Содержание биоаминов в тканях различных органов кроликов при недостатке аксотока в блуждающих нервах

Размещено на http://www.allbest.ru/

Содержание биоаминов в тканях различных органов кроликов при недостатке аксотока в блуждающих нервах

Г.Г. Ефремов

Аннотация

Оценивали содержание серотонина, гистамина и катехоламинов в тканях сердца, легких и печени кроликов при блокаде аксотока в блуждающих нервах по периодам постнатального онтогенеза. Обсуждается необходимость притока аксоплазмы в нервных волокнах для поддержания оптимального количества биоаминов в тканях внутренних органов животных. серотонин кролик нерв

В естественных условиях рост и развитие органов животных связаны с процессами дифференцировки, поэтому вполне обоснован интерес к анализу факторов, влияющих на эти процессы. Особое внимание уделяется взаимосвязи между нервными регуляторными системами и тканевым субстратом в ранний постнатальный период. Значительная роль в регуляции структурно-функционального развития органов отводится веществам, поступающим к тканям с током аксоплазмы, которые необходимы как для пополнения запасов метаболитов и ферментов в нервных окончаниях, поддержания возбудимости мембран аксона, регуляции функции синапсов посредством информационных макромолекул, так и передачи нервных импульсов с помощью доставки или локального синтеза нейромедиаторов (1).

В задачу наших исследований входило определение содержания биоаминов в тканях сердца, легких и печени кроликов в условиях дефицита аксотока в блуждающих нервах с целью выявления роли тока аксоплазмы в нервных волокнах при становлении биоаминного статуса тканей в постнатальном онтогенезе.

Методика. Объектом исследования служили две группы кроликов породы бабочка (опыт и контроль, по 18 гол. в каждой) в возрасте 10-120 сут. У животных опытной группы в 10-суточном возрасте блокаду тока аксоплазмы по волокнам блуждающих нервов вызывали воздействием колхицина по методу Волкова с соавт. (2). Для этого животных под наркозом фиксировали брюшком вверх, разрезали кожу по средней линии шеи и отделяли участок блуждающего нерва длиной 1 см, который помещали в чашечку, оформленную в операционной ране из вазелина и полиэтиленовой подложки. В чашечку заливали 30 мМ раствор колхицина на среде Рингера, который через 30 мин после начала аппликации удаляли вместе с чашечкой; мышцы и кожную рану зашивали. Заживление раны в основном происходило по первичному натяжению. Содержание биоаминов в тканях сердца, легких и печени определяли люминесцентно-гистохимическими методами по Falck с соавт. в модификации Крохиной с соавт. (серотонин и катехоламины) (3, 4), а также по Cross с соавт. (гистамин) (5). Для идентификации и количественной оценки содержания биоаминов использовали метод микрофлуорометрии; на люминесцентном микроскопе была установлена дополнительная насадка ФМЭЛ-1. Интенсивность свечения выражали в единицах флуоресценции (усл. ед.) по регистрирующей шкале усилителя. Статистический анализ проводили при использовании MS Excel 2000, оценку достоверности - по критерию Стьюдента.

Результаты. У интактных животных (контроль) в возрасте 10, 30, 45, 60, 90 и 120 сут содержание серотонина в эндокарде составляло соответственно 0,0250,001; 0,0460,001; 0,0590,001; 0,0610,001; 0,0880,001 и 0,1250,001 усл. ед.; стенке бронха легких - 0,1420,001; 0,1310,002; 0,0990,001; 0,1950,002; 0,0840,001 и 0,0920,001; паренхиме легких - 0,0980,001; 0,0780,001; 0,0560,001; 0,0930,001; 0,0460,001 и 0,0380,001 усл. ед. (рис., а). В стенках миокарда этот показатель в период 10-60 сут снижался от 0,1260,001 до 0,0550,001, но максимально возрастал до 0,1530,001 усл. ед. к 120-м сут; в гепатоцитах - повышался от 0,0350,001 до 0,0900,001 к 45-60-м сут и вновь снижался до 0,0650,001 усл. ед. к 120-м сут.

В контроле содержание гистамина в эндокарде животных в 10-, 30-, 45-, 60-, 90- и 120-суточном возрасте составляло соответственно 0,4610,008; 0,4180,006; 0,2640,003; 0,3420,007; 0,1440,004 и 0,3310,006 усл. ед.; миокарде - 0,1260,002; 0,2220,002; 0,3580,018; 0,5520,012; 0,1320,005 и 0,2260,012; стенке бронха легких - 0,2620,011; 0,3110,006; 0,3370,013; 0,3990,012; 0,2760,012 и 0,4110,012; паренхиме легких - 0,1560,012; 0,2160,002; 0,3890,014; 0,2680,015; 0,2830,011 и 0,2480,008; гепатоцитах - 0,4150,012; 0,3980,012; 0,3370,013; 0,5860,015; 0,2140,011 и 0,2470,001 усл. ед. (см. рис., б).

Возрастная динамика содержания серотонина (а), гистамина (б) и катехоламинов (в) в тканях внутренних органов кроликов породы бабочка при блокаде аксотока в блуждающих нервах: I, II, III, IV, V - соответственно эндокард, миокард, стенка бронха, паренхима легких, гепатоциты; 1 и 2 - соответственно контроль и опыт.

В эндокарде интактных кроликов содержание катехоламинов по периодам постнатального онтогенеза увеличивалось на 69,3 % (см. рис., в). Динамика содержания катехоламинов в миокарде была аналогична таковой в эндокарде. В стенке бронха этот показатель составлял 0,0210,001; 0,0390,001; 0,0230,001 и 0,0450,001 усл. ед. соответственно в возрасте 10, 45, 90 и 120 сут; в паренхиме легких - уменьшался от 0,0350,001 до 0,0120,001 к 90-м и увеличивался до 0,0230,001 усл. ед. к 120-м сут. Динамика содержания катехоламинов в гепатоцитах кроликов была аналогична таковой в паренхиме легких.

Блокада тока аксоплазмы в волокнах блуждающих нервов животных в опыте сопровождалась следующими изменениями в тканях сердца: содержание серотонина в эндокарде было на 71,5 и 12,0 % выше, чем в контроле, соответственно в возрасте 30 и 45 сут; на 12,0; 68,2 и 48,0 % ниже - соответственно в возрасте 60, 90 и 120 сут; в стенке миокарда - на 15,0-69,6 % ниже во все возрастные периоды (Р < 0,001) (см. рис., а). В тканях легких также было отмечено снижение содержания серотонина в опыте: в стенке бронха - на 74,1; 81,9; 47,3; 16,7 и 53,3 % меньше (Р < 0,001), чем у интактных животных, соответственно в возрасте 30, 45, 60, 90 и 120 сут, причем наблюдалось повышение содержания серотонина к 3- и снижение к 4-месячному возрасту. В паренхиме легких динамика содержания серотонина у животных в опыте соответствовала таковой в стенке бронха. В гепатоцитах этот показатель уменьшался на 22,0 (Р < 0,01); 79,9 (Р < 0,001); 13,4 (Р < 0,001) и 38,5 % (Р < 0,001) соответственно в возрасте 30, 45, 60 и 90 сут, а в 4-месячном возрасте, наоборот, возрастал у кроликов в опыте по сравнению с контролем.

В эндокарде животных опытной группы в возрасте 30 и 45 сут содержание гистамина составляло соответственно 0,0870,001 и 0,2360,012 усл. ед. (меньше, чем в контроле, Р < 0,001), в возрасте 60, 90 и 120 сут - 0,6230,026; 0,3730,005 и 0,3400,004 усл. ед. (больше, чем в контроле) (см. рис., б). Динамика содержания гистамина в миокарде животных в опыте была аналогична таковой в эндокарде. Содержание гистамина в стенке бронха у животных в опыте в возрасте 30 и 45 сут было соответственно на 69,8 и 32,4 % ниже, в возрасте 60 и 90 сут - на 15,3 и 14,6 % выше (Р < 0,001), чем в контроле; к 120-м сут этот показатель снижался на 19,3 %. Динамика содержания гистамина в паренхиме легких была такой же, как в стенке бронха. Количество гистамина в гепатоцитах у животных в опыте было на 60,4; 32,4; 59,8; 40,2 % меньше (Р < 0,001) и на 4,3 % больше (Р < 0,01), чем в контроле, соответственно в возрасте 30, 45, 60, 90 и 120 сут.

Содержание катехоламинов в эндокарде кроликов в опыте не отличалось от контроля в возрасте 30 и 45 сут и составляло соответственно 0,0100,001 и 0,0200,001 усл. ед., затем возрастало к 60-м и 90-м сут до 0,0230,001 и 0,0340,001 (выше, чем в контроле) и уменьшалось к 120-м сут до 0,0110,001 усл. ед. (ниже, чем в контроле); динамика этого показателя в миокарде была аналогичной (см. рис., в). В стенке бронха содержание катехоламинов у животных в возрасте 30 и 90 сут было соответственно на 48,6 и 72,3 % выше; в возрасте 45 и 120 сут - на 33,4 % ниже в опыте, чем в контроле (Р < 0,001), и не отличалось от контроля в возрасте 60 сут. Динамика содержания катехоламинов в паренхиме легких оказалась такой же, как в стенке бронха. В гепатоцитах животных в опыте этот показатель был на 63,6 % ниже (Р < 0,001), на 20,6-54,9 % выше (Р < 0,01-0,001), чем в контроле, соответственно в возрасте 30, 45-90 сут и не отличался от контрольных показателей в 4-месячном возрасте.

Таким образом, ткани сердца, легких и печени кроликов в процессе развития в постнатальном онтогенезе характеризуются неодинаковым содержанием биоаминов. Как известно, колхицин слабо диффундирует в перинервальном пространстве и не способствует увеличению количества нервных клеток ниже места аппликации (6). Следовательно, изменение содержания серотонина, гистамина и катехоламинов в исследуемых нами тканях связано с недостатком тока аксоплазмы в блуждающих нервах и в наибольшей степени выражено у животных в 30- и 45-суточном возрасте; в последующие периоды онтогенеза происходит восстановление тока аксоплазмы в нервных волокнах. Очевидно, что приток аксоплазмы по волокнам блуждающих нервов к различным тканям органов в постнатальном онтогенезе является необходимым условием поддержания оптимального содержания биоаминов.

Литература

Л ы с о в В.Ф. Постнатальное становление десимпатизированных сердца и почек у овец. В сб.: XVII съезд физиологов России. Ростов-на-Дону, 1998: 51-52.

В о л к о в Е.М., Н а с л е д о в Г.А., П о л е т а е в Г.И. и др. Сравнительная характеристика электрофизиологических изменений мышечного волокна лягушки после денервации и после блокады аксоплазматического транспорта. Физиол. журн. СССР, 1977, 10: 1432-1434.

F a l c k В., H i l l a r p N.A., T h i e m e G. e.a. Fluorescence of catecholamines and related compounds condensed with dormaldehyde. J. Hystochem. Cytochem., 1962, 10: 348-354.

К р о х и н а Е.М., А л е к с а н д р о в П.М. Симпатический (адренергический) компонент эфферентной иннервации сердечной мышцы. Кардиология, 1969, 3: 97-102.

C r o s s S.A., E w e n S.W., R o s t F.W. A study of methods available for cytochemical localization of histamine by fluorescence indeed with o-phtaldehyde or acetaldehyde. Hystchem. J., 1971, 3, 6: 471-476.

З е ф и р о в Т.Л. Нервная регуляция сердечного ритма крыс в постнатальном онтогенезе. Автореф. докт. дис. Казань, 2000.

Размещено на Allbest.ru