Розробка засобів специфічної профілактики бруцелаовісної та хламідійної інфекцій

Через 9,5 місяців після першого щеплення інактивованої біемульсин-вакцини баранчикам 1-ї групи була проведена ревакцинація біемульсин-вакциною серії 2 в дозі 1,0 см³ підшкірно. Титр бруцелаовісних антитіл в РТЗК на 30 добу після ревакцинації становив 1,25 ± 0,35 log₂. На 60 та 90 добу титр бруцелаовісних антитіл становив 1,25 ± 0,42 log₂. В РІД позитивно реагували всі тварини на 30, 60 та 90 добу після ревакцинації. Ревакцинація інактивованою біемульсин-вакциною суттєво не вплинула на титри хламідійних антитіл: на 30 добу після повторного щеплення виявили титр антитіл 1:8 - 1:16 (2,5 ± 0,7 log₂), на 60 добу реагували всі тварини в титрі 1:4 - 1:8 (2,75 ± 0,63 log₂), на 90 добу титр 1:8 - 1:16 (2,5 ± 0,7 log₂).

На 90 добу після ревакцинації дослідних та контрольних тварин заразили вірулентною культурою Br. оvis 65-і в дозі 10 Ч 10⁹ м.к./см³ в об'ємі 1,0 см³ аплікацією на слизову препуція 0,8 см³ та 0,2 см³ на кон'юнктиву очей. Через 30 діб після контрольного зараження титр бруцелаовісних антитіл в сироватці крові щеплених баранів становив 1,75 ± 0,49 log₂ й зберігався протягом 2,5 місяців. Через 3,5 місяці титр антитіл знизився до 1,2 ± 0,34 log₂, в РІД реагували всі ревакциновані тварини. В контрольній групі титр бруцелаовісних антитіл в РТЗК становив 1,6 ± 0,83 log_2, в РІД реагували всі тварини, що свідчило про розвиток бруцелаовісної інфекції після експериментального зараження культурою Br. ovis. Ревакцинована група баранів мала протективний імунітет проти експериментального зараження, культуру не реізольовано. У контрольних тварин виявлено серопозитивність та у 2-х з трьох реізольовано заражаючу культуру з лімфатичного вузла та сім'яників.

Висновки

1. У дисертації на підставі вивчення літературних джерел, епізоотологічного аналізу, клініко-епізоотологічних обстежень вівцегосподарств, серологічних і бактеріологічних досліджень, а також результатів біологічного експерименту на лабораторних тваринах та вівцях, теоретично і експериментально обґрунтовано комбіноване щеплення інактивованих вакцин проти бруцелаовісної і хламідійної інфекцій, розроблено і випробувано з позитивним результатом експериментальні зразки біемульсин-вакцини проти зазначених інфекцій, а також виготовлено і досліджено інактивовану емульсин-вакцину проти інфекційного епідидиміту баранів.

2. Клініко-епізоотологічні обстеження і серологічні дослідження, проведені у п'яти племінних вівцефермах свідчать, що низький рівень відтворення приплоду (35 - 66%) зумовлений ураженістю вівцепоголів'я хламідійною або одночасного хламідійною і бруцелаовісною інфекціями. Хламідійну серопозитивність серед дослідженого дорослого поголів'я виявлено у 18,8 - 30,5 % і у молодняку віком до одного року у 9,09 - 47,62 %. З абортплоду та лімфовузлів вівцематки ізольовано на курячих ембріонах дві культури хламідій, які типовано як Chlamydophila abortus. Бруцелаовісну серопозитивність виявлено у 3,8 - 5,5 % досліджених тварин. З передміхурової залози барана ізольовано культуру Brucella ovis.

3. Вакцинний штам Brucella ovis 67/Б у виготовлених нами за лабораторним регламентом 5-ти експериментальних серій інактивованої емульсин-вакцини проти інфекційного епідидиміту баранів (бруцелаовісної інфекції) в дослідах на морських свинках і на вівцях показав високу антигенну активність і імуногенність і не індукував бруцельозну серопозитивность у щеплених тварин.

4. В порівняльних дослідженнях інактивованих емульсин-вакцин проти інфекційного епідидиміту баранів з штаму 67/Б і зарубіжної вакцини “ЕВАК” встановлено, що обидві вакцини забезпечували напружений протективний імунітет проти експериментального зараження вірулентною культурою Br. ovis в дозі 2 Ч 10⁹ м.к./см³ підшкірно. В контрольній групі заразилися всі морські свинки з індексом інфікованості 23,7 %. Вакцина з штаму 67/Б була менш реактогенною, ніж вакцина “ЕВАК”.

5. В порівняльних дослідах двох ембріональних і однієї культуральної інактивованих вакцин проти хламідійної інфекції встановлено, що ембріональні вакцини виробництва Сумської біофабрики та фірми “Sanofi”, введені підшкірно в дозі 0,5 см³, були помірно реактогенні, на 30 добу після щеплення протективний титр хламідійних антитіл в РЗК ?1:16 встановлено у 100 % тварин, середній титр по групах становив 5,8 ± 0,97 log₂ та 5,22 ± 0,64 log₂ відповідно. Культуральна інактивована вакцина проти хламідіозу ВРХ та ДРХ (ООО “БЛИЦ”), щеплена в дозі 0,5 см³ внутрішньошкірно, мала помірну реактогенність, на 30 добу протективний титр хламідійних антитіл в РЗК ?1:16 встановлено у 100 % тварин, середній титр по групі становив 5,8 ± 1,24 log₂.

6. Комбіноване підшкірне щеплення морським свинкам в дозі 0,5 см³ вітчизняної комерційної інактивованої протихламідійної емульсин-вакцини та двох серій експериментальної інактивованої емульсин-вакцини з штаму Br. ovis 67/Б (серії 6 та 6.1) на 30-у добу формувало гуморальний імунітет до обох вакцин: протективний показник титру хламідійних антитіл ? 1:16 виявлено у 67 % з середнім показником по групам 3,66 ± 0,23 log₂ та 2,0 ± 0,48 log₂ відповідно; поствакцинальні бруцелаовісні антитіла в РТЗК виявили у 91,7 % тварин в титрі 2,5 ± 0,67 log₂ та 2,16 ± 0,6 log₂, відповідно. Комбіноване щеплення захищало 100 % тварин від підшкірного зараження вірулентною культурою Brucella ovis 65939 в дозі 2 Ч 10⁹ м.к./см³. У контрольних групах морських свинок після зараження реагували всі тварини в РТЗК з бруцелаовісним антигеном з середнім показником титру антитіл 3,33 ± 0,59 log₂ культура реізольована у 83,3 % тварин, індекс інфікованості 27,8 %.

7. В дослідах на морських свинках після комбінованого щеплення: інактивованою емульсин-вакциною проти ІЕ баранів “ЕВАК” підшкірно 0,5 см³ та інактивованою культуральною емульсин-вакциною проти хламідіозу (ВІЕВ) в дозі 0,2 см³ внутрішньошкірно, спостерігали виражену реактогенність. На 30 добу середній титр хламідійних антитіл в РЗК становив 5,0 0,89 log₂ з показником протективного титру антитіл ? 1:16 у 100 % тварин, титр бруцелаовісних антитіл в РТЗК становив 4,83 0,38 log₂. Комбіноване щеплення захищало 100 % тварин від підшкірного зараження вірулентною культурою Brucella ovis 65939 в дозі 2 Ч 10⁹ м.к./см³. У всіх морських свинок контрольної групи після зараження реізольовано культуру Br. ovis, індекс інфікованості 45,83%.

8. Виготовлені нами експериментальні серії інактивованої біемульсин-вакцини проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій на основі комерційних інактивованих протихламідійних емульсин-вакцин виробництва Сумської біофабрики або фірми Sanofi та інактивованого бактерину штаму Br. ovis 67/Б були стерильними, нешкодочинними, слабореактогенними, нетератогенними та імуногенними, що забезпечувалося концентрацією хламідійного компоненту 10^6,5 - 10^7,9 EID₅₀ та бруцелаовісного бактерину у кінцевій концентрації 5 Ч 10⁹ м.к./см³ у вакцині.

9. У щеплених інактивованою біемульсин-вакциною проти хламідійної і бруцелаовісної інфекцій серіями 1, 2, 4, 5 морських свинок формування гуморального імунітету встановлено на 14 - 30 добу після вакцинації. На 14 добу після щеплення в РЗК з хламідійним антигеном виявили антитіла у титрі: 3,0 ± 0,64 log₂, 4,2 ± 0,9 log₂, 2,7 ± 0,54 log₂, 2,11 ± 0,28 log₂ відповідно. Середній показник бруцелаовісних антитіл в РТЗК становив 1,8 ± 0,39 log₂, 4,2 ± 0,9 log₂, 0,33 ± 0,36 log_2, 1,33 ± 0,16 log₂, на 30 добу виявлено зростання титру хламідійних антитіл: 5,6 ± 1,16 log_2, 7,0 ± 1,5 log_2, 3,83 ± 0,91 log_2. 5,6 ± 1,2 log₂ відповідно, протективний титр хламідійних антитіл 1:16 виявлено у 66,7 % - 100 %. Титр бруцелаовісних антитіл в РТЗК становив 3,8 ± 0,82 log₂, 5,2 ± 1,12 log₂, 3,5 ± 0,55 log_2, 2,83 ± 0,5 log₂ відповідно_.. Біемульсин-вакцина захищала всіх щеплених морських свинок проти генералізованої інфекції після експериментального зараження культурою Brucella ovis підшкірно в дозі 2 млрд.м.к./см³. В контрольних групах морських свинок після зараження позитивно реагувало 100 % тварин в РТЗК з середнім показником титру 2,96 ± 0,34 log₂, заражаючу культуру B. ovis реізольовано від 83,9 % тварин, індекс інфікованості 20,7 %.

10. У щеплених баранчиків інактивованою біемульсин-вакциною серія 2 підшкірно в дозі 1,0 см³ антитіла в РТЗК з бруцелаовісним антигеном виявили на 14 добу в титрі 2,18 ± 0,22 log₂ та на 30 добу - 1,45 ± 0,14 log₂ В РІД з бруцелаовісним антигеном на 14 та 30 добу після щеплення позитивно реагувало 100 % тварин, на 73 добу реагувало 72,2 % баранчиків. Хламідійні антитіла в РЗК виявлені у 72,2 % протягом 10 місяців з середнім показником титру по групі 3,12 ± 0,31 log₂. У щеплених 4-х кітних вівцематок антитіла в РТЗК з бруцелаовісним антигеном виявляли протягом 10 місяців (строк спостереження) з середнім показником титру по групі 2,43 ± 0,89 log₂. В РІД реагувало 2 вівцематки протягом 133 діб після щеплення. Хламідійна серопозитивність в РЗК спостерігалася у 75 % тварин протягом 10 місяців з середнім показником титру по групі 4,13 ± 1,16 log₂. У контрольній групі баранчиків після зараження вірулентною культурою Brucella ovis 65939 методом аплікації на слизову препуція та кон'юнктиву очей в дозі 10 Ч 10⁹ м.к./см³ за даними серологічного дослідження заразилося всі 4 тварини, культуру Br. оvis ізольовано у 2-х реагуючих тварин.

11. Щеплення 5 баранчиків інактивованою біемульсин-вакциною серія 3 підшкірно в дозі 1,0 см³ викликало серопозитивність в РТЗК з бруцелаовісним антигеном на 15 добу з середнім показником титру по групі 1,8 ± 0,39 log₂, на 50 добу - 1,6 ± 0,34 log_2, на 80 добу - 2,2 ± 0,47 log₂. Титр хламідійних антитіл після вакцинації на 15 добу сягав 3,8 ± 0,82 log₂, на 50 добу - 1,44 ± 0,3 log_2, на 80 добу - 1,8 ± 0,39 log_2. У контрольній групі баранчиків після зараження вірулентною культурою Brucella ovis 65-і методом аплікації на слизову препуція та кон'юнктиву очей в дозі 10 Ч 10⁹ м.к./см³ за даними серологічного дослідження заразилося всі 4 тварини, культуру Br. оvis ізольовано у 2-х реагуючих тварин.

12. Ревакцинація овець через 9,5 місяців після першого щеплення інактивованою біемульсин-вакциною серія 2 підшкірно в дозі 1,0 см³ стимулювала появу бруцелаовісних антитіл в титрі 1:4 - 1:8 в РТЗК з середнім показником по групі 1,17 ± 0,35 log₂, в РІД реагували всі тварини, титр хламідійних антитіл - 2,6 ± 0,68 log₂. Імунітет встановлено у всіх щеплених тварин після зараження через 3 місяці культурою Brucella ovis 65-і. У контрольній групі за даними серологічних досліджень заразилися всі тварини, культуру Br. ovis ізольовано від 2-х з 3-х баранчиків.

13. Медичний набір “Полімік” виробництва фірми” НВФ “Літех” виявився придатним для індикації ДНК хламідій у полімеразно ланцюговій реакції у виділених нами від овець ізолятах Chlamydophila abortus, а також для контролю хламідійних вакцин.

14. На підставі результатів експериментальних досліджень розроблено лабораторний регламент на виготовлення, контроль та застосування інактивованої біемульсин-вакцини проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій у неблагополучних на подвійну інфекцію вівцегосподарствах.

Перелік надрукованих робіт

1. Медвідь О.О. Iмунологiчнi зрушення в крові морських свинок, щеплених моно - та біемульсин-вакцинами проти хламідійної й бруцелаовісної iнфекцiй // Пробл. зооінженерії та вет. медицини: б. наук. праць/ ХЗВI. Х., 2001. С. 192-193.

2. Медвідь О.О., Бабкін А.Ф. Імунологічна активність хламідійного і бруцелаовісного антигену в складі моно - та асоційованих вакцинних препаратів в дослідах на морських свинках// Вет. медицина: Мiжвiд. тематич. наук. зб. Х., 2002. Вип. 80. С. 425 - 434.

Дисертанткою виготовлено інактивовану емульсин-вакцину проти ІЕ баранів та біемульсин-вакцину, вивчено імуногенну активність хламідійного і бруцелаовісного антигенів, аналіз отриманих результатів.

3. Бабкін А.Ф., Медвідь О.О. Результати дослідження імуногенності моно - i комбінованих інактивованих емульсин-вакцин проти хламідійної i бруцелаовісної iнфекцiй на морських свинках// Вет. медицина: Мiжвiд. тематич. наук. зб. Х., 2003. Вип. 82. С. 59-63.

Дисертантка експериментально обґрунтувала комбіноване щеплення проти інфекційного епідидиміту баранів і хламідіозу, провела експериментальні дослідження, аналіз отриманих результатів.

4. Бабкін А.Ф., Обухівська О.В., Медвідь О.О. Вивчення патогенності польових iзолятiв хламідій// Вет. медицина: Мiжвiд. тематич. наук. зб. Х., 2003. Вип. 81. С. 34-40.

Дисертанткою виділено польові ізоляти хламідій, вивчено їх патогенність на курячих ембріонах і білих мишах, проведено аналіз отриманих результатів.

5. Медвідь О.О. Розповсюдження хламідійної iнфекцiї та вивчення iзолятiв хламідій, видалених від овець// Вет.медицина: Мiжвiд. тематич. наук. зб. Х., 2004. Вип. 84. С. 479 - 483.

6. Бабкін А.Ф., Стегній Б.Т., Медвідь О.О. Розробка та випробування інактивованої біемульсин-вакцинами проти хламідійної й бруцелаовісної iнфекцiй на вівцях// Вет. медицина: Мiжвiд. тематич. наук. зб. Х., 2005. Вип. 85. Т. 1. С. 81 - 88.

Дисертанткою виготовлено експериментальні серії інактивованої біемульсин-вакцини, проведені випробування, аналіз отриманих результатів.

7. Бабкін А.Ф., Медвідь О.О., Дейнеш Б. Імуногенність Brucella ovis штам 67/Б у складі біемульсин-вакцини на основі протихламідійної вакцини фірми Sanofi (Угорщина)// Вет. медицина: Мiжвiд. тематич. наук. зб. Х., 2005. Вип. 85. Т. 1. С. 76-87.

Дисертантка провела дослідження імуногенності Brucella ovis штам 67/, у складі вакцини, аналіз отриманих результатів.

8. Деклараційний патент України на корисну модель Інактивована біемульсин-вакцина проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій. Б.Т. Стегній, А.Ф. Бабкін, О.О. Медвідь. №8006 А61К39/10; Заявл. 27.12.2004; Опубл. 15.07.2005. Бюл. №7. Ст. 2.

Анотація

Медвідь О.О. Розробка засобів специфічної профілактики бруцелаовісної та хламідійної інфекцій. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.03 - ветеринарна мікробіологія та вірусологія, Національний науковий центр “Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини”, Харків, 2006

У дисертації викладено результати вивчення імуногенності інактивованих емульсин-вакцин проти інфекційного епідидиміту баранів і хламідійної інфекції, а також після комбінованого їх застосування. Розроблено і випробувано експериментальні зразки інактивованої біемульсин-вакцини проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій.

Клініко-епізоотологічні, серологічні і бактеріологічні дослідження свідчать, що низький рівень відтворення у обстежених вівцегосподарствах був зумовлений хламідійною або поєднаним перебігом хламідійної і бруцелаовісної інфекцій.

Виготовлено і досліджено 5 серій інактивованої емульсин-вакцини проти ІЕ баранів з штаму B.ovis 67/Б і 5 серій інактивованої біемульсин-вакцини проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій. В порівняльних дослідженнях з зарубіжними вакцинами встановлено, що обидві вакцини індукують напружений імунітет проти експериментального зараження вірулентною культурою B. ovis в дозі 2 Ч 10⁹м.к./см³ підшкірно морських свинок і баранів в дозі 10 Ч 10⁹м.к./см³ на слизову кон'юнктиви та припуцію.

Комбіноване щеплення інактивованими протихламідійними та протибруцелаовісними вакцинами формувало імунітет до обох збудників: протективний показник титру хламідійних антитіл ? 1:16 виявили у 84 % щеплених морських свинок, поствакцинальні бруцелаовісні антитіла виявлено у 96 % тварин. Імунітет до експериментального зараження вірулентною культурою B. оvis встановлено у 100 % щеплених морських свинок.

Експериментальні зразки інактивованої біемульсин-вакцини проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій ННЦ “ІЕКВМ” на основі комерційних протихламідійних вакцин і інактивованого бактерину штаму B. ovis 67/Б були стерильними, нешкодочинними, слабореактогенними та імуногенними. На 30 добу протективний титр хламідійних антитіл ? 1:16 виявили у 66,7 - 100 %, показник титру бруцелаовісних антитіл в РТЗК становив 2,83 ± 0,5 log₂ - 5,0 ± 1,12 log₂. З бруцельозним антигеном в РБП антитіл не виявлено. Біемульсин-вакцина захищала щеплених морських свинок проти генералізованої інфекції після експериментального зараження культурою B. ovis в дозі 2 Ч 10⁹м.к./см³ підшкірно, у 3-х з 25 морських свинок було ізольовано культуру B. оvis з місця інокуляції культуру збудника, індекс інфікованості 2,91 %. В контрольних групах після зараження позитивно реагували 100 % тварин в РТЗК, заражаючу культуру реізольовано від 83,9 % тварин, індекс інфікованості 20,7 %.

Щеплення 20 овець інактивованою біемульсин-вакциною серія 2 та 3 в дозі 1,0 см³ підшкірно, стимулювало високі тири хламідійних і бруцелаовісних антитіл та захищало 100 % тварин від експериментального зараження культурою B. ovis в дозі 10 Ч 10⁹м.к./см³ на слизову препуцію та кон'юнктиви. В контрольних групах за даними серологічного дослідження заразилися всі тварини, заражаючу культуру виділено у 50 % позитивно реагуючих тварин. Ревакцинація овець через 9,5 місяців після щеплення інактивованою біемульсин-вакциною серія 2 в дозі 1,0 см³ підшкірно стимулювала появу бруцелаовісних антитіл в РТЗК і РІД і хламідійних антитіл в РЗК. Вакцина захищала від експериментального зараження культурою B. ovis всіх щеплених тварин. Інактивовану біемульсин-вакцину проти хламідійної та бруцелаовісної інфекцій пропонується для оздоровлення вівцеферм неблагополучних на змішану інфекцію.

Набір для ПЛР в медицині “Полімік” виробництва фірми НВФ “Літех” виявився придатним для індикації ДНК хламідій (Chlamydophila abortus) в жовткових культурах ізолятів від овець, а також для контролю вакцин на ДНК хламідій.

Ключові слова: Бруцелаовісна і хламідійна інфекції, біемульсин-вакцина, інактивована емульсин-вакцина проти інфекційного епідидиміту баранів, комбінована вакцинація.

Аннотация

Медведь О.О. Разработка средств специфической профилактики бруцелаовисной и хламидийной инфекций. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 16.00.03 - ветеринарная микробиология и вирусология, Национальный научный центр “Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины”, Харьков, 2006

В диссертации изложены результаты изучения иммуногенности инактивированных эмульсин-вакцин против инфекционного эпидидимита баранов и хламидийной инфекций, а также при комбинированном их применении. Разработано и испытано экспериментальные образцы инактивированной биэмульсин-вакцины против хламидийной и бруцелаовисной инфекций. Клинико-эпизоотологические, серологические и бактериологические исследования свидетельствует, что низкий уровень воспроизводства в обследованных овцеводческих хозяйствах был обусловлен хламидийной или сочетанным течением хламидийной и бруцелаовисной инфекций.

Изготовленные нами 5 серий инактивированной эмульсин-вакцины против инфекционного эпидидимита баранов из штамма Brucella ovis 67/Б и 5 серий инактивированной биэмульсин-вакцины против хламидийной и бруцелаовисной инфекций были стерильними, безвредными, слабореактогенными и иммуногенными. В сравнительных опытах с зарубежными вакцинами установлено, что обе вакцины создают напряженный иммунитет против экспериментального заражения вирулентной культурой B. ovis в дозе 2 Ч 10⁹ м.к./см³ подкожно морским свинкам и в дозе 10 Ч 10⁹ м.к./см³ на слизистую конъюнктивы и препуция баранам.

Комбинированная прививка инактивированными протихламидийными и протибруцелаовисными вакцинами отечественного и зарубежного производства формировала у морских свинок: протективний титр хламидийных антител ? 1:16 у 84 %, бруцелаовисные антитела у 96 % животных. Вакцинация защищала 100 % морских свинок от экспериментального заражения вирулентной культурой B. ovis в дозе 2 Ч 10⁹г. к. /см³ подкожно.

Экспериментальные образцы инактивированной биэмульсин-вакцины против хламидийной и бруцелаовисной инфекций на основе коммерческих протихламидийных вакцин и инактивированного бактерина штамма B. ovis 67/Б на 30 сутки после прививки индуцировали протективний титр хламидийных антител ? 1:16 у 66,7 - 100 % морских свинок, средний титр бруцелаовисных антител в РТЗК 2,83 ± 0,5 log₂ - 5,0 ± 1,12 log₂. С бруцельозным антигеном в РБП антитела не выявляли. Биэмульсин-вакцина защитила привитых морских свинок против генерализованой инфекции после подкожного заражения культурой B. ovis в дозе 2 Ч 10⁹ м.к./см³, в 3-х морских свинок из 25 установлено региональную инфекцию, индекс инфицированности 2,91 %. В контрольных группах после заражения положительно реагировали 100 % животных, заражающую культуру реизолировано от 83,9% животных с индексом инфицированности 20,7 %.

Прививка 20 овец инактивованой биэмульсин-вакциной в дозе 1,0 см³ подкожно, стимулировала высокие тиры хламидийных и бруцелаовисных антител и защищала 100 % животных от экспериментального заражения культурой B. ovis в дозе 10 Ч 10⁹ м.к./см³ на слизистую препуция и конъюнктиву. В контрольных группах по данным серологического исследования заразились все животные, культура выделена у 50 %. Ревакцинация овец через 9,5 месяцев после прививки инактивованой биэмульсин-вакциной стимулировала гуморальный иммунный ответ против обоих возбудителей. Вакцина защищала от экспериментального заражения культурой Brucella ovis всех животных. В контрольной группе по данным серологического исследования заразились все животных, культура выделена в 67 %. Инактивированная биемульсин-вакцина против хламидийной и бруцелаовисной инфекций рекомендуется для оздоровления неблагополучных овцеферм при смешанной инфекции.

Набор для ПЛР “Полимик” фирмы НВФ “Литех” пригодный для индикации ДНК хламидий от овец в желточных культурах ізолятів, виділених від овець, а также для контроля хламидийных вакцин на ДНК хламидий.

Ключевые слова: бруцелаовисная и хламидийная инфекции, биемульсин-вакцина, инактивированная эмульсин-вакцина против инфекционного эпидидимита баранов, комбинированная вакцинация.

Annotation

Medvid' O.O. Development of B.ovis and chlamydial infections specific prophylaxis means.

Thesis for the defense of Ph.D. thesis, speciality 16.00.03 - veterinary microbiology and virology, National Scientific Center “Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine”, Kharkiv, 2006

Results of the study of immunogenicity of inactivated emulsive-vaccines against ovine infectious epididymitis and chlamydial infections, and also their combined application are presented in the thesis.

Experimental samples of inactivated bi-emulsive vaccine against chlamydial and B. ovis infections were developed and tested.

Clinical-and-epizootological, serological and bacteriological investigations indicate, that low reproduction level in examined sheep farms was caused by chlamidial or combined chlamidial and B. ovis infections.

Produced by us 5 series of inactivated emulsive vaccine against ovine infectious epididymitis from the strain Brucella ovis 67/B and 5 series of inactivated bi-emulsive vaccine against B.ovis and chlamydial infections were sterile, innocuous and showed low reactogenicity and immunogenicity. In comparative study with foreign vaccine there was determined, that both vaccines produce expressed immunity against experimental infection of guinea pigs by virulent culture B.ovis in the dose 2Ч10⁹ SFU hypodermic and rams in a dose 10Ч10⁹ SFU on mucous conjuctiva and prepuce.

The combined bvaccination by domestic and foreign inactivated anti-chlamydiosis and anti brucella ovis vaccines produced at guinea-pigs: protective titre of chlamydiosis antibodies > 1:16 at 84 %, brucella ovis antibodies at 96 % animals. Vaccination protected 100 % guinea-pigs from the experimental infection by a virulent culture Brucella ovis in the dose 2Ч10⁹ CFU hypodermic.

The experimental samples of inactivated bi-emulsive vaccines against chlamydiosis and brucella ovis infections on the 30th day after vaccination provided the protective titre of chlamydiosis antibodies > 1:16 at 66,7 - 100 % guinea-pigs, titre of the brucella ovis antibodies 2,83 ± 0,5 log₂ - 5,0 ± 1,12 log₂. Brutselleznie antibodies in RBP were not discovered. Bi-emulsive vaccines protected all vaccinated guinea-pigs against generalized infection after the hypodermic infection by B. ovis culture in the dose 2Ч10⁹ CFU. At 3 from 25 vaccinated guinea-pigs regional infection was determined, index of infection is 2,91 %. In control groups 100 % animals positively reacted in CFT after the infection, infecting culture was isolated from 83,9 % animals with the index of infection 20,7 %.

Vaccination of 20 sheep by the inactivated bi-emulsive vaccines in a dose 1,0 sm³ hypodermic, stimulated the high titers of chlamydiosis and brucella ovis antibodies and protected 100 % animals from the experimental infection by Brucella ovis culture in a dose 10Ч10⁹ CFU on mucous prepuce and conjunctiva. In control groups according to the data of serological research all animals were infected, Brucella ovis culture was isolated at 50 % animals. Re-vaccination of sheep in 9,5 months after the inoculation by inactivated bi-emulsive vaccines stimulated a humoral immunity response against both pathogens. Vaccine protected all animals from the experimental infection by Brucella ovis culture. In a control group according to the data of serological research all animals were infected, culture was isolated in 67 %. Use of inactivated bi-emulsive vaccines against chlamydiosis and brucella ovis infections is recommended for sanitation of trouble sheep farms at the mixed infection.

Kit for the PCR “Polimik”, produced by NVF “Liteh” is good for the indication of chlamydia DNA in isolates from sheep and also for the control of chlamydiosis vaccines on chlamydia DNA

Keywords: chlamydiosis and brucella ovis infections, combined vaccination, inactivated bi-emulsive vaccines against chlamydiosis and brucella ovis infections.

Размещено на Allbest.ru