Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат диссертации

на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Лечение ран у животных с применением растворов, обработанных энергией электромагнитных полей миллиметрового диапазона наноуровневой интенсивности (экспериментально-клинические исследования)

Специальность 16.00.05. - Ветеринарная хирургия

Гынку Сергей Петрович

КАЗАНЬ - 2007

Работа выполнена на кафедре общей и частной хирургии ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»

Научный руководитель доктор ветеринарных наук, профессор Шакуров Мухаметфатих Шакурович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Сунагатуллин Фарук Ахмадуллович (Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана)

доктор ветеринарных наук, профессор Ермолаев Валерий Аркадьевич (Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия)

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Разработка эффективных методов лечения раненых животных является важной и нерешенной проблемой.

Использование антибиотиков и других антимикробных препаратов для этой цели не только полностью не решило эту проблему, но и поставило перед ветеринарной наукой и практикой новые задачи. Бессистемное и частое использование антибиотиков в ветеринарной практике способствовало появлению антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов, что намного осложнило лечебную работу (В. А. Проскуров,1980; Д.Д. Меньшиков, 1982; Э.И. Веремей, В.М. Лакисов, Н.М. Персикова, 1988 и др.). Кроме того, антибиотики подавляют иммунитет у животных.

Поэтому в последние годы значительно возрос интерес к применению физических факторов в лечении различных заболеваний животных. Это физиологично, безвредно, эффективно и, в отличие от медикаментозного лечения, позволяет исключить развитие лекарственной аллергии, лечение экономически выгодно (М.Г. Млодик, 1991; К.В. Липатов, 2001).

С конца 80-х годов в медицине с большим успехом стали применяться в лечебной практике низкоинтенсивные электромагнитные излучения крайневысокочастотного (НИЭМИ КВЧ) диапазона. Причем данный вид излучения помогает решению многих назревших проблем, стоящих в настоящее время перед практической медициной. В 90-х годах появились отрывочные сведения, указывающие на хорошие результаты после КВЧ воздействия на воду (структурированная вода) и различные растворы (Д.Г. Уоттерсон, 1991; Ю.М. Барабаш, 1996).

Структурированная вода имеет большой дипольный момент, а значит, должна реагировать на внешнее электромагнитное поле, и сама является источником электромагнитного излучения определенной частоты. В таком состоянии вода сохраняет достаточно долгое время информацию (память) о самом факте облучения. Система «молекулярная структура воды и резонансные ММ-волны» представляется наиболее глубинной и универсальной системой гомеостаза на молекулярно-полевом уровне. (S. Rai, 1994; Л.Д. Гапочка, 1994; E.E. Fesenko, 1995; О.В. Бецкий, 1998).

В этой связи большой интерес представляют возможности терапевтического применения при инфицированных ранах у животных растворов, обработанных энергией электромагнитных полей наноуровневой интенсивности.

Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований явилась разработка способа получения и применения растворов, обработанных НИЭМИ КВЧ диапазона при лечении инфицированных ран у животных.

Задачи исследований:

1. Определить in vitro антибактериальную активность различных растворов, обработанных НИЭМИ КВЧ диапазона с длинами волн F₁ и F₂ мм с различной экспозицией по отношению к St. aureus и E. Coli.

2. Изучить терапевтическое действие различных растворов, обработанных НИЭМИ КВЧ диапазона, на репаративные процессы инфицированных ран у собак и овец.

3. В процессе лечения ран изучить клинические, гематологические, иммунологические, биохимические показатели крови; планометрические данные, площади ран, цитологическую картину мазков-отпечатков, рН раневого секрета у экспериментальных животных.

4. Изучить сравнительную эффективность 0,9% раствора натрия хлорида, обработанного НИЭМИ КВЧ диапазона, в сочетании с регионарной новокаиновой блокадой при лечении инфицированных ран у животных.

5. На основании полученных результатов исследований разработать и предложить в ветеринарную практику эффективное средство лечения инфицированных ран у животных.

Научная новизна результатов исследований. На основании проведенных исследований впервые установлена высокая терапевтическая эффективность 0,9% раствора хлорида натрия, обработанного НИЭМИ КВЧ диапазона аппаратом «Явь - 1», при лечении инфицированных ран у собак и овец. Исследована антибактериальная активность НИЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм. Разносторонними экспериментально-клиническими, гематологическими, иммунологическими, микробиологическими, цитологическими, биохимическими исследованиями установлено благоприятное влияние раствора 0,9% хлорида натрия, обработанного НИЭМИ КВЧ аппаратом «Явь - 1», на организм животных с инфицированными ранами мягких тканей.

Практическая значимость.

1. При лечении животных с инфицированными ранами мягких тканей эффективно применение 0,9%-го раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм, что позволяет рекомендовать его для лечения данного процесса.

2. Совместное применение 0,9%-го раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм, совместно с новокаиновой блокадой (с учетом локализации процесса), значительно повышает эффективность лечения инфицированных ран у животных. Такое сочетание целесообразно применять при тяжело протекающих процессах.

3. Материалы клинико-экспериментальных исследований и сформулированные в диссертации научные положения внедрены в учебный процесс на кафедре общей и частной хирургии ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана». Разработанный способ применения 0,9%-го раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм, успешно применяется для лечения инфицированных ран в ЛКЦ КГАВМ и в ветеринарном центре «Солнышко» (ООО «ВЕТСТАР») г. Казани.

Основные научные положения, выносимые на защиту:

1. НИЭМИ КВЧ диапазона с длиной волны волн F₂ мм и временем облучения T_optimum минут обладают бактериостатическим действием по отношению к St. aureus и E. Coli.

2. Противовоспалительное и регенеративно-стимулирующее действие 0,9% раствора хлорида натрия, облученного ЭМИ КВЧ аппаратом «Явь - 1» с длиной волны F₂ мм и временем облучения T_optimum минут, которое сопровождается изменениями клинических, гематологических, биохимических, цитологических и иммунологических показателей.

3. Применение в первой фазе раневого процесса 0,9% раствора хлорида натрия, облученного ЭМИ КВЧ, ускоряет очищение ран от инфекции, стимулирует образование и рост грануляционной ткани. Во второй фазе раневого процесса данный раствор повышает пролиферативную активность эпителиальных клеток и обуславливает сокращение сроков регенерации раневого дефекта на 4-5 дней.

Объём и структура диссертации. Работа изложена на 180 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, приложения. Диссертация иллюстрирована 45 рисунками, содержит 45 таблиц, 7 диаграмм. Список литературы включает 201 источник, из них 31 иностранных авторов.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментально-клинические и лабораторные исследования по изучению влияния растворов, обработанных НИЭМИ КВЧ диапазона на раневой процесс (РП), которые легли в основу настоящей диссертации, проведены с 2004 по 2007 гг.. на базе кафедры общей и частной хирургии (зав. каф.- заслуженный деятель науки РФ и РТ, профессор М.Ш. Шакуров) ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана», в лечебно-консультативном центре КГАВМ и в ветеринарном центре «Солнышко» г. Казани (табл. 1 и 2).

Таблица 1

Объем и характер исследований

№ серии	Характер опытов	Количество и вид животных
		Собаки	Овцы
1	Изучение in vitro антимикробной активности обработанных растворов ЭМИ КВЧ диапазоном в зависимости от длины волны и времени экспозиции.	-	-
2	Изучение репаративных процессов инфицированных ран на фоне местного применения раствора фурацилина и линимента бальзамического по Вишневскому (контроль).	4	5
3	Испытание лечебной эффективности различных растворов, обработанных ЭМИ КВЧ на клинически больных животных: 3.1 Изучение репаративных процессов инфицированных ран на фоне местного применения раствора фурацилина, обработанного ЭМИ КВЧ и линимента бальзамического по Вишневскому. 3.2 Изучение репаративных процессов инфицированных ран на фоне местного применения 0,9% раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ. 3.3 Изучение репаративных процессов инфицированных ран на фоне местного применения анолита и католита. 3.4 Изучение репаративных процессов инфицированных ран на фоне местного применения анолита и католита, обработанного ЭМИ КВЧ. 3.5 Изучение репаративных процессов инфицированных ран на фоне местного применения 0,9% раствора хорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ и новокаиновой блокадой звездчатого узла
		4	-
		4	-
		4	-
		4	-
		4	5
	Всего	24	10

Таблица 2. Методы и количество исследований

№ п.п.	Методы исследований	Вид и количество животных	Количество исследований
		Собаки	Овцы
1	Экспериментальная часть:	24	10	3335
	1.1 Клинические	24	10	272
	1.2 Гематологические	20	10	960
	1.3 Биохимические	20	10	1200
	1.4 Иммунологические	20	10	480
	1.5 Цитологические	24	10	204
	1.6 Биохимические (pH - метрия раневого экссудата)	24	10	204
	1.7 Микробиологические	-	-	15
2	Клиническая часть	12	-	12

Электромагнитное поле миллиметрового диапазона получали с помощью крайневысокочастотных аппаратов «Явь-1» с длинами волн F₁ и F₂ мм с облучателями типа «рупор». Тубус (облучатель) аппаратов располагался на расстоянии 7 см от поверхности исследуемых растворов (рис. 1).

Рис.1. Обработка раствора аппаратом «Явь -1».

Объектом наших исследований служили 24 клинически здоровые беспородные собаки обоего пола в возрасте от 2 до 5 лет и 10 овец романовской породы в возрасте от 3 до 5 лет, а также 12 клинически больных собак с гнойными ранами различной этиологии, принадлежащих частным владельцам г. Казани.

Из них, с соблюдением принципа аналогов, были созданы 6 групп собак - по 4 животных в группе и 2 группы овец по 5 животных в каждой.

Для лечения животных 1-ой группы (контроль) использовали раствор фурацилина 1:5000 путем санации им раны в первой фазе и линимента бальзамического по Вишневскому во второй фазе раневого процесса.

Для лечения животных 2-ой группы в первую фазу раневого процесса применяли санацию раны раствором фурацилина 1:5000, обработанного ЭМИ КВЧ, и во второй фазе раневого процесса линимента бальзамического по Вишневскому.

В 3-й группе в обеих фазах раневого процесса с целью лечения применяли 0,9% раствор хлорида натрия, обработанный ЭМИ КВЧ.

В 4-й группе в первой и второй фазах раневого процесса применяли растворы анолита и католита.

В 5-й группе с целью лечения инфицированных кожно-мышечных ран применяли растворы анолита и католита, обработанные ЭМИ КВЧ.

С целью лечения животных в 6-й группе в качестве лечения в первой и второй фазах раневого процесса применялся 0,9% раствор хлорида натрия, обработанный ЭМИ КВЧ, на фоне выполнения новокаиновой блокады звездчатого узла.

На овцах были проведены аналогичные серии опытов как в 1-й и 6-й группах собак.

Антимикробную активность жидкостей, облученных ЭМИ КВЧ определяли на МПА St. Aureus и E. Coli методом диффузии в агар.

Для изучения резонансного (информационного) характера КВЧ миллиметрового диапазона, аппаратами ЭМИ облучали МПА со свежепосеянными культурами, с последующим пересевом на необлученную питательную среду.

Для объективной оценки течения заболевания, тяжести воспалительного процесса, наличия интоксикации у животных и эффективности лечения в процессе экспериментов изучали показатели периферической крови. В крови определяли количество эритроцитов, содержание в них гемоглобина, СОЭ, цветной показатель, количество лейкоцитов и изучали лейкограмму по общепринятым в гематологии методикам.

В сыворотке крови определяли:

- количество глюкозы на электронном анализаторе «Эксан -Г»;

- количество общего белка определяли биуретовым методом;

- активность щелочной фосфатазы - унифицированным методом по «конечной точке»;

- содержание гемоглобина определяли на мини ГЕМ 540-гемоглобинометре портативной фотометрической А2Ф-03-1;

- активность лизоцима в сыворотке крови - по методу В.Г. Дорофейчука (1968);

- фагоцитарную активность нейтрофилов с 4-х миллиардной взвесью E.coli также проводили в исследуемые дни по методике Кост и Стенко (1958) (В.А. Берестов, 1981; И.П. Кондрахин, Н.В. Курилов, 1985).

О характере течения раневого процесса судили по визуальным наблюдениям (время очищения ран, появления грануляции, эпителизации, состояние тканей вокруг раны). Динамику изменений площади раны изучали по методу Поповой Л.Н. (1942). Полное покрытие раневого дефекта слоем эпителия считали сроком окончательного заживления.

Клиническая характеристика раневого процесса была также дополнена цитологическими исследованиями. Исследования раневого экссудата проводили одновременно с рН-метрией. Цитологические исследования раневого содержимого проводили с помощью мазков-отпечатков, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Для изучения раневых отпечатков использовали алгоритмический способ оценки (М.П. Покровская, М.С. Макаров, 1942; В.Л. Белянин, Д.Э. Цыплаков, 1999).

лечение инфицированная рана электромагнитный

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Результаты проведенных исследований показали, что при обработке водопроводной воды, 0,9% раствора хлорида натрия и дистиллированной воды ЭМИ КВЧ длинами волн F₁ и F₂ мм с временем экспозиции от 30 до 60 минут и орошении обработанными растворами посевов микробов St. Aureus и E. Coli, отмечается задержка роста культур во всех трех изучаемых жидкостях, обработанных длиной волны F₂ мм в течение T_optimum минут.

При обработке свежепосеянных микробных клеток на МПА ЭМИ КВЧ диапазона с временем обработки от 15 до 120 минут и длинами волн F₁ и F₂ мм был отмечен наименьший рост микробных культур, обработанных длиной волны F₂ мм и временем экспозиции от 60 до 120 минут, относительно контроля и всех чашек Петри, обработанных длиной волны F₁ мм и F₂ мм с временем обработки от 15 до 40 минут.

Для изучения «информационной памяти жидкости» были проведены опыты на свежих посевах микробных культур, обработанных ЭМИ КВЧ диапазона длиной волны F₂ мм, время экспозиции T_optimum минут. Выросшую культуру пересевали на необработанную питательную среду. При этом отмечалась задержка роста пересеянных культур клеток.

Спустя сутки после воспроизведения инфицированной раны у животных отмечалось беспокойство, переходящее в угнетение, повышалась температура тела до 39,4С (диаграмма 1), учащался пульс, дыхание становилось поверхностным и частым.

Диаграмма 1

Отмечалась хромота средней степени, сильная жажда, снижение аппетита, вплоть до полного отказа от корма. Наблюдались характерные клинические признаки инфицированной раны (перифокальный отек, болезненность, гиперемия, истечение гнойного экссудата). С этого момента начинали лечение животных.

Изменение клинической картины в процессе лечения происходило в зависимости от применяемого метода (табл. 3). Следует отметить, что у животных третьей, пятой и шестой групп отмечался спад околораневого отека и снижение болезненности на 7-3 сутки. Грануляции ран наиболее были выражены на пятые сутки у животных шестой и третьей групп. Заживление ран у собак в третьей и шестой группах произошло на 17 сутки, а в первой и второй группах в среднем на 21 сутки.

Таблица 3

Динамика клинических изменений у собак (M±m)

Группы животных	Очищение ран от гнойного экссудата (сутки)	Отсутствие отека (сутки)	Отсутствие болезненности (сутки)	Появление единичных островков грануляций (сутки)	Заживление раны (сутки)
I n=4	10,0 ±0,28	10,6 ±0,28	10,3 ±0,28	7,5 ±0,28	21,0 ±0,00
II n=4	8,3 ±0,30*	9,0 ±0,56	10,0 ±0,00*	7,0 ±0,00*	20,3 ±0,28
III n=4	4,0 ±0,00*	7,7 ±0,28*	7,2 ±0,56*	5,6 ±0,56*	17,3 ±0,28*
IV n=4	3,6 ±0,30*	8,3 ±0,56*	7,6 ±0,56*	6,3 ±0,28*	19,0 ±0,56*
V n=4	3,6 ±0,28	7,6 ±0,28	7,3 ±0,84	6,0 ±0,00*	18,7 ±0,28
VI n=4	3,6 ±0,12*	7,3 ±0,56	3,3 ±0,28*	5,3 ±0,64	17,2 ±0,28

* по отношению к контрольной группе статистически достоверно (Р<0,05)

Через трое суток после нанесения ран у животных всех шести групп наблюдалось незначительное увеличение площади раневой поверхности относительно первых суток. На седьмые сутки площадь раны во всех группах стала уменьшаться и самый высокий (с 822 мм² до 585 мм²) результат был у шестой группы. На десятые сутки во всех шести группах происходило уменьшение площади раны, но положительная динамика прослеживалась в третьей (с 741 до 338 мм²) и в шестой группах (с 585 до 350 мм²). В дальнейшем, на протяжении всего времени эксперимента, показатель площади ран уменьшался во всех группах, но более динамично происходило уменьшение площади ран у животных шестой группы (табл. 4).

Индекс Л.Н. Поповой, спустя трое суток, был отрицательным у собак всех шести групп. На седьмые сутки наблюдался скачкообразный рост показателя в шестой группе и в среднем составил около 7,2%. Значительный рост значений индекса Л.Н. Поповой к десятым суткам составил в третьей группе - 18,12%, в шестой - 13,3%, в первой - 12,24%, во второй - 12,22%, в пятой - 9,7% и в четвертой - 7,9%. В дальнейшем положительная динамика индекса сохраня- лась во всех группах, но в шестой группе этот показатель был выше, чем в контрольной (табл. 4).

Таблица 4

Динамика изменений площади ран и индекса Поповой Л.Н. у собак (М±m)

Сроки исследований (сутки)

I группа (контроль n=4)

II группа (n=4)

III группа (n=4)

IV группа (n=4)

V группа (n=4)

VI группа (n=4)

S, ммІ

S?, %

S, ммІ

S?, %

S, ммІ

S?, %

S, ммІ

S?, %

S, ммІ

S?, %

S, ммІ

S?, %

1

487 ±29,75

575 ±19,85

683 ±22,70*

408 ±0,28*

434 ±20,17*

800 ±23,63*

3

563 ±28,12

-7,8

595 ±21,58

-1,7

771 ±31,39*

-6,4

587 ±22,42

-14,6

464 ±14,05*

-3,4

822 ±25,73

-1,3

7

455 ±16,01

0,43

488 ±33,63

0,35

741 ±20,17*

0,97

610 ±22,42*

-0,9

463 ±20,74*

0,05

585 ±29,42*

7,2

10

288 ±14,01

12,22

309 ±37,83

12,24

338 ±19,89*

18,1

465 ±1,40*

7,9

328 ±9,24*

9,7

350 ±18,21

13,3

15

149 ±11,70

12,0

224 ±13,73*

5,5

139 ±13,17

11,7

171 ±15,69

12,6

135 ±9,80*

11,7

106 ±13,17

13,9

21

98 ±9,52

6,8

75 ±3,92*

11,08

40 ±8,68*

11,8

33 ±0,56*

13,4

39 ±5,08*

11,8

16 ±0,56*

14,1

* по отношению к контрольной группе статистически достоверно (Р<0,05).

Адекватно течению болезни изменялись и гематологические показатели. Повышалось количество гемоглобина в первой и второй группах, в первые сутки 129±8,68* г/л и в последующем прослеживалось достоверное снижение этого показателя до 109±6,72* г/л. В остальных же группах в течение всего эксперимента наблюдалось незначительное снижение гемоглобина, к концу опыта в 3-й группе он был равен исходным данным - 130±0,56* г/л, а в 4-й и 5-й гемоглобин был ниже физиологических норм - 122±2,24* г/л.

Количество эритроцитов у животных всех опытных групп в течение всего периода наблюдения не изменялось и находилась в пределах физиологических норм. Показатель скорости оседания эритроцитов (СОЭ) на всем протяжении опытов изменялся в зависимости от способа лечения. В пределах физиологических норм СОЭ в течение всего опыта находилось в третьей группе с небольшим достоверным повышением его на третий день (до 16 ±1,12*мм/ч), в первой, второй, четвертой и пятой группах СОЭ повышалась до 17, 20, 24 и 22 мм/ч соответственно.

В процессе лечения животных более выраженные изменения выявлены в содержании лейкоцитов и в характере лейкоцитарной формулы (табл. 5). Так, в первой (контрольной) группе к 7-му дню наблюдения уровень лейкоцитов в крови оставался повышенным (15,02,10*тыс/мкл). В лейкограмме оставалось также высоким процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов (29,01,95*%). Процент эозинофилов и моноцитов оставался в нижних пределах нормы. Снижение количества лейкоцитов в крови до уровня исходных данных наступало лишь к 15 суткам. К этому сроку уменьшался и процент палочкоядерных нейтрофилов.

У животных 2-й группы изменения гематологической картины протекали наиболее динамично. Так, уже после выполнения лечебных процедур на 3-и сутки исследования количество лейкоцитов снизилось до 9,10,90 тыс/мкл, но на 7-е сутки прослеживалось их повышение, а в дальнейшем на этом уровне лейкоцитоз сохранялся до 10 суток.

У собак 3-й группы на третьи сутки количество лейкоцитов приблизилось к исходным данным и составило 8,01,45 тыс./мкл. На эти сроки значительно понизился процент палочкоядерных нейтрофилов (19,01,95*%), а процент эозинофилов и моноцитов достоверно повысился. В последующие дни количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула не изменялись.

В 4-й группе высокий уровень количества лейкоцитов наблюдался, как и у всех групп, на первые сутки. На третьи сутки он снизился до 8,90,35 тыс./мкл с последующим незначительным понижением и приблизился к исходным данным на 15-е сутки. Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов достоверно понизилось до исходного уровня на 7-е сутки (13,00,56*%), но на 10-е сутки этот показатель вновь повысился и начал снижаться лишь на 21 сутки. Процент эозинофилов и моноцитов повышался на 10-15-е сутки.

В 5-й группе количество лейкоцитов достоверно понизилось и приблизилось к исходному показателю на 7-е сутки (до 10,72,24* тыс./мкл). Однако на 10-е сутки этот показатель незначительно повысился (14,63,15*тыс./мкл) и в последующие сутки понизился, приближаясь к исходному значению. Процент палочкоядерных нейтрофилов приблизился к исходному значению на 15-е сутки (16,0 1,95%). Процент эозинофилов и моноцитов повысился на 7 -10-е сутки.

Таблица 5

Количество лейкоцитов у собак, 10⁹/л. (Мm). n=4

№ группы	Сроки исследований, сутки
	Исход	1-е	3-и	7-е	10-е	15-е	21-е
I (контроль) n=4	7,5 ±0,57	13,2 ±2,81*	8,5 ±1,68	15,0 ±2,10*	11,1 ±0,57*	7,9 ±0,28	5,6 ±0,28
II n=4	9,11 ±0,02	12,4 ±1,10*	9,1 ±0,90	8,6 ±0,56*	7,8 ±0,20*	5,4 ±0,60*	6,7 ±0,02*
III n=4	7,5 ±0,04	14,6 ±2,24*	8,0 ±1,45	7,8 ±1,42*	6,5 ±1,80*	8,0 ±1,14	5,2 ±0,84
IV n=4	5,5 ±0,04	13,2 ±0,14*	8,9 ±0,35	8,0 ±1,30*	7,0 ±1,40	6,4 ±1,50	5,8 ±1,30
V n=4	10,8 ±1,20	17,3 ±0,58*	17,8 ±1,42*	10,7 ±2,24*	14,6 ±3,15*	11,1 ±1,68*	11,0 ±1,70*

* по отношению к контрольной группе статистически достоверно (Р<0,05).

Изучение показателей, характеризующих иммунный статус собак с инфицированными кожно-мышечными ранами показало, что процент фагоцитоза за 30 мин. инкубации в 3-ей группе достоверно увеличился на 1-е сутки и составил 73,3±0,42%*, с последующим незначительным снижением на 3-и сутки до 66,0±1,12%. На 7-15-е сутки этот показатель относительно контрольной группы достоверно повысился до 70,0±1,12%* во второй группе. Однако, увеличение процента фагоцитоза наблюдалось на третьи сутки 84,0±2,24%* с последующим снижением данного показателя. В 4-й и 5-й группах максимальное повышение процента фагоцитоза наблюдалось на 10-е сутки до 66,0±1,12%* и 77,0±2,80%* соответственно.

Процент фагоцитоза за 1 час инкубации в третьей, второй и пятой группах был достоверно высоким на 3-и сутки (66,0±0,0%*, 80,0±1,68%* и 62,0±2,24%*).

В третьей и второй группах фагоцитарное число за 30 мин. инкубации было достоверно высоким на 21-е сутки (9,4±0,58* и 7,13±0,54*), в первой же группе его увеличение наблюдалось на 7-е сутки 8,6±0,58*, в четвертой и в пятой - на 10-е сутки (9,4±0,09* и 10,8±0,90*).

В первой, второй и третьей группах фагоцитарное число за 1 час инкубации было достоверно высоким на 7-е сутки (4,0±0,06*, 6,7±1,12* и 4,5, ±0,12*). В четвертой, пятой - на 10-е сутки - 9,4±0,09* и 10,8±0,90.

Индекс завершенности фагоцитоза через 1 час был достоверным на 7-е сутки в третьей, первой и пятой группах (2,171±0,15*, 1,797±0,09* и 2,220±1,95*). Во второй и четвертой группах показатель был высоким на 21-е сутки (2,672±1,40* и 2,417±0,21*) (табл. 6).

Таблица 6

Динамика изменения индекса завершённости фагоцитоза у животных опытных групп (Mm)

Группы животных	Исход	Сроки исследований, сутки
		1	3	7	10	15	21
I n=4	2,077 ±0,89	1,970 ±0,14	2,045 ±0,05	1,735 ±0,09*	2,063 ±0,30	2,072 ±1,12	1,903 ±0,19
II n=4	2,015 ±1,12	1,786 ±0,30	1,747 ±0,28	1,813 ±1,12	1,825 ±0,12	1,923 ±0,18	2,672 ±1,40*
III n=4	2,060 ±0,21	2,002 ±0,11	2,003 ±0,07	2,171 ±0,15*	2,057 ±0,12	2,083 ±0,07	2,114 ±0,14
IV n=4	2,288 ±1,68	1,977 ±0,28	1,973 ±1,12	1,970 ±0,06	2,266 ±1,40	2,035 ±0,05	2,417 ±0,21*
V n=4	2,533 ±1,68	1,966 ±0,28	2,250 ±1,12	2,220 ±1,95*	2,035 ±0,56	2,124 ±0,06	2,131 ±0,56

* по отношению к контрольной группе статистически достоверно (Р<0,05).

Показатели лизоцимной активности сыворотки крови также изменялись в зависимости от метода лечения. Так, в третьей группе максимальный процент её наблюдался на 3-и сутки и составил 22,2±0,56%*, а в первой группе на - 21-е сутки 9,6±1,99%*. Во 2-й, 4-й и 5-й группах на - 7-е сутки 11,3±1,33%*, 25,5±1,12%* и 26,7±1,12%* соответственно (табл. 7).

Таблица 7

Группы животных	До опыта	Сроки исследований, сутки
		1	3	7	10	15	21
I n=4	15,2 ±2,80	15,7 ±2,24	9,5 ±1,40*	5,0 ±0,86*	6,4 ±0,57*	5,13 ±0,40*	9,6 ±1,99*
II n=4	13,2 ±0,30	6,4 ±0,28*	6,1 ±0,00*	11,3 ±1,33*	7,8 ±1,68	6,5 ±1,40*	10,2 ±1,95*
III n=4	13,8 ±0,28	12,0 ±1,12	22,2 ±0,56*	17,5 ±0,20*	14,7 ±1,70*	11,4 ±1,41*	10,4 ±0,22
IV n=4	12,1 ±0,80	14,8 ±0,30	21,5 ±0,32*	25,5 ±1,12*	16,8 ±1,20*	10,5 ±1,70*	10,7 ±1,85
V n=4	11,9 ±1,40	8,64 ±0,56*	22,2 ±0,08*	26,7 ±1,12*	15,9 ±0,10*	9,9 ±1,46*	10,8 ±0,27

Показатели лизацимной активности сыворотки крови собак в % (Мm)

* по отношению к контрольной группе статистически достоверно (Р<0,05).

До третьих суток исследования в мазках-отпечатках в значительном количестве присутствовали эритроциты, большинство из которых находились в состоянии гемолиза. Из возбудителей гнойной инфекции преобладала кокковая флора - до 50-60%, большая часть которых располагалась вне полиморфноядерных лейкоцитов. Количество фагоцитирующих нейтрофилов и лимфоцитов составило от 10 до 20%.

Показатель рН раневого экссудата во всех шести группах собак был кислым (от 3,3 до 3,9) (табл.8).

На третий день в мазках-отпечатках отмечалось снижение количества эритроцитов в первой и второй группах до 10%, а в остальных - до 5%. Содержание микроорганизмов в первой и во второй группах снизилось до 20%, а в остальных группах - до 10%. Количество полиморфноядерных лейкоцитов в третьей, пятой и шестой группах было 50%, в первой, второй и четвертой группах - до 20%. Основная масса из них находилась в состоянии фагоцитоза. Процент лимфоцитов во всех группах составил в среднем 20%.

рН достоверно увеличился в третьей группе - 4,9±0,04*, а в контрольной группе - 4,7±0,06*. В четвертой, пятой и шестой группах значение рН возрастало до 6,5±0,00*.

В мазках-отпечатках процент микроорганизмов в первой группе составил 10%, а в остальных - менее 5%. Количество эритроцитов в первой и второй группах было единичнымо, а в других - до 5%. Полиморфноядерные лейкоциты составляли до 5% в третьей и шестой группах, во второй, четвертой и пятой группах до - 10%, а в первой до - 15%. Во всех группах макрофаги составили 5%, а после завершения некролиза, очищения раны и появления грануляций их количество постепенно уменьшалось. Полибласты в первой и второй группах составляли 5%, в четвертой, третьей, пятой и шестой группах - до 10%, при этом отмечалась трансформация клеток в профибробласты и фибробласты. Количество фибробластов в третьей, пятой и шестой группах составляло 20%, а в первой, второй и четвертой группах - 5%. Эпителиальные клетки встречались в третьей, пятой и шестой группах до 20%, во второй и четвертой группах до - 5%, а в первой группе в единичных количествах.

К 15 суткам в мазках-отпечатках у животных третьей, пятой и шестой групп микроорганизмы встречались в единичных количествах. В первой, второй и четвертой группах их количество доходило до 5%. Фибробласты в третьей, пятой и шестой группах составили 50%, а в первой, второй и четвертой группах - до 10%. Процент полибластов в первой и второй группах увеличился до 50%, в четвертой, пятой и шестой - до 10%, а в третьей - до 5%. Эритроциты во всех группах встречались в единичных случаях. В первой и четвертой группах содержание лимфоцитов снизилось до 10%, в остальных группах до 5%. Макрофаги в мазках-отпечатках шестой группы были единичными, а в остальных встречались до 5%. Количество эпителиальных клеток во всех группах составило 5%.

Таблица 8

Показатели pH раны у собак (Мm)

Группы животных	Сроки исследований, сутки
	1	3	7	10	15
I n=4	3,6 ±0,06	4,7 ±0,06*	4,9 ±0,04*	7,0 ±0,10*	7,2 ±0,14*
II n=4	3,3 ±0,14	4,7 ±0,30	7,1 ±0,20*	7,5 ±0,00*	7,5 0,10
III n=4	3,4 ±0,06	4,9 ±0,04*	7,5 ±0,02*	7,5 ±0,06*	7,5 ±0,10*
IV n=4	3,6 ±0,04	6,5 ±0,00*	7,5 ±0,06*	7,5 ±0,00*	7,5 ±0,08
V n=4	3,9 ±0,16	6,5 ±0,00	6,8 ±0,18*	7,3 ±0,16	7,5 ±0,00*
VI n=4	3,3 ±0,02	6,3 ±0,12*	7,0 ±0,00*	7,0 ±0,04*	7,5 ±0,06*

* по отношению к контрольной группе статистически достоверно (Р<0,05).

Проведенные экспериментально-клинические исследования на овцах также свидетельствовали о благоприятном течении раневого процесса при лечении их 0,9%-ным раствором хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ.

Получив положительные результаты при применении обработанного ЭМИ КВЧ 0,9%-ного раствора хлорида натрия для лечения экспериментальных инфицированных ран в первой и второй фазах раневого процесса и новокаиновой блокады звездчатого узла у мелких домашних животных, мы использовали этот метод на клинически больных собаках, получивших спонтанные раны.

Наш метод лечения применялся как дополнение к другим схемам лечения. В результате этого было замечено, что у собак с инфицированными ранами на вторые сутки после лечения улучшалось состояние, процесс очищения от раневого экссудата происходил на третьи - четвертые сутки, в это же время был отмечен рост активных грануляций с последующей эпителизацией.

Таким образом, в результате научных исследований нами разработан и апробирован на экспериментальных и клинически больных животных эффективный метод лечения инфицированных ран с помощью 0,9%-ного раствора натрия хлорида, обработанного электромагнитным полем крайневысокочастотного диапазона наноуровневой интенсивности.

ВЫВОДЫ

1. Изотонический (0,9%-ный) раствор натрия хлорида, обработанный НИЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм и временем экспозиции T_optimum минут in vitro, проявляет антибактериальную активность по отношению к культурам St. aureus и E. сoli.

2. НИЭМИ КВЧ диапазона с длиной волны F₂ мм и экспозицией T_optimum минут изменяет культуральные свойства микробных клеток St. aureus и E. сoli при однократном посеве и последующем пересевании.

3. Изотонический раствор натрия хлорида, обработанный ЭМИ КВЧ, способствует уменьшению гиперемии, отечности, болезненности тканей в инфицированных ранах (в области лопатки) на 3,1±0,56 (Р<0,05) суток раньше, чем в контрольной и других опытных группах, что свидетельствует о его противовоспалительном эффекте.

4. Изотонический раствор натрия хлорида, обработанный ЭМИ КВЧ, вызывает в кратчайшие сроки нормализацию гематологических, биохимических показателей, а также незначительное повышение иммунологических показателей у раненых собак.

5. У собак с инфицированными ранами в области лопатки сроки лечения при использовании 0,9%-ного раствора натрия хлорида, обработанного ЭМИ КВЧ, сокращаются на 4,0±0,28 (Р<0,05) суток, по сравнению с контрольной группой.

6. Растворы анолита и католита, обработанные ЭМИ КВЧ, показали более высокий лечебный эффект относительно необработанных растворов анолита и католита.

7. При лечении овец с экспериментально вызванными инфицированными ранами наиболее выраженная терапевтическая эффективность отмечается при лечении 0,9%-ным раствором хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ, относительно контрольной группы, где в качестве лечения применялся раствор фурацилина 1:5000 и линимент бальзамический по Вишневскому.

8. Применение 0,9%-ного раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ, на фоне новокаиновой блокады звездчатого узла соответствующей стороны при лечении инфицированных ран у животных сокращает фазу воспаления, активизирует регенеративно-пролиферативные процессы и значительно ускоряет клиническое выздоровление раненых животных, по сравнению с контрольной группой.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При лечении животных с инфицированными ранами мягких тканей эффективно применение 0,9%-го раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм, что позволяет рекомендовать его для лечения данного процесса.

2. Совместное применение 0,9%-го раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм, с новокаиновой блокадой (с учетом локализации раны), значительно повышает эффективность лечения инфицированных ран у животных. Такое сочетание целесообразно применять при тяжело протекающих процессах.

3. Материалы клинико-экспериментальных исследований и сформулированные в диссертации научные положения внедрены в учебный процесс на кафедре общей и частной хирургии ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э Баумана». Разработанный нами способ с применением 0,9%-го раствора хлорида натрия, обработанного ЭМИ КВЧ с длиной волны F₂ мм для лечения инфицированных ран, успешно применяется в ЛКЦ КГАВМ и в ветеринарном центре «Солнышко» (ООО «ВЕТСТАР») г. Казани.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гынку С.П. Исследования воздействия энергии КВЧ диапазона на водные растворы и их применение в хирургической патологии / С.П. Гынку, М.Ш. Шакуров, Г.А. Морозов // Ветеринарный врач. - 2007.- №1.- С. 30-32.

2. Гынку С.П. Информационные технологии в исследованиях воздействия энергии КВЧ диапазона в ветеринарной медицине / С.П. Гынку // Матер. всерос. науч. конф., посвящ. 75-летию Казан. гос. технич. унив. им. А.Н. Туполева «Информационные технологии в науке, образовании и производстве». Казань, 2007. С. 236-238.

3. Гынку С.П. Информационные технологии в исследованиях воздействия энергии КВЧ диапазона на водные растворы и их применение в ветеринарной медицине / С.П. Гынку, М.Ш. Шакуров, Г.А. Морозов // Физика волновых процессов и радиотехнические системы. - 2007.-№4.-Т.10.- С.56-58.

Размещено на Allbest.ru

...