Размещено на http://www.allbest.ru/

Экспериментальное обоснование и практическое применение физиотерапии при эндометритах и маститах, вызываемых условно-патогенной микрофлорой у коров

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Смертина Елена Юрьевна

Новосибирск - 2007

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока

СО Россельхозакадемии

Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор

академик Россельхозакадемии

Донченко Александр Семенович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Димов Сергей Константинович

(ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии),

доктор ветеринарных наук, доцент

Конопельцев Игорь Геннадьевич

(ФГОУ ВПО Вятская ГСХА),

доктор ветеринарных наук, профессор

Барышников Петр Иванович

(ИВМ ФГОУ ВПО АГАУ)

Ведущая организация: Институт ветеринарной медицины ФГОУ ВПО

Омский государственный аграрный университет

(ИВМ ФГОУ ВПО ОмГАУ)

Защита состоится "__"____________2007г. в______ч. на заседании диссертационного совета Д.006.045.01 при ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО Россельхозакадемии по адресу: 630501, Новосибирская обл., Новосибирский р-н, п. Краснообск, СО Россельхозакадемии, ГНУ ИЭВСиДВ

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНСХБ СО Россельхозакадемии

Автореферат разослан "___"__________2007г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Стеблева Г.М.

1. Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Ветеринарные наука и практика неизменно уделяют большое внимание проблемам профилактики бесплодия и лечения акушерско-гинекологических заболеваний, пытаясь решить не проходящую задачу - получать ежегодно по одному теленку от каждой коровы. Однако, в течение последних лет показатели воспроизводства стада крупного рогатого скота в сельхозпредприятиях России не улучшаются. Так в среднем по России в 2005 году получено на 100 коров лишь 76 телят. Только в 15 субъектах Российской Федерации получено более 81 теленка, что можно считать минимальным базовым показателем выхода телят (И.М. Дунин, 2006). В Новосибирской области в 370 хозяйствах содержится 153 тыс. коров, от которых получено в 2006 г. в среднем 78 телят на 100 голов маточного поголовья

Болезни органов размножения незаразной этиологии регистрируются в различные годы у 8,1 - 8,3% маточного поголовья (В.П. Иноземцев, Б.Г. Таллер, 1994). В структуре этих заболеваний наряду с патологией яичников наиболее широко распространены задержания последа и эндометриты. Ими переболевает от 25 до 70% отелившихся коров и до 90% первотелок (П.Н. Никоноров, 1987; А.Д. Ярушин, 1990; В.Ф. Воскобойников, Г.Г. Козлов, 1991; А.А. Лимаренко, 1994; А.Н. Турченко, В.Н. Шевкопляс, 2000).

Главным этиологическим агентом в возникновении и развитии эндометритов и маститов считают условно-патогенную и патогенную микрофлору, попадающую в половые пути из внешней среды и гематогенным и лимфогенным путями до родов, во время родов и сразу же после их завершения (В.А. Лочкарев, В.А. Кулик, 1990; С. Лаурусявичюс, Р. Марушка, 1994; В.Г. Панков, 1994 И.Н. Зюбин, 1998; А.Н. Турченко, 2000).

Патология родов и послеродового периода тесно связана с погрешностями в кормлении и содержании животных. Неправильная эксплуатация животных (укороченный сухостойный период, нарушение правил машинного доения) и другие стрессовые воздействия, приводят к расстройству регуляции обменных процессов, снижению иммунитета и других адаптационно-защитных возможностей организма.

В ветеринарной практике большое внимание уделяется профилактике послеродовых эндометритов и маститов, предусматривающей применение антимикробных средств, в том числе антибиотиков, гормональных и других биологически активных препаратов. Однако, использование традиционных средств и методов терапии, несмотря на огромное количество рекомендованных лекарственных средств, форм и сочетаний, дает лечебную эффективность не более 70 - 80%. Длительное их применение может отрицательно влиять на качество молока и мяса, приводит к появлению лекарственно устойчивых форм микроорганизмов, аллергическим реакциям у человека и животных, экологическим и другим неблагоприятным последствиям (А.Г. Нежданов, 1994). Побочное действие химиотерапевтических препаратов и появление антибиотикоустойчивых культур микроорганизмов, повышают интерес ветеринарных специалистов к не медикаментозным методам лечения, в частности, к физиотерапевтическим. Физические факторы воздействовали на макроорганизм на протяжении всей его эволюции; поэтому физиотерапевтические процедуры оказывают на организм более физиологическое влияние, чем многие лекарственные средства, вызывают как неспецифические, так и специфические ответные реакции организма. Последние обусловлены особенностями действующего фактора и патологического процесса и обеспечивают основной лечебный эффект.

Учитывая особенности проведения лечебно-профилактических мероприятий в условиях животноводческих ферм, наиболее приемлемыми являются способы проведения физиотерапевтических процедур с использованием компактных, мобильных аппаратов. Вопросам приборного обеспечения и использования аппаратной физиотерапии посвящены работы И.И. Балкового, В.П. Иноземцева, В.И. Слободяника, Г.В. Казеева, П.Н. Никонорова, А.В. Павлова, В.А. Петрова, А.В. Петляковского, Н.В. Старчака, Ю.Г. Юшкова и многих других ученых, выполненные в 1980-2005 годы. Преимущества аппаратной физиотерапии обычно рассматривают как альтернативу химио- или фармакотерапии, несмотря на то, что в лечении большинства заболеваний зачастую применяют комплекс физических факторов и лекарственных веществ. Определение оптимальных критериев использования аппаратной физиотерапии при лечении акушерско-гинекологических заболеваний у коров, вызываемых условно-патогенной микрофлорой в комплексе или с замещением антимикробных и гормональных препаратов, будет способствовать внедрению новых способов в ветеринарную практику, решая актуальную проблему безопасности продуктов питания.

Цель исследований Экспериментально обосновать и практически апробировать способы применения аппаратной физиотерапии у коров при некоторых гинекологических заболеваниях и маститах, вызываемых условно-патогенной микрофлорой.

Для достижения указанной цели были поставлены задачи:

выявить степень распространения и структуру акушерско-гинекологических заболеваний у коров в сельхозпредприятиях Западной Сибири, оценить этиологическую роль микробного фактора, в том числе при ассоциативном течении эндометритов и маститов;

изучить in vitro антимикробное действие монохромного некогерентного красного и инфракрасного излучений и определить оптимальные характеристики излучателей;

изучить в сравнительном аспекте влияние вибромассажа и монохромного некогерентного красного и инфракрасного излучений на микробную обсемененность матки и вымени и иммуно-биохимические показатели организма коров;

научно и экспериментально обосновать и практически апробировать способы применения аппаратной физиопрофилактики и физиотерапии в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при функциональных нарушениях и заболеваниях матки и вымени, вызываемых условно-патогенной микрофлорой, у коров;

Научная новизна. Впервые проведен комплексный анализ результатов акушерско-гинекологической диспансеризации маточного поголовья крупного рогатого скота в сельхозпредприятиях Западной Сибири за 1996 - 2006 годы с целью выявления не только распространения, но и структуры акушерских и гинекологических патологий. Доказано широкое распространение заболеваний репродуктивных органов у коров с преобладанием в структуре патологий функциональных нарушений.

Подтверждена роль условно-патогенной микрофлоры в этиологии воспалительных заболеваний матки и вымени, и доказана высокая степень резистентности микробных ассоциаций к основным антибиотикам, применяемым в ветеринарной практике.

Изучено антимикробное действие монохромного некогерентного красного и инфракрасного излучений in vitro. Определены оптимальные характеристики излучателей для проведения аппаратной физиотерапии в комплексе с антимикробными препаратами при заболеваниях, вызываемых условно-патогенной микрофлорой.

Впервые изучено в сравнительном аспекте влияние вибромассажа и монохромного некогерентного красного и инфракрасного излучений на микробную обсемененность матки и вымени и иммуно-биохимические показатели организма коров. Установлено, что указанные физические воздействия снижают степень микробной обсемененности матки и вымени, повышают естественную резистентность организма коров, не вызывая достоверных изменений биохимических показателей сыворотки крови.

Научно обоснованы и разработаны экологически безопасные способы и лечебно-профилактические схемы применения аппаратной физиотерапии в качестве альтернативы антимикробным препаратам при профилактике послеродовых осложнений, терапии асептических воспалений и в качестве компонента комплексной терапии заболеваний репродуктивных органов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой.

Показана высокая экономическая эффективность применения физиотерапии и физиопрофилактики в акушерско-гинекологической практике.

Новизна научных исследований подтверждена патентами на изобретения и полезную модель:

Патент РФ № 2219891"Способ физиотерапии и физиопрофилактики болезней органов воспроизводства с. - х. животных" от 27.12.2003;

Патент РФ № 2232569 "Способ стимуляции воспроизводительной функции самок животных" от 20.07.2004;

Патент РФ № 42430 "Устройство для облучения биологических объектов" от 10.12.2004.

Решение о выдаче патента РФ № 732/01 "Способ лечения острого эндометрита у коров" от 13.11.2006.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученная при выполнении работы информация о распространении и структуре акушерско-гинекологических патологий в сельхозпредприятиях Западной Сибири, и этиологической роли условно-патогенной микрофлоры может быть использована при планировании и организации ветеринарного обеспечения воспроизводства стада крупного рогатого скота.

Результаты проведенных исследований вносят существенный теоретический и практический вклад в определение роли и места аппаратной физиотерапии в качестве альтернативы антимикробным препаратам при профилактике послеродовых осложнений, терапии асептических воспалений и в качестве компонента комплексной терапии заболеваний репродуктивных органов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой.

Результаты исследований и полученные новые научные данные использованы при разработке и усовершенствовании физиотерапевтических приборов "Вэлта" и "Старт".

Экспериментально обоснованы для практического применения способы профилактики и терапии субинволюции и воспалительных заболеваний матки и вымени, основанные на самостоятельном и комплексном применении аппаратной физиотерапии. Оценка экономической эффективности предложенных способов позволяет судить о целесообразности их использования в условиях хозяйств.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях методического и ученого совета ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии (1989-2006); Всероссийской научной и учебно - методической конференции по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных (Воронеж, 1994); Всероссийском симпозиуме по машинному доению сельскохозяйственных животных (Оренбург, 1995); Международной научно - практической конференции (Новосибирск, 1999); Международной конференции, посвященной 30-летию Всероссийского научно - исследовательского ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии (Воронеж, 2000); региональной научно - практической конференции "Информационные технологии, информационные измерительные системы и приборы в исследовании сельскохозяйственных процессов" (Новосибирск, 2000); Международной научно-практической конференции "АПК Сибири, Монголии и Казахстана в XXI веке" (Улан-Батор, 2001); конференции молодых ученых "Актуальные проблемы патологии свиней, крупного и мелкого рогатого скота (Владимир, 2002); научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины Восточной Сибири" (Иркутск, 2002); Международной научно-практической конференции посвященной 45-летию ФГУ ВНИИЗЖ "Актуальные проблемы инфекционной патологии животных" (Владимир, 2003); Международной научно-практической конференции "Аграрная наука Сибири, Монголии, Казахстана и Башкортостана - сельскому хозяйству" (Павлодар 2003); Международной научно-практической конференции "Состояние и перспективы развития ветеринарной науки и практики" (Алматы, 2003); 2-й Международной научно-практической конференции "Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных" (Ставрополь, 2003); Международной научной конференции "Современные проблемы эпизоотологии" (Краснообск, 2004 г.); Международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию организации Всероссийского НИВИ патологии, фармакологии и терапии "Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных" (Воронеж, 2005); Сибирском международном ветеринарном конгрессе "Актуальные вопросы ветеринарной медицины" (Новосибирск, 2005).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 43 научных работы, в том числе 1 монография и 5 статей в научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ ("Сибирский вестник сельскохозяйственной науки", "Ветеринарный врач")

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 310 страницах и включает разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список литературы и приложение. Работа иллюстрирована 41 таблицами и 25 рисунками. Список литературы содержит 425 источников, в том числе 96 зарубежных авторов.

Внедрение результатов исследований. Результаты научных исследований использованы для разработки 8 методических рекомендаций, утвержденных на федеральном и региональном уровнях, по ветеринарному обеспечению организации воспроизводства стада крупного рогатого скота при стойловом и пастбищном содержании, в коллективных хозяйствах и частных подворьях; лечебно-профилактической работе с применением способов аппаратной физиотерапии, приборному обеспечению стимуляции репродуктивных функций, физиотерапии и физиопрофилактики гинекологических болезней у коров.

Результаты научных исследований включены в "Методические указания по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и телок", (рассмотрены и одобрены на Бюро Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии, прот. №3, 2005 г.), и сборник методических рекомендаций "Новые методы исследований по проблемам ветеринарной медицины". Часть III. "Методы исследований по проблемам незаразной патологии у продуктивных животных", рассмотрен и одобрен на Бюро Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (прот. №3, 2005) и утвержден Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии 21.09.2006 г.

Основные положения, выносимые на защиту:

материалы по распространению и особенностям структуры акушерско-гинекологических патологий у коров, в сельхозпредприятиях Западной Сибири с учетом оценки этиологической роли микробного фактора, в том числе при ассоциативном течении маститов и эндометритов;

результаты лабораторных исследований, доказывающие антимикробное действие монохромного некогерентного красного и инфракрасного излучений при определенных характеристиках излучателей;

результаты экспериментального обоснования снижения микробной обсемененности матки и вымени и возможности повышения естественной резистентности организма коров под влиянием аппаратной физиотерапии;

оптимальные способы применения аппаратной физиопрофилактики и физиотерапии в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при функциональных нарушениях и заболеваниях матки и вымени, вызываемых условно-патогенной микрофлорой, у коров;

бесплодие аппаратная физиотерапия корова

2. Собственные исследования

2.1 Материалы и методы исследований

Работа выполнена в период с 1989 по 2006 г. в ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО Россельхозакадемии. Распространение акушерско-гинекологических заболеваний и маститов изучено на 11736 коровах, принадлежащих сельхозпредприятиям Новосибирской, Томской областей и Алтайского края, в соответствии с "Методическими указаниями по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и телок" (2000). Акушерско-гинекологическую диспансеризацию коров проводили по общепринятой методике. Трансректально обследовано 7363 коров. Под наблюдением находились коровы разного возраста голштинизированной черно-пестрой, голштинизированной черно-пестрой ирменского и приобского типов и красной степной пород с продуктивностью от 2,5 до 8 тысяч килограмм молока при жирности от 3,4 до 4,3 процента. Распространение маститов у коров в хозяйствах региона изучено путем разовых исследований в 15 хозяйствах Новосибирской и Томской областей. Всего обследовано 4373 коровы путем осмотра, пальпации вымени и исследования секрета вымени с растворами димастина или мастидина.

Материалом для лабораторных исследований служили биопробы из шейки матки, содержимое матки и пробы сыворотки крови. Для изучения маточной микрофлоры у коров в период инволюции половых органов пробы лохий из шейки матки для микроскопии и бактериологических исследований брали по методике Н.Н. Михайлова с соавт. (1967). Проведены бактериологические исследования 207 проб молока и 208 проб содержимого матки и влагалищно-цервикальной слизи. Посев микрофлоры проводили на элективные питательные среды (МПА, МПБ, среду Эндо, среду Сабуро, кровяной агар). Патогенность 49 культур микроорганизмов оценивали на белых беспородных мышах методом внутрибрюшинного введения чистых одно - и двухсуточных бульонных и агаровых культур и их ассоциаций. Количественные показатели микробной обсемененности проб молока и выделений из матки изучены при парных исследованиях 123 проб.

Резистентность 70 культур микроорганизмов и 86 микробных ассоциаций к химиотерапевтическим средствам изучали дискоинффузионным методом согласно инструкции по применению дисков для определения чувствительности к антибиотикам, утвержденной Управлением по внедрению новых лекарственных средств и медицинской техники (МЗ СССР 08.07.1986). Посевы инкубировали в аэробных условиях в течение 24 часов при 37⁰ С. Измерение диаметра зон ингибиции роста проводили с точностью до 1 мм с помощью линейки.

Иммунобиохимические исследования 68 проб крови и сыворотки крови проводили при помощи инфракрасного спектроанализатора "Infrapid - 61".

Аппаратную физиотерапию проводили при помощи аппаратов для вибромассажа и фототерапии.

Вибромассаж с лечебной и профилактической целью коровам опытных групп проводили аппаратом "Вэлмас", разработанным в ГНУ ИЭВС и ДВ и НТЦ по животноводству и ветеринарии, в соответствии с инструкцией по эксплуатации аппарата. Электровибромассажер "Вэлмас" представляет собой прибор массой не более 4 кг, в комплект поставки которого входят металлический или пластмассовый корпус с понижающим трансформатором, насадка для воздействия на объект, ремень, фиксационные крючки для крепления насадки на теле животного.

Питание прибора осуществляется от сети переменного тока с номинальным напряжением 220 В и номинальной частотой 50 Гц. Конструкция прибора позволяет использовать его при напряжении 12 В как постоянного, так и переменного тока, возможно подключение к аккумулятору автомобиля. Потребляемая мощность составляет 40 Вт, режим работы аппарата прерывистый. Насадку аппарата накладывали на сухой выровненный волосяной покров в области остистых отростков позвоночника пояснично-крестцовой области, ориентировочно в зоне проекции тела матки. Насадку закрепляли на месте воздействия фиксационными ремнями, корову фиксировали в стойле на привязи.

Фототерапию с лечебной и профилактической целью всем коровам опытных групп проводили аппаратами "Вэлта" и "Старт". Фототерапевтический портативный аппарат "Вэлта", предназначен для воздействия на патологические зоны, а также биологически активные точки организма животных при лечении различных патологий путем наружного и внутриполостного облучения инфракрасным (длина волны 0,8-0,92 мкм) и красным излучением (длина волны 0,68 мкм) с фиксированной частотой модуляции 100 Гц. В комплект прибора входят блок питания с встроенным аккумулятором и 2 насадки (для наружного и ректовагинального облучения). Питание прибора осуществляется как от сети переменного тока с напряжением 220 В, так и от аккумулятора.

Для облучения микроорганизмов применяли фототерапевтический аппарат "Старт", разработанный и изготовленный в лаборатории воспроизводства и технических средств в ветеринарии ГНУ ИЭВС и ДВ, при участии специалистов Института Лазерной Физики СО РАН и СибФТИ СО РАСХН. Ветеринарный физиотерапевтический аппарат "Старт" предназначен для проведения научных исследований по изучению влияния оптического монохромного излучения с различной длиной волны и частотой модуляции на условно-патогенную микрофлору в лабораторных условиях и изучения терапевтической эффективности этих излучений при гинекологических заболеваниях животных. Прибор генерирует монохромное не лазерное оптическое излучение со следующими длинами волн 940 нм., 660 нм., 590 нм., 570 нм., 430 нм. и позволяет модулировать любое из этих излучений частотой 0, 5, 50, 100, 250, 500, 1000, 3000, 5000, 10000, 25000 Гц. Для проведения облучения микроорганизмов применяется облучатель специальной конструкции, представляющий собой планшету для ИФА с вмонтированными в нее светодиодами. Такая конструкция позволяет проводить одновременное облучение светом с различной длиной волны, но одной частотой, при репрезентативной выборке пяти измерений (n=5), при максимально одинаковых внешних условиях, что позволяет достичь высокой точности в исследованиях.

Антимикробное действие оптического излучения оценивали по изменению оптической плотности среды, характеризующей скорость роста микробной культуры, измеряемой на спектрофотометре типа "Диагност". В опытах использовали музейный штамм Золотистого стафилококка АТСС 6538 Р ВКПМ-6646.

Основные задачи решали в 19-ти научно-производственных опытах, проведенных на 458 коровах.

В опытные и контрольные группы включали новотельных коров - аналогов по возрасту, продуктивности, живой массе, срокам заболевания после отела. До постановки опыта и в течение всего периода наблюдения животные имели одинаковые условия содержания.

В опытах учитывали период инволюции матки, наличие послеродовых осложнений, время прихода в охоту, кратность осеменения, сервис-период.

Влияние аппаратной физиотерапии на физиологические, иммунобиохимические показатели организма и микробную обсемененность молока коров, больных маститом и выделений из матки новотельных коров изучено в 8 опытах на 176 коровах.

Эффективность аппаратной физиотерапии при маститах изучена в 7 опытах на 217 коровах. Опыт по изучению эффективности аппаратной физиотерапии при ассоциативном течении хронического эндометрита и субклинического мастита в комплексе с антимикробными препаратами проведен на 18 животных. Профилактическая эффективность аппаратной физиотерапии в послеродовой период изучена в 3 опытах на 47 коровах. Профилактическая и экономическая эффективность аппаратной физиотерапии в условиях производственного эксперимента оценена на 162 животных в 3 хозяйствах Новосибирской области.

Расчет экономической эффективности, применения новых способов профилактики послеродовых эндометритов проводили в соответствии с "Методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий", (ГУВ МСХ СССР, 1982г), с учетом рекомендаций ИЭВСиДВ "Принципы и методика расчета экономического эффекта от применения новых способов борьбы с бесплодием и болезнями животных" (1992).

Статистическую обработку цифрового материала проводили на РС Pentium с использованием стандартных прикладных программ Microsoft Word и Microsoft Excel, а также по методике В.Л. Петухова с соавт. (1985).

Отдельные разделы работы выполнены при участии кандидата ветеринарных наук Ю.Г. Юшкова, кандидата ветеринарных наук А.В. Петляковского, кандидата биологических наук А.В. Павлова, сотрудников лаборатории лейкозов с/х животных (заведующий доктор ветеринарных наук, профессор В.В. Храмцов), за что автор работы им глубоко признателен и выражает искреннюю благодарность.

3. Результаты исследований

3.1 Степень распространения и структура функциональных нарушений и воспалительных заболеваний матки и вымени у коров в сельхозпредприятиях Западной Сибири

3.1.1 Распространение и структура функциональных нарушений и воспалительных заболеваний репродуктивных органов у коров

Распространение и структуру акушерско-гинекологических патологий

изучали при проведении трансректальных исследований в хозяйствах Усть-Тарского, Тогучинского, Черепановского, Ордынского районов Новосибирской области, Асиновского района Томской области, Немецкого Национального района Алтайского края. Всего осмотрено с проведением ректальной диагностики 7363 коров, принадлежащих 17 сельхозпредприятиям. Хозяйства различаются породным составом животных, условиями содержания, сбалансированностью кормовых рационов, технологиями доения, осеменения, обеспеченностью и квалификацией специалистов, и как следствие, продуктивностью животных.

Результаты акушерско-гинекологической диспансеризации, (табл.1), демонстрируют высокий уровень распространения в хозяйствах региона как воспалительных заболеваний, так и функциональных нарушений репродуктивных органов у коров, 34 и 52,9%, соответственно.

Суммарный показатель воспалительных заболеваний и функциональных нарушений репродуктивных органов у коров по всему обследованному поголовью составил в среднем 86,9%. Среди воспалительных заболеваний репродуктивных органов у коров в хозяйствах регистрировали острый послеродовой эндометрит, хронический эндометрит и цервицит. Анализируя структуру акушерско-гинекологических воспалительных заболеваний у коров по средним показателям, следует отметить, что острый послеродовой эндометрит составляет 15,6%. Доли хронического эндометрита и цервицита составляют 13,6 и 4,7%, соответственно.

Таблица 1 - Распространение акушерско-гинекологических заболеваний и функциональных нарушений репродуктивных органов у коров в сельхозпредприятиях Сибирского региона

Район, область

Показатели

Удой на фуражную корову (тыс. кг в год)

Осмотрено (гол. /%)

Острый послеродовой эндометрит (гол/%)

Хронический эндометрит (гол/%)

Цервицит (гол/%)

Задержание последа (гол/%)

Субинволюция матки (гол/%)

Гипофункция яичников (гол/%)

Кисты яичников (гол/%)

Воспалительные заболевания всего (гол. /%)

Функциональные нарушения всего (гол. /%)

Усть-Тарский НСО Черепановский НСО Тогучинский НСО Асиновский Томской области Немецкий Национальный Алтайского края Ордынский район НСО Всего, гол/%

2,5-3 3-3,5 3,5-4,1 4-4,2 4-4,7 5-5,5

220 1758 2235 621 1251 1278 7363

26/11,8 246/13,9 273/12,2 94/15,1 205/16,4 311/24,3 1155/ 15,6

6/2,72 302/17,2 317/14,2 39/6,2 164/13,2 179/14 1007/ 13,6

0 51/2,9 109/4,8 22/3,5 73/5,8 96/7,5 351/4,7

6/2,72 217/12,3 241/10,8 63/10,1 116/9,2 204/15,9 847/11,5

14/6,3 112/6,3 162/7,24 47/7,6 91/7,28 176/13,7 602/8,1

3/1,3 839/47,7 521/23,3 51/8,2 403/32,2 113/8,8 1930/ 26,2

2/0,9 143/8,1 141/6,3 44/7 118/9,44 72/5,6 520/7,1

32/14,5 599/34,1 699/31,2 155/24,9 442/35,3 586/45,8 2513/34

25/11,3 1311/74,5 1065/47,65 205/33 728/58,2 565/44,2 3899/52,9

При проведении диспансеризации регистрировали следующие функциональные нарушения репродуктивных органов у коров: задержание последа, субинволюция матки, гипофункция яичников, кисты яичников. Гипофункция яичников является самым распространенным нарушением функций и составляет 26,2% в структуре выявленных расстройств репродуктивной сферы. Задержание последа выявлено у 11,5% всех обследованных коров. Доля субинволюции матки, фолликулярных и лютеиновых кист составляет 8,1% и 7,1% в общей структуре заболеваний.

Результаты биохимических исследований крови и сыворотки крови коров, проведенных в рамках диспансеризации в различные физиологические периоды, свидетельствуют о нарушении белкового и витаминного обмена веществ, кислотно-щелочного равновесия и минерального обмена по некоторым показателям. Достоверных различий показателей обмена веществ в зависимости от физиологического состояния животных не выявлено

3.1.2 Распространение маститов у коров

Распространение маститов у коров в хозяйствах региона изучено путем разовых исследований в 11 хозяйствах Новосибирской и Томской областей. Всего обследовано 3248 коров путем осмотра, пальпации вымени и исследования секрета вымени с растворами димастина или мастидина. Результаты осмотра и диагностических исследований представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Распространение маститов у коров

№п/п	Показатели	Голов	%
1. 2. 3. 4. 5.	Обследовано коров Заболеваемость коров маститом Клиническая форма мастита Субклиническая форма мастита Атрофия четвертей вымени	3248 612 197 415 304	18,8 6,1 12,7 9,3

Заболеваемость коров маститом на молочных фермах составила 18,8%. Клиническими формами мастита переболели 197 коров, что составляет 6,1% от общего количества обследованных животных. Субклинический мастит зарегистрирован у 415 коров или 12,7% обследованных животных. Атрофия одной из четвертей вымени выявлена у 9,3% коров.

При исчислении процента коров, переболевших маститом в субклинической форме от количества животных, переболевших маститами, показатель составил 67,8%. Соответственно, клинически выраженный мастит наблюдали у 32,2% переболевших коров. Соотношение скрытых и клинических маститов составило 2,1: 1.

Кроме того, проведено исследование 1125 коров в 4-х хозяйствах пригородной зоны Новосибирска с целью выявления асептических форм мастита. Кроме органолептической оценки секрета вымени и проведения быстрых маститных тестов, пробы молока, полученные от коров, больных маститом, были подвергнуты микробиологическим исследованиям. Всего обследовано 1125 коров. Выявлено с патологиями вымени 261 животное, что составляет 23,2% от количества обследованных коров. Структура выявленных форм мастита отражена на рис.1. Клинические симптомы мастита отмечены у 65 коров, что составляет 5,8% от общего количества обследованных животных. Субклинический мастит выявлен у 123 коров (10,9%), у 6,5% больных коров мы наблюдали асептический мастит.

Рисунок 1 - Структура различных форм маститов у коров в хозяйствах пригородной зоны Новосибирска

При изучении распространения маститов и хронических эндометритов у коров при ассоциативном течении выявлен мастит, протекающий в клинически выраженной и скрытой форме у 49,2% коров, больных хроническим эндометритом. Скрытый эндометрит диагностирован у 22,5% коров с воспалительными процессами вымени, протекающими в субклинической форме.

Учитывая результаты диагностических исследований на мастит 4373 коров можно сделать вывод о распространении патологии молочной железы у 18,8-23,2% обследованных животных. Асептический, субклинический, клинически выраженный маститы и атрофия долей вымени установлены у 6,5%; 10,9-12,7; 5,8-6,1; 9,3% коров, соответственно. В 22,5 - 49,2% случаев наблюдается ассоциативное течение хронического эндометрита и мастита у коров.

3.2 Этиологическая роль микробного фактора в развитии воспалений матки и вымени у коров

Микрофлора вымени при маститах у коров

Идентификации микрофлоры, наиболее часто присутствующей в пробах молока, полученных от коров больных маститом, проведена при бактериологических исследованиях 207 проб молока (таблица 3).

Таблица 3 - Результаты бактериологических экспертиз проб молока.

Показатели	1990-1995 гг.	2000-2005 гг
Количество исследованных проб Контаминировано микробами проб, % В том числе (от числа выделенных культур), % Streptococcus agalactiae Стрептококки других серологических групп Staphylococcus aureus Коагулазоотрицательные стафилококки E. coli Proteus vulgaris Candida albicansi Микрофлора выделена в ассоциациях	65 63 96,4 22,2 15,9 25,3 4,8 11,1 20,6	142 131 92,25 6,87 1,52 9,92 2,29 4,58 2,29 7,63 65,6

Результаты исследований представлены за два периода. При анализе результатов исследований, проведенных в 1990-1995 годы, установлено, что условно-патогенная микрофлора выделена из 96,4% проб молока. Из идентифицированных микроорганизмов наиболее часто встречался Staphylococcus aureus - 25,3% проб, Streptococcus agalactiae - 22,2 и ассоциации стафилококков и стрептококков различных серогрупп - 20,6%. Стрептококки, коагулазоотрицательные стафилококки и E. coli выделены в 15,9%; 4,8 и 11,1% проб, соответственно.

Чувствительность указанных микроорганизмов к испытанным антибиотикам колеблется в пределах от 17,6 до 100%. Стафилококки наиболее чувствительны к гентамицину, неомицину и тетрациклину - 96,6, 84,8 и 81,2 % культур, соответственно. Наиболее устойчивы стафилококки к стрептомицину - 18,7%, левомицетину - 28,3 и пенициллину - 34,3%. Стрептококки наиболее чувствительны к левомицетину - 97,05%. Так же высока их чувствительность к тетрациклину - 86,2 и эритромицину - 79,4%. Однако 64,7% стрептококков устойчивы к стрептомицину, 47,1 - к неомицину, 44,1% - к пенициллину. Все испытанные культуры кишечной палочки высокочувствительны к тетрациклину, неомицину, гентамицину и левомицетину. В 75% случаев культуры кишечной палочки устойчивы к стрептомицину и эритромицину. При анализе результатов исследований, проведенных в 2000-2005 годы, установлено, что условно-патогенная микрофлора выделена в 131 пробе молока из 142 исследованных, что составило 92,2 %. Сравнительный анализ экспертиз проб молока за два периода исследований показал незначительные различия в родовом составе микрофлоры, в том числе выделение микроскопических грибков в 7,6% проб, и больший процент микрофлоры, выделяемой в различных ассоциациях - 65,6%. Чувствительность к антибиотикам во второй серии опытов определяли относительно ассоциации, выделенной из одной пробы, без учета чувствительности изолированных культур. Результаты экспертиз представлены на рисунке 2.

Рисунок 2 - Чувствительность микробных ассоциаций к антимикробным препаратам

Изучена чувствительность 86 ассоциаций микроорганизмов. Наиболее высокую чувствительность микроорганизмов выявили в отношении ципрофлоксацина - 77,9%. Также достаточно эффективным в отношении микрофлоры вымени является энрофлон - 55,8% проб. К наиболее часто применяемым в ветеринарной практике животноводческих хозяйств антибиотикам, таким как тетрациклин, стрептомицин, гентамицин, неомицин, левомицетин, эритромицин микробные ассоциации наименее чувствительны, в диапазоне от 1,2 до 12%.

Таким образом, условно-патогенная микрофлора изолирована из 92,2-96,4% проб секрета вымени, полученного от коров с клиническим проявлением мастита. Основными возбудителями мастита являются золотистый стафилококк, агалактийный стрептококк, аасоциации стафилококков и стрептококков различных серогрупп, и бактерии группы кишечной палочки, выделенные из 65,6% проб в виде микробных ассоциаций и проявляющих резистентность к основным антибиотикам, применяемым в ветеринарной практике в 22,1 - 98,4% случаев.

3.2.2 Микрофлора матки при послеродовых эндометритах у коров

Анализ микробной контаминации матки коров при послеродовых эндометритах проведен на основании результатов бактериологических исследований 146 проб маточного содержимого. Установлено, что условно-патогенная микрофлора присутствует в 138 пробах, т.е. в 94,5% случаев из каждой пробы от одной коровы изолировано от одного до трех видов микроорганизмов. Патогенностью обладали 38,1% изолированных культур. По видовому составу микроорганизмы представлены следующим образом:

E. сoli выделена из 52 проб, 75% из них патогенны; Streptococcus faecalis выделен из 41пробы, 51,2% - патогенны; Streptococcus equi обнаружен в 19 пробах, причем все выделенные культуры были патогенными; Staphylococcus aureus изолирован в 26 пробах, 50% культур были патогенны. Непатогенные культуры стрептококков и диплококков других видов выделены в 20 пробах (13,7%), а непатогенные культуры Staphilococcus albus выделены в 17 пробах (11,6%). Стафилококки других видов выделены из 46 проб при патогенности 17,4% изолированных культур. Непатогенная культура B. subtilis изолирована из 23 проб (15,75%). Грибковая микрофлора присутствовала в 29 пробах (19,86%), причем все они не обладали патогенными свойствами.

Итак, из 94,5% проб содержимого матки, полученного от коров больных острым послеродовым эндометритом изолирована микрофлора, патогенная в 38,09% случаев.

3.2.3 Микробный фактор в этиопатогенезе субклинических маститов и хронических эндометритов у коров при ассоциативном течении

В опыте на 62 коровах изучена микрофлора вымени и цервикальной слизи от животных с одновременным течением мастита и хронического эндометрита.

Результаты бактериологических исследований представлены в таблице 4. Всего исследовано 124 проб: 62 пробы молока и 62 пробы цервикальной слизи от одних и тех же животных. Микрофлора изолирована из 54 проб молока и 62 проб цервикальной слизи.

Таблица 4 - Микрофлора изолированная из проб молока и цервикальной слизи от коров больных маститом и хроническим эндометритом

Выделенная микрофлора	Молоко	Цервикальная слизь
	Количество культур	%% от количества проб	Количество культур	%% от количества проб
Staphylococcus aureus	17	27,4%	11	17,7%
E. coli	12	19,3%	27	43,5%
Streptococcus agalactiae	22	35,4%	0	0
Proteus vulgaris	15	24,1%	18	29%
B. subtilis	0	0	22	35,4%
B. piogenes	0	0	14	22,5%
Candida albicansi	0	0	6	9,6%
Коагулазоотрицательные стафилококки	12	19,3%	8	12,9%
Стрептококки других серологических групп	6	9,6%	7	11,2%
Изолировано всего	84	-	113	-
Исследовано всего, проб	62	-	62	-

Таким образом, ассоциативное течение маститов и хронических эндометритов у коров сопровождается микробной контаминацией матки и вымени в 100% и 87,09% случаев заболеваний.

Всего выделено 197 культур микроорганизмов, в том числе из проб молока - 84 культуры: Staphylococcus aureus, E. coli, Proteus vulgaris, Streptococcus agalactiae, коагулазоотрицательные стафилококки, стрептококки других серологических групп. Необходимо отметить, что 77% выделенных культур представлены в ассоциациях с другими микроорганизмами в количестве от одного до трех.

Из проб цервикальной слизи изолировано 113 культур: Staphylococcus

aureus, E. coli, Proteus vulgaris, B. Subtilis, B. piogenes, Candida albicansi, коагулазоотрицательные стафилококки, стрептококки других серологических групп. Из них 97,4% культур представлены в ассоциациях с другими микроорганизмами.

Культуры, выделенные из парных проб молока и цервикальной слизи от 15 коров кроме идентификации, были протестированы на патогенность на белых мышах. Таким образом, микрофлора изолирована из 100% проб цервикальной слизи и 87,1% проб молока при патогенности 42,1 и 16,6% соответственно.

3.4 Антимикробное действие оптического излучения

Изучение антимикробного действия оптического излучения in vitro проведено с целью определения оптимальных характеристик излучателей для физиотерапевтических аппаратов, применяемых дляпрофилактики и лечения заболеваний, вызываемых условно-патогенной микрофлорой. Предварительные исследования А.В. Павлова, Е.Ю. Смертиной (2001-2005г.) позволили выяснить, что инфракрасное и красное излучения с длинами волн 940 и 660 нм, соответственно, оказывают более значительное воздействие на микроорганизмы, чем другие спектры излучения. Поэтому в наших опытах было уделено максимальное внимание излучениям именно с такими характеристиками.

Проведенные исследования по облучению культуры золотистого стафилококка красным и инфракрасным излучением с длинами волн 660 и 920 нм, соответственно при частотах модуляции излучений 0, 5, 50, 100, 250, 500, 1000, 3000, 5000, 10000, 25000 Гц показали, что в зависимости от характеристики излучения наблюдается выраженный в различной степени бактериостатический эффект, сопровождающийся изменением чувствительности культуры золотистого стафилококка к антибиотикам и некоторых других свойств.

При воздействии на стафилококк инфракрасным излучением максимальные различия в скорости роста по сравнению с контролем наблюдались через 11 часов в случае использования частот 5 и 100 Гц. Остальные частоты показывали максимальный достоверный результат через 16 часов. Наибольший бактериостатический эффект наблюдали при облучении культуры золотистого стафилококка инфракрасным излучением с частотой модуляции 500, 3000, 5000, 250, 1000 ГЦ. На рисунке 3 продемонстрированы различия в динамике скорости роста золотистого стафилококка в контроле и при воздействии инфракрасным излучением с частотой модуляции 3000 Гц.

Рисунок 3 - Динамика скорости роста золотистого стафилококка при воздействии инфракрасным излучением с частотой модуляции 3000 Гц

На рисунке 4 продемонстрированы максимальные достоверные результаты изменения скорости роста золотистого стафилококка в течение 16 часов. Воздействие на культуру золотистого стафилококка с частотой 10000 Гц привело к достоверному ростостимулирующему эффекту, оптическая плотность по сравнению с контролем увеличилась на 3,12% через 11 часов после начала облучения. Все остальные частоты оказывали на микроорганизм бактериостатическое воздействие в той или иной степени. Максимальный бактериостатический эффект получен при облучении культуры золотистого стафилококка красным излучением с частотой модуляции 3000 и 1000 Гц, 11 и 10,8%, соответственно. При воздействии на стафилококк красным излучением не получено достоверных изменений оптической плотности при частоте модуляции 500 Гц.

Учитывая полученные результаты, можно сделать вывод, что оптимальными параметрами излучателей для достижения бактериостатического эффекта в отношении золотистого стафилококка является инфракрасное излучение, генерируемое с частотой модуляции 250, 500, 1000, 3000 и 5000 Гц.

Рисунок 4 - Максимальные достоверные значения изменений показателей скорости роста культуры золотистого стафилококка

Красное излучение можно считать оптимальным по результатам опыта при частотах 1000 и 3000 Гц. Однако в опытах было учтено и влияние облучения культуры золотистого стафилококка с использованием излучателей с различными характеристиками на изменение чувствительности микроорганизма к различными антибиотикам. Результаты опытов вносят изменения в возможные выводы по эффективности того или иного излучения, напрашивающиеся исходя из результатов о бактериостатическом воздействии определенных излучений.

Чувствительность микробной культуры к антибиотикам достоверно повышается на 3,6-24,8% при использовании следующих оптических излучений: 940 нм (50 Гц, 250, 1000, 3000, 10000 Гц), 660 нм (5 Гц, 50, 3000, 10000 Гц). Такие частоты, как 0, 250, 500, 25000 Гц повышают резистентность золотистого стафилококка к ряду антибиотиков, исключая возможность применения данного способа аппаратной физиотерапии при комплексном лечении воспалительных заболеваний с применением антибиотиков. Частота модуляции излучений 3000 Гц, способствует повышению чувствительности золотистого стафилококка к максимальному количеству антибиотиков (макролидам, производным хлорамфеникола, в - лактамным антибиотикам).

Анализируя результаты исследований можно сделать вывод, что чувствительность золотистого стафилококка к антибиотикам, в большей степени зависит от частоты модуляции, чем длины волны излучения.

Следует отметить, что высокую эффективность имели красное (660 нм) излучение с частотой 1000 Гц и 3000 Гц, вызывающее снижение скорости роста золотистого стафилококка через 16 часов от начала опыта, на 10,8 и 11%% (Р<0,05), при отсутствии достоверного снижения чувствительности микробной культуры к антибиотикам. Инфракрасное излучение с частотой 3000 Гц приводит к снижению скорости роста золотистого стафилококка через 16 часов от начала опыта на 15,9% (Р<0,05), достоверно повышая чувствительность к некоторым антибиотикам на 8,7-20,8%.

3.5 Влияние аппаратной физиотерапии на степень микробной обсемененности молока коров, больных маститом и выделений из матки новотельных коров

В 3-х опытах на 92 коровах изучили влияние физиотерапии с применением аппарата "Вэлмас" на микробную обсемененность секрета вымени коров при разных формах мастита. Подсчет количества микроорганизмов проводили до и после лечения. Применение только физиотерапии при лечении субклинических маститов у коров позволяет снизить микробную обсемененность молока в 2,2 раза. Проведение физиопроцедур при комплексной терапии серозного и серозно-катарального мастита снижает микробную обсемененность секрета вымени в 2,8-3,3 раза, при снижении микробной обсемененности секрета вымени в контрольных группах в 2,1-2,6 раза.

В двух опытах, проведенных на 31 корове изучено влияние аппаратной физиопрофилактики на микробную обсемененность выделений из матки новотельных коров. Результаты опытов продемонстрированы на рисунках 5 и 6.

Рисунок 5 - Динамика микробной обсемененности маточно-цервикальной слизи в послеродовой период у коров в норме и при эндометритах

Проведенные исследования по изучению динамики микробной обсемененности маточно-цервикальной слизи в послеродовой период у коров в норме и при эндометритах показали следующие результаты. Количество микробных клеток в 1 мл исследуемого материала в 1-е сутки после отела от коров, впоследствии заболевших эндометритом, составило 525 48,3 млн. м. к. /мл. На 8-10 дни после родов у заболевших коров показатель микробной обсемененности составил 1125 95,5 млн. м. к. /мл, т.е. увеличился в 2,1 раза

При нормальном течении послеродового периода микробная обсемененность маточно-цервикальной слизи снизилась в 1,3 раза с 920 68,3 млн. м. к. /мл до 680 24,6 млн. м. к. /мл.

Рисунок 6 - Влияние аппаратной физиопрофилактики на микробную обсемененность маточно-цервикальной слизи новотельных коров

При проведении опыта по профилактической эффективности вибромассажа новотельным коровам, количество микробных клеток в 1 мл содержимого матки коров в 1-е сутки после родов составило 675 51,2 млн. м. к. /мл. После проведения профилактических процедур в течение 7 дней, в 1 мл проб содержалось 348 32,3 млн. м. к. /мл, что в 1,9 раза ниже, чем в 1-е сутки после родов.

Профилактическая обработка новотельных коров красным и инфракрасным излучением в течение 5-7 дней путем введения насадки излучателя во влагалище позволила снизить микробную обсемененность матки в 3,4 раза, изменив показатель микробной обсемененности с 970 46,2 млн. м. к. /мл до 285 38,5 млн. м. к. /мл.

Таким образом, проведение лечебно-профилактических физиопроцедур способствует снижению микробной контаминации проб молока от коров, больных маститом в 2,1-3,3 раза, а проб выделений из матки коров после родов - в 1,9-3,4 раза.

3.6 Динамика показателей естественной резистентности организма коров при аппаратной физиотерапии

...