Лабораторная диагностика болезни Ауески

Размещено на http://www.allbest.ru/

Лабораторная диагностика болезни Ауески

Халявина В.С.

Николаева О.Н.

ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ

Уфа, Россия

Болезнь Ауески -- остро протекающая болезнь многих видов домашних и диких животных, проявляющаяся расстройством ЦНС, сильным зудом и расчёсами (у всех животных, кроме свиней и пушных зверей). У свиней болезнь обычно протекает в виде лихорадки, а у молодняка сопровождается судорогами, параличами, гибелью животных. Зафиксированы случаи заболевания у людей с симптомами зуда и лихорадки [1]. лабораторный диагностика болезнь ауески

Экономический ущерб складывается из падежа, вынужденного убоя, снижения прироста массы животного, потери племенных качеств, выбраковки туш, абортов, затрат на ликвидацию, общую и специфическую профилактику болезни.

Болезнь Ауески свиней встречается во всех странах мира. По 5 вспышек данной болезни было отмечено в России. Помимо собственных источников возбудителя болезни Ауески, эпизоотическую угрозу в отношении этой болезни для России представляют страны, откуда возбудитель может быть занесен с импортируемой свининой: Бразилия, Голландия, Франция, Испания, Польша [2].

На сегодняшний день специфические и медикаментозные средства лечения больных животных пока разработаны недостаточно хорошо.

Возбудителем заболевания является герпесвирус Suid herpesvius 1.

Order/Отряд - Herpesvirales

Family/ Семейство - Herpesviridae

Subfamily/ Подсемейство - Alphaherpesvirinae

Genus/ Род - Varicellovirus

Species/ Вид - Suid herpesvirus 1

Методы лабораторной диагностики болезни Ауески утверждены Постановлением

Государственного комитета СССР по стандартам (ГОСТ 25753-83) от 22 апреля 1983 г. № 2016 и основаны на обнаружении и идентификации вируса в патологическом материале с помощью РНГА; на выявлении специфических антител в сыворотке крови больных и переболевших животных в РНГА или РН в культуре ткани; на постановке биологической пробы.

Для диагностики вируса используются:

1. Метод биологической пробы. Сущность метода заключается в воспроизведении заболевания у здоровых кроликов или котят, путем введения паталогического материла.

Кроликам или котятам внутримышечно вводят суспензию паталогического материала (головной мозг, легкие, печень, селезенка) от павших или убитых с диагностической целью животных. При наличии вируса в патматериале у животных появляются клинические признаки (расчесы, зуд) и через 2-10 суток наступает смерть. Если животное погибло, без наличия признаков болезни Ауески, биопробу повторяют, используя патматериал первого пассажа. Для идентификации вируса используют серологический метод.

2. Метод выделения вируса в культурах клеток. Сущность метода заключается в выявлении цитопатического действия (ЦПД) вируса в культуре клеток и его последующей идентификации.

Для выделения вируса болезни Ауески используют культуру клеток первичнотрипсинизированных почек и щитовидный железы поросят, семенников телят, эмбрионов кур, почек эмбрионов свиньи и коровы, а также перевиваемые линии клеток. Культуру клеток заражают испытуемым материалом и выдерживают в термостате при температуре 37° в течение 30 минут. Затем удаляют надосадочную жидкость и добавляют поддерживающую питательную среду. Инкубируют вместе с контрольной культурой клеток в течение 2-5 суток. Сроки наступления цитопатогенного действия зависят от дозы вируса и количества пассажей [4].

При наличии вируса проявляется цитопатическое действие (ЦПД) в виде округления клеток, появлении гигантских клеток, растворения клеток и их систем с отпадением пораженных клеток от стекла. В незараженных (контрольных) культурах клеток не должно быть цитопатических изменений. Видовую принадлежность выделенного вируса подтверждают методом идентификации вируса.

3. Метод идентификации вируса. Сущность метода заключается в обнаружении подавления биологоческой активности вируса в культуре клеток с помощью типоспецифических сывороткок.

Вирус болезни Ауески можно идентифицировать в реакции нейтрализации на том лабораторном объекте, на котором он был обнаружен. Перед постановкой реакции положительную и отрицательную сыворотки разбавляют питательной средой для культуры клеток. Затем прогревают в водной бане при температуре 56° в течение 30 минут. Готовят десятикратное разведение испытуемого вируса и вносят в пробирки с сыворотками, выдерживают в термостате при температуре 37° в течение 1 часа. Каждую смесь сывороток с разведениями вируса вносят в пробирки с культурой клетки и инкубируют в термостате при температуре 37°.

Результаты учитывают по цитопатическому действию вируса через 2-3 суток, с помощью определения титра исследуемого вируса в присутствии положительной и отрицательной сыворотки и выражают его в логарифмах. Видовую принадлежность вирусов устанавливают при наличии разности в титрах вируса с отрицательными и положительными сыворотками не менее чем на два логарифма [4].

4. Серологический метод исследования. Сущность метода заключается в специфическом свойстве нейтрализующих антител подавлять способность вируса вызывать цитопатическое действие в культуре клеток.

Основным методом диагностики болезни Ауески в нашей стране является реакция нейтрализации. Недостатками этого теста являются: трудность и длительность выполнения, необходимость поддержания соответствующих культур клеток и штаммов вируса. Для диагностики болезни Ауески разработана реакция пассивной гемагглютинации, но этот метод не получил широкого применения из-за отсутствия промышленного выпуска диагностикумов [3].

Результаты серологического исследования испытуемых сывороток считают положительными, если цитопатическое действие отсутствует в разведениях сыворотки 1:2 и выше. При этом в контроле должны быть такие результаты как:

* в контроле культуры клеток монослой клеток должен оставаться прежним, то есть без изменений;

* в контроле дозы вируса ЦПД должно быть в рабочем разведении вируса;

* в контроле токсичности сывороток у положительной сыворотки (переболевшее животное) должен отсутствовать цитопатический эффект, начиная с разведения сыворотки 1:2, а у отрицательной сыворотки (специфические антитела отсутствуют) наоборот должен присутствовать цитопатический эффект;

* в контроле специфичности вируса в культурах клеток, в которые введена смесь специфической сыворотки и вируса, должен отсутствовать цитопатический эффект.

Наличие специфических антител в испытуемых сыворотках крови свидетельствует об инфицировании данной особи, группы животных возбудителем болезни Ауески или возможной вакцинации животных против болезни Ауески.

Положительный результат серологического метода исследования сывороток крови невакцинированных животных свидетельствует о подозрении на заболевание, которое подтверждают постановкой биопробы [4].

В связи с вышеизложенным, своевременная лабораторная диагностика позволяет предотвратить распространение данной инфекции.

Библиографический список

1. Бессарабов Б. Ф. Инфекционные болезни животных: учебник / Б. А. Бессарабов, А. А.Вашутин, Е. С. Воронин [и др.] - М. : КолоС, 2007.- 671 с.

2. Болоцкий И. А. Болезнь Ауески [Текст] / И. А. Болоцкий, В. И. Семенцов, А. К. Васильев, С. В. Пруцаков // Инфекционные болезни животных. - 2009. - № 2. - С. 19.

3. Корниенко Л. Н. Разработка средств и методов лабораторной диагностики болезни Ауески: Автореферат дис. канд. биол. наук / Л. Н. Корниенко. - Владимир. : 1993. - 23 с.

4. Методы лабораторной диагностики болезни Ауески : ГОСТ 25753-83. - 7с.

Размещено на Allbest.ru