Функциональная и морфологическая характеристика иммунной системы организма поросят при применении иммуномодулятора натрия нуклеината

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных

патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

кандидата ветеринарных наук

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ И МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ОРГАНИЗМА ПОРОСЯТ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИММУНОМОДУЛЯТОРА НАТРИЯ НУКЛЕИНАТА

Александрова Светлана Сергеевна

Саратов 2010

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Скорляков Виктор Михайлович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Винников Николай Тимофеевич

кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Бородавкин Игорь Валерьевич

Ведущая организация: ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии

Защита состоится «17»декабря 2010 года в «___» часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.01 при ФГОУ ВПО Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова по адресу: 410005, Саратов, ул. Соколовая, 335 диссертационный зал.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке УК № 3 ФГОУ ВПО Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова по адресу: 410005, Саратов, ул. Соколовая, 335

Отзывы на автореферат просим высылать по адресу: 410012, РФ, г. Саратов, Театральная площадь, 1, ученому секретарю.

Автореферат разослан 2010 г. и размещен на сайте университета www.sgau.ru

Ученый секретарь диссертационного совета Домницкий И.Ю.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Для многих хозяйств, занимающихся животноводством, актуальной становится проблема иммунодефицитных состояний, особенно у молодняка. По данным Деевой А.В. с соавторами (2006) в условиях промышленного содержания у 80% животных развиваются иммунодефицитные состояния, что приводит к повышению восприимчивости к заболеваниям, в том числе бактериальной и вирусной природы.

Применение современных средств иммунокоррекции в животноводстве позволяет повысить эффект традиционной терапии, значительно снизить заболеваемость и смертность, и тем самым уменьшить затраты на лечение и повысить экономическую эффективность производства.

В настоящее время существует большое количество иммунокоррегирующих препаратов различных по химической структуре и биологическим свойствам. Наше внимание привлек иммуномодулятор натрия нуклеинат, который представляет собой натриевую соль низкомолекулярной РНК. Его активным биологическим компонентом являются нуклеотиды. Предприятием ЗАО «Биоамид» разработан новый способ получения субстанции препарата натрия нуклеинат гидролизом хлебопекарских дрожжей. Процесс получения препарата включает специальную стадию ферментной очистки от белковых примесей, чего ранее не было. В результате разработки нового способа получения натрия нуклеината возникла необходимость в оценке влияния этого препарата на иммунный статус поросят.

Работа является частью комплексных исследований факультета ветеринарной медицины и биотехнологии в рамках комплексной темы перспективного плана ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ» «Адаптивные морфофункциональные особенности организма животных в видовом, возрастном и породном аспектах в зависимости от влияния факторов внешней среды».

Цель и задачи исследований. Целью нашего исследования является изучение влияния иммуномодулятора натрия нуклеината, производимого с помощью нового способа ферментной очистки на функциональные и морфологические показатели иммунного статуса поросят и формирование поствакцинального иммунитета.

При этом ставились следующие задачи:

1. Оценить влияние натрия нуклеината на становление клеточных и гуморальных показателей защиты организма поросят;

2. Изучить морфологическое строение органов иммунной системы при применении натрия нуклеината;

3. Выяснить действие препарата на формирование поствакцинального иммунитета; натрий нуклеинат гуморальный поросенок

4. Исследовать эффективность препарата в условиях производства.

Научная новизна. Впервые проводится системное изучение функциональных и морфологических показателей иммунной системы поросят под влиянием натрия нуклеината, полученного с помощью нового способа, включающего специальную стадию ферментной очистки.

Установлено влияние препарата на динамику Т и Б лимфоцитов, уровень фагоцитарной активности, состояние бактерицидной и лизоцимной активности, содержание общего белка и его фракций в сыворотке крови.

Доказано воздействие препарата на морфофункциональное состояние органов иммунной системы, а так же иммунный ответ на введение препарата в период отъема и вакцинации.

Практическая значимость работы. Доказано стимулирующее влияние иммуномодулятора натрия нуклеината, полученного новым способом ферментной очистки на состояние специфической и неспецифической систем защиты организма поросят. Полученные результаты могут быть использованы ветеринарными специалистами при коррекции иммунодефицитных состояний у молодняка животных. Препарат рекомендован к широкому использованию как стимулятор клеточных и гуморальных факторов защиты организма.

Материалы исследований используются на морфологических и клинических кафедрах для организации учебного процесса при подготовке и повышении квалификации ветеринарных специалистов.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования используются в практической деятельности ветеринарными специалистами ЗАО Агрофирмы «Волга» Марксовского района Саратовской области. Материалы исследования используются в учебном процессе и научных целях в Саратовском, Воронежском, Оренбургском госагроуниверситетах, Ульяновской ГСХА.

Основные положения, выносимые на защиту:

Системная оценка функционального состояния иммунной системы организма поросят при применении натрия нуклеината.

Морфологическая картина органов иммунной системы под действием препарата.

Влияние натрия нуклеината на формирование поствакцинального иммунитета и снижение поствакцинальных осложнений.

Апробация работы. Основные положения и практические результаты диссертации доложены на научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов по итогам научно-исследовательской и учебно-методической работы за год (Саратов 2007, 2008 г.г.); международной научно- практической конференции «Вавиловские чтения» (Саратов 2007, 2008 г.г.).

Публикации результатов исследований. Основные материалы диссертации опубликованы в 4-х научных статьях в журналах и сборниках региональных и межвузовских научно-практических конференций. В том числе одна из них в рецензируемом научном издании, рекомендованном ВАК РФ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 144 страницах компьютерного текста и состоит из общей характеристики работы, введения, обзора литературы, материалов и методов собственных исследований, их результатов и обсуждения, выводов, практических предложений и списка использованной литературы, включающего198 литературных источника, в том числе 51 иностранных авторов. Иллюстрирована 12 таблицами и 30 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал и методы исследований

Исследования по теме проведены в период с 2006 по 2008 гг. в условиях клиники сельскохозяйственных животных факультета ветеринарной медицины, на базе кафедры патанатомии и патофизиологии ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н.И. Вавилова, а так же в условиях ЗАО «Волга» Марксовского района.

Работа выполнена на поросятах крупной белой породы в возрасте от 2 до 5 месяцев. Изучение препарата проводилось в 3 этапа. Группы животных формировались по принципу аналогов, пола и живой массы. Поросята получали одинаковый по структуре рацион, который был сбалансирован и содержал все необходимые питательные вещества. Условия содержания соответствовали ветеринарно-санитарным требованиям. Было проведено 2 серии опытов в условиях ветеринарной клиники, а так же производственный эксперимент.

Первый этап проводился в условиях клиники. Целью эксперимента было изучить становление клеточных и гуморальных показателей защиты организма поросят, а так же на морфологическое строение органов иммунной системы под действием натрия нуклеината. Для этого его вводили животным первой группы в дозе 1,0 мл 0,2% раствора внутримышечно, вторая являлась контрольной. Кровь для изучения основных иммунологических показателей брали в начале эксперимента для получения исходных данных, а так же на 7, 14 и 21 дни исследования. После окончания эксперимента провели диагностический убой для выявления морфологических изменений в иммунных органах.

Второй этап работы проводился с целью оценки влияния натрия нуклеината на формирование поствакцинального иммунитета. Опыт проводился в условиях ветеринарной клиники. Поросятам первой группы вводили натрия нуклеинат в количестве 1,0 мл 0,2% раствора внутримышечно, на первый и седьмой день исследования, а так же вакцину против сальмонеллеза поросят Армавирской биофабрики подкожно в дозе 5 мл в первый день опыта. Ревакцинацию проводили на 7 день. При этом так же оценивали основные показатели иммунного статуса. Второй группе - только натрия нуклеинат в той же дозе.

Третий этап - эксперимент в условиях производства проводился на поросятах 5 месячного возраста с целью оценить предрасположенность поросят к легочным и желудочно-кишечным заболеваниям под влиянием препарата. Подопытной группе вводили натрия нуклеинат двукратно с интервалом 7 дней в дозе 3,0 мл 0,2 % раствора внутримышечно. Учитывали общее физиологическое состояние, рост и развитие поросят, появление стрессовых реакций, уровень легочных и желудочно-кишечных заболеваний.

Для оценки иммунного статуса в крови изучали следующие показатели:

Количество эритроцитов и гемоглобина определяли с помощью фотоэлектрического эритрогемометра (модель 065).

Количество лейкоцитов подсчитывали в счетной камере Горяева с использованием жидкости Тюрка по общепринятой методике.

Скорость оседания эритроцитов оценивали с помощью аппарата Панченко.

Лейкоцитарная формула выводилась в мазках крови окрашенных по Лейшману, с помощью лабораторного счетчика СЛ-1 (СмирновА.П.,1981).

Количество общего белка определяли по общепринятой методике рефрактометром ИРФ-22 (СмирновА.П.,1981). Белковые фракции в сыворотке крови определяли нефелометрическим методом на ФЭК-56М (Блинов В.А., 1996).

Лизоцимную активность сыворотки крови определяли по Бухарину О.В нефелометрическим методом, на ФЭК-56М путем лизиса бактериальной взвеси Micrococcus luteus, выращенной на МПА.

Бактерицидная активность сыворотки крови оценивалась нефелометрически на ФЭК-56М в отношении 24- часовой культуры E. coli. По Бухарину О. В. (1974)

Фагоцитарная активность нейтрофилов с помощью тест-набора "Определение фагоцитоза" ООО ХК "Реакомплекс" (Хаитова Р.М., 1995);

Количество Т- и В-лимфоцитов подсчитывали в тесте розеткообразования (Кондрахин И. П., 1985) Готовили мазки, которые окрашивали по Лейшману. В мазках подсчитывали 100 клеток‚ за В-лимфоциты принимали клетки, присоединившие 3 и более эритроцита. Результат выражали в процентах.

В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе (И.М. Карпуть, 1986; В.Е. Чумаченко, А.М. Высоцкий, Н.А. Сердюк и др.1990).

После окончания первого эксперимента провели диагностический убой для выявления морфологических изменений в иммунных органах. При вскрытии у животных отбирали лимфатические узлы, селезенку, пейеровы бляшки кишечника. Так же исследовались печень и мозг для изучения токсического влияния препарата на организм животных. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине, после чего готовили срезы и окрашивали гематоксилин-эозином.

Статистическую обработку данных осуществляли на персональном компьютере с помощью стандартного пакета программ Microsoft Excel. Достоверность различий определяли методом вариационной статистики с использованием критерия Стьюдента, различия считали достоверными при Р<0,05 (Петухов В.Л. 1996).

Первый этап эксперимента.

Гематологические показатели крови

Во время первого этапа эксперимента, количество эритроцитов в подопытной группе имело тенденцию к повышению на всем протяжении опыта. Так же следует отметить, что данный показатель на 7, 14 и 21 дни в подопытной группе был выше, соответственно на 7, 19 и 31% по сравнению с контрольной.

Общее количество лейкоцитов к 21 дню опыта увеличилось в подопытной группе на 50% по сравнению с исходными данными и достигло максимума, более чем в 2 раза превысив показатели контрольной группы.

Уровень гемоглобина в крови поросят подопытной группы достоверно вырос на 14 день и продолжал расти, достигнув на 21 день 122,2 г/л. Скорость оседания эритроцитов росла в обеих группах, однако выше этот показатель был в подопытной группе. Что мы считаем, связано с увеличением количества г- глобулинов.

Проанализировав результаты изучения лейкограммы, мы выяснили, что уровень сегментоядерных нейтрофилов в подопытной группе имел тенденцию к снижению и минимального значения достиг на 14 день опыта, составив 24,6%. Сравнительный анализ контрольной и подопытной групп показал, что их количество в подопытной группе было ниже в 1,5 раза на протяжении всего времени исследования. По данным Лебедева К.А. (1990), увеличение относительного количества нейтрофилов в крови свидетельствует о развитии стрессорной реакции. Следовательно, в нашем случае введение препарата оказало антистрессорное воздействие и вызвало оптимизацию уровня нейтрофилов.

Количество лимфоцитов у подопытной группы достигло предельного значения на 21 день опыта, превысив на 9% показатели контрольной группы. Данная картина свидетельствует стимуляции лимфопоэза, что говорит о повышение иммунологической реактивности организма.

Реакция клеточных и гуморальных систем

Исследование клеточной системы иммунитета (рис. 1, 2) показало, что уровень фагоцитарной активности достоверно увеличился в подопытной группе на 14 день эксперимента на 50% по сравнению с исх. Данными, в два раза превысив показатели контрольной группы.

Рис. 1 Фагоцитарная активность, % (первая серия опытов)

Рис. 2 Фагоцитарное число (первая серия опытов)

Фагоцитарное число в крови свиней подопытной группы возросло на 14 день и достигло к 21 дню 1,14, увеличившись в 4 раза. Фагоцитарная интенсивность в подопытной группе была выше, чем в контрольной на протяжении всего времени исследования. Таким образом, высокий уровень фагоцитарной реакции, который наблюдался с 14 дня, говорит о становлении клеточных факторов защиты, а повышение фагоцитарного числа - о формировании адаптационного резерва нейтрофилов под влиянием препарата.

Проведенные исследования количества Т и В лимфоцитов в крови показали, что количество Т лимфоцитов выросло на 14 день опыта на 13 %. На 21 день их уровень составил 44 10 9/л, что в 1,3 р. выше показателей контрольной группы. Количество В лимфоцитов возросло в крови животных подопытной группы на 21 день опыта на 31,48% по сравнению с исходными данными, в 1,5 раза превысив показатели контрольной группы.

Таким образом, наши исследования показывают, что препарат оказывает оптимизирующее действие на уровень Т- и В- лимфоцитов

Рис. 3 Т-лимфоциты, 109/л (первая серия опытов)

Рис. 4 В-лимфоциты, 109/л (первая серия опытов)

Изучив динамику изменения уровня бактерицидной активности, мы выявили, что в подопытной группе она достоверно увеличилась на 14 день, и продолжала расти, превысив на 21 день в 1,2 раза значения контрольной группы.

Максимальный уровень лизоцимной активности в подопытной группе наблюдался на 21 день эксперимента. В контрольной группе его значение было ниже показателей подопытной группы на 16%.

Таким образом, рост бактерицидной и лизоцимной активности в крови поросят подопытной группы, свидетельствует о повышении уровня неспецифической резистентности под влиянием препарата.

Биохимические показатели.

Содержание общего белка в сыворотке крови животных подопытной группы (табл. 1) было выше показателей контрольной на всем протяжении опыта.

Таблица 1 - Биохимические показатели (первая серия опытов)

Периоды исследования	Общий белок, г/л	Альбумины,%	б глобулины,%	в глобулины,%	г глобулины,%
Перед началом опыта	1 гр. n=5 (нуклеинат)	6,20±0,23	49,04±1,74	18,87±0,49	12,94±0,94	19,15±0,58
	2 гр. n=5 (контроль)	6,32±0,29	47,39±2,25	16,51±2,48	14,96±1,49	19,74±0,93
7 день	1 гр. n=5 (нуклеинат)	6,70±0,31	42,85±2,23	17,59±1,51	15,84±0,86*	23,59±1,05**
	2 гр. n=5 (контроль)	6,18±0,12	46,67±2,96	18,87±2,90	14,27±0,61	20,09±0,95
14 день	1 гр. n=5 (нуклеинат)	7,97±0,75*	42,42±3,04	13,87±1,42*	16,27±0,65*	27,45±1,71**
	2 гр. n=5 (контроль)	6,03±0,04	45,46±3,10	14,28±2,51	20,46±6,51	19,79±1,72
21 день	1 гр. n=5 (нуклеинат)	7,58±0,62*	22,05±1,75*	22,05±1,75*	19,65±3,27*	26,24±2,18**
	2 гр. n=5 (контроль)	5,97±0,19	40,81±3,08	40,81±3,08	25,33±3,30	19,81±0,97

Примечание: * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001

Количество г глобулинов (табл. 1) в процессе эксперимента у животных первой группы увеличилось на 7 день в 1,2 раза, на 14 день в 1,4 раза. На 21 день их количество начало снижаться, но осталось выше, чем в контрольной группе, что позволяет сделать вывод, что натрия нуклеинат стимулирует синтез г глобулинов.

Гистологическое исследование органов иммунной системы.

В лимфоузлах свиней подопытной группы отмечено увеличение количества лимфофолликулов, в которых наблюдается выраженная гиперплазия, хорошо заметны зоны Т- и В- лимфоцитов.

Рис. 5 Лимфоузел подопытная группа Увеличение количества лимфофолликулов (Г-Э Х 300)

Рис. 6 Лимфоузел контрольная группа Увеличение количества лимфофолликулов (Г-Э Х 300)



В селезенке животных опытной группы наблюдается увеличение лимфоидных фолликулов, четко видны зоны Т- и В- лимфоцитов. Пролиферация клеток лимфоидного ряда захватывает и строму селезенки. Увеличена красная пульпа селезенки. Все это говорит об активизации функций селезенки как иммунного органа.

Рис. 7 Селезенка подопытная группа Увеличение количества лимфофолликулов (Г-Э Х 300)

Рис. 8 Селезенкаконтрольная группа Увеличение количества лимфофолликулов (Г-Э Х 300)

В стенке кишечника подопытной группы лимфофолликулы образуются даже в слизистом слое кишечника, отмечена пролиферация клеток, что говорит об усилении иммунных процессов. Пейеровы бляшки увеличены, границы их расширены, и клетки лимфоидного ряда выходят за границы бляшек.

Рис. 9 Кишечник подопытная группа Увеличение количества пейеровых бляшек (Г-Э Х 300)

Рис. 10 Кишечник контрольная группа Увеличение количества пейеровых бляшек (Г-Э Х 300)

Структура ткани мозга четко выражена. Дистрофических и некробиотических изменений нет. В печени никаких патологических изменений не выявлено. Это подтверждает отсутствие токсического действия препарата на организм животных.

Результаты изучения морфологической структура органов иммунной системы после применения натрия нуклеината подтверждают, что под действием препарата происходит активное становление иммунной системы.

Второй этап эксперимента, направленный на изучение влияния натрия нуклеината на формирование поствакцинального иммунитета.

Содержание эритроцитов в крови оставалось практически на одном уровне в пределах физиологической нормы. Количество лейкоцитов имело тенденцию к увеличению, в обеих группах на протяжении всего эксперимента. Максимально увеличившись в первой подопытной группе на 11,25% по сравнению с исходными данными. Уровень гемоглобина был ниже нормы в начале опыта, и вырос на 7-й день, как в первой, так и во второй группах оставаясь далее на этом уровне. Скорость оседания эритроцитов снижалась на протяжении всего опыта, минимального уровня, достигнув на 21 день, снизившись в 2 раза по сравнению с исходными данными. Эти данные подтверждают результаты первой серии опытов, и свидетельствуют о стимулирующем влиянии натрия нуклеината на лейкопоэз.

При исследовании изменений лейкограммы, мы выяснили, что количество базофилов, эозинофилов и моноцитов на протяжении эксперимента незначительно изменялось в обеих группах в пределах физиологической нормы. Уровень сегментоядерных нейтрофилов в первой группе вакцинированных животных имел тенденцию к повышению и максимума достиг на 21 день опыта, составив 17,2%. Во второй группе - снизился, достигнув на 21 день. 17,4%.

Количество лимфоцитов увеличилось в обеих группах и достигло предельного значения в крови провакцинированной группы на 21 день опыта, составив 74,4%, что на 16 % превысило исходные данные. Во второй группе получившей только нуклеинат натрия количество лимфоцитов на 21 день так же увеличилось на 12%.Это свидетельствует о стимуляции лимфопоэза и активизации общей иммунологической реактивности организма, что согласуется с результатами исследований Кривопушкина А.В (2009), наблюдавшего оптимизацию уровня лимфоцитов под влиянием натрия нуклеината

Результаты изучения лейкограммы во время второго этапа нашей работы, подтверждают результаты первой серии опытов, а так же указывают на стимулирующее действие натрия нуклеината при формировании поствакцинального иммунитета.

Рис. 11 Фагоцитарная активность, % (вторая серия опытов)

Рис. 12 Фагоцитарное число (вторая серия опытов)

Уровень фагоцитарной активности (рис. 11) имел тенденцию к увеличению и достоверно увеличился на 21 день эксперимента в первой группе, на 5,9%, а во второй - на 7,78% по сравнению с исходными данными. Фагоцитарное число (рис. 12) превысило исходные данные на 21 день, составив в первой группе 0,36, а во второй-0,4. Фагоцитарная интенсивность снизилась на 7 день, затем возросла, но так и не достигла исходных значений.

По данным Масьянова Ю.Н. (2010) и Кривопушкина А.В. (2009), под действием вакцины происходит снижение фагоцитарной активности, а так же фагоцитарного числа и интенсивности нейтрофилов. Нам, применяя натрия нуклеинат, удалось избежать снижения этих показателей. Мы подтвердили результаты первой серии опытов, а так же выяснили, что натрия нуклеинат оказывает положительное влияние на уровень фагоцитарной активности и под действием вакцины.

Уровень бактерицидной активности достоверно увеличился на 14 день после начала эксперимента в 1 группе в 1,9 и во 2 группе в 1,2 раза. Максимальный уровень лизоцимной активности мы наблюдали на 7 день эксперимента. Он вырос в 1 группе в 2,3 раза и во второй в 3,2 раза по сравнению с началом эксперимента. Эти данные согласуются с результатами первой серии опытов и подтверждают положительное влияние натрия нуклеината на факторы неспецифической резистентности.

Биохимические показатели.

Содержание общего белка в сыворотке крови максимума достигло на 14 день и составило 8,2 г/л у поросят, прошедших вакцинацию. Причем увеличение происходило, в основном, за счет увеличения содержания г- глобулинов, количество которых возрастало с начала опыта и максимального значения достигло на 14 день, увеличившись в 1 группе в 1,5 раза и во 2 группе в 1,3 раза. Оценивая результаты эксперимента, можно сделать вывод, что натрия нуклеинат оказывает стимулирующее действие на синтез г- глобулинов. Причем наиболее активно этот процесс происходит на 14 день после введения препарата.

Таблица 2 - Биохимические показатели (вторая серия опытов)

Показатели	Общий белок, г/л	Альбуины,%	б глобулины,%	в глобулины,%	г глобулины,%
Перед началом опыта	1 гр. n=5 (нуклеинат)	5,69±0,12	38,89±1,22	21,55±2,2	18,09±2,25	21,47±1,06
	2 гр. n=5 (контроль)	6,11±0,12*	37,91±1,68	16,18±2,96	15,53±2,25	30,39±2,73*
7 день	1 гр. n=5 (нуклеинат)	6,70±0,21**	33,32±1,61*	27,51±1,78	14,15±2,05	25,34±1,76*
	2 гр. n=5 (контроль)	8,2±1,71	40,13±2,26	14,19±0,67*	15,32±2,56	31,32±1,36**
14 день	1 гр. n=5 (нуклеинат)	6,30±0,41	35,15±1,23*	20,99±2,16	16,194±0,50	27,67±1,34*
	2 гр. n=5 (контроль)	6,07±0,2	38,76±2,74	26,68±1,04	19,69±2,13	14,88±0,4**
21 день	1 гр. n=5 (нуклеинат)	5,67±0,23	40,22±2,22	18,25±0,34	20,32±0,22	21,20±1,74
	2 гр. n=5 (контроль)	5,69±0,12	38,89±1,22	21,55±2,2	18,09±2,25	21,47±1,06

Примечание: * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001

Таким образом, мы можем сделать вывод, что натрия нуклеинат оказывает положительное влияние на состояние иммунного статуса поросят, подвергшихся вакцинации. Позволяет избежать развития поствакцинальных осложнений, угнетения факторов неспецифической резистентности и обеспечить формирование более стойкого поствакцинального иммунитета.

Результаты производственного испытания.

При испытаниях в условиях производства, мы поставили перед собой задачу оценить предрасположенность поросят 5 месячного возраста к легочным и желудочно-кишечным заболеваниям под влиянием препарата натрия нуклеинат.

В период эксперимента мы наблюдали за животными и оценивали их состояние по ряду показателей. Учитывали общее физиологическое состояние, рост и развитие, возбудимость, появление стрессовых реакций, аппетит, состояние кожного покрова и слизистых оболочек, уровень легочных и желудочно-кишечных заболеваний.

За период эксперимента, у поросят обеих групп отмечались заболевания дыхательной и пищеварительной систем. Однако следует отметить, что уровень заболеваемости в подопытной группе был в 2,5 раза ниже, чем в контрольной. Рост и развитие животных опытной группы по сравнению с контрольной были на более высоком уровне.

Таким образом, применение данного препарата поросятам позволяет повысить устойчивость организма к инфекциям, вызванным патогенной и условно-патогенной микрофлорой, проявляющимся желудочно-кишечными и респираторными синдромами, и тем самым снизить заболеваемость животных и повысить их сохранность.



ВЫВОДЫ

1. Установлено, что натрия нуклеинат активизирует систему кроветворения. Отмечено увеличение количества эритроцитов до 30%, лейкоцитов до 50%, гемоглобина до 20% на 21 день, соответственно до 7,14±0,97 1012/л, 12,68±0,71 109/л, 122,2±0,70 г/л против исходных данных.

2. Доказано, что натрия нуклеинат стимулирует клеточную систему иммунитета. Фагоцитарную активность и фагоцитарное число нейтрофилов на 50%. Увеличивает количество Т- и В- лимфоцитов. в 1,3 и 1,5 раза, соответственно до 44,00±4,82 109/л и 26,20±2,18 109/л.

3. Применение натрия нуклеината активизирует гуморальную систему неспецифической защиты организма. Отмечается рост бактерицидной активности сыворотки крови в 1,2 раза, лизоцимной активности в 1,7 раза. Происходит увеличение уровня общего белка в 1,2 раза, за счет роста относительного количества г глобулинов на 27%.

4. Использование натрия нуклеината совместно с вакциной против сальмонеллеза дает увеличение лимфоцитов на 16 % до 74,4±0,85%, фагоцитарной активности на 5,9% до 18,00±1,59%, бактерицидной активности в 1,9 раза до 86,62±5,87, лизоцимной активности в 2,3 раза до 5,97±0,50,общего белка до 8,2±1,71 г/л против исходного значения 5,69±0,12 г/л за счет роста уровня г глобулинов соответственно до 31,32±1,36%.

5. Результаты изучения гистологической структуры иммунных органов (селезенки, лимфатических узлов, пейеровых бляшек кишечника) выявили выраженную гиперплазию органов, увеличение количества лимфоидных фолликулов, пролиферацию клеток лимфоидного ряда. Отмечено отсутствие токсического действия препарата.

6. Введение натрия нуклеината в дозе 3 мл 0,2% раствора поросятам 5 месячного возраста позволяет снизить уровень легочных и желудочно-кишечных заболеваний в 2,5 раза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. С целью повышения уровня естественной резистентности поросят в период отъема рекомендуется однократная внутримышечная инъекция 0,2% раствора натрия нуклеината в дозе 0,01 мл/кг.

2. Для улучшения эффективности вакцинации, формирования более напряженного поствакцинального иммунитета, а так же предотвращения развития стрессорных реакций при вакцинации против сальмонеллеза рекомендуется применять 0,2% раствор натрия нуклеината в дозе 0,01 мл/кг двукратно, одновременно с вакцинацией и ревакцинацией животных.

3. Рекомендуется использовать материал, полученный в ходе исследований при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами ветеринарных ВУЗов и факультетов.



СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Александрова, С.С. Состояние гуморальных показателей защиты организма поросят при введении иммуномодулятора натрия нуклеината / С.С. Александрова, В.М. Скорляков // Актуальные проблемы ветеринарной патологии, физиологии, биотехнологии, селекции животных. Сб. материалов всероссийской конференции. - Саратов, 2007.- С. 106-108 (0,12/ 0,06 п.л.).

2. Александрова, С.С. Состояние Т - и В - систем организма поросят под влиянием натрия нуклеината / С.С. Александрова, В.М. Скорляков // Сборник материалов международной научно-практической конференции «Вавиловские чтения посвященной 120-й годовщине со дня рождения Н.И. Вавилова» - Саратов, 2007. - ч. 3 С.7-8 (0,15/0,075 п. л.).

3. Александрова, С. С. Морфофункциональное состояние органов иммунной системы поросят при использовании иммуномодулятора Натрия нуклеината./ С.С. Александрова, В.М. Скорляков // Сб. материалов научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов по итогам научно-исследовательской и учебно-методической работы. - Саратов, 2008.- С. 20-22 (0,19/0,095 п. л.).

4. Александрова, С. С. Ответная реакция иммунной системы на применение иммуномодулятора натрия нуклеината / В. М. Скорляков, С. П. Воронин, С. С. Александрова // Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова - № 1 - 2010. - С 22-25 (0,3/0,1 п. л.).

Размещено на Allbest.ru

...