Применение электрохимических и йодсодержащих препаратов для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«БЕЛГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ В.Я. ГОРИНА»

ОТЧЕТ О НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЕ

Применение электрохимических и йодсодержащих препаратов для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов

Начальник научной части А.Н. Ивченко

Руководитель темы А.М. Коваленко

БЕЛГОРОД 2013

Реферат

ЖИВОТНЫЕ, КРОЛИКИ, ЙОДСОДЕРЖАЩИЙ ПРЕПАРАТ-ЙОДПРОТЕКТИН, ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИЕ РАСТВОРЫ, ЛЕЧЕНИЕ, ПРОФИЛАКТИКА, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ

Объектом исследования являются кролики разных пород, инфицированные возбудителями бактериальных инфекций.

Цель исследований - изучение распространенности инфекционных болезней кроликов, сопровождающегося развитием: Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli-, - инфекций и разработка способов применения электрохимических и йодсодержащих препаратов для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов. Для достижения цели были решены следующие задачи: изучена распространененность Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli- - инфекций, вызывающих инфекционные болезни у кроликов; определена чувствительность выделенных возбудителей (Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli к традиционным антибиотическим веществам (антибиотикам), йодсодержащим и антибактериальным препаратам, обладающих антисептическими, антибактериальными и ранозаживляющими свойствами; разработаны методические подходы и рекомендации. проведены испытания по профилактике и лечению Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli-, - инфекций, вызывающих инфекционные болезни у кроликов, с использованием йодсодержащих и электрохимических растворов, обладающих антисептическими, антибактериальми и ранозаживляющими свойствами.

Содержание

Нормативные ссылки

Введение

1. Обоснование направления исследований

2. Методика проведения исследований

3. Результаты исследований

Заключение

Список использованных источников

Нормативные ссылки

В настоящем отчете о научно-исследовательской работе использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 2874 "Вода питьевая";

ГОСТ 13830-84 Соль поваренная пищевая;

ГОСТ 20010-93 Резиновые перчатки;

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная;

ГОСТ 4233-77 Хлорид натрия марок "ХЧ" или "Ч";

ГОСТ Р 51232-98 Вода очищенная для гемодиализа;

ГОСТ Р 51760-2001 Полимерные бутылки, канистры;

ГОСТ Р 51232-98. Вода питьевая водопроводная;

ГОСТ Р 12.4.013-97.12.4.7 Защитные очки;

ГОСТ Р 8.579-2001 Номинальные объёмы расфасованного средства;

ГОСТ 12.1.007-76. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности.

ГОСТ 12.4.021-75 Приточно-вытяжная вентиляция;

ГОСТ 12.4.121-83 Промышленные фильтрующие противогазы марок А и БКФ;

ГОСТ 12.4.131-83, ГОСТ 12.4.132-83 хлопчатобумажные халаты;

ТУ 18-11-65 Техническая поваренная соль;

СанПиН 2.1.4.559 - 96 Вода питьевая водопроводная;

Введение

Наиболее ощутимый ущерб в кролеководческих хозяйствах наносят бактериальные и вирусные инфекционные болезни, которые сопровождается сенсибилизацией возбудителей секундарных инфекций: Staphylococcus aureus, Staphylococcus albus, Staph. еpidermidis, E.coli. Данная инфекционная патология встречается у 15-50% кроликов, практически во всех кролеководческих хозяйствах России. Длительное время ученые ветеринары проводили изыскательские работы по снижению риска развития инфекционных болезней кроликов, а так же по использованию антисептических, антибактериальных и ранозаживляющих препаратов, не содержащих антибиотики. Наиболее часто встречающимися болезнями кроликов являются: стафилококкоз, колибактериоз, инфекционный стоматит, инфекционный ринит. миксоматоз, вирусная геморрагическая болезнь и др.

Инфекционному стоматиту («мокрая мордочка») подвержены в основном молодняк с подсосного (20--26 дней) и до 3-месячного возраста, независимо от породы и пола; полновозрастные кролики болеют редко. Возбудителем инфекционного стоматита является фильтрующийся вирус. При заболевании у крольчат воспаляется слизистая оболочка ротовой полости, наблюдается обильное слюнотечение, на языке появляются язвочки или сыпь. Нередко болезнь сопровождается поносом. Болезнь быстро распространяется на кролиководческой ферме, особенно в антисанитарных условиях, поражая сначала отдельные гнезда (семьи), а затем весь молодняк. Источник заражения -- больные инфекционным стоматитом кролики. При сильных эпизоотиях смертность молодняка колеблется от 30 до 50%. Латентный (скрытый, инкубационный) период длится от двух до восьми дней. Инфекционный ринит (заразный насморк) поражает прежде всего слизистые оболочки носовых ходов. Источник инфекции -- больные кролики. Возбудители заболевания -- вирус, стафилококки, бронхосептикум. Распространению инфекции способствует совместное содержание больных животных со здоровыми. Если не принять своевременных мер, то более половины всех кроликов в хозяйстве могут в скором времени оказаться больными. При неблагоприятном течении болезнь может распространиться в глубь дыхательных путей, вызвать воспаление бронхов, легких и привести к падежу кроликов. Возникновению заболевания способствуют простуда, вызванная сквозняками, намоканием крольчат, а также раздражающие факторы -- повышенная концентрация в воздухе помещения аммиака, дыма и пыли. К инфекционному риниту восприимчивы кролики всех возрастов, особенно при пониженной резистентности их организма.

В начале заболевания наблюдаются покраснение и набухание слизистой оболочки носовой полости и обильное выделение прозрачной жидкости. Затем слизистая мутнеет, становится серовато-желтой и покрывается обильным экссудатом. Больные кролики чихают, из носа выделяется слизисто-гнойный или гнойный экссудат. Кролик при этом трет нос передними лапами, на которых образуются своеобразные зачесы. Перезаражение кроликов происходит аэрогенным путем при чихании. При осложненной форме инфекционного ринита дыхание у кролика затруднено, общее его состояние угнетенное, при прослушивании в легких слышны хрипы. Температура у больных животных повышается, они отказываются от корма.

Распространены стафилококкозов способствуют антисанитарные условия содержания, скученность кроликов и драки между ними, травмы от острых предметов, покусы крольчатами сосков у самок и т. д. Проявляется стафилококкоз в форме септикопиемии, блуждающей пиемии, пододерматита, общей септицемии и мастита. На коже крольчат, больных септи копиемией, образуется множество гнойничков величиной с просяное зерно. Такие крольчата обычно погибают. Блуждающая пиемия характеризуется появлением на различных участках тела и даже на внутренних органах гнойных абсцессов.

Причиной мастита (воспаления молочной железы) могут явиться покусы крольчатами сосков (особенно у маломолочных крольчих.) Молочная.железа у крольчихи в таком случае воспаляется, становится твердой и бывает покрыта язвами. Крольчиха перестает кормить крольчат молоком. При надавливании на молочную железу из сосков выделяется молоко с примесью гноя. Маститных крольчих немедленно уничтожают. При общей септицемии гнойные абсцессы могут возникать в различных органах или мышцах. По мере созревания они вскрываются в брюшную или грудную полость, в результате чего кролик сразу погибает.

При пододерматите вначале выпадает волос на нижней поверхности лап, затем образуются сухие корочки, переходящие в дальнейшем в жесткие мозоли (намины), которые далее трескаются. При попадании в раны и трещины инфекции развиваются гнойные процессы. Кролики от этого беспокоятся, теряют аппетит и худеют. Такие животные подлежат выбраковке.

Колибактериоз характеризуется угнетенным состоянием кроликов и расстройством функции желудочно-кишечного тракта. Возбудитель -- кишечная палочка. Болезнь может поразить значительную часть поголовья кроликов на ферме. Возникновению болезни способствуют антисанитарные условия содержания животных, плохое кормление и снижение общей резистентности. Больные кролики теряют аппетит, страдают поносом, быстро худеют и через 2--8 дней погибают.

Традиционно для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов используют настойку йода (5 мл на 10 л воды) или кристаллический марганцовокислый калий (до появления слабо-розового окрашивания) для профилактики инфекционного стоматита, 33%-ного водного раствора экмо-новоциллина, 1 %-ного раствора фурациллина (по 7--8 капель в каждую ноздрю) или раствора, содержащего в 1 мл 15 000--20 000 ЕД пенициллина (по 10--12) капель введение в носовую полость 2 раза в день в течение четырех-пяти дней для профилактики инфекционного ринита, пенициллин или стрептомицин в дозе 20000--25 000 ЕД, а также бициллин в дозе 30 000--50 000 ЕД в расчете на 1 кг живой массы кролика внутримышечно для лечения стафилококкоза, биомицин вместе с кормом в дозе 25 мг и синтомицин в дозе 0,1 г на 1 кг живой массы для лечения колибактериоза.

Последние 10-15 лет существует тенденция снижения применения препаратов содержащих антибиотики. Были разработаны препараты, не содержащие в своем составе антибиотики. Научной группой БелГСХА с 2012 года проводятся изыскательные работы по разработке и применению йодсодержащих препаратов обладающих антисептическими, антимикробными и ранозаживляющими свойствами.

1. Обоснование направления исследований

Йод обладает широким спектром антимикробного, антигельминтного, фунгицидного, антивирусного и противопротозойного действия. Доказано, что йодистые соединения блокируют дыхательные ферменты бактерий, проявляет тем самым бактерицидные и бактериостатические свойства. У микроорганизмов к йодистым препаратам, в отличии от антибактериальных, не возникает резистентность даже при длительном применении [2,3].

Препараты йода используют как антисептические, кровоостанавливающие, раздражающие. отвлекающие, противовоспалительные и ранозаживляющие средства. Местное действие этих лекарств может проявляться в улучшении трофики тканей и рассасывании токсических веществ из очага воспаления. Йодистые препараты показаны в гинекологии при воспалительных процессах половой сферы, кожных болезнях, желудочно-кишечной патологии различной этиологии и в хирургической практике. Их применяют и в качестве дезинфектантов для обеззараживания помещений и оборудования.

Препараты йода очень легко всасываются слизистыми оболочками желудочно-кишечного тракта животного, причем йодистые соли могут всасываться в неизмененном виде, а молекулярный йод отчасти переходит в йодистые соли или вступает в сложные соединения с жироподобными веществами (липоидами) и временно циркулирует в организме в форме органических соединений.Резорбтивное действие йода при выделении его через легкие проявляется в виде отхаркивающего и муколитического эффекта.

Длительный опыт применения различных препаратов йода показал, что те из них, которые обладают выраженными антимикробными свойствами с широким спектром действия (спиртовой раствор йода и йод однохлористый) являются вместе с тем резко токсичными при введении в организм животных и человека, что значительно суживает область их клинического применения. И наоборот, те йодистые препараты, которые являются нетоксичными при введении в организм (например, йодистый калий), совершенно лишены антимикробных свойств и поэтому применение их для лечения и профилактики микробных заболеваний лишено смысла [1].

Теоретически обоснована и разработана система ветеринарно - санитарных мероприятий по профилактики и лечению инфекционных заболеваний с использованием (йодофоров) йод-неонол. Существует лекарственное средств монклавит, Монклавит-1 - лекарственное антисептическое и дезинфицирующее средство широкого спектра действия, представляющее собой водно-полимерную систему на основе йода в форме комплекса поли-N-виниламидациклосульфойодида. Монклавит-1 как лекарственное средство предназначен для:

эффективного лечения и профилактики инфекционных заболеваний животных, он обладает антибактериальными, фунгицидными, противовоспалительными и регенерирующими свойствами;

профилактики и лечения йод-дефицитных заболеваний животных, повышения неспецифического иммунитета, стимуляции роста

санации воздушной среды в присутствии животных;

Применение Монклавита-1 позволяет снизить затраты и повысить эффективность производства, в том числе уменьшить количество применяемых антибиотиков; понизить токсичность кормов; увеличить сохранность, прирост массы тела животных и вывод молодняка птицы; увеличить выпуск готовой продукции. Применение Монклавита-1 позволяет улучшить качество животноводческой продукции по основным показателям, получать обогащенную йодом продукцию. Однако он имеет сравнительно небольшой срок хранения [2,3].

Разработанный нами йодсодержащей препарат для лечения инфекционно-больных животных обладает высокими терапевтическими и антибактериальными свойствами.

Электрохимическая активация воды является динамично развивающимся направлением мировой промышленности. Технология ЭХА внедрена в РФ, США, Японии, Корее, Австралии, Германии и других странах. Принцип ЭХА воды используется для получения активированных фракций воды для дезинфекции, стерилизации (анолит), моющих фракций ЭХА воды (католит). В 1998г. в США на целевую программу замены дезинфектантов в перерабатывающей промышленности был затрачен 1 млрд долларов. Полученные электрохимически активированные растворы применяются в медицине - дезинфекция, предстерилизационная очистка, стерилизация изделий из различного материала. Получаемые электрохимически активированные растворы могут использоваться как дезинфицирующие, стерилизующие, моющие растворы, а также для профилактики и лечения ряда заболеваний. Основным преимуществом данных растворов перед традиционно применяемыми средствами являются их физиологическая безвредность, дешевизна и биосовместимость [5].

Электрохимически активированные растворы синтезируют из разбавленных (от 0,05 до 5,0 г/л) растворов неорганических веществ, в качестве которых чаще всего используют раствор хлорида натрия в питьевой воде. Также электрохимически активированные растворы можно готовить из дистиллированной или очищенной для гемодиализа воды с добавками химически чистого хлорида натрия или других электролитов.

Электрохимическая активация (ЭХА) привлекает все большее внимание специалистов различных отраслей и ученых возможностью безреагентного экологически чистого изменения кислотно-щелочных и окислительно-восстановительных свойств воды различной степени минерализации: от дистиллированной до сильно минерализованной. Сущность ЭХА - придание воде необходимых функциональных свойств перед использованием, в том числе придание ей каталитической и биокаталитической активности. Электрохимическая активация производится путем катодной или анодной (униполярной) электрохимической обработки воды в диафрагменном электрохимическом реакторе. Диафрагма в виде пористой диэлектрической перегородки между электродами реактора препятствует смешиванию объемов воды (или растворов) в анодной и катодной электродной камерах, но в то же время обеспечивает ионный обмен между этими объемами. При этом каждый микрообъем массы жидкости обрабатывается в электрическом поле сверхвысокой напряженности у поверхности электрода одной полярности при отсутствии перемешивания с жидкостью у электрода противоположной полярности. В результате указанного воздействия растворы переходят в термодинамически неравновесное состояние и в течение 24 часов проявляют аномально высокую химическую активность, при этом раствор, обработанный в катодной камере (католит) обладает моющими свойствами, а раствор, обработанный в анодной камере (анолит), проявляет дезинфекционную активность. В катодной камере реактора вода насыщается продуктами катодных электрохимических реакций, обычно гидроксидами металлов, образовавшимися из растворенных солей, гидроксид-ионами, водородом. В момент и после катодной электрохимической обработки вода для упрощения обозначения характера оказанного на нее воздействия называется католитом. При анодной обработке на нерасходуемом электроде вода насыщается продуктами окисления, в том числе кислотами, синтезированными из растворенных солей, кислородом, хлором. В момент и после анодной обработки вода называется анолитом. Наличие устойчивых электрохимически синтезированных щелочей в католите и кислот в анолите не является признаком их актиаированности, как не являются им соответственно высокие и низкие значения рН католита и анолита, сохраняющие свое значение длительное время при хранении. Активированное состояние воды и растворов в результате униполярной электрохимической обработки проявляется в аномальной реакционной способности католита и анолита в окислительно-восстановительных реакциях, в их каталитической, биокаталитической активности, в аномальной физико-химической активности при взаимодействиях на границе раздела фаз и коррелирует с измеряемыми параметрами, такими, как pH, окислительно-восстановительным потенциалом (ОВП) поверхностным натяжением, диэлектрической проницаемостью, электропроводностью и другими. Значение рН в основном связано с одним из факторов активации - синтезом устойчивых веществ в традиционных процессах электролиза. Современные электрохимические активаторы позволяют получать 4 вида активированной воды:

кислотный анолит (рН =<5)

нейтральный анолит (рН = 61)

щелочной анолит (рН= 7- 8)

нейтральный католит (рН =7-8)

щелочной католит (рН >8)/

Электрохимически активированные растворы получают из водопроводной води ГОСТ 2874 " Вода питьевая" и пищевой попаренной соли ГОСТ 13830-84 или технической поваренной соли ТУ 18-11-65; растворы технической соли предварительно фильтруют через ткань для освобождения от шлака [6].

Применение ЭХАР в ветеринарной медицине возможно при наличии высокотехнологических установок и средств, позволяющих получать дезинфицирующие растворы со стабильными показателями их качества, а также пригодных для работы в условиях животноводства. Для электрохимической активации воды и слабых солевых растворов применяют специально сконструированный реактор РПЭ (реактор проточный электрохимический), позволяющий получать дезинфицирующие и стерилизующие растворы [7-8,9,10].

2. Методика проведения исследований

Изучая распространенность инфекционных болезей кроликов, сопровождающейся развитием: Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli- - инфекций, для выделения возбудителей проводили смывы с носового зеркала, анального отверствия. Для этого из пяти кроликах проводили смывы стерильным физиологически раствором и помещали в пробирки, а после тщательного их взбалтывания и отстаивания в течение 30 минут, центрифугировали при 1500 оборотов в течение 20 мин проводили посевы. Надосадочную жидкость пастеровской пипеткой высевали на питательные среды: МПБ, МПА, Кит - Тароци, Сабуро. Для накопления бактериальной массы эшерихий использовали среду Хотингера. Выделенные культуры Staphylococcus aureus, E.coli подвергали микроскопированию с использованием светового микроскопа. После рекультивации E.coli на среде Хотингера и питательной среде для выращивания кишечной палочки (Среда ВК) содержащей в литре дистиллированной воды: лимонную кислоту, хлористый натрий, сернокислый магний, фосфорнокислый калий двухзамещенный, сернокислое железо, аспарагин, глюкозу, глицерин, ее использовали для изучений бактерицидных свойств электрохимических растворов и йодпротектина. С этой целью наносили взвесь E.coli в дозе 1см3 с концентрацией 2-3млн. микробных клеток на тест объекты (деревяные квадратные дощечки размером 10,0 х10,0 см). После 2 часовой выдержки наносили нативный электрохимический раствор и разведенные 1:50, 1:70, 1:80, 1:99 растворы йодсодержащего препарата йодпротектин на высохшие дощечки с культурой эшерихий в дозах 10.0 мл. с использованием распылителя Росинка. Изучение ультратонких срезов микроорганизмов при воздействии на них ЭХАР АКВАЭХА проводили по методике А.В. Иванова, А.А. Иванова и др., используя в качестве модели полевой штамм E. coli. Осадок суточных бульонных культур E. coli после заданной нами экспозиции с ЭХАР АКВАЭХА (рН 6,5, сод. акт. Сl2 500 мг/л, ОВП - 700 мВ) получали центрифугированием, заключали в агар-агар, вырезали и фиксировали в 1% растворе глутарового альдегида (SERVA, Германия) на 0,1 М фосфатном буфере рН 7,4 12 час в холодильнике с последующей фиксацией в 2% растворе четырёхокиси осмия на том же буфере в течение 2 ч при комнатной t0. После дегидратации образцы заключали в смесь эпоновых смол (Epon-812, MNA, DDSA, SERVA, Германия). Ультратонкие срезы получали на микротоме LKB-3 и изучали в электронном микроскопе JEM 100СХ-2 («Jeol», Japan). Фотофискацию проводили на фототехническую плёнку AGFA ORTHOCHROMATIC. Для получения микрофотографий использовали сканирование негативов на сканере EPSON PERFECTION 4990 PHOTO с разрешением 600 dpi.

электрохимический йодсодержащий инфекционный кролик

3. Результаты исследований

При изучении распространенности инфекционных болезей у кроликов (n=5) были выделены культуры Staphylococcus aureus, Staph. еpidermidis, E.coli в смывах носового зеркала, анальных отверствий. После нанесения взвеси E.coli в дозе 1,0 см3 с концентрацией 2-3млн. микробных клеток на тест объекты (деревяные квадратные дощечки размером 10,0 х10,0 см) и 2 часовой выдержки, а также наносения нативного электрохимического раствора и разведенных 1:50, 1:70, 1:80, 1:99 растворов йодсодержащего препарата йодпротектин на высохшие дощечки с культурой эшерихий в дозах 10.0 мл. с использованием распылителя Росинка, изучали антибактериальные свойства ЭХАР и Йодпротектина. При изучении ультратонкой картины действия на микроорганизмы E. coli при контакте с электрохимическим раствором ЭХАР АКВАЭХА (рН 6,0, сод. акт. Cl2 500 мг/л, ОВП -700 мВ) и йодпротектином (при разведении1:50, 1:70, 1:80, 1:99) при экспозиции 5 и 20 мин. в сравнении с интактными бульонными культурами и культурами при действии на них свежеприготовленного 3% раствора карболовой кислоты позволили заключить, что уже соответственно через 5 и 10 мин. происходит денатурация цитоплазмы E. coli при контакте культур с ЭХАР и йодпротектином, а также в контрольных исследованиях (через 3 мин) при воздействии на них 3% раствора карболовой кислоты. При экспозиции 20 мин. с ЭХАР и йодсодержащим препаратом (1:50 и 1:99) происходит усиление изменения цитоплазмы, конденсирование внутрицитоплазматических компонентов, увеличение периплазматического пространства, разрыв и лизис клеток, что представлено на рис. 1-3.

Рис. 1. Контроль - суточная бульонная культура E. сoli

Рис. 2. Действие йодпротектина в разведениях (1:50 и 1:99) на E. сoli через 5 мин.

Рис. 3. Действие ЭХАР АКВАЭХА (рН 6,0, сод. акт. Cl2 500 мг/л, ОВП -700 мВ) E. сoli через 5 мин.

Были отработаны методические подходы по профилактическим обработкам кроликов ежедневно в течение 4-12 дней, а лечебные мероприятия - ежедневно, в течение 8-15 дней в терапевтических дозах до полного выздоровления. Для орошения носовых перегородок, наружных половых органов, долей молочной железы, кожи и шерстного покрова использованы были йодсодержащий препарат в разведении 1:50, 1:70, 1:80, 1:99 с профилактической и 1:20, 1:10, 1:5 и нативную препаративную форму с лечебной целью. В опыте использовано для определения профилактической эффективности от 50 до 100, с лечебной целью от 30 до 80 кроликов [4]

Таблица 1. Эффективность лечения кроликов больных инфекционными заболеваниями с помощью йодсодержащих и электрохимических растворов

№ п/п	Инвентарный №	Поражения носоглотки	Изолировано возбудители	Схема лечения	Результаты лечения (% выздоровевших)	Выявленные микроорганизмы
		Фибринозные	Гнойно-фибринозные
1	01 - 24	+	+	S. aureus, S.еpidermidis, E.coli	A	99	-
2	25 -47	+	+	S. aureus, S.еpidermidis, E.coli	B	82	-
3	47 - 60	+	+	S. aureus, S.еpidermidis, E.coli	C	74	S.еpidermidis
4	60 - 91	+	+	S. aureus, S.еpidermidis, E.coli	D	69	S.еpidermidis

*А-разведение Йодпротектина 1:50,B- 1:70, C- 1:80,D- 1:99

Таблица 2. Эффективность лечения животных с поражениями слизистых оболочек носа, ротовой полости йодсодержащими препаратами и электрохимическими растворами

№ п/п	Инвентарный №	Клинические изменения в ротовой полости	Изолированые возбудители	Нативный раствор	Результаты лечения(% выздоровевших)	Выявленные микроорганизмы после лечения
		Пустулезная сыпь	Геморрагические поражения
1	92-104	+	+	S. aureus, S.еpidermidis, E.coli	Электрохимический	83	-

Изучение гематологических, биохимических и иммунологических показателей.

При первом исследовании до применения препаратов, равно как и при последующих, концентрация общего белка и его фракций, за исключением г-глобулинов, в сыворотке крови контрольной и подопытной групп оставалась в пределах физиологической нормы (таб. 1). Уровень ?-глобулинов был понижен в опытной группе на 41,2% и в контрольной на 45,8%.

Таблица 3. Содержание общего белка и его фракций у контрольной и подопытной групп при применении Йодпротектина

Показатели	Начало опыта	Средина опыта	Конец опыта
Общий белок г/л	77,9+1,4	82,7+0,4	80,21,5
	78,0+0,8	77,9+0,8	76,6+2,7
Альбумин, г/л	33,44+0,9	32,6+0,4	32,9+1,3
	34,6+0,6	35,6+0,6	36,2+0,8
б-глобулин, г/л	15,2+0,9	15,8+0,2	15,1+0,74
	16,6+0,5	17,6+0,8	16,2+0,3
в-глобулин, г/л	14,4+0,4	15,8+0,2*	15,2+0,3
	13,0+0,6	13,1+0,6	13,2+2,3
г-глобулин, г/л	14,1+1,2	18,6+1,2*	18,8+1,0*
	13,0+0,6	11,2+0,7	10,7+0,68

Примечание: * - разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р?0,05

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

Концентрация иммуноглобулинов класса M была понижена на 8,0% у опытной группы и на 16,0% у контрольной, а также наметилась тенденция к снижению IgG относительно нижней границы физиологической нормы (таб. 2). Снижение активности лизоцима составило 27,0% и 29,0% соответственно.

Таблица 4. Показатели резистентности контрольной и подопытной групп при применении препарата Йодпротектин

Показатели	Начало опыта	Средина опыта	Конец опыта
Иммуноглобулин G, мг/мл	12,4+0,6	14,6+0,6	14,7+0,76
	12,9+0,5	12,5+0,5	11,3+1,4
Иммуноглобулин M, мг/мл	2,3±0,2	2,6+0,2	2,7+0,04
	2,1+0,1	2,16+0,14	2,0+0,16
ЦИК, мг/мл	0,16+0,008	0,17+0,008	0,17+0,006*
	0,17+0,006	0,16+0,003	0,15+0,004
Серомукоиды, мг/мл	0,17+0,01	0,14+0,008	0,14+0,003*
	0,17±0,01	0,16±0,004	0,18+0,006
Лизоцим, мкг/мл	43,8+2,0	48,0+1,4	53,2+1,4*
	42,6+2,2	45,0+4,3	45,0+2,0
	30,6+1,2	32,2+1,1	28,9+0,9
Кислотная емкость, мг%	376+12,0	408+4,0*,**	428±12,0*
	352+8,0	348+12,0	350±12,0
Активность фагоцитоза	ФИ, %	52,2±1,6	54,8±1,2	60,2±2,8*,
		51,4±2,0	50,0±2,0	47,6±2,60
	ФЧ, ед.	3,9±0,14	4,2±0,12*	4,5±0,12*
		3,68±0,16	3,6±0,12	3,5±0,1
	КЗФ. ед	2,5±0,16	2,86±0,14	3,20±0,14
		2,4±0,08	2,68±0,14	2,70±0,12

Примечание: * - разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р?0,05

** - - разница статистически достоверна межу показателями подопытной групы в данный и предыдущий период исследования.

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

О нарушении кислотно-основного гомеостаза у животных свидетельствует снижение кислотной емкости сыворотки крови на 10,5% в опытной и 19,0% в контрольной группе относительно нижней границы нормы. Показатель фагоцитарной активности - фагоцитарный индекс, который указывает на долю нейтрофилов, захвативших микроорганизмы, были приближены к нижней границе физиологической нормы. В то же время фагоцитарное число - среднее число микроорганизмов, поглощенных одним нейтрофилом - было снижено относительно нижней границы нормы в обеих группах. Концентрация ЦИК оставалась в пределах физиологической нормы на протяжении всего опыта.

Полученные данные (таб. 3) свидетельствуют о определенном напряжении в системе ПОЛ-АОЗ. Так, уровень конечного продукта ПОЛ - МДА превышает физиологически нормальный уровень на 30,7% у животных опытной группы и на 17,6% - у контрольной. В то же время, несмотря на соответствие концентрации витамина Е и активности каталазы физиологической норме, у коров обеих групп снижена общая антиокислительная активность (АОА) липидов сыворотки крови на 12,0% и 14,2% соответственно.

Таблица 5. Биохимические показатели контрольной и подопытной групп при применении электрохимического раствора

Показатели	Начало опыта	Средина опыта	Конец опыта
Витамин Е, мкг/мл	9,1+0,7	10,7+1,2	12,0±0,6*
	9,8+0,5	8,9+0,84	9,3+0,7
Оксид азота, мкмоль/л	9,4+0,5	11,6+0,4*	12,4+0,48*
	9,4+0,4	8,8+0,5	8,9+0,7
Каталаза, нмоль н2о2 секхмг белка	30,9+1,0	35,4+0,6*	37,0+1,6*
	31,1+0,6	32,5+0,8	29,6+0,5
ДК, мкмоль/л	21,2+0,5	19,6+0,4	18,5+0,4*
	19,6+0,9	21,2+0,5	21,7+0,7
МДА, ?/Д	2,0+0,04	1,8+0,06*	1,6+0,06
	1,8+0,06	2,0+0,04	1,9+0,1
АОА, % ингибиции	31,6+1,3	36,6+1,2	37,3+1,46*
	30,6+1,2	32,2+1,1	28,9+0,9

Примечание: * - разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р?0,05

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

При исследовании гематологических показателей (таб. 4) в обеих группах был установлен сдвиг лейкоцитарной формулы влево - количество палочкоядерных нейтрофилов было выше верхней границы нормы в среднем около на 126% (в 2,26 раза), а уровень сегментоядерных нейтрофилов был снижен на 22,0% относительно нижней границы нормы. Процент моноцитов у животных опытной группы был повышен на 31,4%, а контрольной - на 37,1% относительно верхней границы физиологической нормы.

Таблица 6. Гематологические показатели контрольной и подопытной групп при применении электрохимического раствора

Показатели	Начало опыта	Средина опыта	Конец опыта
Лейкоциты, Т/л	8,7±0,2	7,8±0,3*	6,8±0,3*
	9,4±0,5±	9,7±0,6	9,4±0,4
Лейкоцитарная формула,%	П	13,2±0,8	9,4±0,6*,**	7,4±0,6*
		13,6±0,6	13,4±0,6	13,2±1,0
	С	27,6±1,6	34,6±3,0*	38,6±1,0*
		27,0±2,2	24,6±1,2	22,6±1,8
	Э	6,0±0,8	5,4±0,8	5,2±0,7
		6,6±0,8	7,2±0,4	7,0±0,6
	Б	0
		0
	М	9,2±0,8	7,2±0,4*	6,4±0,6*
		9,6±0,6	9,8±0,8	10,4±0,8
	Л	42,2±3,48	45,2±4,0	43,2±1,0
		43,2±3,0	43,0±2,6	42,8±1,0

Примечание: * - разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р?0,05

** - - разница статистически достоверна межу показателями подопытной групы в данный и предыдущий период исследования.

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

При взятии крови после начала лечения (средина опытна) у животных опытной группы установлено статистически достоверное повышение уровня ?-глобулинов на 66,6% относительно показателей контрольной группы и на 31,9% по сравнению с предыдущими показателями в этой группе, концентрация иммуноглобулинов у кроликов этой группы также возрастала: Ig G на 13,0% и 20,3% - IgM на 17,7% соответственно.

О снижении иммуносупрессии в организме кроликов, подвергавшихся лечению, свидетельствует снижение уровня серомукоидов на 17,6% по сравнению с предыдущими показателями, и на 12,5% относительно показателей контрольной группы в этот период исследовании.

Об определенной активизации ферментативного звена антиоксидантной защиты при лечении свидетельствует незначительное повышение активности каталазы - на 14,6% и АОА - на 15,8% относительно предыдущих показателей и на 8,9% и 13,7% по сравнению с контрольными значениями в этот период опыта. По-видимому, это обусловило тенденцию к снижению концентрации продуктов ПОЛ - ДК и МДА (на 7,5% и 10,0% относительно контроля). Лечение способствовало нормализации кислотно-основного равновесия в организме кроликов - кислотная емкость повысилась на 8,5% и достигла физиологической нормы.

Применение электрохимического раствора также способствовало изменению лейкоцитарной формулы - у коров снизился процент палочкоядерных нейтрофилов (на 29,8%) и моноцитов (на 21,7%) (р?0,05), также на 10 % снизилось количество лейкоцитов в крови.

При лечении повысилось продуцирование оксида азота, на что указывает увеличение его концентрации на 23,4% относительно предыдущих показателей и на 31,8% по сравнению с контролем. Применение препарата положительно повлияло на активность фагоцитоза, о чем свидетельствует тенденция к повышению фагоцитарной активности нейтрофилов, и статистически достоверное повышение фагоцитарного индекса на 16,6%.

У животных этой группы повысилась также активность лизоцима - на 11, 6% относительно предыдущих показателей и на 6,6 % относительно контроля на фоне аналогичного повышения этого показателя у коров контрольной группы по сравнению с первым взятием крови.

После заключительного отбора крови зафиксирована некоторая стабилизация ряда иммунобиохимических показателей крови у кроликов опытной группы на фоне их ухудшения у животных контрольной группы. В частности, у кроликов контрольной группы продолжалось снижение уровня ?-глобулинов, IgG, IgМ, и повышение серомукоидов, при этом разница между показателями групп составляла 66,1%, 16,8% 20,4% (р?0,05) и 12,5% соответственно.

Лечение способствовало снижению расходования витамина Е - его уровень у кроликов опытной группы превысил средний показатель контрольной группы на 29,0% (р?0,05). У животных опытной группы была выше контроля активность каталазы на 25,0%, а также АОА липидов сыворотки - на 29,1%.

В этот период опыта продолжилась тенденция к снижению интенсивности ПОЛ, зафиксированная на предыдущем сроке исследования: разница между средними показателями уровня ДК и МДА у коров обеих групп составила 14,7% и 15,8% соответственно.

Усилилось влияние лечения и на состояние кислотно-основного гомеостаза животных, на что указывает повышение кислотной емкости у животных опытной группы на 22,3% по сравнению с контролем.

В этот период опыта у животных опытной группы продолжалось снижение количества лейкоцитов в крови (относительно показателей группы контроля на 27,6%), доли палочкоядерных нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов (их процент ниже контроля на 51,5% 25,7% и 38,5 соответственно). При этом в крови возрастало количество сегментоядерных нейтрофилов - уровень был выше у животных опытной группы на 70,7% по сравнению с контролем.

Также повышалась интенсивность фагоцитарной реакции нейтрофилов, о чем свидетельствует повышение ФА (на 9,8% по сравнению показателем предыдущего исследования и на 26,4% относительно контроля), ФИ (на 6,1% и 28,1% соответственно) и КЗФ (на 11,9 и 18,5% соответственно). Также со времени предыдущего исследования у кроликов опытной группы незначительно усилилось продуцирование оксида азота - разница между предыдущими показателями по группе составила 6,8%, по сравнению с контрольными в этот период - 39,3% (р?0,05).

Эти данные согласуются с данными по увеличению активности лизоцима, продуцентом которого являются моноциты, обладающие фагоцитарной активностью. Активность лизоцима у животных опытной группы по сравнению с предыдущим исследованием крови повысилась на 10,8%, а относительно контрольных показателей зафиксировано статистически достоверное повышение - разница составила 66,7%.

Таким образом необходимо отметить, что исходя из полученных данных можно констатировать снижение защитных сил организма животных вследствие действия сезонных стресс-факторов, развития острых вирусных инфекций что привело к увеличению заболеваемости бактериальными инфекциями. Применение разработанного препарата Йодпротектин и электрохимического раствора, прямо или косвенно, способствовало улучшению иммунобиологического статуса подопытных животных.

Заключение

Среди поголовья условно здоровых кроликов чаще всего выделяются культуры Staphylococcus aureus, Staph. еpidermidis, E.coli в смывах из носового зеркала и анальных отверствий. Электрохимические нативные растворы и йодпротектин (в разведении 1:50, 1:70, 1:80, 1:99) после нанесения их на E.coli (с концентрацией 2-3млн в 1,0 см3) при 2 часовой выдержке в полной мере обеззараживали микроорганизмы, что подтверждено денатурация цитоплазмы E. coli при контакте культур с ЭХАР и йодпротектином уже через 5 и 10 мин соответственно. А уже через 20 мин. происходит усиление изменения цитоплазмы, конденсирование внутрицитоплазматических компонентов, увеличение периплазматического пространства, разрыв и лизис клеток.

Сравнительное изучение лечебного и профилактического воздействия йодсодержащих и электрохимических растворов показало наибольшую эффективность йодпротектина в разведении 1:50, позволившего выздороветь 99% кроликов имевших S. aureus, S.еpidermidis, E.coli - инфекций. Незначительными терапевтическими свойствами(69%) обладал Йодпротектин в разведении 1:99. Нативные электрохимические растворы обеспечивали выздоровление 83% инфицированных животных.

С профилактической целью необходимо проводить обработки нативными электрохимическими растворами в течении 4-5 дней, а с лечебной 10-12. Йодсодержащие разведения Йодпротектина (1:50) необходимо применять с лечебной целью 8-15 дней, а с профилактической 4-8.

Список использованных источников

1. Бреславец В.М., Коваленко А.М., Хохлов А.В., Белогурова Н.А. Применение препарата «Йодпротектин» для лечения хронических эндометритов различной этиологии у коров // Материалы 13 международной научно-производственной конференции (19-22 мая 2009 года), Белгород.- Изд. БелГСХА, 2009, стр. 52-53.

2. Коваленко А.М., Евглевский Д.А., Евглевский Ан.А. Новые подходы к лечению репродуктивних органов и молочной железы // Вестник КГСХА., Курск., №5, 2010, стр. 75-76.

3. Хачко В.И., Бреславец Е.М., Коваленко А.М. Решение проблем безплодия крупного рогатого скота, вызванных инфекционными заболеваниями, поражающими репродуктивне органы и молочную железу // Бюллетень научных работ., Выпуск N 19 Белгород.- Изд. БелГСХА, 2009, стр. 17-19.

4. Положительное решение Института промышленной собственности Российской Федерации на выдачу патента „Дезинфицирующие средства йодпротектин” авторы Коваленко А.М., Дорофеев А.Ф. от 29.05. 2011., № 2012121677 (032839).

5. Инструкция по применению средства дезинфицирующего «АКВА-ЭХА», получаемого на установке для электрохимического синтеза активированных дезинфицирующих растворов «АКВА-ЭХА», производства ООО НПП «ИЗУМРУД» (Россия) для целей дезинфекции на предприятиях молочной промышленности.-М.,2008.- 12с.

6. Методические рекомендации по применению электрохимически активированных растворов хлорида натрия с целью дезинфекции животноводческих объектов, РАСХН //Закомырдин А.А., Незлобин В.П., Яблочкин В.Д. и др.-М.,1995.-19с.

7. Методические указания по применению нейтрального анолита АНК, вырабатываемого в установке СТЭЛ-10Н-120-01, для целей дезинфекции, предстерилизационной очистки и стерилизации. Разрешение Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России от 14 февраля 1997г., № МУ-17-1

8. Наставление по применению электрохимически активированных растворов натрия хлорида (католита и анолита), получаемых на установках типа СТЭЛ, для мойки и дезинфекции в ветеринарии и животноводстве.-Утв. Деп. ветеринарии МСХиП РФ.-1999.-2с.

9. Применение электроактивированной воды в птицеводстве: Методические рекомендации / В.И.Филоненко, В.Г.Шоль, В.И.Фисинин и др.-Сергиев Посад,1995.-46 с.

10. Применение электроактивированной воды в технологических процессах птицеводства.- Сергиев Посад, 2007.-54с. есть «ИЗУМРУД»)

Размещено на Allbest.ru

...