Антиагрегационный контроль сосудов над основными форменными элементами крови у новорожденных телят

Размещено на http://www.allbest.ru/

Антиагрегационный контроль сосудов над основными форменными элементами крови у новорожденных телят

Необходимость интенсификации производства говядины остро диктует необходимость дальнейших исследований в области физиологии крупного рогатого скота в течение всего онтогенеза. Особое внимание в этой связи привлекает к себе кровь, состоящая из форменных элементов и плазмы, непрерывно перемещающаяся по сосудам животного, обеспечивающая газообмен, доставку тканям питательных и биологически активных веществ, а также удаление из них токсических веществ и шлаков. Успешность гемоциркуляции, существенно определяющая общий физиолого-биологический статус животного, во многом связана с особенностями агрегации форменных элементов крови и выраженностью контроля над нею со стороны сосудистой стенки в течение всего онтогенеза. Замечено, что избыточная агрегация эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов может нарушать метаболические процессы и тормозить развитие животных.

В этой связи становится актуальным определение состояния сосудистого контроля над агрегацией форменных элементов крови у телят в самом начале онтогенеза - в фазу новорожденности. В этом нуждается не только фундаментальная наука, но и практика, так как необходимо выяснение выраженности антиагрегационных нарушений сосудов у новорожденных телят при отдельных заболеваниях, оценка степени их динамики при применении различных подходов к коррекции состояния животных, возможные только при знании нормативных показателей в отношении основных форменных элементов крови.

В работе поставлена цель - установить выраженность антиагрегационных возможностей влияния сосудов на форменные элементы крови у телят в течение фазы новорожденности.

Материалы и методы. Исследование выполнено на 32 телятах черно-пестрой породы, взятых в исследование на 1-2 сутки жизни. Обследование проводилось в течение фазы новорожденности пятикратно - на 1-2, 3-4, 5-6, 7-8 и 9-10 сутки жизни. Выраженность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в плазме оценивалась по содержанию тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором "Агат-Мед" и ацилгидроперекисей (АГП). Антиокислительный потенциал жидкой части крови определялся по её антиокислительной активности (АОА).

Сосудистый контроль над агрегацией форменных элементов крови определяли по её ослаблению в пробе с временной венозной окклюзией. Выраженность агрегации эритроцитов до и после временной ишемии стенки сосуда определяли с помощью светового микроскопа в камере Горяева, регистрируя количество агрегатов эритроцитов, число агрегированных и неагрегированных эритроцитов. У всех телят путем деления суммы всех эритроцитов в агрегатах на величину этой суммы на фоне временной венозной окклюзии рассчитывался индекс контроля сосудов над суммой эритроцитов в агрегате (ИКССЭА), в результате деления количества агрегатов без временной венозной окклюзии на их количество на фоне временной венозной окклюзии определяли индекс контроля сосудов над количеством эритроцитарных агрегатов (ИКСКЭА) и в ходе деления количества свободных эритроцитов на фоне временной венозной окклюзии на количество свободных эритроцитов без нее высчитывалась величина индекса контроля сосудов над количеством свободных эритроцитов (ИКСКСЭ).

Агрегацию тромбоцитов (АТ) оценивали с помощью визуального микрометода оценки АТ [12] до и после венозной окклюзии с применением АДФ (0,5*10-4 М), коллагена (разведение 1:2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед/мл), ристомицина (0,8 мг/мл), адреналина (5,0*10-6 М) и перекиси водорода (7,3*10-3 М) и богатой тромбоцитами плазмы со стандартизированным количеством тромбоцитов - 200*109. Индекс антиагрегационной активности сосудистой стенки (ИААСС) выявляли при делении времени развития АТ после венозной окклюзии на время без нее. Ограничивающее влияние сосудов на процесс агрегации нейтрофилов в плазме, полученной после наложения манжетки и без нее, оценивалась способность этих клеток к агрегации на фотоэлектроколориметре. В качестве индукторов применены лектин зародыша пшеницы в дозе 32 мкг/мл, конканавалин А - 32 мкг/мл и фитогемагглютинин - 32 мкг/мл. У всех телят рассчитывался индекс торможения сосудистой стенкой агрегации нейтрофилов (ИТССАН) путем деления величины агрегации нейтрофилов в плазме, полученной без манжетки на ее величину в плазме, взятой с наложением манжетки. Статистическая обработка полученных результатов велась t-критерием Стьюдента.

Результаты исследований. У телят отмечена невысокая активность ПОЛ плазмы, имеющая тенденцию к снижению в течение срока наблюдения - содержание в ней АГП уменьшилось с 1,53±0,26 Д233/1 мл до 1,42±0,31 Д233/1 мл, ТБК-активных продуктов с 3,62±0,12 мкмоль/л до 3,48±0,24 мкмоль/л. Это сопровождалось тенденцией к росту АОА плазмы с 32,0±0,42% на 1-2 сутки до 33,4±0,28% на 9-10 сутки. В течение фазы новорожденности у телят отмечена тенденция к повышению спонтанной агрегации эритроцитов, о чем судили по наклонности к увеличению суммарного количества эритроцитов в агрегате (на 4,7%), нарастанию количества самих агрегатов (на 2,5%) и понижению числа свободно лежащих красных кровяных телец (на 2,4%).

На фоне временной венозной окклюзии у телят в течение новорожденности суммарное количество эритроцитов в агрегатах за первые 10 суток жизни сократилось на 3,1%, число этих агрегатов уменьшилось на 2,8%, что сопровождалось увеличением числа свободных эритроцитов на 1,7%, обеспечив тенденцию к повышению ИКССЭА, ИКСКЭА и ИКСКСЭ (табл. 1).

Таблица 1. Антиагрегационный контроль сосудистой стенки у новорожденных телят

У всех телят в течение новорожденности отмечена тенденция к усилению агрегации тромбоцитов. В пробе с временной венозной окклюзией их агрегация отмечена тенденция к замедлению АТ. Это указывало у наблюдаемых телят на постепенное усиление у них контроля стенки сосуда над тромбоцитарной агрегацией, что подтверждалось найденной тенденцией к увеличению ИААСС, достигших у телят к 9-10 суткам жизни: для адреналина 1,64±0,008, для АДФ 1,65±0,004, для коллагена 1,62±0,008 , для тромбина 1,53±0,006, для ристомицина 1,52±0,004. Из данных таблицы 1 видно, что при сочетанном применении индукторов индексы антиагрегационной активности сосудистой стенки также имели склонность к увеличению.

В течение новорожденности у телят отмечена тенденция к усилению агрегации нейтрофилов. В пробе с временной венозной окклюзией их агрегация также имела наклонность к усилению в отношении всех испытанных индукторов, что обусловило тенденцию к повышению ИТССАН для лектина на 5,0%, для конканавалина А на 3,3%, для фитогемагглютинина на 3,4%.Таким образом, у новорожденных телят отмечается тенденция к росту способности к агрегации форменных элементов крови и увеличению сдерживающего контроля над нею со стороны сосудистой стенки. Большое значение в обеспечении реологических свойств крови у телят в течение новорожденности принадлежит агрегации форменных элементов крови. Стабильно высокая АОА плазмы обеспечивает невыраженную в ней активность ПОЛ. Выявленная у новорожденных телят низкая интенсивность свободнорадикальных процессов в плазме способствует незначительности перестроек в мембранах эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов, которые в данных условиях сохраняют невысокую агрегабельность при выраженной функциональной активности эндотелиоцитов.

В течение всей новорожденности отмечена тенденция к усилению агрегационной активности эритроцитов, достоверно понижающейся в пробе с временной венозной окклюзией. Очевидно, нормальная агрегация эритроцитов у телят in vivo во многом обеспечена высокой дезагрегирующей способности сосудистой стенки при одновременно оптимальной электроотрицательности поверхности эритроцитов за счет нарастания количества на их мембране отрицательно заряженных протеинов. Эффективный контроль над генерацией активных форм кислорода обеспечивает минимизацию оксидативных повреждений данных белков мембраны и глобулярных протеинов плазмы, способных связывать эритроциты между собой в уже образовавшихся агрегатах. Высокий контроль сосудистой стенки над агрегацией эритроцитов, очевидно, имеет в своей основе повышенную концентрацию в крови новорожденных телят простацик-лина и NO, поддерживающих в красных кровяных тельцах оптимум активности аденилатциклазы и фосфодиэстеразы, обеспечивающих физиологическое соотношение в их цитоплазме количества циклического АМФ и Са2+.

Выраженное торможение АТ и тенденция к повышению чувствительности тромбоцитов, в т. ч. к дезагрегирующим воздействиям со стороны сосудистой стенки у телят в течение первых 10 суток жизни имеет во многом в своей основе оптимальность выработки в эндотелии простациклина и ЫО во многом вследствие невыраженности ПОЛ плазмы. Невысокая АТ в ответ на ристомицин у телят была обусловлена неактивной выработкой в эндотелии сосудов фактора Виллебранда. Стабильная длительность АТ с сочетаниями индукторов и количества агрегатов тромбоцитов в крови телят до и после венозной окклюзии указывала на постоянство нормальных сосудисто-тром-боцитарных взаимодействий у животных в течение первых 10 суток жизни в условиях близких к реальным.

Нормальная агрегация нейтрофилов, полученная у наблюдаемых телят, видимо, связана с высокими антиагрегационными возможностями сосудов, сочетающимися с оптимумом состава гликопро-теиновых рецепторов лейкоцитов и их чувствительности к лектинам, использованным в качестве индукторов. Слабая тенденция к росту лектин- и конканавалин А-индуцированной агрегации нейтрофилов у новорожденных телят обеспечивалась тенденцией к усилению экспрессии рецепторов адгезии и увеличением в их составе участков, содержащих N-ацетил-Э-глюкозамин, N-ацетил-нейраминовую кислоту и маннозу. Тенденция к росту индуцированной фитогемагглю-тинином агрегации обеспечивалось склонностью к нарастанию в их рецепторах участков гликопротеинов, содержащих bD-галактозу при эффективном сдерживании высокой выработкой в сосудах животных простациклина и NO.

У новорожденных телят выявляется тенденция к усилению агрегации форменных элементов крови. Для телят в течение новорожденности характерно усиление дезагрегирующего контроля со стороны сосудистой стенки над агрегационными свойствами эритроцитов, тромбоцитов и нейтрофилов.

Список литературы

сосудистый агрегация кровь теленок

1. Волчегорский И.А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников. - Челябинск, 2000. -167с.

2. Гаврилов В.Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови / В.Б. Гаврилов, М.И. Мишкорудная // Лабораторное дело. -1983.- N 3.- С. 33-36.

3. Завалишина С.Ю. Контроль сосудистой стенки над индуцированной агрегацией тромбоцитов у новорожденных телят в условиях дефицита железа / С.Ю. Завалишина, Т.И. Глаголева // Ветеринарная практика. -2013.- N 2(61).-С. 40-42.

4. Завалишина С.Ю. Антиагрегационные возможности сосудов у новорожденных телят с дефицитом железа на фоне ферроглюкина и гамавита / С.Ю. Завалишина, Т.И. Глаголева, И.Н. Медведев // Теоретические и прикладные проблемы агропромышленного комплекса.- 2013.- С. 3-5.

5. Завалишина С.Ю. Гемостатическая активность сосудов у новорожденных телят с дефицитом железа на фоне применения ферроглюкина и крезаци-на / С.Ю. Завалишина, Т.И. Глаголева, И.Н. Медведев // Ветеринария. -2013. -N 6.- С. 47-49.

6. Кутафина Н.В. Механизмы функционирования сосудистого гемостаза / Н.В. Кутафина // Международный научно-исследовательский журнал. -2012.-N 5-3(5).- С. 64-65.

7. Кутафина Н.В. Механизмы функционирования сосудисто-тромбоцитарного гемостаза / Н.В. Кутафина, С.Ю. Завалишина // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия "Экология и безопасность жизнедеятельности". -2012.- N 1.- С. 30-37.

8. Кутафина Н.В. Агрегация эритроцитов и тромбоцитов у молодняка крупного рогатого скота в первые 10 суток жизни / Н.В. Кутафина, Т.А. Белова // Магистр KZ. -2014.- N 10.- С. 16-18.

9. Кощаев А.Г. Использование биотехнологических методов воспроизводства для повышения экономической эффективности производства говядины / А.Г. Кощаев, И.В. Щукина // Ветеринария Кубани.-2014.-N 5.-С. 17-21.

10. Махаринец Г.Г. Морфологические показатели крови телят, содержавшихся на режимном подсосе/ Г.Г. Махаринец, В.И. Добрелин // Ветеринарная патология. - 2012. - N 3. - С. 73-77.

11. Медведев И.Н. Особенности системы гемостаза коров в течение стельности /И.Н. Медведев, С.Ю. Завалишина // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. -2014.- N 6.- С. 44-47.

12. Медведев И.Н. Методические подходы к оценке агрегации и поверхностных свойств тромбоцитов и эритроцитов / И.Н. Медведев, С.Ю. Завалишина, Е.Г. Краснова, Н.В. Кутафина // Фундаментальные исследования. -2014. -N 10.- С. 117-120.

13. Медведев И.Н. Физиология висцеральных систем (учебник для вузов) / И.Н. Медведев И.Н., С.Ю. Завалишина, Н.В. Кутафина // Успехи современного естествознания. -2014.- N 10.- С. 87-88.

14. Максимов В.И. Сравнительная оценка тромбоцитарных функций в раннем онтогенезе у телят и поросят / В.И. Максимов, И.Н. Медведев // Ветеринария. -2008.- N 11. -С. 50-54.

15. Максимов В.И. Особенности антикоагуляционной и фибринолитичес-кой активности крови у здоровых поросят молочного питания / В.И. Максимов, И.Н. Медведев, А.В. Парахневич // Ветеринария, зоотехния и биотехнология.-2014. -N 1.- С. 12-16.

16. Эффективность применения р-адреноблокатора анаприлина для предотвращения критической потери живой массы новотельных коров /А.Г. Кощаев, А.В. Лихоман, В.В. Усенко, Л.И. Баюров // Ветеринария Кубани.-2014.-N 4. -С. 22-25.

17. Medvedev I.N. Activity of platelet hemostasis in newborn calves / I.N. Medvedev, S.Yu. Zavalishina // Russian Agricultural Sciences.-2011.-vol. 37, N 5.-Р. 404-406.

18. Moncada S. Prostacyclin and blood coagulation / S. Moncada, J.R. Vane // Drugs. - 2001. - Vol. 21, N 6. - P. 430-437.

19. Tschudi M.R. Nitric oxide: the endogenous nitrate in the cardiovascular system /M.R. Tschudi, T.F. Luscher // Herz. - 2005.- Vol. 21. - P. 50-60.

Размещено на Allbest.ru