Мониторинг определения общего гемоглобина крови во время беременности

Размещено на http://www.allbest.ru/

Государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение Департамента здравоохранения города Москвы

«Медицинский колледж № 1»

ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА

Мониторинг определение общего гемоглобина крови во время беременности

Специальность: 31.02.03Лабораторная диагностика

Студент: Варданян О.М.

Драгосавлевич С.В.

Москва 2017

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Гемоглобин, основные функции. Строение и свойства

1.2 Изменения содержания гемоглобина в крови женщин на разных сроках беременности

1.3 Общая характеристика методов измерения концентрации гемоглобина в крови

ГЛАВА 2. ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЩЕГО ГЕМОГЛОБИНА

2.1 Подготовка к исследованию

2.2 Определение гемоглобина

2.3 Результаты исследования

2.4 Выводы по практической части

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Гемоглобин - основнои? дыхательныи? пигмент и главныи? компонент эритроцита, выполняющии? важные функции в организме человека: перенос кислорода из легких в ткани и углекислого газа из тканеи? в легкие. Он также играет существенную роль в поддержании кислотно-основного равновесия крови. Буферная система, создаваемая гемоглобином, способствует сохранению рН крови в определенных пределах.[4]

Снижение концентрации гемоглобина в крови называется анемией. Актуальность темы обусловлена тем, что анемия широко распространена среди беременных женщин всего мира. Ее частота колеблется от 15 до 30%, но в ряде развивающихся и экономически отсталых регионов она может достигать 70-90%. По распространенности, прямому и косвенному влиянию на материнскую, перинатальную заболеваемость и смертность, последствиям анемия беременных сохраняет свое значение, как одна из весьма актуальных проблем мирового здравоохранения.[12]

С ухудшением качества жизни, снижением показателей здоровья женщин в Российской Федерации значительно возросла частота анемии беременных. К сожалению, по этим показателям многие регионы России опустились до уровня развивающихся стран. По данным МЗ РФ за последние 10 лет частота этой патологии увеличилась в 6,3 раза. В Республике Башкортостан анемия при беременности наблюдается у 40-60% женщин. В структуре алиментарных гестационных анемий ведущее место занимает ЖДА, наблюдающаяся у 75-95% женщин в этой группе. [10]

Высокая распространенность анемии беременных, и те неблагоприятные последствия для беременной и плода, к которым они могут привести, делают эту проблему чрезвычайно актуальной и требуют совершенствования современной системы охраны здоровья матери и ребёнка. Наличие железодефицитной анемии приводит к нарушению качества жизни пациенток, снижает их работоспособность, вызывает функциональные расстройства со стороны многих органов и систем.[11]

Дефицит железа у беременных неблагоприятно отражается на:

- течении беременности, родов, послеродового периода;

- состоянии плода и новорожденного, способствуя увеличению частоты преждевременных родов;

- плацентарной недостаточности;

- угрозы прерывания беременности;

- гипотрофии плода;

- аномалий родовой деятельности;

- инфекционных осложнений и гипогалактии у родильниц;

- частоты и объема патологической кровопотери в родах и послеродовом периоде. [8]

Цель: Провести мониторинг определения общего гемоглобина в крови у беременных женщин.

Задачи:

1. Изучить научную литературу по теме исследования;

2. Провести исследование гемоглобина у женщин на разных сроках беременности;

3.Сравнить показатели гемоглобина у женщин на разных сроках беременности.

Объект: Лабораторное определение общего гемоглобина в крови у беременных женщин.

Предмет: Деятельность медицинского лабораторного техника при определении общего гемоглобина в крови у беременных женщин.

База исследования:

Методы исследования:

- Поисково-информационный;

- Экспериментальный;

- Аналитический;

- Сравнительный.

ГЛАВА 1. ОБЗОР НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Гемоглобин, основные функции. Строение и свойства

Гемоглобин - основнои? дыхательныи? пигмент и главныи? компонент эритроцита, выполняющии? важные функции в организме человека: перенос кислорода из легких в ткани и углекислого газа из тканеи? в легкие. Он также играет существенную роль в поддержании кислотно-основного равновесия крови. Буферная система, создаваемая гемоглобином, способствует сохранению рН крови в определенных пределах. Гемоглобин - красныи? пигмент крови человека и животных. Подсчитано, что в одном эритроците содержится около ~ 340000000 молекул гемоглобина, каждая из которых состоит примерно из 103 атомов.[4] В крови человека в среднем содержится ~ 14,5% гемоглобина, его общее количество ~ 750 г. Гемоглобин представляет собои? сложныи? белок, относящии?ся к группе гемопротеинов; белковыи? компонент в котором представлен глобином, небелковыи? - простетическои? группои?. Простетическая группа в молекуле гемоглобина представлена 4 одинаковыми железопорфириновыми соединениями, которые называются гемами. Молекула гема состоит из порфирина IХ, связанного с железом двумя атомами азота ковалентными и двумя другими атомами азота координационными связями. Атом железа (II) расположен в центре гема и придает крови характерныи? красныи? цвет, степень его окисления не изменяется независимо от присоединения или отдачи кислорода.[7] В соответствии с рисунком 1.



Рисунок 1

Видовые различия гемоглобина обусловлены химическим составом и строением глобина. Гемоглобины представляют собои? тетрамерные белки, молекулы которых образованы различными типами полипептидных цепеи?, обозначаемых как a ,b ,g ,d . В состав молекулы входят по 2 полипептидные цепи двух разных типов, каждая из которых оборачивает 1 гем гемоглобина. Гемоглобины различных видов различаются вторичнои?, третичнои? и четвертичнои? структурами, и индивидуальные свои?ства гемоглобинов неразрывно связаны с их структурами.[9] Известно, что гемоглобин человека состоит из двух равных половин, каждая из которых образована двумя одинаковыми полипептидными цепями. У человека обнаружены гемоглобины различных типов, которые отличаются по химическому строению. В крови взрослого человека содержится гемоглобин А (HbA), состоящии? из a2b2 цепеи?. В дополнение к основному HbA в крови взрослого человека обнаружен гемоглобин A2 (HbA2), на долю которого приходится ~ 2,5% от всего гемоглобина. Кроме того, известен фетальныи? гемоглобин F (HbF) - гемоглобин новорожденных, имеющии? структуру a2g2, и отличающии?ся от HbA вторичнои?, третичнои? и четвертичнои? структурами, что обусловливает их различия: по спектральным характеристикам, электрофоретическои? подвижности, устои?чивости к тепловои? денатурации и др. Кровь новорожденного ребенка состоит на ~ 80% из HbF, которыи? к концу первого года жизни почти целиком заменяется на HbA (в крови взрослого человека содержится до ~ 1,5% HbF от общего количества гемоглобина).[1]

Незначительное изменение аминокислотного состава глобина, иногда замена лишь однои? аминокислоты, оказывается достаточным для полного изменения свои?ств гемоглобина. Так, замена в HbA глутаминовои? кислоты на валин обусловливает появление гемоглобина S (HbS ), которыи? имеет структуру a2s2 и обнаружен у больных серповидно-клеточнои? анемиеи?. HbS по ряду свои?ств отличается от нормального гемоглобина. После отдачи кислорода в тканях он превращается в плохо растворимую форму и выкристаллизовывается в эритроцитах, вызывая их деформацию (образование серповидных форм), что и приводит к нарушению функции крови.

Гемоглобин - кристаллическое вещество, хорошо растворимое в воде и нерастворимое в спирте, эфире и хлороформе. В эритроцитах гемоглобин находится в растворенном состоянии, несмотря на то, что его содержание более 30%. При изменении аминокислотного состава глобина может произои?ти и изменение его растворимости, как у HbS. [8]

Растворы гемоглобина окрашены в темно-красныи? цвет и имеют характерные спектры поглощения в ультрафиолетовои? и видимои? областях спектра. Изоэлектрическая точка гемоглобина ~ 7. В кислои? и щелочнои? среде гемоглобин легко денатурируется, скорость денатурации различна у различных видов гемоглобинов. В кислои? среде связь между гемом и глобином легко разрывается. Свободныи? гем легко окисляется кислородом воздуха до гематина, в котором атом железа трехвалентен.[7]

Наиболее характерным свои?ством гемоглобина является обратимое присоединение газов О2, СО и др. Образовавшиеся при этом соединения называются оксигемоглобином и карбоксигемоглобином, соответственно. Реакция присоединения молекулярного кислорода не является истинным окислением гемоглобина, так как валентность железа в гене при этом не изменяется, и эту реакцию правильнее называть оксигенациеи?. Истинное окисление гемоглобина происходит только тогда, когда железо переходит в трехвалентное состояние.

В крови гемоглобин существует по краи?неи? мере в четырех формах: оксигемоглобин, дезоксигемоглобин, карбоксигемоглобин, метгемоглобин. В эритроцитах молекулярные формы гемоглобина способны к взаимопревращению, их соотношение определено индивидуальными особенностями организма.

Клиническое значение:

- Снижение концентрации гемоглобина: анемии.

- повышение концентрации гемоглобина: полицитемия, гемоконцентрация при дегитратации, ожогах, кишечнои? непроходимости, упорнои? рвоте, пребывание на больших высотах, чрезмерная физическая нагрузка или возбуждение; сердечно-сосудистая патология, обычно врожденная, приводящая к значительному венозному сбросу; заболевания легких, приводящие к снижению легочнои? перфузии, плохои? аэрации легких, легочнои? артериальнои? фистуле; хроническое химическое воздеи?ствие нитритов, сульфонамидов,

вызывающих образование мет- и сульфогемоглобина.[2]

Нормальные величины:

у мужчин 130-160 г/л; у женщин; 120-140 г/л.

Содержание гемоглобина обычно ниже у недоношенных, чем у доношенных новорожденных. Содержание гемоглобина снижается на ~ 10% в промежутке времени от 17 до 07 час утра, а также после еды. Снижение гемоглобина от нормальных величин на ~ 6% наблюдается при взятии пробы в положении лежа.

Незначительное, но диагностически значимое, снижение нижнего порога нормальных величин гемоглобина встречается у мужчин возрастнои? группы 65-74 года. [9]

1.2 Изменения содержания гемоглобина в крови женьщин на разных сроках беременности

Гемоглобин -- специфический белок крови, который отвечает за перенос кислорода.

Кислород, в свою очередь, необходим для протекания большинства обменных процессов в организме, формировании тканей, работе головного мозга. Если уровень гемоглобина снижен, ткани недополучают кислород. А в случае с беременной женщиной, страдают одновременно и мать, и плод, которому кислород необходим для роста и развития.[5]

Значительное увеличение объема плазмы относительно увеличения количества гемоглобина и объема эритроцитов приводит к умеренному снижению уровня гемоглобина (физиологическая анемия или низкий гемоглобин у беременных), что наблюдается у здоровых беременных. Самая большая разница между темпами роста объема плазмы крови и количества эритроцитов в материнском кровотоке, формируется в течение конца второго, начале третьего триместра (снижение гемоглобина обычно происходит в 28-36 недель беременности). Концентрация гемоглобина повышается благодаря прекращению увеличения объема плазмы и продолжения повышения количества гемоглобина. Наоборот, отсутствие появления физиологической анемии является фактором риска мертворождения. Данные представлены в таблице 1.1

Таблица 1.1

Срок беременности (недели)	12	16	20	24	28	32	36	40
Нижняя граница нормы Hb (г/л)	110	106	105	105	107	110	114	119

Но кроме физиологической анемии при беременности возможно развитие и других, патологических анемий, наиболее часто это железодефицитная анемия, реже - анемия на фоне хронических заболеваний внутренних органов, фолиево-дефицитная анемия, витамин B-12-дефицитная анемия.[16]

Так же пониженный уровень гемоглобина у беременной может отмечаться в случае недостаточного промежутка между беременностями (дело втом, запасы железа в организме женщины приходят в норму примерно только через 3 года после прошедших родов). Кроме того, причиной развития анемии могут послужить: гормональные изменения в организме женщины, прием лекарственных препаратов (например, цитостатики, левомицетин, аминазин), дисбактериоз и нервные стрессы.

Но какая бы причина снижения уровня гемоглобина не была, следствием этого всегда является то, развивающийся плод испытывает дефицит питательных веществ, и в большей степени кислорода, приводящий к развитию гипоксии. Возникает угроза невынашивания ребенка, возрастает риск развития позднего токсикоза и несвоевременного излития околоплодных вод. А так же возможны осложнения и во время самих родов: преждевременные роды, слабая родовая деятельность, обильные кровотечения и даже гибель ребенка в течение первых суток жизни. Часты случаи рождения детей незрелыми, с низким весом и впоследствии они более восприимчивыми к различным инфекциям. У таких детей может быть нарушена кроветворная функция организма.[8]

Однако пониженный гемоглобин при беременности может проявиться рядом симптомов, по которым даже без проведения анализа крови женщина способна распознать у себя начало развития анемии. Это очень важно, так как своевременно принятые меры по нормализации - повышению уровня гемоглобина, способны снизить риски возникновения осложнений малокровия.

Есть три степени падения уровня гемоглобина у беременных:

первая (на 1 литр крови 90-110 гр гемоглобина; в основном протекает скрыто)

вторая (степень считается средней, на 1 л крови обнаруживается 70-90 грамм гемоглобина; тут симптоматика более вероятна, но она не является тревожащей, потому женщина может и не обратиться вовремя к гинекологу)

третья (в крови менее 70 грамм гемоглобина на литр, появляется очень много симптомов)

Третья степень считается тяжелой, при этом могут иметь место необратимые последствия.[5]

В некоторых случаях наблюдается проблема высокого гемоглобина при беременности. В первом триместре такое повышение не является отклонением от нормы. Оно связано с тем, что организм женщины приспосабливается к новому состоянию вынашивания ребенка. Кроме того, высокий уровень этого элемента крови может быть наследственным. Есть люди, у которых содержание гемоглобина в течение жизни немного выше, чем у других. Высокий показатель наблюдается у жителей высокогорных районов, где воздух значительно разрежен. Все эти причины не вызывают опасений за здоровье женщины и ее малыша. Но повышение гемоглобина при беременности может быть спровоцировано патологическими факторами, при которых увеличивается количество эритроцитов в крови. Так, заболевания сердца, почек, кишечника, желудка и даже курение способствуют повышению уровня гемоглобина. Симптомы повышенного гемоглобина в крови: сонливость, быстрая утомляемость, снижение остроты зрения, расстройство аппетита, нарушение функций мочеполовой системы, бледность кожи. Высокая концентрация данного элемента приводит к увеличению вязкости крови и, как следствие, повышению риска развития тромбозов (формирование сгустков крови внутри кровеносных сосудов). Высокий гемоглобин при беременности может стать причиной некоторых ее осложнений. Наиболее частое из них - гипоксия плода. Так как кровь женщины становится вязкой, она медленнее циркулирует. В итоге ребенок получает меньше кислорода и питательных веществ. Это приводит к замедлению его развития и даже гибели на ранних сроках.[11]

1.3 Общая характеристика методов измерения концентрации гемоглобина в крови

Определение содержания гемоглобина в крови человека является одним из самых важных и массовых показателеи?. Для определения гемоглобина чаще всего анализируют производные гемоглобина, образовавшиеся в процессе его окисления и присоединения к гему различных химических групп, приводящих к изменению валентности железа и окраски раствора.[17]

Из “старых” методов, все еще применяемых в ряде лаборатории?, остановимся на следующих: сапониновом и методе Сали. При использовании сапонинового метода тельца Геи?нца не растворяются, раствор остается мутноватым, за счет чего может меняться спектр поглощения раствора, и ошибка при этом достигает 20-30%.

В методе Сали измеряется гематин, образовавшии?ся при взаимодеи?ствии гемоглобина с солянои? кислотои?. Метод основан на визуальнои? оценке содержания гемоглобина путем сравнения окраски исследуемои? пробы со стандартными растворами солянокислого гематина. Ошибка метода достигает ~ 30%, на результаты определения влияют многие факторы: время реакции между гемоглобином и солянои? кислотои?, которое может колебаться от 2 до 40 мин в зависимости от содержания белков крови; оттенок цвета геминхлорида, зависящии? от содержания билирубина в крови; характера освещения и пр.[7]

Химические и спектрофотометрические методы имеют высокую точность и рекомендуются в качестве референсных, но из-за трудоемкости и значительнои? стоимости анализа для рутинных определении? не применяются. Для рутинных лабораторных исследовании? наиболее предпочтительны колориметрические методы, как наиболее дешевые, простые и быстрые в исполнении. Кровь человека - это нормальная смесь производных гемоглобина с различными спектрами поглощения. При количественном определении гемоглобина колориметрическими методами возникает проблема в выборе реагента, которыи? превращал бы все производные гемоглобина только в одну форму перед фотометрическим анализом. Лучшими методами, количественно превращающими гемоглобин в его производные, оказались гемиглобинцианидныи? (HbCN), гемихромныи? (HbChr) и гемиглобиназидныи? (HbN3), которые при фотометрировании дают наименьшую ошибку определения среди других методов анализа.[9]

Интерференция при всех колориметрических методах анализа

Повышение гемоглобина: гипертриглицеридемия, количество леи?коцитов более 25х109/л, прогрессирующие заболевания печени, наличие легко преципитирующихся глобулинов (при миеломнои? болезни или при макроглобулинемии Вальденстрема). - Понижение гемоглобина: у заядлых курильщиков вследствие образования неактивного HbСО.[16]

Гемиглобинцианидныи? метод

Принцин гемиглобинцианидного метода основан на переводе всех форм гемоглобина в одну - гемиглобинцианид. Перевод гемоглобина в гемиглобинцианид осуществляется при его взаимодеи?ствии с трансформирующим раствором, содержащим феррицианид калия, цианид калия, дигидрофосфат калия и неионныи? детергент. Дигидрофосфат калия поддерживает уровень рН, при котором реакция проходит за 3-5 минут. Детергент усиливает гемолиз эритроцитов и предотвращает мутность, связанную с белками плазмы. Феррицианид калия окисляет все формы гемоглобина в метгемоглобин, которыи? образует с цианистым калием гемиглобинцианид, имеющии? красноватыи? цвет, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в пробе. Характеристика метода Гемиглобинцианидныи? метод, разработанныи? в 1936 г Драбкиным, был одобрен Международным Комитетом по стандартизации в гематологии (ICSH) в 1963 г. Основные достоинства гемиглобинцианидного метода является то, что HbCN является стабильным производным гемоглобина, и все имеющиеся в крови формы гемоглобина могут быть быстро и количественно превращены в HbCN; Метод обеспечивает возможность получения результатов с погрешностью, не превышающеи? ± 2%. [7]

Требования безопасности при работе с раствором, содержащим цианистые соединения При всех положительных параметрах гемиглобинцианидного метода большим его недостатком является то, что он основан на применении ядовитых цианистых соединении? (о чем уже как-то и забыли). Вместо цианистого калия многие применяют маскированныи? цианид - ацетонциангидрин, которыи? в процессе приготовления трансформирующего раствора распадается с образованием цианид-иона. Характер деи?ствия ацетонциангидрина на человека сходен с деи?ствием синильнои? кислоты, но эффект развивается медленнее. Ацетонциангидрин всасывается через кожу и может вызывать тяжелые отравления. Его предельно- допустимая концентрация (ПДК) составляет 0,9 мг/м3, класс опасности 2. В НИИ экологии человека НЦМЭ Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН показали, что хроническая интоксикация цианистыми соединениями проявляется у людеи? в виде гиперплазии щитовиднои? железы с соответствующими изменениями гормонального фона. Для работы с цианистыми соединениями необходимо соблюдение специальных мер предосторожности: применение фильтрующих противогазов, спецодежды; оснащение рабочего места местнои? и общеи? вытяжнои? вентиляциеи?; необходимостью проведения контроля за концентрациеи? ацетонциангидрина в воздухе, тщательную герметизацию аппаратуры и ее продувание перед началом работы К недостатку метода можно отнести и длительное время реакции - около 20 минут. [14] Гемихромныи? метод С развитием методов анализа для определения гемоглобина в крови разработан новыи? колориметрическии? метод, не содержащии? в составе реагентов цианистых соединении?, которые заменены жирными кислотами с феррицианидом калия или поверхностно-активными веществами, лучшии? из которых - додецилсульфат натрия (SDS). Принцип гемихромного метода Принцип гемихромного метода основан на переводе всех форм гемоглобина в одну - гемихром. При взаимодеи?ствии гемоглобина с трансформирующим раствором, содержащим жирные кислоты с феррицианидом калия или додецилсульфат натрия, происходит его превращение в окисленную низкоспиновую форму - гемихром (HbChr), имеющую красноватыи? цвет, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в пробе. Характеристика метода Гемихромныи? метод определения гемоглобина в крови разработан Ахрем А.А. с соавторами в 1986 г. Набор реагентов для определения гемоглобина в крови, основанныи? на данном методе, одобрен Комитетом по новои? медицинскои? технике МЗ РФ и рекомендован к применению в клинико-диагностических лабораториях уже в 1998 г. Основным достоинством гемихромного метода является то, что содержащиеся в крови формы гемоглобина могут быть быстро и количественно превращены в HbChr при полнои? безвредности трансформирующего раствора; [11]

Гемиглобиназидныи? метод и его варианты Гемиглобиназидныи? метод также относится к колориметрическим, не содержащим в составе реагентов цианистых соединении?, которые заменены азидом натрия. Принцип гемиглобиназидного метода Метод основан на переводе гемоглобина в метгемоглобин под воздеи?ствием нитрита натрия и дальнеи?шеи? конвертациеи? метгемоглобина в азидметгемоглобин при участии азида натрия. Характеристика метода Гемиглобиназидныи? метод разработан Vanzetti в 1966 г, широко применяется в мире с 80-0-х годов XX века.[10].

Таким образом, Гемоглобин крови является жизненно важным показателем. Снижение его в крови называется анемией. Состояние анемии значительно влияет на качество жизни беременной женщины и может угрожать нормальному развитию плода. Характеристика методов определения гемоглобина показывает, что в настоящее время широко используется колорометрические методы определения гемоглобина.

ГЛАВА 2 ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЩЕГО ГЕМОГЛОБИНА

Работа выполнялась на базе КДЛ ГБУЗ КДЦ № 2

Было проведено определение гемоглобина 30 пациенток женской консультации. Для исследования использовалась венозная кровь.

2.1 Подготовка к исследованию

Венозная кровь. Венозная кровь считается лучшим материалом для клинического исследования крови. При известной стандартизации процессов взятия, хранения, транспортировки венозной крови удается добиться минимальной травматизации и активации клеток, примеси тканевой жидкости, при этом всегда имеется возможность повторить и/или расширить анализ, например, добавив исследование ретикулоцитов. Достоверность и точность исследовани гемоглобина, проводимых из венозной крови, во многом определяется техникой взятия крови.[3]

Подготовка пациента к взятию крови из вены включает несколько этапов. Место венепункции нужно продезинфицировать марлевой салфеткой или специальной безворсовой салфеткой, смоченной 70 град. спиртом, и подождать до полного высыхания антисептика (30-60 секунд). Применение ватных тампонов и других волокнистых материалов подобного рода может привести к засорению волокнами счетной и гемоглобиновой камер, что влечет снижение точности и воспроизводимости измерения. [22]

Кровь для гематологических исследований должна поступать свободным током непосредственно в пробирку, содержащую антикоагулянт К ЭДТА. [2] В соответствии с рисунком 2 .



Рисунок 2

Взятие крови шприцом без антикоагулянта с последующим переливанием в пробирку нежелательно из-за формирования микросгустков и гемолиза. Рационально применение пробирок для взятия венозной крови небольшого объема (4-5 мл) диаметром 13 и высотой пробирки 75 мм. Взятие венозной крови облегчается применением закрытых вакуумных систем. Метод взятия крови с помощью закрытых вакуумных систем имеет ряд преимуществ, основными из которых являются обеспечение высокого качества пробы и предотвращение любого контакта с кровью пациента, а значит, обеспечение безопасности медицинского персонала и других пациентов за счет существенного снижения риска заражения гемоконтактными инфекциями.[21] (Приложение )

ЭДТА (К ЭДТА или К ЭДТА) - предпочтительный антикоагулянт при подсчете форменных элементов крови с использованием автоматических гематологических анализаторов.

Капиллярная кровь. Для гематологических исследований капиллярную кровь рекомендуется брать в следующих случаях:

- при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;

- при выраженном ожирении пациента;

- при установленной склонности к венозному тромбозу;

- у новорожденных.

Для взятия пробы капиллярной крови используют стерильные скарификаторы-копья одноразового применения. В соответствии с рисунком 3 и 4.

Рисунок 3

Рисунок 4

Перед проколом кожа пальца пациента обрабатывается стерильным тампоном, смоченным 70 град. спиртом. Кожа в месте прокола должна быть сухой, розовой и теплой. Место пункции необходимо просушить естественным способом для удаления остатков спирта, поскольку он может вызвать гемолиз.

Применение ватных тампонов и других волокнистых материалов не рекомендовано, поскольку это приводит к засорению волокнами счетных и гемоглобиновой камер. (в соответствии с рисунком 5) В результате точность и воспроизводимость измерения падает.[21]



Рисунок 5

Первую каплю крови, полученную после прокола кожи, следует удалить тампоном, поскольку эта капля содержит примесь тканевой жидкости. Капли крови должны свободно вытекать, нельзя давить на палец и массировать зону вокруг прокола, так как при этом в кровь попадает тканевая жидкость, что существенно искажает результаты исследования.

После прокола капиллярная кровь помещается в специальный микрокапилляр или специальные пластиковые пробирки одноразового пользования, обработанные антикоагулянтом К ЭДТА. [2]( в соответствии с рисунком 6)

Рисунок 6

Доставка, хранение и подготовка проб к исследованию

Для обеспечения качественного результата исследований нужно четко контролировать время и условия хранения проб до выполнения анализа.

- Автоматизированное исследование крови необходимо проводить в промежутке 0-5 мин. или через 1 час и позже после взятия крови.

- Непосредственно после взятия крови исключается возможность спонтанной агрегации тромбоцитов, примерно 25 мин. необходимо для адаптации тромбоцитов к антикоагулянту. При анализе, проведенном позже чем через 6-8 часов после взятия образца, уменьшается достоверность результатов. Более продолжительное хранение крови не рекомендуется, т.к. изменяются некоторые характеристики клеток (сопротивляемость клеточной мембраны), снижается объем лейкоцитов, повышается объем эритроцитов, что в конечном итоге приводит к ошибочным результатам измерения и неправильной интерпретации результатов. Только концентрация гемоглобина и количество тромбоцитов остаются стабильными в течение суток хранения крови. [2] гемоглобин беременность кровь

- Кровь нельзя замораживать. Капиллярную кровь с ЭДТА следует хранить при комнатной температуре и анализировать в течение 4 часов после взятия.

- При необходимости проведения отсроченного анализа (транспортировка на отдаленные расстояния, техническая неполадка прибора и т.д.) пробы крови хранят в холодильнике (4 град. - 8 град. С) и исследуют в течение 24 часов. Однако при этом следует учитывать, что происходит набухание клеток и изменение параметров, связанных с их объемом. У практически здоровых людей эти изменения не носят критического характера и не сказываются на количественных параметрах, но при наличии патологических клеток последние могут изменяться или даже разрушаться в течение нескольких часов с момента взятия крови. [3]

- Непосредственно перед исследованием кровь должна быть тщательно перемешана в течение нескольких минут для разведения антикоагулянта и равномерного распределения форменных элементов в плазме. Длительное постоянное перемешивание образцов на ротомиксе до момента их исследований не рекомендуется вследствие возможного травмирования и распада патологических клеток.

- Исследование крови на приборе проводится при комнатной температуре. Кровь, хранившуюся в холодильнике, необходимо вначале согреть до комнатной температуры, так как при низкой температуре увеличивается вязкость, а форменные элементы имеют тенденцию к склеиванию, что, в свою очередь, приводит к нарушению перемешивания и неполному лизису. Исследование холодной крови может быть причиной появления "сигналов тревоги" вследствие компрессии лейкоцитарной гистограммы.[21]

В гематологических анализаторах к методам определения гемоглобина предъявляется ряд специфических требований. Во-первых, время реакции должно быть в десятки раз меньше для обеспечения высокой производительности анализаторов. Во-вторых, для оптимизации конструкции анализаторов гемоглобин должен измеряться в том же гемолизате, который используется для подсчета лейкоцитов, и, следовательно, компоненты, обеспечивающие гемоглобиновую реакцию, не должны негативно влиять на подсчет лейкоцитов. Многие гематологические анализаторы измеряют концентрацию гемоглобина модифицированным гемиглобинцианидным методом. Высокая скорость реакции достигается путем быстрого лизиса эритроцитов, денатурирования и окисления гемоглобина до трехвалентного Fe с помощью поверхностно-активных веществ. Последующая реакция с цианидом формирует устойчивую форму со спектром поглощения, похожим на спектр гемиглобинцианида в методе Драбкина, и максимумом поглощения около 545 нм. Достоинством метода является его простота, высокая скорость реакции и стабильность конечного продукта. Применение циановых методов в гематологических автоанализаторах имеет два существенных недостатка, связанных с тем, что цианид из флаконов постепенно выпаривается в виде синильной кислоты. Во-первых, это может оказывать вредное воздействие на персонал при плохой вентиляции помещения. Во-вторых, это приводит к ухудшению реакции и изменению калибровки по гемоглобину через 2-3 месяца после подсоединения к прибору флакона с гемолитиком.[5]

2.2 Определение гемоглобина

Для исследования гемоглобина использовался автоматический гематологический анализатор ABX Micros ES 60 в соответствии с рисунком 7, приложение А.

Рисунок 7

Регистрация проб производится путем считывания сканером анализатора штрих-кодов, которые присваиваются каждой пробе (в соответствии с рисунком 8).



Рисунок 8

Анализатор передает результат анализа в общую лабораторную сеть ЛИС, в которой регистрируются данные пациентки, вид материала (в соответствии с рисунком 9)

Рисунок 9

Ежедневно на анализаторе проводится контроль качества (в соответствии с рисунком 10) и обслуживание, включающее в себя промывку и при необходимости калибровку.

Рисунок 10

Результаты контрольных проб также передаются в общую лабораторную сеть, где в специальной программе строятся контрольные карты. (в соответствии с рисунком 11)

Рисунок 11

Перед непосредственным запуском пробы, кровь визуально проверяются на наличие сгустка и в течении 2-3 минут перемешиваются, для перемешивания используется миксер (в соответствии с рисунком 12)

Рисунок 12

Проверенная и подготовленная проба крови запускается в анализатор, с пробирки снимают крышку, подносят к прибору таким образом чтобы аспирационная игла была погружена в кровь. (в соответствии с рисунком 13)

Рисунок 13

2.3 Результаты исследования

Показатели гемоглобина представлены в таблице 1, 2

Таблица -1 Результаты мониторинга гемоглобина на разных сроках беременности

Гемоглобин г/л
I триместр	II триместр	III триместр
103	126	103
121	104	101
123	103	134
128	129	108
120	126	122
135	124	101
122	107	80
128	128	97
129	126	122
106	122	108

Таблица-2 Доля анемий на разных сроках беременности

	I триместр	II триместр	III триместр
Пациентки с анемией %	20,00%	40,00%	70,00%
Пациентки с нормальными показателями гемоглобина	80,00%	60,00%	30,00%

Для наглядности данные таблицы представлены в виде диаграмм 1 и 2



Диаграмма 1

Из полученных данных видно что количество пациенток с показателями гемоглобина ниже нормы, к концу срока беременности возрастает.

Диаграмма 2

У 43 % беременных женщин показатели гемоглобина ниже нормы.

2.4 Выводы

1. В ходе проведенных исследований было установлено, что у 43% беременных женщин показатели гемоглобина ниже нормы.

2. На поздних сроках беременности, процент женщин страдающих анемией выше чем в первые недели.

3. Предпочтительным методом определение гемоглобина, является исследование на автоматических гематологических анализаторах.

4. При определение гемоглобина очень важно соблюдения всех пунктов преаналитического этапа, т. к. от качества забора образца крови, его хранения и времени исследования напрямую зависит точность результата.

5. Исследование нужно проводить на откалиброванном и прошедшим контроль качества анализаторе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Гемоглобин - это особый железо-содержащий белок крови сложной структуры, выполняющий в организме крайне важную функцию - газообмен и поддержание за счет этого стабильного обмена веществ. Гемоглобин - своего рода посредник между тканями и легкими в обмене кислородом и углекислым газом. Для полноценного функционирования организма количество гемоглобина должно стабильным, с размахом колебаний (с учетом возраста и пола).

Исследование гемоглобина проводят при общем анализе крови, параллельно изучая количество эритроцитов и их качественные характеристики. Уровень гемоглобина сам по себе не дает возможности поставить диагноз, но является важной характеристикой нездоровья в организме, и оценивается врачом в сочетании с другими изменениями крови и клиническими симптомами.

Сниженное содержание гемоглобина в крови называется-анемией. это клинико-гематологический комплекс симптомов, который заключается в снижении гемоглобина крови и связанных с этим нарушениях в органах и системах. Анемия беременной - это специфическое состояние, которое развивается в период вынашивания, чаще всего проявляется во II-III триместрах и осложняет течение беременности.

Частота развития анемий у беременных составляет, по разным данным, от 20 до 80%. Среди анемий беременных около 90% составляют железодефицитные состояния, другие виды анемий встречаются гораздо реже. Перинатальная смертность при анемии составляет от 4,5 до 20,7 %. Частота встречаемости врожденных аномалий развития плода достигает 17,8 % случаев.

Определение содержания гемоглобина в крови человека является одним из самых важных и массовых показателеи?. Для определения гемоглобина чаще всего анализируют производные гемоглобина, образовавшиеся в процессе его окисления и присоединения к гему различных химических групп, приводящих к изменению валентности железа и окраски раствора. Это методы: Сали. Метод основан на визуальнои? оценке содержания гемоглобина путем сравнения окраски исследуемои? пробы со стандартными растворами солянокислого гематина.

Для рутинных лабораторных исследовании? наиболее предпочтительны колориметрические методы, как наиболее дешевые, простые и быстрые в исполнении (гемиглобинцианидныи? ,гемихромныи? и гемиглобиназидныи?) которые при фотометрировании дают наименьшую ошибку определения среди других методов анализа. Но в современной лабораторной практике для определения гемоглобина используются гематологические анализаторы (модифицированный гемиглобинцианидный метод). При определение гемоглобина на анализаторе очень важно соблюдения всех пунктов преаналитического этапа, т. к. от качества забора образца крови, его хранения и времени исследования напрямую зависит точность результата. Исследование нужно проводить на откалиброванном и прошедшим контроль качества анализаторе.

В ходе проведенных исследований было установлено, что у 43% беременных женщин показатели гемоглобина ниже нормы. На поздних сроках беременности, процент женщин страдающих анемией выше чем в первые недели.

Таким образом, поставленные нами задачи выполнены, цель исследования достигнута.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Волотовская О.А. Методы клинических лабораторных исследований// О.А.Волотовская, Ходюкова А.Б. - МЕДпресс-информ, 2016 г.

2. ГОСТ Р 53133.1Ї2008 Технологии лабораторные клинические. Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 1. Пределы допускаемых погрешностей результатов измерения аналитов в клинико-диагностических лабораториях.

3. ГОСТ Р 53133.2Ї2008 Технологии лабораторные клинические. Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 2. Правила проведения внутрилабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов.

4. Гуляева О.А. Клинико-лабораторное обоснвоание ранней диагностики и профилактики// О.А.Гуляева,Т.С.Чемикосова, А.Б.Бакиров//Lambert Academic Publishing, 2011 г. - 188 с.

5. Данилова, Л.А. Анализы крови и мочи/ Л.А. Данилова. - СПб.: Салит-Медкнига, 2000. - 128 с.

6. Жангелова М.А. Клиническая лабораторная диагностика//М.А.Жангелова, М.П.Рысулы , З.Ф. Канжигалина - Lambert Academic Publishing, 2014 г. - 552 с.

7. Камышников В.С. Клиническая лабораторная диагностика. Методы и трактовка лабораторных исследований. Учебное пособие//В.С.Камышников - МЕДпресс-информ, 2015г.

8. Камышников, В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике / В. С. Камышников. - М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 896 с.

9. Камышников, В.С. Техника лабораторных работ в медицинской практике / В.С. Камышников. - М.: МЕДпресс-информ, 2013. - 344 с.

10. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии//А.И.Карпищенко - ГЭОТАР-Медиа, 2012 г.

11. Карпищенко А.И. Медицинская дабораторная диагностика. Программы и алгоритмы//А.И.Карпищенко - ГЭОТАР-Медиа, 2014 г. - 762 с.- 696 с.

12. Кишкун, А.А. Клиническая лабораторная диагностика / А.А. Кишкун - М. ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 976 с.

13. Кишкун, А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики / А.А. Кишкун. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 780 с.

14. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. В 2х томах// ГЭОТАР-Медиа, 2012 г.

15. Лабораторные и инструментальные исследования в диагностике: Справочник / Под. ред. В.Н. Титова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2004. - 960 с.

16. Лифшиц В.М. Медицинские лабораторные анализы.Справочник// В.М.Лифшиц, В.И.Сидельникова - Триада - Х, 2011 г. -184 с.

17. Луцик Б.П. Лабораторная диганотика// Б.П.Луцик - Lambert Academic Publishing, 2014 г. - 104 с.

18. Медведев, В.В. Клиническая лабораторная диагностика: Справочник для врачей / В.В. Медведев, Ю.З. Волчек. - СПб.: Гиппократ,1995. - 208 с.

19. Методы клинических лабораторных исследований: Учебник/ Под ред. В.С. Камышникова. - М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 752 с.

20. Методы клинических лабораторных исследований / Под ред. В.С. Камышникова. - М.: МЕДпресс-информ, 2013. - 736 с.

21. Приказ МЗ РФ № 45 от 07.02.00 «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения РФ» [Электронный документ]. - Режим доступа: http://docs.cntd.ru/document/901755005

22. Риссел Дж. Гематологический анализатор// Дж. Рассел,Р.Кон - Книга по требованию, 2013 г. - 92 с.

23. Уоллах Ж. Лабораторная диагностика// Ж.Уоллах - Эксмо, 2013 г. - 1360с.

24. Хиггинс, К. Расшифровка клинических лабораторных анализов / К. Хиггинс; под ред. В.Л. Эмануэля; пер. с англ. - М.: БИНОМ, 2008. - 376 с.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

Таблица-А1 Технические характеристики гематологического анализатора Micros ES 60

Характеристика	Значение
Производительность	60 анализов в час
Пробирки	открытая или вакуумная
Объем образца	10 мкл венозной или капиллярной крови
Память	1000 результатов
Дисплей	сенсорный экран LVDC: 8,4 дюйма, 640Ч480, 256000 цветов
Уровень шума	53 дБ
Питание	110-220 В, 50 Гц
Условия эксплуатации	рабочая температура 15-30°C; влажность до 95%
Габариты	430Ч460Ч360 мм
Масса	16 кг

Размещено на Allbest.ru

...