Видовой состав микромицетов, выделенный из саженцев винограда пораженных сосудистым некрозом

Размещено на http://www.allbest.ru/

Государственное научное учреждение Анапская зональная опытная станция виноградарства и виноделия СКЗНИИСиВ

Российской академии сельскохозяйственных наук

Видовой состав микромицетов, выделенный из саженцев винограда пораженных сосудистым некрозом

Лукьянова Анна Александровна

науч. сотрудник

г. Анапа

Аннотация

В статье представлены результаты исследований по видовому составу микромицетов, выделенному из саженцев винограда пораженных сосудистым некрозом

Ключевые слова: сосудистый некроз, Микромицеты, саженцы винограда

The article presents the results of studies on the species composition of fungi isolated from seedlings of grapes affected by vascular necrosis

Keywords: vascular necrosis, fungi, vines (seedlings of grapes)

Качество посадочного материала винограда имеет важное значение для формирования высокопродуктивных жизнеспособных, долговечных насаждений. Некачественный посадочный материал, используемый для закладки виноградников, приводит в дальнейшем к большой изреженности насаждений, неравномерному развитию кустов, слабой устойчивости их к неблагоприятным условиям среды, снижению урожайности и преждевременной гибели. Возраст виноградных насаждений заложенных саженцами низкого качества не превышает 15, максимум 20 лет. К сожалению, отсутствующий системный контроль за фитосанитарным состоянием саженцев винограда, часто приводит к закладке инфицированным посадочным материалом, в результате на виноградниках заложенных такими саженцами снижается продуктивность и продолжительность жизни насаждений. По данным А.И. Талаш [15] в Краснодарском крае ежегодно гибнет от 2 до 20 и более гектаров новых посадок. В подавляющем большинстве случаев гибель происходит по причинам поражения проводящей системы саженцев, вызванных болезнями различной природы. По мнению многих исследователей А.И. Мисливского, А.М. Аджиева и его соавторов на продуктивность и продолжительность жизни виноградных насаждений оказывает сосудистый некроз древесины саженцев винограда [1, 10].

Сосудистый некроз древесины саженцев винограда распространен повсеместно. Растения, рано заболевшие некрозом, заметно отстают в своем развитии, дают слабый прирост, развивают слабую корневую систему и при выкопке из виноградных школок выбраковываются [6]. По данным П.Н. Костюк [4, 5] поражения, вызываемые сосудистым некрозом, снижают выход привитых саженцев винограда до 50 и более процентов. Такие саженцы являются одной из причин недобора урожая и сокращения сроков эксплуатации плодоносящих виноградных насаждений. Как указывает А.И. Мисливский [10], при сильном поражении саженцев некрозом, от 60 до 100%, снижается продолжительность жизни насаждений и уже на второй год изреженность кустов достигала 40 - 80 %.

Мнения ученых на причину возникновения некроза неоднозначны. Авторы П.И. Нагорный (1930), П.Н. Костюк (1949), Г.П. Малых и его соавторы (2009, 2010), К. Thuemen (1898) считают, что причиной болезни являются микромицеты, а С.А. Мельник (1940), К.И. Купорицкая (1954), И.В. Михайлов (1958), И.М. Козарь (1990) объясняют ее, функциональными нарушениями [2, 3, 6, 7, 8, 9, 11, 12, 20]. Исследователи L. Rives (1924), П.Н. Костюк (1959) в равной степени признают как функциональные нарушения, так и инфекционный характер сосудистого некроза [5, 17].

В связи с этим целью наших исследований стало изучение видовой роли микромицетов в этиологии сосудистого некроза саженцев винограда.

В 2006 - 2008 гг. на базе Государственного научного учреждения Анапская зональная опытная станция виноградарства и виноделия СКЗНИИСиВ Россельхозакадемии нами проводился микологический анализ однолетних корнесобственных и привитых саженцев винограда. Исследования проводились на столовых (Августин, Молдова) и технических (Каберне-Совиньон, Пино блан) сортах. Микологическому анализу подверглись ткани саженцев 840 образцов:

- с чёткими признаками некроза;

- ткань, расположенная в зоне здоровой и поражённой некрозом;

- здоровая ткань, следующая непосредственно за поражённой некрозом (рисунок 1).

Рисунок 1 - Микологический анализ тканей саженцев с различной степенью поражения сосудов некрозом

При проведении микологической экспертизы анализируемые образцы дезинфицировались, у них удалялась кора, они разрезались на сегменты размером 0,5-0,7 см. Анализ проводился с использованием агаризованных питательных сред - голодного алкогольного (ГАА), картофельно-морковного (КМА) и картофельно-глюкозного (КГА) агаров. Образцы экспонировались в термостате при температуре 24-25єС в течение 7-10 дней до момента формирования типичного габитуса микромицетов. Видовая принадлежность выделенных грибов устанавливалась по определителям: Н.М. Пидопличко [13], И.С. Попушой, Л.А. Маржина [14]. Идентификацию видов рода Fusarium проводили по таксономической системе немецких ученых W. Gerlach, H. Nirenberg [16], Alternaria - по E.G. Simmons [18, 19].

Корнесобственные саженцы при проведении микологической экспертизы ранжировались по оригинальной трехбалльной шкале:

0 баллов - здоровый саженец.

І балл - слабопоражённый саженец. Некроз сосудов отмечается в виде слабого темнения ткани в зоне пятки. Поражение не распространяется выше следующего междоузлия. Однолетний прирост хорошо вызревший.

ІІ балл - среднепораженный саженец. Некроз сосудов характеризуется более темной окраской, признаки проявления болезни отмечаются не только в зоне пятки, но распространяются на следующее междоузлие. Однолетний прирост вызревший.

ІІІ балл - сильнопораженный саженец. Некроз сосудов характеризуется интенсивной темной окраской, поражение распространяется от пятки вверх более чем на два междоузлия. Саженцы имеют менее развитую корневую систему и слабый плохо вызревший однолетний прирост (рисунок 2).

Рисунок 2 - Степень поражения некрозом сосудов корнесобственных саженцев винограда: а - слабо-, б - средне-, в - сильнопораженные

В результате исследований из тканей сосудов корнесобственных саженцев винограда пораженных некрозом изолированы и идентифицированы микромицеты следующих видов и родов: Sphaeropsis malorum Berk., Phoma vitis Bonord., Fusarium oxysporum Schlecht., Fusarium spp. (2 вида), Botrytis cinerea Pers. (телеоморфа Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel), Alternaria alternata (Fr.) Keissl., A. tenuissima (Fr.) Wiltshire., Alternaria sp., Cladosporium herbarum (Pers.) Link. (телеоморфа Mycosphaerella tassiana (deN) Joh.), C. macrocarpus Preuss., Trichotecium roseum Fr., Penicillium spp. (3 вида), Aspergillus niger van Tieghem. Микромицеты S. malorum, Ph. vitis, B. cinerea, T. roseum и виды родов Fusarium, Alternaria, Cladosporium представляют патогенную группу, а представители родов Penicillium и гриб A. niger - сапротрофную. Частота встречаемости отдельных представителей зависела от степени поражения некрозом корнесобственных саженцев. У слабопораженных оказался самый ограниченный видовой состав - он представлен видами S. malorum, Ph. vitis,и представителями родов Fusarium, Alternaria.

В общем комплексе выделенных грибов вид S. malorum (рисунок 3, 4а) доминировал у всех исследуемых сортов. Патоген изолировался из тканей, расположенных на границе пораженной и здоровой, средняя частота его встречаемости составляла 60,5 %, несколько реже - с чёткими признаками поражения (57,3 %) и совсем не выделялся из здоровой ткани. Частота выделения гриба Ph. vitis (рисунок 4б) при слабой степени поражения в среднем составляла от 19,5 у пораженной ткани и до 24,3 процентов - на границе здоровой и пораженной ткани. В меньшей степени у слабопораженных саженцев изолировались виды фузариозной и альтернариозной инфекции.

Рисунок 3 - Частота встречаемости микромицетов, выделенных из слабопораженных саженцев, 2006-2008 гг.

Рисунок 4 - Микроструктуры грибов Sphaeropsis malorum (а) и Phoma vitis (б): 1 - пикниды, 2 - мицелий, 3- пикноспоры (ориг.)

По степени нарастания поражения прослежена сукцессия в сторону увеличения частоты встречаемости представителей родов Fusarium, Alternaria. В тканях с чёткими признаками поражения некрозом средняя частота изоляции фузариозной инфекции у среднепораженных саженцев достигала 76,3 %, а гриба S. malorum снизилась в девять раз. Представители рода Alternaria и гриб B. cinerea изолировались из тканей с различными признаками поражения. В комплексе микромицетов у среднепораженных некрозом саженцев из тканей с различными признаками поражения выделялись представители рода Cladosporium (рисунк 5).

Комплекс микромицетов, изолированный из сильнопоражённых некрозом корнесобственных саженцев, составили представители родов Fusarium, Alternaria, Cladosporium, Penicillium и виды B. cinerea, T.roseum, A. niger. Доминирующими оказались виды родов Fusarium, Alternaria и вид B. cinerea (рисунок 6). В зависимости от устойчивости сорта частота изолирования фузариозной инфекции резко колебалась, от 5,0 (из ткани без признаков поражения у сортов Молдова, Августин и Каберне-Совиньон) до 64,0% (из ткани с чёткими признаками поражения сорта Пино блан).

Рисунок 5 - Частота встречаемости микромицетов, выделенных из среднепораженных саженцев, 2006-2008 гг.

Рисунок 6 - Частота встречаемости микромицетов, выделенных из сильнопораженных саженцев, 2006-2008 гг.

Средняя частота встречаемости представителей рода Fusarium из ткани без признаков поражения составляла 6,3%, а из ткани с чёткими признаками поражения достигала 45,5%, представителей рода Alternaria - 8,5 и 35,8% соответственно. Вовсе не изолировался микромицет B. cinerea у сорта Молдова из тканей без признаков поражения. У остальных сортов гриб успешно выделялся из тканей как внешне здоровых, так с различными признаками поражения. У саженцев с интенсивным проявлением некроза на границе здоровой и с признаками некроза, а также пораженной тканей, выделены виды: T. roseum, A. niger и виды рода Penicillium. Не изолировался микромицет S. malorum у сильнопораженных саженцев.