Проведение фитопатологического и энтомологического анализа семян

Размещено на http://www.allbest.ru/

Лабораторная работа

По предмету: "Лесосеменное дело"

На тему: "Проведение фитопатологического и энтомологического анализа семян"

1. Основные понятия по теме

Лесосеменное сырье, заготавливаемое лесхозами, может быть заражено фитопатогенами. При этом качество семян может снижаться в процессе их формирования или во время сбора и хранения в результате вредного воздействия факторов внешней среды, в том числе и биотических (преимущественно грибов). Поэтому при непринятии мер по обеззараживанию семян они могут значительно снизить свои показатели всхожести при хранении, а затем дать плохие результаты при посеве в питомнике. Своевременное определение видов фитопатогенов и мер по обеззараживанию семенного сырья позволяет предотвратить эти неблагоприятные явления.

Данный анализ проводится в соответствии с ГОСТ 13056.5-76 «Семена деревьев и кустарников. Методы фитопатологического анализа». Данным стандартом устанавливается три метода фитопатологического анализа: биологический, макроскопический и центрифугирования.

При проведении энтомологической экспертизы наружные повреждения семян вредителями определяют внешним осмотром (одновременно с разбором навески на чистоту), внутреннюю зараженность - путем разрезания семян.

2. Лабораторная работа

Цель: изучение методов фитопатологического анализа семян, освоение приемов проведения анализа по определению энтомологической зараженности.

Материалы и оборудование: семена основных лесообразующих пород, разборная доска, лабораторные весы, совочки, препарировальные иглы, предметные и покровные стекла, фильтровальная бумага, чашки Петри, микроскопы, семена с грибницей.

Ход работы:

Методы фитопатологической экспертизы.

1. Биологический метод. Данный метод предназначен для установления внешней и внутренней зараженности семян.

Внутреннюю зараженность определяют только у семян всех видов дуба, каштана, лещины, ореха, сосны кедровой сибирской. Для других семян определяют внешнюю зараженность.

Чтобы установить внешнюю зараженность, из разных мест среднего образца отбирают не менее 500 семян. Из них на анализ выделяют по 100 семян для ясеня, клена, бука, ильмовых и по 200 семян для остальных видов.

Для определения внутренней зараженности из разных мест среднего образца отбирают не менее 200 семян. Из них выделяют 100. Для анализа семян всех видов дуба, каштана, лещины, ореха и фисташки используют загнившие семена, выделенные при установлении жизнеспособности или доброкачественности.

Внешнюю зараженность определяют путем раскладки семян на питательные среды, предварительно простерилизованные в автоклаве паром. Стерилизации подвергают также чашки Петри, фильтровальную бумагу, бюксы, воду. Питательные среды разливают в чашки Петри толщиной 3-4 мм и после застывания раскладывают семена. Количество зависит от размера семян: 50 мелких (сосна, ель и др.), 25 крупных (пихта, яблоня, груша), 5-10 семян клена, ореха и близких им по размерам.

Чашки Петри с разложенными семенами помещают в термостат на 5-6 суток при температуре 25-28 ^оС. Просмотр семян проводят на шестые или седьмые сутки.

При просмотре каждой чашки производят учет зараженности семян отдельно каждым паразитным и сапрофитным грибом. Учету подлежат все колонии грибов, образовавшиеся на семенах и вокруг них. Колонии паразитных грибов учитывают отдельно по каждому роду гриба в процентах от количества разложенных семян, вычисления ведут до целого числа.

Колонии сапрофитных грибов учитывают в процессе просмотра семян и оценивают их зараженность каждым грибом по степени встречаемости: единичная - до 5% зараженных семян; слабая - до 25% зараженных семян; средняя - до 50% зараженных семян; сильная - более 50% зараженных семян.

Внутреннюю зараженность семян устанавливают во влажной камере, которую готовят следующим образом: в чашки Петри укладывают фильтровальную бумагу и увлажняют свежекипяченой водой до полной влагоемкости так, чтобы при наклоне с кружков стекали мелкие капли воды.

Во влажную камеру раскладывают семена, у которых определяют внутреннюю зараженность, а также семена всех видов ильмовых, клена и ясеня. Перед раскладкой семена освобождают от кожуры и обеззараживают поверхность путем: а) быстрого проведения через пламя спиртовки с помощью пинцета; б) опускания в спирт на 1 мин; в) стерилизации 0,5%-ным раствором марганцевокислого калия в течение 1 ч с последующим промыванием свежекипяченой водой.

Обеззараженные семена раскладывают во влажную камеру и помещают в термостат. Дальнейший анализ такой же, как и при определении внешней зараженности.

2. Макроскопический метод. Применяется для определения внешних изменений, вызванных развивающимися грибами в семенах всех видов березы, ольхи, дуба, тополя, ели и караганы древовидной.

Навеску семян осматривают невооруженным глазом или с помощью лупы и выделяют деформированные семена, а также семена со склероциями и явно выраженным спороношением.

Зараженность семян всех видов березы, ольхи, караганы древовидной, дуба и тополя учитывают в процентах от массы навески по ГОСТ 13056.2-89. Зараженность семян всех видов ели определяют только по тому, обнаружена ржавчина или нет.

3. Метод центрифугирования. Используют для ускоренного или предварительного фитопатологического анализа семян (определенный род грибов).

Для анализа из разных мест среднего образца берут 2 пробы по 100 семян. Их помещают в стерильные колбы, заливают 10-20 мл воды комнатной температуры и взбалтывают.

Затем суспензию от каждой пробы сливают в стерильные пробирки центрифуги и подвергают центрифугированию в течение 3 мин. По окончании центрифугирования воду сливают, оставляя слой 1,5-2,0 см, осадок взмучивают и из него готовят пять препаратов. Препараты просматривают под микроскопом по всей площади покровного стекла и устанавливают наличие спор и род грибов.

Необходимо сравнить различные методы фитопатологического анализа между собой. Установить виды грибов, поражающих семена, и степень заражения. Дать рекомендации по обеззараживанию семян.

4. Методы энтомологической экспертизы. Определение наружных повреждений семян. Данный анализ проводят одновременно с установлением чистоты. Семена, имеющие наружные повреждения, подсчитывают и вычисляют их процентное содержание в навеске. Живых вредителей подсчитывают и вычисляют их количество на 1 кг семян (мертвых вредителей относят к примеси и в данном анализе не учитывают). При помощи лупы по характеру повреждений, остаткам насекомых внутри семян или живым вредителям устанавливают вид вредителя.

Для определения зараженности клещами и вредителями образец семян подогревают в течение 20-30 мин при температуре 25-28 ^оС. Затем семена просеивают в течение 3 мин через два сита с отверстиями диаметром 1,5 и 2,5 мм. Для мелких семян применяют сита с отверстиями диаметром 1 мм. Отсев высыпают на стекло с подложенной черной бумагой и с помощью лупы выявляют наличие клещей. На ситах диаметром 1 и 1,5 мм устанавливают наличие долгоносиков, точильщиков, мукоедов, хрущаков и их личинок. На ситах диаметром 2,5 мм определяют наличие огневок, молей, большого хрущака и других насекомых.

Определение внутренней зараженности семян. Внутреннюю зараженность семян вредителями устанавливают одновременно с определением жизнеспособности по ГОСТ 13056.7-93 и доброкачественности по ГОСТ 13056.8-97. При просмотре зараженных семян устанавливают вид вредителя, подсчитывают количество зараженных семян и определяют их процентное содержание. Внутреннюю зараженность семян, всхожесть которых определяют методом проращивания, устанавливают путем погружения их в жидкости (для хвойных пород - бензин или спирт).

Для определения скрытой зараженности отсчитывают 400 семян, насыпают их в стакан, заливают жидкостью и перемешивают. Все всплывшие семена вынимают на фильтровальную бумагу и разрезают. По обнаруженным вредителям и характеру повреждений семян устанавливают вид вредителя и фазу его развития.

Студенту необходимо установить чистоту выданного образца семян. Результаты экспертизы и рекомендуемые мероприятия по обеззараживанию семян заносят в карточку энтомологической экспертизы и в документ о качестве.

фитопатологический зараженность экспертиза центрифугирование

Вопросы для самоконтроля

1. Какие методы фитопатологической экспертизы применяются при анализе семян?

2. Какие методы энтомологической экспертизы применяются при анализе?

Литература

1. ГОСТ 13056.2-89. Семена деревьев и кустарников. Методы определения чистоты.

2 ГОСТ 13056.3-86. Семена деревьев и кустарников. Методы определения влажности.

3 ГОСТ 13056.6-97. Семена деревьев и кустарников. Методы определения всхожести.

4 ГОСТ 13056.7-93. Семена деревьев и кустарников. Методы определения жизнеспособности.

5 ГОСТ 13056.8-97. Семена деревьев и кустарников. Методы определения доброкачественности.

6 ГОСТ 14161-86. Семена хвойных древесных пород. Посевные качества.

7 Правила отбора образцов и методы определения посевных качеств семян. ГОСТ 13056.1-67, ГОСТ 13056.4-67, ГОСТ 13056.5-76, ГОСТ 13056.9-68 - ГОСТ 13056.11-68.

8 Справочник по лесосеменному делу / Под общ. ред. канд. с.-х. н. А. И. Новосельцевой. - М.: Лесная промышленность, 1978. - 336 с.

9 Сироткин, Ю. Д. Лесные культуры: учеб. пособие для вузов / Ю. Д. Сироткин, А. Н. Праходский. - Мн. : Выш. шк., 1988. - 239 с.

10 Родин, А. Р. Лесные культуры: учебник. - 3-е изд., испр. и доп. / А. Р. Родин. - М. : ГОУ ВПО МГУЛ, 2006. - 318 с.

11 Набатов, Н. М. Лесные культуры и механизация лесохозяйственных работ: учеб. пособие / Н. М. Набатов, В. В. Ильяков. - М. : ГОУ ВПО МГУЛ, 2005. - 205 с.

12 Редько, Г. И. Лесные культуры: учебник для вузов / Г. И. Редько, А. Р. Родин, И. В. Трещевский. - М. : Лесная пром-ть, 1980. - 368 с.

Размещено на Allbest.ru