Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Физиологическое действие метионинатов меди и кобальта в сочетании с L-карнитином на организм животных

03.03.01 - физиология

Щитковская Татьяна Рамазановна

Казань 2011

Работа выполнена в федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»

Научный руководитель - доктор биологических наук, доцент Логинов Георгий Павлович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Зеленов Юрий Никандрович

доктор биологических наук, профессор Любин Николай Александрович

Ведущая организация - ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. С развитием интенсивных технологий выращивания и откорма сельскохозяйственной птицы большое внимание уделяется их полноценному питанию, содержанию в рационе минеральных веществ, витаминов и других биологически активных веществ. Такой комплексный подход требует глубоких научных исследований, системы их применения, совместимости, влияния на состояние обменных процессов в организме, продуктивность и качество продукции.

В кормлении птицы часто имеет место дефицит многих минеральных и биологически активных веществ в рационе. Для восполнения дефицита микроэлементов в кормах традиционно используются их неорганические производные, биологическая доступность которых во многих случаях низкая. Результаты многих исследований (Х.Ш. Казаков и соавт., 1965; В.Д.Кальницкий, 1985; Р.Г. Бинеев и соавт., 1987; А. Горобец, 1990; Г.П.Логинов и соавт., 1981; Г.Ф. Кабиров и соавт., 2005; А.П. Кебец соавт., 2006; Р.Темираев и соавт., 2006 и др.) показали, что хелатные формы биогенных металлов с аминокислотами, пептидами, белками и другими биолигандами имеют низкую токсичность и более эффективны при меньших дозах применения, в связи с чем обладают преимуществом перед неорганическими солями для использования в практике животноводства.

Хелатные соединения обладают антиоксидантным действием, связывают ионы металлов переменной валентности, препятствуют вовлечению их в реакции разложения перекисей (Е.М. Трещалина и соавт., 1979; Е.Б. Меньщикова и др., 1993; А.В.Бушов и соавт., 2005; Г.Ф.Кабиров и соавт., 2005).

В последние годы в животноводстве и птицеводстве особое внимание обращают на биологически активные вещества_ (БАВ). Одним из важнейших физиологических стимуляторов является L-карнитин (СН₃)₃N⁺CH₂CН(ОН)CH₂COO^-), г-N-триметиламино-в-оксимасляная кислота. L-карнитин играет ключевую роль в метаболизме энергии. Основная функция его заключается в переносе жирных кислот к местам их расщепления в митохондриях (G.C. Lenaz et al., 2002). Карнитин укрепляет иммунную систему, стимулирует процесс кроветворения, выводит яды из клеток и защищает их от многих вредных веществ (Е.Д. Васильева, 1972; Р.А. Богомолова, 2006).

В связи с выше изложенным, изучение влияния хелатных комплексов биогенных металлов в сочетании с L-карнитином на обменные процессы, продуктивность животных и птицы имеет большое теоретическое и прикладное значение.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось изучение влияние хелатных комплексов в сочетании с L-карнитином на обменные процессы, на рост, развитие и качество мяса цыплят-бройлеров.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить токсичность хелатных комплексов в сочетании с L-карнитином.

2. Изучить гепатопротекторное, антианемическое действие и антиоксидантную активность металлохелатов в сочетании с L-карнитином на белых крысах.

3. Изучить влияние хелатных комплексов в сочетании с L-карнитином на рост и развитие цыплят-бройлеров и определить оптимальную дозу.

4. Изучить влияние хелатных комплексов и L-карнитина на некоторые гематологические и биохимические показатели крови цыплят-бройлеров.

5. Провести ветеринарно-санитарную экспертизу мяса и определить влияние препарата на гистологическое строение органов.

Научная новизна работы. Впервые проведены комплексные исследования и изучено сочетанное влияние хелатных комплексов и L-карнитина на перекисное окисление липидов, гепатопротекторное и антианемическое действие, морфологический и биохимический состав крови. Проведена ветеринарно-санитарная экспертиза мяса, и дана оценка влияния препарата на гистологическое строение органов цыплят-бройлеров.

Практическая значимость работы. Разработана технология применения L-карнитина в сочетании с хелатными комплексами меди и кобальта в рационах цыплят-бройлеров, определена оптимальная доза, которые позволяют повышать живую массу у кросса «Смена».

Результаты экспериментальных исследований вошли во «Временное наставление по применению хелатных комплексов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином для выращивания цыплят-бройлеров, утвержденное ГУВ КМ РТ 6 апреля 2011 года.

Основные положения, выносимые на защиту:

Хелатные комплексы меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином:

o относятся к IV классу токсичности;

o проявляют гепатопротекторное, антианемическое действие и антиоксидантную активность;

o в составе рациона кормов стимулируют рост цыплят, оказывают влияние на морфо-биохимические показатели крови;

o положительно влияют на качество мяса, структуру органов и тканей цыплят-бройлеров.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на международных научных конференциях «Современные тенденции развития ветеринарной медицины и инновационные технологии в ветеринарии и животноводстве» (Казань, 2009); на Всероссийской научно-практ. конференции молодых ученых «Инновационные разработки молодых ученых - АПК России», посвященной памяти Р.Г.Гареева (Казань, 2010); на LXX Всероссийской научно-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и студентов, посвященной 80-летию Пермской ГСХА, «Молодежная наука 2010: технология, инновация» (Пермь, 2010); на Всероссийской научно-производственной конференции по птицеводству, «Научное обеспечение инновационного развития птицеводства Российской Федерации; опыт, проблемы и пути решения» (Казань, 2010).

Публикация результатов исследований. Основное содержание диссертации изложено в 7 научных статьях, в том числе 4 статьи в Ученых записках ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана», включенные в перечень ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований и их обсуждение, выводы, практические предложения производству, приложения. Работа содержит 22 таблицы, 17 рисунков. Список использованной литературы включает 268 наименований, в том числе 110 на иностранных языках.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследований

Исследования по теме диссертации проводились в период с 2008 по 2011 год на кафедре биологической и неорганической химии в ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана».

Экспериментальные и научно-практические опыты по изучению эффективности хелатных комплексов и карнитина на цыплятах-бройлерах проводили в условиях вивария академии и в КФХ «Марс» Зеленодольского района Республики Татарстан.

Для синеза хелатных соединений были использованы сульфат меди CuSO₄^.5H₂O, сульфат кобальта CoSO₄^.7H₂O квалификации «хч», едкий натр NaOH - «хч», метионин - квалификации «ч».

Регистрацию ИК-спектров поглощения твердых образцов хелатов меди, кобальта с метионином проводили на спектрометре Vector 22 фирмы Bruker, в диапазоне 4000-500 см^-1. Образцы изготавливались в виде таблеток KBr.

В опытах были использованы 110 белых мышей, 105 белых крыс и 830 цыплят-бройлеров. Подопытных животных отбирали по возрасту, живой массе, полу, соблюдая принципы аналогов. Уход, содержание и кормление животных были одинаковыми. Опыты проводились в соответствии со схемой (рис 1). Во всех сериях опытов животных взвешивали перед постановкой эксперимента и после его окончания. В течение исследований проводили клиническое наблюдение за общим состоянием животных (упитанность, подвижность, пищевая возбудимость, характер шерстного и перьевого покрова животных).

Определение параметров острой токсичности хелатных комплексов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином проводили на беспородных белых мышах массой 16-18 г., из которых было сформировано 6 групп, по 6 особей в каждой. Препарат вводили предварительно растворяя его в воде натощак, внутрижелудочно, однократно. Наблюдение за состоянием животных проводили в течение 10 дней. Среднюю смертельную дозу (LD₅₀) рассчитывали по формуле Г. Кербера (О.Н. Елизарова, 1962).

Опыты по изучению гепатопротекторного действия нового препарата проводили на трех группах белых крыс живой массой 120-170 г. Первая группа крыс была интактная, у второй и третьей опытных групп животных инициирование перекисного окисления липидов (ПОЛ) проводили подкожным введением 50%-ного стерильного масляного раствора четыреххлористого углерода из расчета 0,45 мл /кг живой массы в течение пяти дней. Животные третьей группы за две недели до инъекции ССl₄ и весь опытный период получали с кормом хелатные комплексы в сочетании с L-карнитином из расчета 50 мг L-карнитина и 2,5 мг хелатных комплексов. Наблюдение за подопытными животными проводили в течение 14 дней.

Для изучения противоанемического действия хелатных комплексов и L-карнитина были отобраны белые крысы живой массой 120-180 г и разбиты на 3 группы по 15 голов в каждой. Предварительно у всех животных кровопусканием из хвостовой вены вызывалась постгеморрагическая анемия. Первая группа крыс служила контролем. Животные второй группы ежедневно в течение двух недель получали с кормом хелатные комплексы меди и кобальта из расчета меди 1,5 мг/кг, кобальта - 0,1 мг/кг живой массы. Третья группа крыс дополнительно к хелатным комплексам получала L-карнитин в дозе 50 мг/кг живой массы. Кровь для анализа брали до кровопускания и на 5, 10, 15 и 25-е сутки опыта декапитацией от 5 голов животных каждой группы в одно и тоже время утром до кормления.

На цыплятах-бройлерах кросса «Смена» опыты были проведены в виварии академии и в производственных условиях в КФХ «Марс» Зеленодольского района Республики Татарстан. Были сформированы четыре группы молодняка 7-ми дневного возраста по 6 голов в каждой, подобранные по аналогам. Первая группа цыплят - контрольная, получала основной рацион. Цыплятам опытных групп дополнительно к основному рациону задавали L-карнитин и хелатные комплексы меди и кобальта с метионином из расчета: второй группе - 100 мг карнитина, третьей -100 мг карнитина и 5 мг хелатных комплексов, четвертой - 50 мг карнитина и 2,5 мг хелатных комплексов на килограмм живой массы. Цыплята содержались по три головы в каждой клетке. В целях контроля роста и развития цыплят-бройлеров проводили их взвешивание в двух-, трех-, четырех- и шестинедельном возрасте. В крови определяли гематологические показатели по общепринятой методике, в сыворотке крови - содержание общего белка, белковые фракции, активность ферментов аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ), глюкозы, общего кальция и неорганического фосфора на анализаторе ARKRAY. Об интенсивности процессов ПОЛ судили по содержанию в крови каталазы (по Баху и Зубковой), содержание восстановленного глутатиона (по методу Вудворда и Фрея), церулоплазмина (по Равину) и малонового диальдегида (А.В. Стальная, 1977).

Рисунок 1

хелатный карнитин мясо бройлер

В процессе эксперимента проводили выборочный контрольный убой цыплят-бройлеров для ветеринарно-санитарной оценки мяса, соблюдая общепринятые требования “Правил ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов”. При этом определяли органолептические признаки мяса и биохимические показатели.

Гистологические исследования по оценке влияния хелатных комплексов и L -карнитина на органы и ткани цыплят проводили на 35-е сутки после начала применения испытуемых средств. Для выполнения морфологических исследований кусочки железистого отдела желудка, тонкого кишечника, печени, почек и селезенки подопытных и контрольных птиц 42-х суточного возраста фиксировали в 10 %-ном нейтральном водном растворе формальдегида, этанол-формальдегиде (9:1). Обезвоженные в спиртах восходящей плотности, кусочки органов и тканей уплотняли заливкой в парафин. Изготовленные гистологические срезы толщиной 6-8 мкм окрашивали гематоксилин-эозином (Меркулов М.И., 1969). В ходе изучения микроструктурных изменений в органах и тканях птиц проводили фотографирование наиболее выраженных изменений. Морфологические исследования были выполнены на кафедре патологической анатомии и гистологии ФГБОУ ВПО «КГАВМ им. Н.Э. Баумана» под руководством заведующего кафедрой, д.вет.н., профессора Залялова И.Н.

Статистическую обработку цифровых данных проводили по разработанным программам в Microsoft Excel. Достоверность устанавливали по методу Стьюдента-Фишера (Плохинский Ш.А.,1970).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Физико-химические свойства синтезированных хелатных соединений и изучения их токсичности в сочетании с L -карнитином

Хелатные комплексы меди и кобальта с метионином получены по методу по E. Abderhalden et al. (1927). Содержание меди в метионинате меди составляет 17,5%, кобальта в метионинате кобальта - 16,4 %.

Хелатная структура комплексов установлена по ИК-спектроскопии. Наличие в ИК-спектрах комплексов меди и кобальта с метионином Cu(мет)₂ и Cо(мет)₂ полос поглощения в области спектра 3150-3350, 1580-1620 и 1390-1420 см^-1, обусловленные соответствующими валентными колебаниями NH₂, асимметричными и симметричными колебаниями СОО^Ї, подтверждают хелатную структуру комплексов.

Рис.2. - ИК-спектры метионина (а) и метионината кобальта (б)

Изучение токсичности хелатных комплесов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином в соотношении Сu(мет)₂: Со(мет)₂: L-карнитин равным 1: 0,1: 50 показала, что LD₅₀ при введении в желудок испытанного соединения составила 7,05±0,19 г/кг, т.е. относятся к веществам IV класса токсичности (ГОСТ 12.1.007.76) [Г.А. Хмельницкий и соавт., 1987].

3.2 Изучение гепатопротекторного действия хелатов меди и кобальта в сочетании с L-карнитином

Результаты исследования влияния хелатных комплексов с L-карнитином при подкожной инъекции четыреххлористого углерода на живую массу белых крыс отражены на рис. 3.

Рис. 3- Влияние хелатных комплексов в сочетании с L-карнитином на живую массу крыс при введении ССl₄

Как видно из рис 3, подкожная инъекция четыреххлористого углерода сопровождалась снижением массы белых крыс по сравнению с третьей группой, получавшей хелатные соединения в сочетании с L-карнитином на 21,6 г (Р < 0,001).

При гематологическом исследовании установлено, что инъекция четыреххлористого углерода приводила к снижению количества гемоглобина на 29,6 г/л (Р < 0,001), эритроцитов - на 0,65 Ч10¹²/л (Р < 0,05), (таб.1).

Таблица 1- Влияние ССl₄ и хелатных комплексов с L-карнитином на показатели крови белых крыс

У крыс, получавших хелаты и L-карнитин, наблюдалась менее выраженная тенденция изменения гематологических показателей, колебания которых находились в пределах физиологической нормы. Отмечалось повышение каталазной активности у животных третьей группы по сравнению с первой в 1,1 раза, по второй - в 1,3 раза. Также, наблюдалось повышение содержания восстановленного глутатиона у животных этой же группы по сравнению со второй группой в 1,2 раза. Инъекция четыреххлористого углерода второй группе животных приводила к снижению концентрации восстановленного глутатиона до 73,7% от показателя интактных животных (Р < 0,001). Отмечалось снижение концентрации церулоплазмина у второй группы на 15,9 % и повышение у третьей группы на 13,2 % по отношению к первой группе. Снижение содержание малонового диальдегида в сыворотке крови животных третьей группы по сравнению со второй в 1,6 раза.

Исследованиями установлено, что хелатные комплексы метионинатов меди и кобальта в сочетании с L-карнитином оказывают гепатопротекторное действие.

3.3 Влияние хелатов и карнитина на морфологический состав крови белых крыс при постгеморрагической анемии

Предварительные исследования показали, что до кровопускания в крови белых крыс содержалось гемоглобина 141,8±4,62 г/л, эритроцитов - 6,23±0,21х10¹²/л. Как видно из табл. 2, на гемо- и эритропоэз значительное влияние оказали хелаты меди и кобальта в сочетании с карнитином.

Таблица 2- Морфологический состав крови белых крыс

Количество гемоглобина в крови животных третьей группы, получавших хелатные комплексы меди и кобальта с метионином из расчета меди 1,5 мг/кг живой массы, кобальта - 0,1 мг/кг и L-карнитин в дозе 50 мг/кг, составило на 5-е сутки 100,6±3,67 г/л и больше контрольного показателя на 10,1% (Р < 0,05), на 10-25-е сутки также оказалось выше контрольных величин на 16,6-18,5% (Р < 0,05-0,01). У животных второй группы, которые получали метионинаты меди и кобальта (без карнитина), содержание гемоглобина было достоверно выше контрольных показателей. Цветной показатель крови животных опытных групп также был выше по сравнению с контрольной группой в течение всего опытного периода.

3.4 Влияние хелатов и карнитина на антиоксидантную систему при постгеморрагической анемии

Проведенными исследованиями установлено, что хелатные комплексы в сочетании с L-карнитином способствовали повышению содержания каталазы в крови по сравнению с контрольными показателями в опытных группах; по второй группе активность фермента повышалась на 5-е, 15-е и 25-е сутки на 38,8, 44,1 и 40,7 % соответственно, по третьей группе - в 1,7, 1,5 и 1,4 раза.

Таблица 3 - Динамика каталазного числа, церулоплазмина и малонового диальдегида в крови белых крыс

Отмечалось увеличение оксидазной активности церулоплазмина в соответсвующие сроки по второй группе на 14,8, 19,2 и 18,0 %, по третьей - на 30,7, 21,6 и 11,1 %. В сыворотке крови животных опытных групп во все сроки исследования отмечалось снижение концентрации малонового диальдегида, что свидетельствует об антиоксидантной активности хелатов меди и кобальта с метионином в отдельности, так и в сочетании с карнитином.

Таким образом, добавление в рацион белых крыс хелатных комплексов меди и кобальта с метионином в сочетании с карнитином на фоне постгеморрагической анемии стимулирует гемо- и эритропоэз, нормализует активность аминотрансфераз, повышает активность каталазы и оксидазную активность церулоплазмина, снижает содержание МДА в сыворотке крови.

3.5 Влияние хелатов и карнитина на живую массу цыплят-бройлеров и биохимические показатели крови

Изучение влияние хелатных комплексов с L-карнитином проводилось на цыплятах-бройлерах. В табл. 4 отражена динамика живой массы, из нее видно, что у 7-суточных цыплят разницы в живой массе между группами не наблюдалось.

Таблица 4 - Динамика живой массы цыплят по группам, г

Данные таблицы показывают, что на 14-е, 21-е, 28-е, 35-е и 42-е сутки во всех подопытных группах по сравнению с контрольной живая масса цыплят была выше. Наибольшей скоростью роста обладала птица 4-ой группы. Живая масса у цыплят получавших с кормом 50 мг карнитина и 2,5 мг хелатных комплексов, на 14-е сутки равнялась 260,0±6,1 г, на 21-е - 515,0±13,2, на 28-е 869,2±19,2, на 35-е - 1169,5±24,4 и 42-е - 1550±34,4 г соответственно, что на 4,2, 7,1, 9,6, 9,9 и 10, 5% выше контрольных значений.

Один из ключевых параметров, характеризующих рост птицы, - среднесуточный прирост живой массы. За период выращивания у цыплят второй опытной группы он был выше, чем в контроле, на 21 -е сутки на 7,4%, третьей группы - на 7,5%, четвертой - на 10,5%.

В табл. 5 приведены данные по влиянию карнитина и хелатных комплексов на содержание общего белка и белковых фракций в сыворотке крови цыплят.

Как видно из таблицы, у цыплят двухнедельного возраста содержание общего белка в сыворотке крови второй, третьей и четвертой групп было выше по сравнению с контрольной на 7,7, 6,0 и 8,5% соответственно. К четырехнедельному возрасту отмечалось увеличение концентрации общего белка в сыворотке крови по сравнению с первым сроком исследования, и по группам составило: по контрольной - 35,5±1,07 г/л, второй - 38,9±1,04, третьей - 39,0±1,12 и четвертой - 38,7±1,18 г/л, что на 9,6, 9,9 и 9,0% соответственно выше контрольных показателей.

Таблица 5 - Общий белок и белковые фракции в сыворотке крови цыплят

Значительные изменения в содержании альбуминов отмечались в сыворотке крови у 14-ти дневных цыплят четвертой группы и количество их составило 14,9±0,42 г/л, что на 11,8% (Р < 0,05) больше по сравнению с контрольными показателями; отмечалось увеличение концентрации в-глобулинов в сыворотке крови второй опытной группы у 28-ми суточных цыплят на 11,1% (Р < 0,05). Наблюдалось увеличение в опытных группах содержания б-глобулинов (на 7,8-13,6%) и г-глобулинов (на 8,6-15,6%).

Результаты исследования активности ферментов трансаминирования приведены в табл.6

Таблица 6 - Влиние хелатных комплексов и L-карнитина на активность ферментов АсАТ и АлАТ

Данные таблицы показывают, что при скармливании цыплятам L-карнитина в отдельности и в сочетании с хелатными комплексами вызывают незначительные колебания активности АсАТ на 12,3 -28,2 %, АлАТ -9,1-17,8 %. Эти изменения были в пределах физиологической нормы.

Таким образом, скармливание цыплятам-бройлерам L-карнитина в отдельности и в сочетании с хелатными комплексами меди и кобальта с метионином оказывает положительное влияние на живую массу цыплят, на содержание в сыворотке крови общего белка, количественное содержание альбуминов, б- и г-глобулинов и на активность аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы.

3.6 Ветеринарно-санитарная оценка мяса птиц при скармливании препарата

Для изучения влияния хелатных комплексов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином на качество мяса был проведён выборочный убой цыплят в возрасте 42 дней от контрольной и опытной групп с последующим проведением ветеринарно - санитарной оценки.

Органолептическими исследованиями установлено, что тушки цыплят хорошо обескровлены, мышцы на разрезе слегка влажные, цвет мяса бело - жёлтый на туловище и светло-красный на ножках. Консистенция мяса плотная, упругая, запах свойственный куриному мясу.

Биохимические исследования показали, что мясо цыплят-бройлеров контрольной и опытных групп не отличались по качеству друг от друга, то есть препарат не оказывает негативного воздействие на биохимические процессы в мышечных тканях.

Дегустационная оценка бульона показала, что хелатные комплексы метионинатов меди и кобальта в сочетании с L-карнитином оказали положительное влияние на вкусовые свойства и показатели качества бульона. Средний балл опытных групп по сравнению с контрольной, по оценке комиссии, оказался выше: внешний вид бульона на 2,8 %, запах - 2,6 %, консистенция - 2,2 %, сочность - 6,6 % и вкус - 3,4 %. Вареное мясо имело светло-серый цвет, было сочным, нежным со специфическим, приятным запахом и вкусом. На поверхности бульона жир собирался в виде крупных капель.

Таким образом, мясо птицы, получавших с основным рационом хелатные комплексы меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином по органолептическим, биохимическим показателям соответствует ГОСТу для свежего, доброкачественного мяса.

3.7 Результаты гистологических исследований органов птицы

Морфологическую оценку характера влияние хелатных комплексов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином проводили на цыплятах-бройлерах 42 суточного возраста. У контрольных птиц, получавших только основной рацион, в исследованных внутренних органах обнаруживали морфологические признаки нарушения обмена веществ, ослабления митотической активности клеток, регенераторных зон желудочно-кишечного тракта, выявили проявление дезорганизации компонентов соединительной ткани с локальной инфильтрацией, сопровождаемые явлениями нарушения гемоциркуляции в исследуемых органах и желчевыведения в печени. Клетки паренхимы печени, почек контрольных животных выделялись полиморфизмом, светлой окраской цитоплазмы, наличием гиперхромных и иногда пикнотичных ядер (рис.4,5).

Действие испытанного препарата на подопытных цыплят-бройлеров способствовало прекращению проявлений деструктивных процессов в исследованных органах и тканях, сопровождаемых восстановлением регенераторной способности эпителиальных тканей желудочно-кишечного тракта, печени, почек. Происходило увеличение объема субэпителиальной лимфоидной ткани органов желудочно-кишечного тракта. Восстанавливался адекватный уровень кровотока в системе микроциркуляции исследованных органов, сопровождаемый прекращением проявлений признаков нарушения обмена веществ обратимого или необратимого характера.

Рис. 4 - Гистологическая структура печени птицы (а - опыт; б - контроль)

Рис. 5 - Гистологическая структура почки птицы (а - опыт; б - контроль)

3.8 Эффективность использования хелатных комплексов в сочетании с L-карнитином

Хозяйственные опыты, проведенные на цыплятах-бройлерах, в КФХ «Марс» показали эффективность хелатных комплексов меди и кобальта с L-карнитном для повышения продуктивности.

Таблица 7 - Экономическая эффективность использования хелатных комплексов в сочетании с карнитином

*Примечание: стоимость 1 кг мяса птицы - 75 руб., 1 кг субпродуктов - 40 руб

При анализе экономической эффективности выяснилось, что уровень рентабельности во всех группах был достаточно высоким. Самым большим он оказался в четвертой группе, получавших хелатные комплексы в сочетании с L-карнитином их экономическая эффективность составила 6,5 рублей на 1 рубль дополнительных затрат.

ВЫВОДЫ

1. Наличие в ИК-спектрах комплексов меди и кобальта с метионином Cu(мет)₂ и Cо(мет)₂ полос поглощения в области спектра 3150-3350, 1580-1620 и 1390-1420 см^-1, обусловленные соответствующими валентными колебаниями NH₂, асимметричными и симметричными колебаниями СОО^Ї, подтверждают хелатную структуру комплексов.

2. Токсичность хелатных комплексов меди и кобальта с L-карнитном на белых мышах ЛД₅₀ - 7,05±0,19 г/кг. Препарат относится к IV классу токсичности (ГОСТ 12.1.007-76).

3. Введение в рацион цыплят-бойлеров хелатных комплексов Сu(мет)₂ и Cо(мет)₂ в сочетании с L-карнитином в расчете 50 мг карнитина и 2,5 мг хелатных комплексов на кг живой массы способствует увеличению живой массы на 8-12%, среднесуточного прироста 5,7-11,4%, сохранности птицы на 3,2-5,4%, уменьшению затрат корма на 5,7%, позволяет получать животноводческую продукцию (мясо бройлеров) более высокого качества.

4. В крови цыплят-бройлеров, получавших хелатные комплексы и карнитин, происходит повышение концентрации эритроцитов (6,5-12,2%), гемоглобина (на 9,0-15,3%), общего белка (8,7-9,9%), г-глобулинов (9,1-14,5%), общего кальция на 14,6-24,3 % (Р < 0,05-0,01), неорганического фосфора (9,7-19,0 %).

5. Мясо цыплят бройлеров получавших хелатные комплексы биогеных металлов и L-карнитин по органолептическим, биохимическим показателям соответствуют требованиям ГОСТа.

6. Продолжительное применение хелатных комплексов и L-карнитина способствует активизации биосинтетических, регенераторных процессов, прекращают проявление признаков нарушения обмена веществ в исследованных органах и тканях подопытных птиц.

7. Использование хелатных комплексов в рационе белых крыс на фоне подкожного введения четыреххлористого углерода способствует повышению в крови каталазной активности в 1,3 раза, оксидазной активности ЦП - на 13,2%, нормализации содержания восстановленного глутатиона, снижению концентрации малонового диальдегтида, что свидетельствует о гепатопротекторном действии хелатных комплексов в сочетании с L-карнитином.

8. Совместное использование хелатных комплексов и L-карнитина в дозе 1,5 мг Cu(мет)₂, 0,1 мг Cо(мет)₂ и 50 мг L-карнитина на килограмм живой массы белых крыс на фоне постгеморрагической анемии повышает содержание гемоглобина в крови на 10,1-18,5% (Р < 0,05-0,01) и эритроцитов - на 9,4-12,8%; способствует повышению активности каталазы на 38,8-44,1%, что свидетельствует об антианемическом действии металлохелатов в сочетании с карнитином.

9. Применение хелатных комплексов и L-карнитина экономически целесообразно, оно позволяет получать на 1 рубль дополнительных затрат продукцию на сумму 1,64 - 6,5 рубля.

Практические предложения

1. Для стимулирования обменных процессов и улучшения продуктивных качеств цыплят-бройлеров рекомендуется добавлять в рацион птицы хелатные комплексы меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином из расчета 1,8 мг Cu(мет)₂, 0,7 мг Cо(мет)₂ и 50 мг карнитина на килограмм живой массы с 7-ми дневного до 42-дневного возраста.

2. Результаты исследований вошли во “Временное наставление по применению хелатных комплексов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином для выращивания цыплят-бройлеров”, утвержденное ГУВ Кабинета Министров Республики Татарсатн (2011).

3. Полученные результаты исследований используются в учебном процессе факультетов ветеринарной медицины и биотехнологии и стандартизации КГАВМ.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гайсина, Т.Р. Влияние хелатных комплексов меди и кобальта с метионином и карнитина на биохимические показатели крови белых крыс при постгеморрагической анемии / Т.Р. Гайсина, Г.П. Логинов, Л.А. Гайсина // Материалы Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Инновационные разработки молодых ученых - АПК России», посвященной памяти Р.Г.Гареева, Казань, 2010. - С. 360-364.

2. Гайсина, Т.Р. Изменения некоторых биохимических показателей в крови лабораторных животных под воздействием хелатных комплексов в сочетании с карнитином при постгеморрагической анемии / Т.Р. Гайсина, Г.П. Логинов // Материалы LXX Всероссийской научно-практ. конф. Молодых ученых, аспирантов и студентов, посвященной 80-летию Пермской ГСХА, «Молодежная наука 2010: технология, инновация», Пермь, ФГОУ ВПО «Пермская ГСХА», 2010. - С.309-312.

3. Гайсина, Т.Р. Влияние хелатных комплексов в сочетании с карнитином на гематологические показатели крови, содержание белка и белковых фракций в сыворотке крови белых крыс при постгеморрагической анемии / Т.Р. Гайсина // Уч. записки КГАВМ, 2010, т.203. - С. 68-73.

4. Гайсина, Т.Р. Влияние хелатных комплексов меди и кобальта в сочетании с L-карнитином на живую массу, белковый спектр и на активность аминотрансфераз в сыворотке крови цыплят-бройлеров / Т.Р. Гайсина // Уч. записки КГАВМ, 2010, т. 204. - С. 53-58.

5. Гайсина, Т.Р. Изучение действия L-карнитина с хелатными комплексами меди и кобальта на биохимические показатели крови цыплят-бройлеров / Т.Р. Гайсина // Материалы Всероссийской научно-произв. конф. по птицеводству (на примере развития птицеводства Республики Татарстан) 25-27 октября 2010 г. - Казань, 2010. - С. 47-50.

6. Щитковская Т.Р. Влияние хелатных комплексов и L-карнитина на качество мяса / Т.Р. Щитковская// Уч. записки КГАВМ, 2011, т. 206.- С. 286-292.

7. Щитковская Т.Р. Гематологические и биохимические показатели крови у цыплят-бройлеров при скармливании в рационе хелатов меди и кобальта с метионином в сочетании с L-карнитином / Т.Р. Щитковская// Уч. записки КГАВМ, 2011, т. 208.- С. 367-372.

Размещено на Allbest.ru