1

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Антагонистическая активность пробиотического препарата «Бацинил» в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и его профилактическая и лечебная эффективность при эндометритах у коров

06.02.02 -- ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Мясникова Н.Г.

Воронеж - 2011

Работа выполнена на кафедре биотехнологии и ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Смоленская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, доцент

Красочко Ирина Александровна

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук

Бригадиров Юрий Николаевич

доктор ветеринарных наук

Шумский Николай Иванович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина»

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. На сельскохозяйственных предприятиях Российской Федерации послеродовые эндометриты наблюдается в среднем у 14,8 % коров, Белоруссии - у 6,6-16,0 %, Канаде - у 11,2 %, Голландии - у 13 % животных от общего числа отелившихся (Валюшкин К.Д., 2001). Одной из основных причин возникновения послеродовых эндометритов является активация условно-патогенной и патогенной микрофлоры на фоне угнетения иммунной системы, нарушений обменных процессов (О.Г.Новиков, 2003; В.С.Бегунов, 2009; О.П.Ивашкевич, 2009 и др.). Ухудшение условий содержания, недостаточное или неполноценное кормление коров и нетелей по витаминам, микро- и макроэлементам (особенно по йоду и селену) в стойловый период увеличивает частоту этого заболевания. Предрасполагающими факторами возникновения послеродовых эндометритов бактериальной этиологии являются различные технологические и экологические факторы - температурный стресс, нарушения в кормлении и содержании, повышенная бактериальная обсемененность помещений и т.д. (В.С. Авдеенко с соавт., 1996; К.Д.Валюшкин, 2001; О.П.Ивашкевич, 2009 и др.).

В последние годы в связи с более глубоким изучением гомеостаза животных знания об этиологии и патогенезе заболевания расширились. Однако многие вопросы остаются мало исследованными или спорными. В настоящее время при большом спектре лекарственных средств и их высокой стоимости особое внимание необходимо обращать на оценку различных способов терапии и профилактики, использовать лишь те препараты и приемы, эффективность которых является бесспорной и подтверждается статистической обработкой результатов исследований. Это необходимо и для совершенствования методов лечения и профилактики заболевания.

В связи с этим во многих странах изыскиваются такие способы лечения послеродовых эндометритов, которые бы в меньшей степени сопровождались осложнениями и в меньшей мере сказывались отрицательно на последующей воспроизводительной функции животных. При разработке новых способов лечения ведется и разработка новых лекарственных препаратов.

В настоящее время одним из основных методов лечения послеродовых эндометритов является использование химиотерапевтических препаратов (В.С.Бегунов, 2009; Г.Ф. Медведев и др. 1998; О.П.Ивашкевич, 2009; О.Г. Новиков, 2002 и др.). Однако их использование часто приводит к ухудшению качества животноводческой продукции - в молоке и мясе до 28 дней находятся остаточные количества применяемых препаратов, что ведет к ограничению использования продукции. В практике ветеринарной службы имеется опыт применения пробиотиков для профилактики и терапии послеродовых эндометритов (И.Я.Шматко, 2001 и др.). Но их применение в настоящее ограничено. Это обусловлено тем, что для решения этой проблемы в настоящее время пробиотиков не выпускается. Их использование не ухудшает качеств продукции и не вызывает осложнений.

В этой связи разработка способов применения пробиотических препаратов для лечения послеродовых эндометритов является актуальной.

Цель и задачи исследования. Целью настоящих исследований явилась разработка пробиотического препарата «Бацинил» для профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить ситуацию по послеродовым эндометритам в хозяйствах Смоленской области и установить роль возбудителей инфекционных заболеваний в их этиологии.

2. Изучить состояние иммунитета и обменных процессов у коров, больных послеродовыми эндометритами.

3. Изучить чувствительность микрофлоры, выделенной от коров, больных послеродовыми эндометритами к бесклеточному пробиотическому препарату «Бацинил».

4. Изучить влияние бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» на обменные процессы и иммунитет животных при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

5. Изучить терапевтическую, профилактическую и экономическую эффективность бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

6. Подготовить методические рекомендации и временную инструкцию по применению бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при профилактике и терапии послеродовых эндометритов.

Научная новизна. Изучена эпизоотическая ситуация, определена этиологическая структура послеродовых эндометритов у коров в Смоленской области, состояние иммунитета и обменных процессов у больных послеродовыми эндометритами коров в хозяйствах Смоленской области.

Научно обоснована возможность применения бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» для профилактики и терапии послеродовых эндометритов бактериальной этиологии у коров.

Установлена высокая профилактическая, терапевтическая и экономическая эффективность применения бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» при послеродовых эндометритах у коров.

Практическая значимость полученных результатов. Результаты экспериментальных исследований дополняют современные знания в области патогенеза и лечения послеродовых эндометритов коров, что позволяет повысить эффективность борьбы с ними. Разработанный способ терапии и профилактики послеродовых эндометритов позволяет значительно сократить длительность заболевания и повысить продуктивность коров.

Применение указанной разработки в условиях производства позволяет в 2-2,5 раза сократить длительность течения послеродовых эндометритов у коров и на 25-35% увеличить продуктивность животных.

На основании проведенных исследований разработаны и утверждены:

- временная инструкция по применению бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» (утверждено Главным управлением ветеринарии Смоленской области 29 сентября 2010 г.);

- инструкция по применению препарата «Бацинил» в ветеринарии (Рассмотрена и одобрена на заседании Ветбиофармсовета Минсельхозпрода Республики Беларусь, протокол № 54 от 15 июля 2010 г.);

- методические указания по применению пробиотических препаратов в животноводстве и ветеринарной медицине (утверждено Главным управлением ветеринарии Смоленской области 18 октября 2010 г.);

- методические указания по применению пробиотических препаратов на основе метаболитов бацилл для сельскохозяйственных животных и птиц (Утверждены ГУВ МСХП РБ 23.07.2010 г. № 10-1-5/86).

Способ терапии и профилактики послеродовых эндометритов с использованием пробиотиков конкурентоспособен в сравнении с аналогами. Окупаемость ветеринарных мероприятий при его использовании для терапии послеродовых эндометритов составляет в среднем 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертации доложены и одобрены на: Международной научной конференции «Проблемы и перспективы развития аграрного производства» (Смоленск, 2007); Volumul 18 include materialele Simpozionului єtiinюific internaюional ”Agricultura modernг-realizгri єi perspective” dedicat aniversгrii a 75 ani ai Universitгюii Agrare de Stat din Moldova (Кишинев, 2008); международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ФГОУ ВПО Смоленская ГСХА «Научное обеспечение аграрного производства в современных условиях» (Смоленск, 2010).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 1 статья в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 125 страницах текста в компьютерном исполнении, включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, изложение собственных исследований, анализ и обобщение результатов исследований, выводы и практические предложения. Список использованной литературы включает 185 наименований работ отечественных и зарубежных авторов. Материалы диссертации иллюстрированы 24 таблицами и 28 рисунками. В приложении приводятся документы, подтверждающие научную и практическую значимость диссертационной работы.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- распространение послеродовых эндометритов у коров в хозяйствах Смоленской области и роль возбудителей инфекционных заболеваний в их этиологии;

- состояние иммунитета и обменных процессов у коров при послеродовых эндометритах;

- разработка и апробация способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов бактериальной этиологии с использованием пробиотического препарата на основе метаболитов бацилл «Бацинил»;

- профилактическая, терапевтическая и экономическая эффективность использования пробиотического препарата на основе метаболитов бацилл «Бацинил» при послеродовых эндометритах.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальная часть работы выполнена на кафедре биотехнологии и ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Смоленская государственная сельскохозяйственная академия» по заданию 08.04.01. «Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высопродуктивных животных» (№ гос. Регистрации 15070 3666026906.06.8.001.2).

Исследования проведены в шесть этапов.

На первом этапе была изучена эпизоотическая ситуация и определена этиологическая структура возбудителей послеродовых эндометритов в животноводческих хозяйствах Смоленской области.

На втором этапе было проведено исследование состояния иммунитета и обменных процессов у коров при послеродовых эндометритах.

На третьем этапе исследования были направлены на проверку антагонистической активности пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл в отношении патогенной и условно-патогенной микрофлоры, выделенной от коров, больных послеродовыми эндометритами.

На четвертом этапе были отработаны оптимальные схемы применения пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл для профилактики и терапии коров, больных послеродовыми эндометритами. Критерием оценки эффективности препарата служили такие показатели, как исчезновение клинических эндометритов, улучшение клинического состояния животных, повышение молочной продуктивности, оплодотворяемость коров.

На пятом этапе были изучены гематологические, биохимические и иммунологические показатели крови телят при использовании пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл при терапии больных послеродовыми эндометритами коров.

На шестом этапе была изучена лечебная, профилактическая и экономическая эффективность пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл для терапии больных послеродовыми эндометритами коров.

В ходе экспериментов использованы серологические, вирусологические, бактериологические, иммунологические, гематологические, биохимические, клинико-эпизоотологические и статистические методы.

Для оценки степени распространения послеродовых эндометритов коров проведен анализ материалов ветеринарной отчетности Главного управления ветеринарии Смоленской области за 2000 - 2009 годы согласно методическим указаниям по эпизоотологическому исследованию И.А. Бакулова (1987).

Серологическими методами (РНГА) исследовались сыворотки крови коров с различным клиническим состоянием репродуктивных органов.

Бактериологическую экспертизу патологического материала, полученного от больных эндометритами коров проводили по общепринятым методикам.

Оценку антагонистической активности проводили методом диффузии в мясо-пептонный агар в отношении выделенных при эндометритах коров микроорганизмов (Staph. еpidermidis, Proteus vulgaris, E.coli, Staph. pyogenes, Staph. aureus, Ps. aeruginosa). Продукты метаболизма бацилл получали после культивирования их на мясо-пептонном бульоне в течение 4-х дней, после чего бактериальные клетки удаляли центрифугированием и стерилизующей фильтрацией.

На поверхность застывшего 4%-го агара наносили культуру тест-культур микроорганизмов в концентрации 500,0 - 1000,0 млн. микробных клеток, помещенных в 1,4-1,6% (мягкий) мясо-пептонный агар. После застывания агара в нем готовили лунки диаметром 9 мм и вносили продукты метаболизма.

Для оценки антагонистической активности метаболитов бацилл измеряли диаметр зоны задержки роста тест-культур.

Для оценки состояния общей неспецифической резистентности организма животных определяли бактерицидную активность сыворотки крови по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1968); концентрацию лизоцима в сыворотках крови - по В.Г. Дорофейчуку (1972) и содержание общего белка в сыворотке крови - с помощью биуретового метода.

Разделение белков на фракции проводили методом электрофореза в агарозном геле с использованием аналитического оборудования и наборов производства фирмы «Sebia» (Франция).

Гематологические исследования проводили на гематологическом анализаторе «Medonic CA 620» (Швеция) с использованием реактивов производства фирмы «Cormey» (Польша), биохимические исследования крови - на биохимическом анализаторе «Фотофермент-1» (Россия) с использованием наборов производства фирмы «Cormey» (Польша).

Биометрическую обработку полученного цифрового материала проводили с помощью персонального компьютера и программы Microsoft Exсel. В качестве доверительного интервала был выбран уровень вероятности Р?0,95 (уровень значимости ?0,05).

Экономическую эффективность применения разработанного препарата рассчитывали согласно «Методике определения экономический эффективности ветеринарных мероприятий» (Москва, 1982 г.).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Причины возникновения и патогенез послеродовых эндометритов коров

3.1.1 Изучение ситуации по заболеваниям органов размножения у коров в хозяйствах Смоленской области

Анализ ветеринарной отчетности Главного управления ветеринарии администрации Смоленской области за 2000-2009 гг. свидетельствует о значительном неблагополучии крупного рогатого скота по заболеваниям органов размножения. В таблице 1 и на рис. 1 представлены данные о заболеваемости коров эндометритами.

Установлено, что в период с 2000 по 2009 гг., несмотря на снижение количества коров в области, заболеваемость их эндометритами остается стабильно высокой. Приведенные данные свидетельствуют о необходимости разработки высокоэффективных средств и методов профилактики и терапии данного заболевания.

3.1.2 Изучение этиологии эндометритов у коров в Смоленской области

Наиболее часто послеродовой эндометрит у коров возникает после аборта (82,4%), при задержании последа (80,7%), и после патологических родов (75,4%). Указанные патологии ведут к нарушению целостности слизистой оболочки матки и к последующему инфицированию условно-патогенной и патогенной микрофлорой. При проведении бактериологического исследования содержимого матки 147 больных эндометритом коров в 95-100% случаев выделяется микрофлора. В таблице 2 представлены частота выделения и состав микрофлоры при послеродовых эндометритах.

Таблица 1

Заболеваемость крупного рогатого скота эндометритами в хозяйствах Смоленской области в 2000-2009 годы

Годы	Поголовье крупного рогатого скота	Из них коров	Получено телят (гол.)	Выход телят (%)	Заболеваемость
					Всего заболело коров (тыс.гол.)	%
2000	220,1	101,8	72,4	67	15,9	15,6
2001	205,6	95,1	72,5	72	16,3	17,1
2002	196,5	89,1	66,2	72	15,9	17,8
2003	180,2	81,0	59,7	70	15,0	18,5
2004	155,3	72,6	58,5	74	13,4	18,4
2005	140,6	68,7	54,9	77	12,7	18,4
2006	132,9	65,0	53,1	78	10,8	16,6
2007	125,2	60,6	48,6	77	10,5	17,3
2008	110,9	53,8	43,1	76	9,5	17,6
2009	104,1	52,8	42,1	78	9,0	17,0

Рис. 1. Заболеваемость коров эндометритами (% от общего количества коров)

Таблица 2

Частота выделения и состав микрофлоры от коров, больных послеродовыми эндометритами

Вид микроорганизма	% выде-ления	Ассоциации	% выде-ления
Staph. epidermidis	12	Proteus vulgaris	8
Proteus vulgaris	12	Staph. epidermidis, Strep. pyogenes, E.coli	12
E.coli	16	Staph. aureus, Str. faecalis, Mucor, Aspergillus flavus, Penicillium, Staph. epidermidis, Proteus vulgaris	16
Strep. pyogenes	8	Proteus vulgaris, Mucor, Ps. aeruginosa, Aspergillus flavus	12
Staph. aureus	12	E.coli, Mucor Aspergillus flaus	4
Ps. aeruginosa	4	Proteus vulgaris, Mucor, Strаp. pyogenes, Aspergillus flavus	4
Aspergilla flaus	8	Staph. aureus, Mucor, Str. pyogenes, Ps. aeruginosa	8
Mucor	20	Staph. epidermidis, Str. faecalis, Mucor, E.coli, Staph. Aureus, Penicillium	20
Penicillium	4	Str. faecalis, Mucor, E.coli	4

При эндометритах наиболее часто выделяются: E.coli (16%), Staph. epidermidis (12%), Proteus vulgaris (12%), Staph. aureus (12%), Str. pyogenes (8%), Ps. aeruginosa (4%), а также Mucor (20%), Aspergillus flavus (8%), Penicillium (8%).

Кроме таких факторов, как задержание последа, патологические роды, аборт, в возникновении послеродовых эндометритов большую роль играют нарушения зоогигиенических и санитарных нормативов. Так, в хозяйствах, где имелись нарушения зоогигиенических норм кормления (недостаток в рационе белка, сахара, микро- и макроэлементов, витаминов), санитарного состояния животноводческих помещений, отсутствие моциона, отмечали 3-4-кратное увеличение животных с послеродовыми эндометритами. При этом у животных регистрировали угнетение клеточного и гуморального звеньев иммунитета, что являлось одним из важных условий возникновения послеродовых эндометритов. На этом фоне происходит активация патогенной и условно-патогенной микрофлоры, которая существенно осложняет течение послеродовых эндометритов.

Таким образом, в возникновении и развитии эндометритов у коров на фоне задержания последа, нарушения сократительной функции матки, инволюции матки, патологических родов, абортов, нарушений технологии содержания коров существенную роль играют возбудители бактериальных инфекций - эшерихии, стафилококки, протеи, псевдомоны и грибы родов аспергиллус, мукор, пенициллус.

3.2 Разработка способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров с помощью бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил»

3.2.1 Изучение антагонистической активности препарата «Бацинилл» в отношении микроорганизмов, выделенных от коров, больных послеродовыми эндометритами

Для разработки способа профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров в качестве основы использован бесклеточный пробиотический препарат «Бацинил». Основой бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил» являются продукты метаболизма спорообразующих бактерий - бацилл (Bacillus subtilis) с высокой антагонистической активностью против возбудителей желудочно-кишечных, респираторных и генитальных инфекций сельскохозяйственных животных.

Антибактериальными активнодействующими веществами в пробиотическом препарате «Бацинил» являются пептиды молекулярной массой 220 и 270 нм, что подтверждено УФ-спектроскопией. Антибактериальные вещества высоко устойчивы к действию протеазы. В их состав входят б- и в-аминокислоты, основные, дигидро- и серусодержащие аминокислоты. Кроме того, в состав препарата входят термостабильные протеазы.

Механизм действия препарата «Бацинил» основан на подавлении роста патогенной и условно-патогенной микрофлоры, а также входящих в состав препарата протеаз, разжижающих омертвевшие ткани и способствующих быстрейшему воздействию антибактериальных веществ препарата на бактерии, осложняющие течение послеродовых эндометритов.

Результаты исследования антагонистической активности разработанного препарата «Бацинил» по отношению к бактериям, выделяемым при послеродовых эндометритах коров, представлены в таблице 3.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что беклеточный пробиотический препарат «Бацинил» обладает широким спектром антагонистической активности в отношении бактериальных возбудителей эндометритов коров.

Таблица 3

Антагонистическая активность «Бацинила» в отношении микроорганизмов, выделенных от больных послеродовыми эндометритами коров.

Серия «Бацинила»	Диаметр зоны задержки роста микроорганизмов, (мм)
	Staph. epidermidis	Proteus vulgaris	E.coli	Staph. pyogenes	Staph. aureus	Ps. aeruginosa
№ 1	25	18	16	11	28	17
№ 2	21	22	15	19	21	22
№ 3	19	20	20	17	25	28
№ 4	22	26	22	22	20	11
№ 5	23	29	18	21	28	19
№ 6	19	31	19	18	30	29
№ 7	29	25	26	28	32	31
M+m	21,8	24,4	17,7	19,5	26,3	22,5

3.2.2 Отработка оптимального способа терапии послеродовых эндометритов коров с помощью бесклеточного пробиотика «Бацинил»

Для отработки терапии послеродовых эндометритов с использованием бесклеточного пробиотика «Бацинил» исследования проводили на клинически здоровых коровах СПК "Селезнёвский", СПК «1-ое Мая», СПК «Крутое» Велижского района Смоленской области. В опыт были взяты коровы в начальной стадии эндометритов. При этом отрабатывались оптимальная доза, способ и кратность введения. Для отработки оптимального способа терапии было сформировано 10 групп больных эндометритами коров по 10-15 голов в группе.

Коровам опытной группы № 1 вводили Бацинил по 15 мл однократно внутриматочно; опытной группы № 2 - по 15 мл однократно внутримышечно; опытной группы № 3 - по 15 мл однократно внутриматочно и внутримышечно; опытной группы № 4 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно; опытной группы № 5 - по 15 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно; опытной группы № 6 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутримышечно; опытной группы № 7 - по 15 мл, 1 раз в сутки 5 дней подряд внутримышечно; опытной группы № 8 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно и внутримышечно; опытной группы № 9 - по 10 мл 1 раз в сутки 5 дней подряд внутриматочно и внутримышечно; коровам контрольной группы внутриматочно вводили гинекологические палочки c фуразолидоном. Данные, полученные в результате исследований, представлены в таблице 4.

Таблица 4

Терапевтическая эффективность бесклеточного пробиотика «Бацинил» при послеродовых эндометритов у коров

Показатели	Опытная группа № 1	Опытная группа № 2	Опытная группа № 3	Опытная группа № 4	Опытная группа № 5	Опытная группа № 6	Опытная группа № 7	Опытная группа № 8	Опытная группа № 9	Контрольная группа
Количество животных в группе, гол	10	10	10	15	15	15	15	15	15	10
Выздоровело животных, голов/%	8/80	6/60	8/80	15/100	15/100	11/73,3	13/86,6	14/93,3	15/100	4/40
Продолжительность лечения, дней	6,00 +0,30	8,30 +0,37	6,80 +0,33	5,00 +0,30	4,80 +0,20	6,50 +0,31	6,00 +0,29	5,50 +0,27	5,30 +0,26	15,70 +0,39
Оплодотворилось после 1 осеменения, голов/%	7/70	5/50	4/70	15/100	15/100	7/46,6	9/60	14/93,3	15/100	4/40

Размещено на http://www.allbest.ru/

Из представленных в таблице данных видно, что оптимальной терапевтической дозой является 15 мл препарата «Бацинил» при его внутриматочном введении 1 раз в сутки 5 дней подряд. При этом терапевтическая эффективность достигает 100%. Однократное внутриматочное введение препарата менее эффективно (80%). Внутримышечное введение препарата имело низкую эффективность как при однократном (60%), так и при 5-кратном введении (73,3-86,6%). Комбинированное применение «Бацинила» - 93,3-100%.

При изучении состояния микрофлоры, выделяемой из половых органов коров после лечения пробиотическим препаратом «Бацинил», установлено, что через 2 дня лечения в содержимом матки в основном содержались эшерихии, протеусы, стафилококки и стрептококки в концентрациях 10³ - 10⁴ КОЕ на 1 г содержимого. Через 5 дней после начала лечения количество вышеуказанных бактерий снизилось 100-500 раз, но в содержимом обнаружено наличие бацилл, входящих в «Бацинил», а также лакто- и бифидобактерии. В конце лечения, после исчезновения истечений из матки количество патогенной микрофлоры было минимальным - отмечены единичные колонии эшерихий, протеусов, стафилококков и стрептококков. Концентрация и лакто-, и бифидобактерий была 10¹ - 10¹ КОЕ на 1 г содержимого. корова послеродовой эндометрит баценил

Таким образом, отработка методов терапии послеродовых эндометритов показала, что наиболее эффективным является внутриматочное или внутриматочно-внутримышечное применение бесклеточного пробиотического препарата «Бацинил». Такая схема позволяет на 40-50% повысить эффективность осеменения животных, снизить до 10-15% количество животных с послеродовыми эндометритами. При их возникновении выздоровление составляло 93,3 - 100% больных животных.

3.2.3 Отработка способа профилактики послеродовых эндометритов коров с помощью бесклеточного пробиотика «Бацинил»

Для отработки способа профилактики послеродовых эндометритов с использованием бесклеточного пробиотика «Бацинил» исследования проводили на клинически здоровых коровах СПК "Селезнёвский". При этом отрабатывались оптимальная доза и кратность введения. Для этого было сформировано 5 групп по 8-9 коров. Коров опытной группы № 1 обрабатывали препаратом «Бацинил» внутриматочно по 10 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд; опытной группы № 2 - по 10 мл 1 раз в сутки с интервалом в 2 дня 3-кратно, опытной группы № 3 - по 15 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд, опытной группы № 4 - по 15 мл 1 раз в сутки с интервалом в 2 дня 3-кратно. Коровы группы № 5 - контроль. Результаты исследований представлены в таблице 5.

Приведенные в таблице данные свидетельствуют, что для профилактики послеродовых эндометритов внутриматочное введение бесклеточного пробиотика «Бацинил» по 10 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд, по 15 мл 1 раз в сутки 3 дня подряд и по 15 мл 1 раз в сутки с интервалом в 2 дня 3-кратно имели одинаково высокую эффективность - 87,5 - 88,9%.

Таблица 5

Эффективность бесклеточного пробиотика «Бацинил» при профилактике послеродовых эндометритов у коров

Показатели	Группы животных
	Опытная группа № 1	Опытная группа № 2	Опытная группа № 3	Опытная группа № 4	Контрольная группа
Кол-во животных в группе, гол	8	9	9	8	8
Заболело, голов/%	1/12,5%	2/22%	1/11,1%	1/12,5%	4/50
Профилактическая эффективность, %	87,5%	77,8%	88,9%	87,5%	-

Таким образом, для профилактики послеродовых эндометритов возбудителями бактериальных инфекций с использованием бесклеточного пробиотика на основе бацилл «Бацинил» оптимальная доза - 10 мл при 3-х кратном использовании 1 раз в день 3 дня подряд.

3.2.4 Влияние пробиотического препарат «Бацинил» на гематологические и биохимические показатели у коров при терапии послеродовых эндометритов

При лечении коров пробиотическим препаратом на основе продуктов метаболизма бацилл «Бацинил» отмечено незначительное его влияние на биохимические и гематологические показатели. У коров, внутриматочно обработанных «Бацинилом», отмечается незначительное повышение уровня общего белка к 12 дню наблюдения с 7,9 до 8,01 г/%, после чего - уменьшение к 20-му дню до исходного уровня - 7,9 г/%. Из белков сыворотки крови, отвечающих за иммунную систему, не отмечено существенных изменений в ходе исследований. Обработка больных послеродовыми эндометритами коров «Бацинилом» оказывает влияние на различные показатели обменных процессов. При этом отмечается увеличение концентрации холестерина, глюкозы, креатинина, но уменьшение уровня мочевины, мочевой кислоты. Также установлено, что активность АЛТ у коров, которые лечились «Бацинилом», достоверно снижается по сравнению с больными коровами, не получавшими препарат. Аналогичная ситуация отмечена и в отношении активности АCТ. Показатели активности щелочной фосфатазы были практически без изменений на протяжении всего опыта. Полученные данные свидетельствуют о нормализации функции печени под действием пробиотического препарата «Бацинил». Также у больных послеродовыми эндометритами коров, леченными «Бацинилом», отмечается достоверное уменьшение количества эритроцитов, но, в то же время, увеличение количества лейкоцитов и гемоглобина. Это свидетельствует об активации гемопоэза и переключения его с эритропоэза на лейкопоэз. У коров в результате лечения «Бацинилом» отмечается снижение эозинофилов на 3,2 - 3,3%, также уменьшается количество моноцитов, палочкоядерных и сегментноядерных нейтрофилов, что свидетельствует о снижении гнойной воспалительной реакции организма и активности фагоцитоза. Но при этом увеличивается количество лимфоцитов, что говорит об активации клеточного иммунитета коров.

Изучение влияния препарата «Бацинил» при профилактике послеродовых эндометритов на обменные процессы и иммунитет показало, что разница показателей в опытной и контрольной группах была незначительна и статистически недостоверна.

3.3 Экономическая эффективность проводимых мероприятий

Производственные испытания пробиотического препарата «Бацинил» проводили в СПК «Селезневский» Велижского района Смоленской области.

Таблица 6

Производственные испытания пробиотического препарата на основе продуктов метаболизма бацилл в СПК «Селезневский» Велижского района Смоленской области

Показатели	Опытная группа	Контрольная группы
Количество животных в группе, гол.	50	45
Продолжительность лечения, дни	5,5+0,6	15,2+2,6
Завершение инволюции половых органов, дни	15,3+2,4	25+2,9
Оплодотворилось после 1-ого осеменения:
всего	50	12
процент	99,8%	26,7%
Затраты на лечение, руб/гол.	30,0	81,0
Продуктивность (литров молока в сутки)	16	14

Для изучения экономической эффективности препарата из заболевших коров с учетом принципа условных аналогов были сформированы 2 группы больных эндометритами коров в возрасте до 3 - 7 лет. Коровам опытной группы (n=50) вводили «Бацинил» внутриматочно в дозе 15 мл 1 раз в сутки в течение 5 дней, контрольной группы (n=45) - антибиотики пролонгированного действия Бицилин-5 внутримышечно 1 раз в 5 дней (3 раза), фуразолидоновые палочки 1 раз в сутки внутриматочно в течение 15 дней подряд; ихтиол 7% внутриматочно 1 раз в сутки с интервалом 3 дня (3 раза). Всех животных перед лечением обрабатывали окситоцином. Результаты испытаний представлены в таблице 6.

Экономический эффект от использования пробиотического препарата «Бацинил» для терапии послеродовых эндометритов у коров составил 771 рублей на 1 животное, а окупаемость ветеринарных мероприятий - 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

ВЫВОДЫ

1. Заболеваемость коров послеродовыми эндометритами в сельхозпредприятиях Смоленской области в период с 2000 по 2009 годы была стабильно высокой - 15,6% - 17,0%. Наиболее часто послеродовой эндометрит у животных регистрируется после аборта (82,4%), при задержании последа (80,7%) и патологических родах (75,4%), при которых происходит нарушение целостности слизистой оболочки матки и инфицирование ее микроорганизмами.

2. При бактериологическом исследовании содержимого матки больных эндометритом коров выделяются E.coli (16%), Staph. epidermidis (12%), Proteus vulgaris (12%), Staph. aureus (12%), Strep. pyogenes (8%), Ps. aeruginosa (4%), а также грибы - Mucor (20%), Aspergillus flavus (8%), Penicillium (8%), участвующие в этиологии и патогенезе послеродовых эндометритов у животных.

3. При серологических исследованиях у коров с послеродовыми эндометритами выявлены антитела в диагностических титрах к вирусу инфекционного ринотрахеита у 96,5% и к возбудителю вирусной диареи (болезни слизистых) - в 98,2% случаях, свидетельствующие о циркуляции указанных вирусных патогенов среди животных и возможном их участии в этиологии и патогенезе послеродовой патологии.

4. У больных послеродовыми эндометритами коров отмечено снижение в крови концентрации фосфора на 37,1%, сахара - на 69,7%, мочевины - на 30,1%, холестерина - на 69,9%, -липопротеидов - на 71%, общих липидов - на 66,4%, по сравнению со здоровыми животными, что свидетельствует о нарушении липидного, углеводного обменов и функции печени, которые играют существенную роль в процессах воспроизводства животных.

5. Содержание Т-лимфоцитов у больных послеродовыми эндометритами коров было достоверно ниже, по сравнению со здоровыми, в 1-й день после заболевания на 7,0%, на 4-й день - на 6,0%, на 7-й день - на 10%, на 15-й день - на 9%, на 25-й день - на 11,2%, но с недостоверной разницей содержания В-лимфоцитов (0,7-4%).Количество «нулевых» лимфоцитов было достоверно выше у больных животных - самый высокий показатель (26,01,4%) наблюдался через 7 дней после родов, что было выше на 41,9%, чем у здоровых коров (р0,05). Наблюдалась повышенная фагоцитарная активность лейкоцитов у здоровых животных в послеродовый период - на 12,7 - 30,7%, по сравнению с больными животными (р0,05), но фагоцитарное число было выше у больных животных. На достоверно высоком уровне находилось количество лизоцима и бактерицидная активность сыворотки крови (р0,05) у здоровых коров во все сроки исследования. Концентрация лизоцима в маточном секрете у больных и здоровых коров на 1-й, 7-й и 15-й дни послеродового периода была на одном уровне, и только на 25-й день после отела количество лизоцима было достоверно выше (р0,05) у здоровых животных - 8,31,2 мкмоль/л у здоровых и 5,90,4 мкмоль/л у больных животных.

6. Установлена высокая антагонистическая активность пробиотического препарата «Бацинил», приготовленного на основе продуктов метаболизма Bacillus subtilis, в отношении микрофлоры, выделяемой при эндометритах коров - Staph. epidermidis, Proteus vulgaris, E.coli, Staph. aureus, Strep. pyogenes, Ps. aeruginosa.

7. Терапевтическая эффективность послеродовых эндометритов коров с использованием пробиотического препарата «Бацинил» при внутриматочном его введении в дозе 15 мл 1 раз в день в течение 5 дней достигает 99,8%, при этом отмечается активизация белкового обмена и нормализация функции печени.

8. Профилактическая эффективность послеродовых эндометритов коров с использованием пробиотического препарата «Бацинил» при внутриматочном его введении в дозе 10 мл 1 раз в день в течение 3 дней составляет 87,5-88,9% и не оказывает отрицательного влияния на гематологические и биохимические показатели организма коров.

9. Экономический эффект от применения коровам при эндометритах бактериальной этиологии пробиотического препарата «Бацинил» составляет 771 рублей на животное, а окупаемость ветеринарных мероприятий - 25,7 рубля на 1 рубль затрат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для терапии больных эндометритом коров рекомендуется применять препарат «Бацинил» внутриматочно в дозе 15мл 1раз в день в течение 5 дней.

Для профилактики эндометритов у коров рекомендуется применять препарат «Бацинил» в дозе 10мл при 3-х кратном использовании 1 раз в день 3 дня подряд.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1*. Камошенков А.Р., Мясникова Н.Г., Красочко П.А., Красочко И.А. Использование фильтрата культуры B. subtilis для терапии эндометритов коров// Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2009. - № 4. - С. 9-12.

2. Красочко И.А., Мясникова Н.Г., Грибко С.М. Этиологическая структура микроорганизмов при заболеваниях органов воспроизводства у коров// Материалы международной научной конференции «Проблемы и перспективы развития аграрного производства» - Смоленск, 2007. - С.468-469.

3. Красочкo И., Мясникова Н. Изучение чувствительности микроорганизмов, выделенных при заболеваниях репродуктивных органов бесклеточным пробиотикам на основе бацилл// Volumul 18 include materialele Simpozionului єtiinюific internaюional „Agricultura modernг-realizгri єi perspective” dedicat aniversгrii a 75 ani ai Universitгюii Agrare de Stat din Moldova Сol red.: N. Eremia, B.Pгsгrin, Єt. Юurcanu [et al.], Chiєinгu, 23-25 septembrie 2008// Chiєinгu, 2008. - Р. 155-156.

4. Красочко И.А., Мясникова Н.Г. Показатели иммунитета у коров при эндометритах и заболеваниях репродуктивных органов// Научное обеспечение аграрного производства в современных условиях. Сборник материалов международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ФГОУ ВПО «Смоленская ГСХА». - Смоленск, 2010. - С. 339-344.

5. Камошенков А.Р., Красочко И.А., Мясникова Н.Г., Кашко Л.С. Изучение чувствительности микроорганизмов, выделенных при заболеваниях репродуктивных органов к бесклеточным пробиотикам на основе бацилл// Актуальные проблемы животноводства и пути их решения: сборник материалов международной научно-практической конференции. Под общ. ред. проф. А.Р. Камошенкова, доц. В.М. Новикова. - Смоленск, 2010. - С. 47-49.

6. Методические указания по применению пробиотических препаратов на основе метаболитов бацилл для сельскохозяйственных животных и птиц/ П.А. Красочко, Э.И. Коломиец, Ю.В. Ломако, Н.Г. Мясникова и др. Утв. ГУВ МСХП РБ 23.07.2010 г. № 10-1-5/86 - Горки: Изд. УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия», 2010. - 34 с.

7. Методические указания по применению пробиотических препаратов в животноводстве и ветеринарной медицине/ П.А.Красочко, А.Р.Камошенков, И.А Красочко, Н.Г. Мясникова и др. Утв. Главным управлением ветеринарии Смоленской области 18 октября 2010 г. - Смоленск, 2010 г. - 52 с.

*- издание из перечня ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК РФ.

Размещено на Allbest.ru

...