеличение же активности при добавлении 10-2 М БеС13 не превысило 70% в сравнении с контролем. Однако оно было большим, чем в случае интрацеллюлярных протеиназ. Менее демонстративным был эффект Си804: лишь в минимальной концентрации соли рост активности составил 51%, а увеличение ее концентрации снижало эффект, и уже при концентрации 10^ М он не превысил 23%. В реакционной системе при рН 5,8 добавление №804 во всем диапазоне концентраций сопровождалось приростом активности на 77-102%. Более заметным было и влияние Си804: в диапазоне концентраций 10-8-10-3 М желатинолиз усиливался на 42-60%. При добавлении же БеС13 в минимальной концентрации выявлен рост активности протеиназ на 66%, а в присутствии СоС12 во всем диапазоне концентраций желатинолитическая активность возрастала на 6098%. Менее сильным, в сравнении с рН 7,6, был и эффект 2и804, не превысивший 66%.

Столь сильные различия можно было бы связать с уровнем растворимых белков в гомогенате мицелия вешенки 1,01 ± 0,0002 мг/г и в культуральной жидкости - 0,01 ± 0,0001 мг/мл (п=6). Однако проведенные дополнительно исследования упомянутых солей металлов на желатинолитическую активность экстрацеллюлярных протеиназ культуры гриба при 9,2 показали, что наиболее выраженным было воздействие СоС12, добавление которого в концентрациях 10-8, 10-7 и 10-3 М сопровождалось умеренным ростом желатинолитической активности на 38, 23 и 28% соответственно (таблица 2, рисунок 2). Во всех остальных случаях эффект солей (как правило, активаторный) не превышал 18%.

Таблица 2

Влияние солей металлов на желатинолитическую активность (мм2 зон лизиса) при рН 9,2 культуральной жидкости глубинной культуры вешенки (п=8)

Концентрация солей, М

БеСЬ

Си804

С0СІ2

2и804

№804

Контроль

80,75 ± 3,57

80,51 ± 3,62

63,00 ± 2.87

70,75 ± 1,84

86,25 ± 4,10

10-2

85,42 ± 3,11

90,87 ± 5,77

72,58 ± 3,4*

81,94 ± 3,62*

89,87 ± 2,71

10-3

75,75 ± 3,64

93,87 ± 3,62*

80,57 ± 3,1*

71,25 ± 2,99

98,37 ± 4,77*

10-4

80,37 ± 3,68

78,00 ± 2,90

64,93 ± 4,62*

67,75 ± 3,19

91,37 ± 2,61

10-5

90,31 ± 3,15

84,93 ± 3,73

68,06 ± 3,50

72,33 ± 3,64

85,75 ± 2,56

10-6

79,16 ± 3,89

71,00 ± 3,00

65,83 ± 3,26

79,28 ± 3,46

82,16 ± 4,01

10-7

80,12 ± 3,97

77,31 ± 3,60

77,75 ± 2,27*

57,37 ± 2,75*

80,12 ± 2,56

10-8

84,12 ± 3,96

85,12 ± 4,13

87,08 ± 3,54*

70,69 ± 2,88

73,37 ± 3,45*

Как было установлено, желатинолитическая активность протеиназ мицелия при рН 5,8 и 7,6 угнеталась о-фенантролином на 61 и 33% соответственно, а при рН 5,8 - дополнительно и ЭДТА на 35% [1]. Однако при рН 5,8 ни одна из использованных в эксперименте солей не сопровождалась существенным увеличением протеолитической активности.

Рисунок 2 Влияние ГвС13 (1), Си804 (2), СоС12 (3), ZnSO4 (4), N№04 (5) на желатинолитическую активность (% к контролю, принятому за 100%) при рН 9,2 культуральной жидкости глубинной культуры вешенки

Складывается впечатление, что в состав подобной протеиназы входит иной металл. Вместе с тем, при рН 7,6 активаторное действие выявлено со стороны FeCl3, CuSO4 и даже CoCl2 и NiSO4 при определенных концентрациях. Но особое внимание привлекает активность желатиназ при рН 9,2, индифферентная ко всем использованным нами группоспецифическим ингибиторам протеиназ [1]. Желатинолитическая активность протеиназ этого типа, как установлено в настоящем исследовании, существенно повышалась в присутствии сульфата меди.

Заключение

Полученные результаты настоящего исследования пока дают только дополнительные факты для анализа функциональной специфики протеиназ мицелиальной культуры вешенки. Тем не менее, отдельные результаты «вырисовывают» несколько необычных черт этих протеиназ. В дальнейшем совершенно логично предстоит выяснить, что за компонент присутствует в протеиназе с оптимальным рН при 5,8, активность которой чувствительна к ЭДТА и фенантролину, но, по-видимому, не является ни одним из катионов, входящих в состав использованных в эксперименте солей. Не исключено также, что подобная особенность может быть обусловлена характером лигандного окружения катиона в макромолекуле протеиназы. Не менее примечательна и картина, полученная при исследовании резистентной к действию всех использованных ранее нами группоспецифических протеиназ (рН оптимум - 9,2), повышающая активность при добавлении сульфата меди.

Список литературы

1. Кульгавеня, А. Д. Протеолитическая активность мицелиальной культуры гриба вешенка обыкновенная (Pleurotus ostreatus) при глубинном культивировании / А. Д. Кульгавеня, В. Н. Никандров // Весн. Палес. дзярж. ун-та. Сер. прыродазна. навук. 2020. № 1. С. 12-23.

2. Ritala, A. Single cell protein - state-of-the-art, industrial landscape and patents 2001-2016 / A. Ritala, S.T. Hдkkinen, M. Toivari, M.G. Wiebe // Frontiers in Microbiol. 2017. Vol. B. art. 2009. P. 1-18.

3. Кульгавеня, А. Д. О протеиназах вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus) / А. Д. Кульгавеня, И. А. Ильючик, В. Н. Никандров // Сб. материалов V междунар. науч.практ. конф. online-offline «Биотехнология: достижения и перспективы развития», Пинск, 2021. С. 29-32.

4. Никандров, В. Н. Влияние ионов Mn (II) на расщепление протеинов-субстратов протеиназами / В. Н. Никандров, И. А. Ильючик // Новости медико-биол. наук. 2020. Т. 20, - № 4. С. 62-70.

5. Корнейчук, П. В. Влияние катионов металлов на желатинолитическую активность экстрацеллюлярных протеиназ вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus) / П. В. Корнейчук, А. Д. Кульгавеня, В. Н. Никандров // Физико-химическая биология: материалы IX междунар. науч. интернетконф. / Ставроп. гос. мед. ун-т ; отв. ред.: И. Кошель. Ставрополь: Изд-во СтГМУ, 2021. C. 8-11.

6. Корнейчук, П. В. О способности мицелиальной культуры Pleurotus ostreatus продуцировать ингибиторы протеолиза / П. В. Корнейчук [и др.] // Биотехнология: взгляд в будущее: материалы VII междунар. научно-практ. конф., 2 апреля 2021 года [в 2 ч.] / Ставроп. гос. мед. ун-т ; отв. ред.: В.Н. Мажаров. Ставрополь: Изд-во СтГМУ, 2021. Ч. 1. С.121-123.

7. Никандров, В. Н. Методы исследования протеолиза. Глава 5 / В. Н. Никандров, Н. Пыжова // Современные проблемы биохимии. Методы исследований. Минск: Выш. шк. 2013. С. 132-157.

8. Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of proteindye binding / M. M. Bradford // Anal. Biochem. 1976. Vol. 72. P. 248-254.

References

1. Kul'gavenya, A.D., Nikandrov V.N. Proteoliticheskaya aktivnost' micelial'noj kul'tury griba veshenka obyknovennaya (Pleurotus ostreatus) pri glubinnom kul'tivirovanii [Proteolytic activity of fungus Pleurotus ostreatus mycelial culture in deep-liquid cultivation]. Vesnik Paleskaga dzyarzhaynaga universiteta. Seryya pryrodaznaychyh navuk nauk [Bulletin of Polessky State University. Series in Natural Sciences], 2020, no 1, рр. 12-23. (In Russian)

2. Ritala A., Hдkkinen S.T., Toivari M., Wiebe M.G Single cell protein - state-of-the-art, industrial landscape and patents 2001-2016: Frontiers in Microbiol, 2017, Vol. B. art. 2009, pp. 1-18.

3. Kul'gavenya A.D., Il'yuchik I.A., Nikandrov V.N. O proteinazah veshenki obyknovennoj (Pleurotus ostreatus) [About proteinases of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus)]. Sbornik materialov V mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii onlineoffline «Biotekhnologiya: dostizheniya i perspektivy razvitiya». Pinsk, 2021, pp. 29-32. (In Russian)

4. Nikandrov, V. N., Il'yuchik I. A. Vliyanie ionov Mn (II) na rasshcheplenie proteinovsubstratov proteinazami [Effect of Mn (II) ions on cleavage of protein substrates by proteinases]. Novosti mediko-biol. Nauk [News of biomedical sciences], 2020, vol. 20, no. 4, pp. 62-70. (In Russian)

5. Kornejchuk P. V., Kul'gavenya A. D., Nikandrov V. N. Vliyanie kationov metallov na zhelatinoliticheskuyu aktivnost' ekstracellyulyarnyh proteinaz veshenki obyknovennoj (Pleurotus ostreatus) [The influence of metal cations on the gelatinolytic activity of extracellular proteinases of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus)]. Fiziko-himicheskaya biologiya: materialy IX mezhdunarodnoj nauchnoj internet-konferencii / Stavropol'skij gosudarstvennyj medicinskij universitet Ministerstva zdravoohraneniya Rossijskoj Federacii; otv. red.: V. I. Koshel', Stavropol', 2021. - pp. 8-11. (In Russian)

6. Kornejchuk P. V., Kul'gavenya A.D., Il'yuchik I.A., Nikandrov V.N. O sposobnosti micelial'noj kul'tury Pleurotus ostreatus producirovat' ingibitory proteoliza [On the ability of Pleurotus ostreatus mycelial culture to produce proteolysis inhibitors]. Biotekhnologiya: vzglyad v budushchee. Mater. VII mezhdunar. nauchno-prakt. konf.», Stavropol'. - 2021. - Part 1. - pp. 121-123. (In Russian)

7. Nikandrov V.N., Pyizhova N.S. Metodyi issledovaniya proteoliza. Glava 5. [Methods for the study of proteolysis. Chapter 5]. Sovremennyie problemyi biohimii. Metodyi issledovaniy [Modern problems of biochemistry. Research methods]. Minsk: Visheyshaya shkola, 2013, pp. 132-157. (In Russian)

8. Bradford M.M. A rapid and sensitive me thodfor the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of proteindye binding: Anal. Biochem, 1976, Vol. 72, pp. 248-254.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

  • Рассмотрены основные области применения протеаз - ферментов, расщепляющих белки. Пищевая промышленность. Применение в бытовой химии. Применение протеаз в легкой промышленности. Применение протеиназ в кожевенном производстве. Меховое производство.

    реферат [8,7 K], добавлен 19.04.2004

  • Классификация и номенклатура ферментных препаратов, характеристика их активности. Микробиологический и биохимический контроль производства. Регуляция синтеза и технологические схемы производства микробных протеиназ. Экстрагирование ферментных препаратов.

    курсовая работа [1,1 M], добавлен 19.12.2010

  • Структура и поверхностные свойства, функции и самосборка, пенообразующие и пеностабилизирующие свойства гидрофобинов. Глубинное культивирование гриба и высших базидиомицетов. Определение влажности биомассы и количества белка в экстрактах, электрофорез.

    дипломная работа [2,6 M], добавлен 18.07.2011

  • Изучение влияния пирроксана на активность основных карбоксипептидаз в нервной ткани крыс позволило выяснить, что так как при воздействии активность КПН и ФМСФ-КП изменяется однонаправлено, то оба фермента обладают сходной биологической функцией.

    курсовая работа [64,5 K], добавлен 15.12.2008

  • Кадмий как химический элемент. Изучение влияния азотнокислого кадмия на активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови и тканях органов у потомства белых крыс, подвергшихся токсическому действию в неонатальный период.

    дипломная работа [228,4 K], добавлен 27.10.2010

  • Антиоксидантная активность растительных материалов. Описание растений, обладающих антиоксидантной активностью. Определение содержания витамина С в калине обыкновенной в период созревания, содержания полифенольных соединений в различных сортах чая.

    дипломная работа [309,8 K], добавлен 02.04.2009

  • Основные механизмы деятельности клетки. Клетка как единица физиологических процессов обмена. Основные представления о регуляции. Функции клеточных органелл, мембранные системы внутриклеточных органелл. Обмен веществами между клеткой и окружающей средой.

    презентация [268,6 K], добавлен 04.02.2016

  • Влияние различных доз токсиканта кадмия на активность АЛТ и АСТ в сыворотке крови и тканях потомства крыс, подвергшихся хроническому действию ионами кадмия в неонатальный период. Результаты поставленного эксперимента и его практическая значимость.

    презентация [189,2 K], добавлен 27.10.2010

  • Роль кремния и кремнийорганических соединений для живых организмов. Особенности функционирования кремнийсодержащих препаратов. Инсектицидное и инсекторепеллентное действие. Регулирование роста растений. Фунгистатическая и бактериостатическая активность.

    курсовая работа [272,4 K], добавлен 13.12.2014

  • Изучение методов получения и выделения внеклеточных и внутриклеточных ферментов. Описание процессов осаждения органическими растворителями и высаливания ферментов. Понятие коагуляции и флокуляции. Принцип работы центрифуг с роторами трубчатого типа.

    курсовая работа [59,2 K], добавлен 30.11.2010

  • История батрахологических и герпетологических исследований в Беларуси. Биология и экология прыткой ящерицы. Значение рептилий в естественных экосистемах. Анализ численности, суточной активности и фенетической структуры особей исследуемой популяции.

    курсовая работа [1,7 M], добавлен 16.12.2013

  • Изучение тонкой структуры теломер и механизма действия теломераз. Образование теломерной ДНК. Разработка методов избирательного подавления теломеразной активности в раковых опухолях. Поиск новых средств борьбы со злокачественными заболеваниями.

    презентация [741,6 K], добавлен 29.05.2013

  • Изучение морфологии, ультраструктуры, физиологических свойств и таксономического положения термофильных метанобразующих бактерий. Анализ особенностей дыхания, питания, размножения и энергетических процессов. Влияние температуры на активность бактерий.

    реферат [215,6 K], добавлен 31.01.2015

  • Характеристика биосинтеза как процесса образования органических веществ, происходящего в клетках с помощью ферментов и внутриклеточных структур. Участники биосинтеза белка. Синтез РНК с использованием ДНК в качестве матрицы. Роль и значение рибосом.

    презентация [2,3 M], добавлен 21.12.2013

  • Изучение видового состава рыб в уловах Старомайнского залива мелкоячеистой сетью. Определение годовой динамики встречаемости рыб в уловах. Сравнительный анализ уловов на различных участках водоемов. Исследование суточной активности фоновых видов рыб.

    дипломная работа [1,8 M], добавлен 01.08.2015

  • Понятие ритмичности природы ее характеристика и описание особенностей. Классификация ритмичности и ее виды. Солнечная активность и ее влияние, а также опасность и вред солнечных лучей. Солнечные часы, принцип их работы, характеристика и применение.

    реферат [22,1 K], добавлен 05.03.2009

  • Изучение программы Виргилио Лью и Роберта Букчина о неидеальном осмотическом поведении гемоглобина. Построение математической модели динамики изменения объема и потенциала клетки (липосомы) в зависимости от концентраций вне- и внутриклеточных ионов.

    курсовая работа [586,8 K], добавлен 15.03.2012

  • Механизмы агрегации тромбоцитов человека. Роль рецепторов плазматической мембраны в процессах агрегации тромбоцитов человека. Биологическая активность производных адамантана. Производные адамантана, влияющие на агрегацию тромбоцитов.

    дипломная работа [1,6 M], добавлен 15.12.2008

  • Влияние процессов, происходящих на Солнце, на синхронизацию хода всемирной истории. Доказательства синхронности колебаний солнечной активности и всемирно-исторических процессов, полученные А.Л. Чижевским. Влияние солнечной активности на поведения людей.

    доклад [18,9 K], добавлен 16.04.2014

  • Влияние тестостерона и прогестерона на активность карбоксипептидаза Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидаза в гипоталамо-гипофизарно-надпочечниково-гонадной системе самцов и самок мышей. Зависимость изменения активности ферментов от пола животного.

    диссертация [87,6 K], добавлен 15.12.2008

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.