Размножение земляники

*Различия существенны.

Влияние предварительной обработки раствором ИМК на развитие сорта Трибьют на стадии ризогенеза ex vitro тоже оказалось положительным в отношении количества и длины корней по сравнению с контролем. Превышения по этим показателям существенны по отношению к контролю на обоих концентрациях ИМК. На концентрации ИМК 2 мг/л превышение по длине корней было в 2,5 раза, а на концентрации ИМК 5 мг/л - в 2раза. По количеству корней превышение контроля было в 1,5 раза и в 1,6 раза соответственно. На количество листьев и длину черешка существенного влияния обработка не оказала. Что касается концентрации ИМК, то средняя длина корней была на 2,91 см больше при обработке ИМК в концентрации 2 мг/л, чем в концентрации 5 мг/л, а количество корней при ИМК 2 мг/л было немного меньше.

Табл.6. Влияние предварительной обработки ИМК на параметры развития растений земляники сорта Трибьют во время адаптации.

*Различия существенны.

В результате проведенных исследований и сравнения двух способов укоренения было выявлено, что результаты укоренения ex vitro сорта Королева Елизавета по основным показателям ( количеству и длине корней) не уступают таковым в укоренение in vitro, а длина корней ex vitro растений даже превышает длину корней in vitro растений в 1,5 раза. По данному сорту наблюдалось также увеличение количества листьев. Оно в 1,4 раза превосходило количество листьев у in vitro укоренных растений.

Сорта Трибьют и Маковка тоже дали хорошие результаты при укоренении ex vitro.

Для сорта Трибьют количество корней, образованных при укоренении ex vitro было несколько меньше, чем количество корней образованных in vitro, но длина ex vitro корней не уступала (при концентрации ИМК 2 мг/л).

Для сорта Маковка количество ex vitro корней было не меньше, чем количество корней in vitro, а по длине они значительно превосходили корни, образованные in vitro.

Табл.7. Развитие микрорастений земляники садовой при двух способах укоренения.

Необходимо отметить, что при укоренении ex vitro микрорастения всех сортов отличались по морфологическому строению. Отличалось строение корневой системы: корни растений, укоренных in vitro, были утолщенные, ломкие, они повреждались при смывании с них агара и пересадке в грунт, они не ветвились, тогда как корни у растений, укоренных ex vitro, формировали корни второго и третьего порядка ветвления. В течение последующего роста различия в развитии усилились и наиболее проявились в формировании побегов: более чем в два раза больше побегов сформировалось у растений, укоренных ex vitro, чем у растений, укоренных in vitro. Формирование усов у растений, укоренных ex vitro, началось намного раньше, чем у растений укоренных in vitro. Кроме того, рост ex vitro растений, высаженных в горшки, был непрерывен, в то время как укоренные in vitro растения начали рост спустя 3-4 недели, после пересадки в горшки.

Рис.1.Длина корней у микрорастений земляники садовой при двух способах укоренения.

Рис.2. Количество корней у микрорастений земляники садовой при двух способах укоренения.

Глава 3. Организационно экономическая оценка способа укоренения микропобегов земляники сорта Трибьют в нестерильных условиях

Для организационно экономической оценки был выбран сорт с наибольшим коэффициентом размножения (6). Были учтены процент укореняемости и приживаемости микропобегов, укорененных in vitro и ex vitro.

Табл.8. Расчет себестоимости пробирочных растений при клональном микроразмножении.

Табл.9. Выход супер-супер-элитного посадочного материала земляники сорта Трибьют.

Исходя из цены реализации за 1 растение полученное путем микроклонального размножения 30 рублей сумма реализации составит:

Для in vitro укорененных растений 147600 руб

Для ex vitro укорененных растений 144000 руб.

По проведенным расчетам 60%затрат на производство растений способом микроклонального размножения приходится на этап укоренения in vitro. Следовательно, при ex vitro укоренении себестоимость растений снижается на 60 %, и составит 2 руб.

Затраты на производство in vitro укорененных растений составят 30000 руб.

Затраты на производство ex vitro укорененных растений составят 12000 руб.

Исходя из этого прибыль от реализации in vitro укорененных растений составит 117600 руб, а от реализации ex vitro укорененных растений 132000 руб. При ex vitro укоренении прибыль будет на 14400 руб больше, чем при укоренении in vitro на каждые 6000 полученных микрорастений.

Глава 4. Охрана труда

Меры безопасности при работе в химической лаборатории

Источниками вредности и опасности в химической лаборатории могут быть ядовиты, легколетучие и легковоспламеняющиеся вещества, вредные реактивы, ультрафиолетовые излучения, электроприборы. Во время работы в лаборатории должна действовать вентиляция, обеспечивающая обмен и очистку воздуха, обязательно должен быть вытяжной шкаф для работы с едкими и летучими веществами.

Прежде чем приступить к работе, необходимо убедиться в исправности оборудования. Все работы можно проводить лишь при исправном состоянии электрооборудования, арматуры, заземляющих устройств. Реактивы должны храниться в соответствующих тарах с маркировкой. В помещении необходима аптечка для оказания первой медицинской помощи при несчастных случаях.

Особую осторожность необходимо соблюдать в боксе. Входить в него можно только после выключения УФ-облучения. Обязательно надо следить за источниками открытого огня (спиртовка). При работе с концентрированными кислотами и щелочами необходимо надевать резиновые перчатки и защитные очки. Сливать отработанные растворы в общую канализацию запрещается.

Органические растворители нельзя оставлять в открытой посуде. Сперты должны хранится в специальном опечатанном шкафу. На таре с токсичными веществами должна быть надпись «ЯД». При работе в автоклавной необходимо соблюдать следующие требования:

1. Лица, обслуживающие автоклав, должны иметь специальный допуск к работе.

2. Помещение для размещения автоклавов должно иметь высоту не менее 2-3 м, и такую площадь, чтобы приборы размещались на расстоянии 0,8 м.

3. Размещать в автоклавной другое оборудование, и проводить работы, не связанные со стерилизацией, запрещается.

4. Каждый автоклав должен быть заземлен на металлический контур. Счетчик для общего отключения необходимо размещать у двери и вне помещения.

5. Отвод пара осуществляется в сливную трубу, ниже колена отстойника.

6. В помещение должна быть вентиляция.

7. Пол должен быть выстлан материалом, не накапливающим статическое электричество.

8. Дверь должна открываться наружу.

9. Стерилизацию необходимо проводить в строгом соответствии с инструкцией, не открывать камеру до полного падения в ней давления, не находится в помещении до стерилизации во время работы автоклава.

Выводы и предложения

1.По способности к размножению в условиях in vitro можно отметить, что коэффициент размножения зависит от генотипа. Самый высокий коэффициент размножения был у сорта Трибьют.

2.Эксперимент по предварительной обработке микрорастений раствором ИМК для индукции ризогенеза, показал, что ИМК способствует развитию корневой системы у всех изучаемых сортов. Концентрация ИМК на рост и развитие корней не влияла.

3.При сравнении микрочеренков, укоренных двумя способами, было выявлено, что при укоренении ex vitro, количество корней было на уровне растений, укоренных in vitro, а длина корней ex vitro растений превышала длину корней in vitro укоренных растений. Кроме того, замена стандартной ступени укоренения in vitro на ex vitro ризогенез дает возможность получать растения с полноценными биологическими функциями.

4.Экономические расчеты, проведенные на примере сорта Трибьют, показали, что укоренение микрорастений ex vitro более выгодно, чем укоренение in vitro. На каждые 6000 микрорастений прибыль от укоренения ex vitro была на 14400 руб больше.

Помимо этого, одновременное прохождение этапа укоренения ex vitro и адаптации микрорастений, позволяет сэкономить время на получение оздоровленного посадочного материала.

Можно рекомендовать замену этапа укоренения in vitro на укоренение ex vitro. Укоренение проводить в условиях остекленных теплиц. Высаживать микрорастения в кассеты размером 60*60 мм в стерильный субстрат, состоящий из смеси верхового торфа с перлитом в соотношении 1:1.

Но при замене стандартного способа укоренения микрорастений на ex vitro укоренение,следует учитывать сортовые особенности растений, в частности коэффициент размножения.

Также можно рекомендовать предварительную обработку микрорастений раствором ИМК в концентрации 2 мг/л и 5 мг/л в течение семи часов.

Список использованной литературы

1.Абраменко Н.М., Бондаренко П.А., Ткаченко В.Д. Культура in vitro земляники для получения и ускоренного размножения безвирусных клонов. - Всесоюзная 4 конференция. Культура клеток растений и биотехнология, Кишинев: Штиинца, 1983, с. 53-58.

2. Абраменко Н.М., Бондаренко П.А., Ткаченко В.Д., Спиваченко А.Б. Получение безвирусного посадочного материала земляники и ускоренное размножение его в производстве. - В кн.: Вирусные заболевания культурных растений, Кишинев: Штиинца, 1984, с. 3-12.

3.Бутенко Р.Г. Культура изолированных органов, тканей и клеток растений. Вестник АН СССР. - 1968, номер 5. - с. 131-133.

4.Бакун В.К. и др. Система оздоровления и приемы выращивания рассады земляники. - М., 2003.

5.Бакун Т.В. Особенности микроклонального метода размножения земляники. Проблемы вегетативного размножения в садоводстве. -Сб. науч. тр. ТСХА - М., 1985.

6.Ваничев В.П., Ефименко Д.И.. Новое в агротехнике земляники. М.: Московский рабочий, 1983, с. 96.

7.Воронина А.И. Выращивание оздоровленного посадочного материала ягодных культур, 1987, с. 125-128.

8.Высоцкий В.А. Биотехнологические методы в системе производства посадочного материала и селекции плодовых и ягодных растений. - Автореферат (1998), с. 85-93.

9.Высоцкий В.А. Клональное микроразмножение плодовых растений и декоративных кустарников. - Микроразмножение и оздоровление растений в промышленном плодоводстве и цветоводстве. Сборник научных трудов ВНИИСОК (1989), с. 3-8.

10.Высоцкий В.А. О генетической стабильности при микроразмножении плодовых и ягодных культур. - Сельскохозяйственная биология, номер 5 (1995), с. 63-69.

11.Высоцкий В.А. Перспективы внедрения микроразмножения в производство. - Садоводство и виноградарство, номер 12 (1988), с. 32-38.

12.Деменко В.И. Микроклональное размножение плодовых и ягодных культур. Методические указания к практическим занятиям по плодоводству. - М., 1997.

13.Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Издание 2-е. - М., 2005.

14.Жаркова И.В., Чефранова Л.И. Влияние некоторых факторов на микроразмножение земляники. - В сб.: Интенсивные способы выращивания посадочного материала садовых культур, М., 1984, с. 133-138.

15.Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений. -М., 1983.

16.Кашин В.И., Борисова А.А., Приходько Ю.Н., Суркова О.Ю. и др. Технологический процесс получения безвирусного посадочного материала плодовых и ягодных культур. - М., 2001.

17.Попов Ю.Г. оздоровление земляники, пораженной вирусными заболеваниями, с помощью культуры изолированных меристематических верхушек. - Сельскохозяйственная биология, номер 5 (1974), т.9, с. 69-71.

18.Попов Ю.И. - Оздоровление и размножение плодовых и ягодных растений методом культуры меристематических верхушек. Методические указания ВАСХНИЛ, 1979, с. 29.

19.Семенас С.Э., Кухарчик Н.А. Методика клонального микроразмножения сортов земляники садовой. - Беларусь, 2001.

20.Справочник: ягодные культуры. Сост. Ярославцев Е.И. - М., 1988.

21.Справочник: охрана труда в сельском хозяйстве. - М.: Колос., 1979.

22.Трушечкин В.Г. Производство безвирусного посадочного материала земляники. Садоводство, номер 11, 1984.

23.Туровская Н.И., Стрыгина О.В., Альшевцева Л.И. Особенности микроклонального размножения земляники. - Сб. науч. тр. ВНИИ садоводства им. И.В. Мичурина, Мичуринск, 1986, вып. 47, с. 49-56.

24.Указания по оздоровлению и выращиванию посадочного материала земляники (элиты и первой репродукции). - М: Колос, 1969.

25.Чухляев И.И. Садовая земляника и клубника. - М.: Росагропромиздат., 1986.

26.Anderson H.M., Abbott A.J. and Wiltshire S. Micropropagation of strawberry plants in vitro - effect of growth regulators on incidence of multi-apex abnormality. Scientia Hortyculturae, 16, p. 331-341.

27.Borkowska B. Morphological and physiological characteristics of micropropagated strawberry plants rooted in vitro or ex vitro. Scientia Hortyculturae 89, 2001, p. 195-206.

28.Boxus P. Commercial production of strawberry plants produced by meristem culture and micropropagation. In Les Flaralies Internacionales de Montreal. Collogues Scientifigues, 1981, vol. 15, p. 310-348.

29. Boxus P (1974). The production of strawberry plants by in vitro micropropagation. Journal of Horticultural Science, 49, c. 209-10.

30. Hunter S.A., Foxe M.Y., Hennerby M.Y. The influence of temperature and light intensity on the in vitro propagation of strawberry (Fragaria ananasa duch.). Cambridge favourite. Acfa Hortic. The hugue, 1983, p. 153-161.

31.Miller R.N and Belkengren R.O. Elimination of yellow edge, crinkle and vein banding viruses and certain of virus complexes from strawberries by excision and culturing of apical meristems. - Plant Dis. Ref., 1963, p. 298-300.

32.Martinelli A. High tech and micropropagation. 1992, vol. 18.

33.Nichi S. and Oosawa K. Mass production method of virus free strawberry plants through meristem callus. - Agric. Res. Q., 1973, p. 189-194.

Размещено на Allbest.ru