Влияние трансгенеза на инкубационные качества яиц кур

Размещено на http://www.allbest.ru

'Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства им. Л.К. Эрнста ^Российский университет дружбы народов

Влияние трансгенеза на инкубационные качества яиц кур

А.Н. Ветох, А.А. Никишов, Н.А. Волкова

Целью данной работы было изучение влияния интеграции и экспрессии рекомбинантной ДНК на морфометрические характеристики и инкубационные качества яиц трансгенных кур, полученных с использованием лентивирусного вектора, обеспечивающих конститутивную экспрессию рекомбинантного продукта в клетках белковой части яйцевода. Трансгенные куры были созданы на основе кросса Хайсекс Уайт. Для более точных данных в исследовании отбирались яйца, срок хранения которых не превышал двух дней с момента яйцекладки. Для оценки морфометрических показателей были изучены: индекс формы яйца, общая масса яйца и массы его составных частей -- желтка и плотного белка, толщина скорлупы, большой и малый диаметр плотного белка, диаметр желтка, а также высота белка и желтка. Для оценки качества белка и желтка были использованы расчетные формулы для получения данных по единицам Хау, индексу белка и индексу желтка. Установлено достоверное увеличение диаметра и массы желтка яиц трансгенных кур по сравнению с контролем на 13,6 и 28,9% соответственно, что может быть связано с изменением состава яиц, обусловленного экспрессией дополнительного (рекомбинантного) белка в яйцо. Был изучен показатель оплодотворяемости яиц трансгенных кур в сравнении с контролем. Наблюдалось снижение оплодотворяемости яиц, полученных от трансгенных кур, на 12% по сравнению с контролем, что может быть связано с влиянием интегрированных генов на развитие эмбрионов. Также отмечались различия в гибели эмбрионов в период инкубации, у трансгенных кур она происходила на более ранних, критичных для развития эмбриона, стадиях.

Ключевые слова: трансгенная птица, инкубация, морфология яйца, желток, белок

INFLUENCE OF TRANSGENESIS ON INCUBATION QUALITY OF CHICKEN EGGS

А.N. Vetokh1,2, А.А. Nikishov2, NA. Volkova1

'L.K. Ernst Institute of animal husbandry 'RUDN University (Peoples' Friendship University of Russia) Abstract. The aim of this work was to study effect of integration and expression of recombinant DNA on the morphometric characteristics and incubation qualities of transgenic chicken eggs. Hens were obtained using lentiviral vector, which ensures the constitutive expression of the recombinant product in the cells of the oviduct protein part. Transgenic chickens have been created on the basis of Hisex White cross chickens. Eggs were selected in the study the shelf life of which did not exceed two days from the time of egglaying for more accurate data. The egg shape index, the total weight of the egg and the weight of its components -- yolk and dense protein, the thickness of the shell, the large and small diameter of the dense protein, the diameter of the yolk, and the height of the protein and yolk were studied to assess the morphometric parameters of eggs. The calculation formulas for obtaining data by units of Hau, protein index and yolk index were used to assess the quality of protein and yolk. A veracious increase in the diameter and mass of yolk in egg from transgenic hens as compared to the control was established. It amounted to 13.6% and 28.9%, respectively. This may be due to a change in the composition of eggs, which is due to the expression of additional (recombinant) protein in the egg. The fertilization index of transgenic chickens eggs in comparison with the control was studied. Decrease in egg fertilization by 12% was observed in transgenic hens compared to control. This may be due to the influence of integrated genes on the development of embryos. Differences in the death of embryos during the incubation period were noted. In transgenic chickens, it occurred on earlier critical for the development of the embryo stages.

Key words: transgenic poultry, incubation, morphology of eggs, yolk and white

Основная часть

Яйцо птицы представляет собой высокодифференцированную яйцеклетку, окруженную желтком и белком, которые выполняют определенные функции, направленные на поддержание жизненных процессов эмбриона. Яйцеклетка защищена оболочками и скорлупой. Наиболее важной частью яйца является желток, обладающий большим запасом биологической энергии за счет высокого содержания липидов (32--36%). Он обеспечивает питание бластодермы, из которой развивается птичий эмбрион. Морфометрические (размер, масса) и качественные (химический состав) показатели яйца зависят от генетических особенностей птицы (вида, породы, линии, кросса), возраста, условий содержания и кормления [2; 3].

Генетическая модификация сельскохозяйственной птицы, направленная на получение дополнительных рекомбинантных продуктов с белком яйца, также может оказывать влияние на качество яиц, снижая результативность получения потомства от трансгенных особей. Данная проблема является недостаточно изученной.

Цель исследований -- изучить влияние интеграции рекомбинантной ДНК на инкубационные качества яиц трансгенных кур с конститутивной экспрессией рекомбинантного белка в клетках яйцевода.

Материал и методы исследований. Материалом для исследований служили яйца, полученные от трансгенных и нетрансгенных кур кросса Хайсекс Уайт. Трансгенные куры были получены с использованием лентивирусного вектора, обеспечивающего конститутивную экспрессию рекомбинантного белка.

Отбор яиц от кур опытных и контрольной групп проводили с учетом общепринятых требований к инкубационным яйцам [1]. Срок хранения отобранных яиц составлял не более 2 дней с момента снесения.

Были оценены инкубационные качества яиц трансгенных кур в сравнении с контролем.

Массу яйца и его составных частей определяли на весах Ohaus PA413C с точностью 0,001 г, большой и малый диаметры, а также индекс формы яйца -- с помощью индексомера ИМ-1.

После вскрытия яйца определяли качественные показатели, такие как:

— толщина скорлупы с использованием микрометра часового типа;

— высота белка и желтка -- с помощью микрометра типа «паук» и нивелирного столика;

— диаметр белка и желтка -- штангенциркулем, с точностью измерения 0,1 мм.

С использованием формул [4] определяли:

1) качество белка:

а) в единицах Хау (по формуле Хау [Hough]:

Инкубацию яиц проводили в инкубаторе Brinsea OVA-Easy 190 Advance EX Series II (Great Britain).

Все материалы были обработаны методами вариационной статистики в MS Excel.

Результаты исследований. Результаты оценки метрических и качественных показателей яиц, полученных от трансгенных кур и их нетрансгенных аналогов, представлены в табл. 1.

Таблица 1 Морфометрические и качественные показателе яиц, полученных от трансгенных кур и их нетрансгенных аналогов