Одним из факторов повышения эффективности молочного скотоводства является ускоренное качественное совершенствование существующих пород, а также создание на их основе высокопродуктивных типов и линий животных, в большей степени отвечающих современным технологическим требованиям. Необходимо учитывать и тот факт, что в стране 43% разводимых пород крупного рогатого скота представлены породами двойного направления продуктивности, которые по удою значительно уступают животным специализированных молочных пород и не отвечают промышленным технологиям производства молока [1,2. - С.2-7,3. - С.159].

В хозяйствах Курской области на протяжении ряда лет проводится работа по улучшению симментальского и черно-пестрого скота с использованием быков голштинской породы. В ряде хозяйств имеются стада помесных животных разной кровности по голштинской породе, характеризующиеся высокими продуктивными показателями. Так, молочная продуктивность черно-пестрых голштинских коров в ФГУП "Учхоз „Знаменское“" Курской ГСХА колеблется от 5000 до 6000 кг [4. - С.12,5. - С.40-41]. Тогда как продуктивность дойного стада в области по всем категориям хозяйств по данным за 2008 год составляет 3968 кг.

С целью увеличения производства молока, продуктивности животных и повышения экономической эффективности молочной отрасли в области реализуется целевая программа "Развитие молочного скотоводства в Курской области на 2009-2012 годы" (утверждена постановлением Администрации Курской области от 21 октября 2009 г. №340). Реализация мероприятий, предусмотренных данной программой, позволит повысить продуктивность дойного стада до 5100 кг, увеличить удельный вес племенного поголовья коров до 13,8%, выход телят на 100 маток до 82 голов и довести производство молока к 2012 году до 490 тыс. тонн, в т. ч. на душу населения до уровня 412 кг [6].

Реализация селекционных программ по улучшению крупного рогатого скота требует изучения факторов защиты организма помесных животных с учетом их генотипа, возраста, условий выращивания, действия различных стрессоров. При этом важно знать состояние клеточного звена иммунитета. Лимфоциты, являясь ключевыми клетками иммунной системы, обеспечивают основные реакции иммунитета. Т - и В-лимфоциты совместно с макрофагами обеспечивают становление защитных сил организма и поддержание иммунологического гомеостаза. Они различаются между собой по антигенным, физическим, химическим и биологическим свойствам. Т-лимфоциты содержат поверхностные 0-антигены, лишены иммуноглобулиновых рецепторов и детерминант для иммунных комплексов. В-лимфоциты не имеют 0-антигены, но содержат большое количество детерминант различных классов иммуноглобулинов. Кроме того, Т-лимфоциты обеспечивают иммунный ответ на воздействие вирусных, бактериальных, грибковых и других агентов. В этом процессе участвую три субпопуляции клеток: Т-клетки-хелперы (Th), обеспечивающие развитие гуморального и клеточного ответов, активизацию макрофагов; цитоксические

Т-клетки (Tc), участвующие в разрушении чужеродных или инфицированных клеток; Т-клетки-супрессоры (Ts), подавляющие иммунный ответ и отвечающие за иммуносупрессию, обусловленную микроорганизмами. В-лимфоциты предназначены для реализации гуморального иммунного ответа с образованием специфических антител [7].

В связи с этим целью наших исследований являлось изучение количественных и функциональных характеристик иммунокомпетентных клеток на популяционном и субпопуляционном уровнях в постнатальном онтогенезе у голштинизированных телок.

клеточный иммунитет ремонтная телка

Для проведения экспериментальной части работы в учебном хозяйстве "Знаменское" Курской ГСХА по методу аналогов из числа клинически здоровых телочек была сформирована опытная группа в количестве 10 животных. Уровень кормления телок во все возрастные периоды соответствовал нормам ВАСХНИЛ, условия содержания - зоогигиеническим нормам. Кровь для исследований отбирали из яремной вены при рождении, в возрасте 1, 5 15 сут и в 1, 3, 6, 9, 12, 18 месяцев, стабилизировали ее гепарином из расчета 25 ед/мл. В цельной крови определяли общее количество лейкоцитов, их дифференциальный подсчет (лейкограмму) проводили в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Лимфоциты из крови выделяли методом дифференциального центрифугирования форменных элементов в центрифужных пробирках с добавлением 10% раствора желатина в одноступенчатом градиенте плотности. Т-лимфоциты определяли в реакции спонтанного розеткообразования (Е-РОК) с эритроцитами барана, В-лимфоциты - методом комплиментарного розеткообразования (ЕАС-РОК) с эритроцитами мыши. Определяли относительное количество розеткообразующих лимфоцитов в мазках крови и, сопоставляя полученные данные с результатами гематологических исследований, вычисляли содержание их в крови в абсолютных значениях. Субпопуляции лимфоцитов определяли нагрузочной пробой с теофилином. При проведении исследований использовали общепринятые в клинической иммунологии методы [7, 8, 9, 10].

Результаты иммунного статуса организма животных использовали для расчета индексов: Т/В - отношение количества Т-клеток к В-клеткам; лейко-Т-клеточного (ЛТИ) - отношение количества лейкоцитов к числу Т-лимфоцитов в 1 мкл крови; лейко-В-клеточного (ЛВИ) - отношение количества лейкоцитов к В-лимфоцитов; иммунорегуляторного - отношение Т-хелперов к Т-супрессорам.

Анализ полученных данных позволил выявить основные этапы в становлении клеточного звена иммунитета, его изменения в процессе роста телок. У новорожденных животных до выпойки молозива в крови отмечается низкое количество лейкоцитов и лимфоцитов, хотя уровень Т - и В-клеток уже достаточно высокий (таблица 1). После выпойки молозива количество лейкоцитов и лимфоцитов повысилось в 1,4 раза. На 5 сут постнатального периода телят содержание лейкоцитов составляло в среднем 7,27±0,04*10⁹/л, лимфоцитов - 4,68±0,06*10⁹/л. На 15 сут жизни животных абсолютное количество лимфоцитов повысилось на 6 % в результате увеличения уровня Т - и В-популяций клеток.

Таблица 1 - Клеточные показатели иммунитета в постнатальном онтогенезе телок

Примечание: *Р < 0,05

Таблица 2 - Субпопуляции Т-лимфоцитов в периферической крови телок

Примечание: **Р < 0,01

Рисунок 1 - Возрастная динамика иммунологических индексов

Выявлены достоверные различия (Р<0,05) между количеством лимфоцитов у телят при рождении (до поения молозивом) и в суточном возрасте по сравнению с животными 15-суточного и более старшего возраста (2,92±0,01 против 4,96±0,09 и 5,51±0,11*10⁹/л) у новорожденных и у телят 1-5-суточного возраста по сравнению с животными месячного возраста, в относительном и абсолютном содержании Т - и В-клеток (45,9±0,74% и 1,34±0,02*10⁹/л и 9,8±0,39% и 0,29±0,01*10⁹/л). Снижение функциональной активности популяций лимфоцитов наблюдали в возрасте 3-6 месяцев. При достижении половозрелого возраста (9-12 месяцев) отмечали стабилизацию количества лейкоцитов, лимфоцитов, Т - и В-популяций клеток.

Среди субпопуляций Т-клеток абсолютное количество, как Т-хелперов, так и Т-супрессоров были наименьшими в первые пять суток жизни телят (таблица 2). В этот возрастной период количество Т-хелперов колебалась от 0,810,01*10⁹/л до 1,310,03*10⁹/л, Т - супрессоров от 0,530,01*10⁹/л до 0,850,02*10⁹/л. В 30-суточном возрасте количество Т-хелперов уже составляло в среднем 1,800,04*10⁹/л, а Т-супрессоров-1,160,02*10⁹/л., увеличение по сравнению с показателями при рождении составило соответственно 0,99 и 0,63*10⁹/л (Р0,001). В 3-6-месчном возрасте отмечается снижение субпопуляций Т-клеток. Абсолютное число Т-хелперов в возрасте 90 суток составляло в среднем 1,380,03*10⁹/л, что на 0,42*10⁹/л меньше по сравнению с показателем в 30-суточном возрасте (Р<0,01). Количество Т-хелперов в 6-месячном возрасте имело тенденцию к снижению (1,290,03*10⁹/л). Количество Т-супрессоров в 3-месячном возрасте было равным 0,900,02*10⁹/л или на 0,26*10⁹/л меньше чем в месячном возрасте (Р0,01). Количественная стабилизация субпопуляций Т-клеток наблюдалась при достижении телками годовалого возраста. Число Т-хелперов в этом возрасте было на уровне 1,350,04*10⁹/л, а Т-супрессоров - 0,870,02*10⁹/л.

Индекс Т-лимфоциты / В-лимфоциты от рождения до 15-суточного возраста увеличился с 4,73±0,17 до 5,00±0,15 (рисунок 1). К месячному возрасту, он понизился до 3,570,13. При достижении животными 3-месячного возраста индекс Т/В был равен 4,260,22, а 6-месчного - 4,170,26, затем понижался до 4,000,19 (9 месяцев) и 3,960,25 (12 месяцев), а к концу наблюдений повышался до 4,110,23.

При рождении телочки имели самые высокие значения индексов ЛТИ и ЛВИ соответственно 3,640,06 и 17,250,69. Снижение индекса ЛТИ до 2,450,04-2,500,05 отмечали в период с 15 до 30-суточного возраста. Индекс ЛВИ также был ниже в этот период: у 15-суточных телят-12,240,4, 30-суточных - 8,880,26. В другие изучаемые возрастные периоды ЛТИ находился в пределах 3,13-3,39, а ЛВИ-12,81-13,99. Иммунорегуляторный индекс в период наблюдений варьировал: от 1,530,02 при рождении до 1,590,06 в 180-суточном возрасте.

Таким образом, становление факторов клеточного иммунитета у телок происходит в первые тридцать суток постнатального онтогенеза. Т-лимфоциты после рождения обладают более высокой функциональной активностью, по-видимому, за счет Т-хелперов, поскольку количество и активность В-лимфоцитов в первые дни жизни понижены, что свидетельствует о несовершенстве кооперативных, регуляторных взаимоотношений между иммунокомпетентными клетками. Полученные данные подтверждают положение о важности системы Т-лимфоцитов, выполняющих функцию надзора и регуляции иммунологического гомеостаза организма. Поэтому телята рождаются с достаточно зрелой клеточной системой иммунитета. В процессе роста телок отмечаются количественные изменения в популяции лимфоцитов, которые необходимо учитывать в клинической практике с целью профилактики иммунодефицитов.

Список использованных источников