Морфологические, иммунологические и биохимические показатели крови кроликов при применении пробиотической добавки к корму "Бацелл-М"

Размещено на http://www.allbest.ru/

Морфологические, иммунологические и биохимические показатели крови кроликов при применении пробиотической добавки к корму "Бацелл-М"

Омельченко Н.Н. 

Резюме

бацелл кролик иммунный биохимический

В статье изучено воздействие кормовой пробиотической добавки "Бацелл-М", разработанной кубанскими учеными на клинико-физиологическое состояние, развитие кроликов и влияния препарата на динамику роста, морфологические, иммунологические и биохимические показатели крови кроликов. Применение пробиотической добавки к корму "Бацелл-М" при выращивании кроликов сопровождается увеличением среднесуточных приростов массы тела.

Состав крови не только определяет состояние животного, но и даёт общее представление относительно приспособленности к условиям среды. Картина крови позволяет наблюдать различные изменения, которые происходят в организме животных под влиянием кормления и содержания, что дает возможность оценить их общее физиологическое состояние. В результате проведенных исследований морфологического и иммунологического состава крови, отмечено преимущество опытных групп. Применение пробиотика оказывает закаливающее действие на организм кроликов, которое проявляется повышением физиологических и морфологических показателей. Установлена достоверная разница между кроликами опытных групп и кроликами контрольной группы по фракциям белков крови, макроэлементов.

Полученные данные свидетельствуют о том, что функциональное состояние печени подопытных животных нормализовалось, а увеличение активности показателей ферментов АСТ и АЛТ в контрольной группе указывает на нарушение функций печени. В пробиотической добавке к корму "Бацелл-М" включён вид микроорганизма Enterococcus faecium, что в комплексе с Bacillus subtilis, Lactobacillus paracasei усиливает его действие и тем самым повышает устойчивость кроликов к заболеваниям, активирует защитные системы крови, что способствует профилактике заболеваний, обеспечивает высокие показатели прироста, иммунной защиты и обменных процессов.

Ключевые слова: кролики, пробиотик, кровь, морфологические показатели, эритроциты, лейкоциты, иммунитет, профилактика, защитные системы крови, биохимические показатели, общий белок, макроэлементы, ферменты.

Существует множество причин, из-за которых происходит изменение соотношения нормальной микрофлоры пищеварительного тракта у животных. Эти изменения представляют собой состояние экосистемы, при котором нарушается функционирование всех её составных частей организма животного, его микрофлоры и окружающей среды, а также механизмов их взаимодействия, что ведет к возникновению заболеваний.

При нарушении технологии содержания и кормления кроликов понижается естественная резистентность и устойчивость к неблагоприятным факторам внешней среды. С целью предупреждения данных нарушений в организме в последние годы стали широко использоваться в практике ветеринарной медицины и животноводства пробиотики.

В связи с этим изучение воздействия пробиотических препаратов на физиологическое состояние организма животных имеет как теоретическое, так и практическое значение.

В источниках литературы имеется много сведений, где указано, что использование пробиотиков способствует оптимизации метаболических процессов в организме животных, освещена эффективность, белково-аминокислотный статус, морфологические и биохимические показатели при применении различных биологически активных добавок и пробиотиков [9, 11, 14, 15].

Целью работы являлось изучение влияния пробиотической добавки к корму "Бацелл-М", состоящей из микробной массы живых бактерий: Bacillus subtilis, Lactobacillus paracasei, Enterococcus faecium на динамику роста, морфологические, иммунологические и биохимические показатели крови у кроликов.

Объект исследования. С начала 2015 года были организованы и проведены научно-хозяйственные опыты на кроликоматках и молодняке кроликов до трёх месячного возраста.

Для проведения опытов были подобраны молодые матки-аналоги по возрасту, живой массе и породности (бабочка). Проведен уравнительный период 10 дней. Для опыта были сформированы 3 группы кроликоматок по 4 головы в каждой, со средней живой массой 4,5-4,6 кг. Случки их проведены в сжатые сроки - с 5 по 9 февраля. Взвешивание кроликов проводилось при рождении и по периодам выращивания. В 50-ти дневном возрасте был проведен отъем крольчат от маток и продолжен опыт до 3-х месячного возраста. В 20-дневном, 2-х месячном и в конце опыта - 3-х месячном возрасте проводились индивидуальные перевески кроликов.

Кормление животных осуществлялось по схеме исследований: первая (контрольная) группа кроликов получала хозяйственный (основной) рацион (ОР). Состав ОР: зерно кукурузы, пшеницы, ячменя, жмых подсолнечный, сено люцерновое и макроэлементы.

Второй (опытной) группе скармливали основной рацион (ОР) с той разницей, что в корм вводили добавку кормовую пробиотическую "Бацелл-М", из расчёта 6 г/ кг корма. Добавка кормовая пробиотическая "Бацелл-М" разработана в 2014 году кубанскими учеными и сотрудниками ООО "Биотехагро", г. Тимашевск Краснодарского края.

Третья (опытная) группа получала полноценные комбикорма (ПК), с добавлением добавка кормовой пробиотической "Бацелл-М" (6 г/ кг).

Комбикорма представляют собой приготовленные по специальным рецептам смеси различных кормов в измельчённом виде, а, следовательно, лучшем для усвоения виде. Полнорационные (полноценные) комбикорма обычно гранулируют [13].

ПК были предоставлены заказчиком ООО "Новые комбинированные корма" ст. Тбилисская: гранулированный комбикорм для маток с травяной мукой и ПК с травяной мукой для молодняка с 30-ти до 120-ти дневного возраста. Животные всех опытных групп получали корма вволю. Ежедневно проводился учёт поедаемости и расхода кормов. Были проведены все необходимые ветеринарные обработки животных и мест их содержания.

Материалом исследований стали образцы крови кроликов на выращивании, взятые в 90 дневном возрасте. Кровь для исследования отбирали в серологические и гематологические пробирки, путем прокола краевой ушной вены кроликов инъекционной иглой. В лабораторию кровь доставляли в день её взятия. Количество образцов - по 3 из каждой группы.

При исследовании крови изучали морфологический состав и активность иммунитета (ФГБУ Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт) и биохимический состав (ФГБНУ Северо-Кавказский научно-исследовательский институт животноводства).

Клинико-физиологическое состояние кроликов определяли путем ежедневного их осмотра. Внимание обращали на их поведение, поедаемость корма, состояние шерстного покрова. Живую массу определяли путем индивидуального взвешивания.

Получаемый в опытах цифровой материал обработали по методикам, описанным в литературе [7], с применением персонального компьютера и пакета прикладных программ (Microsoft Excel). Разницу в значениях считали достоверной при: * - р > 0,05; ** р < 0,01 и *** р < 0,001.

Результаты и обсуждения. Основные результаты эксперимента представлены в таблицах 1, 2, 3.

Таблица 1. Показатели выращивания кроликов при использовании пробиотической добавки к корму "Бацелл-М"

Здесь и далее: * - р > 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001

Из таблицы 1 видно, что среднесуточный прирост 2 и 3 опытных

групп больше контрольной (р < 0,01, р < 0,001) на 10 и 30 %, соответственно. Живая масса к 60 дням у подопытных 2 и 3-й групп составляла 2588±0,06 (р < 0,01) и 3060±0,04 грамм (р < 0,001), соответственно, что так же было выше контроля на 10 и 30 %.

Следует отметить, что поедаемость ПК молодняком кроликов с 2,5-месячного возраста была выше по сравнению с ОР других групп животных.

Таким образом, применение пробиотической добавки к корму "Бацелл-М" при выращивании кроликов сопровождается увеличением среднесуточных приростов массы тела.

Морфологические показатели крови. Известно, что кровь совместно с лимфой и тканевой жидкостью образует внутреннюю среду организма, омывающую все клетки и ткани. По составу крови можно судить о многих процессах протекающих в организме. Состав крови не только определяет состояние животного, но и даёт общее представление относительно приспособленности к условиям среды. Картина крови позволяет наблюдать различные изменения, которые происходят в организме животных под влиянием кормления и содержания, что дает возможность оценить их физиологическое состояние [11, 16].

Кровь включает две части жидкой среды - плазму и взвешенные в ней форменные элементы (тромбоциты, эритроциты и лейкоциты). Содержание форменных элементов может резко меняться при патологических состояниях организма [3]. В первый месяц жизни количество эритроцитов в крови значительно ниже нормы, но с увеличением возраста повышается и к 4-х месячному возрасту приходит в соответствие с нормой [5].

Основной частью эритроцитов является гемоглобин, который обеспечивает дыхательную функцию крови, являясь дыхательным ферментом.

Непосредственными исполнителями иммунных реакций являются лейкоциты. Их назначение - распознавать чужеродные вещества и микроорганизмы, осуществлять борьбу с ними, а также фиксировать информацию о них.

Лимфоциты отвечают за формирование специфического иммунитета и осуществляют иммунный надзор в организме, сохраняют генетическое постоянство внутренней среды. В центральных органах иммунной системы осуществляется первичная дифференцировка так называемых нулевых лимфоцитов с превращением их в Т-лимфоциты (в тимусе), В-лимфоциты (в костном мозге млекопитающих и в фаб-рициевой сумке (bursa Fabricius) у птиц). В периферических органах иммунитета Т-лимфоциты приобретают способность осуществлять иммунный ответ клеточного типа, а В-лимфоциты - гуморальный ответ путём выработки антител [6].

Из общего количества лимфоцитов, циркулирующих в крови и лимфе, примерно 75 % приходится на долю Т-лифоцитов, 15% - на долю В-лимфоцитов и 10 % - на клетки, не относящиеся ни к той, ни к другой группе (нуль-клетки, или К-клетки) [3].

Уровень естественной резистентности определяет степень устойчивости животных к заболеваниям и находится в прямой зависимости от возраста, времени года, условий кормления и содержания.

Результаты лабораторного анализа гематологических и иммунологических показателей представлены в таблице 2.

Таблица 2. Результаты лабораторного анализа гематологических и иммунологических показателей

В крови взрослых кроликов варьирование лейкоцитов считается нормальным в пределах 5,5-10 тыс. в 1 мм3, эритроцитов - 4,7-7,5 млн. в 1 мм3, СОЭ 1,5 мм/час, гематокрит 35-45% [1, 2].

Средние показатели лейкоцитов в крови 2 и 3-й подопытных групп находились в пределах физиологической нормы и были выше контроля на 52,3 (р > 0,05) и 43,2%.

Средние показатели эритроцитов и гемоглобина у опытных групп находились в пределах физиологической нормы и были выше контроля на 21,9 (р > 0,05) и 23,1% (р > 0,05) - эритроцитов и на 10,2 и 38,2% (р < 0,001) - гемоглобина соответственно, в то время как показатель гемоглобина у контрольной группы был занижен.

Увеличение количества эритроцитов положительно отражается на развитии иммунного статуса [4].

Оседание эритроцитов (СОЭ) - это свойство эритроцитов осаждаться на дне сосуда при сохранении крови в несвёртывающемся состоянии. СОЭ является неспецифическим показателем состояния крови у животных. Величина СОЭ зависит от многих факторов и в первую очередь от содержания в плазме крови крупномолекулярных белков - глобулинов. У подопытных животных величина СОЭ находилась в пределах физиологической нормы. СОЭ у кроликов контрольной группы оставила 2,33±0,333 мм/час при норме 1-2 мм/час.

Гематокритная величина - объёмное соотношение форменных элементов крови и плазмы, у подопытных кроликов 2-й группы была выше контроля на 5,6%. В третей группе гематокритная величина была выше контроля на 43,5 % (р < 0,001) и соответствовала норме.

Фагоцитарная активность лейкоцитов - это способность фагоцитов захватывать, умерщвлять и переваривать патогенные и условнопатогенные микроорганизмы. Фагоцитарная активность нейтрофилов обычно повышается в начале развития воспалительного процесса. Снижение фагоцитарной активности клеток крови способствует развитию хронического воспалительного процесса и возникновению агрессии против собственных тканей организма (появлению аутоиммунных процессов).

Фагоцитарная активность у кроликов второй и третей подопытных групп была в норме и выше контроля на 7,3 (р < 0,01) и 13,7 % (р > 0,05).

Наиболее информативным для оценки фагоцитарной активности следует считать индекс поглощения, то есть. фагоцитарное число, коэффициент фагоцитарного числа, которые отражают завершенность фагоцитоза (ЗФ) и индекс бактерицидности -- способность фагоцита переваривать захваченный микроб [8].

Завершенность фагоцитоза отмечена у животных всех групп, но более высокие показатели наблюдаются в опытных группах. Исследования показали высокие, на 35% (р > 0,05), показатели коэффициента мобилизации лейкоцитов. Это свидетельствует об увеличении активности микробицидной системы фагоцитов у животных данных групп.

Для характеристики клеточного и гуморального иммунитета проводили количественное определение Т- и В-лимфоцитов.

Показатели клеточного звена иммунитета 2 и 3-й опытных групп кроликов были выше контроля. Абсолютное количество Т-лимфоцитов было выше на 27 и 52 % (р > 0,05). Абсолютное количество В-лим-фоцитов показало повышение на 3 (р > 0,05) и 5 % соответственно групп относительно контроля. При этом процентное содержание Т- и 13-лимфоцитов во всех группах по сравнению с фоновыми показателями достоверно не изменилось.

Таким образом, исходя из общего анализа исследований морфологического и иммунологического состава крови, отмечено преимущество опытных групп. Применение пробиотиков оказывает закаливающее действие на организм кроликов, которое проявляется активацией защитных систем крови и повышением иммунных свойств животных.

В комплекс исследований входило определение биохимических показателей крови кроликов и анализ полученных данных.

В сыворотке крови из всех веществ сухого остатка больше всего содержится белка, который состоит из альбуминов и глобулинов. Белки плазмы выполняют самые разнообразные функции. При интенсивном росте, а так же при заболеваниях животных соотношение белковых фракций меняется. С возрастом животных сыворотка крови обогащается глобулинами и параллельно с этим снижается содержание альбуминов. Изменение белкового спектра может быть спровоцировано переменой кормления животных.

Углеводы играют важную роль в энергетическом балансе организма. Из углеводов основным источником энергии в организме является глюкоза. С возрастом эти показатели приближаются к норме.

Среди минеральных веществ особе значение для кроликов имеют кальций и фосфор. Они составляют 65-70% всех минеральных веществ в организме кролика.

Основное физиологическое значение кальция в организме заключается в том, что он входит в состав минеральной части костей, играет особо важную роль в сокращении мышц, участвует в свёртывании крови, повышает защитные функции организма. Дефицит кальция может стать причиной сбоя в иммунной системе организма.

Фосфор относится к числу наиболее физиологически активных и необходимых элементов для жизнедеятельности организма. Значение фосфора в организме обусловлено тем, что он в большом количестве содержится в костной ткани, где служит вместе с кальцием пластическим материалом костей [5]. Фосфор предотвращает ресорбцию (поглощение) кальция. Нормальное соотношение кальция и фосфора -- 2:1 [1, 5].

Известно, что важное клинико-диагностическое значение при многих инфекционных процессах принадлежит показателям энергетического обмена, таким как аланин- и аспартатаминотрансферазы (АЛТ и АСТ), регулирующих метаболические потоки. Бактериостатические свойства плазмы крови тесно связаны с энзимами [12].

АЛТ и АСТ - это специальные белки (ферменты), которые содержатся внутри клеток организма и участвуют в обмене аминокислот (веществ, из которых состоят белки). Эти ферменты содержатся только в клетках различных органов и попадают в кровь при повреждении или разрушении клеток (болезни, травмы).

Таблица 3. Результаты лабораторного анализа биохимических показателей.

В сыворотке крови кроликов 2 и 3-й подопытных групп содержание общего белка было выше, чем у аналогов в контроле на 3,8 (р < 0,01) и 2,3 % (р < 0,001).

Наличие альбуминов и глобулинов так же было выше на 3,6 и 17,2 % (р < 0,001) во 2-й и на 1,4 и 23,9 % (р > 0,05) в 3-й опытных группах.

У подопытных кроликов содержание Са и P увеличилось на 18 (р > 0,05) и 14 % - во второй группе, на 12 (р < 0,01) и 17 % (р > 0,05) - в третьей группе, соответственно.

Содержание глюкозы во всех группах соответствовало физиологической норме.

При определении активности АСТ в сыворотке крови кроликов опытной группы установлено, что активность фермента достоверно понижается на 22,6 (р < 0,001) и 25 % (р < 0,001) по сравнению с контрольной группой. Для определения соотношения АСТ/ АЛТ вычисляется коэффициент Де Ритиса. Полученные результаты свидетельствуют, что данные энзимы опытной группы в пределах нормы, а в контрольной группе они несколько завышены. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что функциональное состояние печени подопытных животных нормализовалось, а увеличение активности данных показателей в контрольной группе указывает на повреждение клеток печени и, как следствие, нарушение функций органа.

Наличие холестерина и мочевины у кроликов опытных групп находилось в пределах физиологических норм. У кроликов контрольной группы отмечено отличие от нормы уровня холестерина в крови на 10 %.

Выводы

1. Проведённый анализ указывает на отличие морфологических, иммунологических и биохимических показателей крови кроликов в пользу опытных групп.

2. Кролики контрольных групп приобретают более интенсивный рост

3. Отмечено большее содержание эритроцитов, гемоглобина, более высокие показатели фагоцитарной активности, завершённости фагоцитоза и коэффициента мобилизации лейкоцитов.

3. Установлена достоверная разница между кроликами, опытных групп, и кроликами контрольной группы, по фракциям белков крови, макроэлементов.

5. Таким образом, в результате проведенных исследований доказано позитивное влияние пробиотика на морфологические, биохимические и иммунологические показатели кроликов.

6. В добавку кормовую пробиотическую "Бацелл-М" включён вид микроорганизма Enterococcus faecium, что в комплексе с Bacillus subtilis, Lactobacillus paracasei усиливает его действие и тем самым повышает устойчивость кроликов к заболеваниям, активирует защитные системы крови, что способствует профилактике заболеваний, обеспечивая высокие показатели иммунной защиты, обменных процессов и прироста.

Список литературы

Берхоф П.К. Мелкие домашние животные. Болезни и лечение/ Пер. с нем. И. Кравец. Изд. 2, испр. и доп. - М.: ООО "АКВАРИУМ ПРИНТ". - 2004.- С.60.

Георгиевский В.И. Практическое руководство по физиологии сельскохозяйственных животных. Учеб. пособие для с.-х. вузов.- М., "Высш. школа",-1976.- С. 184-185.

Георгиевский В.И. Физиология сельскохозяйственных животных.- М.: Агропромиздат.- 1990. - 511 с.

Громыхина Н.Ю., Козлов В.А. Роль макрофагов во взаимодействии иммунной и эритроидной систем при формировании иммунного статуса. Иммунология.- 1997.-N°1.- С.25-27.

Ефремов А.П., Мартынов П.Н. Интерьерные различия крольчат разного возраста/ Фундаментальные исследования. - 2012.- N°5.- С.138-141.

Иммунология. Под ред. Воронина Е.С. М.: Колос-Пресс, 2002.- 408 с.- С. 34.

Лакин Г.Ф. Биометрия. Учеб. пособие для биол. спец. вузов - 4-е ИЗД., перераб. и доп - М.: Высш. шк.- 1990.- 352 с.

Нагоев Б.С. Справочник по иммунологии. - Нальчик: Эльбрус, 2002 - 192 с. - С.53.

Ноздрин Г.А. Морфологические и биохимические показатели у кроликов при применении пробиотического препарата Велес 6.59/ Ноздрин ГА, Громова А.В. Иванова А.Б. и др.// Достижения науки и техники АПК.- N° 10.- 2012.- С.53-55.

Омельченко Н.Н. Использование пробиотиков в профилактике болезней кроликов/ Омельченко Н.Н., Лысенко А.А., Омельченко Н.А., Остапчук Д.В. // Труды Кубанского государственного аграрного университета.- N° 53.- 2015.- С. 47.

Петрова Н.А. Влияние пробиотиков на показатели крови кроликов/ К.А. Сидорова, К.С. Есенбаева, Н.А. Петрова, А.А. Бекташева// Вестник Тюменской государственной сельскохозяйственной академии. Вып. 1. - Тюмень.- 2007. - С. 162-163.

Румина М.В. Зависимость иммунного ответа у кроликов от активности ферментов плазмы крови/ Румина М.В., Габалов К.П., Ласковый В.Н., Малинин М.Л.// Ветеринарная патология.- N°3.- 2013. - С. 72-77.

Сысоев В.С., Александров В.Н. Кролиководство.-М.: Агропромиздат, 1985. -272 с.

Титова А.В. Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук. Белково-аминокислотный состав крови и продуктивные качества кроликов при скармливании пробиотических препаратов. Орёл.- 2010.- 18 с.

Шакин А.А. Эффективность применения БиоПлюс 2Б в свиноводстве/ Эффективное животноводство.- N° 3.- 2014.- с.34-35.

Miloslav Martinec, Helena Hartlova, Darina Chodova Eva Tumova Alena Fucfkova. Selected haematological and biochemical indicators in different breeds of rabbits. ACTA VET. BRNO 2012, 81: 371-375.

Размещено на Allbest.ru