Протеїновий обмін та ензимна активність у високопродуктивних молочних корів за метаболічних порушень

Виявлення кетову у корів, який, залежно від характеру й тяжкості протікання, є причиною виникнення вторинної остедистрофії та стеатозу. Встановлення диспротеїнемії, гіпоальбумінемії та гіперглобулінемії, як результату деструктивних змін у печінці.

Рубрика Сельское, лесное хозяйство и землепользование
Вид статья
Язык украинский
Дата добавления 04.03.2020
Размер файла 26,9 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Львівський національний університет ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Гжицького

Протеїновий обмін та ензимна активність у високопродуктивних молочних корів за метаболічних порушень

І.М. Петрух

Домінуюче місце у структурі захворювань молочних корів займають метаболічні хвороби [1, 2]. Вони характеризуються складними етіологією і патогенезом. Найчастіше серед метаболічних хвороб у жуйних тварин виявляють кетоз, остеодистрофію, гепатодистрофію, пасовищну тетанію, мікроелементози і гіповітамінози.

Кетоз молочних корів - захворювання, що характеризується порушенням вуглеводно- ліпідного, протеїнового, енергетичного та мінерального обмінів і супроводжується накопиченням в організмі кетонових тіл (Р-оксимасляної, ацетооцтової кислоти та ацетону), дистрофічними змінами в печінці, серці, нирках, яєчниках, щитоподібній та прищитоподібній залозах, гіпофізі [3, 4]. Слід зазначити, що тварини з вищою молочною продуктивністю хворіють частіше. Це пояснюють тим, що зростання рівня виробництва молока пов'язано з підвищенням мобілізації жирів, що призведуть до підвищення рівня концентрації ацетону, Р- оксимасляної та ацетооцтової кислот (кетонів) у крові. Існують дані [4], що у кожної четвертої корови, яка перехворіла кетозом, розвивається важка форма вторинної остеодистрофії, яка залежить насамперед від характеру й тяжкості основного (первинного) захворювання. Одночасно порушення травлення, накопичення токсичних продуктів (Р-оксимасляної, ацетооцтової кислоти та ацетону), посилення ліпомобілізації за затяжного кетозу є причиною розвитку деструктивних змін у печінці (гепатоз) [2, 5, 6].

Мета проведених досліджень - вивчити протеїновий обмін та ензимну активність у високопродуктивних корів за кетозу, вторинної остеодистрофії та гепатодистрофії (стеатозу).

Матеріали і методи. Для дослідження були відібрані корови молочного напряму продуктивності з середньорічнім надоєм 5500 кг на рік і більше. За проведеним клінічними дослідженнями корів та зібраним анамнезом сформовано групи (контрольну та дослідні). Контрольна група сформована з клінічно здорових корів (п=15). У першу дослідну групу входили тварини (п=12) з клінічними ознаками кетозу та позитивним експрес-тестом на кетонові тіла у сечі. Клінічні симптоми у цієї групи корів залежали від рівня кетонових тіл в організмі. У більшості тварин встановлено пригнічення загального стану, кволість, неохочі рухи, залежування. У окремих тварин реєструвалась тахікардія, тахіпное, погіршення апетиту, зниження частоти і сили рубцевих скорочень. Типовою ознакою кетозу був запах ацетону з видихуваним повітрям.

У другу дослідну групу були відібрані корови (п=8) з ознаками характерними для вторинної остеодистрофії. У тварин за клінічного огляду встановлено демінералізацією хвостових хребців, неправильну постанову кінцівок та кульгавість при русі. Корови були флегматичними, мало рухалися у деяких спостерігалася лизуха. При цьому, на 5 - 7 тиждень лактації кетонолактію чи кетонурію у цієї групи корів не спостерігали.

У третю групу (п=7) входили корови з ознаками стеатозу (жирова гепатодистрофія). Пальпацією хворих корів встановлена болючість у ділянці печінки, а перкусією печінкового поля - збільшення ділянки притуплення. Клінічно встановлено, що корови пригнічені, мало рухливі, апетит знижений. У частини корів цієї групи (п=3) відмічена жовтяничність склери, видимих слизових оболонок та непігментованих ділянок шкіри. За проведеними експрес- методом дослідженнями кетонолактію чи кетонурію не встановлено.

Кров для досліджень відбирали з яремної вени у стерильні пробірки до ранішньої годівлі корів. Для отримання сироватки крові пробірки з кров'ю залишали на 30 хв за кімнатної температури для утворення згустку. Утворений згусток відділяли від стінок тонкою скляною паличкою та центрифугували (15 хв за 1 тис. об/хв). Отриману сироватку крові зберігали у холодильнику за 4 - 6 °С. У сироватці крові визначали вміст загального протеїну за Лоурі, протеїнових фракцій - за допомогою електрофорезу у поліакриламідному гелі, активність АлАТ та АсАТ - методом Райтмана-Френкеля, вміст сечовини - з діацилмонооксимом. Активність ГГТ та вміст креатиніну за допомогою біохімічного аналізатора Нита^ег 2000.

У пробах сечі визначали концентрацію кетонових тіл за допомогою індикаторних смужок (Ketophan, Pliva).

Робота проводилась з урахуванням “Загальних етичних принципів експериментів на тваринах” (Україна, 2001), згідно з положеннями “Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментальних та інших цілей” (Страсбург, 1985).

Результати й обговорення. У сироватці крові всіх дослідних груп корів встановлено вірогідне збільшення концентрації загального протеїну. Так, у 72 % корів, хворих на кетоз, величина показника була вища за результати у здорових на 12,3 % (р<0,01), а за остеодистрофії та стеатозі - на 11,2 % та 8 % (р<0,05), відповідно (табл. 1).

Таблиця 1 Вміст загального протеїну та його фракцій у сироватці крові клінічно здорових і хворих корів, г/л; M±m

Показники

Клінічно здорові (п=15)

Кетоз

(п=12)

Остеодистрофія

(п=8)

Стеатоз

(п=7)

Загальний

протеїн

М±т

79,6±2,46

89,3±0,44

88,5±1,10

86,6±1,04

< норми, % тварин

11,0

5,5

24,5

15,3

> норми, % тварин

1,7

72,2

64,7

58,1

р<

0,01

0,05

0,05

Альбуміни

М±т

32,6±0,57

25,5±1,07

27,7±0,89

28,8±1,05

< норми, % тварин

21,6

76,1

54,9

75,2

> норми, % тварин

1,0

0

0

0

р<

0,001

0,01

0,05

Глобуліни

М±т

47,0±0,54

63,8±1,04

60,8±2,50

57,8±0,87

< норми, % тварин

8,1

2

0

1

> норми, % тварин

2,0

54,3

40,4

47,2

р<

0,001

0,01

0,001

альбуміни/глобуліни

0,69±0,04

0,40±0,02

0,46±0,12

0,50±0,02

При дослідженні фракцій сироваткового протеїну встановлено, що рівень глобулінів у % корів, хворих на кетоз, перевищував показник у здорових на 34 % (р<0,001, табл. 1). При остеодистрофії та гепатодистрофії різниця між хворими і здоровими коровами становила % (р<0,01) та 22 % (р<0,001), відповідно. Отже, зростання концентрації загального протеїну у сироватці крові хворих корів відбулося за рахунок збільшення глобулінової фракції. Одночасно, гіперглобулінемія у хворих корів супроводжувалася гіпоальбумінемією. Так, у 76,1 % крові корів, хворих на кетоз, вміст альбуміну в складі фракцій протеїнів знижувалася, у порівнянні зі здоровими коровами, на 23,2 % (р<0,001), а за стеатозу та остеодистрофії - на 11,6 % (р<0,05) та 15 % (р<0,01), відповідно. Розвиток гіпоальбумінемії у хворих корів вказує на порушення функціонального стану печінки, зокрема її здатності до синтезу протеїнів альбумінового спектру.

Таблиця 2 Вміст сечовини та креатиніну у сироватці крові здорових та хворих корів, М±т

Показники

Клінічно здорові (п=15)

Кетоз

(п=12)

Остеодистрофія

(п=8)

Стеатоз

(п=7)

Сечовина,

ммоль/л

М±т

4,25±0,54

6,5±0,31

5,41±0,24

5,84±0,14

< норми, % тварин

2

0

0

0

> нормы, % тварин

0

87,2

72,2

88,4

р<

0,01

0,05

0,05

Креатинін,

мкмоль/л

М±т

103,6±9,56

142,8±7,91

129,2±3,36

121,0±6,56

< норми, % тварин

0

0

0

0

> нормы, % тварин

1

90

72,0

87,3

р<

0,01

0,01

0,05

Низький рівень альбумінів та високий глобулінів спричиняє зниження альбуміно- глобулінового коефіцієнта із 0,69±0,04 у здорових корів до 0,40 - 0,50 у хворих, що підтверджує розвиток патологічних змін у печінці.

Крім визначення вмісту загального протеїну та його фракцій критеріями метаболізму протеїнів в організмі є показники концентрації сечовини та креатиніну. остедистрофія стеатоз диспротеїнемія печінка

Встановлено, що вміст сечовини у сироватці крові здорових корів знаходився в межах фізіологічної норми (3,5 - 6,0 ммоль/л), а у групах хворих корів зміни величин цього показника були неоднозначними. Так, у корів, хворих на кетоз, величина показника зростала і була вищою на 52,9 % (р<0,01), ніж у здорових (табл. 2).

Концентрація сечовини у крові корів з ознаками вторинної остеодистрофії та стеатозу була вищою ніж у здорових корів на 27,2 та 37,4 % (р<0,05), відповідно.

Сечовина є основним кінцевим метаболітом в обміні протеїнів. Синтез її відбувається в печінці, звідки вона транспортується в нирки та виводиться разом з сечею. Визначення сечовини використовують головним чином для оцінки клубочкового відділу нефрона, функції сечоутворення і виділення нирок. Підвищений вміст сечовини у сироватці крові хворих корів (88,4 - 72,2 %), вказує на порушення функції нирок, а саме - зниження здатності виводити сечовину з організму шляхом клубочкової фільтрації. Разом з тим гіпоальбунемія на фоні гіперпротеїномії та високого вмісту фракції глобулінів свідчить про печінкову недостатність у хворих корів, спричинену аміаковою інтоксикацією [6, 7]. Очевидно за тривалої аміакової інтоксикації відбувається значне ураження гепатоцитів, порушується функціональна здатність печінки, зокрема її альбумінсинтезуюча та сечовиноутворювальна функції, що призводить до зниження вмісту сечовини та альбуміну у сироватці крові.

Більш специфічним і чутливим показником функції нирок є креатинін. Встановлено, що у корів, хворих на кетоз, міст креатиніну зростав на 37,8 % (р<0,01), порівняно до величини показника у здорових тварин. Концентрація креатиніну у крові корів, хворих на остеодистрофію та при стеатозі перевищувала величини показника значення у здорових на

24,7 % (р<0,01) та 16,8 %, відповідно. Креатинін виводиться нирками, виділяється тільки клубочками і не реабсорбується в ниркових канальцях. Зростання вмісту креатиніну та сечовини у сироватці крові хворих корів, очевидно вказує, що захворювання ускладнюється нирковою недостатністю.

Для діагностики функціональної здатності печінки проведено дослідження активності індикаторних для печінки ензимів і встановлено суттєву різницю між величинами показників у здорових та хворих корів. Так, за дослідження активності аланінамінотрансфераз та аспартатамінотрансфераз у крові корів, хворих на кетоз, встановлено вірогідне (р<0,001) їх зростання (на 28,5 % та 151,6 %, відповідно), порівняно зі здоровими коровами (табл. 3). При цьому, верхню межу фізіологічних коливань активність АлАТ перевищувала у 29 % досліджених хворих корів, а АсАТ - у 95,4 %.

Таблиця 3 Активність ензимів у сироватці крові корів, M±m

Показники, нкат/л

Клінічно здорові (п=15)

Кетоз

(п=12)

Остеодистрофія

(п=8)

Стеатоз

(п=7)

АлАТ

М±т

351,6±10,61

451,9±15,35

398±12,7

406,7±10,8

р<

0,001

0,05

0,001

АсАТ

М±т

608,5±48,94

1530,7±85,65

1304±76,8

1626,4±92,6

р<

0,001

0,01

0,001

ГГТ

М±т

214,1±14,68

453,2±36,87

309,8±31,72

504,3±42,12

р<

0,001

0,05

0,001

Одночасно, встановлено зростання у 3-4 рази вище фізіологічних величин (р<0,001) активності АсАТ у 68 % корів з ознаками остеодистрофії та у 94,8 % при стеатозі. При цьому зростання активності АлАТ було не таким суттєвим.

Крім АлАТ та АсАТ встановлено, що активність у-глутамілтрансферази (ГГТ) у сироватці крові більше ніж 87 % корів, хворих на кетоз; у 72,5 % корів з ознаками вторинної остеодистофії та у всіх корів за стеатозу, також вірогідно (р<0,05 - 0,001) вища ніж у здорових (табл. 3). Максимальне зростання (на 135,5 % вище ніж у клінічно здорових) активності цього ензиму встановлено у крові корів при стеатозі. Оскільки зростання активності ГГТ відбувається вже за слабкого ступеня жирової дистрофії печінки [6, 7], то визначення її активності у корів з метаболічними порушеннями дає підставу віднести ензим до найчутливішого тесту, за яким можна діагностувати і прогнозувати початок ураження біліарної системи.

Висновки

1. Встановлена диспротеїнемія, гіпоальбумінемія та гіперглобулінемія у крові корів за метаболічних порушень свідчить про деструктивні зміни у печінці.

2. У сироватці крові значної частини хворих корів реєструється вірогідне зростання активності аланінової, аспарагінової трансфераз, у-глутамілтранспептидази, що свідчить про розвиток цитолітичного і холестатичного синдромів.

3. Високий вміст креатиніну, сечовини та зростання активності ГГТ вказує, що кетоз, ускладнений вторинною остеодистрофією та стеатозом протікає з нирковою недостатністю.

4. На відміну від аліментарної за вторинної остеодистрофії, поряд з синдромом ураження кісток, відмічено ураження гепатобіліарної системи (гіперпротеїнемія, гіпоальбумінемія, висока активність АсАТ та зростання активності ГГТ).

Перспективи досліджень. Встановлені особливості протеїнового обміну та ензимної активності у крові високопродуктивних корів за кетозу, вторинної остеодистрофії та гепатодистрофії (стеатозу) будуть теоретичним підґрунтям для розробки нових інформативних діагностичних тестів та більш глибокого зрозуміння патогенезу за поліморбідного перебігу.

Література

1. Безух В. М. Обмін речовин у високопродуктивних корів та його аналіз [Текст] / В. М. Безух, О. В. Чуб, Надточій В. П. // Науковий вісник ветеринарної медицини: зб. наук. праць. - Біла Церква, 2012. Вип. 9 (92). - 203 с.

2. Внутрішні хвороби тварин / Левченко В. І., Кондрахін І. П., Влізло В. В. та ін. ; за ред. В. І. Левченка. - Біла Церква , 2001. - Ч.2. - 544 с.

3. Влізло В. В. Патогенетичні механізми виникнення кетозу у лактуючих корів / В. Влізло, Г. Готтер, В. Баумгартнер // Вет. медицина. Міжвід. темат. наук. збірник. - Харків. - 1997. - Вип. 71. - С. 56-60.

4. Левченко В. І. Кетоз високопродуктивних корів: етіологія, діагностика і лікування / В. І. Левченко // Здоров'я тварин і ліки. - 2009. - №2. - С.14-15.

5. Влізло В. В. Стан кислотно-основного балансу в корів, хворих на кетоз / вісник БДАУ. - 2004. - Вип. 25,Ч 2. - С. 24-27.

6. Влізло В. В. Жировий гепатоз у корів : автореф. дис. на здобуття наук. ступеня д-ра. вет. наук : 16.00.01 / В. В. Влізло. - Біла Церква, 1998. - 34 с

7. Сахнюк В. В. Параметри оцінки клініко-функціонального стану печінки і нирок у клінічно здорових високопродуктивних корів [Текст] / В. В. Сахнюк // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. - Вип. 51. - Біла Церква, 2008. - С. 78-852.

Анотація

У статті наведені результати досліджень показників протеїнового обміну та ензимної активності у крові високопродуктивних молочних корів за домінуючих метаболічних хвороб. Встановлено, що найчастіше серед метаболічних хвороб у корів виявляють кетоз, який, залежно від характеру й тяжкості протікання, є причиною виникнення вторинної остедистрофії та стеатозу. У корів за кетозу, вторинної остеодистрофіїї та стеатозу, встановлена диспротеїнемія, гіпоальбумінемія та гіперглобулінемія, як результат деструктивних змін у печінці.

У крові корів, хворих на кетоз, встановлено зростання (р<0,001) активності АлАТ та АсАТ (на 28,5 % та 151,6 %, відповідно), порівняно зі здоровими коровами. При цьому, верхню межу фізіологічних коливань активність АлАТ перевищувала у 29 % досліджених хворих корів, а АсАТ - у 95,4 %. При вторинній остеодистрофії у 68 % та стеатозі у 94,8 % корів активність АсАТ у крові була у 3-4 рази вище фізіологічних величин (р<0,001).

Крім АлАТта АсАТ встановлено, зростання (р<0,05 - 0,001) активності у-глутамілтрансферази (ГГТ) у сироватці крові більш ніж у 87 % корів, хворих на кетоз та у 72,5 % корів з ознаками вторинної остеодистофії. Вірогідне зростання активності аланінової, аспарагінової трансфераз, у-глутамілтранспептидази (ГГТ) у сироватці крові значної частини хворих корів свідчить про розвиток цитолітичного і холестатичного синдромів. Високий вміст креатиніну, сечовини та зростання активності ГГТ вказує, що метаболічні хвороби (кетоз, ускладнений вторинною остеодистрофією та стеатозом) протікають з нирковою недостатністю. На відміну від аліментарної остеодистрофії, у корів за вторинної остеодистрофії відмічена гіперпротеїнемія, гіпоальбумінемія, висока активність АсАТ та зростання активності ГГТ, що свідчить про ураження гепатобіліарної системи.

Ключові слова: КОРОВИ, МЕТАБОЛІЧНІ ПОРУШЕННЯ, КЕТОЗ, ВТОРИННА ОСТЕОДИСТРОФІЯ, СТЕАТОЗ, ПРОТЕЇН, СЕЧОВИНА, КРЕАТИНІН.

В статье изложены данные результатов исследования показателей протеинового обмена и ферментативной активности у высокопродуктивных молочных коров при доминирующих метаболических болезнях. Указано, что чаще всего среди метаболических болезней у жвачных животных обнаруживают кетоз, который, в зависимости от характера и тяжести протекания, является причиной возникновения вторичной остедистрофии и стеатоза. У коров за кетоза, вторичной остеодистрофиии и стеатоза, установлена диспротеинемия, гипоальбуминемия и гиперглобулинемия, как результат деструктивных изменений в печени. В крови коров, больных кетоз, установлен рост (р <0,001) активности АлАТ и АсАТ (на 28,5% и 151,6 %, соответственно) по сравнению со здоровыми коровами. При этом, верхний предел физиологических колебаний активность АЛТ превышала в 29% исследованных больных коров, а АсАТ - в 95,4%. При вторичной остеодистрофии у 68%, а стеатозе у 94,8% коров активность АсАТ в крови была в 3-4 раза выше физиологических величин (р <0,001). Кроме АлАТ и АсАТ установлено, рост (р <0,05 - 0,001) активности у-глутамилтрансферазы (ГГТ) в сыворотке крови более чем 87% коров, больных кетозом и в 72,5% коров с признаками вторичной остеодистофии. Вероятный рост активности аланиновой, аспарагиновой трансфераз, у-глутамилтранспептидазы (ГГТ) в сыворотке крови значительной части больных коров свидетельствует о развитии цитолитического и холестатического синдромов. Высокое содержание креатинина, мочевины и рост активности ГГТ указывает, что метаболические болезни (кетоз, осложненный вторичной остеодистрофией и стеатозом) протекают с почечной недостаточностью. В отличие от алиментарной остеодистрофии, у коров при вторичной остеодистрофии отмечена гиперпротеинемия, гипоальбуминемия, высокая активность АсАТ и рост активности ГГТ, что свидетельствует о поражении гепатобилиарной системы.

Ключевые слова: КОРОВЫ, НАРУШЕНИЕ МЕТАБОЛИЗМА, КЕТОЗ, ВТОРИЧНАЯ ОСТЭОДИСТРОФИЯ, СТЕАТОЗ, ПРОТЕИН, МОЧЕВИНА, КРЕАТИНИН.

The article presents data of the research of protein metabolism and enzyme activity in high- producing dairy cows suffering from metabolic disorders. It is indicated that most often among metabolic diseases in ruminants are detected ketosis, which, depending on the nature and the leakage severity, is the cause of a secondary osteodystrophy and steatosis. Dysproteinemia, hypoalbuminemia and hyperglobulinemia have been established as a result of destructive changes in the liver of cows with ketosis, secondary osteodystrophy and steatosis. An increase (p <0.001) in the activity of AlT and AST (by 28.5 % and 151.6 %, respectively) was observed in the blood of ketotic cows compared with healthy cows. In this case, the upper limits of physiological fluctuations of ALT activity were exceeded in in 29 % of examined cows, and AST activity - in 95.4 %. The AST activity in blood was 4 times higher than the physiological values (p <0.001) in 68 % cows with secondary osteodystrophy and 94.8 % with steatosis. In addition to ALT and AST, an increase (p <0.05 - 0.001) of y-glutamyltransferase (GGT) activity in serum was found to be higher in more than 87 % ketotic cows and 72.5 % cows with secondary osteodystophy features. The probable increase in the activity of ALT, AST, and GGT in serum of a significant proportion of sick cows indicates the development of cytolysis and cholestasis syndromes. High levels of creatinine, urea, and increased GGT activity indicate that metabolic diseases (ketosis, which is complicated by secondary osteodystrophy and steatosis) occur with renal failure. Hyperproteinemia, hypoalbuminemia, high activity of AST and increased activity of GGT in cows with secondary osteodystrophy indicate the hepatobiliary damage.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.