Выживаемость микобактерий в объектах внешней среды

Размещено на http://www.allbest.ru/

Выживаемость микобактерий в объектах внешней среды

А.Н. Тарасов

БелГСХА им. В.Я. Горина

Среди инфекционных заболеваний туберкулёз занимает особое положение, так как он причиняет значительный экономический ущерб животноводству и представляет постоянную опасность для здоровья людей. В связи с этим мероприятия, направленные на ликвидацию этого заболевания должны носить всесторонний характер. Так, в распространении туберкулёза большую роль играют факторы передачи возбудителя, которыми являются объекты внешней среды (воздух, почва, вода, корма и продукты животноводства), обсеменение которых микобактериями происходит вследствие выделения возбудителя из организма больного животного при физиологических актах (дыхание, молокоотдача, дефекация, мочеиспускание) и патологических процессах (кашель, истечения из носовой и ротовой полости). Попавший во внешнюю среду возбудитель туберкулёза находится в ней до тех пор, пока не будет благоприятных условий для его проникновения в восприимчивый организм. Жизнеспособность же микобактерий в окружающей среде зависит от их устойчивости и условий самой среды (солнечная радиация, температура, влажность, рН среды и др.) [2, 5].

По данным разных авторов, микобактерии туберкулёза обладают высокой устойчивостью к воздействию различных физических и химических факторов вследствие особенностей строения клеточной стенки и высокого содержания в ней липидов, восков (А, Б, Д) [1].

Анализ литературных данных свидетельствует о том, что возбудители туберкулёза, находясь в объектах внешней среды, могут сохранять свою жизнеспособность и патогенность длительное время, но в разных климатических зонах их устойчивость колеблется в широких пределах. Так, в условиях Сибири возбудители туберкулёза бычьего вида сохраняет свою жизнеспособность и патогенность в течение 12 месяцев (на поверхности почвы), 27 месяцев - на глубине 5 см и 36 месяцев - на глубине 10 и 20 см.[4]. В.С. Козлов при изучении выживаемости микобактерий в дерново0подзолистой супесчаной почве средней полосы России установил, что M. tuberculosis сохраняют жизнеспособность до 3 месяцев (Р.О. Драбкина сообщает, что данный возбудитель на поверхности почвы и других объектов сохранял жизнедеятельность не более нескольких дней [2]), M. bovis - до 5 месяцев, а M. avium - до 18 месяцев [3]. Что касается устойчивости возбудителей туберкулёза в объектах внешней среды в зонах Степи, Лесостепи и Полесья Украины, то этот вопрос остаётся не полностью изученным.

В связи с этим, целью наших исследований явилось изучение сроков устойчивости M. avium и атипичных микобактерий в разных климатических зонах Украины. Полученные данные позволят усовершенствовать систему противотуберкулёзных и ветеринарно-санитарных мероприятий по санации.

Материалы и методы. Для проведения исследований были отобраны пробы подстилки, силоса и мочи в ЧСП «Нива» Волчанского района в количестве не менее 0.5 кг. Исследования проводили в двух модификациях: одна половина отобранных проб с целью уничтожения банальной микрофлоры была автоклавирована при режиме 132оС, 2 атмосферы в течение 60 минут. Остальная половина объектов оставалась в нативном виде.

Для контаминации использовали двух-четырёх недельные культуры патогенных микобактерий птичьего вида (шт. №61) и атипичных микобактерий видов: M. intracellularae, M. scrofulaceum, M. Fortuitum, выращенные на картофельной питательной среде Павловского. Названные культуры микобактерий гомогенизировали в стерильном физиологическом растворе из расчета 1 мг бактериальной массы на 1 см3 раствора. Полученной взвесью контаминировали объекты из расчета 1 см3 взвеси на 1 г пробы. После контаминации пробы сохраняли при комнатной температуре, умеренной влажности, на рассеянном солнечном свету. Через 30, 60, 90, 120 дней из заложенных тест-объектов отбирали пробы, которые центрифугировали при режиме 1-1.5 тыс. об. / мин. в течение 20-30 минут. Нативные пробы, которые не подвергали автоклавированию, обрабатывали 10-18% раствором серной кислоты при экспозиции 20-30 минут, а обеззараженные объекты исследовали этими же методами без обработки кислотой и с обработкой 5% раствором серной кислоты с экспозицией 20 минут. Отцентрифугированный осадок после действия серной кислоты дважды отмывали стерильным физиологическим раствором, а полученный ресуспензированный в стерильном физиологическом растворе осадок высевали на поверхность питательной среды для культивирования микобактерий. Пробирки с посевами культивировали в термостате при температуре 37оС. Учёт роста выделенных колоний проводили через каждые 5-7 дней на протяжении трёх месяцев. Из выращенных колоний микроорганизмов готовили мазки, окрашивали их по методу Циля-Нильсена и подвергали световой микроскопии. Эталоном служили референтные культуры микобактерий.

Результаты исследований

туберкулёз микобактерия животное

Сроки выживаемости микобактерий в подстилке, силосе и моче определяли в течение 120 дней.

Исследования показали, что за данный промежуток времени микобактерии не утрачивают жизнеспособности, но изменяют свои свойства. Так, начиная с 60-90-х суток пребывания микобактерий в тест объектах, высеваемость их постепенно уменьшается и к 120-му составляет до 10 колоний, что свидетельствует о снижении жизнеспособности M. avium и атипичных микобактерий в процессе пребывания их в силосе и моче.

Табл. 2 Сравнительная таблица интенсивности роста колоний микобактерий, выделенных из тест-объектов через 30, 60, 90 и 120 дней

«+» - рост на питательной среде до 10 колоний; «++» - от 10 до 50 колоний; «+++» - от 50 до 100 колоний; «#» - сплошной рост колоний микобактерий; «-» - рост на питательной среде не выявлен

Что касается подстилки, автоклавированной перед контаминацией, то интенсивность роста на питательной среде не изменяется, однако сроки появления первых колоний у М. scrofulaceum увеличиваются в два раза, что видно из таблицы.

Выводы

Жизнеспособность М. avium, M. Scrofulaceum, M. Intracellularae и M. fortuitum в подстилке, силосе и моче составляет более 120 дней (срок исследования).

В силосе и моче жизнеспособность микобактерий постепенно уменьшается и изменяются их морфологические и культуральные свойства.

Стерильная подстилка является благоприятной средой для выживания микобактерий.

Использованные источники

1. Вейсфейлер Ю.К. Биология и изменчивость микобактерий туберкулёза и атипичных микобактерий. - Будапешт: Издательство Академии наук Венгрии, 1975. - 335 с.

2. Драбкина Р.О. Микробиология туберкулёза. - М.: Медгиз, 1963. - 254 с.

3. Козлов В.С. Биологические свойства микобактерий различных видов, выделенных из почвы // Проблемы туберкулёза. - 1982. - № 3. - С65-68.

4. Прокофьева Н.И. Выживаемость микобактерий туберкулёза в почве и методы её обеззараживания в условиях Якутии // Туберкулёз крупного рогатого скота и меры борьбы с ним / Сб. науч. тр. - Новосибирск, 1986. - С. 124-128.

5. Туберкулёз животных и меры борьбы с ним / Ю.Я. Кассич, А.Т. Борзяк, А.Ф. Кочмарский и др. - К.: Урожай, 1990. - 304 с.

Размещено на Allbest.ru