Инфекционный ринотрахеит

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

ОМСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ

УНИВЕРСИТЕТ им. П.А. СТОЛЫПИНА

ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И

БИОТЕХНОЛОГИИ

Кафедра анатомии, гистологии, физиологии и патологической анатомии

Курсовая работа

Тема: «Инфекционный ринотрахеит»

Выполнила: студентка 502 (1) группы

Бердова Е. П.

Проверил: Гичев Ю. М.

Омск 2014 г.



Содержание

1. Протокол вскрытия трупа животного

2. Сопроводительный документ при направлении патологического материала на бактериологическое, гистологическое и химико-токсикологическое исследование

3. Анализ диагностированного случая болезни

3.1 Краткое определение болезни

3.2 Этиология

3.3 Патогенез

3.4 Основные клинико-анатомические формы течения болезни и их патоморфологическая характеристика

3.5 Взаимосвязь патологоанатомических изменений

3.6 Взаимосвязь клинических признаков и патологоанатомических изменений. Диагноз и дифференцированный диагноз

Список литературы



1. Протокол вскрытия трупа животного

животное инфекционный ринотрахеит анатомический

Протокол патологоанатомического вскрытия трупа кота от 23 сентября 2014 года.

Мною, Студенткой 502(1) группы Бердовой Е. П, на основании просьбы владельца животного в присутствии студентов Пашковец Ю. К, Мельниковой С. Л. В в вскрывочной комнате было произведено вскрытие трупа кота беспородного, кличка «Барсик», в возрасте 1.5 лет, принадлежащего гражданке Подалковой Т. Н, проживающей по адресу г. Омск, улица 1905 года 15.

Анамнез: со слов владельца животного кот содержится в квартире, имеет свободный доступ к прогулкам на улице, контактирует с другими животными, кормление натуральными кормами, кот не вакцинирован, не кастрирован, вода вволю. На протяжении последней недели хозяйка заметила, что животное угнетено, вялое, отказывается от еды и воды, была рвота (пеной), однократно был понос. 22 сентября 2014 года хозяйка обратилась в клинику НИУЦ ИВМиБ ОмГАУ по адресу Орджоникидзе 47А с просьбой оказания коту лечебной помощи. Т= 34,2. При осмотре - видимые слизистые оболочки бледного цвета, кот вялый, наблюдается его истощение, обезвоживание организма, изо рта гнилостный запах, в ротовой полости многочисленные язвы, из носовой полости и глаз гнойные выделения, усиленное слюнотечение, кашель.

Дополнительные исследования - экспресс-тест на калицивирусную инфекцию и инфекционный ринотрахеит, оба теста показали положительный результат. Был поставлен прижизненный диагноз-калицивирусная инфекция и инфекционный ринотрахеит.

Было оказано следующее лечение- кордиамин, глобфел-4, амоксициллин, 20% раствор глюкозы, ваготил.

Время смерти животного: 22.09.2014 г. в 22:00.

Вскрытие начато: 23 сентября 2014 года в 14:00.

Вскрытие окончено: 23 сентября 2014 года в 15:32.

Описательная часть.

Наружный осмотр.

1. Опознавательные признаки.

Кот, беспородный, 1,5 года, рыжий, среднего телосложения, упитанность низкая, масса 3 кг.

2. Трупные изменения.

Труп холодный, трупное окоченение выражено сильно, t = 32⁰ C, отмечается неподвижность челюстей и мышц, конечности в суставах не сгибаются , гнилостные изменения отсутствуют. Трупные пятна отсутствуют. Объем живота не увеличен, запавший.

3. Глаза и естественные отверстия тела.

Глазные щели открыты, веки набухние, наблюдаются гнойные истечения из глазных щелей(засохшие), роговица тусклая, сухая, без изъязвлений, конъюктива бледного цвета, зрачки расширены, содержимое конъюктивального мешка вязкое, мутное, желтого цвета.

А) Носовые отверстия. Гнойные выделения, слизистая оболочка умеренно влажная, бледного цвета, неблестящая, без наложений и повреждений.

Б) Ротовое отверстие. Челюсти плотно сжаты, не открываются, кончик языка не выступает. Истечений нет, губы целые, бледного цвета, сухие.

В) Ушные раковины и слуховые проходы. Уши без патологий, наружной слуховой проход чист, повреждений нет. Отмечается небольшое количество ушной серы светло-коричневого цвета.

Г) Анальное отверстие. Анус закрыт, загрязнено фекалиями, истечений и повреждений не наблюдается.

Д) Препуциальное отверстие. Истечений и повреждений не наблюдается.

4. Кожа и производные кожи.

Кожа пигментирована, утратившая эластичность, сухая., собрана в складки, покраснений и повреждений нет. Шерсть лишена блеска, тусклая, взъерошена, плохо удерживается в волосяном фолликуле, загрязнена.

5. Подкожная жировая клетчатка.

Сухая, развита плохо, липкая,. Кровенаполнение сосудов слабое (сосуды запустевшие). Трупных пятен нет.

6. Поверхностные лимфатические узлы.

Подчелюстные, шейные, паховые, коленной складки - увеличены, плотной консистенции, подвижны, округлой формы , красного цвета.

7. Скелетная мускулатура, сухожилия.

Скелетная мускулатура развита, плотная, межмышечная ткань ненабухшая, несочная, Мышцы темно-красного цвета, на разрезе суховатые. Рисунок волокнистого строения сохранен. Сухожилия целостные, эластичные.

8. Кости, суставы, связки, хрящи.

Трубчатые кости гладкие, без повреждений. На распиле - костный мозг красного цвета. Суставы без видимых изменений. В полости суставов незначительное количество синовиальной жидкости серо-белого цвета, густой, тягучей консистенции. Суставные связки блестящие, влажные, без повреждений.

Внутренний осмотр.

9. Брюшная полость, состояние диафрагмы.

Положение органов анатомически правильное. В брюшной полости жидкости нет. Брыжейка не утолщена, тусклая. Целостность диафрагмы не нарушена, блестящая. Купол диафрагмы на уровне 6-го ребра.

10. Брюшина висцеральная и париетальная, сальник.

Брюшина прозрачная, блестящая, темно-розового цвета, умеренно влажная, неутолщенная, кровеносные сосуды слабо наполненные, наложений нет, присутствуют спайки, которые разделяются с трудом. Сальник содержит незначительное отложение жира бледно-желтого цвета, умеренно влажный.

11. Грудная полость, плевра.

Положение органов правильное. Плевра гладкая, блестящая, красно-розового цвета, неравномерно окрашенная и умеренно наполненными сосудами, влажная. В грудной клетке содержится умеренное количество жидкости.

12. Ротовая полость, глотка и пищевод.

Слизистая оболочка ротовой полости бледная, имеются многочисленные язвы, незначительно набухшая. Целостность мягкого нёба сохранена. Миндалины увеличены, гладкие, без повреждений. Количество и развитость зубов соответствует виду и возрасту животного. Язык упругий, с многочисленными изъязвлениями. На разрезе язык темно-красного цвета, рисунок мышечных волокон хорошо выражен. Слизистые оболочки глотки и пищевода бледного цвета с многочисленными язвами. Содержимое отсутствует.

13. Гортань, трахея.

Целостность хрящей и трахеальных колец сохранена, содержимое гортани и трахеи пенистое, красноватое от примеси крови, на слизистых оболочках точечные кровоизлияния.

14. Легкие и бронхи. Бронхиальные и средостненные лимфатические узлы.

Легкие неспавшиеся, тестоватой консистенции, темно-красного цвета, края заострены, сосуды сильно наполненные. С поверхности разреза стекает светлая, пенистая жидкость красного цвета. Междольковая соединительная ткань утолщена, отёчна, в просвете альвеол однородная бледно-розовая масса, кусочек легкого с трудом остается на поверхности воды, лимфатические узлы в состоянии воспаления.

15. Сердечная сумка и сердце.

В сердечной сорочке небольшое количество жира, сердце не увеличено, верхушка раздвоена, красного цвета. В сердечных полостях кровь в виде сгустков не обнаружена, наблюдается расширение сердца, истончение стенок.

16. Кровеносные сосуды и кровь.

Яремная вена умеренно заполнена кровью. Стенки вены истощены, внутренняя поверхность сосуда гладкая, блестящая. Легочная артерия и аорта без утолщений, кровенаполнены, стенки эластичные, интима серо-желтого цвета. Кровь красная, жидкая.

17. Селезенка и тимус.

Селезенка увеличена в объеме, с заостренными краями, капсула напряжена, тёмно-красного цвета. На поверхности - покрыта плотной консистенцией в виде нитей, капсула снимается с трудом. Пульпа мягкая, немного выбухает над уровнем края разреза, с поверхности разреза соскоб незначительный, кровянистый. Тимус слаборазвит.

18. Печень и желчный пузырь. Поджелудочная железа.

Печень увеличена в объеме, наблюдается сильное разъединение ее долей, тёмно-красного цвета, плотной консистенции, поверхность гладкая, на разрезе - небольшое количество стекающей крови. Желчный пузырь увеличен, переполнен, паразитов и камней не обнаружено, тёмно-зелёного цвета, рисунок слабовыражен.

19. Почки, мочеточники и мочевой пузырь.

Почки немного уменьшены в размере, околопочечного жира нет, малокровны, светло- серого цвета, рисунок сглажен, граница между корковым и мозговым веществом нечеткая, капсула легко отделяется, проходимость мочеточников не нарушена, мочевой пузырь в объёме не увеличен, умеренного наполнения, примесей крови и гноя в содержимом нет, моча светло-желтого цвета, прозрачная.

20. Желудок.

Умеренно наполнен кормовыми массами. Орган правильной формы. Слизистая оболочка целостная, покрасневшая, набухшая, влажная, с многочисленными изъязвлениями. Мышечный рисунок выражен хорошо.

21. Тонкие кишки, брызжейка, мезентеральные лимфатические узлы.

Слизистая оболочка тонкого кишечника набухшая тёмно- серого цвета, небольшое количество кашеобразного содержимого, лимфатические узлы увеличены в размере, на слизистой наблюдаются изъязвления.

22. Толстые кишки.

Умерено заполнены жидкими каловыми массами. Слизистая оболочка тёмно-серого цвета, ровная, набухшая, с изъязвлениями. Серозная оболочка утолщена, с участками некроза.

23. Половые органы.

Половой член и препуций без видимых изменений. Семенники не увеличены, округлой формы, светло-розового цвета, плотные по консистенции, кровеносные сосуды слабого наполнения.

24. Железы внутренней секреции.

Надпочечники. Не увеличены, гладкие, блестящие.

Щитовидная железа. Не увеличена, плотная, прикрыта щитовидным хрящом.

25. Головной мозг и его оболочки.

Головной мозг. Твердая и мягкая оболочки без повреждений, не напряжены, степень наполнения кровеносных сосудов слабая, плотный по консистенции. Мозговые оболочки и борозды коры без видимых изменений. Граница между белым и серым веществом хорошо выражена. Спинной мозг имеет одинаковый диаметр на протяжении всей своей длины, содержимое спинномозгового канала сероватого цвета.

26. Носовая полость, околоносовые пазухи.

Содержимое носовой полости гнойного-фибринозного характера, под экссудатом слизистая оболочка шероховатая, красного цвета, местами изъязвлена, степень проходимости носовых пазух низкая, носовая перегородка и раковины не деформированы.

27. Особые добавления.

Не проводились.

Патологоанатомический диагноз.

1. Гнойный ринит (п. 3)

2. Лимфаденит (п. 6, 14, 21)

3. Везикулярный язвенный стоматит (п. 12)

4. Гнойный конъюнктивит (п. 3)

5. Острый фарингит (п. 12)

6. Острый тонзиллит (п.12 )

7. Острый ларингит (п. 13)

8. Точечные кровоизлияния на слизистой трахеи (п. 13)

9. Отёк легких (п. 14)

10. Интерстициальная пневмония (п. 14)

11. Спленомегалия (п.17)

12. Гепатит (п. 18)

13. Язвенный гастрит, энтерит (п. 20, 21, 22)

14. Гнойный гайморит, фронтит (п. 26)

15. Обезвоживание (п. 4)

16. Истощение (п. 10)

Заключение.

На основании анамнестических данных, клинических признаков и результатов патологоанатомического вскрытия трупа кота, можно сделать заключение, что смерть животного наступила от асфиксии на почве отёка легких, который развился на фоне инфекционного ринотрахеита и калицивирусной инфекции



2. Сопроводительный документ при направлении патологического материала на бактериологическое, гистологическое и химико-токсикологическое исследование

Сопроводительный документ к патологическому материалу В Омскую областную ветеринарную лабораторию Адрес ул. 10 лет Октября 103-а

Направляется для серологического и гистологического исследования с целью выявления болезни инфекционный ринотрахеит и калицивирусная инфекция патологический материал от кота, самца, беспородного, в возрасте 1,5 лет, принадлежего гражданке Подалковой Т.Н., проживающей по адресу г. Омск, ул.1905 года, 15.

Патологический материал: кровь, кусочки паренхиматозных органов, лимфатические узлы.

Животное заболело: 15.09.14..

Клиническая картина: Животное было угнетено , наблюдался отказ от корма, кот вялый, наблюдалось его истощение, обезвоживание организма, изо рта гнилостный запах, в ротовой полости многочисленные язвы, из носовой полости и глаз гнойные выделения, усиленное слюнотечение, кашель.

Животное пало 22.09.14.

При патологоанатомическом вскрытии обнаружено:

1. Гнойный ринит (п. 3)

2. Лимфаденит (п. 6, 14, 21)

3. Везикулярный язвенный стоматит (п. 12)

4. Гнойный конъюнктивит (п. 3)

5. Острый фарингит (п. 12)

6. Острый тонзиллит (п.12 )

7. Острый ларингит (п. 13)

8. Точечные кровоизлияния на слизистой трахеи (п. 13)

9. Отёк легких (п. 14)

10. Интерстициальная пневмония (п. 14)

11. Спленомегалия (п.17)

12. Гепатит (п. 18)

13. Язвенный гастрит, энтерит (п. 20, 21, 22)

14. Гнойный гайморит, фронтит (п. 26)

15. Обезвоживание (п. 4)

16. Истощение (п. 10)

Предполагаемый диагноз инфекционный ринотрахеит и калицивирусная инфекция.

Эпизоотологические данные: вакцинация не проводилась.

Должность, подпись__________________________

Обратный адрес г. Омск, ул. Орджоникидзе 47А, клиника НИУЦ ИВМиБ ОмГАУ.

Дата 22.09.2014 г.



3. Анализ диагностированного случая болезни

3.1 Краткое определение болезни

Инфекционный ринотрахеит кошек -- остропротекающая вирусная инфекционная болезнь, сопровождающаяся поражением глаз и органов дыхания.

Возбудитель-ДНК содержащий вирус семейства герпес вирусов. Температура 56 градусов инактивирует вирус через 20 минут, прямые солнечные лучи убивают вирус в течение 48часов. Обычные дезинфицирующие средства убивают вирус ИРТ моментально.

Заболеваемость составляет 50%, смертность 5?20%. Вирус ИРТ кошек является видоспецифическим заболеванием, которое не опасно для других видов домашних животных и человека. Инфекционный, или герпесвирусный, ринотрахеит кошек - остро протекающая контагиозная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением дыхательных путей и поражением глаз. Болеют все породы кошек, независимо от возраста. Заболеваемость достигает 50%, смертность - 5-20%. Переболевшее животное приобретает иммунитет.

Источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие кошки, которые являются носителем вируса в течение 8-9 месяцев после выздоровления. В дыхательных путях кошек возбудитель обнаруживается в течение 50 дней. Возможно латентное носительство. Вирус выделяется с носовым секретом, истечениями из глаз и половых органов, с молоком, мочой, калом, спермой. Путем передачи могут быть инфицированный воздух, корма, предметы ухода, транспортные средства, а также насекомые, люди, имевшие контакт с больными животными. В естественных условиях животные заражаются в основном аэрогенно. Распространению болезни способствует пониженная резистентность организма, перегревание или переохлаждение, неполноценное кормление и несоответствующие условия содержания кошек.

Вирус герпеса кошек - FHV-1 вызывает заболевание не только у домашних кошек (Felis catus). Первое сообщение о выделении FHV-1 от экзотических кошек было получено в 1977 году из зоопарка Святой Луизы, где FHV-1 послужил причиной смерти трех обычных и пяти пятнистых леопардов (Neofelis nebulosa) в единственной вспышке. В настоящее время опубликовано значительное количество работ о важной роли вируса герпеса кошек в возникновении заболеваний у диких кошек: дикой африканской (Felis silvestris) и песчаной (Felis margarita) кошек на Ближнем Востоке и в Южной Африке (S. Ostrowski, Van Vuuren M, M. Daniel, D.M. Lenain et al., 2003) и дикой европейской кошки (Felis silvestris silvestris) в Западной и Восточной Европе (M.J. Daniels, M.C. Golder, O. Jarrett et al., 1999).

Рис. 1. Герпесвирус кошек.

3.2 Этиология

Инфекционный ринотрахеит кошек, как и другие вирусные респираторные инфекции широко распространены. Заболевание поражает всех из семейства кошачьих, болеют все породы кошек независимо от возраста, за исключением котят-сосунов до 2-х месячного возраста получающих антитела от матери с молозивом (коллостральный иммунитет). При групповом содержание кошек (приюты, кошачьи питомники) болезнь может быстро распространяться, приобретая при этом характер постоянных энзоотий. Пик заболевания у кошек приходится на холодное и дождливое время года (зима, начало весны, конец осени). Риск заразиться ИРТ резко повышается, если кошка будет посещать выставки или бесконтрольно спариваться с котами у которых в семенной жидкости содержится возбудитель ИРТ. К группе риска можно отнести кошек ослабленным стрессом или болезнью, кошки живущие скученно (идет перекрестное перезаражение), неполноценное кормление, котята и молодые кошки от 2месяцев до 1года. Источником ИРТ кошек являются больные и вирусоносители ИРТ кошки. В дыхательных путях выздоровевших кошек возбудитель ИРТ обнаруживается до 50 дней. У кошек возможно скрытое носительство. В результате того или иного стресса в организме кошки происходит реактивация вируса с последующим выделением его во внешнею среду. Здоровым кошкам вирус ИРТ передается при непосредственном контакте с больными животными через выделения из носа, рта и глаз. Основной путь заражения -- аэрогенный, который способствует быстрому распространению ИРТ. Путями передачи могут служить корма, предметы ухода, люди имевшие контакт с больными животными, инфицированный воздух.

3.3 Патогенез

Основным местом внедрения вируса является эпителий слизистых оболочек верхних дыхательных путей, ротовой полости и конъюнктивы глаз. Попав на слизистые оболочки, вирус проникает в клетки эпителия, репродуцируется, вызывая их гибель и слущивание. Кроме того, герпес-вирус кошек тропичен к растущим частям скелета, включая носовую раковину.

Герпесвирус (FVR) локализуется и размножается в основном в эпителии глотки. При стрессе (болезнь, анестезия, операция, период лактации) иммунный барьер кошки нарушается, и вирус начинает выделяться со слюной во внешнюю среду.

В дальнейшем возникает воспалительная реакция, на поверхности слизистой оболочки образуются вначале мелкие, а затем более обширные участки некроза. Адсорбируясь на лейкоцитах, вирус попадает в кровь и вызывает вирусемию, проявляющуюся общим угнетением и лихорадкой.

При проникновении вируса через плацентарный и гематоэнцефалический барьеры возникает поражение мозга, плаценты, матки и плода. Патологический процесс при инфекционном ринотрахеите во многом зависит от осложнений условно-патогенной микрофлорой, проявляющихся развитием бронхита, пневмоний, гастрита и энтерита.

Течение болезни обостряется при смешанной инфекции с аденовирусами и возбудителем панлейкопении.

В дыхательных путях выздоровевших кошек вирус обнаруживается до 50 дней. У кошек возбудитель может находиться на слизистых оболочках дыхательных путей.

3.4 Основные клинико-анатомические формы течения болезни и их патоморфологическая характеристика

Инкубационный период длится от 2 до 10 дней. Картина развивается на 2-17 день от момента заражения и достигает пика на 12-26 день.

Болезнь протекает:

· остро

· подостро

· хронически

При остром течении клинические признаки зависят от путей проникновения вируса в организм, физиологического состояния и возраста животного.

У кошек регистрируют:

1. повышение температуры тела до 40 °С и более в течение 3 - 5 дней

2. развиваются конъюнктивит и ринит

3. у кошки отмечаются приступы чихания

4. в первые дни болезни отмечают обильное серозно-слизистое истечение из носа, переходящее иногда в серозно-фибринозное (редко с примесью крови) и фибринозно-гнойное

5. слизистые оболочки носа, глотки, гортани резко набухшие, отечные, часто гиперемированные («красный нос»)

6. у пациентов развивается одышка (они дышат открытым ртом), отмечаются обильная саливация, охриплость голоса, кашель

7. на поверхности носа и на слизистой оболочке появляются белый налет, некротические корки, под которыми образуются язвы

8. при пальпации в области гортани и трахеи отмечается сильная болезненность, кошки проявляют беспокойство

9. апатия, потеря аппетита

10. прием пищи и воды затруднен

11. в некоторых случаях болезнь может сопровождаться поражением пищеварительного тракта; при этом усиливается рвота, появляется диарея

12. ринотрахеит может осложняться бронхитом и пневмонией

13. при затяжном течении поражается ЦНС

14. у беременных кошек происходит аборт

Если патологический процесс затягивается, то развивается:

ь атония кишечника

ь появляются запоры

Осложнения при герпесвирусной инфекции:

§ может развиться вирусная пневмония и бронхит

§ некроз слизистых оболочек носовой полости могут привести к хроническому риниту и синуситу

§ обезвоживание и отказ от еды могут привести к летальному исходу

§ язвенный кератит

§ изъязвления кожи

§ поражение центральной нервной системы (при затяжном течении болезни)

§ аборт у беременных самок

Выздоровление наступает через 7 - 10 дней от начала болезни. Летальность, несмотря на тяжелое течение заболевания, невысокая.

Большинство кошек, переболевших остро, становятся вирусоносителями. В стрессовых ситуациях иммунитет у животного ослабевает, и со слюной начинает выделяться вирус. Вновь могут развиться легкие симптомы респираторного заболевания длительностью 10 - 14 дней, в редких случаях болезнь затягивается на несколько недель и проявляется редким кашлем и непостоянным насморком.

Кошки с явлениями язвенного стоматита или пневмонии часто погибают.

Подострое течение болезни: клинические симптомы те же самые, что и при остром течении заболевания, но выражены слабее и развиваются в течение более продолжительного времени (1,5-3 недели). Проявляется в основном болезнь редким кашлем и непостоянным насморком.

Хроническое течение болезни: хроническая форма часто отмечается при наличии вторичных бактериальных инфекций, которые вызывают вялотекущие бронхиты, пневмонии и бронхопневмонии. При этой форме болезни наблюдается длительное вирусоносительство.

a) Выделение вируса в окружающую среду начинается не сразу, а только после перенесенного стресса:

b) перевозка кошки на новое место

c) посещение ветеринарной клиники

d) смена хозяина

e) применение гормонов

Скрытое (латентное) течение болезни: эта форма болезни не проявляется никакими клиническими признаками, и только при лабораторном исследовании определяется наличие герпесвирусной инфекции. При этой форме кошки так же являются вирусоносителями.

Патологоанатомические изменения. В случае болезни, закончившейся смертью, как правило, отмечают фибринозный ринотрахеит, острую пневмонию, тонзиллит, конъюнктивит, реже кератит и стоматит. При вскрытии павших кошек в носовых ходах находят гнойно-фибринозный экссудат, закрывающий всю полость носа. Под экссудатом слизистая оболочка шероховатая, красного цвета, местами изъязвлена. Подобным образом выглядит и слизистая оболочка трахеи. Миндалины увеличены, пронизаны кровоизлияниями. Заглоточные и подчелюстные лимфатические узлы увеличены, отечны, окрашены в красный цвет. Пневмония регистрируется в двух вариантах. При герпетической форме преобладают некротические процессы и серозно-фибринозная экссудация. В долях легких находят многочисленные уплотненные очаги серо-красного цвета. С поверхности разреза в этих участках легкого выделяется немного мутной се-ровато-красной жидкости. При других формах, когда герпесвирусная инфекция осложнена бактериями или кокками, поражения носят характер катарально-фибринозно-гнойной бронхопневмонии. При этом с поверхности разреза легких и бронхов выделяется густой серовато-белый экссудат, напоминающий слизь и гной.



3.5 Взаимосвязь патологоанатомических изменений

Патологоанатомический диагноз:

1. Гнойный ринит (п. 3)

2. Лимфаденит (п. 6, 14, 21)

3. Везикулярный язвенный стоматит (п. 12)

4. Гнойный конъюнктивит (п. 3)

5. Острый фарингит (п. 12)

6. Острый тонзиллит (п.12 )

7. Острый ларингит (п. 13)

8. Точечные кровоизлияния на слизистой трахеи (п. 13)

9. Отёк легких (п. 14)

10. Интерстициальная пневмония (п. 14)

11. Спленомегалия (п.17)

12. Гепатит (п. 18)

13. Язвенный гастрит, энтерит (п. 20, 21, 22)

14. Гнойный гайморит, фронтит (п. 26)

15. Обезвоживание (п. 4)

16. Истощение (п. 10)

В случае болезни, закончившейся смертью, как правило, отмечают фибринозный ринотрахеит, острую пневмонию, тонзиллит, конъюнктивит, реже кератит и стоматит. При вскрытии павших кошек в носовых ходах находят гнойно-фибринозный экссудат, закрывающий всю полость носа. Под экссудатом слизистая оболочка шероховатая, красного цвета, местами изъязвлена. Подобным образом выглядит и слизистая оболочка трахеи. Миндалины увеличены, пронизаны кровоизлияниями. Заглоточные и подчелюстные лимфатические узлы увеличены, отечны, окрашены в красный цвет. Пневмония регистрируется в двух вариантах. При герпетической форме преобладают некротические процессы и серозно-фибринозная экссудация. В долях легких находят многочисленные уплотненные очаги серо-красного цвета. С поверхности разреза в этих участках легкого выделяется немного мутной се-ровато-красной жидкости. При других формах, когда герпесвирусная инфекция осложнена бактериями или кокками, поражения носят характер катарально-фибринозно-гнойной бронхопневмонии. При этом с поверхности разреза легких и бронхов выделяется густой серовато-белый экссудат, напоминающий слизь и гной.

3.6 Взаимосвязь клинических признаков и патологоанатомических изменений. Диагноз и дифференцированный диагноз

Диагноз устанавливают на основании: эпизоотологических данных, клинических данных, патологоанатомических данных, результатов лабораторных исследований (обнаружение внутриядерных включений в мазках истечений изо рта, носа, глаз и выделение вируса в культуре клеток)

Для уточнения диагноза ставят реакцию нейтрализации (РН) в культуре клеток почки или легкого котят, а также учитывают избирательную сохраняемость вируса при разных температурах.

При дифференциальной диагностике следует иметь в виду, что у кошек причиной респираторных поражений помимо вируса ринотрахеита могут быть: пикорнавирусы, реовирусы, микоплазмы, хламидии.

Дифференцируют болезнь от: калицивироза, хламидиоза.

При некотором сходстве этих инфекций для хламидиоза более типично проявление в виде лишь конъюнктивита, а для калицивироза -- стоматита. Часто ринотрахеит кошек возникает в смешанной форме с калицивирусной инфекцией и панлейкопенией.

Лабораторная диагностика инфекционного ринотрахеита кошек:

1. Выделение вируса на культуре клеток.

В 1958 году Crandell and Maurer продемонстрировали, что вирус FHV-1 растет и вызывает цитопатический эффект в культуре клеток почки кошки, что позволило создать in vitro систему для выделения и изучения свойств FHV-1.

Для выделения вируса FHV-1 мазок берут с поверхности конъюнктивы или слизистой оболочки ротоглотки, обычно используют стерильные тампоны из хлопка или дакрона. Сразу после взятия пробы тампон помещают в пробирку с 1-1,5 мл вирусной транспортной среды с антибиотиками. При необходимости пробы замораживают и сохраняют при -70оС. Для выделения вируса обычно используют культуру клеток почки кошки CrFK, выращенную на плашках (рис. 2).

Рис. 2. Перевиваемая культура клеток почки кошки - CrFK.

2. Полимеразная цепная реакция.

Важным этапом в совершенствовании методов диагностики инфекционных заболеваний явилась разработка методов, позволяющих обнаруживать гены или последовательности нуклеиновой кислоты, специфичные для определенного вида возбудителя инфекционного заболевания. Создание принципиально нового способа исследования, получившего название полимеразной цепной реакции (ПЦР), открыло новые возможности для эпидемиологического анализа инфекционных заболеваний.

Принцип ПЦР был описан в 1986 г. К. Мюллисом. В основе этого метода лежит многократное копирование с помощью фермента ДНК-полимеразы определенного фрагмента ДНК, являющегося маркерным для данного вида. Механизм копирования таков, что комплементарное достраивание нитей может начаться не в любой точке последовательности ДНК, а только в определенных стартовых блоках. Для создания стартовых блоков в заданных участках ДНК используют затравки - олигонуклеотиды длиной 20-30 нуклеотидных пар (праймеры). Они комплементарны последовательностям ДНК на левой и правой границах специфического фрагмента и ориентированы таким образом, что синтез ДНК, осуществляемый ДНК-полимеразой, протекает только между ними. В результате происходит экспоненциальное увеличение количества копий специфического фрагмента по формуле 2n, где n - число циклов амплификации. Построение новых нитей ДНК из дезоксирибонуклеотидтрифосфатов осуществляет фермент термостабильная ДНК-полимераза. Процесс амплификации заключается в повторении циклов амплификации (состоящих из денатурации ДНК, отжига праймеров и построения фрагмента). В результате 30-35 циклов амплификации синтезируется 108 копий фрагментов, что делает возможным визуальный учет результатов после электрофореза в агарозном или акриламидном гелях. Использование термостабильной ДНК-полимеразы позволило автоматизировать процесс амплификации с помощью специального прибора, называемого термоциклером. Этот прибор автоматически осуществляет смену температур согласно заданной программе и числу циклов амплификации.

Метод ПЦР обладает высокой чувствительностью, дающей возможность обнаруживать единичные бактериальные клетки или вирусные частицы. Но это преимущество ПЦР уместно рассматривать при сравнении с другими молекулярно-генетическими или иммунологическими методами диагностики. Однако высочайшая чувствительность ПЦР обычно достигается при работе с чистой культурой микроба или, что еще лучше, с очищенной нуклеиновой кислотой. Эта чувствительность автоматически не трансформируется в чувствительность метода при работе с клиническим материалом. На успех определения при работе с этим материалом влияют такие факторы, как методика приготовления образца, возможное присутствие ингибитора фермента, осуществляющего амплификацию, объем образца при низких концентрациях тестируемых молекул.

Метод ПЦР превосходит метод выделения вируса на культурах клеток, особенно в случае бактериальной контаминации, которая мешает традиционной технике культивирования; более чувствителен и менее трудоемок.

Наличие вторичной бактериальной и грибковой инфекции может осложнять и маскировать первичную вирусную инфекцию, затрудняя клиническую диагностику. Таким образом, существенным является возможность определения вирусных протеинов или вирусной ДНК для подтверждения диагноза первичной вирусной инфекции. ПЦР может являться одним из методов подтверждения FHV-1 инфекции в гистологических образцах в подозрительных случаях.

К сожалению, диагностика FHV-1 инфекции с помощью ПЦР-амплификации имеет ограниченную клиническую ценность, поскольку могут выявляться латентные инфекции, широко распространенные у кошек, таким образом, невозможно будет определить, играет ли FHV-1 первичную роль в возникновении заболевания, или же он просто реактивировался из латентного состояния под действием стресса или сопутствующей инфекции. Немалую роль в ограничении использования ПЦР является дороговизна оборудования и реактивов, высокая требовательность к качеству реактивов, строжайшие требования к помещениям и организации работы в ПЦР-лаборатории для исключения контаминации образцов продуктами амплификации.

3. Реакция иммунофлуоресценции.

РИФ, предложенную Кунсом еще в 1942 году, трудно отнести к новым методам исследования. Но благодаря появлению гибридомных технологий, позволяющих получать моноклональные антитела, РИФ получила в настоящее время вторую жизнь, ее чувствительность и специфичность значительно увеличены.

Популярность РИФ объясняется экономичностью, наличием широкого спектра диагностических наборов, быстротой получения ответа. Чаще всего она используется для быстрого обнаружения возбудителя в патологическом материале. В этом случае из исследуемого материала как для обычной микроскопии готовят мазок на предметном стекле. Препарат фиксируют метиловым спиртом, ацетоном или другим химическим фиксатором, иногда входящим в состав диагностического набора. На поверхность фиксированного мазка наносят меченые ФИТЦ сыворотки или моноклональные антитела (в случае непрямой РИФ сначала препарат обрабатывают сывороткой против искомого антигена, а затем мечеными антителами к иммуноглобулинам, использованным на первом этапе (антивидовыми)). Поскольку РИФ является разновидностью гетерогенного анализа, один этап отделяется от другого промывкой.

Учет результатов реакции осуществляется с помощью люминесцентного микроскопа, в оптическую систему которого устанавливается набор светофильтров, обеспечивающих освещение препарата ультрафиолетовым или сине-фиолетовым светом с заданной длиной волны. Это заставляет флюорохром светиться в заданном диапазоне спектра. Исследователь оценивает характер свечения, форму, размер объектов и их взаимное расположение.

Если прямая РИФ может использоваться только для обнаружения антигена, то непрямой вариант этой реакции может быть использован помимо обнаружения антигена и для обнаружения антител. В этом случае готовят мазки из эталонного штамма возбудителя. Исследуемую сыворотку наносят на мазок. Если в ней присутствуют искомые антитела, то они связываются с антигенами микробных клеток. Промывка препарата буферным раствором позволяет удалить несвязанные антитела. Затем препарат обрабатывают меченой сывороткой против иммуноглобулинов (антивидовой). В случае положительного результата реакции при микроскопии мазка в люминесцентном микроскопе наблюдают специфическое свечение эталонной культуры.

В ветеринарной вирусологии РИФ активно используется для диагностики следующих вирусных заболеваний:

- вирус бешенства (непрямая),

- вирус иммунодефицита КРС (непрямая),

- коронавирус собак (непрямая),

- чума собак (непрямая),

- инфекционный перитонит (коронавирус) кошек (прямая),

- респираторный и репродуктивный синдром свиней (прямая).

РИФ является чрезвычайно ценным методом при диагностике FHV-1, при этом используют оба варианта РИФ. Для обнаружения вируса обычно берут эпителиальные клетки конъюнктивы (конъюнктивальную полость перед взятием пробы очищают от слизи и гнойных выделений), скарифицируют их под местной анестезией. При необходимости скарифицируют и эпителиальные клетки роговицы. Скарифицированные клетки помещают на предметное стекло, высушивают при комнатной температуре и фиксируют в ацетоне в течение 10 минут (рис. 4).

Рис. 3. РИФ при диагностике FHV-1:

а). Клетки, инфицированные вирусом FHV-1;

б). Скопление клеточных мембран инфицированных клеток.

4. Гистохимический вариант ИФА или иммунопериксидазная реакция.

Иммунопероксидазная реакция аналогична методу иммунофлуоресценции, но отличается тем, что для постановки реакции используют антитела, меченные не флуорохромом, а ферментом, и учет реакции проводят не под люминесцентным, а под обычным световым микроскопом. Обычно, в этом варианте ИФА используют антитела, меченые пероксидазой. Материалом для выявления вирус-специфических антигенов или вирусов с помощью иммунопероксидазной реакции могут служить: мазки-отпечатки различных органов, парафиновые срезы, культура клеток, мазки крови. Аналогично РИФ иммунопероксидазную реакцию ставят в прямом и непрямом вариантах.

Прямой пероскидазный тест.

При выявлении антигена с его помощью используют противовирусные конъюгаты - конъюгаты, полученные из антител, выделенные из специфической сыворотки, и фермент. Например, культуру клеток, выращенную на покровных стеклах и инфицированную вирусом, или мазки-отпечатки фиксируют в течение 10 минут (например, охлажденным ацетоном), высушивают на воздухе и наносят иммунопероксидазный конъюгат в рабочем разведении. Инкубируют 1-2 часа при 37оС во влажной камере, ополаскивают дистиллированной водой и высушивают на воздухе. Наносят несколько капель раствора субстрата - диаминобензидинтетрахлорида, инкубируют 5-10 минут и промывают 10-15 минут в физиологическом растворе и ополаскивают дистиллированной водой.

В положительных случаях, то есть при наличии антигена в исследуемом препарате после нанесения иммунопероксидазного конъюгата образуется комплекс антиген-антитело, помеченный ферментом. После нанесения на препарат раствора субстрата, последний под действием фермента разлагается, образуя цветной продукт ферментативной реакции, хорошо видный в световом микроскопе.

Результаты учитывают с помощью светового микроскопа. Диаминобензидинтетрахлорид под действием пероксидазы разлагается, образуя продукт реакции голубого цвета, который быстро приобретает коричневый окрас. В препарате видны или диффузное желто-коричневое окрашивание, или гранулы коричнево-черного цвета. Вирус-специфический антиген в мазках и гистосрезах обнаруживают тем же способом.

Непрямой пероскидазный тест.

Используют антивидовые иммунопероксидазные конъюгаты. Преимуществом непрямого метода является универсальность меченых антивидовых глобулинов, а также большая чувствительность его по сравнению с прямым тестом. Методика его постановки отличается двумя этапами: на исследуемый образец наносят специфическую для исследуемого антигена сыворотку, после инкубации и промывания наносят антивидовой пероксидазный конъюгат в рабочем разведении и инкубируют при 37оС 1 час. Далее следуют этапы, описанные в разделе о прямом методе. При наличии в исследуемом материале вирус-специфического антигена после внесения специфической сыворотки образуется комплекс антиген-антитело, для выявления которого используют антивидовые или вторичные антитела, меченые ферментом; образуется более сложный, чем в первом случае, комплекс «антиген-антитело-вторичное антитело-фермент». Полученный комплекс выявляют добавлением субстрата, который под действием фермента разлагается, образуя цветной продукт ферментативной реакции. Учет результатов, как и в первом случае, проводят под световым микроскопом.

Иммунопероксидазная реакция в прямом и непрямом вариантах используется для выявления вирусов бешенства, ящура, герпесвирусов, энтеровирусов и др. На сегодняшний день, вероятно, это наиболее ценный метод для экспресс-диагностики FHV-1. Он позволяет получить четкий и быстрый диагноз, дает возможность обнаруживать как FHV-1-антиген, так и антитела к нему в мазках, мазках-отпечатках, смывах, образцах тканей и т.д. Постановка иммунопероксидазных тестов требует минимального количества реактивов и оборудования, не требует стерильности, проста в исполнении, может проводиться в любой лаборатории при наличии обычного светового микроскопа.

5. Иммуноферментный анализ.

ИФА - специфичный и универсальный метод, отличающийся высокой чувствительностью, удобный для автоматизации и стандартизации реагентов. В ИФА первый известный компонент (антитело или антиген) сорбируют на твердую фазу. Следующие компоненты, включая исследуемые пробы, вносят последовательно в жидком растворенном виде. Сформировавшиеся после инкубации иммунные комплексы антиген-антитело отделяют от непрореагировавших компонентов реакции при отмывании планшет. В ИФА используют противовирусные или антивидовые антитела, меченые пероксидазой хрена (ПХ) или другими ферментами, которые затем выявляются различными субстратами (диаминобензидин, 5-аминосалициловая кислота, о-фенилендиамин). Изменение цвета регистрируется визуально или спектрофотометрически, что дает возможность проводить количественный учет результатов анализа.

Разработаны различные варианты ИФА: прямые, непрямые, методы блокирования и конкурентные. В прямых вариантах используют меченые ферментом противовирусные антитела, в непрямых - антивидовые конъюгаты. В конкурентном варианте и методе блокирования типирование и титрование исследуемых антигенов и антител обеспечивается за счет вытеснения с их помощью определенного количества меченого антигена или антитела.

Для обнаружения антител к FHV-1 ИФА ставят на многолуночных микротитровальных плашках, сенсибилизированных антигеном FHV-1 по стандартной методике. Используют как моноклональные антитела, так и поликлональные анти-кошачьи IgG, в качестве ферментной метки чаще всего используют пероксидазу хрена. Определения показателя абсорбции проводят на автоматическом ИФА-ридере с фильтром 492 нм.

ИФА - универсальный, и на сегодняшний день наиболее чувствительный и совершенный метод определения антител к FHV-1 у кошек. Он позволяет определять уровень антител как в сыворотке крови, так и во внутриглазной и спинномозговой жидкостях, что необходимо при проведении любых научных и научно-практических исследований. С помощью ИФА можно проводить контроль эффективности вакцин против FHV-1 и иммунных сывороток, определять напряженность иммунитета, что позволяет оценить степень защиты животных от заражения и заболевания и т.д.

Дифференциальный диагноз

Название органа	Инфекционный ринотрахеит	Хламидиоз	Панлейкопения
Течение болезни	Остро, подстро, хронический	Чаще патологическое	Острое, сверхострое и субклиническое
Селезенка	Увеличена, края заостренные, тёмно- красного цвета.	Спленомегалия
Печень	Без изменений	Увеличена, рыхлой консистенции
Легкие	неспавшиеся, края заострены
Сердце	Сердце не увеличено, верхушка раздвоена.
Желудок	В объёме не увеличен, слизистая покрасневшая, набухшая, к изъязвлениями.
Тонкий кишечник			точечные кровоизлияния, несколько расширена местами, содержимое зловонное, водянистое, жел-товато-серого цвета
Толстый кишечник			точечные кровоизлияния
Лимфати-ческие узлы	увеличены	Резко увеличегы, отечны.	Увеличенные, гиперемированы



Список использованной литературы

1. «Внутренние болезни животных».Учебник / Под общ. Ред. И. Г. Щербакова, А. в. Коробова.5 изд., испр. И доп. - СПб.: Издательство «Лань», 2009. - 736 с.: - (Учебники для вузов. Специальная литература.)

2. «Инфекционные болезни животных» /Б. Ф..Бессарабов, А. А. Вашутин, Е. С. Воронин и др.; Под ред. А. А.Сидорчука. - М.: КолосС, 2007. - 671 с., [18] л. ил.: ил. - (Учебники и учеб. пособия для студентов высш. учеб. заведений.)

3. Вскрытие и патоморфологическая диагностика болезней животных/Под ред. А. В. Жарова. - М.: Колос, 2003. - 400 с., [4] л. ил.: ил. - (Учебники и учеб. пособия для студентов высш. учеб. заведений.)

4. «Патологическая анатомия сельскохозяйственных животных». /А. В. Жаров, В. П. Шишков, М. С. Жаков и др.; Под ред. В.П.Шишкова, А. В. Жарова. - 4 - е изд., перераб. И доп. - М.: Колос, 1999. - 568 с., [4] л. ил.: ил. - (Учебники и учеб. пособия для студентов высш. учеб. Заведений.) .

5. http://bethoven-vet.ru/rinotrakheit-koshek-gerpesvirusnaya-infektsiya

6.http://knowledge.allbest.ru/agriculture/3c0a65625a2ad68a5c43b88521216c37_0.html

Размещено на Allbest.ru

...