Замена осетровых гипофизов альтернативными препаратами

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

ЗАМЕНА ОСЕТРОВЫХ ГИПОФИЗОВ АЛЬТЕРНАТИВНЫМИ ПРЕПАРАТАМИ

Подушка С.Б.

ООО "ЧНИОРХ"

Падение запасов осетровых привело к запрету их промысла. Прекратилась централизованная заготовка гипофизов, необходимых для воспроизводства этих рыб на рыбоводных заводах. Осетроводные предприятия перешли на использование альтернативных препаратов. Обобщён многолетний опыт испытаний различных агентов для стимуляции спермиации и овуляции у осетровых. Испытаны гипофизы товарного сибирского (ленского) осетра, карповых рыб (леща и карпа), кеты, европейского и африканского сомов, кур, а также сурфагон, фоллимаг и овариальная жидкость стерляди. Помимо уже широко используемых гипофизов карповых рыб и сурфагона перспективными для использования в осетроводстве признаны гипофизы сомов и товарных осетров.

Ключевые слова: осетроводство, гипофиз, инъекции, осетровые, карповые, сомы, лососевые, окситоцин, сурфагон, фоллимаг, овариальная жидкость

REPLACEMENT OF STURGEON PITUITARY GLANDS WITH ALTERNATIVE DRUGS

The decline of sturgeon stocks led to the ban on their fishing. Centralized harvesting of their pituitary glands necessary for their reproduction in hatcheries was stopped. Sturgeon hatcheries switched

to alternative drugs. The paper summarizes many years of experience of testing various agents for the stimulation of spermiation and ovulation in sturgeons. Pituitary glands of young aquaculture Siberian (Lena) sturgeons, carp fishes (bream and carp), chum salmons, European and African catfishes and chicken were tested, as well as surfagon, follimagum and the ovarian fluid of sterlet. In addition to the pituitary glands of carps and surfagon, which are already widely used, pituitary glands of catfish and young aquaculture sturgeon were found to be promising for use in sturgeon farming.

Key words: sturgeon breeding, pituitary gland, injections, sturgeon, carp, catfish, salmon, oxytocin, surfagon, follimagum, ovarian fluid

Падение естественных запасов осетровых привело к резкому сокращению уловов и последующему запрету промысла. Централизованная заготовка в Астрахани осетровых гипофизов, необходимых для рыбоводных заводов, прекратилась. Хозяйства, осуществляющие работы по воспроизводству осетровых, были вынуждены перейти на использование альтернативных препаратов.

В настоящем сообщении кратко освещаются многолетние исследования автора, касающиеся этой проблемы. В качестве агентов для получения зрелых половых продуктов у осетровых были испытаны: гипофизы товарного сибирского (ленского) осетра Acipenser baerii [9], леща Abramis brama [11], карпа Cyprinus carpio (целый гипофиз и отдельно передняя и задняя доли) [14], кеты Oncorhynchus keta, европейского сома Silurus glanis [13], африканского сома Clarias gariepinus [17], курицы Gallus domesticus [15, 18], фоллимаг, сурфагон [12] и овариальная жидкость (табл.1). Тест-объектами были производители стерляди Acipenser ruthenus и ленского осетра.

С физиологической точки зрения наиболее оптимальной была бы замена ставших дефицитными гипофизов диких осетровых осетровыми же гипофизами, но от рыб, выращенных в аквакультуре. Сложность такой замены связана с тем, что в большинстве хозяйств выращивают товарных осетровых небольших размеров (2-3 кг), то есть, неполовозрелую рыбу. А половозрелых самок, у которых гонадотропная активность гипофизов максимальна, как правило, не забивают, а используют для получения икры многократно [19]. Гонадотропная активность гипофизов неполовозрелых рыб значительно ниже, чем половозрелых [1]. Тем не менее, мы провели тестирование гипофизов товарных сибирских (ленских) осетров, выращенных в ООО «Биоакустик» [9]. В качестве тест-объектов использованы самцы и самки стерляди.

Полученные результаты показали, что гипофизы, заготовленные от мелких товарных ленских осетров, масса которых не превышает 2,0-2,5 кг, имеют достаточно высокую гонадотропную активность (не более чем в три-четыре раза ниже активности стандартного препарата, получаемого от половозрелых рыб) и с успехом могут использоваться для стимуляции созревания половых продуктов у осетровых рыб. Использованные для изъятия гипофизов рыбы не были рассортированы по полу, а представляли собой смесь самцов и самок. В последние годы в ряде хозяйств, ориентированных на производство пищевой икры, самцов успешно отбирают и удаляют из выращиваемых стад с помощью УЗИ-диагностики. Можно полагать, что, если для отбора гипофизов будут использоваться исключительно самцы, которые достигают половой зрелости на несколько лет раньше самок, активность заготавливаемого препарата окажется ещё выше.

осетровый гипофиз альтернативный

Таблица 1

Сведения об испытанных препаратах и оценка перспективности их использования в осетроводстве для получения зрелых половых продуктов

¹ Получен эффект только на самцах

Возможность использования гипофизов карповых рыб для стимуляции созревания половых продуктов у осетровых известна давно. Ещё в довоенные годы Б.Н. Казанский [8], используя гипофизы леща, добился созревания икры у севрюги. Г.М. Персов [10] при работе с производителями стерляди применял глицериновую вытяжку из ацетонированных гипофизов сазана. Лещовые гипофизы достаточно эффективны при работе с сибирским осетром [11]. В настоящее время в России и за рубежом гипофизы леща и карпа широко используются в практике разведения осетровых различных видов. При этом обычно применяются следующие дозировки сухого порошка гипофизов (мг/кг): для самцов - от 1 до 4, для самок - от 2 до 10. М.С. Чебанов и Е.В. Галич [23] рекомендуют при использовании гипофизов карповых рыб применять в полтора раза большие дозировки по сравнению с гипофизами осетровых.

Гипофизы двух видов сомообразных - европейского и африканского сомов, как показали исследования, могут успешно использоваться для получения зрелых половых продуктов у осетровых. Гонадотропная активность гипофизов сомов оказалась достаточно высокой и сопоставимой с активностью осетровых гипофизов. Однако, если запасы и, соответственно, возможности заготовки гипофизов европейского сома, весьма ограничены и вряд ли могут быть существенно увеличены в обозримом будущем, потенциал развития аквакультуры клариевого сома ещё далеко не исчерпан, и развитие рынка гипофизов этого вида имеет большие перспективы [13, 17].

Тихоокеанские лососи рода Oncorhynchus из-за большой численности и уловов могли бы стать надёжным источником гипофизов для рыбоводства, в том числе и для осетроводства. Однако проведённые нами испытания на самцах стерляди показали, что ацетонированные гипофизы кеты O. keta менее эффективны, чем гипофизы карповых, а от самок стерляди получить икру после инъекций гипофизов кеты вообще не удалось (дозировки 12,5-22,3 мг/кг, однократные и градуальные инъекции).

Гипофизы домашних кур можно успешно использовать для получения зрелых половых продуктов у ряда видов костистых рыб. Сырьевая база для получения куриных гипофизов практически неисчерпаема. Однако проведённые нами исследования показали, что эффективные дозы куриного гипофиза для самцов стерляди (25 мг/кг и выше) на порядок и более превышают нормативные дозы препаратов гипофизов осетровых и карповых рыб. Попытка получить от самок стерляди с помощью инъекций куриных гипофизов овулировавшую икру успехом не увенчалась (доза 73,3 мг/кг, градуальные инъекции). В связи с этим рекомендовать использование гипофиза кур в осетроводстве нецелесообразно [15, 18].

Литературные данные свидетельствуют, что препараты сыворотки крови жеребых кобыл (СЖК) способны стимулировать овуляцию и спермиацию у некоторых видов костистых рыб. Представляло интерес проверить этот препарат и на осетровых. В наших опытах использован фоллимаг - препарат, содержащий гонадотропин СЖК, очищенный от иммуногенных белков, и вспомогательные вещества. Препарат представляет собой пористую массу от белого до светло-коричневого цвета, хорошо растворим в воде или физиологическом растворе. Фоллимаг разрешен Департаментом ветеринарии МСХ РФ для регуляции воспроизводительной функции в животноводстве и звероводстве.

Проверяли действие препарата на самцах стерляди. Активность препарата составляла 350 м.е./мг. Водный раствор фоллимага вводили внутримышечно. Испытывали дозы 5,3; 23,3 и 73,5 м.е./кг. В каждом варианте опыта было по 3 самца. Через сутки ни у одного из них спермиация не наблюдалась. Контрольные самцы (5 шт.) созрели от инъекции 10 мкг сурфагона. Таким образом, фоллимаг в испытанных дозировках на самцов стерляди не подействовал.

А.Б. Бурлаков и соавторы [2] указывают, что в карповодстве следует использовать препарат СЖК с активностью не менее 2 тыс. м.е./мг. Мы работали с препаратом меньшей активности и использовали дозировки на два порядка более низкие. Возможно, отрицательный результат связан с этим. Следует проверить более активный препарат и более высокие дозировки.

Окситоцин - гормон гипоталамуса, который у млекопитающих транспортируется в заднюю долю гипофиза, где накапливается и выделяется в кровь. В ветеринарии используется синтетический аналог окситоцина. Роль окситоцина в регуляции размножения низших позвоночных ещё мало изучена, и применение его для регуляции гаметогенеза не разработано [4]. Мы испытывали действие окситоцина на производителей стерляди. Подопытным рыбам инъекции делали однократно. Был испытан широкий диапазон дозировок окситоцина (0,0125-15 м.е.), но ни в одном случае эффект (спермиация или овуляция) получен не был.

Возможность применения в осетроводстве суперактивных синтетических аналогов люлиберина впервые была показана Б.Ф. Гончаровым [5]. Один из испытанных им аналогов впоследствии стал выпускаться в промышленных масштабах для ветеринарии под коммерческим названием «сурфагон». Этот препарат широко доступен и дёшев по сравнению с рыбьими гипофизами и в настоящее время используется на осетровых рыбоводных заводах [22]. Тем не менее, в некоторых случаях, в частности при инъецировании стерляди, при использовании сурфагона получают неудовлетворительные результаты [6, 12]. Наши исследования на самцах стерляди показали, что, как и в описанных Б.Ф. Гончаровым с соавторами примерах с вьюнами и амфибиями [7, 21], разные партии рыб могут иметь разную чувствительность к сурфагону. Как известно, во многих случаях увеличить чувствительность рыб к суперактивным синтетическим аналогам люлиберина удается с помощью нейролептиков - антагонистов дофамина [20]. В США при разведении белого осетра аналоги гонадотропин-рилизинг гормона используются в комбинации с антагонистами дофамина (пимозидом или домперидоном). При этом достигается практически 100%-ное созревание самок [24]. В России выпускается целая линейка аналогичных препаратов для различных видов рыб под названием «нерестины». Мы испытывали на стерляди совместное с сурфагоном введение следующих препаратов, содержащих нейролептики: эглонил (сульпирид), церукал (метоклопрамид) и раунатин (резерпин). Наиболее эффективной добавкой к сурфагону оказался раунатин [16]. Это отечественный доступный и относительно недорогой препарат.

В одной из ранних работ Н.Л. Гербильского [3] есть упоминание о фактах созревания самок севрюги с яичниками IV стадии зрелости после внутриполостных инъекций овариальной жидкости. Обсуждая механизм действия инъекций овариальной жидкости, Н.Л. Гербильский указывал на его неизученность: "Действует ли в данном случае именно гонадотропный гормон, и содержится ли он в овариальной жидкости у осетровых, или мы имеем здесь дело с относительно автономной регуляцией процессов в пределах органа - мы пока не знаем" (с.34). Хотя Н.Л. Гербильский писал о необходимости широкой проверки этого варианта инъекций, какой-либо дальнейшей информации по этому вопросу в доступных литературных источниках мы не встретили.

Нами проведены испытания действия овариальной жидкости на самцов стерляди. В первом опыте шести самцам стерляди в спинную мускулатуру инъецировали по 2,5 мл овариальной жидкости своего вида. Обеднённую реакцию спермиации наблюдали только у одного самца (выделилась капля спермы). Во втором опыте пяти самцам стерляди в брюшную полость ввели по 10 мл овариальной жидкости. Ни у одного самца спермиации отмечено не было. На самках овариальную жидкость не испытывали.

Обобщая полученные результаты, можно заключить, что, помимо уже широко используемых в осетроводстве гипофизов карповых рыб и сурфагона, в качестве препаратов, стимулирующих спермиацию и овуляцию, наиболее перспективны гипофизы клариевого сома и товарного ленского осетра.

Литература

1. Баранникова И.А. 1975. Гипофизарно-овариальные взаимосвязи у осетровых при нормальном половом цикле и при его нарушениях // Труды ВНИРО. - Т.111. - С.86-96.

2. Бурлаков А.Б., Белова Н.В., Зуморина Л.А., Параскевопулу С.А. 1980. Возможность применения препарата СЖК для получения икры карпа // Рыбное хозяйство. № 8. - С.31-32.

3. Гербильский Н.Л. 1941. Метод гипофизарных инъекций и его роль в рыбоводстве // Метод гипофизарных инъекций и его роль в воспроизводстве рыбных запасов. - Л.: Изд. ЛГУ. - С.5-35.

4. Глубоков А.И. 1993. Некоторые нейрофизиологические предпосылки использования биологически активных веществ и факторов для стимуляции созревания рыб // Биологически активные вещества и факторы в аквакультуре. - М.: ВНИРО. - С.3-28.

5. Гончаров Б.Ф. 1984. Опыт применения синтетических аналогов люлиберина для индукции созревания половых продуктов у осетровых рыб // Осетровое хозяйство водоемов СССР: Всесоюз. совещ.: Кратк. тез. науч. докл. - Астрахань. - С.94-95.

6. Гончаров Б.Ф., Игумнова Л.В., Полупан И.С., Савельева Э.А. 1991. Сравнение действия синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона и гипофизов осетровых рыб на созревание половых продуктов у осетровых рыб // Онтогенез. - Т.22. № 5. - С.514-526.

7. Гончаров Б.Ф., Сербинова И.А., Шубравый О.И. и др. 1990. Влияние синтетических аналогов гонадотропин-рилизинг гормонов на размножение у амфибий // Зоокультура амфибий. - М.- С.51-74.

8. Казанский Б.Н. 1940. К вопросу о таксономической специфичности гонадотропного гормона гипофиза у рыб // Докл. АН СССР. - Т.27. № 2. - С.180-183.

9. Мышкин А.В., Подушка С.Б. 2013. Товарная рыба - новый источник гипофизов для осетроводства // Рыбное хозяйство. № 3. - С.78-81.

10. Персов Г.М. 1950. Воспроизводство стерляди на новой основе // Рыбное хозяйство. № 9. - С.47-48.

11. Подушка С.Б. 1999. Использование гипофизов леща при разведении сибирского осетра // Проблемы современного товарного осетроводства: Первая науч.-практич. конф.: Тез. докл. - Астрахань. - С.40-41.

12. Подушка С.Б. 2001. Вариабельность в чувствительности производителей стерляди к сурфагону // Аквакультура осетровых рыб: достижения и перспективы развития: II Международ. науч.-практич. конф. - Астрахань. - С.29-30.

13. Подушка С.Б. 2003. Тестирование гипофизов сома (Silurus glanis) на самцах стерляди (Acipenser ruthenus) // Научно-технический бюллетень лаборатории ихтиологии ИНЭНКО. № 6. - СПб. - С.19-20.

14. Подушка С.Б. 2005. Тестирование передней и задней долей гипофиза сазана на самцах стерляди // Научно-технический бюллетень лаборатории ихтиологии ИНЭНКО. № 9. - СПб. - С.29-33.

15. Подушка С.Б. 2008. Повторное тестирование куриных гипофизов на самцах стерляди // Научно-технический бюллетень лаборатории ихтиологии ИНЭНКО. № 14. - СПб. - С.29-32.

16. Подушка С.Б. 2010. Раунатин усиливает действие сурфагона на производителей стерляди // Осетровое хозяйство. № 4. - С.16-25.

17. Подушка С.Б. 2016. Заготовка и использование в рыбоводстве гипофизов клариевого сома // Рыбоводство и рыбное хозяйство. № 3 (в печати)

18. Подушка С.Б., Кирилин С.Ю. 2004. Тестирование куриных гипофизов на самцах стерляди // Аквакультура осетровых рыб: достижения и перспективы развития. III Международная научно-практическая конференция. Материалы докладов. - Астрахань: "Альфа-Аст". - С.204-206.

19. Подушка С.Б., Лунеев Д.Е., Брусованский Р.Б. и др. 2005. Начало официального производства пищевой икры осетровых рыб, выращенных в рыбоводных хозяйствах // Научно-технический бюллетень лаборатории ихтиологии ИНЭНКО. № 9. - СПб. - С.5-11.

20. Попонов С. Ю., Веселовзоров С. И., Мотлох Н. Н., Гончаров Б. Ф. 1990. Дофаминовая регуляция овуляции и спермиации у рыб // Экол.-физиол. и токсикол. аспекты и методы рыбохоз. исслед. - М.: ВНИРО. - С.102-117.

21. Попонов С.Ю., Гончаров Б.Ф. 1995. Влияние синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона и антагонистов дофамина на созревание и качество яйцеклеток вьюна // Онтогенез. - Т.26. № 6. - С.453-459.

22. Тренклер И.В. (Составитель) 2010. Методические рекомендации по применению сурфагона для стимуляции созревания самок и самцов осетровых рыб на рыбоводных заводах дельты Волги. ФГУ «Севзапрыбвод». Центр. лаб. по воспр. рыбных запасов. - СПб.: Изд-во «ВИС». - 44 с.

23. Чебанов М.С., Галич Е.В. 2010. Руководство по искусственному воспроизводству осетровых рыб // Технический доклад ФАО по рыбному хозяйству № 558. - Анкара. - 325 с.

24. Doroshov S.I., Van Eenennaam J.P., Moberg G.P. 1999. Development of sturgeon broodstock // Journal Appl. Ichthyology. - V.15. N 4-5. - P.326-327.

Размещено на Allbest.ru