Фотодинамическая терапия в лечении перитонита

Далее проводили санацию брюшной полости стерильным физиологическим раствором до удаления фибрина из брюшной полости. После завершения санации, промывную жидкость эвакуировали из брюшной полости электроотсосом и производили облучение брюшины лазерным излучением по методу, исключающим термическое повреждение тканей. В качестве источника света для проведения ФДТ был использован лазер «АТКУС-2» с выходной мощностью до 2 Вт, длиной волны 660±0,03 нм, в непрерывном режиме красного оптического диапазона (рис. 2). После определяли выходную мощности лазерного излучения аппарата «АТКУС-2» с помощью прибора ИИМ-1П, производили облучение брюшины в течение 10 минут по анатомическим областям. При проведении лазерного облучения плотность энергии от 20 до 25 Дж/см² [Странадко Е.Ф. и соавт., 2012; Толстых П.И. и соавт., 2000; Аземшоев А.М., 2008]. По окончания облучения, через 5 мин, выполняли повторную флуоресцентную спектрографию.

Рисунок 2. Проведения облучения брюшины крысы с распространенным перитонитом с помощью лазерного аппарата «АТКУС-2»

Экспериментальные животные выводились из опыта трехкратной передозировкой тиопентала-натрия.

У 6 крыс массой тела 200 - 500 г. были произведены измерения площади брюшины:

Висцеральная брюшина:

• селезенка - 6,1%-7,4% (28 см²)

• печень - 14,8%-15,9% (56-72 см²)

• желудок, кишечник с брыжейкой

• и связочным аппаратом - 37,6%-40,7% (154-170 см²)

Париетальная брюшина:

• передняя и боковые брюшные стенки - 23,8% (90-108 см²)

• Задняя стенка - 13,2%-16,3% (50-74 см²)

Всего: 378-452 см²

Из представленных данных следует, что «теоретически» можно обработать не более 60% площади брюшины у крысы, так как невозможно подвести лазерное излучение к сложным анатомическим областям.

Особенности расположения органов в брюшной полости, наличие естественных карманов, ямок, щелей подтверждают, что непосредственное воздействие лазерного излучения на брюшину не способно обеспечить обработку всей ее поверхности.

Характеристика групп животных II этапа исследований

Целью второго этапа исследований являлось изучение эффективности применения метода ФДТ при лечение распространенного перитонита в сравнении с традиционным методом санации брюшной полости. Для сравнительной оценки изучались; гематологические и биохимические показатели периферической крови, уровень эндогенной интоксикации, гистологический материал и летальность животных с ОЭП.

Исследования проведены на 65 крысах, входящих в состав двух группы:

• основная группа состояла из 43 крыс, санация брюшной полости проводили методом ФДТ;

• контрольная группа состояла из 22 крыс, санацию брюшной полости проводили антисептическим раствором.

В качестве антисептического раствора в контрольной группе использовали 0.02% водный раствор хлоргексидина, действующим веществом которого является хлоргексидина глюконат, обладающий активным бактерицидным действием в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных аэробных и анаэробных бактерий. Данный раствор широко применяется в клинической практике для промывания полостей и ран.

В послеоперационный период животным обеих групп в течение 3 суток проводили антибактериальную терапию, используя внутримышечные инъекции гентамицина из расчета 2 мг/кг массы.

По ряду причин выбор был сделан в пользу сульфата гентамицина. Данный препарат обладающий широким спектром действия, подавляет рост большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. При внутримышечном введении средних терапевтических доз препарата, концентрация его в сыворотке крови составляет 2-8 мкг/мл.

Выполнение санации брюшной полости методом ФДТ

Под общей внутривенной анестезии (тиопентал-натрия: 5-7 мг, 2% р-ра на 100 г. массы тела) животное укладывали на операционный стол и фиксировали за конечности. После удаления волосяного покрова брюшной стенки и обработки ее по методу Гроссиха-Филончикова выполняли срединную лапаротомию от мечевидного отростка до лонного сочленения. Гемостаз из стенок раны брюшной стенки осуществляли с использованием электрокоагуляции. К краям раны подшивали стерильные салфетки шелком на атравматической игле. Затем к краям раны брюшной стенки подшивали четыре шелковые держалки и края раны разводились в стороны. Производили оценку морфологической картины: состояние париетальной и висцеральной брюшины; измеряли объем экссудата и давали его характеристику; стерильным шприцем проводили забор экссудата; производили забор участка париетальной брюшины для гистологического исследования. Экссудат полностью удаляли из брюшной полости при помощи электроотсоса.

В брюшную полость животного вливали от 20 до 30 мл стерильного физиологического раствора, перед этим за держалки края раны брюшной стенки поднимали вверх и в стороны. Раствор тщательно перемешивали стерильным шпателем и производили удаление электроотсосом. Потом производили облучение брюшины лазерным излучением, по методу исключающим термическое повреждение тканей (мощностью 2 Вт длиной волны 660±0,03 нм), в течение 10 минут - плотность энергии от 20 до 25 Дж/см². По окончанию облучения выполняли повторное промывание брюшной полости стерильным физиологическим раствором. Раствор тщательно перемешивали стерильным шпателем и производили удаление электроотсосом.

Брюшную стенку зашивали через все слои шелком и обрабатывали спиртовой настойкой йода, животное маркировали и помещали в стандартные условия вивария.

Выполнение санации брюшной полости традиционным методом

Под общей внутривенной анестезии (описанной выше) животным выполняли срединную лапаротомия. Производили оценку морфологической картины: состояние париетальной и висцеральной брюшины; измеряли объем экссудата и давали его характеристику; стерильным шприцем проводили забор экссудата; производили забор участка париетальной брюшины для гистологического исследования. Экссудат полностью удаляли из брюшной полости при помощи электроотсоса.

Брюшную полость трех - четырёхкратно промывали 0,02% раствором хлоргексидина, до «чистых» вод. Последовательность выполнения эксперимента не отличалась от санации брюшной полости в основной группе животных. Объем раствора хлоргексидина примененного для санации брюшной полости в контрольной группe животных составлял в среднем 823 мл, а время экспозиции - 1074 секунд. По завершении интраоперационной санации брюшной полости ее ушивали через все слои, животных маркировали и помещали в стандартные условия вивария.

Характеристика групп животных III этапа исследований

Отдельным этапом нашей работы было изучение антибактериальных свойств ФДТ при перитоните, при котором существенное значение имеет определение числа колониеобразующих единиц (КОЕ) микроорганизмов в послеоперационном периоде.

Исследование произведено на 60 крысах. Для более удобного подсчета микроорганизмов в экссудате, моделирование перитонита вызывали внутрибрюшинным введением монокультуры E. Coli (Штамп 25922) в концентрации 10^8-9 микробных тел в 1 мл суспензии из расcчета 0,01 мл заражающей дозы на 1 г массы животного. Во избежание повреждения внутренних органов при введении монокультуры в брюшную полость, животных располагали вертикально, каудальным концом вверх. Методом пункции вентральной стенки в центре средней линии живота, направляя конец иглы поочередно то в правое и левое подреберья, то в правую и левую подвздошные области, вводили необходимое количество взвеси.

Для определения КОЕ подопытных животных выводили из эксперимента на 1; 3; 5 и 7 сутки после оперативного вмешательства при помощи передозировки анестетика (тиопентал-натрия).

Экспериментальные животные распределялись на группы:

• основная группа состояла из 36 крыс, в которой санацию брюшной полости производили методом ФДТ;

• контрольная группа состояла из 24 крыс, санацию брюшной полости, в которой производилась 0,02% раствором хлоргексидина.

Клиника перитонита у экспериментальных животных развивалась к концу 2 суток. На 3 сутки после моделирования бактериального перитонита животных подвергали оперативному вмешательству. Оперативное вмешательство производилось по вышеизложенным методикам.

Фотосенсибилизатор

В качестве фотосенсибилизатора использовался препарат «Фотодитазин» разработан в Научно-производственной фирме ООО «ВЕТА-ГРАНД», входящей в ОАО «Группа компаний «Гранд», регистрационное удостоверение №ЛС-001246. «Фотодитазин» - универсальный, единственный в ряду известных фотосенсибилизаторов, применяющихся в медицинской практике препарат, используемый как для флуорестенцентной диагностики, так и для фотодинамической терапии. «Фотодитазин» (N-диметилглюкаминовая соль хлорина Е6) - препарат растительного происхождения, создан на основе производных хлорофилла А, получаемого из биомассы микроводоросли Спирулина Платензис (Spirulina platensis Gom. Geitleri). «Фотодитазин» удовлетворяет всем основным требованиям, предъявляемым к современным фотосенсибилизаторам: возможность использования «Фотодитазина» как для флуоресцентной диагностики, так как и для фотодинамической терапии; высокая селективность к раковым клеткам; низкое накопление ФС в нормальных тканях; практическое отсутствие токсичности и быстрое выведение из организма; высокая индуцированная люминесценция в очаге накопления для провидения надежной диагностики; высокий квантовый выход образования синглентного кислорода; интенсивный максимум поглощения в области 660-820 нм. Высокая скорость накопления в опухоли, отсутствие токсичности и, что особенно важно для практического применения, полное выведение из организма в течении 26-28 часов (существенное снижение ограничений для пациентов по соблюдению светового режима). По решению Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития был внесен в государственный реестр лекарственных средств.

Для исследования применялась дозировка препарата 0,8 мг/кг, что составляет среднестатистический показатель рекомендованной дозировка «Фотодитазина» для внутривенного введения (0,3-1,4 мг/кг). Рассчитанную дозу растворяли в 0,5-0,7 мл физиологического раствора и медленно вводили в хвостатую вену крысы. Разведение ФС и инъекции проводились в затемненном помещении.

2.2 Методы исследования

Флуоресцентная диагностика

Исследования проводились с использованием портативного многоканального лазерного спектрального анализатора последнего поколения ЛЭСА-01 (рис. 3) совместного производства объединения «Биоспек» (Россия) и ЦЕНИ ИОФ РАН, с программным обеспечением для работы в операционной среде Microsoft Windows'98-2000.

Относительно простая компактная система позволяет получать спектр диффузного отражения и флюоресценции с интервалом 0,1 сек., что достаточно для мониторинга в реальном масштабе времени. Схема прибора позволяет производить регистрацию спектра флюоресценции в ускоренном режиме в диапазоне длин волн от 400 до 850 нм одновременно по более чем 3000 каналам.

Система оснащена гибким V-образным многоканальным волоконно-оптическим катетером диаметром 1,8 мм, малый диаметр и гибкость позволяют вводить катетер в биопсийный канал эндоскопа для исследования полых органов, в том числе трахеи и бронхов, обеспечивая непосредственный контакт с исследуемой поверхностью [Лощенов В.Б., 1998; Харнас С.С., 1999; Loschenov, V.B., 1991].

Принцип работы системы следующий: cвет от лазерного источника фокусируется на входной конец V-образного волоконно-оптического катетера. В работе мы использовали гелий-неоновый лазер с длиной волны 632,8 нм и мощностью 25 мВт. Такая длина волны позволяет достичь наиболее возможной глубины проникновения до 3 мм. Дистальный конец диагностического катетера (общий диаметр 1,8 мм). Флуоресцентный и рассеянный свет поступает в приемные волокна (6 штук), которые окружают волокно для доставки света, последнее соединено со спектрографом. Волокна на выходном конце сформированы в ряд с тем, чтобы увеличить разрешение системы. Спектрограф вместе с электроникой для сбора данных смонтирован на плате компьютера, которая вставляется в ISA-слот станции расширения компьютера Notebook. Приемный сигнал оцифровывается, передается в память компьютера и изображается на дисплее в реальном масштабе времени. Многофункциональность применения данной системы обеспечивается также специальным программным обеспечением, работающим в среде Windows. Для того чтобы система могла эффективно использоваться в биомедицинских и клинических приложениях имеется возможность проводить анализ спектральной информации в реальном масштабе времени.



Рисунок 3. ЛЭСА-01

Источник света

В качестве источника низкоинтенсивного лазерного излучения использовали полупроводниковый лазерный аппарат «АТКУС-2» (рис. 4) фирмы ЗАО «Полупроводниковые приборы» г. Санкт-Петербург. Аппарат разрешен к применению в медицине Минздравом РФ. Сертификат соответствия (Госстандарт РФ №РОСС RU. ИМ 15. В 00404, №6053691).

Рисунок 4. полупроводниковый лазерный аппарат «АТКУС-2»



Аппарат имеет следующие технические характеристики:

• Выходная мощность - 0,1-2 Вт

• Тип излучателя - полупроводниковые лазерные диоды

• Длина волны излучения - 660±0,03 нм

• Режим работы - импульсный или непрерывный

• Длительность импульсов - 0,05 -10 сек

• Скважность - 1 сек - 30 мин

• Охлаждение - воздушное

• Диаметр транспортного - волокна

• Сеть - 220 Вт/50 Гц

• Диапазон рабочих температур - от +10 С до + 30 С

• Габариты - 37 - 500 - 170 мм

• Вес - 14,0 кг

Данный лазерный аппарат рекомендован Научно-производственной фирмой ООО «ВЕТА-ГРАНД» для работы с фотосенсибилизатором «Фотодитазин».

С целью контроля выходной мощности на конце оптического волокна использовали интегральный измеритель мощности (ИИМ-1П), изготовленный Научно-производственной фирмой «ПОЛИРОНИК», Россия (рис. 5).

Риссунок 5. ИИМ-1П

Клинико-лабораторные исследования

Забор крови у экспериментальных животных производился из хвостовой вены.

При проведение клинического анализа крови определяли показатели эритроцитарного звена (эритроциты, гемоглобин, гематокрит), лейкоциты.

При проведение биохимических исследований определяли уровень аминотрансфераз (АлАТ, АсАТ), концентрацию креатинина и мочевины, концентрацию общего белка.

Для оценки степени синдрома эндогенной интоксикации проводили подсчет лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ). Лейкоцитарный индекс интоксикации рассчитывали по лейкограмме согласно формуле, предложенной Я.Я. Кальф-Калифом (1941):

ЛИИ=(4Мл+3Ю+2П+С) х (Пл+1)/(М+Л) х (Э+1)

где: Мл - миелоциты крови (%); Пл - плазматические клетки (%); Ю - юные (%); М - моноциты (%); П - палочкоядерные (%); Л - лимфоциты (%); С - сегментоядерные (%); Э - эозинофилы (%).

Морфологические исследования

Морфологические исследования тканей париетальной брюшины проводили на 1, 3, 4, 7 сутки после начала лечения. Биопсийный материал фиксировали в жидкости Карнуа в течение 2 часов и заливали в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону на коллагеновые волокна, фукселином на эластические волокна, импрегнировали серебром по Гомори для выявления аргирофильных структур. Использовали также гистохимические методы: окраска толуидиновым синим для выявления глюкозаминогликанов и их комплексов с белками (протеингликаны), ШИК-реакция для выявления гликогена и гликопротеинов, реакция Браше для выявления РНК и реакция Фёльгена для выявления ДНК в клетках.

Морфологические исследования выполнены совместно с д.м.н., профессором В.И. Елисеенко.

Методика выполнения бактериологического исследования экссудата брюшной полости

После выполнения лапаротомии у животных с ОЭП в стерильные пробирки осуществляли забор экссудата из брюшной полости, а при его отсутствии забирали смывы из брюшной полости. Для этого в брюшную полость вводили стерильный изотонический раствор в количестве 10 мл. Осуществляли забор экссудата (смывов) в стерильные пробирки. Из забранного материала готовили разведение 10^2, 10^4, 10^6, 10⁸ микробных тел/мл. После этого осуществляли посев газоном на чашки с мясопептонным агаром. Результат оценивался через 18-20 часов инкубации при 27⁰ С. Исследование проводились на 1, 3, 5, 7 сутки после проведения оперативного вмешательства.

Статистическая обработка полученных результатов

Статистическую обработку результатов экспериментальных исследований осуществляли с помощью компьютера, методом вариационной статистики (Боровиков А.П. и соавт., 1998) с использованием программы «Microsoft Office Excel». Результаты рассматривали как достоверные, если вероятность случайного их происхождения по t-критерию Стьюдента была менее 5% (р< 0,05).



3. Результаты и обсуждение

3.1 Характеристика животных с острым экспериментальным перитонитом

Клинико-морфологическая характеристика животных с острым экспериментальным перитонитом

В ходе работы нами проведена оценка клинического состояния и макроскопических изменений со стороны органов брюшной полости у животных с ОЭП. На 2 сутки после введения каловой взвеси у экспериментальных животных появились первые признаки проявления клинической симптоматики характерные перитониту: вялость, заторможенность, животные «сбивались» в одном из углов клетки, взъерошенность шерсти, учащенное дыхания, отдышка, отказ от еды, жидкий стул и вздутие живота. К 3 суткам клиническая картина усилилась, в период со 2 по 3 сутки была отмечена летальность 9 особей от общего числа экспериментальных животных, что составило - 12,16%. (данный показатель соответствует летальности животных при создании ОЭП, по методики Лазаренко В.А. и соавт. (2008)).

При вскрытие брюшной полости (рис. 6) отмечалось от 2 до 5 мл воспалительного экссудата от серозного до гнойного, иногда с геморрагическим компонентом.

Брюшная стенка тусклая, гиперемированная, с гнойно-фибринозными наложениями на поверхности и висцеральной поверхности печени. На органах брюшной полости рыхлые фибриновые спайки в виде «паутинки». На брыжейке кишечника отмечаются отдельные мелкоочаговые кровоизлияния. Петли кишок раздуты, заполненные массами темного цвета, в некоторых местах кишка отечна, сосудистый рисунок кишечной стенки усилен.



Рисунок 6. Макроскопическая картина брюшной полости крысы при ОЭП

При гистологическом исследовании до санации брюшной полости мы выявляли картину фибринозно-гнойного перитонита с выраженной нейтрофильной инфильтрацией, отеком и полнокровием стромы (рис. 7).

Рисунок 7. Фибринозно-гнойный перитонит с выраженной нейтрофильной инфильтрацией, отеком и полнокровием стромы. Окр. гематоксилином и эозином

Ув.Х 100

Флуоресцентная диагностика брюшины животных

Проведена оценка накопления фотосенсибилизатора в интактной париетальной брюшине и париетальной брюшине при экспериментальном остром разлитом каловом перитоните без введения фотосенсибилизатора.

Рисунок 8. Спектр флуоресценции. Кривая 1-интактная крыса, кривая 2 - крыса с ОЭП

На рисунке 8 кривая №1 отражает результаты зарегистрированные в группе интактных крыс и демонстрирует колебания показателя флуоресценции в пределах 10±5 Ед.ф., что доказывает отсутствие накопления фотосенсибилизатора «Фотодитазин» в брюшине крысы не охваченных воспалительным процессом.

Кривая №2 отражает результаты спектрофлуоресценции, полученные у крыс контрольной группы с экспериментальным каловым перитонитом (без введения «Фотодитазина»). Данный показатель флуоресценции равен 400±50 Ед.ф., что отражает истинный спектр флуоресценции бактерий.

Лабораторная оценка состояния животных с острым экспериментальным перитонитом

В последние годы активно изучается возможность оценки степени выраженности эндогенной интоксикации при различных заболеваниях по изменениям ряда показателей системы крови, определение которых отличается сравнительной доступностью и простотой [Власова В.П., 2007]. Установлено, что эритроцитарное звено крови чувствительно к действию эндо- и экзотоксинов и к повышению активности свободнорадикального окисления [Ройтман Е.В., 2001]. Поэтому изучение количественных характеристик эритроцитов было одним из важных элементов нашей работы.

Несмотря на, ожидаемую гемоконцентрацию, вследствие развития гиповолемии, за счет потери плазмы и накопления ее в брюшной полости в виде воспалительного экссудата, у животных с ОЭП наблюдалось умеренное снижение эритроцитов (Эр) до 3,68±0,4x10№І/л, с 4,12±0,06x10№І/л у интактных животных.

Снижение количества эритроцитов при отсутствии кровопотери связано прежде всего с токсическим или окислительным повреждением мембран эритроцитов.

При изучении концентрации гемоглобина (Hb) в крови, который в свою очередь является универсальным неспецифическим показателем адаптационных процессов у животных, наблюдалось снижение данного показателя с 135,8±3,6г/л у интактных животных до 115,8±3,1г/л, у животными с ОЭП, с достоверностью (р<0,05), что может быть связано с нарушением оксигенации тканей и мембранной организации эритроцитов.

Также у животных с ОЭП отмечалось снижение гематокрита (Ht) с 41,2±2,9% до 36,8±2,7% по сравнению с интактными животными, что отражает соотношение жидкой части крови и форменных элементов. По снижению Ht можно судить о разрушении эритроцитов, предположительно более старых форм.

При исследовании реакции лейкоцитов (L) на развитие ОЭП у животных отмечалось повышение лейкоцитов с 6,83 ±0,51x10⁹ /л у интактных животных до 11,53±0,82x10⁹/л, с достоверностью (р<0,05), что свидетельствует о выраженной воспалительной реакции и развитие перитонита.

Установлено, что колебания показателей ЛИИ при инфекционных и септических заболеваниях объективно соответствуют изменениям клинической картины и отражает степень выраженности эндогенной интоксикации (при вирусных инфекциях показатель ЛИИ понижается, при бактериальных - повышается):

увеличение данного показателя до 4-9 Ед. свидетельствует о наличии значительного бактериального компонента эндогенной интоксикации;

умеренное повышение ЛИИ до 2-3 Ед. свидетельствует об ограничении инфекционного процесса или о наличии очага некробиотических изменений ткани;

высокий лейкоцитоз и повышение ЛИИ до 10 Ед. служит признаком септического шока;

лейкопения с высоким ЛИИ является тревожным прогностическим признаком.

В конкретно рассматриваемом случаи ЛИИ у интактных животных составляло 0,93±0,13 Ед., а на момент оперативного вмешательства у животных с ОЭП данный показатель был равен 5,66±1,05 Ед., с достоверностью (р<0,05), что свидетельствует о развитии средней степени эндогенной интоксикации с значительным бактериальным компонентом.

У животных с ОЭП отмечалась гипопротеинемия, вызванная увеличением проницаемости капиллярного русла с перемещением жидкости и низкомолекулярных белков в клетки, а также потеря белка с экссудатом в брюшной полости. Содержание общего белка в крови снизилось с 62,9±0,5 г/л у интактных животных до 51,3±1,8 г/л у животных с ОЭП, с достоверностью (р<0,05).

В биохимическом анализе крови у животных с ОЭП отмечалось повышение креатинина с 5,1± 0,5 ммоль/100 мл у интактных животных до 7,7±0,9 ммоль/100 мл л у животных с ОЭП, и мочевины с 4,91± 0,7 ммоль/л до 8,76±1,2 ммоль/л соответственно, с достоверностью (р<0,05), что является одним из первых показателей развития эндотоксической реакции. [Мишнёв О.Д. и соавт, 2004; Савельев B.C. и соавт., 2006].

Кроме того, отмечалось повышение аминотрансфераз: аланинаминотрансфераза (АлАТ) с 77,83± 1,7 Ед/л у интактных животных до 143,12± 2,1 Ед/л у животных с ОЭП; аспартатаминотрансфераза (АсАТ) с 162,06± 7,6 Ед/л, до 340,32± 4,5 Ед/л соответственно.

Резкое повышение показателей крови свидетельствует о развитии синдрома полиорганной недостаточности, а в частности, острой печеночно-почечной недостаточности у животных с ОЭП.

3.2 Оценка накопления фотосенсибилизатора в париетальной брюшине при острым экспериментальным перитонитом

Для изучения накопления фотосенсибилизатора «Фотодитазина» в париетальной брюшине экспериментальных животных нами были проанализированы результаты исследования во всех обследуемых группах, которые отражены в виде кривых спектра флуоресценции (рис. 9).

В 1-ой основной группе при проведении спектрографии на 30 минуте от введения «Фотодитазина», отмечалось равномерное накопление фотосенсибилизатора по всем 12 точкам равное 1000±145 ед. ф. Если учитывать, что флуоресценция париетальной брюшины без введения фотосенсибилизатора находится в пределах 400 ±50 Ед.ф., то увеличение флуоресцентной активности выросло в 1,5 раза.



Рисунок 9. Спектр флуоресценции (кривые с 1 по 6 - основные группы, кривая 7 и 8 - контрольные)

Во 2-ой основной группе наблюдалось увеличение показателей спектрографии до 1600±150 ед. ф. (р<0,05), что в 4 раза больше показателей контрольной группы.

В 3-ей основной группе отмечалась прогрессия показателей флуоресценции, равное 2400±145 ед. ф., что в 6 раз выше контрольной и на 33,3% больше чем во 2-ой основной группе (р<0,05).

В 4-ой основной группе, продолжался умеренный рост флуоресценции до 3000±155 ед. ф. соответственно в 7,5 раз и на 20% относительно 3-ей основной группы, с достоверностью (р<0,05).

В 5-ой основной группе происходило замедление флуоресцентной активности накопления ФС воспаленной брюшиной по сравнению с 4-ой основной группой составило 6,25%, что соответствует 3200±150 ед. ф.

В 6-ой основной группе отмечается падение флуоресцентной активности, 2900±135 ед. ф., относительно 5-ой основной на 9,38% и 4-ой основной группы на 3,34% (p<0,05).

Результаты спектрографии у крыс 6 основных групп представлены в таблице 2.

Таблица 2. Результаты флуоресценции в основных и контрольных группах

Группы	основная	контрольная
№	1	2	3	4	5	6	7	8
Время, мин.	30	60	90	120	150	180	без ФС	интактные крысы
Ед.ф.	1000 ±145*	1600 ±150*	2400 ±145*	3000 ±155*	3200 ±150*	2900 ±135*	400 ±50	0-10 ±5

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной и последующими группами

Анализ полученных нами спектров флуоресценции по данным шести основных групп свидетельствует о равномерном накоплении «Фотодитазина» в клетках воспаленной брюшины. При этом максимальный пик накопления приходится на временной интервал 120 мин (3000±155 Ед.ф.) и 150 мин (3200±150 Ед.ф.), при умеренном снижении спектра в последующие часы, достоверно (р<0,05).

Таким образом, результаты спектрографии свидетельствуют о том, что оптимально эффективный момент для оперативного лечения и лазерного воздействия на брюшину при остром распространенном перитоните у экспериментальных животных развивается через 2-2,5 часа после введения «Фотодитазина».

После определения максимального времени накопления фотосенсибилизатора производили засвечивание брюшины крысы лазерным излучением длиной волны 660±0,03 нм, работающим в непрерывном режиме с выходной мощностью 2 Вт. Повторную флуоресцентную спектрографию производили через 5 минут после облучения. Динамика изменения флуоресценции отображена на рисунке 10.

Рисунок 10. Спектр флуоресценции фотосенсибилизатора «Фотодитазин» у крыс с распространенным перитонитом до облучения (кривая 1) и после облучения (кривая 2)

По полученным результатам, можно с уверенность утверждать, что при интенсивности флуоресценции препарата при воспаленной париетальной брюшине - 3200±150 Ед.ф., сеанс лазерного засвечивания приводили к снижению этого показателя более чем в 4 раза до уровня 750±70 Ед.ф.

По данным спектрографии проведение ФДТ, приводило к снижению интенсивности флуоресценции в сравнении с исходными данными на 76,6%, что свидетельствует о выраженном возбуждении ФС и высокой степени фотодинамической реакции. Полученный результат подтверждает снижение концентрации препарата в брюшине под влиянием лазерного облучения с длиной волны 660±0,03 нм.

Таким образом, в результате проведенных исследований методом флуоресцентной спектроскопии доказано, что за период 2-2,5 часа после внутривенного введения препарата в дозе 0.8 мг/кг происходит максимальное накопление фотосенсибилизатора в брюшине. После проведения лазерного воздействия, интенсивность флуоресценции снижается на 76.6%, что свидетельствует об активной фотодинамической реакции снижении концентрации препаратов в брюшине при распространенно перитоните.

3.3 Сравнительная характеристика эффективности фотодинамической терапии в лечении распространенного перитонита

Оценка выживаемости животных с острым экспериментальным перитонитом при разных методах лечения

Через сутки после оперативного вмешательства в основной группе, где санация брюшной полости проводилась при помощи ФДТ животные дышат тяжело, «чихают», малоподвижны, шерсть взъерошена, почти не едят, обильно пьют воду. При макроскопической картине сохраняются признаки пареза желудочно-кишечного тракта, выраженное вздутием или спазмом желудка, спазмом отдельных сегментов тонкой кишки, легкое набухание лимфоидных бляшек и брыжеечных лимфатических узлов. Париетальная и висцеральная брюшина инъецирована, несколько тусклая. В брюшной полости имелся слегка мутный экссудат с желтоватым окрашиванием, без запаха. Объем его составил 1 мл у 4-х из 6 животных, а у остальных - 2-3 мл. Ни в одном случае не было обнаружено признаков термического повреждения брюшины.

Через 3-е суток после операции животные активные, аппетит нормальный, пареза кишечника не наблюдаем, при этом мы отмечали сохранение равномерной слабовыраженной гиперемии брюшины с появлением обычного блеска последней. Объем экссудата (прозрачного вида) составил 0,5 мл у 2-х из 6 животных, у остальных 4-х животных менее 0,5 мл. Спаек между петлями брюшины мы также не наблюдали, как и признаков термического поражения брюшины.

Через 5 суток после операции поведение животных не отличается от здоровых особей: парез разрешился, исчезала гиперемия брюшины. Последняя, приобрела гладкий, блестящий вид. В брюшной полости имелись единичные рыхлые спайки, более выраженные в области послеоперационной раны, выпота не отмечалось.

На 7-е сутки, у отдельных животных выявляются отдельные нежные, невыраженные спайки сальника с висцеральной поверхностью печени или петлями тонкой кишки и нижним полюсом селезенки, легко отделяемые, у остальных спаечный процесс не наблюдался. Брюшина гладкая, блестящая.

Макроскопическая картина на 7-е сутки брюшной полости не отличалась от макроскопической картины здоровых животных.

В контрольной группе животных, где санацию брюшины проводили 0,02% раствором хлоргексидина в первые сутки у крыс наблюдалась выраженная отдышка, они малоподвижны, «кучкуются» в одном углу клетки, не едят, обильно пьют воду. В брюшной полости отмечался около 2-3 мл мутного выпота, в 2 случаях с геморрагическим компонентом, на висцеральной поверхности печени, между брюшинными листками серповидной складки и в складках сальника определялись единичные вкрапления фибрина. Желудок вздут и наполнен массами. Отмечается сегментарное вздутие и атония тонкой кишки, подвздошная кишка спавшаяся, стенки ее отечны.

На 3 сутки у животных появляется аппетит, но едят мало. В брюшной полости сохраняется выпот до 1,5 мл без запаха, обнаруживались небольшие межпетельные спайки, а также спайки с передней брюшной стенкой более выраженные в области послеоперационной раны, или с краями печени и нижнего полюса селезенки с большим сальником. Брюшина тусклая, инъецирована, сохраняются признаки пареза кишечника, с тенденцией к разрешению.

На 5 сутки в брюшной полости около 0,5-1 мл светлого выпота, отмечается гиперемия брюшины, межпетельные, а также шнуровые спайки, парез кишечника разрешился.

К 7 суткам в брюшной полости незначительное количество выпота светлой окраски, определяется у 2 особей, сохраняется слабовыраженная гиперемия брюшины с появлением обычного блеска последней.

Макроскопическая картина брюшной полости после сеанса ФДТ в основной группе на всех этапах исследования была существенно лучше, чем в контрольной группе.

У животных основной группы функция кишечника восстанавливалась спустя сутки от начала кормления, а через 3-5 суток после операции поведение животных не отличалось от здоровых животных не участвовавших в эксперименте.

В контрольной группе животные были менее активны, слабо реагировали на внешние раздражители, тянулись в основном к поильнику. Функция кишечника у них восстанавливалась на 4-5 сутки после операции, но даже в эти сроки крысы были вялыми и малоподвижными.

Летальность в основной группе составила 4 крысы (9,3%), из которых две скончались в течение первых 24 часов, и 2 крысы в последующие 48 часа вследствие продолжающегося перитонита и нарастающей интоксикации. В контрольной группе летальность составила 6 крыс (27,3%) в течение первых 24 часов при явлениях продолжающегося перитонита (табл. 3). При вскрытии у большинства животных в брюшной полости содержалось от 0,5 до 2 мл гнойного или гнойно-геморрагического экссудата с запахом. На висцеральной поверхности печени, между брюшинными листками, серповидной складки и в складках сальника определяются сгустки и единичные округлые образования фибрина. Сальник скомкан, синюшно-багрового цвета. Печень и селезенка увеличены. Желудок вздут, тонкая, подвздошная, слепая кишка отечна, заполнена вязкими массами темного цвета.

Таблица 3. Распределение погибших животных с острым перитонитом по способам санации брюшины

Группы	Сутки после оперативного вмешательства	Всего
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	2	2	-	-	4 (9,3%)
контрольная	6	-	-	-	6 (27,3%)

Лабораторная оценка состояния животных с острым экспериментальным перитонитом при различных методах лечения

При проведении клинических исследований были получены следующие результаты. Прежде всего, отмечено, что при проведении санации брюшной полости при ФДТ более достоверно выражена динамика купирования синдрома эндогенной интоксикации в сравнении с контрольной группой животных, где санация производилась 0,02% раствором хлоргексидина.

Из полученных результатов эритроцитарного звена (табл. 4) видно, что в первые сутки после оперативного вмешательства в основной группе в сравнении с контрольной группой отмечается повышение эритроцитов на 9,3%, гемоглобина на 7,62%. и гематокрита на 3,76%, что свидетельствует о стимуляции эритропоэза, снижении вязкости крови, улучшении микроциркуляции и тканевого метаболизма уже в первые сутки от начала лечения, что обусловлено положительным терапевтическим эффектом лазерного облучения.



Таблица 4. Динамика показателей эритроцитарного звена крови у крыс основной и контрольной группе

	Заборы проб крови (сутки)
Группы	Показатель	1	3	5	7
Основная	Эр (х1012/л)	3, 34±0,43	4,18±0,23	4,05±0,17	4,01±0,09
	Hb (г/л)	127±8	132±7*	129±5	138±4
	Ht (%)	34,6±2,6	40,3±2,5	43,7±2,3	47,1±2,8
Контрольная	Эр (х1012/л)	3, 33±0,36	3.76±0,25	3,78±0,12	3,84±0,11
	Hb (г/л)	118±4	112±5	120±6	127±5
	Ht (%)	33,4±2,1	39,0±2,1	42,5±1,8	44,5±2,5

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой

К третьим суткам отмечается нормализация показателей эритроцитов в основной группе и умеренные отклонения показателей гемоглобина и гематокрита от нормы на 2,87% и 2,23% (р<0,05) соответственно. В контрольной группе данные показатели ниже нормы на 9,57%, 17,53%, 5,34%. К пятым суткам отмечается снижение показаний в основной группе по сравнению с нормой эритроцитов и гемоглобина и нормализация показаний гематокрита в основной и контрольной группе. К седьмым суткам показатели эритроцитарного звена нормализовались, в контрольной группе отмечалось снижение концентрации эритроцитов и гемоглобина на 6,8% и 6,5% соответственно.

Таблица 5. Динамика изменения лейкоцитов (x10⁹/л) у животных основной и контрольной групп

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	9,02±0,46*	8,45±0,29	6,68±0,31	6,1±0,3*
контрольная	10.88±0,37	9,25±0,39	7,98±0,45	7,42±0,43

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой



При сравнении уровня лейкоцитов в основной и контрольной группе (табл. 5) к концу первых суток отмечалось выраженное снижение лейкоцитов в основной группе по сравнению к контрольной на 17,1%, с достоверностью (р<0,05). На третьи и пятые сутки также отмечалось более быстрое снижение лейкоцитов в основной группе по сравнению с контрольной группой на 9,49% и 19,42% соответственно. На 7 сутки послеоперационного периода разница содержания лейкоцитов в периферической крови между основной и контрольной группами возросла до 21,48%, но в контрольной группе сохранялось умеренное повышение лейкоцитов от нормы на 2,67% с достоверностью (р?0,05).

До проведения оперативного вмешательства все животные имели признаки интоксикации схожие по клинической картине, о чем свидетельствовали изменения лейкоцитарной формулы крови: лейкоцитоз, повышение количества незрелых форм нейтрофилов, появление плазматических клеток, снижение количества моноцитов и лимфоцитов, а также увеличение показателя ЛИИ. Увеличение числа незрелых форм нейтрофилов мы рассматривали как проявление напряжения компенсаторных механизмов, обеспечивающих инактивацию токсинов. По мере стихания симптомов острого воспаления показатели ЛИИ приближаются к нормальным значениям.

Таблица 6. Динамика лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ, Ед.) периферической крови

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
Основная	3,91±0,33	3,15±0,25	2,21±0,22*	1,01±0,09*
контрольная	4,54±0,42	3,84±0,23	2,96±0,2	1,86±0,31

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой

Через сутки после проведения оперативного вмешательства в обеих группах отмечалось снижение ЛИИ (табл. 6), более выраженное в основной группе. В основной группе наблюдалось снижение показателя ЛИИ на 30,91% в сравнении с предоперационным значением, и на 13,87% относительно контрольной группы. Превышение ЛИИ в контрольной группе по сравнению с основной составляло 16,1%, что свидетельствует о более быстром снижении воздействия бактериальных токсинов и продуктов распада в основной группе. К 3 суткам отставание в нормализация данного показателя в контрольной группе увеличилось на 21.9%, что говорит о повышении неспецифической резистентности организма и уменьшении интоксикации по сравнению с первыми сутками.

На 5 сутки отмечалась устойчивая тенденция снижения показателя ЛИИ в обеих группах, с ярко выраженной тенденцией к снижению в основной группе на 33.9% по сравнению с контрольной, данная разница свидетельствует о сохранении в крови продуктов аутолиза, и прекращением влияния бактериальных токсинов с статистической достоверностью (р?0,05).

К 7 суткам после операции при использованием метода ФДТ величина ЛИИ соответствовала нормальным цифрам - 1,01±0,09 усл. ед., в то время как у животных контрольной группы оставалась повышенной - 1,86±0,31 усл. ед. с достоверностью (р?0,05).

При проведении стандартной санации брюшной полости отмечалась медленная нормализация указанного показателя. Значение ЛИИ в основной группе уменьшалось быстрее за счет уменьшения нейтрофильного сдвига и увеличения количества моноцитов, лимфоцитов и эозинофилов. Применение метода ФДТ позволило быстро купировать периульнарные воспалительные явления, перевести раневой процесс из альтеративно-экссудативной фазы в репаративную, что нашло свое отражение и в динамике показателей ЛИИ, которые к 7 суткам достигали пределов физиологических величин. В контрольной группе обмечалось двукратное превышение контрольных показателей.



Таблица 7. Динамика изменения общего белка (г/л) животных основной и контрольной групп

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	52,9±0,8	55,6±1,2	58,4±1,6	61,8±1,1*
контрольная	53,2±0,9	54,2±1,0	55,7±1,2	55,3±0,9

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой

Биохимические показатели крови у обеих групп подопытных животных при развитии ОЭП имели снижение общего белка сохраняющееся на протяжении всего периода наблюдения. В первые сутки у подопытных животных основной и контрольной группы имеется равномерный подъем уровня общего белка плазмы крови (табл. 7), приблизительно составляемый 10% (в основной -10,2%, в контрольной - 9,8%). На третьи и пятые сутки отмечалось умеренный рост общего белка в обеих группах, с умеренным преобладанием в основной группе на 2,58% к третьим суткам и на 4,48% к пятым. Однако, наиболее выраженная тенденция к повышению данного показателя имела место в основной группе - к седьмым суткам, уровень общего белка повысился на 11,75% с достоверностью (р?0,05), по сравнению с контрольной группой.

Таблица 8. Динамика изменения мочевины (ммоль/л) у животных основной и контрольной групп

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	7,92±0,38*	5,62±0,36	5,14±0,28	4,81±0,25**
контрольная	9,63±0,45	6,47±0,3	5,52±0,41	4,94±0,3

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой

** достоверность (р<0,05) по сравнению с исходными данными

Содержание мочевины на момент оперативного вмешательства превышало норму на 78.5%. На конец первых суток в основной группе имелась тенденция к снижению данного показателя по отношению к исходному значению (табл. 8). В контрольной группе содержание мочевины на первые сутки увеличилась на 21, 64% по сравнению с основной группой, и превысила начальный показатель на 9,93%, что свидетельствует о продолжении нарастания почечной недостаточности, после проведения санации брюшной полости 0,02% раствором хлоргексидина или его токсическим действием с достоверностью (р<0,05). В последующем, показатель концентрации мочевины в контрольной группе превышал показатель основной группы к третьим суткам на 17,37%, а к пятым на 7,83%. В основной группе аналогичные показатели были равны, соответственно, 14,63 и 4,78%. К седьмым суткам концентрация мочевины в крови нормализовалась с достоверностью (р<0,05).

Данный показатель в основной группе был ниже по сравнению с контрольной группой на протяжении всего исследуемого интервала времени, что в первую очередь свидетельствует о более быстром купировании воспалительного процесса в основной группе, где санация брюшной полости проводилась методом фотодинамической терапии.

Таблица 9. Динамика изменения креатинина (ммоль/100 мл) у животных основной и контрольной групп

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	6,9±1	5,4±0,6	5,0±0,4*	4,9±0,4*
контрольная	6,3±0,8	6,0±0,8	5,6±0,4	5,1±0,3

* достоверность (р<0,05) по сравнению с исходными данными

Показатель креатинина в плазме крови в обеих группах к концу первых суток имел тенденцию к снижению, но более существенно это проявилось в контрольной группе - 9,8% по сравнению с основной группой (табл. 9). К третьим и пятым суткам наблюдения, наоборот, более выраженная тенденция к снижению уровня креатинина была отмечена в основной группе по сравнению с контрольной на 11,1% и 12% соответственно. В основной группе показатели креатинина уже к пятым суткам были в пределах нормы, в контрольной группе показатель превышал норму на 8,9%. К седьмым суткам показатели креатинина нормализовались и в контрольной группе с достоверностью (р<0,05).

К концу первых суток было отмечено, что показатель аспартатаминотрансферазы в контрольной группе имел превышение активности данного фермента по сравнению с основной группой на 34,12% и относительно данных показателя на момент операции, которое составляло 340,32± 4,5 Ед/л на 4,83% с достоверностью (р<0,05) (табл. 10).

Таблица 10. Динамика изменения АсАТ (Ед/л) у животных основной и контрольной групп

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	266,02±5,64*	212,05±3,98*	160,83±2.39*	164,18±2,23**
контрольная	356,78±3,80	240,28±4,83	193,83±6,02	159,03±4,19

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой

** достоверность (р<0,05) по сравнению с исходными данными

На третьи сутки показатель контрольной группы превышал основную на 13,31%. К пятым суткам превышение фермента в контрольной группе превышала норму на 19,63%, в основной группе АсАТ было в пределах нормы с достоверностью (р<0,05). В контрольной группе активность данного фермента нормализовалась к седьмым суткам послеоперационного периода с достоверностью (р<0,05).



Таблица 11. Динамика изменения АлАТ (Ед/л) у животных основной и контрольной групп

Группы	Сутки после оперативного вмешательства
	1-е сутки	3-е сутки	5-е сутки	7-е сутки
основная	96,54±4,34*	92,02±2, 34*	80,25±3.50	74,36±1,27**
контрольная	120,16±2,22	102,34±1,63	87,03±2,33	76,52±2,11

* достоверность (р<0,05) по сравнению с контрольной группой

** достоверность (р<0,05) по сравнению с исходными данными

Выраженное снижение активности аланинаминотрансфераза наблюдалось в основной группе, по сравнению с контрольной. К концу первых суток после операции активность АлАТ в контрольной группе была повышена на 19,66%, на третьи сутки на 10,09%, и к пятым суткам - на 7,8% (табл. 11). В основной группе данный показатель превышал норму в исследуемые интервалы времени, соответственно, на 24,05%; 15,43%; 3,02% с достоверностью (р<0,05). К седьмым суткам концентрация АлАТ в обеих группах достигла нормы достоверностью (р<0,05).

Таким образом, изучение динамики гематологических и биохимических показателей крови у животных с ОЭП позволило выявить, что использование метода ФДТ для санации брюшной полости нормализует изучаемые биохимические показатели и не оказывает патологических воздействий на гомеостаз животных с ОЭП и способствует активному купированию острой полиорганной недостаточности.

Оценка гистологической картины брюшины животных с острым экспериментальным перитонитом при различных методах лечения

При гистологическом исследовании париетальной брюшины крыс с ОЭП на момент оперативного лечения имеется картина фибринозно-гнойного перитонита с выраженной нейтрофильной инфильтрацией, отеком и полнокровием стромы (рис. 11).

Через сутки после проведения сеанса ФДТ гистологическая картина брюшины характеризуется значительным уменьшением интенсивности экссудативного воспаления, активацией клеточных элементов системы мононуклеарных фагоцитов (макрофагов) с сохранением венозного полнокровия (рис. 12). Ни в одном случаи признаков термического повреждения брюшины не отмечалось.

Спустя третьи суток после проведения ФДТ отмечается значительное сниженения интенсивности дисциркуляторных изменений в виде венозного полнокровия и отека стромы (рис. 13), нейтрофильная инфильтрция отсутствует, сохраняется активность клеточных элементов макрофагального ряда, отмечается увеличение количества тучных клеток.

Рисунок 11. Фибринозно-гнойный перитонит с выраженной нейтрофильной инфильтрацией, отеком и полнокровием стромы. Окр. гематоксилом и эозином. Ув.Х 100



Рисунок 12. Брюшина через 1 сут. после проведения ФДТ. Значительное уменьшение интенсивности нейтрофильной инфильтрации, макрофагов с сохранением венозного полнокровия. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. Х 120

Рисунок 13. Брюшина через 3 сут. после проведения ФДТ. Венозное полнокровие, активация клеточных элементов макрофагального ряда, отсутствие нейтрофильной инфильтрацыии, увеличение количества тучных клеток. Окр. гематоксилином и эозином, Ув.Х 180



Рисунок 14. Брюшина через 5 сут. после проведения ФДТ. Очаговая метахромазия межуточного вещества. Дегрануляция тучных клеток. Окр. толуидиновым синим. Ув. Х 180

На пятые сутки в строме выявляется очаговая метахромазия межуточного вещества, свидетельствующая об активном синтезе гликозаминогликанов (рис. 14).

Полное восстановление гистологической структуры брюшины происходло к седьмым суткам после проведения санации брюшной полости методом ФДТ (рис. 15).

Рисунок 15. Брюшина через 7 сут. после проведения ФДТ. Отсутствие признаков воспаления, неравномерное венозное полнокровие. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. Х 100

Рисунок 16. Контрольная группа. Гнойный перитонит. 3-и сутки. Выраженная диффузная нейтрофильная инфильтрация, венозное полнокровие и отек стромы. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. Х100

Рисунок 17. Контрольная группа. Брюшина через 5 сут. Венозное полнокровие, отек брюшины, уменьшением интенсивности нейтрофильнай инфильтрации. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. Х 120



Рисунок 18. Контрольная группа. Брюшина через 7 сут. Очаговое венозное полнокровие, продолжающееся уменьшение интенсивности нейтрофильнай инфильтрации стромы. Окр. гематоксилином и эозином. Ув. Х 80

В контрольной группе при использовании традиционного метода санации брюшной полости в течение первых трех суток сохраняется гистологическая картина фибринозно-гнойного разлитого перитонита с незначительным снижением нейтрофильной инфильтрации, отеком и полнокровием стромы (рис. 16).

На пятые сутки при гистологическом исследованиии выявляется уменьшение воспаления с сохранением отека и венозного полнокровия стромы висцеральной и париетальной брюшины, уменьшением интесивности нейтрофильной инфильтрации (рис. 17).

На седьмые сутки после проведения санации брюшной полости 0,02% раствором хлоргексидина сохраняются признаки воспаления с тенденцией к уменьшению интенсивности нейтрофильной инфильтрации, отека и полнокровия стромы (рис. 18).

Таким образом, морфологические исследования наглядно подтверждают различия в результатах интраоперационной санации брюшной полости и лечения экспериментального калового перитонита у крыс основной и контрольной группы.

Гистологическая картина брюшной полости у крыс основной группы после проведения санации брюшной методом ФДТ на всех этапах исследования была качественно лучше, чем у представителей контрольной группы при операционной санации брюшной полости 0,02% раствором хлоргексидина.

3.3. Оценка антибактериальной свойств фотодинамической терапии в лечении животных с острым экспериментальным перитонитом

Клиническая картина перитонита моделированного с помощью монокультуры E. coli была менее выраженная по сравнению с животными, где перитонит был вызван введением в брюшную полость каловой взвеси. При оперативном вмешательстве в брюшной полости отмечался серозный выпот объемом от 2 до 5 мл. Послеоперационный период протекал более гладко, животные в основной группе активизировались на 2 сутки, в контрольной группе на 3 сутки. В обеих группах уже на 4 сутки животные не отличались от здоровых особей.

...