Применение электромагнитного излучения КВЧ-мм диапазона и препарата "ДАФС-25" для коррекции воспроизводительной функции у хряков-производителей

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

ПРИМЕНЕНИЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ КВЧ-ММ ДИАПАЗОНА И ПРЕПАРАТА «ДАФС-25» ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ У ХРЯКОВ-ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ.

16.00.07 - Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

Макарова Юлия Владимировна

Саратов - 2007

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Для обеспечения потребности населения в мясе и мясных продуктах важная роль отводится свиноводству, как отрасли наиболее скороспелого животноводства (Шахов А.Г., 2001; Мисайлов В.Д., 2003; Коробов А.П., 2004).

В Саратовской области разведение свиней является традиционной отраслью сельскохозяйственного производства. Этому способствуют благоприятные почвенно-климатические условия для выращивания фуражного зерна, картофеля, тыквы, сахарной свеклы, а также высокая плодовитость свиней, их скороспелость, хорошая оплата корма продукцией и высокий убойный (Авдеенко В.С., Москаленко С.П., Аношина Р.И., 2000).

Однако наибольший эффект в свиноводстве достигается путем его интенсификации с максимальным использованием маточного поголовья (Шумский Н.И., 2002). Репродуктивные возможности свиней во многом зависят от качества хряков-производителей, используемых в технологии искусственного осеменения (Филатов А.В., 2005).

В настоящее время одним из важнейших направлений в свиноводстве является разработка и совершенствования средств ранней профилактики нарушений репродуктивной функций хряков-производителей ( Липатов П.П., 2000).

Широкое распространение применения антимикробных средств вызвало появление высокоустойчивых штаммов микроорганизмов, значительно снижающих качественные показатели спермы, что приводит к снижению оплодотворяемости, абортам и бесплодию самок, рождению гипотрофного и мертворожденного потомства (Щербаченко Д. Ю. ,2006).

В последние годы в России проводятся масштабные изыскания способов повышения репродуктивных возможностей у самцов на основе нетрадиционных методов воздействия на организм самцов и их половые органы (Баталин Ю. Е., 2002).

Установлено положительное влияние электрических импульсов электроакупунктуры, поля УВЧ, магнитного поля и лазерного излучения на качественные показатели спермы у самцов как лабораторных, так и продуктивных животных.

Учитывая, что физические методы, оказывают благоприятные действия на организм животных и их репродуктивные органы, существенный интерес представляет изучение действия электромагнитного излучения крайне высокой частоты мм диапазона на организм хряков-производителей и их качественные показатели спермы.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы, явилось изучение использования качественных показателей спермы хряков-производителей, селеноорганического препарата «ДАФС-25» и созданных в институте радиоэлектроники РАН и ОАО «Центральный научно-исследовательский институт измерительной аппаратуры» (г. Саратов) аппарата «КВЧ О₂».

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

- установить эффективность применения естественно-биофизических стимуляторов для повышения половой активности хряков-производителей и качества спермопродукции;

- изучить изменения качественных показателей спермы хряков-производителей под воздействием препарата «ДАФС-25»;

- определить характер влияния ЭМИ КВЧ-мм диапазона МСПИ О₂ и препарата «ДАФС-25» на показатели репродуктивной функции хряков- производителей;

- выявить эффективность сочетанного применения естественно-биофизических стимуляторов, препарата «ДАФС-25» и ЭМИ КВЧ-мм диапазона МСПИ О₂ в свиноводстве для повышения репродукции и продуктивности хряков-производителей.

Клинико-экспериментальные исследования выполнены в рамках гранта (№ E-0250) Российского фонда фундаментальных исследований по госконтракту федеральной целевой программы «Интеграция» Российской академии наук и Министерства образования РФ.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение влияния естественно-биофизических стимуляторов, ЭМИ КВЧ-мм диапазона молекулярного спектра поглощения и излучения О₂ на 65…129 ГГц и препарата «ДАФС-25» на характер проявления репродуктивной функции хряков-производителей. Получены новые данные о качественных изменениях в сперме хряков под воздействием естественно-биофизических стимуляторов, электромагнитного излучения КВЧ-мм диапазона («КВЧ О₂» и селеноорганического препарата «ДАФС-25»). Сравнительная ветеринарно-санитарная оценка смывов препу-циальной полости и спермы показала, что у хряков опытной группы отмечается снижение микробной контаминации на 34,1%...18,7%, коли-индекс в 1,34…-1,32 раза, а коли-титр в 1,33…1,51 раза. Оплодотворяемость свиноматок, осемененных спермой от хряков опытной группы, облученных ЭМИ КВЧ, превышала на 11,85% контрольных животных, при облучении спермы на 12.7%, а при воздействии на семенники и сперму - на 13,4%.

Определены эффективные параметры для организма хряков-производителей и методы воздействия ЭМИ КВЧ-мм диапазона препарата «ДАФС-25», а также естественно-биофизических стимуляторов для коррекции качественных показателей спермы в процессе репродукции свиней.

Практическая и теоретическая значимость. Дано научно-экспериментальное обоснование к исследованиям в практике свиноводства электромагнитного излучения КВЧ-мм диапазона и препарата «ДАФС-25» для коррекции репродуктивной функции у хряков. Определена физиологическая целесообразность и экономическая эффективность применения препарата «ДАФС-25», разработана технология и методика применения ЭМИ КВЧ мм-диапазона для коррекции репродуктивной функции у хряков. В смывах препуциальной полости у хряков, получавших «ДАФС-25» отмечается снижение микробного числа на 63,2%, коли-индекса в 1,38 раза, а коли-титра в 1,27 раза. Микробная контаминация спермы хряков опытной группы была ниже в 1,54 раза. При воздействии ЭМИ КВЧ мм-диапазона на семенники и сперму микробная контаминация полости препуция выше обсемененности эякулята в опытной группе. Общая загрязненность препуция и спермы снижается в 1,8 раза по сравнению с показателями контрольной группы.

Материалы исследований используются в учебном процессе в ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ» студентами факультетов ветеринарной медицины и биотехнологического при изучении дисциплин «Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения животных», а также на курсах повышения квалификации зооветеринарных специалистов свиноводческих хозяйств и комплексов.

Реализация результатов исследования. Материалы исследований вошли в «Методические указания по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения и молочной железы свиней», одобренные секцией патологии, фармакологии и терапии Российской сельскохозяйственной академии 24 марта 2005 г., протокол № 1. В сводный отчет по государственному контракту NE-0250 и «Экспедиционные и полевые испытания прецизионно-волновой КВЧ-терапии заболеваний сельскохозяйственных животных», 2006 г.

Объект и предмет исследования. Объектом исследования служили хряки-производители крупной белой породы, ландрас, дюрок, аппарат «КВЧ О2», препарат «ДАФС-25». Предметом исследования явились: сперма и семенники хряков-производителей, а также клинические, морфобиохимические, иммунологические и статистические показатели свиней.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных научно-практических, учебно-методических конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ» (Саратов, 2003-2006 г.г.), на Международной научно-практической конференции «Развития народного хозяйства в Западном Казахстане: потенциал, проблемы и перспективы» (Уральск, 2005, республика Казахстан).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 работ, в которых отражены основные научные положения. Общий объем публикаций 1,2 печатных листа, из которых 0,6 печатных листа принадлежат лично соискателю, одна из которых опубликована в рецензируемом издании рекомендованных ВАК.

Основные положения, выносимые на защиту:

- характер влияния КВЧ-мм диапазона МСПИ О₂ и препарата «ДАФС-25» на показатели репродуктивной функции хряков-производителей;

- изменения качественных показателей спермы хряков-производителей под воздействием ЭМИ КВЧ-мм диапазона МСПИ О₂ и препарата «ДАФС-25»;

- эффективность применения препарата «ДАФС-25» и аппарата «КВЧ О₂» в свиноводстве.

2. Материалы и методы исследования

Работа выполнена в 2003-2006 г.г. на кафедре акушерства и хирургии ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ», племенном свиноводческом заводе ОПХ «Крутое» Балаковского района Саратовской области.

Исследования выполнены на 12-ти хряках-производителях и 108 свиноматках крупной белой породы, дюрок, крупная черная и ландрас по второму-пятому опоросу с массой тела 185-235 кг. По принципу аналогов были сформированы 4 группы основных свиноматок. В период опыта хряки-производители получали в составе рациона: экструдированные ячмень, пшеницу, жмых подсолнечный, премикс витаминно-минерально-белковый, сыворотку молочную, фосфат обесфторенный, соль поваренную, мел кормовой, куриные яйца.

Свиноматки в период опыта продолжительностью 4 месяца получали в составе рациона: экструдированные ячмень, пшеницу, рожь, премикс 12-15-7/8, соевый жмых, молочную сыворотку, соль поваренную, мел кормовой, молочную сыворотку и препарат «ДАФС-25» в дозе 40 мг на 1 кг премикса.

Репродуктивную функцию хряков изучали в течение года по результатам оценки качества эякулята. Первый способ активации половой функции у хряков заключался в массаже семенников за 5-10 минут до получения спермы. Второй - в активном общении хряка- производителя в течении 5-10 минут со свиноматкой находящейся в охоте. Для изучения влияния ЭМИ КВЧ-мм диапазона и повышения репродуктивной функции хряков-производителей использовали аппарат «КВЧ О₂» и препарат «ДАФС-25».

Животных, используемых в технологии искусственного осеменения, по принципу парных аналогов разделили на шесть групп. Хрякам контрольной группы в рацион не вводили «ДАФС-25» и не облучали семенники и полученную сперму. Хрякам I подопытной группы проводили облучение аппаратом «КВЧ О₂» на частоте 65,56 ГГц семенники в экспозиции 15 мин. за 12 часов, 6 и 3 часа до получения спермы и в рацион вводили «ДАФС-25» в дозе 46 мг на 1 кг премикса. Животным III подопытной группы вводили в рацион препарат «ДАФС-25» в дозе 46 мг на 1 кг премикса. Хрякам IV подопытной группы проводили облучение аппаратом «КВЧ О₂» в экспозиции 15 мин. за 12 часов, 6 и 3 часа до получения спермы. Животным IV подопытной группы проводили облучение спермы в той же экспозиции 15 мин до разбавления и после разбавления. Животным V подопытной группы проводили облучение, как семенников, так и спермы по аналогичной методике, что в третьей и четвертой группах. Хрякам шестой подопытной группы вводили в рацион препарат «ДАФС-25» и проводили облучение семенников и спермы аналогично животным второй, третьей и четвертой группах.

Оценку 450 эякулятов осуществляли при умеренном режиме использования хряков-производителей с интервалом 3 суток, исследование спермопродукции вели по общепринятым методикам, используя основные показатели: объем эякулята, цвет, запах, активность, концентрацию, резистентность, дегидрогеназную активность, абсолютный показатель выживаемости спермиев. Оплодотворяемую способность спермы определяли прямым способом по данным зоотехнического учета осеменений и опоросов 108 свиноматок.

Санитарные показатели препуциальной полости и эякулятов изучали у 4-х хряков-производителей. Всего за период исследований проведено 60 проб смывов из препуциальной полости и эякулятов для определения в них микробного числа, Коли-индекса и Коли-титра. На основании полученных результатов устанавливали породные, возрастные и сезонные колебания микробной контаминации препуции и спермы животных, а также эффективность «ДАФС-25» и ЭМИ КВЧ-мм диапазона.

Смывы из полости препуции хряков получали по методу Филатова А.В., (2001). Все инструменты и приспособления были индивидуальными для каждого хряка-производителя.

Пробы спермы для микробиологических исследований отбирали после получения эякулятов от хряков на искусственную вагину. Смывы и сперму хряков-производителей исследовали в Балаковской ветеринарной лаборатории в течении первых 3-х часов после их получения. Определение микробной контаминации препуциальных смывов и спермы хряков-производителей проводили путем посева на ИПА, а коли -титр на среду Эндо. Предварительно их многократно последовательно разводили стерильным физиологическим раствором 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000, 1:100000.

Через сутки подсчитывали колонии кишечной палочки, в соответствии с характером роста и окраской колоний. Рассчитывали коли-титр и коли-индекс. Родовой состав микроорганизмов в препуциальных смывах и сперме определяли путем посева на специальные питательные среды: МПА, МПБ, Эндо, молочно-солевой агар, кровяной агар и ЭНЦПХ-агар.

Клинические и гематологические исследования проведены по общепринятым методам, биохимические - в соответствии с «Методическими указаниями по применению модифицированных методов исследований крови, мочи и молока в ветеринарных исследованиях» (М., 1981). Кровь для исследования получали из передней полой вены. В качестве антикоагулянта использовали гепарин. В крови определяли гемоглобин, гемиглобин цианидным методом, эритроциты и лейкоциты подсчитывали в счетной камере Горяева, выводили лейкограмму, фагоцитарную активность нейтрофилов с использованием латекс-теста по С.Г. Потаповой (1977). В сыворотке крови определяли общий белок по биуретовой реакции, белковые организмы - неорелометрическим методом по Ошу и Маккорду в модификации С.А. Карнюко (1962). Оценку состояния процессов пероксидации проводили методом индуцированной биохемилюминесценции на биохемилюминометре БХЛ-06, сопряженным с компьютером IBM PC/AT в диалоговом режиме.

Экономическую эффективность определяли согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий». (М., 2002).

Цифровой материал подвергали статистической обработке на ПК Pentium с использованием прикладных программ пакета Microsoft Office.

импотенция хряк спермопродукция репродуктивный

3. Результаты собственных исследований

3.1 Особенности проявления импотенции у хряков производителей

Импотенция у производителей во многом зависит от особенностей их использования и этиологических факторов, которым в последнее время уделяют особое значение, так как они оказывают непосредственное влияние на степень закрепления или нарушения половых рефлексов, проявляющихся в виде ослабления, торможения или извращения.

Для изучения особенностей проявления импотенции у хряков были подобраны три группы хряков-производителей по принципу аналогов. При оценке половой активности отмечали время запуска хряка в манеж для получения спермы на искусственную вагину, а так же количество и качество получено спермы. Хряки после запуска в манеж проявляли половые рефлексы в неодинаковой форме.

Анализ полученных нами данных свидетельствует о том, что у 56,7% хряков половые рефлексы проявлялись активно. У 12,1% хряков-производителей проявление половых рефлексов заторможено, в связи с низкой половой активностью и отсутствием рефлекса эрекции. Хряки в 23,7% случаев отказывались делать садку на чучело с достаточно ярко выраженными половыми рефлексами т.е. отсутствовал рефлекс вспрыгивания. В 7,5% случаев хряки не проявляли интерес к чучелу и не проявляли половые рефлексы, т.е. отсутствовал изначальный локомоторный рефлекс.

Расстройство нейроэндокринной регуляции половой функции у хряков проявлялось нарушением половых рефлексов, преимущественно их торможением. Наличие у хряка внешнего раздражения половых рефлексов или торможения отрицательной индукции было замечено в 30,4% случаев, что проявлялось отказом делать садку на чучело.

Необходимо отметить, что у 16,0% хряков отмечалось торможение половых рефлексов при появлении в манеже посторонних людей, а в 50,7 % случаев наблюдалось полное торможение половых рефлексов при появлении в манеже ветеринарного врача. У 31,0% хряков увеличилось время от начало их запуска в манеж до начала появление половых рефлексов при наличии в манеже запахов. В 22,3% случаев у хряков-производителей наступало торможение половых рефлексов на звуковые и световые сигналы. Запредельное торможение половых рефлексов (27,8%) очень возбудимых хряков, что характеризовалось чрезмерным проявлением локомоторных рефлексов и ослаблением рефлекса эрекции. Угасательная форма торможения половых рефлексов не характерна для хряков и в нашем случае отмечена лишь у одного хряка, что составляет за весь период опыта 8,2 %.

Торможение запаздывающего рефлекса, возникающее после длительной выдержки хряков перед манежем в состоянии полового возбуждения и связанное с задержкой получения спермы было у 12,5% животных. Нарушение половых рефлексов в форме сонного торможения отмечено у 21,1 % хряков - производителей .

Результаты исследований свидетельствуют о том, что существует породные особенности в проявлении половых рефлексов у хряков. Так, у крупной белой породы преобладает торможение половых рефлексов в форме отрицательной индукции (38,1%), тогда как среди породы дюрок только у 27,0%, а у ландрас - 36,2%. Наиболее лабильны хряки-производители к торможению отрицательной индукции - крупная черная (27,6 %). Запредельное торможение наиболее часто (35,5%) регистрируется у хряков крупной черной породы. Запредельный рефлекс встречается предельно у 17,9% хряков крупной черной породы, у других пород этот показатель не превышает 15%. Сонное торможение достаточно часто встречается у хряков породы ландрас (26,0%).

Запаздывающий рефлекс (12,5 %), а также угасание половых рефлексов (8,2 %) не характерно для хряков, а столь высокий процент данных показателей свидетельствует о малой выборке наблюдений.

В результате проведенных нами наблюдений за психоэмоциональным состоянием хряков-производителей используемых в технологии искусственного осеменения позволило выделить четыре типа нервной деятельности в зависимости от породной принадлежности . Из полученных данных следует, что у хряков пород крупная черная (38,7%) и крупная белая (24,7%) наиболее часто встречается сильный неуравновешенный тип нервной деятельности, который характеризуется интенсивностью проявления половых рефлексов, как правило, они не способны к торможению половых рефлексов. Вследствие нарушения отношений между раздражительными и тормозными процессами срок их эксплуатации ограничен с возрастом. Хряки крупной белой (41,3%) и ландрас (40,4%) обладают сильным уравновешенным подвижным типом нервной системы. Они, как правило, активны при получении спермы на искусственную вагину. Положительные и тормозные половые рефлексы на чучело у них образуется легко. Однако при однообразной обстановке у них появляется сонно-тормозное состояние. Сильно уравновешенный инертный тип хряков зарегистрирован у 24,8% пород дюрок и у 20,6% крупная белая. Хряки слабого типа нервной деятельности встречались в 21,3% случаев породы ландрас и породы дюрок (19,2%). Они отличались быстрым торможением половых рефлексов на внешние раздражители, особенно шум, окрик, резкий запах вследствие этого очень трудно приучить их к получению спермы на искусственную вагину.

Наиболее существенными моментами появления импотенции у хряков является недостатки качества спермопродукции. В результате проведенных нами исследований было установлено, что наиболее часто они встречаются в виде азоспермии, олигоспермии, некроспермии и тератоспермии .

Нарушение процесса спермопродукции или оплодотворительная импотенция наиболее часто регистрируется у хряков породы ландрас (38,7%) и крупная белая (38,5%), у крупной черной (32,6%) и дюрок (36,2%) -несколько ниже, но все таки достаточно высокий у трети хряков в силу тех или иных причин качественные показатели спермы снижены, что затрудняет их использование в технологическом цикле воспроизводства маточного поголовья свиней.

Азоспермия у хряков встречается в 10,27% случаев, а олигоспермия в 12,3% случаев. Некроспермия зарегистрирована в 8,45% эякулятах, а тератоспермия в 5,7% случаев.

3.2 Эффективность применения естественно-биофизических стимуляторов для повышения половой активности хряков-производителей и качества спермопродукции

В результате проведенных исследований по изучению особенностей проявление половых рефлексов у хряков-производителей, а так же формах их торможения и типов нервной деятельности установили наличие технологических ошибок при получении спермы и эксплуатации разных пород хряков..

Из естественно-биофизических стимуляторов воспроизводительной способности хряков наше внимание привлек простой метод активации половой функции - массаж семенников и общение со свиноматкой в охоте.

Первый способ заключался в том, что за 5-10 минут перед запуском хряка в манеж для взятия спермы на искусственную вагину им проводили массаж мошонки и семенников, после предварительного обмывания теплой водой. Массаж мошонки и семенников оказал положительное действие. Полученные данные свидетельствуют о том, что объем эякулята возрастал с 221,5 мл до 237,7 мл. Эта динамика прослеживалась у 87,5% хряков-производителей не зависимо от породных принадлежностей. Поскольку показатели объема эякулята после опыта были выше фоновых на 16,2 мл.

Концентрация спермиев в 1 мл эякулята изменялась неравномерно и носила хаотический характер. У 12,7% хряков отмечалось увеличение этого показателя с 0,271 млрд./мл до 0,280 млрд./мл. Во время опыта у 67,5% хряков данный показатель не имел статистически достоверную разницу с контрольной группой животных и в основном имел породные отличия.

При этом у 19,8% хряков показатель концентрации спермиев в 1 мл эякулята снизился на 6,7 % . Показатель количества живых спермиев составили 88,8%, мертвых - 11,2%. Активность составила 8.8. баллов, при выживаемости спермиев в течение 5 часов показатель абсолютной выживаемости составил 2547 ед.

Сила влияния массажа мошонки и семенников на объем эякулята во время опыта составила 0,13 (F = 21), а после опыта 0,11 (F = 1,7).

В качестве естественно-биофизического стимулятора половой деятельности хряков-производителей нами была применена свиноматка в стадии возбуждения полового цикла при наличии феномена половой охоты.

При оценке активности половых рефлексов учитывали время запуска производителя в манеж, проявление половых рефлексов на чучело, общую активность животных и спермопродукцию. Для проведения эксперимента были подобраны три группы хряков-производителей крупной белой породы.

В первой группе активацию проводили способом обнюхивания хряками ватных тампонов, смоченных шеечновлагалищной слизью, полученной из смывов влагалища свиноматок в охоте.

Хрякам второй группы представлялась возможность общения со свиноматкой в охоте. Хряки третьей группы не только общались со свиноматкой, но и выполняли половой акт. У животных первой группы в течение недели особых поведенческих изменений не отмечалось. Лишь на 8-12-й день у трех хряков повысилось половая активность. Во второй группе хряков у 70% половая активность повысилась на 2-3 день, в то время как у хряков-производителей третей группы у 67% отмечалось угасание половых рефлексов на чучело и получение спермы на искусственную вагину стало проблематично.

Объем эякулята увеличивался на 11,9 % (P >0,05). После окончания опыта показатели объема эякулята приближались к исходным данным. Аналогичная картина наблюдалась и в динамике концентрации спермиев. Происходило увеличение концентрации от 0,252 ± 0,014 до 0,279 ± 0,015 млрд./мл. Процент живых спермиев составил во время опыта 90%, а после опыта - 88%. Показатель абсолютной выживаемости составил во время опыта 2478 ± 97, а после опыта 2616 ± 102 ед.

Стимулирующие влияние массажа мошонки и семенников их придатков осуществляется за счет механических раздражений барорецепторов периферических нервов. Действие на нервную систему осуществляется рефлекторным путем на нервные центры и вегетативную нервную систему, в результате чего изменяются установившиеся взаимоотношения между периферией и нервными центрами.

Ручной массаж, проводимый хрякам перед получением спермы на искусственную вагину, увеличивал объем эякулята после опыта на 6,7% . Концентрация увеличивалась во время опыта и после опыта соответственно на 3,1 и 5,3%. В коррелятивной зависимости от увеличения объема эякулята концентрации спермиев находились показатели качества спермиев и получаемых спермодоз. Увеличение показателя количества спермиев произвело во время опыта на 32,2 и после 29,7%, а показатели получаемых спермодоз во время опыта на 32,5 и после - 29,5%.

Усиление секреторной деятельности придаточных половых желез способствовало увеличению процента живых спермиев, которых во время опыта составило 9,4%. Показатель абсолютный выживаемости изменялся незначительно.

Стимуляция хряков свиноматкой в охоте на первом этапе проведения эксперимента сокращала время получения спермы на искусственную вагину. Общение хряков со свиноматкой в охоте без коитуса вызывает физиологически полноценную стимуляцию не только отдельных мышц, но и всей половой системы в целом. В ходе проведения эксперимента и производственного опыта было установлено, что происходит увеличение объема эякулята во время опыта на 16,8%. После опыта этот показатель снижается до уровня фонового. Концентрация увеличивается во время опыта на 14,7% и после - 5,5%, а также количества получаемых спермодоз во время опыта на 20, % и после - 5,5%. Стимуляция хряков предложенным методом снизила процент мертвых и повысила процент живых спермиев во время опыта на 7,5% и после опыта на 4,4%.Показатель абсолютной выживаемости повысился во время опыта на 2,4% и после на 4,7%.

3.3 Влияние селеноорганического препарата «ДАФС-25» на репродуктивную функцию хряков-производителей и качество спермопродукции

Применение «ДАФС-25» позволяет выяснить его влияние на количество и качество спермы, а также изыскать эффективный способ профилактики импотенции у хряков-производителей. Для проведения экспериментов были сформировано две группы хряков. Животные имели правильное телосложение, хорошую упитанность и конституцию. Выраженных отклонений в общем состоянии организма животных и проявлений половых расстройств за период проведения опытов не отмечалось.

У хряков опытной группы объем эякулята в период опыта увеличился по сравнению с исходными данными до опыта на 1,2%, а после опыта увеличивался на статистически недостоверную разницу (разница 4,8%). Концентрация спермиев во время опыта увеличивалась на 2,3% (Р>0,05), а после опыта этот показатель был равен фоновому. Процент патологических спермиев во время и после опыта не изменялся. Показатель резистентности во время опыта снизился на 2,2%, а после опыта повысился на 1,5% по сравнению с показателями фона.

У хряков контрольной группы во время опыта произошло снижение на 17,4%, а после опыта увеличение дегидрагеназной активности на 9,8% . Процент патологических спермиев во время и после опыта незначительно превышал допустимые нормы .Показатель резистентности во время опыта снизился на 2,2%, а после опыта повысился на 1,5% по сравнению с показателями фона.

Таблица 1. Показатели спермограммы хряков-производителей при введении в рацион антиоксиданта «ДАФС-25»

Примечание: здесь и далее* Р < 0,05; ** Р > 0,01 по отношению к контрольной группе.

Применение препарата «ДАФС-25» в рационах хряков приводит к увеличению объема эякулята и концентрации спермы, как во время опыта, так и после опыта. Объем эякулята увеличился во время опыта на 18,1%, а после опыта на 36%. Концентрация спермы возросла во время опыта на 10,2%, а после опыта на 23,5%. В коррелятивной зависимости от объема эякулята и концентрации спермы находилось количество спермиев и полученных спермодоз, увеличение которых составило во время опыта 17,0%, а после опыта 51,6%.. Увеличение активности спермиев на 11,3% произошло только во время опыта. После опыта этот показатель стал равен фоновому. Повышение резистентности на 12,8% отмечалось только после опыта. Выживаемость спермиев во время опыта повысилась на 8,7%, а после опыта на 36,4%. Одновременно произошло увеличение показателя абсолютной выживаемости во время опыта на 12,3% и после опыта на 16,9%. В ходе опыта и после него улучшались показатели дегидогенозной активности, соответственно на 19,4% и 33,7%. Отмечалось снижение патологических форм спермиев во время опыта на 10,9% и после опыта на 12,0%.

Испытываемый препарат «ДАФС-25» оказал стимулирующее воздействие на рН спермы. Произошло увеличение этого показателя во время опыта на 12,4% и после опыта на 11,9%. Сопоставление данных, полученных во время опыта у хряков опытной группы при изучении влияния «ДАФС-25» с показателями животных контрольной группы, указывает на стимулирующее воздействие применения «ДАФС-25» на качество спермы.

Объем эякулята во время опыта у животных этой группы оставался стабильным, а увеличение его произошло после опыта и превысило аналогичный показатель у контрольной группы животных на 20,7%. Концентрация спермиев по сравнению с контролем повысилась во время опыта на 12,5%, а после опыта на 20,7%. Увеличение количества спермиев и полученных спермодоз было аналогично с изменениями предыдущих показателей, которые составили во время опыта 28,7%, а после опыта 44,9%. Средние показатели активности, выживаемости, живых и мертвых спермиев оставались относительно стабильными и незначительно отклонялись от показателей контрольной группы. Резистентность спермиев у опытных хряков была выше на 16,6% во время опыта и на 14,3% после опыта. Дегидрогеназная активность улучшалась и превышала показатели контрольной группы во время опыта на 13,2%, а после опыта на 25,3%. Показатель рН был выше, чем у контрольных животных во время опыта на 2,6%, а после опыта на 3,9%.

Введение в рацион «ДАФС-25» нормализует функцию щитовидной железы и тем самым улучшает эндокринную регуляцию сперматогенеза и значительно повышает качественную характеристику спермы. Необходимо отметить, что после применения селеноорганического препарата «ДАФС-25» для улучшения качества спермы у хряков значительно сократился процент браковки спермы .

Микробная контаминация спермы хряков во многом определяет ее устойчивость во внешней среде и оплодотворяющую способность. Результаты ветеринарно-санитарных значений смывов препуциальной полости и эякулятов хряков предоставлены в данных таблицы.

В смывах препуция хряков микробное число составило в контрольной группе 108,7 ± 15,2 тыс. м. г. в 1 мл против 68,7 ± 9,3 (Р < 0,01) тыс. мл в 1 мл. в опытной группе. В то же время коли-индекс у хряков-производителей опытной группы был снижен в 1,38 раза, а коли-титр в 1,27 раза по сравнению со смывами из препуциальной полости хряков контрольной группы, а в сперме, соответственно, в 1,54; 1.29 и 1,75 раза при высокой степени достоверности (Р < ; Р < 0,01).

Между микробной контаминацией препуциальной полости и спермой выявлена слабая корреляция по общей микробной загрязненности (ч = + 0,15) и высокодостоверная средняя положительная корреляция по коли-титру (ч = + 0,4; Р < 0,01).

В смывах препуция и пробах спермы хряков-производителей во всех случаях выделяли микроорганизмы, родовой состав которых был идентичен. Так, из препуция выделяли в 32,7% случаев стафилококки, в 27,3% - эшерихии, в 7,3% псевдоманады и в 32,7% - стрептококки, а их спермы эти же культуры микроорганизмов, соответственно, в 32,4%; 32,4%; 27,8% и 7,3% случаев.

Наиболее общее количество бактерий и микроорганизмов кишечной палочки в смывах препуция и эякулятах получали летом и зимой, а наименьшее - весной и осенью. Микробное число спермы соответствовало санитарным нормам весной, летом и осенью. Однако коли-титр как смывов препуция, так и спермы хряков не соответствовал ветеринарно-санитарным нормативам ни в один из сезонов года. Наибольшее количество слабозагрязненных эякулятов получали в весенний (57,3%) и осенний (51,2%) периоды времени, а наименьшее - в зимний (15,5%) и летний (26,1%) периоды года. При бактериологическом исследовании спермы летом и зимой выявили преимущественно среднезагрязненные эакуляты, соответственно в 51,3% и 40,3% случаев. Наибольшее количество эякулятов с сильно загрязненной спермой выявлено зимой в 40,5% случаев, а в остальные периода года количество эякулятов, содержащих более 5 тыс. м. т. в сперме, было одинаковым и регистрировалось в 25,7% случаев.

Оплодотворяемость свиноматок во все периоды года была выше в группе хряков-производителей, которым в рацион вводили селеноорганический препарат «ДАФС-25» и составили соответственно 7,8%; 3,9%; 2,5%; 6%. Устойчивое снижение уровня оплодотворяемости начинается с июля (64,5%) и становится минимальным в августе (54,4%) и сентябре (59,7%). Подобную динамику снижения оплодотворяемости свиноматок, по-видимому, можно связать с действием температурного стресса на организм хряков, а также функциональную деятельность репродуктивной системы свиноматок.

Опыт проводили в два этапа: подготовительный и опытный. В подготовительный период, продолжительностью 40 дней, подопытная и контрольная группы хряков-производителей получали только основной рацион. В опытный период, продолжающийся 120 дней, подопытная группа хряков дополнительно к основному рациону в течение 20 дней получала селеноорганический препарат «ДАФС-25».

Для оценки качества спермопродукции, эякуляты от хряков получали на искусственную вагину при умеренном режиме использования, одна садка в 3-4-и дня, при туровом искусственном осеменении свиноматок. Оценку спермы осуществляли как в подготовительный период, так и через 60 и 90 дней после скармливания «ДАФС-25».

Полученные данные свидетельствуют о том, что в подготовительном периоде показатели спермограммы хряков подопытной и контрольной групп были практически равными. Вместе с тем, анализ спермограмм, полученных в опытный период, позволил установить, что применение «ДАФС-25» приводит к повышению воспроизводительной способности хряков. Так, в подопытной группе через 60 и 90 дней после применения препарата наблюдалось повышение объема эякулята на 15,27% при незначительном понижении концентрации в нем половых клеток на 4,27%. Данные показатели оставались постоянными на протяжении всего периода наблюдений.

При оценке качественных показателей спермы установили, что дегидрогеназная активность во всех группах на протяжении периода наблюдений не имела значительных колебаний. Повышение качественных показателей смермограммы у хряков, после введения в рацион «ДАФС-25», положительно отразилось на эффективности осеменения свиноматок. Так, использование спермы от хряков подопытной группы обуславливало оплодотворение у 76,25…78,85% осемененных свиноматок, тогда как эффективность осеменения маток спермой хряков контрольной группы составила 72,15…74,37%..

3.4 Разработка метода активации половой потенции хряков-производителей ЭМИ КВЧ-мм диапазона МСПИО₂

Особого внимания заслуживает разработка способов восстановления половой функции у хряков с учетом взаимосвязи между внешним проявлением активности и внутренними изменениями функции половых желез, которые отражают механизмы регуляции и изменений сперматогенеза, активности проявления половых рефлексов в ответ на действие различных раздражителей.

Первый способ стимуляции заключался в том, что 4-м хрякам-производителям за 15-20 минут до получения спермы на искусственную вагину проводили воздействие ЭМИ КВЧ-мм диапазона аппаратом «КВЧ О₂» в режиме 65...129 ГГц в течение 6-8 минут на семенники и их придатки.

У хряков данной подопытной группы объем эякулята до и во время опыта составил в среднем 257,4 ± 10,1 мл, после опыта произошло его увеличение в среднем на 16,2%. Воздействие ЭМИ КВЧ-мм диапазона («КВЧ О₂») оказало влияние на концентрацию спермиев в сперме хряков, которая во время опыта находилась в пределах от 14,3% до 18,1% против фоновых показателей до опыта, а после опыта от 14,3% до 27,3%.

Полученные результаты показывают, что изменение количества спермиев у хряков находилось в коррелятивной зависимости от объема эякулята и концентрации спермиев.. Высоких процент живых спермиев во время опыта составил в среднем 89,0%, а после опыта - 90,0%. Активность спермиев у хряков-производителей была достаточно высокой 9,0 баллов.

Электромагнитное излучение КВЧ-мм диапазона на частоте 65…129 ГГц положительно повлияло на изменение показателя абсолютной выживаемости спермиев, причем, индивидуальные показатели качества спермы хряков внутри группы имели характерные отличия, связанные также с природными качествами и носили сезонный характер.

Интервалы показателей у этих хряков составили во время опыта от 8,3% до 25,0%, а после опыта от 7,7% до 23,1%. У хряков крупной белой породы повышение среднего показателя отмечали только после опыта (16,7%). Повышение средних показателей концентрации спермиев во время опытов на 33,3% и после опыта на 23,1% отмечались у хряков крупной черной породы и ландрас. ЭМИ КВЧ-мм диапазона оказало определенное воздействие на соотношение живых спермиев. У хряков крупной белой породы в конце опыта произошло увеличение среднего показателя процента живых спермиев на 7,3%. Активность спермиев у хряков породы дюрок и ландрас была выше среднего показателя на 8,4%. Выживаемость спермиев увеличилась не зависимо от породы хряков в среднем на 8,65% - 15,6%.

Второй способ стимуляции качества спермы заключался в непосредственном воздействии ЭМИ КВЧ-мм диапазона на сперму после ее получения на искусственную вагину, в течение 3-5 минут. ЭМИ КВЧ -воздействие в мм-диапазоне на частоте 65…129 ГГц оказало положительное влияние на качество полученной спермы. В большинстве эякулятов активность спермиев была в среднем 9,0 баллов. При этом соотношение живых и мертвых спермиев сдвинулось в пользу процента живых спермиев, обладающих прямолинейно-поступательным движением в среднем на 8,6%. Активность спермиев 75% эякулятов была выше средних показателей на 9,1%. При этом абсолютная выживаемость превышала средний уровень на 13,4%.

Таблица 2. Качество спермограммы хряков-производителей при воздействии на семенники и сперму ЭМИ КВЧ-ММ диапазона

Третий способ электромагнитного воздействия КВЧ-мм диапазона заключался в облучении семенников и спермы, полученной от хряков на искусственную вагину. У хряков этой группы происходило увеличение эякулята как во время опыта, так и после него. Максимальное увеличение объема эякулята отмечалось у хряков крупной белой, крупной черной пород, а также ландрас и находилось в пределах от 17,6% до 62,5% У хряков-производителей породы дюрок объем эякулята в среднем увеличивался в интервале от 6,1% до 11,1%. После опыта этот показатель у всех хряков удерживался на достаточно высоком уровне от 11,8% до 62,5%. Увеличение объема эякулята по данной опытной группе в среднем составило во время опыта 13,1%, а после опыта - 14,4%, что свидетельствует о стимулирующем воздействии ЭМИ КВЧ-мм диапазона на объем эякулята.

На изменение концентрации спермиев ЭМИ КВЧ-мм диапазона во время опыта существенного влияния не оказал. Показатели оставались стабильными у 50,0% хряков-производителей. Только у хряков породы крупная белая произошло увеличение этого показателя на 11,15% после опыта, а у хряков породы ландрас и крупная черная - на 8,3% и 12,5%. В целом по группе концентрация спермиев во время опыта оставалась стабильной и не превышала фоновые показатели. Высокий процент живых спермиев был получен в конце опытов у 50% хряков-производителей. У этих же хряков-производителей активность спермиев составила 9 баллов, у остальных хряков активность было 8,9 балла.

Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что у хряков крупной белой и крупной черной пород объем эякулята был выше среднего показателя по группе во время опыта на 7,4%-65,2%, и после опыта на 4,2%-31,9%. У хряков породы ландрас и дюрок показатели объема эякулята были выше среднего показателя контрольной группы во время опыта на 9,1%-17,4%, а после опыта на 9,8%-16,7%.

Повышение средних показателей концентрации спермиев во время опыта на 9,1% отмечалось у хряков породы ландрас и дюрок, а после опыта на 10,0%-20,0%, соответственно. У хряков крупной белой и крупной черной пород во время опыта превышение среднего показателя произошло на 9,1%-18,2%. Превышение среднего (контрольная группа) показателя процента живых спермиев на 5,9% и снижение мертвых спермиев на 33,3% было характерным для хряков пород ландрас и крупная белая. У остальных хряков процент живых спермиев по сравнению с контрольной группой не превышал 2,3%-3,4%, а мертвых не более 7,5%-11,8%. Активность спермиев у 50% хряков превышала средний уровень хряков контрольной группы на 5,9%, у остальных - на 4,7%. Отклонение от среднего уровня абсолютной выживаемости были незначительными у хряков-производителей пород ландрас и дюрок. Превышение данного показателя находилось в пределах 2,5%-4,3%.

Исследования показали, что во время воздействия, характеристика применяемых способов воздействия ЭМИ КВЧ-мм диапазона, количество сеансов находилось в коррелятивной зависимости от ответной реакции животных, продолжительности снижения половой потенции, режима полового использования и уровня обмена веществ.

Сопоставляя результаты исследований по изучению влияния ЭМИ КВЧ-мм диапазона на спермопродукцию хряков и качественные показатели спермы, необходимо отметить, что предложенный метод ЭМИ КВЧ-мм диапазона на частоте 65…129 ГГц оказывает не только локальное воздействие, но и активно влияет на обменные процессы организма животных в целом.

Обобщение полученных результатов позволяет сделать заключение о целесообразности использования метода воздействия ЭМИ КВЧ-мм диапазона на хряков с пониженной половой потенцией для повышения качества спермы.

Оплодотворяющая способность спермы во многом зависит от микробной контаминации препуциальной полости и спермы хряков. Результаты ветеринарно-санитарных значений смывов препуциальной полости и эякулятов, полученных от хряков, свидетельствуют о том, что в смывах препуциальной полости микробное число у хряков контрольной группы превысило аналогичный показатель животных опытной группы на 68,63% в тыс. м. г. в 1 мл. эякулята, коли-индекс в 1,28 раза, а коли-титр в 1,31 раза. Между микробной контаминацией препуциальной полости и спермой выявлена положительная корреляция по общей микробной загрязненности (ч = + 0,37; Р < 0,05) и высокодостоверная корреляция по коли-титру (ч = + 0,75; Р < 0,01). В смывах из препуциальной полости и пробах спермы хряков-производителей выделяли микроорганизмы, родовой состав которых был идентичен. Так, из препуциальной полости выделили в 37,4% случаев стафилококки, в 33,3% - стрептококки, в 25,3% - эшерихии и 4,0% - псевдомонады. В сперме количественный состав микроорганизмов был следующий: 38,2% стафилококки, 32,7% - стрептококки, 26,5% - эшерихии и 2,6% - псевдомонады.

Результаты проведенных исследований по изучению влияния ЭМИ КВЧ-мм диапазона на оплодотворяющую способность спермы показали, что оплодотворяемость свиноматок находится в прямой зависимости от способа воздействия ЭМИ КВЧ-мм диапазона. Оплодотворяющая способность эякулятов хряков имела вариации от способа воздействия и породы. При сравнении данных по уровню оплодотворяемости свиноматок установили, что самая высокая она была у крупной белой породы при облучении семенников и спермы ЭМИ КВЧ-мм диапазона на частоте 65…129 ГГц. А самая низкая у породы ландрас. При облучении семенников перед получением спермы на искусственную вагину оплодотворяемость свиноматок составила в среднем 79,13%. Отмечена породная особенность, которая свидетельствует о достаточно высокой оплодотворяемости свиноматок породы дюрок (74,0%) и наименьшая у породы крупная черная (71,9%). При облучении свежеполученной спермы наивысшая оплодотворяемость отмечена у породы крупная белая (74,6%) и наименьшая у породы ландарс (73,5%). В среднем оплодотворяемость в данном опыте составила 74,08%.

При воздействии ЭМИ КВЧ-мм диапазона на семенники перед получением спермы на искусственную вагину и облучением свежеполученной спермы оплодотворяемость свиноматок в среднем по опытной группе составила 74,68%. Наивысшая оплодотворяемость зафиксирована у крупной белой породы (75,6%), наименьшая - у породы ландрас (73,6%).

3.5 Эффективность сочетанного применения естественно-биофизических стимуляторов,«ДАФС-25» и ЭМИ КВЧ-мм диапазона для профилактики импотенции и повышения качества спермы у хряков-производителей.

Методика проведения эксперимента заключалась в следующем: по принципу аналогов были сформированы две группы хряков-производителей.

Находящихся в опыте хрякам разных пород проводили стимуляцию половой потенции естественно-биологическими стимуляторами. Для этого, перед получением спермы от хряка на искусственную вагину, его загоняли в станок, где содержались свиноматки, пришедшие в охоту. После активного общения со свиноматками хряка удаляли из станка и загоняли в манеж для взятия спермы. Тщательно теплой водой обмывали кожу мошонки и одновременно проводили массаж семенников и их придатков. Вслед за этим проводили облучение семенников и их придатков ЭМИ КВЧ-мм диапазона. После получения спермы на искусственную вагину и отделения саговых зерен от эякулята проводили облучение неразбавленной спермы ЭМИ КВЧ-мм диапазона на частоте 65…129 ГГц. Перед опытом хряки кроме хозяйского рациона дополнительно получали с премиксом препарат «ДАФС-25». Контрольная группа хряков была группой сравнения.

Таблица 3. Эффективность сочетанного применения естественно-биофизических стимуляторов при коррекции качества спермограммы у хряков-производителей (n = 32)

Средняя активность половых клеток в свежеполученной сперме хряков опытной группы была достаточно высокой (8,95 балл.) против хряков контрольной группы (8,65 балл.). Концентрация, дегидрогеназная активность и резистентность спермиев и общее количество активных половых клеток были выше у производителей, которым проводили стимуляцию спермопродукии естественно- биологическими способами.

Сочетанная стимуляция половой активности спермопродукции у хряков оказала положительное воздействие на качество спермы. У большинства хряков (75,0%) подопытной группы как во время опыта, так и после него происходило увеличение объема эякулята. Максимальное его увеличение было отмечено у хряков-производителей крупной белой и крупной черной пород от 14,3% до 25,0%. Увеличение на 6,7% и 9,1% было характерным для хряков пород ландрас и дюрок. После опыта наибольшее увеличение показателя объема эякулята от 28,6% до 46,7% было у хряков крупной белой породы и ландрас. Превышение фоновых показателей объема эякулята на 10,0%-17,6% отмечалось у хряков пород дюрок и крупной черной, что указывает на стимулирующее воздействие на объемы эякулята естественно-биофизических факторов и применения «ДАФС-25» и ЭМИ КВЧ-мм диапазона.

Во время опыта увеличение концентрации спермиев на 9,1% произошло у хряков крупной белой породы. После опыта у всех хряков произошло увеличение концентрации на 12,5%-25,0%. В целом по подопытной группе концентрация спермиев у хряков-производителей увеличилась во время опыта на 6,3%, а после опыта на 24,9 Высокий процент живых спермиев был получен в конце опыта у 75,0% хряков. У этих же хряков активность спермиев составляла 9 баллов. У хряков породы дюрок активность спермиев в среднем составила 8,7 балла.

Анализ полученных данных показывает, что повышение качества спермы у хряков не всегда совпадает со средними показателями по всей группе.

Так, у хряков крупной белой породы, ландрас и крупной черной показатели объема эякулята были выше средних показателей во время опыта на 10,3%-47,1%, а после опыта на 7,6%-39,2%. Повышение средних показателей концентрации спермиев во время опыта на 12,0%-28,0% , и после опыта на 15,1%-29,5% отмечалось у хряков крупной белой породы, ландрас и дюрок.

Применение естественно-биофизических стимуляторов, антиоксидантов и ЭМИ КВЧ-мм диапазона оказывает определенное воздействие на соотношение живых и мертвых спермиев. У 75% хряков произошло увеличение среднего показателя живых спермиев на 18,6%, у остальных - на 13,9%. Активность спермиев у 85% хряков превышала фоновый показатель на 19,1%, у остальных - на 12,9%. Было отмечено влияние сочетанной стимуляции и воздействие ЭМИ КВЧ-мм диапазона на абсолютную выживаемость. Превышение среднего уровня было отмечено у 85,0% хряков-производителей на 17,1%-23,4%.

Микробная контаминация полости препуция хряков оказывает значительное влияние на санитарные показатели полученных от них эякулятов. Чем выше обсемененность в смывах препуция, тем выше эти значения и в эякулятах производителей.

Следовательно, достоверное снижение санитарных показателей смывов препуция происходит у хряков в возрасте старше 3-х лет, что вероятно связано с увеличением объема препуциальной полости, возможностей скопления в ней остатков мочи, секрета, снижением локальной резистентности и, как следствие, созданию условий развития условно-патогенной микрофлоры. По сравнению с молодыми хряками микробное число повышается в возрасте от 2-х до 3-х лет в 1,85 раза, старше 3-х лет - в 2,15 раза, а коли-титр уменьшается, соответственно, в 2,37 и 3,85 раза (Р < 0,01). При внутрипородном рассмотрении санитарных показателей выявили, что у хряков крупной белой породы и ландрас в возрасте 2-х-3-х лет микробное число спермы увеличивается в 1,57 раза, старше 3-х лет в 2,19 раза, а коли-титр понижается, соответственно, в 1,95 и 3,75 раза (Р < 0,05; Р < 0,01). У хряков породы дюрок и крупная черная общая микробная загрязненность эякулятов в возрасте 2-х-3-х лет повышается в 2,63 раза, старше 3-х лет - в 2,47 раза, а коли-титр, соответственно, понижается в 3,35 и 4,43 раза Р < 0,05; Р < 0,01).