Эритроцитарные микрореологические свойства и коагуляционные особенности плазмы у свиноматок после отъема

Размещено на http://www.allbest.ru/

Всероссийский НИИ физиологии, биохимии и питания животных

Эритроцитарные микрореологические свойства и коагуляционные особенности плазмы у свиноматок после отъема

Парахневич А.В.

г. Курск

Под наблюдением находились 46 здоровых свиноматок породы крупная белая, обследованных в день отъема г поросят и на 1-е, 3-и, 5-е и 7-е сутки после него. В ходе наблюдения у свиноматок зарегистрирована тенденция к повышению в крови количества эритроцитов-дискоцитов, понижению уровня обратимо измененных эритроцитов при стабильно невысоком уровне необратимо измененных форм. В крови свиноматок после отъема отмечено небольшое понижение уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты и количества самих агрегатов при небольшом понижении свободно перемещающихся эритроцитов. Для свиноматок после отъема характерна тенденция к снижению активности всех факторов свертывания. У наблюдаемых животных отмечена склонность к замедлению активированного парциального тромбопластинового, протромбинового и тромбинового времени. эритроцит гемоциркуляция кровь дискоцит

Процесс гемоциркуляции имеет большое биологическое значение для функциональной активности организма продуктивных животных, в том числе свиней, вследствие обеспечения всех процессов тканевого обмена [12]. Важнейшими компонентами, необходимыми для сохранения оптимума внутренней среды организма свиней в течение их онтогенеза, являются эритроциты [4]. За счет их адекватной агрегационнои активности и состояния поверхностной геометрии [8] при оптимальной коагуляционной способности плазмы обеспечивается беспрепятственное перемещение крови по сосудам в любом возрасте [5]. Становится ясно, что состояние микрореологических свойств эритроцитов и гемокоагуляции у продуктивных животных при различных физиологических состояниях является серьезным физиологическим элементом поддержания у них процесса анаболизма в тканях и обеспечения реализации генетической программы в имеющихся условиях их существования [10, 11].

Вместе с тем, несмотря на большие успехи практической биологии особенности цитоархитектоники и агрегации эритроцитов, а также активность коагуляционного гемостаза у здоровых свиноматок в течение наиболее физиологически важных этапов их онтогенеза остаются изучены недостаточно.

В этой связи была намечена цель: выяснить реологические особенности эритроцитов и коагуляционные свойства плазмы крови у здоровых свиноматок после отъема поросят (далее, отъема).

Материалы и методы. Под наблюдением находились 46 здоровых свиноматок породы крупная белая. У всех животных оценивалась активность перекисного окисления липидов (ПОЛ) плазмы по количеству в ней ацилгидроперекисей (АГП), тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором "Агат-Мед". Также регистрировалась антиокислительная активность (АОА) жидкой части крови общепринятым методом [2].

После отмытия и ресуспендирования в эритроцитах определяли выраженность ПОЛ по количеству в них АГП и по уровню малонового диальдегида (МДА) в реакции восстановления тиобарбитуро-вой кислоты. С помощью набора "Витал Диагностикум" в эритроцитах количественно было определено содержание холестерина (ХС). а по уровню в их мембранах фосфора был оценен уровень общих фосфолипидов (ОФЛ) с вычислением на основе полученных данных соотношения ХС/ОФЛ. Функциональная активность внутриэритро-цитарных ферментов антиокисления определялась для каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) общепринятым методом [2]. У свиноматок оценивалась цитоархитектоника эритроцитов с применением световой фазовоконтрастной микроскопии. Регистрируемые эритроциты типировались на дискоциты, обратимо измененные и необратимо измененные формы [6]. С учетом соотношения обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов рассчитывали ряд индексов [6]:

Индекс трансформации (ИТ): ИТ = (ОД + НД) / Д, где Д - процент дискоцитов; ОД - процент обратимо деформированных эритроцитов; НД - процент необратимо деформированных эритроцитов.

Индекс обратимой трансформации (ИОТ) рассчитывали: ИОТ = ОД / Д,

Индекс необратимой трансформации (ИНОТ): ИНОТ = НД / Д.

Индекс обратимости (ИО): ИО = ОД / НД.

Выраженность агрегационной активности эритроцитов регистрировали с помощью светового микроскопа путем подсчета в камере Горяева агрегированных и неагрегированных эритроцитов и количества самих агрегатов во взвеси отмытых эритроцитов в плазме крови с вычислением среднего размера агрегата (СРА): СРА = СЭА/КА, где СЭА - сумма всех эритроцитов в агрегате; КА - количество агрегатов. Также рассчитывался показатель агрегации (ПА): ПА = (СРА * КА + КСЭ) / (КА + КСЭ), где КСЭ - количество свободных эритроцитов. Вычислялся процент неагрегированных эритроцитов (ПНА) = (КСЭ * 100) / (СРА * КА + КСЭ) [6].

У каждой свиноматки при каждом обследовании оценивалась активность ряда факторов свертывания (I, II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII), длительность активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ), протромбинового и тромбинового времени [1].

Для статистической обработки полученных результатов применен t-критерий Стьюдента.

Результаты исследования. После отъема поросят у свиноматок регистрируется небольшая тенденция к усилению АОА плазмы (с 45,5±0,22% в день отъема до 46,0±0,12% на 7 сутки после него), способствующая тенденции к ослаблению активности в ней ПОЛ. Так, количественное содержание в жидкой части крови первичных продуктов ПОЛ-АГП составляло в день отъема 1,19±0,012 Д233/1 мл, на 7 сутки после него -1,15±0,014 Д233/1 мл, тогда как вторичных продуктов пероксидации плазменных липидов - ТБК-активных соединений содержалось в ней в эти сроки 2,48±0,011 мкмоль/л и 2,44±0,015 мкмоль/л, соответственно.

У наблюдаемых свиноматок после отъема в мембранах эритроцитов отмечена тенденция к повышению количества ХС при незначительном понижении ОФЛ, что обеспечило нарастание градиента ХС/ОФЛ с 1,68±0,011 до 1,73±0,014.

Количество АГП в эритроцитах здоровых свиноматок в день отъема составляло 2,35±0,012 Д233/1012 эр., а на 7 сутки после него 2,30±0,011 Д233/1012эр. При этом, уровень МДА в эритроцитах - конечного продукта ПОЛ также испытывал легкую тенденцию к понижению с 0,78±0,009 нмоль/1012 эр. до 0,76±0,019 нмоль/1012 эр. Выявленная динамика активности ПОЛ в эритроцитах здоровых свиноматок после отъема обеспечивалась тенденцией к усилению их антиоксидантной системы, оцененной по функциональным возможностям каталазы и СОД, составивших в день отъема 14440,2±24,1 МЕ/1012 эр. и 1960,3±10,24 МЕ/1012 эр., а на 7 сутки после него 14600,0±17,6 МЕ/1012 эр. и 2042,1±8,99 МЕ/1012 эр., соответственно.

У свиноматок после отъема зарегистрировано оптимальное количество дискоцитов в крови с тенденцией их к повышению до 80,5±0,12%, обеспечив к 7 суткам после него невысокий уровень ИТ - 0,24±0,009 (табл.1). При этом, у животных после отъема отмечено легкое понижение содержания в крови обратимо измененных эритроцитов до 13,6±0,09% при неизменности количества необратимо трансформированных форм. Выявленная динамика цитоархитектоники эритроцитов обеспечила у наблюдаемых свиноматок стабильность у них ИОТ, ИНОТ при тенденции к снижению ИО до 2,19±0,014.

У свиноматок после отъема отмечено некоторое ослабление агрегационной способности эритроцитов (табл.1) с тенденцией к снижению уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты (на 3,0%), понижением количества этих агрегатов в кровотоке (на 8,5%), уменьшением на 3,4% содержания в крови свободно перемещающихся эритроцитов. Это сопровождалось тенденцией к укрупнению агрегатов в их крови - СРА (до 4,1±0,10 клеток) при стабильности ПА и легком повышении ПНА (до 83,9±0,20%).

У свиноматок после отъема поросят выявлена тенденция к понижению активности всех факторов коагуляции (табл. 2). Зарегистрированная у животных длительность коагуляционных тестов явилась отражением выявленной у них активности отдельных факторов свертывания (табл.2). Так, продолжительность АПТВ постепенно замедлялась до 29,1±0,06 с. При этом, протромбиновое время испытывало легкую тенденцию к удлинению, достигнув на 7 сутки после отъема продолжительности 13,1±0,09 с. Тромбиновое время, отражающее интенсивность перехода фибриногена в фибрин, у свиноматок также несколько увеличивалось, достигая на 7-е после отъема 13,4±0,11с.

Обсуждение результатов. Онтогенез неизбежно знаменуется рядом гематологических изменений, оказывающих влияние на реологические свойства клеток крови [2,3] и их взаимодействие [4]. Существующая у свиноматок к моменту технологического прерывания лактации высокая активность ферментов антиокисления красных кровяных телец после него дополнительно повышается, способствуя стабилизации на невысоком уровне процессов ПОЛ. Это в сочетании с оптимальным содержанием в их мембранах ХС обеспечивает хорошие микрореологические свойства эритроцитов. Несомненно, это является физиологической основой поддержания в кровотоке у свиноматок после отъема низкого уровня обратимо и необратимо измененных разновидностей эритроцитов при стойком превалировании в крови их неизмененных форм. Это обеспечивает наилучшие реологические свойства крови, достаточную перфузию внутренних органов и в этой связи оптимальность анаболизма в тканях животного.

Найденную в ходе исследования тенденцию к ослаблению агрегации эритроцитов у свиноматок после отъема следует связывать с физиологическими колебаниями заряда эритроцитов, вследствие демаскировки отрицательно заряженных протеинов [9], наступающей на фоне гормональных перестроек. Это неизбежно понижает силу сцепления данных белков эритроцитарной мембраны с глобулярными протеинами плазмы, выполняющими роль "мостиков" между красными кровяными тельцами в агрегатах [7].

Оптимальные микрореологические свойства эритроцитов у свиноматок после отъема во многом обеспечивают необходимые для данного этапа онтогенеза жидкостные свойства крови и, тем самым, достаточную перфузию внутренних органов. Это позволяет поддерживать у них необходимый для организма уровень обмена в клетках, способствуя дальнейшему росту и развитию животного. Несомненно, что выявленные особенности цитоархитектоники и агрегации эритроцитов свиноматок после отъема в значительной мере обеспечивают переход организма к готовности к новой су-поросности.

Регистрируемая у свиноматок после отъема тенденция к понижению активности ряда факторов свертывания приводит к замедлению АПТВ, отражающего активность внутреннего пути коагуляции и протромбинового времени, выявляющего активность его внешнего пути. Понижение в их крови активности I и II факторов свертывания обеспечивало увеличение тромбинового времени, что, видимо, является физиологическим механизмом контроля гемостатического гомеостаза организма свиноматки на данном этапе развития [5].

Таблица 1 - Микрореологические свойства эритроцитов у свиноматок после отъема

Примечание: достоверность динамики показателей не получена.

Таблица 2 - Коагуляционная активность у свиноматок после отъема

Примечание: достоверность динамики показателей не получена.

Список литературы

1. Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. "Ньюдиамед-АО", Москва, 1999.-218с.

2. Белова Т.А., Медведев И.Н. Онтогенетическая динамика микрореоло- 20 гических свойств эритроцитов и тромбоцитов у телят различного физиологического статуса. Монография. М-во образования и науки РФ, Курский ин-т социального образования (филиал) РГСУ. Курск, 2011.

3. Краснова Е.Г, Медведев И.Н. Тромбоцитарная активность гемостаза у поросят молочного питания // Ветеринарная практика. - 2011.- N°3.- С.34.

4. Кутафина Н.В., Медведев И.Н. Вопросы эритроцитарно-тромбоцитар-ных взаимодействий // Материалы Международной научно-практической конференции "Наука и образование: инновации, интеграция и развитие". - Уфа, 2014.- С.72-75.

5. Максимов В.И., Медведев И.Н., Парахневич А.В. Особенности антико-агуляционной и фибринолитической активности крови у здоровых поросят молочного питания // Ветеринария, зоотехния и биотехнология.-2014.-N°1.-С.12-16.

6. Медведев И.Н., Завалишина С.Ю., Краснова Е.Г. Методические подходы к исследованию реологических свойств крови при различных состояниях. // Российский кардиологический журнал.-2009.-N°5.- С.42-45.

7. Медведев И.Н., Краснова Е.Г., Завалишина С.Ю., Беспарточный Б.Д., Фадеева Т.С. Способ нормализации спонтанной агрегации эритроцитов у новорожденных поросят с анемией. Патент на изобретение RUS 2403029, приоритет 15.10.2009.

8. Медведев И.Н., Парахневич А.В. Агрегация и цитоархитектоника эритроцитов у новорожденных поросят с железодефицитной анемией // Зоотехния.-2012.- N°3.- С.27-29.

9. Медведев И.Н., Парахневич А.В., Завалишина С.Ю., Максимов В.И. Способ нормализации спонтанной агрегации эритроцитов у новорожденных поросят с железодефицитной анемией. Патент на изобретение 2472501, приоритет 02.04.2012.

10. Медведев И.Н., Парахневич А.В., Максимов В.И. Реологические свойства эритроцитов и коагуляционные особенности крови здоровых поросят молочного питания // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук.-2013.-N°3.-С.51-54.

11. Парахневич А.В., Медведев И.Н., Максимов В.И. Микрореологичес-кие характеристики эритроцитов у поросят в течение фазы молочного питания // Актуальные вопросы ветеринарной биологии.-2012.-N°4(16). -С.3-7.

Парахневич А.В., Медведев И.Н., Максимов В.И. Особенности цитоархитектоники эритроцитов у новорожденных поросят породы крупная белая // Актуальные вопросы ветеринарной биологии.-2013.-N°3(19).- С.8-11.

Резюме. Для здоровых свиноматок после отъема поросят характерен оптимальный липидный состав эритроцитов, невысокая активность в них перекисного окисления липидов при легком понижении агрегации эритроцитов, невыраженном увеличении в крови содержания их дискоцитов при понижении числа обратимо и необратимо измененных их форм. Оптимальность микрореологических свойств эритроцитов сопровождалась у наблюдаемых свиноматок тенденцией к ослаблению свертывания крови. Выявленные особенности эритроцитов и коагуляции во многом являются элементами обеспечения адаптации свиноматок к прекращению лактации и подготовке их организма к новому осеменению. Процесс гемоциркуляции имеет большое биологическое значение для функциональной активности организма продуктивных животных, в т.ч. свиней, вследствие обеспечения всех процессов тканевого обмена. Важнейшими компонентами, необходимыми для сохранения оптимума внутренней среды организма свиней в течение их онтогенеза, являются эритроциты. За счет их адекватной агрегационной активности и состояния поверхностной геометрии при оптимальной коагуляционной способности плазмы обеспечивается беспрепятственное перемещение крови по сосудам в любом возрасте. Становится ясно, что состояние микрореологических свойств эритроцитов и гемокоагуляции у продуктивных животных при различных физиологических состояниях является серьезным физиологическим элементом поддержания у них процесса анаболизма в тканях и обеспечения реализации генетической программы в имеющихся условиях их существования.

Ключевые слова: эритроциты, агрегация, цитоархитектоника, свертывание крови, гемоциркуляция, свиноматки, отъем, тромбопластин, протромбин, тромбин.

Размещено на Allbest.ru