Стан гуморальних i клiтинних чинників iмунiтету при інфекційній анемії коней

Размещено на http://www.allbest.ru/

УКРАЇНСЬКА АКАДЕМІЯ АГРАРНИХ НАУК

Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини

А В Т О Р Е Ф Е Р А Т

дисертацiї на здобуття наукового ступеня кандидата

ветеринарних наук

Стан гуморальних i клiтинних чинників iмунiтету при інфекційній анемії коней

Кривошия Павло Юрійович

Харкiв - 1999

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана в лабораторії вивчення хвороб коней Інституту епiзотологiї УААН.

Науковий керiвник - кандидат ветеринарних наук, доцент Галатюк

Олександр Євстафійович, провідний науковий

співробітник, заступник директора з наукової роботи

Інституту епiзотологiї УААН.

Офiцiйнi опоненти: доктор ветеринарних наук, професор Апатенко

Володимир Максимович, завідувач кафедри мікробіології,

вірусології і імунології Харківського зооветеринарного

інституту

доктор ветеринарних наук, професор Бортнійчук

Володимир Андронович, кафедра мікробіології і вірусології

Національного аграрного університету ( м. Київ ).

Провiдна установа - Інститут ветеринарної медицини УААН, лабораторія вірусології, м. Київ.

Захист дисертацiї вiдбудеться " 24 " червня 1999 року о 12-00год. на засiданнi спецiалiзованої вченої ради Д 64.359.01. при Iнститутi експериментальної і клiнiчної ветеринарної медицини УААН: 310023, м. Харкiв, вул.Пушкiнська ,83.

З дисертацiєю можна ознайомитись у бiблiотецi Iнституту експериментальної і клiнiчної ветеринарної медицини (м. Харкiв, вул.Пушкiнська, 83).

Автореферат розiсланий " 21 " травня 1999 р.

Вчений секретар

спецiалiзованої вченої ради,

доктор ветеринарних наук,

професор Конаржевський К. Є.

1. ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Забезпечення країни тягловою силою та сiльськогосподарською сировиною великою мірою залежить вiд ветеринарного благополуччя конепоголiв'я щодо iнфекцiйних хвороб, серед яких досить поширеною є iнфекцiйна анемiя (ІА). Хвороба характеризується ураженням ретікулоендотеліальної системи з постiйною вiремiєю в присутностi антитіл. Вона завдає значних економiчних збитків господарствам через загибель коней, зниження їх продуктивності та племiнної цiнності.

Основнi механізми розвитку патологiчного процесу в органiзмi хворих тварин зумовлені iмунологiчними порушеннями. Це підтверджують роботи багатьох вчених ( Садиков В.Е., 1972; Kono V., Sentsui, H, Murakami Y., 1976; Орлов Ф. М., 1976; Макаров В.В., 1982; Valpotic I. R. et al., 1986; Осидзе Д. Ф., 1987; Зуєв В. А., 1988; Юров К. П., 1984; 1997).

Деякi автори вказують на пригнiчення вiрусом IА iмунної системи та морфологiчну спорiдненiсть патогенезу зі СНIДом людини й онкорнавірусами ( Gereneer M.., Valpotic Ivica B., 1989 ). У літературних

джерелах мало повiдомлень щодо iмунологiчних дослiджень при інфекційній анемії коней /ІАК/. Деякi результати дослiджень дискусiйнi.

Це свiдчить про те, що на сьогоднiшнiй день iмунiтет при інфекційній анемії вивчений недостатньо.

Залишається нерозкритим питання щодо ролi популяцiї iмунокомпетентних клiтин в iнфекцiйному процесi, змiни стану експресiї рецепторiв на лімфоцитах і впливу вiрусу на цi клiтини. Недостатньо вивчені показники iмунiтету по сезонах року, в рiзновiкових групах здорових коней та з прихованим перебiгом IА .

Використання сучасних iмунологiчних методiв дає змогу розкрити механiзм патогенезу хвороби, що необхiдно враховувати під час проведення дiагностичних дослiджень і оздоровчих заходiв.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дослідження виконано відповідно завдань Державних програм Української академії аграрних наук "Продовольство - 95" № державної реєстрації УАО - N А01009818Р. - Вивчити структуру інфекційних хвороб коней в Україні, розробити сучасні методи діагностики та способи профілактики інфекційної анемії коней (1991 - 1995). Вивчити епізоотичну ситуацію в племінних кінних господарствах, розробити методи контролю інфекційної анемії та ринопневмонії (1996 - 2000) № державної реєстрації N АО 0196V024150.

Мета та завдання дослідження. Метою наших досліджень було визначення стану гуморальних i клiтинних чинників iмунiтету в коней з прихованим перебiгом інфекційної анемії.

Виходячи з цього ми повинні були:

- визначити ступінь поширення IА коней в Українi;

- дослiдити динамiку показникiв iмунiтету в здорових і з прихованим перебігом хвороби у коней рiзного вiку та в залежності від сезону року;

- визначити показники iмунiтету при розвитку інфекційного процесу за прихованого перебігу хвороби;

- провести пошук імунологічних маркерів, які дадуть можливість виявити коней із підвищеним ризиком розвитку патологічного процесу за прихованого перебігу ІА.

Наукова новизна. Вперше проведено комплексні дослідження чинників імунітету в коней з прихованим перебігом інфекційної анемії. Визначено та обгрунтовано закономірності розвитку інфекційного процесу при зростанні титру специфічних антитіл. Встановлено пригнічення клітинних чинників імунітету, що забезпечує персистенцію вірусу в організмі хворих тварин.

Практична цiннiсть роботи. Проведено аналіз і узагальнено дані щодо нерівномірності поширення інфекційної анемії коней в Україні.

Встановлені імунологічні параметри у різновікових групах здорових коней і з прихованим перебігом інфекційної анемії в різні сезони року, що дає змогу на високому рівні проводити оцінку імунітету в нормі та при різних захворюваннях. Результати досліджень включені в "Інструкцію по профілактиці та оздоровленню від інфекційної анемії коней", яка затверджена на вченій раді Інституту епізоотології (м. Рівне) і передана для затвердження в Державний департамент ветмедицини Міністерства АПК України. Розроблено та впроваджено методичні рекомендації "Оцінка імунного статусу коней в нормі і за прихованого перебігу інфекційної анемії" ( затверджені методкомісією вченої ради ІЕКВМ УААН, протокол № 3, 3.11. 1995р.) інфекційний анемія кінь імунітет

Особистий внесок здобувача. Автор безпосередньо виконав дослідження, провів експерименти та узагальнив одержані дані. Частину досліджень (визначення кількості еритроцитів, гемоглобіну, гетерогемаглютинінів, ізогемаглютинінів, білка, фракцій глобулінів і постановка РДП) проведено разом із завідувачем лабораторії "Хвороби коней", кандидатом ветеринарних наук О. Є. Галатюком (Інститут епізоотології УААН м. Рівне).Патоморфологічні дослідження здійснено сумісно із завідувачем лабораторії "Патоморфології", кандидатом біологічних наук Л. П. Горальським ( Інститут епізоотології УААН м. Рівне).

Апробація результатів дисертації. Основні положення дисертації доповідалися на засіданнях методичної комісії та вченої ради Інституту епізоотології УААН , а також на науково - практичній конференції "Проблеми ветеринарної медицини щодо обслуговування тваринницьких колективних і фермерських господарств" (м. Харків, 1992); Міжнародній науковій конференції "Загальна епізоотологія, імунологія: екологічні і методологічні проблеми" ( м. Харків, 1995); Міжнародній науково- практичній конференції "Розвиток ветеринарної науки в Україні: здобутки та проблеми " ( м. Харків, 1997); на міжлабораторному засіданні в Інституті експериментальної і клінічної ветеринарної медицини ( м. Харків, 1999).

7Публікації. За темою дисертації опубліковано тринадцять статей, з них три - у фахових журналах.

Обсяг та структура роботи: Матеріали дисертації викладені на 162 сторінках машинописного тексту і включають: вступ, огляд літератури, власні дослідження, обговорення результатів досліджень, висновки, практичні пропозиції. Перелік літератури містить 250 джерел, у тому числі 97 робіт іноземних авторів. Робота ілюстрована 37 таблицями та 19 рисунками.

2. РЕЗУЛЬТАТИ ВЛАСНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ

Матерiали та методи досліджень

Робота проводилася в лабораторії " Хвороби коней " Інституту епізоотології УААН (м. Рівне), а також у господарствах Захiдних областей України, неблагополучних щодо інфекційної анемії. Дослiдження виконанi у 329 непородних коней, з яких 225 були вільні від вірусу інфекційної анемії та в 104 з прихованим перебігом хвороби. У піддослідних тварин в процесі виконання роботи не було виявлено інших інфекційних захворювань. Епізоотологічні дослідження проводили з використанням статистичних даних ветеринарної звітності обласних і районних установ ветеринарної медицини, Державної лабораторії ветеринарної медицини (м. Київ), а також лабораторії "Хвороб коней" Інституту епізоотології (м. Рівне). Всі піддослідні коні були піддані клініко-гематологічним дослідженням. Загалом проведено 1710 серологічних, 453 біохімічних, 154 - по фагоцитозу, 762 - по визначенню вмісту Т- та В - лімфоцитів. Визначення специфiчних антитiл до вiрусу IА в сироватцi кровi коней проводили в РДП (реакція дифузної преципітації) згiдно з методичними вказiвками вiд 25.03.1983р. N115-62. Для оцiнки стану специфiчної реактивностi органiзму, в дослiдних тварин визначали титр антитiл до вiрусу IА шляхом серiйних розбавлень сироватки кровi. На підставі одержаних даних були сформованi дослiднi та контрольнi групи. Вивчаючи епiзоотичний процес при IА коней, використовували загальноприйнятi методи епiзоотологiчних дослiджень. Титри гетерогемаглютинінів і ізогемаглютинінів у сироватці крові коней визначали за методикою Шиффа в модифікації Галатюка О. Є. (1984). Кількість загального білка, альбумінів, фракцій глобулінів і гемоглобіну визначали за методичними рекомендаціями (Чумаченко В.Е. та ін., 1990), iмунних комплексiв (Гриневич Ю.А. та iн., 1986), лiзоциму (Смирнов П.Н. та iн., 1987), вiтамiну С (Краснiков Г.А. та iн., 1985).Гематологiчнi дослiдження ( пiдрахунок кiлькостi лейкоцитiв, лiмфоцитiв i нейтрофiлiв) проводили за загальноприйнятими методиками (Чумаченко В.Е. та ін. 1990).Iмунологiчнi дослiдження - визначення Т-лiмфоцитiв та їхніх субпопуляцiй Тр-(теофілінрезистентних) i Тч-(теофілінчутливих) та В-лiмфоцитiв - виконували згідно з унiфiкованим нами методом (Чернушенко Е.Ф. та iн., 1988), враховуючи особливостi фiзiологiї кровi коней. Фагоцитарну активнiсть нейтрофiлiв визначали за методикою (Бусол В. А. та iн., 1996), гістологічні дослідження (Ромейс Б. 1953).

Вивчаючи прихований перебiг IА, кров у пiддослiдних тварин брали через кожнi 90 - 180 днiв протягом 2 рокiв.

Результати дослiджень опрацьовували методами варiацiйної статистики (Сосов Р.Ф., Глушков Н.А., 1974). При математичному опрацюванні результатiв дослiджень використовували ЕОМ і застосовували комп'ютерні програми.

Епiзоотична ситуацiя та особливостi iнфекцiйного процесу за прихованого перебігу інфекційної анемії коней

Аналiз епiзоотичної ситуацiї за останнi 12 рокiв щодо IА коней в Українi показав, що це захворювання реєструвалося у 15 областях, найбільше - в західних та найменше - в східних. У 1986-87 рр. виділено найбільше інфікованих коней - 2,32-3,69 % від досліджених. Це пов'язано з високою інфікованістю тварин у цей період в Житомирській, Полтавській Сумській і Чернігівській областях, яка становила 6,05-12,7%. У наступні роки з проведенням протиепізоотичних заходів кількість хворих коней у зазначених областях значно зменшилася і в даний час реєструється в трьох областях. Серологічними дослiдженнями у рiзновiкових групах коней встановлено нерiвномiрне поширення iнфекцiї. Так, за спонтанного перебiгу IА має мiсце тенденцiя до збiльшення кiлькостi носiїв антитiл iз вiком тварини. Найнижчий рiвень iнфiкованостi реєстрували серед коней вiком 1-3 роки (8,3%) i найвищий - у коней вiком 16 і старше (66,67%). Iз вiком тварин спостерiгається не тiльки збiльшення кiлькостi iнфiкованих, а й зростає титр специфiчних антитiл що, на нашу думку, може спричинити прояв рецидиву хвороби в старших вiкових групах, а також свiдчить про повiльний i поступовий розвиток хвороби.

Характеристика показників специфічного і неспецифічного захисту в здорових коней

Для об'єктивнішої оцiнки показникiв специфічного і неспецифічного захисту в iнфiкованих коней необхiдно було вивчити вказані данi у здорових тварин. З цiєю метою провели дослiдження показникiв специфічного і неспецифічного захисту в коней рiзного вiку (до року; 1-3; 4-9; 10 i старше) в рiзнi пори року. Дослiдження здійснювали на 225 тваринах.Встановлено, що рiвень гетерогемаглютининiв з вiком зростає вірогідно від 6,25 до 12,02 ум.од., тодi як титр ізогемаглютинінів з віком знижується від 3,95 до 2,81. Рiвень загального бiлка у здорових коней поступово підвищується до групи коней віком девять рокiв, а потiм поступово знижується у тварин вiком десять рокiв i старше. З вiком у здорових коней спостерігається зменшення кiлькостi імуноглобулінів, -глобулiнiв, -глобулiнiв, альбумiнiв, лізоцимної активності, гемоглобіну, а також підвищення рівня імунних комплексів. Встановлено, що рiвень iмунних комплексiв у старших вiкових групах коней у весняний сезон був збiльшений i становив у середньому 65,810,15 ум.од., на вiдмiну вiд iнших сезонiв 43,48,6 ум.од. Виявлено вiрогiдну рiзницю цього показника мiж наймолодшою i найстаршою вiковою групою у весняний сезон (р< 0,01). Кiлькiсть аскорбiнової кислоти менша в зимовий сезон. У коней до року встановлено вірогідне (р<0,05) зниження рівня вітаміну С восени порівянно з старшими віковими групами. Таким чином, показники специфічного і неспецифічного захисту в здорових коней змінюються залежно від віку і сезону року.

Характеристика клітинних показникiв iмунiтету в здорових коней

Показники клітинного iмунiтету визначали за кількістю лейкоцитiв, лiмфоцитiв, нейтрофiлiв, Т-, В- лiмфоцитiв та їхніх субпопуляцiй (теофілінрезистентних i теофілінчутливих), рівнем фагоцитозу.

При досліджені 225 клінічно здорових коней найбільшу кiлькiсть лейкоцитiв, лiмфоцитiв, нейтрофiлiв виявлено у групi коней до року, а найменшу - в групi коней віком десять рокiв i старше. Вмiст лейкоцитiв у кровi коней найвищий восени (7,31-8,04 Г/л) i найнижчий літом (6,04-7,86 Г/л). У лошат до року кількість лейкоцитiв i нейтрофiлiв була більшою й становила вiдповiдно 8,5-10,2 i 3,76-4,56 Г/л. У коней вiком 1-3 i 4-9 рокiв ці показники вiдносно постiйні - 6,4-8,2 і 3,02-4,0 Г/л. У коней віком десять років i старше рівень лейкоцитів і нейтрофілів нижчий - у межах 6,2-6,9 i 2,61-3,43 Г/л. Показники вмiсту лiмфоцитiв у кровi тварин у лiтньо-осiннiй перiод були вищими, нiж в зимово-весняний. У сезоннiй динамiцi виявлено, що в осінні та весняні мiсяцi кількість нейтрофiлiв бiльша порівняно з iншими порами року. Аналiз результатів показав, що у групi коней до року є корелятивний зв'язок (r=0,67) мiж вмiстом нейтрофiлiв i сумарною кiлькiстю лейкоцитiв. Таку закономiрнiсть встановлено i в старшiй вiковiй групi коней ( десять років i більше). При аналізі показникiв фагоцитозу в рiзновiкових групах коней є тенденція до зниження їх із вiком тварин. Вищi показники фагоцитозу були в лiтньо-осiннiй перiод i нижчi - у зимово - весняний. При аналiзi останніх виявлено тiсну позитивну кореляцiю в усiх вiкових групах мiж фагоцитарною активнiстю та ємкiстю (r=0,65), а також мiж фагоцитарним числом та iндексом (r=0,87).

Аналiз вмісту імунокомпетентних клітин показав, що вiдносна кiлькість Т-лiмфоцитiв бiльша в осiнньо-зимовий перiод, нiж у весняно-лiтнiй. В абсолютних числах, встановлено незначне зменшення кiлькостi Т-лiмфоцитiв із вiком. Так, у наймолодшiй вiковiй групi вмiст Т- лiмфоцитiв був у межах 0,72-1,16, а в найстаршiй - 0,52-0,70 Г/л. За відносним вмістом В-лімфоцитів також встановлено тендецію до зменшення їхньої кількості, починаючи із осіннього сезону по літній.

Виявлено вiрогiдну рiзницю (р< 0,05) кількості В-лiмфоцитiв мiж лiтнiм i осiннiм сезоном у вiковiй групi десять років i старше. У групi до року вмiст В -клiтин був вищим (0,67-0,72 Г/л), нiж у групi десять років i старше (0,28-0,43 Г/л). Вiдносна кiлькiсть Т(р) в усiх вiкових групах була бiльшою в осiнньо-зимовий перiод у порiвнянні з весняно-лiтнiм. У групi коней до року мiж зимовим i весняним періодом встановлено вiрогiдну рiзницю (р<0,01). Якщо рiвень Т(р) в зимовий сезон був вищим, нiж в iншi, то Т(ч) - нижчий. Виявлено вiрогiдну рiзницю у вмiстi Т(ч) у зимовий сезон (р<0,01). Встановлено поступове збiльшення кiлькостi Т(ч) з вiком тварин. Дана тенденція спостерiгається не тiльки в зимовий сезон, а й в iншi. За вмістом Т(ч) між групою коней до року та десять років і старше встановлено вірогідну різницю (р<0,1). Збільшення кількості Т(ч) з віком тварин пов'язано з розвитком аутоімунних процесів в організмі. Таким чином, в iмунній системі здорових тварин проходять динамiчні змiни в залежностi вiд вiку i пори року, що потрібно враховувати проводячі оцінку її стану, при проведенні профілактичних заходів щодо попередження захворювань різної етиології та виявлення тварин з низькою резистентністю.

Показники гуморального iмунiтету і неспецифічної резистентності за прихованого перебігу інфекційної анемії коней

Дослiдження проведені у 104 коней з прихованим перебігом ІА. З вiком у хворих тварин титр специфiчних антитiл збiльшується і спостерігається зниження в периферичнiй кровi вмісту гетерогемаглютининiв від 10,6 ум.од. у трирiчному вiцi і до 6,26 i 8,07 у 4-9 та 10 рiчному вiцi. Крiм того, підвищений рiвень iзогемаглютинінів та iмунних комплексiв у коней із прихованим перебiгом IА, у порiвнянні iз здоровими, свідчить про розвиток аутоiмунного процесу при IА. Кількість імуноглобулiнiв також більша у тварин із прихованим перебiгом IА, що є реакцiю органiзму на наявнiсть у ньому вiрусу IА. Вміст загального бiлка у хворих тварин поступово зменшується з віком, а у здорових коней він підвищується. Рівень альбумінів, фракцій -глобулінів, - глобулінів та гемоглобіну дещо знижений у хворих коней, а рівень iмунних комплексiв (ІК) в iнфiкованих коней динамiчно змінювався залежно вiд сезону року. В зимово - весняний перiод цей показник вищий (66,51-90,0 ум.од.), в лiтньо-осiннiй - нижчий (52,75-72,67 ум.од.) . Спостерiгається збільшення кiлькостi імунних комплексів у хворих коней. При збільшенні рівня ІК в сироватці крові хворих коней підвищується вміст загального білка, фракції альбумінів, - глобулінів, імуноглобулінів, а також кількість О-клітин і субпопуляцій Т-лімфоцитів: Т-теофілінрезистентних і Т-теофілінчутливих. У свою чергу на фоні зростання вказаних показників вміст фракції -глобулінів, а також кількість Т- і В- лімфоцитів була меншою. У хворих тварин з високим рівнем імунних комплексів встановлено вірогідне зменшення фракціі альбумінів (р<0,05), -глобулінів (р<0,05) і збільшення фракції імуноглобулінів та - глобулінів (р<0,01 р<0,05). Таким чином, високий рівень циркулюючих у крові імунних комплексів у коней за прихованого перебігу хвороби є показником суттєвих змін в імунобіологічному стані.

Лiзоцимна активнiсть у хворих тварин знижена в незначнiй мiрi у весняний та осiннiй сезони й пiдвищена в зимовий i лiтнiй. Вiрогiдної рiзницi у вмiстi лiзоциму мiж здоровою i хворою групами коней не встановлено. За вмiстом вiтамiну С суттєвої рiзницi в аналiзованих групах також не виявлено. Лише у весняний сезон встановлено вiрогiдну рiзницю в зменшенi його кількості у хворих коней (р<0,05), що свідчить про незначне зниження чинників неспецифічної резистентності при інфекційній анемії.

Показники фагоцитарної активності у коней за прихованого перебiгу інфекційної анемії.

Дослідження проведені у віковій групі від чотирьох до дев'яти років на поголів'ї 139 коней, з яких 49 реагували позитивно в РДП - тестi на iнфекцiйну анемiю. Нами не виявлено істотної рiзницi в рівні лейкоцитiв мiж хворими i здоровими тваринами. Спостерiгається збiльшення кількості лейкоцитiв у зимово - весняний i зменшення в лiтньо - осiннiй перiоди в обох досліджуваних групах. При аналiзі показників фагоцитозу у хворих коней, порiвняно із здоровими, виявлено, що фагоцитарна активнiсть у них знижена взимку, що є статистично вiрогiдним (р< 0,001). Фагоцитарне число було нижчим у хворих тварин. Встановлено вiрогiдну рiзницю цього показника в зимовий i лiтнiй сезони (р<0,01 р<0,001) порiвняно із здоровими кіньми.Подiбна закономiрнiсть спостерiгається при визначеннi фагоцитарного iндексу. Протягом усiх сезонiв року вiн був нижчим у хворих тварин i в лiтнiй сезон виявлено вiрогiдну рiзницю (р<0,001). Фагоцитарна ємкiсть менша в усі сезони року в хворих коней. Встановлено вірогідну різницю в зниженні цього показника взимку (р<0,01). Таким чином, проаналiзувавши показники фагоцитозу в коней з прихованим перебiгом iнфекцiйної анемiї, у них виявлено вiрогiдно нижчий рiвень фагоцитарної активностi, числа, iндексу та ємкості, що свідчить про пригнiчення функцiональної активностi нейтрофiлiв кровi iнфiкованих тварин.

Характеристика вмiсту iмунокомпетентних клiтин за прихованого перебiгу інфекційної анемії

Вивчення Т і В - систем iмунiтету проведено у 250 коней, з яких 99 реагували позитивно в РДП - тесті на інфекційну анемію.

Дослiдження щодо кiлькостi лiмфоцитiв у пiддослiдних тварин показали, що в групi коней, iнфiкованих вiрусом IА, спостерігається зниження їхнього рівня у лiтньо-осiннiй перiод. Встановлено зменшення кiлькостi Т-лiмфоцитiв в усi сезони року, крiм весняного, де їх було трохи більше, ніж у здорових коней. Значне зниження рівня Т-лiмфоцитiв у хворих коней виявлено в осiнньо-зимовий перiод. Суттєвої різниці щодо вмiсту В-лiмфоцитiв у дослiдних групах тварин не спостерiгається протягом усiх сезонiв року. Лише в осiннiй сезон як у процентних числах, так i в абсолютних у групi хворих коней виявлено зниження їхнього рівня.

Для поглибленого вивчення впливу вiрусу на iмунокомпетентнi клiтини проведено дослiдження щодо визначення кiлькостi субпопуляцiй Т- клiтин: Т(р)-теофілінрезистентних та Т(ч)-теофілінчутливих в аналiзованих групах коней. Кiлькiсть Тр у розрiзi сезонiв року динамiчно змiнювалася. У лiтньо-осiннiй перiод в обох аналiзованих групах кiлькiсть Тр була бiльшою. Відносна кiлькiсть Тч бiльша в iнфiкованих коней, особливо в осiннiй сезон, де встановлено вiрогiдну рiзницю ( р<0.05). Межi кiлькостi Тч у хворих коней значно ширшi, нiж у здорових. Зменшення вiдносної кiлькостi Т- клiтин i збiльшення Тч в органiзмi тварин свiдчить про iмунодепресивну дiю вiрусного агента на iмунокомпетентнi клiтини.

Встановлено закономірність зміни досліджуваних показників специфічного і неспецифічного захисту організму в залежності від титру специфічних антитіл в РДП. При збільшенні титру специфічних антитіл до вірусу ІА зростають вiдносна кiлькість В-, Тр-, Тч- (р< 0,05) лiмфоцитiв. Виявлено вірогідне зменшення кількості Т-клітин (р< 0,01), рівня фагоцитарного числа (р<0,1), фагоцитарного індексу ( р<0,001). Спостерігається тенденція до зменшення рівня альбумінів, титру гетерогемаглютинінів, вітаміну С, лізоцимної активності, гемоглобіну і збільшення рівня імуноглобулінів, імунних комплексів та ізогемаглютинінів, що свідчить про прогресування патологічного процесу в організмі. Результати наведено в таблиці.

Таким чином, за прихованого перебігу ІА в хворих тварин при зростаннi титрiв специфiчних антитiл можлива імуносупресія, зумовлена вірусом ІА, та розвиток патологічного процесу в організмі.

Таблиця Гематологічні, біохімічні та імунологічні показники у коней в залежності від титру специфічних антитіл до вірусу інфекційної анемії.

Примiтка: ступiнь вiрогiдностi: **** р<0,001, *** р<0,01,** р<0,05, * р<0,1.

Стан експресії рецепторів iмунокомпетентних клiтин за прихованого перебiгу інфекційної анемії коней

Стан експресії рецепторів iмунокомпетентних клiтин у коней визначали оцiнкою груп лiмфоцитiв за їхньою здатністю приєднувати певну кiлькiсть iндикаторних еритроцитiв. З урахуванням вiку тварин, сезону року, умов утримування та титру антитiл в РДП 34 коней роздiлили на три групи. В першу групу ввiйшли 22 тварини, в сироватці кровi яких були вiдсутнi антитiла до вiрусу IА, у другу- сім із титром антитiл в РДП 1:2 - 1:4, в третю - п'ять із титром 1:8 - 1:32. Усе поголiв'я було вiком 10 - 12 рокiв й утримувалося в однакових умовах. Дослiдження проводили восени. При оцiнцi експресії рецепторів iмунокомпетентних клiтин враховували їхню здатнiсть приєднувати певну кiлькiсть iндикаторних еритроцитiв. За цiєю ознакою кожну популяцiю iмунокомпетентних клiтин роздiлили на чотири групи. У першу групу ввiйшли лiмфоцити, якi приєднали три еритроцити, в другу - чотири, третю - вiд п'яти до дев'яти, четверту- вiд десяти i бiльше. У здорових тварин в середньому 77% лiмфоцитiв утворюють неповнi розетки, приєднують 3-4 еритроцити та 23% утворюють повнi розетки, приєднуючи п'ять еритроцитiв i бiльше. Так, порiвнюючи другу й третю групи з першою, встановили вiрогiдну рiзницю (р< 0,05; 0,01) в зменшеннi експресiї рецепторiв повних розеток у коней за прихованого перебiгу IА. Порiвнюючи двi дослiднi групи хворих тварин із рiзним титром антитiл у РДП тестi, виявили більш суттєві змiни в групі коней із високим титром. Одержанi результати свiдчать, що прихований перебiг хвороби супроводжується зменшенням експресiї рецепторiв на Т-лiмфоцитах, а це, можливо, пов'язано з блокуваннням рецепторiв на поверхнi лiмфоцита комплексом вiрус-антитiло. Стан експресiї рецепторiв В-лiмфоцитiв до Сз-компонента комплементу за прихованого перебiгу IА характеризується менш суттєвими змiнами на поверхнi мебран В-клiтин. Так, із розвитком iнфекцiйного процесу лише в третiй групi встановлено вiрогiдну рiзницю (р< 0,05) в зменшеннi експресiї рецепторiв на лiмфоцитах до Сз-компонента комплементу щодо контрольної групи. Одержанi результати свідчать, що прихований перебiг iнфекцiї супроводжується зменшенням експресiї рецепторiв на iмунокомпетентних клiтинах.

Імунологічні, гематологічні та біохімічні показники в динаміці за прихованого перебігу інфекційної анемії коней

Аналіз динаміки специфічних антитіл у досліджуваних господарствах показав, що у серопозитивних коней селянської спілки "Прогрес" спостерігалося поступове зниження рівня специфічних антитіл від 1:14,2 до 1:2,2. Середньоарифметичний титр специфічних антитіл в РДП у десяти тварин держгоспу "Меліоратор" та дев'яти селянської спілки "Полісся" свідчить, що персистенція вірусу сприяє синтезу специфічних антитіл на вищому рівні (6,7 - 14,8 ум.од. ). Встановлено, що в одних і тих самих коней титри змінюються динамічно і стабільно виявляються за допомогою РДП.

Динаміку імунокомпететних клітин і показників фагоцитозу вивчали протягом 24 місяців у коней держгоспу "Меліоратор" і 12 місяців у коней селянської спілки "Прогрес". Дослідження проводили в держгоспі "Меліоратор" з інтервалом шість місяців, а в селянській спілці "Прогрес" - три місяці. Суттєвої різниці в рівні Т- і В-лімфоцитів між здоровими і хворими кіньми в обох господарствах не встановлено, хоча спостерігалося порушення співвідношення імунокомпетентних клітин у хворих тварин. При аналізі О-клітин виявлено деяке збільшення їхньої кількості у хворих тварин. Можливо, значна частина їх є недиференційованими (уражені вірусом інфекційної анемії) або диференційованими, але блокованими комплексом антиген-антитіло чи антигеном. Рівень Тч - лімфоцитів вірогідно був вищим (p<0,1) на 12-му місяці досліджень у держгоспі "Меліоратор" і на першому та шостому місяцях досліджень - у селянській спілці "Прогрес" (p<0,001). При розгляді фагоцитарних показників, спостєрігається зниження їх у хворих як в одному, так і в іншому господарстві. Виявлено вірогідну різницю в показниках фагоцитарного індексу та ємкості між контрольною і дослідною групами коней у селянській спілці "Прогрес", на першому і третьому місяці досліджень за фагоцитарною ємкістю (p<0,01;p<0,05), на третьому та дев'ятому місяцях - за фагоцитарним індексом (p<0,01). У держгоспі "Меліоратор" лише за фагоцитарною ємкістю встановлено вірогідну різницю (p<0,1) на першому та двадцать четвертому місяцях досліджень. В інфікованих і здорових коней обох господарств показники імунітету динамічно змінювалися, що пов'язано з особливостями розвитку інфекційного процесу.

З метою пошуку маркерів резистентності щодо клінічного прояву хвороби нами було проаналізовано результати досліджень показників імунобіологічної реактивності організму у восьми коней селянської спілки "Прогрес".У групі були коні як з високим, так і з низьким рівнем імунологічних показників. На нашу думку, динамічні зміни зумовлені індивідуальними особливостями організму та стадією розвитку хвороби. Аналіз їх, залежно від титру специфічних антитіл кожної окремо взятої тварини, свідчить, що підвищення титру корелює із зниженням резистентності організму, а зниження - з підвищенням. Така закономірність спостерігається не в усіх випадках. Це, можливо, пов'язано з особливостями імунологічної перебудови в організмі хворих тварин. Однак результати досліджень у більшості коней показали, що прогресування інфекційного процесу (підвишення титру специфічних антитіл) супроводжується пригніченням захисних функцій організму (зниження рівнів лізоцимної активності, вітаміну С, титру гетерогемаглютинінів, еритроцитів, Т-лімфоцитів, фагоцитозу) і розвитком аутоімунного процесу (підвищення рівня імунних комплексів та ізогемаглютинінів). Таким чином, ці показники з урахуванням співвідношення альбумінів до імуноглобулінів та рівня титру в РДП можуть використовуватись як допоміжні тести щодо виявлення тварин із підвищеним ризиком розвитку патологічного процесу при цій хворобі.

Отже, при дії вірусного агента імунний стан змінюється. Ці зміни більш суттєво відображені на клітинних показниках імунітету в порівнянні з гуморальними. Реакція організму за прихованого перебігу хвороби спрямована на збереження внутрішнього гомеостазу і захисту від сторонніх агентів.

Імуноморфологічні аспекти діагностики інфекційної анемії коней

Імунологічні показники і патоморфологічні зміни відносно титру специфічних антитіл до вірусу інфекційної анемії вивчали у різних групах коней. Досліджували 33 тварини. При цьому у десяти коней в сироватці титр специфічних антитіл був у межах 1:4-1:64, у 15 тварин тільки нативна сироватка реагувала в РДП, а вісім коней були здоровими (контрольна група). Прогресування інфекційного процесу в коней, зумовленого вірусом ІА, проходить при зменшенні більш як у два рази співвідношення альбумінів до імуноглобулінів, що може мати певне діагностичне значення. При діагностичному забої 25 реагуючих по РДП коней і проведенні патологоанатомічних та гістологічних досліджень встановлено характерну закономірність прихованого перебігу хвороби. Так, у тварин, в яких у РДП реагувала лише нативна сироватка, гістологічних змін в органах і тканинах не виявлено. У коней при наявності титрів специфічних антитіл у РДП на рівні 1:4-1:32 при проведенні гістологічних досліджень спостерігали слабо виражені зміни в органах і тканинах, які проявлялися лише незначною лімфоїдною проліферацією органів і тканин та незначним порушенням будови органів. У тварин з наявністю специфічних титрів (1:64) у РДП виявили гематологічні, патологоанатомічні та гістологічні зміни, характерні для інфекційної анемії. У таких коней встановлено значне зменшення альбуміново - імуноглобулінового співвідношення - 0,580,17 ум.од. (норма 1,310,41). Відмічали незначний лейкоцитоз, лімфоцитопенію, нейтрофілію і зниження рівня еритроцитів.

Таким чином, серед коней із прихованим перебігом хвороби з високими титрами специфічних антитіл в РДП (1:64) і низьким співвідношенням альбумінів до імуноглобулінів (0,580,17 ум. од.) в організмі встановлено патоморфологічні та гістологічні зміни, характерні для гематологічно хворих ІА. Ці показники мають суттєве діагностичне значення для виявлення тварин із підвищеним ризиком розвитку патологічного процесу.

ВИСНОВКИ

1. Інфекційна анемія коней (ІАК) відноситься до типу "повільних інфекцій". Чинники специфічного і неспецифічного захисту організму таких захворювань недостатньо вивчені та дискусійні. Механізм патогенезу нерозкритий і не проводився пошук імунологічних маркерів, щодо виявлення хворих тварин, не розроблено параметри показників імунітету в непородних здорових коней.

2. ІАК в Українi поширена нерiвномiрно. У зоні Полісся захворюваність становила 4,10 - 4,65 , Лісостепу - 0,25 - 0,85 і Степу - 0,01 - 0,09 %.

3. У стаціонарно неблагополучних господарствах за прихованого перебiгу ІА з віком коней збiльшується кiлькість iнфiкованих тварин, що пов'язано з низькою резистентнісю в старших вікових групах. У групі коней від одного до трьох років захворюваність складає 8,3, а віком 16 років і старше - 66,67 %.

4. У коней старше 10 років знижується рівень неспецифічної резистентності організму - титр ізогемаглютинінів, рівень альбумінів, глобулінів, лiзоцимної активності, вміст вітаміну С, гемоглобіну, еритроцитів, лейкоцитів, лімфоцитів і збільшується рівень iмунних комплексiв та гетерогемаглютинінів, кількість імунокомпетентних клітин (Т- і В- лімфоцитів) знижується, Т - теофілінрезистентних і Т -теофілінчутливих (р<0,1) - збільшується.

5. Для інфекційного процесу за прихованого перебігу ІАК характерний динамічний розвиток, що супроводжується зниженням гематологічних, біохімічних та імунологічних показників (кількості еритроцитів, відносного вмісту лімфоцитів, гемоглобіну, альбумінів, - глобулінів, титру гетерогемаглютинінів, вмісту вiтамiну С, лiзоцимної активності, кількості Т- лімфоцитів (р<0,01), фагоцитарної активності, фагоцитарного числа (р<0,01), фагоцитарного iндексу(р<0,001), фагоцитарної ємкостi і збiльшенням кількості лейкоцитів, відносного вмісту нейтрофілів, В-клiтин, Т-теофілінрезистентних, Т-теофілінчутливих (р<0,05), рівня - глобулінів, імуноглобулінів, імунних комплексів, титру ізогемаглютинінів та зниженням експресії рецепторів на імунокомпетентних клітинах і розвитком гістоморфологічних змін в органах.

6. За прихованого перебігу інфекційної анемії коней зниження показників імунітету більше виражено на клітинних, ніж гуморальних. Так, встановлено вірогідні зміни у зниженні показників фагоцитозу- фагоцитарного числа (р<0,01) і фагоцитарного iндексу(р<0,001), кількості Т- лімфоцитів (р<0,01) і збільшення вмісту теофілінчутливих (р<0,05); по гуморальних показниках імунітету вірогідних змін не встановлено.

7. Критерієм виявлення коней з захворюванням на ІА за прихованого перебігу хвороби є встановлення високого рівня преципітінів, які виявляються в РДП, та низький коефіцієнт співвідношення альбумінів до імуноглобулінів (0,580,17 ум.од.).

8. У коней з прихованим перебігом хвороби при підвищенні титрів специфічних антитіл від 1:32 до 1:64 розвиваються гематологічні, паталогоанатомічні та гістологічні зміни, характерні інфекційній анемії.

ПРАКТИЧНI ПРОПОЗИЦІЇ

1. Одержані показники щодо iмунiтету у коней за прихованого перебiгу iнфекцiйної анемiї використовуються при подальшому вивченнi молекулярно-бiологiчних та iмунологiчних механiзмiв виникнення i розвитку цiєї хвороби.

2.На основі встановлених імунологічних показників у здорових непородних коней у рiзновiковiй та сезоннiй динамiцi проводиться оцiнка iмунного статусу тварин у кінних господарствах України.

3. Високий титр преципітінів від 1:32 до 1:64 з одночасним зниженням співввідношення альбумінів до імуноглобулінів (0,580,17 ум. од.) є прогностичним критерієм виявлення коней з підвищеним ризиком розвитку патологічного процесу при інфекційній анемії.

СПИСОК РОБIТ, ОПУБЛIКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦIЇ

1. Кривошия П. Ю. Показники імунобіологічної реактивності у робочих коней. // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету. - Вип. 4. - ч. 1 - Біла Церква , 1998. - С. 63-65.

2. Галатюк О. Є., Кривошия П. Ю. Розповсюдження, лікування і профілактика інфекційних хвороб коней. // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету. - Вип. 4. - ч. 1 - Біла Церква , 1998. - С.23-24. Автором проведено узагальнення досліджень епізоотичної ситуації по інфекційній анемії коней в Україні.

3. Кривошия П. Ю. Функціональна активність Т- і В- лімфоцитів за прихованого перебігу інфекційної анемії коней (ІАК). // Вісник Білоцерківського державного аграрного університету. - Вип. 4. - ч. 1 - Біла Церква , 1998. - С.66-68.

4.Состояние иммунной системы при скрытом течении инфекционной анемии / В. А. Бусол, А. Е. Галатюк, В. М. Ракович, П. Ю. Кривошея //Проблемы профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных. Труды Свердловской НИВС. - Вып. №10. Екатеринбург - 1995. - С. 18 - 23. Автором проведено досліди по визначенню вмісту імунокомпетентних клітин за прихованого перебігу інфекційної анемії коней, обгрунтування отриманих результатів, статистична обробка і висновки.

5. Мандыгра М. С., Галатюк О. Е., Крывошея П. Ю. Состояние Т - системы иммунитета и фагоцитоза при скрытом течении инфекционной анемии лошадей. // Asigurarea stiintifica a sectorului zootehnic si medicini veterinare. Chisinau, 1997. - С. 150. Автором проведено досліди та обгрунтування отриманих результатів, статистична обробка і висновки.

6. Кривошия П. Ю. Циркулюючі імунні комплекси за прихованого перебігу інфекційної анемії коней. // Лабораторна ветеринарна медицина: фізико - хімічні методи досліджень; Наук. статті науково - метод. семінару. Рівне, 1998. - С. 124 -127.

7. Кривошия П.Ю. Деякi показники клiтинного i гуморального iмунiтету при iнфекцiйнiй анемiї коней //Проблеми ветеринарної медицини по обслуговуванню тваринницьких колективних та фермерських господарств: Матер. конф. молодих вчених та спецiалiстiв України. - Харкiв, 1992. - С. 13.

8. Кривошия П.Ю., Галатюк О.Є., Мандигра М.С. Фагоцитарний рiвень лейкоцитiв при прихованому перебiгу iнфекцiйної анемiї коней. /Iнформацiйний листок Рiвненського ЦНТI. - 1994. -N36 - 94. - С.2. Автором проведено досліди та обгрунтування отриманих результатів, статистична обробка і висновки.

9. Кривошия П.Ю., Галатюк О.Є., Мандигра М.С. Показники стану Т- Б- систем iмунiтету та iмунних комплексiв при прихованому перебiгу iнфекцiйної анемiї коней / Iнформацiйцний листок Рiвненського ЦНТI. - 1994. - N37 - 94. - С. 5. Автором проведено досліди та обгрунтування отриманих результатів, статистична обробка і висновки.

10. Галатюк А.Е., Мандыгра Н.С., Кривошея П.Ю.Восприимчивость телят со скрытым течением лейкозного процесса к вирусу инфекционной анемии лошадей //Тез. докл. междунар. научно-производственной конференции. - Кишеньов, 1994. -С.62. Автором проведено експериментальні дослідження.

11.Галатюк О.Є., Самсонюк Л.С., Кривошия П.Ю. Моделювання iнфекцiйного процесу, зумовленого вiрусом iнфекцiйної анемiї коней // Тез. допов. республiканської науково-практичної конференцiї " Проблеми пiдвищення продуктивностi тварин та ефективностi їх лiкування". - Днiпропетровськ, 1994. - С.117. Автором проведено експериментальні дослідження.

12. Кривошея П.Ю., Галатюк О.Е., Мандыгра Н.С.Сезонные колебания неспецифического иммунитета в разновозрастных группах лошадей //Тез. докл. междунар. научной конференции "Общая эпизоотология: иммунологические, экологические и методологические проблемы". - Харьков,1995. - С.85. Автором проведено досліди та обгрунтування отриманих результатів, статистична обробка і висновки.

13. Кривошия П.Ю. Розеткоутворююча здатність нейтрофілів і Т- лімфоцитів у коней за прихованого перебігу інфекційної анемії . // Розвиток ветеринарної науки в Україні: здобутки та проблеми ; Зб. матер. міжнар. науково - практ. конференції. Харків , 1997.- С.147- 148 .

Анотація

Кривошия П.Ю.

Стан гуморальних і клітинних чинників імунітету при інфекційній анемії коней. - Рукопис. Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.03 - мікробіологія та вірусологія. - Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини УААН, Харків, 1999. Дисертація присвячена вивченню показників гуморальних і клітинних чинників імунітету у здорових непородних коней та за прихованого перебігу інфекційної анемії. У коней за прихованого перебігу хвороби встановлено зменшення кількості еритроцитів, зниження відносного вмісту лімфоцитів, Т- лімфоцитів (р<0,01), фагоцитарної активності, фагоцитарного числа (р<0,01), фагоцитарного iндексу (р<0,001), фагоцитарної ємкостi, рівня альбумінів, - глобулінів, гемоглобіну, вiтамiну С, лiзоцимної активності, титру гетерогемаглютинінів і збiльшення кількості лейкоцитів, підвищення відносного вмісту нейтрофілів, В-клiтин, Т-теофілінрезистентних, Т-теофілінчутливих (р<0,05), рівня - глобулінів, імуноглобулінів, імунних комплексів, титру ізогемаглютинінів та зниження експресії рецепторів на імунокомпетентних клітинах і розвиток гістоморфологічних змін в органах. Визначено імунологічні маркери для виявлення коней з підвищеним ризиком розвитку патології серед тварин з прихованим перебігом хвороби. Встановлено імунологічні параметри у непородних здорових коней у різновіковій і сезоній динаміці. Одержані показники щодо iмунiтету у коней за прихованого перебiгу iнфекцiйної анемiї використовуються при подальшому вивченнi молекулярно-бiологiчних i iмунологiчних механiзмiв виникнення i розвитку цiєї хвороби. Ключові слова: інфекційна анемія, імунітет, коні, прихований перебіг, клітини, вітаміни, ферменти, фагоцитоз.

Аннотация

Кривошея П.Ю.

Состояние гуморальных и клеточных факторов иммунитета при инфекционной анемии лошадей. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 16.00.03 - ветеринарная микробиология и вирусология. - Институт експериментальной и клинической ветеринарной медицины УААН, Харьков, 1999.

Диссертация посвящена изучению показателей гуморальных и клеточных факторов иммунитета у здоровых непородных лошадей и при скрытом течении инфекционной анемии.

У лошадей при скрытом течении болезни установалено уменьшение количества эритроцитов, лимфоцитов, Т- лимфоцитов (р<0,01), снижение показателей фагоцитарной активности, фагоцитарного числа (р<0,01), фагоцитарного индекса (р<0,001), фагоцитарной емкости, уровня альбуминов, - глобулинов, гемоглобина, витамина С, лизоцимной активности, титра гетерогемаглютининов, повышение количества лейкоцитов, относительного числа нейтрофилов, В-клеток, Т-теофилинрезистентных, Т-теофилинчуствительных (р<0,05), уровня - глобулинов, иммуноглобулинов, иммунных комплексов, титра изогемаглютининов, уменьшение экспресии рецепторов на иммунокомпетентных клетках и развитием гистоморфологических изменений в органах. Определены иммунологические маркеры для выявления лошадей с повышеным риском развития патологии среди животных со скрытым течением болезни.

Установлены иммунологические параметры у непородных здоровых лошадей в разновозрастной и сезонной динамике. С возрастом у здоровых животных наблюдается тенденция к снижению титра изогемаглютининов, уровня альбуминов, глобулинов, лизоцимной активности, уменьшение количества витамина С, эритроцитов, лейкоцитов, лимфоцитов, Т-, В- клеток и гемоглобина. Паралельно отмечается повышение количества Т- теофилинрезистентных, Т- теофилинчуствительных (р<0,1), иммунных комплексов и гетерогемаглютининов.

Полученые показатели иммунитета у лошадей при скрытом течении инфекционной анемии используются при дальнейшем изучении молекулярно - биологических и иммунологических механизмов возникновения и развития этой болезни.

Ключевые слова: инфекционная анемия, иммунитет, лошади, скрытое течение, клетки, витамины, ферменты, фагоцитоз.

Summary

Krivoshiya Р.Y.

The state of humoral and cellular factors immunity of the horses in case of infectious anaemia. - Manuscript.

The thesis for candidate's degree ( veterinary medicine) in specialized fields 16.00.03. - veterinary microbiology and virology. - Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine of UAAS, Kharkov, 1999.

Тhe thesis is devoted to the studying of the indicators of humoral and cellular immunity of unbreaded healthy and infectious horses - anaemia virus infected horses. Is founded out the reduction of the erythrocytes, lymphocytes, T -lymphocyte (p<0,01) number, the lowering of the phagocitic activity exponents, phagocitic number (p<0,01), phagocitic index (p<0,01), phagocitic capacity of albumins level, - globulins, haemohlobulins, C- vitamins, lysozyme-activity, the titer of heterohemagglutinin, the promotion of leucocyte number, relative number of neutrophils, B-cellulars, T-(theophilinresistence), T-(theophilinsensetive) (p<0,05), the level of - globulins, immunoglobulins, immune complexes, titer of isohemagglutinin, the reduction of the receptor's expression on the immunocompetence cellulars and of the evolvation of histomorphological changes in the organs of horses during the hidden current infectious anaemia.

Immunological markers for exposing horses with promoted risks of patology progress among the animals with hidden current of the desease are defined.

Immune parametres of healthy horses and their age and season dynamics are determined.

Obtained exponentes of immunity of horses with hidden current of infectious anemia are used in further learning of molecular - biologics and immunologics mechanisms of the appearance and progress of this desease.

Key words: infectious anaemia, immunity, horses, hidden, action, cellulars, vitamins, enzymes, phagocitosis.

Размещено на Allbest.ru