Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у спортивных лошадей

Размещено на http://www.allbest.ru/

Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у спортивных лошадей

03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

доктора биологических наук

На правах рукописи

Антонов Андрей Владимирович

Боровск - 2013

Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Рязанский государственный агротехнологический университет имени П. А. Костычева».

Научный консультант: Сергиенко Галина Фёдоровна, доктор биологических наук, профессор.

Официальные оппоненты: Галочкин Владимир Анатольевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией иммунобиотехнологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» Россельхозакадемии;

Джавадов Абульфат Калвалы оглы, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой химии, экологии и землеустройства Мценского филиала ФГБОУ ВПО «Госуниверситет-УНПК»;

Козлов Сергей Анатольевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой скотоводства и коневодства ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина».

Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства» Россельхозакадемии.

Защита состоится 25 сентября 2013 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.030.01 в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» Россельхозакадемии по адресу: 249013, Калужская обл., г. Боровск, пос. Институт.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» Россельхозакадемии.

Автореферат разослан « » 2013 г. и размещен на сайте ВАК Министерства образования и науки РФ vak.ed.gov.ru и на сайте института www.bifip.ru « ___» ______________ 2013 г.

Учёный секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук В. П. Лазаренко

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

работоспособность кислота возрастной гликемия

Актуальность работы. На современном этапе развития конного спорта предъявляются высокие требования к работоспособности лошадей. Вызванное этим повышение тренировочных нагрузок сопряжено с максимальной мобилизацией функциональных резервов организма. Во время соревнований организм лошади работает на пределе возможностей, вследствие чего нередко наблюдается перетренированность и связанные с ней предпатологические состояния, ухудшаются результаты выступлений, снижается спортивное долголетие. Следовательно, проблема совершенствования научно-практической основы для повышения работоспособности и сохранения здоровья лошадей при экстремальных нагрузках во время соревнований остаётся весьма актуальной. Сказанное в наибольшей степени относится к троеборным лошадям, потому что в троеборье нагрузки на лошадь значительно выше, чем в других олимпийских видах конного спорта.

Недостаточно изученным остаётся, в частности, влияние перекисного окисления липидов (ПОЛ) на работоспособность лошадей. Известно, что все достаточно сильные воздействия на организм, в том числе и физические нагрузки, вызывают неспецифическую адаптивную реакцию (стресс). Её обязательным компонентом являются процессы ПОЛ. Они происходят постоянно, а под воздействием стресса их интенсивность, как правило, возрастает. Продукты ПОЛ необходимы для осуществления многих биохимических процессов, но в больших количествах ядовиты (Журавлёв А.И., 1975). В целях сохранения гомеостаза цепные реакции ПОЛ ингибируются антиоксидантной системой, в которую входят витамин Е, каталаза, церулоплазмин, глутатион и другие вещества (Плужников М.С. и др., 1991). Функциональные резервы этой системы ограничены. При недостатке антиоксидантов в организме развивается окислительный стресс - усиление ПОЛ и накопление его токсичных продуктов (Кармолиев Р.Х., 2002).

Установлено, что на ранних стадиях онтогенеза происходят постепенное становление антиоксидантной защиты организма и связанные с этим изменения интенсивности ПОЛ (Рецкий М.И. и др., 2008). У взрослых животных на уровень перекисного окисления липидов и на состояние антиоксидантной системы влияет множество факторов: пол, возраст, физические нагрузки и многие другие. Это показано исследованиями на человеке и лабораторных животных (Нейфах Е.А. и др., 1969; Джафаров А.И., 1981; Мелконян М.М. и др., 1986; Игнатьев А.В., 1987; Пескин А.В., 1987; Чернов И.П. и др., 1997). На лошадей эти закономерности также распространяются (Сергиенко Г.Ф., 1998; White A. et al., 2001; Williams C.A. et al., 2004; Al-Qudah К.М., 2008), но у них влияние различных факторов, в частности, физических нагрузок, на процессы ПОЛ изучено ещё недостаточно.

Для коррекции ПОЛ у спортсменов с целью повышения их работоспособности применяются различные антиоксидантные препараты (Rokitzki L. et al., 1994; Пунякин А.К., 2001; Макарова В.Г., Сауткин М.Ф., 2004). Были также предприняты опыты применения лошадям антиоксидантов, таких, как хлорид марганца (Singh R.K. et al., 1992), аскорбиновая, янтарная и липоевая кислоты (White A. et al., 2001; Williams C.A. et al., 2002; Шестакова А.Н., 2010), витамин Е, препараты селена (Ono K. et al., 1990) и, наконец, сложная смесь антиоксидантов и полиненасыщенных жирных кислот (Fraipont A. et al., 2008). Но таких работ имеется ещё недостаточно, а полученные данные противоречивы, что требует дальнейших исследований в данном направлении. Наиболее перспективным антиоксидантом для лошадей мы считаем липоевую кислоту. Она не токсична, не входит в список запрещённых препаратов и, кроме антиоксидантного, обладает антигипоксическим эффектом. Но антиоксидантное действие липоевой кислоты на организм лошадей изучено мало.

Настоящая работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Рязанский государственный агротехнологический университет им. П.А. Костычева» (тема 26 - «Разработка и совершенствование средств и методов диагностики, лечения и профилактики болезней животных, ветеринарно-санитарный контроль продуктов животноводства», раздел 26.3 - «Перекисное окисление липидов и антиоксидантные системы у спортивных лошадей»).

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучить процессы ПОЛ, становление и функциональное состояние антиоксидантной системы у спортивных лошадей с учётом пола, возраста, физических нагрузок. На основании полученных сведений дать научное обоснование применения липоевой кислоты для коррекции процессов ПОЛ, повышения работоспособности и сохранения здоровья животных.

В задачи исследований входило:

1. Изучить возрастную динамику и половые различия ПОЛ и антиоксидантной системы у жеребят.

2. Исследовать процессы ПОЛ у жеребцов, кобыл и меринов при работе разной интенсивности, на разных стадиях годового тренировочного цикла, в динамике «покой - работа - отдых» и в связи с параметрами неспецифической адаптивной реакции организма.

3. Выявить различия по изучаемым показателям между молодыми лошадьми (4 - 5 лет) и лошадьми старшего возраста (6 лет и старше).

4. Выяснить механизмы антиоксидантной защиты организма лошади при физических нагрузках различной интенсивности и на разных стадиях годового тренировочного цикла.

5. Установить влияние уровня ПОЛ и некоторых показателей антиоксидантной системы на работоспособность лошадей.

6. Изучить возможности применения липоевой кислоты в качестве антиоксиданта для повышения работоспособности лошадей и дать физиолого-биохимическое обоснование применения этого препарата.

Научная новизна. Впервые изучены уровень ПОЛ и функциональное состояние антиоксидантной системы у жеребят в ходе их выращивания в первые полтора года жизни, а также особенности развития антиоксидантной системы у жеребчиков и кобылок в этот период. Показано, что кобылки в ряде случаев отличаются от жеребчиков повышенной активностью антиоксидантных ферментов в плазме крови.

Изучены интенсивность ПОЛ и антиоксидантный статус у троеборных лошадей на разных стадиях годового тренировочного цикла, при нагрузках различной интенсивности и в цикле «покой - работа - отдых». Исследованы различия по уровню ПОЛ и функциональному состоянию антиоксидантной системы между жеребцами, кобылами и меринами, а также между молодыми лошадьми (4 - 5 лет) и лошадьми старшего возраста (6 лет и старше). Показано, что к концу подготовительного периода снижается обеспеченность организма лошадей ?-токоферолом, начинается мобилизация тканевых резервов витамина Е, возрастает нагрузка на антиоксидантную систему, и на фоне этого развивается окислительный стресс, не сопровождающийся, однако, реакцией стресса со стороны кроветворной системы.

Изучено влияние показателей ПОЛ и антиоксидантной защиты на работоспособность троеборных лошадей. Установлено, что хорошая работоспособность лошадей связана с пониженным содержанием в плазме их крови вторичных продуктов ПОЛ (малонового диальдегида), а плохая - с уменьшенным содержанием в плазме крови ?-токоферола, повышенными уровнем малонового диальдегида и активностью церулоплазмина.

Показано, что высокая активность церулоплазмина в плазме крови лошадей, как правило, является признаком усиленной нагрузки на антиоксидантную систему.

Исследовано влияние экзогенной липоевой кислоты на интенсивность перекисного окисления липидов, на функциональное состояние антиоксидантной системы, на уровень глюкозы в крови, на степень тренированности и на работоспособность троеборных лошадей. Дополнены новыми сведениями представления о механизме её действия на обмен веществ в организме работающей лошади. Дано физиолого-биохимическое обоснование для применения этого препарата в спортивной ветеринарии.

Практическая значимость. В процессе исследований выявлены механизмы адаптации антиоксидантной системы лошадей к тренировочным нагрузкам. На основе результатов исследований разработана схема применения липоевой кислоты в качестве антиоксиданта для троеборных лошадей в соревновательный период с целью повышения их работоспособности и сохранения здоровья. Практические рекомендации используются в работе по подготовке спортивных лошадей мастером спорта международного класса, канд. биол. наук Л.А. Борисовой, а также конно-спортивным клубом «Росинант» (Рязанская обл.)

Теоретический материал используется в учебном процессе для студентов ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина», ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет», ФГБОУ ВПО «Костромская государственная сельскохозяйственная академия», ФГБОУ ВПО «Тверская государственная сельскохозяйственная академия» и ФГБОУ ВПО «Рязанский государственный агротехнологический университет им. П.А. Костычева» по курсам физиологии и биохимии животных.

Апробация. Основные положения работы доложены на ежегодных научных конференциях профессорско-преподавательского состава, аспирантов и студентов РГСХА - РГАТУ им. П.А. Костычева (Рязань, 2006 - 2011 г.г.); Международной научной конференции аспирантов и молодых учёных и Всероссийском координационном совещании по научно-исследовательской работе в коневодстве, посвящённым 75-летию профессора, доктора с.-х. наук Г.А. Рождественской (Дивово, 2006 г.); IV Международной научной конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», посвящённой 100-летию со дня рождения академика Н.А. Шманенкова (Боровск, 2006 г.); 10-м Международном конгрессе Всемирной ассоциации конской ветеринарии (Москва, 2008); I Международной Интернет-конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии» (Орёл, 2008); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы животноводства и ветеринарной медицины», посвящённой 90-летию МГАВМиБ им. К.И. Скрябина (Москва, 2009); II Международной научно-практической конференции преподавателей, молодых учёных, аспирантов и студентов «Инновационные процессы в АПК», посвящённой 50-летию РУДН (Москва, 2010); 11-й Международной научно-практической конференции «Болезни лошадей: диагностика, профилактика, лечение» (Москва, 2010); Третьем съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов России (Санкт-Петербург, 2011); объединённом заседании кафедр факультета ветеринарной медицины и биотехнологии ФГОУ ВПО «РГАТУ им. П.А. Костычева» (Рязань, 2011).

Публикации результатов исследований. Результаты исследований изложены в 34 печатных работах, в том числе 12 статей опубликованы в центральных рецензируемых периодических научных изданиях, рекомендованных ВАК.

Положения, выносимые на защиту.

1. Возрастная динамика параметров перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у жеребят в первые 16 месяцев жизни.

2. Динамика показателей перекисного окисления и антиоксидантной защиты у троеборных лошадей на протяжении подготовительного и соревновательного периодов тренинга, а также в цикле «покой - работа - отдых».

3. Половые и возрастные особенности перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у троеборных лошадей.

4. Зависимость работоспособности троеборных лошадей от уровня перекисного окисления липидов и от функциональной активности антиоксидантной системы.

5. Влияние скармливания липоевой кислоты на перекисное окисление липидов, состояние антиоксидантной системы, величину гликемии, тренированность и работоспособность троеборных лошадей.

Структура и объём. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, библиографического списка и приложений. Объём диссертации составляет 322 страницы компьютерного текста. Иллюстрирующий материал состоит из 46 таблиц и 31 рисунка. Библиографический список включает 531 источник, в том числе 218 - на иностранных языках.

2. ОБЪЕКТ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Проведено 5 серий опытов. В первой серии объектом исследований были жеребята русской верховой породы Старожиловского конного завода (Рязанская обл.), в остальных - троеборные лошади различных пород, тренируемые мастером спорта международного класса Л.А. Борисовой (пос. Дивово Рыбновского района Рязанской обл.) Условия кормления, содержания и тренинга лошадей соответствовали зоотехническим нормам. Алгоритм исследований показан на рис. 1.

Материалом исследований была кровь. Взятие крови у всех животных производили из ярёмной вены утром до кормления, а у тренируемых лошадей также после работы и последующего 45-минутного отдыха. Биохимические исследования проводили параллельно с регулярным учётом тренировочных нагрузок, а также контролем состояния здоровья лошадей по общепринятым зоотехническим показателям (внешнему виду, поеданию кормов, поведенческим реакциям в конюшне и на тренировке), определяемым визуально. Тренированность лошадей оценивали по частоте пульса до работы, сразу после неё и после 45-минутного отдыха.

Первая серия исследований проведена на 8 чистопородных жеребятах русской верховой породы (4 жеребчиках и 4 кобылках). Они содержались с матерями до 9-месячного возраста. Взятие крови у жеребят производили в возрасте 2, 5, 13 и 16 мес.

Вторая серия опытов выполнялась в подготовительном периоде тренинга - с ноября 2005 по апрель 2006 г. Объектом исследований служили 12 лошадей в возрасте от 3 до 10 лет, из которых были сформированы три группы: 1-я - четыре жеребца, 2-я - четыре кобылы, 3-я - четыре мерина. Взятие крови производили в начале периода (ноябрь 2005 г.), в середине (март 2006 г.) и в конце (апрель 2006 г.). В дни взятия крови тренировочная нагрузка составляла:

- в ноябре - 15 мин. рысь, 3 мин. шаг, 5 мин. кентер;

- в марте - 15 мин. рысь и дважды по 5 мин. полевой галоп;

- в апреле - 25 мин. рысь и 15 мин. полевой галоп с 15-ю прыжками через препятствия.

В этой же серии опытов те же животные были разделены на 2 группы, по 6 голов каждая, по возрастному признаку: 1 группа - молодые лошади (до 5 лет), и 2 группа - лошади старшего возраста (6 лет и старше), и были исследованы различия между этими группами по всем изучаемым показателям.

Третья серия опытов выполнена с мая по сентябрь 2008 г. Объектом исследования служили 11 троеборных лошадей в возрасте от 3 до 10 лет, в том числе 3 жеребца, 4 кобылы и 4 мерина, участвовавших в этот период в соревнованиях. Взятие крови у лошадей производили в начале, середине и конце периода - соответственно, в мае, июле и сентябре.

В ходе третьей серии опытов нами обследованы также пробы крови этих же лошадей, взятые за 10 дней до старта (n = 10). Одновременно были взяты пробы крови и у лошадей, содержавшихся в тех же условиях, но не участвовавших в соревнованиях (n = 19).

Рисунок 1 - Алгоритм исследований

Из стартовавших лошадей 5 показали хорошую работоспособность (1 - 3 места), а 5 - плохую (сняты с дистанции кросса). В соответствии с этим всю выборку разделили на 3 группы: 1 - нестартовавшие (n = 19), 2 - лучшие (n = 5), 3 - худшие (n = 5) и исследовали различия между этими группами.

Четвёртая серия опытов проведена в середине подготовительного периода (февраль 2009 г.) на 8 троеборных лошадях (3 жеребцах, 2 кобылах и 3 меринах) в возрасте от 4 до 10 лет, разделённых на 2 группы - контрольную и опытную - по 4 головы. Продолжительность исследований составила 22 дня. Лошадям опытной группы в течение этого периода скармливали ежедневно по 500 мг порошка липоевой кислоты. Суточную дозу давали в два приёма - утром и вечером по 250 мг. Животные контрольной группы препарата не получали. Тренировочные нагрузки составляли: в начале эксперимента - 15 мин. рысью и 6-13 мин. полевым галопом, в конце его - 15 мин. рысью и 8-16 мин. полевым галопом. Кровь для определения показателей ПОЛ и антиоксидантной защиты брали перед началом и по окончании опыта.

Пятая серия опытов проведена в соревновательный период 2009 и 2010 г.г. В 2009 г. исследования проведены на 8 троеборных лошадях в возрасте от 5 до 10 лет, разделённых на 2 группы - контрольную и опытную - по 4 головы. В каждой группе были 1 жеребец, 1 кобыла и 2 мерина. Лошадям опытной группы скармливали ежедневно по 500 мг порошка липоевой кислоты. Суточную дозу давали в два приёма - утром и вечером по 250 мг. Проведено два курса применения препарата продолжительностью по 21 дню с интервалом между курсами в 1 месяц. Животные контрольной группы препарата не получали. Тренировочные нагрузки составляли: в начале эксперимента - 20 - 25 мин. рысь и 7 - 9 мин. полевой галоп, в конце первого курса - 20 мин. рысь и 7 мин. полевой галоп с 30-ю прыжками через препятствия, в конце 2 - го курса - 15 мин. рысь и 5 - 8 мин. полевой галоп. Кровь для биохимических анализов брали перед началом опыта и по окончании каждого курса применения препарата. В 2010 г. в контрольную и в опытную группу вошли по 2 головы (1 жеребец и 1 мерин). Лошади опытной группы получали липоевую кислоту в той же дозировке, что и в 2009 г, но было проведено четыре курса применения препарата по 21 дню с интервалами между курсами по 1 месяцу. Лошади контрольной группы препарата не получали. В течение всей 5-й серии опытов учитывали работоспособность лошадей по результатам их выступлений на соревнованиях по троеборью.

Методы клинического и биохимического анализа крови.

В плазме крови определяли продукты ПОЛ: первичные - диеновые конъюгаты (ДК) (Гаврилов В.Б. и др., 1983) и вторичные - малоновый диальдегид (МДА) (Андреева Л.И. и др., 1988), а также антиоксиданты: ?-токоферол - спектрофотометрическим методом, разработанным нами совместно с канд. биол. наук В.Г. Мемедейкиным (ВНИИ коневодства); активность каталазы (Королюк М.А. и др., 1988) и церулоплазмина (Кальницкий Б.Д. и др., 1988). В цельной крови определяли общий, окисленный и восстановленный глутатион (Кудрявцев А.А., 1952) и глюкозу - глюкометром «Horizont». Стадию неспецифической адаптивной реакции определяли по процентному содержанию лимфоцитов в лейкоцитарной формуле.

Биометрическая обработка результатов исследований проведена с помощью компьютерных программ TBAS и “Excel”.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Первая серия опытов. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у жеребят

Содержание малонового диальдегида (МДА) в плазме крови у жеребят в 5-месячном возрасте по сравнению с 2-месячным увеличилось незначительно, а к 13-месячному достоверно снизилось на 48,0 % (P < 0,01) (табл. 1). В 16 мес. оно снова повысилось, но не достигло первоначальной величины. Таким образом, на первом году жизни ПОЛ в целом шло интенсивнее, чем на втором.

Таблица 1 - Содержание малонового диальдегида и антиоксидантов в крови у жеребят

Показатели	Жеребчики (n=4)	Кобылки (n=4)	В среднем (n = 8)
2 месяца
МДА, мкмоль/л	5,92±0,36	5,40±0,16	5,66±0,16
Каталаза, мкмоль/л·с	16,9±2,3	10,8±2,7	12,6±3,0
Церулоплазмин, мкмоль/л·с	0,17±0,02	0,34±0,02	0,26±0,04
5 месяцев
МДА, мкмоль/л	6,67±1,53	5,55±0,86	6,10±0,78
Каталаза, мкмоль/л·с	72,0±8,22***	81,1±10,6***	76,7±7,0***
Церулоплазмин, мкмоль/л·с	1,24±0,40***	0,99±0,15***	1,11±0,19***
Общий глутатион, мг/л	5,40±0,27	6,52±2,33	5,85±0,80
13 месяцев
МДА, мкмоль/л	2,84±0,24*	3,44±0,67	3,17±0,36**
Каталаза, мкмоль/л·с	31,9±0,7***	95,5±19,2	63,7±15,1
Церулоплазмин, мкмоль/л·с	1,22±0,10	1,30±0,07	1,26±0,06
Общий глутатион, мг/л	3,12±0,16***	2,59±0,23	2,85±0,16***
16 месяцев
МДА, мкмоль/л	5,62±0,79***	4,06±0,11	4,84±0,73*
Каталаза, мкмоль/л·с	73,5±7,7***	98,2±2,2	86,0±5,7
Церулоплазмин, мкмоль/л·с	0,57±0,13***	0,59±0,06***	0,58±0,07***
Общий глутатион, мг/л	7,38±0,39***	8,65±0,66***	8,10±0,44***

Достоверность разницы с предыдущим взятием крови: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001



Рисунок 2 - Отношение окисленного глутатиона к восстановленному в крови у жеребят

Активность каталазы в 5-месячном возрасте по сравнению с 2-месячным возросла на 508,7 % (P < 0,001), а церулоплазмина - на 326,9 % (P < 0,001). Затем достоверных изменений активности каталазы не последовало. Активность церулоплазмина на 13-м месяце изменилась незначительно, а на 16-м снизилась на 54,0 % (P < 0,001). Это снижение можно объяснить тем, что в это время (середина мая) начался пастбищный сезон, а молодая трава содержит мало меди, которая является коферментом церулоплазмина. Таким образом, в течение первых 5 месяцев жизни у жеребят происходило постепенное становление ферментативного звена антиоксидантной системы. Это способствовало последующей стабилизации уровня ПОЛ, отмеченной выше.

У кобылок наблюдалась повышенная по сравнению с жеребчиками активность каталазы: в возрасте 13 мес. на 199,0 % (Р < 0,001), 16 мес. - на 33,6 % (Р < 0,01). В 2-месячном возрасте кобылки превосходили жеребчиков по активности церулоплазмина на 100,0 % (Р < 0,001).

Соотношение между окисленной и восстановленной формами глутатиона в возрасте 5 и 13 мес. было примерно одинаковым, а в 16 мес. - повысилось (рис. 2). Это свидетельствует о возрастании нагрузки на антиоксидантную систему на фоне уменьшения активности церулоплазмина, отмеченного выше. Отношение окисленного глутатиона к восстановленному у кобылок в 5 и 13 мес. было выше, чем у жеребчиков. Следовательно, у кобылок становление антиоксидантной защиты шло с большим напряжением в работе системы глутатиона. Она могла хуже справляться со своей функцией, что и приводило к повышенной активности каталазы и церулоплазмина.

Вторая серия опытов. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у троеборных лошадей в подготовительном периоде тренинга.

Уровень диеновых конъюгатов (ДК) в плазме крови у всех лошадей, измеренный в покое, к концу периода по сравнению с началом изменился незначительно (табл. 2). Увеличение этого показателя на 165,4 % (P < 0,001) после работы отмечено в конце периода, а снижение его после отдыха - в начале и в конце этого периода. Таким образом, уровень ДК в плазме крови у лошадей во время работы возрастает только при интенсивных нагрузках. Снижение же его после отдыха возможно и при меньшей интенсивности работы. Оно может быть обусловлено как дальнейшим окислением ДК, образовавшихся в момент работы, так и снижением уровня их продукции.

В конце периода по сравнению с началом содержание МДА в плазме крови лошадей, измеренное до работы, возросло на 85,6 % (P < 0,001) (табл. 3). Следовательно, в организме лошадей в течение подготовительного периода постепенно накапливались токсичные продукты ПОЛ.

После работы в начале периода у жеребцов и кобыл концентрация МДА в плазме достоверно повышалась, а у меринов имела тенденцию к снижению. В среднем по всему поголовью прирост уровня МДА составил 57,7 % (Р < 0,01). Эти тенденции сохранились и в середине периода. В конце периода после работы у всех лошадей уровень МДА возрастал в среднем на 16,6 % (Р < 0,05). Относительная величина прироста уровня МДА не была прямо связана с интенсивностью нагрузок и к концу подготовительного периода уменьшилась по сравнению с началом.

После отдыха в начале периода у всех животных уровень МДА снижался в среднем на 46,1 % (Р < 0,05). В середине периода он также снижался, но менее значительно, а в конце - почти не изменялся. Возможно, в конце периода продукция МДА непосредственно в момент работы усиливалась не столь значительно, как в начале, но её повышенный уровень сохранялся и во время отдыха, а вывод МДА из организма был затруднён.

На всём протяжении периода в покое наименьшее содержание МДА в плазме отмечено у кобыл, а наибольшее - у меринов, вероятно, вследствие антиоксидантного эффекта стероидов, особенно эстрогенов. Наши данные свидетельствуют также в пользу антиоксидантного действия андрогенов, хотя и менее выраженного. У меринов наиболее высокий уровень МДА до работы наблюдался, очевидно, из-за практического отсутствия половых гормонов. К концу подготовительного периода, при интенсивных нагрузках, половые различия по уровню МДА почти исчезли, и половые гормоны уже не играли такой важной роли в антиоксидантной защите организма, как в предыдущие периоды.

В начале и в середине периода во время работы у меринов уровень МДА в плазме имел тенденцию к снижению, в отличие от жеребцов и кобыл. Это можно объяснить тем, что в некоторых случаях тестостерон обладает свойствами прооксиданта. Возможно, это имело место во время работы. Не

Таблица 2 - Содержание диеновых конъюгатов в плазме крови у лошадей в подготовительном периоде, усл. ед.1

Этап периода

Жеребцы (n = 4)

Кобылы (n = 4)

Мерины (n = 4)

В среднем (n = 12)

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Начало (ноябрь)

97,3 ±14,7

100,3 ±11,8

78,3 ±5,8

107,8 ±17,2

98,0 ±15,0

89,8 ±21,3

104,8 ±30,8

114,3 ±11,3

76,0 ±16,8

103,3 ±11,6

104,1 ±7,0

81,3 ±8,6

Середина (март)

88,3 ±8,3

85,0 ±2,0

76,3 ±7,5

81,6 ±1,6

71,0 ±22,3

78,3 ±4,4

91,7 ±4,4

80,0 ±5,8**

86,7 ±4,4

87,2 ±3,1

79,3 ±6,3**

80,0 ±3,5

% к предыдущему

90,8

84,4

97,4

75,7

72,4

87,2

87,5

70,0

114,1

84,4

76,2

98,4

Конец (апрель)

80,0 ±5,1

218,0 ±38,0 ***

151,0 ±20,0 ***

117,5 ±9,2 ***

225,3 ±47,9 **

134,3 ±5,5 **

137,7 ±14,7 **

261,0 ±41,6 ***

218,3 ±40,3 **

109,4 ±8,9*

236,9 ±23,1 ***

170,0 ±20,0 ***

% к предыдущему

90,6

256,5

197,9

144,0

317,3

171,5*

150,1

326,3

251,8

125,5

298,7

212,5

? - 1 усл. ед. - единица оптической плотности, умноженная на 1000.

Достоверность разницы с предыдущим этапом подготовительного периода: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001

Таблица 3 - Содержание малонового диальдегида в плазме крови у лошадей в подготовительном периоде, мкмоль/л

Этап периода

Жеребцы (n = 4)

Кобылы (n = 4)

Мерины (n = 4)

В среднем (n = 12)

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Начало (ноябрь)

1,41 ±0,56

3,78 ±0,71

1,80 ±0,22

1,35 ±0,35

3,04 ±0,33

1,71 ±0,26

2,93 ±0,66

2,16 ±0,12

1,46 ±0,36

1,94 ±0,31

3,06 ±0,33

1,65 ±0,14

Середина (март)

3,00 ±0,2**

3,77 ±0,34

2,64 ±0,37

2,35 ±0,67

2,56 ±0,29

1,55 ±0,63

4,38 ±0,60

3,63 ±0,90

2,45 ±0,77

3,22 ±0,34**

3,36 ±0,31

2,26 ±0,31

% к предыдущему

212,8

99,7

146,7

174,1

84,2

90,6

149,5

168,1

167,8

166,0

109,8

137,0

Конец (апрель)

3,90 ±0,20**

4,08 ±0,16

4,28 ±0,28***

3,18 ±0,35

3,56 ±0,38*

3,69 ±0,26**

3,74 ±0,38

4,93 ±0,19

4,67 ±1,23

3,60 ±0,19

4,20 ±0,26

4,13 ±0,34***

% к предыдущему

130,0

108,2

162,1

135,3

139,1

238,1

85,4

135,8

190,6

111,8

125,0*

182,7

Достоверность разницы с предыдущим этапом подготовительного периода: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001

Не следует исключать возможности прооксидантного действия и женских стероидов.

Таким образом, в течение подготовительного периода в покое уровень первичных стадий ПОЛ (продукция ДК) возрастал не столь значительно, как уровень вторичных стадий (продукция МДА), что приводило к накоплению последнего в организме, а это считается главным признаком окислительного стресса. Во время работы первичные стадии ПОЛ усиливались только в конце периода. А усиление вторичных стадий во время работы было наиболее выражено в начале периода из-за того, что в это время антиоксидантная система ещё не могла немедленно реагировать на нагрузки. На последующих этапах тренинга она приобрела такую способность вследствие адаптации к возрастающим нагрузкам. После отдыха показатели ПОЛ или снижались, или оставались на том же уровне, что и во время работы, но никогда не возрастали. Наиболее очевидной причиной этого была активация антиоксидантной системы, вызванная предыдущими нагрузками. Но к концу периода повышенный уровень вторичных стадий ПОЛ сохранялся после работы более длительное время. Вот почему в начале периода снижение уровня ДК после отдыха сопровождалось также снижением МДА, а в конце при снижении ДК содержание МДА практически не менялось. Поэтому в начале периода наблюдаемое после отдыха уменьшение содержания диеновых конъюгатов в крови можно объяснить усиленной работой антиоксидантной системы и почек, а в конце - дальнейшим окислением ДК с образованием МДА. Возможно, это и привело к накоплению последнего в течение подготовительного периода.

Уровень ?-токоферола, измеренный до работы, у всех животных в течение периода достоверно снизился на 84,9 % ( Р < 0,001) (табл. 4). Это было одной из причин развития окислительного стресса у лошадей. В цикле «покой - работа - отдых» в начале и в середине периода содержание ?-токоферола в плазме у всех лошадей снижалось, а в конце - возрастало. В результате уровень ?-токоферола после отдыха был ниже, чем перед работой: в начале периода на 35,2 % (Р < 0,001), а в середине периода на 57,7 % (Р < 0,001). В конце периода уровень ?-токоферола после отдыха возрос по отношению к измеренному до работы на 127,4 % (Р < 0,001). Достоверных различий между жеребцами, кобылами и меринами на всём протяжении периода не обнаружено. Уменьшение концентрации ?-токоферола в плазме крови у лошадей в цикле «покой - работа - отдых» в начале и в середине периода мы объясняем истощением запасов восстановленной формы витамина Е как во время работы, так и при последующем восстановлении гомеостаза, а её возрастание в конце периода - мобилизацией резервов из печени и жировой ткани.

Активность каталазы, измеренная до работы, у всех лошадей в середине периода по сравнению с началом увеличилась на 146,8 % (Р < 0,001), а в конце по сравнению с серединой уменьшилась на 43,7 % (Р < 0,001) (табл. 5). Значительных различий между группами не было. В начале периода у всех животных после отдыха активность каталазы была выше, чем до работы, в среднем на 42,7 % (Р < 0,05).

Таблица 4 - Содержание ?-токоферола в плазме крови у лошадей в подготовительном периоде , мкмоль/л

Этап периода

Жеребцы (n = 4)

Кобылы (n = 4)

Мерины (n = 4)

В среднем (n = 12)

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Начало (ноябрь)

72,8 ±10,2

78,7 ±6,4

52,3 ±2,6

68,9 ±5,2

65,2 ±4,3

53,4 ±10,4

70,2 ±3,9

48,7 ±0,3

32,7 ±3,0

70,4 ±3,3

64,1 ±4,7

45,6 ±4,7

Середина (март)

22,8 ±4,9 ***

20,8 ±3,8 ***

11,9 ±1,3 ***

18,3 ±4,3 ***

14,7 ±1,5 ***

8,3 ±0,5 ***

31,0 ±1,0 ***

32,0 ±5,5 **

9,5 ±1,1 ***

23,9 ±2,7 ***

22,3 ±3,0 ***

10,1 ±0,8 ***

% к предыдущему

31,3

26,4

22,8

26,6

22,5

15,5

44,2

65,7

29,1

33,9

34,8

22,1

Конец (апрель)

9,2 ±0,8 **

9,6 ±1,0 **

11,3 ±4,3

12,2 ±1,1

22,6 ±5,8

21,6 ±2,1 ***

10,5 ±0,5 ***

17,9 ±2,5 *

35,2 ±2,8 ***

10,6 ±0,6 ***

17,6 ±2,8

24,1 ±3,8 ***

% к предыдущему

40,4

46,2

95,0

66,7

153,7

260,2

33,9

55,9

370,5

44,4

78,9

238,6

Достоверность разницы с предыдущим этапом подготовительного периода: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001

Таблица 5 - Активность каталазы в плазме крови у лошадей в подготовительном периоде, мкмоль/л·с

Этап периода

Жеребцы (n = 4)

Кобылы (n = 4)

Мерины (n = 4)

В среднем (n = 12)

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Начало (ноябрь)

36,2 ±11,6

63,7 ±4,7

70,3 ±8,2

47,4 ±15,3

62,2 ±5,2

65,7 ±5,3

56,2 ±6,5

36,7 ±14,1

63,5 ±7,0

46,6 ±7,2

55,7 ±7,0

66,5 ±5,2

Середина (март)

111,1 ±12,9***

111,1 ±5,5***

110,9 ±5,5***

116,0 ±3,5***

83,0 ±14,7

98,4 ±16,8

123,8 ±21,8**

71,0 ±5,5*

85,2 ±11,0

115,0 ±7,7***

90,6 ±7,6***

99,4 ±6,6***

% к предыдущему

306,9

174,4

157,8

244,7

133,4

149,8

220,3

193,5

134,2

246,8

162,7

149,5

Конец (апрель)

70,0 ±7,0**

63,7 ±2,5***

56,6 ±7,6***

68,6 ±6,9***

52,2 ±10,9

71,7 ±2,6

55,7 ±7,6**

55,0 ±7,2

42,8 ±13,0*

65,7 ±3,8***

56,3 ±4,9***

57,2 ±6,7***

% к предыдущему

63,0

57,3

51,0

59,1

62,9

72,9

45,0

77,5

50,2

57,1

62,1

57,5

Достоверность разницы с предыдущим этапом подготовительного периода: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001

Таблица 6 - Активность церулоплазмина в плазме крови у лошадей в подготовительном периоде, мкмоль/л·с

Этап периода

Жеребцы (n = 4)

Кобылы (n = 4)

Мерины (n = 4)

В среднем (n = 12)

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Покой

Работа

Отдых

Начало (ноябрь)

0,75 ±0,01

0,92 ±0,09

0,73 ±0,04

0,94 ±0,09

0,79 ±0,07

0,78 ±0,05

0,95 ±0,11

0,73 ±0,07

0,68 ±0,09

0,89 ±0,12

0,84 ±0,04

0,73 ±0,04

Середина (март)

0,78 ±0,02

0,92 ±0,05

0,67 ±0,02

0,88 ±0,15

0,78 ±0,02

0,75 ±0,03

0,74 ±0,37

0,67 ±0,10

0,63 ±0,02

0,79 ±0,16

0,80 ±0,05

0,68 ±0,08

% к предыдущему

104,0

100,0

91,8

93,6

98,7

96,2

77,9

91,8

92,6

88,8

95,2

93,2

Конец (апрель)

1,09 ±0,08 ***

1,08 ±0,02 **

1,12 ±0,04 ***

1,22 ±0,09

1,30 ±0,04 ***

1,28 ±0,04 ***

1,15 ±0,16

1,23 ±0,16 **

1,33 ±0,16 ***

1,16 ±0,21

1,21 ±0,07 ***

1,26 ±0,02 ***

% к предыдущему

139,7

117,4

167,2

138,6

166,7

170,7

155,4

183,6

211,1

146,8

151,3

185,3

Достоверность разницы с предыдущим этапом подготовительного периода: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001

Таблица 7 - Содержание глутатиона и его фракций в крови у лошадей (n = 12) в подготовительном периоде, мг/л

Фракции глутатиона	Начало периода (ноябрь)	Середина периода (март)	Конец периода (апрель)
	Покой	Работа	Отдых	Покой	Работа	Отдых	Покой	Работа	Отдых
Общий	3,50 ±0,15	4,28 ±0,18	4,30 ±0,22	4,21 ±0,19**	4,23 ±0,24	4,16 ±0,22	4,88 ±0,23*	4,78 ±0,32	5,00 ±0,33*
Восстановленный	2,12 ±0,11	2,56 ±0,10	2,85 ±0,23	2,66 ±0,10***	2,75 ±0,15	2,69 ±0,15	3,52± 0,21***	3,05± 0,46	3,16± 0,33
Окисленный	1,47 ±0,10	1,72 ±0,16	1,54 ±0,15	1,52 ±0,10	1,49 ±0,13	1,47 ±0,09	1,28 ±0,15	1,73 ±0,21	1,84 ±0,17
Окисл./восстан.	0,70	0,67	0,54	0,57	0,54	0,55	0,36	0,57	0,58
Восстан./общий	0,61	0,59	0,66	0,63	0,63	0,65	0,71	0,64	0,58

Достоверность разницы с предыдущим этапом подготовительного периода: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,01; *** - Р < 0,001

В середине и в конце периода такой закономерности уже не наблюдалось. Полагаем, что в начале периода активность каталазы возрастала и при работе, и сразу после неё за счёт мобилизации резервов фермента из пероксисом. К середине периода интенсивность биосинтеза каталазы возросла, что отразилось на величине его исходного уровня, но функциональные резервы уже были близки к исчерпанию. Вот почему после работы активность каталазы уже не повышалась. В конце же периода эти резервы были истощены, поэтому и исходный уровень был снижен, и в цикле «покой - работа - отдых» он не возрастал. Снижение активности каталазы в конце подготовительного периода могло быть связано и с дефицитом ?-токоферола в плазме крови лошадей.

Значительных изменений активности церулоплазмина в течение периода, в цикле «покой - работа - отдых», а также межгрупповых различий по ней не обнаружено (табл. 6). Отмечена только тенденция к возрастанию её в конце периода. Возможно, это имело целью компенсировать недостаток других антиоксидантов.

Содержание общего глутатиона в крови у всех лошадей в конце периода по сравнению с началом возросло на 39,4 % (Р < 0,001), а восстановленного - на 66,0 % (Р < 0,001) (табл. 7). Содержание окисленного глутатиона за это время недостоверно снизилось на 12,9 %. Доля окисленного глутатиона за это время уменьшилась. Таким образом, резервы общего и восстановленного глутатиона в период с ноября по апрель увеличились, очевидно, вследствие сезонных ритмов в работе эндокринной системы, регулирующей его биосинтез. В начале периода после работы наблюдался рост уровня общего глутатиона после работы в среднем на 22,3 % (Р < 0,001), а восстановленного на 20,8 % (Р < 0,01). Повышенное содержание общего и восстановленного глутатиона сохранялось и после отдыха. Возможно, усиление ПОЛ во время работы стимулировало синтез глутатиона в клетках и тканях. В середине и в конце периода таких изменений не отмечено. С другой стороны, в конце периода при работе резко возрастало отношение окисленного глутатиона к восстановленному и снижалось отношение восстановленного к общему. Следовательно, в этом случае окисление глутатиона шло наиболее интенсивно.

В начале и в середине периода у всех лошадей наблюдалась реакция повышенной активации кроветворной системы (более 44 % лимфоцитов в лейкоформуле) (рис. 3). В конце периода степень активации защитных сил организма понизилась и приблизилась к оптимальному значению. У всех животных на всех этапах периода во время работы процентное содержание лимфоцитов в лейкоцитарной формуле возрастало, а после отдыха - убывало. Следовательно, нагрузки способствовали активации кроветворной функции тимуса. Снижение содержания лимфоцитов в данном случае не вызвано истощением функциональных резервов кроветворной системы, а отражает положительные сдвиги, произошедшие за это время в организме всех лошадей вследствие регулярного тренинга.

Таким образом, в течение подготовительного периода троеборные лошади адаптируются к возрастающим нагрузкам. Адаптация сопровождается развитием окислительного стресса.

Рисунок 3 - Процентное содержание лимфоцитов в лейкоцитарной формуле у лошадей (n = 12) в подготовительном периоде

Он выражается в накоплении в организме малонового диальдегида и в повышении нагрузки на антиоксидантную систему. Однако всё это не приводит к реакции стресса в обычном понимании, одним из признаков которой является уменьшение содержания лимфоцитов в лейкоцитарной формуле ниже нормы.

Возрастные особенности перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у троеборных лошадей

На всём протяжении подготовительного периода установленные нами общие закономерности, рассмотренные выше, распространялись и на молодых лошадей (4 - 5 лет, 1-я группа), и на лошадей старшего возраста (6 лет и старше, 2-я группа). Однако отмечены некоторые различия между этими группами.

Содержание МДА в плазме крови у животных 2-й группы на протяжении всего периода было выше, чем у лошадей 1-й группы, хотя и недостоверно (рис. 4). В конце периода по сравнению с началом оно возросло: в 1-й группе на 120,5 % (Р < 0,01), во 2-й - на 65, 8 % (Р < 0,001). В начале периода после работы концентрация МДА в плазме крови также увеличивалась: в 1-й группе на 99,4 % (Р < 0,05), во 2-й - на 25,9%. После отдыха уровень МДА снижался: в 1-й группе на 48,0 % (Р < 0,05), во 2-й - на 44,6 % (Р < 0,01). В середине периода после работы содержание МДА в плазме у всех лошадей изменялось незначительно, а после отдыха снижалось: в 1-й группе - на 17,6 %, во 2-й - на 45,5 % (Р < 0,01). В конце периода значительных межгрупповых различий не обнаружено. Таким образом, у молодых лошадей интенсивность вторичных стадий ПОЛ в начале периода была несколько ниже, чем у лошадей старшего возраста, но в течение периода усиливалась быстрее, и к концу его значения этого показателя в обеих группах практически сравнялись.



Рисунок 4 - Содержание малонового диальдегида в плазме крови у лошадей разного возраста в подготовительном периоде, мкмоль/л

У лошадей старшего возраста в начале периода увеличение уровня МДА в плазме в момент работы было менее значительным, а в середине периода спад этого показателя во время отдыха - более выраженным, чем у молодых лошадей. Это можно объяснить большей надёжностью антиоксидантной системы, приобретённой в ходе ежегодных тренировок.

Достоверных межгрупповых различий по активности каталазы, измеренной в покое, на всех этапах периода не отмечено. В течение периода в обеих группах величина этого показателя изменялась одинаково (рис. 5). Но в начале периода после работы у лошадей 1-й группы она повышалась на 50,5 % (Р < 0,05), а у животных 2-й группы недостоверно снижалась на 27,4 %. После отдыха она в 1-й группе почти не изменилась, а во 2-й возросла на 49,1 %. Вследствие этого активность каталазы после отдыха была выше, чем до работы: в 1-й группе на 48,3 %, во 2-й на 8,3 %. В середине и конце периода все изменения активности каталазы в цикле «покой - работа - отдых» в обеих группах были недостоверными. Таким образом, в начале периода возрастание активности каталазы и после работы, и после отдыха отмечено только у молодых лошадей. Возможно, это связано с тем, что они ещё не были адаптированы к нагрузкам. Известно, что каталаза является звеном антиоксидантной системы, немедленно реагирующим на усиление ПОЛ. Выше нами показано, что именно у молодых лошадей в начале периода во время работы наблюдалось максимальное возрастание уровня МДА в плазме. Этим, по всей видимости, и было обусловлено одновременное возрастание активности каталазы. На последующих этапах тренинга у молодых лошадей антиоксидантная система достигла такого же уровня адаптации к колебаниям ПОЛ, что и у лошадей старшего возраста, а в конце у всех животных началось истощение резервов биосинтеза каталазы.

Рисунок 5 - Активность каталазы в плазме крови у лошадей разного возраста в подготовительном периоде, мкмоль/л·с

Рисунок 6 - Активность церулоплазмина в плазме крови у лошадей разного возраста в подготовительном периоде, мкмоль/л·с

Следовательно, возрастные различия по активности каталазы имели место только в начале подготовительного периода и только в момент работы и непосредственно после неё, но не в покое.

Межгрупповые различия по активности церулоплазмина на всех этапах подготовительного периода были недостоверными (рис. 6). Однако в конце периода по сравнению с началом она увеличилась: в 1-й группе на 51,9 % (Р < 0,001), во 2-й - на 9,3 %. Если учесть, что биосинтез церулоплазмина обычно усиливается при неблагоприятных метаболических сдвигах, чтобы воспрепятствовать развитию окислительного стресса, то следует сделать вывод, что у молодых лошадей к концу подготовительного периода нагрузка на антиоксидантную систему возрастает в большей степени, чем у

животных старшего возраста. Возрастание активности церулоплазмина могло быть вызвано повышением содержания МДА в плазме, более выраженным у молодых лошадей.

Третья серия опытов. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у троеборных лошадей в соревновательном периоде тренинга.

Содержание ДК в плазме крови у лошадей в течение соревновательного периода (с мая по сентябрь) возросло на 127,8 % (P < 0,001), а МДА - на 125,9 % (Р < 0,001) (табл. 8). Причём, если содержание ДК повышалось только в первой половине периода (до июля), то тенденция к увеличению уровня МДА сохранилась и во второй половине периода. Следовательно, в течение соревновательного периода в организме лошадей развивался окислительный стресс. К концу этого периода интенсивность вторичных стадий ПОЛ возрастала в большей степени, чем интенсивность начальных стадий.

Таблица 8 - Содержание продуктов перекисного окисления липидов и антиоксидантов в плазме крови у лошадей (n = 11) в соревновательном периоде

Показатели	Май	Июль	Сентябрь
ДК, усл. ед.1	42,7±4,6	85,7±3,3***	83,1±4,8
МДА, мкмоль/л	2,43±0,30	4,38±0,45***	5,49±0,49
Каталаза, мкмоль/л·с	72,0±3,6	125,6±17,9**	150,2±9,9
Церулоплазмин, мкмоль/л·с	0,97±0,08	1,03±0,09	1,42±0,13*
...

Подобные документы

• Корма и кормление спортивных лошадей

  Особенности пищеварения у спортивных лошадей. Кормление лошадей при разных нагрузках. Потребность спортивных лошадей в питательных и минеральных веществах. Корма растительного происхождения, остатки технических производств. Кормовые добавки и премиксы.
  
  курсовая работа [116,8 K], добавлен 07.11.2012
  

• Нормы кормления и рационы для спортивных лошадей

  Понятие о норме кормления и кормовых рационах для лошадей. Нормированное кормление и рационы для молодняка мясного скота, для племенных жеребцов, кобыл, молодняка. Особенности пищеварения лошадей. Изучение норм кормления и рационов для спортивных лошадей.
  
  курсовая работа [66,1 K], добавлен 02.05.2010
  

• Кормление лошадей

  Потребность лошадей в энергии. Соевый шрот как часто используемый протеиновый корм в рационах лошадей. Содержание крахмала и сахара в рационах для лошадей. Потребность лошадей в витаминах и минеральных веществах. Контроль полноценности кормления.
  
  курсовая работа [1,3 M], добавлен 19.06.2012
  

• Кормление лошадей

  Научные обоснования кормления лошадей. Кормление жеребых кобыл, подсосных кобыл, жеребцов, рабочих лошадей, жеребят и молодняка лошадей. Потребность в энергии и питательных веществах. Особенности течения беременности. Разработка структуры рациона.
  
  презентация [618,2 K], добавлен 15.02.2016
  

• Породы лошадей

  Классификации и виды пород лошадей по направлению их использования. Характеристики пород лошадей верхового типа, рысистого направления, тяжеловозных: основные масти, сложение, промеры, формы экстерьера. История выведения пород лошадей, назначение.
  
  реферат [35,8 K], добавлен 18.03.2012
  

• Породы лошадей и их характеристики

  Первая классификация пород лошадей, разработана в 1855 г. академиком Миддендорфом, в основу которой положена рабочая производительность на выделение лошадей быстрых аллюров и шаговых. Особенность представления лошадей американской верховой породы.
  
  презентация [3,6 M], добавлен 17.04.2016
  

• Роль липидов в животноводстве

  Биологическая роль липидов. Препараты и добавки, устраняющие недостаток данных веществ в организме животных. Виды кормов, дозировка и нормы их скармливания. Влияние сбалансированного кормления на состояние здоровья и производственные функции животных.
  
  курсовая работа [34,7 K], добавлен 29.04.2014
  

• Разведение лошадей

  Усовершенствование лошадей различных пород. Спаривание лошадей, принадлежащих к разным породам. Воспроизводительное, вводное, поглотительное и промышленное скрещивание. Межвидовая гибридизация животных. Методы выведения новых пород и линий лошадей.
  
  реферат [21,4 K], добавлен 11.11.2015
  

• Мясная продуктивность лошадей

  Химический состав и калорийность мяса табунных лошадей и его калорийность в зависимости от возраста. Энергетическая ценность конины. Способы производства конского мяса. Особенности поведения лошадей в условиях круглогодового пастбищного содержания.
  
  реферат [30,8 K], добавлен 29.11.2012
  

• Зоогигиеническая оценка систем содержания лошадей

  Половозрастные группы лошадей и система их содержания. Общие требования к коневодческим предприятиям: типы, планировка зданий и сооружений, размеры технологических элементов. Нормирование параметров воздуха и оптического излучения; гигиена лошадей.
  
  реферат [32,7 K], добавлен 26.11.2010
  

• Кормление и здоровье лошадей

  Потребность лошадей в питательных веществах и энергии. Корма и добавки, используемые в рационах. Суточные нормы скармливания. Кормление жеребой кобылы. Требования к рационам. Значение запасных питательных веществ в системе нормированного кормления.
  
  курсовая работа [48,5 K], добавлен 10.11.2013
  

• Конюшня на 20 спортивных лошадей

  Изучение зоогигиенических требований для лошадей при проектировании, строительстве животноводческого объекта. Номенклатура коневодческих зданий. Водоснабжение, канализация и навозоудаление. Ветеринарные требования, предъявляемые к месту расположения ферм.
  
  курсовая работа [73,7 K], добавлен 17.11.2014
  

• Экстерьер лошади

  Экстерьер и методы его изучения. Оценка типов высшей нервной деятельности у лошадей и их связь с характером лошади. Двигательно-пищевая методика определения типологических особенностей лошадей. Оценка работоспособности. Экстерьерные особенности лошадей.
  
  дипломная работа [6,4 M], добавлен 08.12.2015
  

• Рабочая продуктивность сельскохозяйственных животных

  Использование ослов и верблюдов на работах. Факторы влияющие на рабочую продуктивность лошадей. Племенная работа в рабочепользовательном направлении. Методы разведения лошадей, бонитировка, отбор, подбор. Задачи тренинга и ипподромных испытаний лошадей.
  
  курсовая работа [38,8 K], добавлен 27.03.2013
  

• Породы лошадей

  Верховые породы: арабская, ахалтекинская, чистокровная верховая. Сложение, формы экстерьера лошадей русской рысистой породы. Русская, советская и литовская тяжеловозная. Направления разведения упряжных пород лошадей. Белорусская и латвийская упряжная.
  
  реферат [19,9 K], добавлен 14.05.2011
  

• Современное коневодство

  Степные породы лошадей. Методы изучения экстерьера лошадей. Измерение высоты в холке. Кормление и содержание рабочих лошадей без работы. Виды случек в коневодстве. Стати тела лошади, их строение и значение. Подготовка и проведение случайной компании.
  
  контрольная работа [378,3 K], добавлен 23.12.2013
  

• Стронгилятозы пищеварительного тракта лошадей

  Предупреждение и ликвидация гельминтозных заболеваний. Кишечные стронгилятозы лошадей как комплекс гельминтозных заболеваний (нематодозов). Биология возбудителей, способы заражения лошадей. Развитие деляфондий, симптомы болезни, диагноз и лечение.
  
  реферат [34,1 K], добавлен 17.01.2011
  

• Рысистые породыв лошадей

  Коннозаводство России в XVIII в. Технология содержания лошадей в период создания породы. Социально-экономические предпосылки и история создания лошадей рысистых пород. Характеристика орловской, американской стандартбредной, французской и русской пород.
  
  презентация [432,9 K], добавлен 12.12.2014
  

• Изучение арабской породы лошадей

  Условия разведения лошадей и племенная работа с ними. История создания и ареал распространения арабской породы. Экстерьерные различия типов породы. Оборот поголовья племенных лошадей, составление рациона их кормления и годовая потребность в кормах.
  
  курсовая работа [36,4 K], добавлен 29.02.2012
  

• Деятельность Коне-Клуба "Йахо"

  История создания клуба и появления лошадей. Характеристика хозяйства, состав сотрудников. Породный состав конюшни, условия содержания, организация ухода и кормление лошадей. Технология подготовки и использование лошадей в прокате в том числе на роупе.
  
  дипломная работа [2,5 M], добавлен 23.06.2010
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам