Диагностика, лечение и специфическая профилактика при колибактериозе поросят

Размещено на http://www.allbest.ru/

ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ПОРОСЯТ

Е.А. Сазонова

Abstract

DIAGNOSIS, TREATMENT AND SPECIFIC PREVENTION OF COLIBACTERIOSIS OF PIGLETS E. A. Sazonova

Relevance. The article presents data on the age-related susceptibility of piglets to colibacteriosis. The results of bacteriological and serological studies in order to establish the etiology of the disease. The safety of piglets in the early postnatal period is one of the main tasks in modern pig breeding. This is due to the lack of immunoglobulins in the blood of piglets. Piglets receive immunity through colostrum, from mothers who were immunized during the deep-fat period. Materials and methods. Clinical studies of pigs of all ages were conducted. Pathoanatomic autopsy of piglets' corpses. Escherichia coli isolates were used for the work. Differential diagnostic media were used: Endo medium, Bismuth -sulfite medium, Levin medium, meat-peptone agar, Eikman medium, Simmons medium, blood agar. In the course of our work, we applied various research methods adopted in veterinary laboratory practice. The sensitivity of isolated Escherichia to antibacterial drugs was studied by the disco-diffusion method. An object. Clinical studies of piglets of different age groups have been conducted. Results and discussion. The results on antibiotic resistance of persistent strains of Escherichia coli isolated from the corpses of sick animals, as well as from feces taken from sick animals not treated with antibacterial drugs are presented. Fecal samples were taken from each sick animal during defecation or from the rectum, using a viscose tampon probe with a plastic applicator, in a test tube with an EISMA transport medium and charcoal. As a result of the work, various research methods approved by the Ministry of Agriculture of the Russian Federation were used. Antibiotic resistance was determined by the disco-diffusion method. In total, 47 antibacterial drugs were tested for sensitivity on 93 cultures of Escherichia coli.

Keywords: Escherichia coli, colibacteriosis, bacteriology, immunology, antibiotic resistance, pig breeding, antibacterial drugs.

Аннотация

Актуальность. В статье представлены данные по возрастной восприимчивости поросят к колибактериозу. Результаты бактериологических и серологических исследований с целью установления этиологии заболевания. Сохранность поросят в ранний постнатальный период является одной из главных задач в современном свиноводстве. Это связано с отсутствием в крови у поросят иммуноглобулинов. Иммунитет поросята получают через молозиво, от матерей, которые были иммунизированы в глубокосупоросный период. Материалы и методы. Проводили клинические исследования свиней всех возрастов. Патологоанатомическое вскрытие трупов поросят. Для работы использовали изоляты E. coli. Применяли дифференциально-диагностические среды: среда Эндо, среда Висмут-сульфит, среда Левина, мясо-пептонный агар, среда Эйкмана, среда Симмонса, кровяной агар. В процессе работы нами были применены различные методы исследований, принятые в ветеринарной лабораторной практике. Чувствительность изолированных эшерихий к антибактериальным препаратам исследовали диско-диффузионным методом. Объект. Проведены клинические исследования поросят разных возрастных групп. Результаты и обсуждение. Представлены результаты по антибиотикорезистентности персистентных штаммов Escherichia coli, выделенных из трупов больных животных, а также из фекалий, взятых у больных животных, не подвергавшихся лечению антибактериальными препаратами. Пробы фекалий брали от каждого больного животного во время дефекации или из прямой кишки при помощи тампона-зонда из вискозы с пластиковым аппликатором, в пробирке с транспортной средой ЭЙСМА и углем. В результате работы использовали различные методики исследований, утвержденные Министерством сельского хозяйства Российской Федерации. Антибиотикорезистентность определяли диско -диффузионным методом. Всего на чувствительность проверили 47 антибактериальных препарата на 93 культурах Escherichia coli.

Ключевые слова: Escherichia coli, колибактериоз поросят, болезни свиней, антибиотикорезистентность, свиноводство, антибактериальные препараты.

Введение

В свиноводстве существует проблема сохранения поросят в ранний постнатальный период, так как новорожденные не имеют устойчивости к большинству возбудителей инфекционных болезней, в том числе к патогенной кишечной микрофлоре (в частности колибактериоза). Всё это связано с тем, что в крови поросят при рождении отсутствуют иммуноглобулины, которые являются основным фактором защиты в этот период. Невозможность трансплацентарной передачи материнских иммуноглобулинов, из-за эпителиохориального типа плаценты, новорожденные поросята получают единственный источник защиты, только через молозиво или молоко. Молозиво содержит высокий уровень иммуноглобулинов и других веществ. Поглощение иммуноглобулинов кишечником новорожденных поросят происходит не более 24 часов. В этот период молозивные иммуноглобулины адсорбируются и транспортируются в лимфопротоки и затем в кровь в нативном состоянии [5, 14].

Анализируя отечественную и зарубежную литературу, констатируем, что, несмотря на разработанные многочисленные меры профилактики и борьбы, желудочно-кишечные заболевания по-прежнему представляют сложную медико-ветеринарную проблему. В свиноводстве на долю желудочно-кишечных заболеваний приходится 60-70 % от общего числа заболеваний поросят, при этом сохраняется также очень высокая летальность, которая доходит до 50-70 %. По данным Департамента ветеринарии РФ, среди желудочно-кишечных патологии поросят, колибактериоз (эшерихиоз) составляет 30,6 % [3,4, 12].

В крупных свиноводческих хозяйствах у молодняка разных видов сельскохозяйственных животных часто регистрируется смешанная кишечная инфекция, спровоцированная несколькими видами энтеробактерий (Escherichia, Proteus, Citrobacter, Morganella, Klebsiella и др.), рота-, коронавирусами [8].

Несмотря на многочисленные исследования, также имеющиеся в арсенале практической ветеринарии: вакцины, сыворотки, антибактериальные и пробиотические препараты, проблема колибактериоза далека от решения. Это заболевание ежегодно приносит сюрпризы в мире: вспышки среди людей и животных, пищевые и кормовые токсикоинфекции. Многие вопросы эпизоотологии недостаточно изучены, изменяются биологические свойства эшерихий, происходит селекция резистентных штаммов бактерий под влиянием антибиотиков, недостаточно иммуногенных вакцин и других факторов [1, 2].

Колибактериоз протекает остро, болеют новорожденные и поросята 2-3 недельного возраста. Болезнь сопровождается продолжительным поносом, беловатожелтоватого цвета, который вызывает интоксикацию и обезвоживание организма. Без лечения поросята погибают. У поросят-отъемышей 35-65 дневного возраста колибактериоз наблюдается как отёчная болезнь с появлением отеков в различных органах и тканях и поражением центральной нервной системы. При бактериальных исследованиях от поросят выделяли энтеропатогенные Escherichia coli различных серогрупп, при отечной болезни - гемолитические варианты кишечной палочки [3, 4].

Основным источником заражения кишечными инфекциями являются больные и переболевшие поросята разных возрастов, энтеропатогенные типы кишечной палочки выделяются во внешнюю среду от свиноматок-бактерионосителей, загрязняют корма, окружающие предметы, подстилку. Также распространению болезни подвержены поросята, отстающие в росте и развитие, так как после многократных пассажей даже самые слабопатогенные эшерихии через ослабленный иммунитет приобретают вирулентность и становятся возбудителями болезни. Переносчиками возбудителя могут стать крысы, поросята заражаются алиментарным путем [6, 7, 9, 13, 15].

Таким образом, колибактериозом болеют поросята всех возрастов, но наиболее тяжело течение болезни и высокая летальность (до 50-70 %) наблюдаются у новорожденных и поросят отъемышей.

Материалы и методы

Объектами наших исследований были свиньи всех возрастов и технологических групп. Проводили клинические исследования свиней всех возрастов: хряков, свиноматок холостых, супоросных и лактирующих, поросят-сосунов, поросят-отъемышей, поросят в группах доращивания, подсвинков на откорме. Патологоанатомическое вскрытие трупов поросят.

Для работы использовали полученные изоляты E. coli от павших или вынужденно убитых животных разных возрастных групп. Применяли дифференциальнодиагностические среды: среда Эндо, среда Висмут-сульфит, среда Левина, мясопептонный агар, среда Эйкмана, среда Симмонса, кровяной агар.

Для бактериологической диагностики колибактериоза от трупов павших и вынужденно убитых поросят отобрали патологический материал: сердце, печень с желчным пузырем, селезенку, почку, пораженный участок тонкого отдела кишечника, трубчатую кость, лимфатические узлы.

В процессе работы нами были применены различные методы исследований, принятые в ветеринарной лабораторной практике [11].

Чувствительность изолированных эшерихий к антибактериальным препаратам исследовали диско-диффузионным методом.

Бактериологические исследования проводили согласно «Методическим указаниям по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных», 2000 г.

Порядок исследования материала

В первый день проводили первичные посевы в пробирки на мясопептонный бульон (МПБ) из отобранного патматериала от павших поросят с признаками отёчной болезни (паренхиматозные органы, костный мозг, лимфатические узлы, соскобов со слизистой оболочки тонкого кишечника). Пробирки с посевами культивировались в термостате, в течение 18-24 часов, при температуре 37 ⁰С.

На второй день - извлеченные из термостата первичные посевы в пробирках, рассевали на дифференцированные питательные среды (Эндо, Симмонса, Плоскирева, Висмут-сульфит) для дальнейшей идентификации микроорганизмов.

На третий день исследований с агара Эндо отбирали типичные для эшерихии колонии: малиново-красного цвета с металлическим блеском, округлой, выпуклой формы с гладкой поверхностью и ровными краями. Отобранные единичные колонии E. coli отсевали в мясопептонный бульон (МПБ).

На четвертый день полученные на питательных средах культуры, а также культуры, обладающие гемолитическими свойствами с кровяного агара, проверили на антибиотикорезистентность диско-диффузионным методом.

Результаты и обсуждение

болезнь свинья кишечный инфекция

В свиноводческих фермерских хозяйствах Ростовской области анализировали эпизоотическую обстановку по инфекционным и незаразным болезням свиней, провели соответствующие исследования. Колибактериоз наблюдали в виде энзоотий в период массовых опоросов. Провели бактериологические исследования материалов от 100 голов поросят разного возраста.

Основным источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие поросята и подсвинки. От свиноматок-бактерионосителей энтеропатогенные типы кишечной палочки выделяются во внешнюю среду в огромном количестве, загрязняя корма и подстилку.

Также распространению эшерихии способствуют отстающие в росте и развитии поросята. Эшерихии после многократных пассажей через организм ослабленных животных приобретают высокую вирулентность и становятся возбудителями болезни. Поросята заражаются алиментарно.

Для посмертной бактериальной диагностики колибактериоза при патологоанатомическом вскрытии трупов поросят произвели посев в мясопептонный бульон (МПБ) из следующих органов: сердце, печень, желчный пузырь, селезенка, почка, пораженный участок тонкого отдела кишечника, лимфатические узлы и трубчатая кость. Далее проводили посев из МПБ на дифференцированные среды.

После проведенных нами исследований получили следующие результаты.

На чашках Петри со средой Эндо отобрали колонии бактерий, типичные для E. coli: круглые с гладкой выпуклой поверхностью, с ровными краями, малиново-красного цвета с металлическим блеском. Отобранные колонии отсевали на МПБ, а также делали мазки, которые в последующем окрашивали по Граму. При микроскопии мазков нашли грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно и попарно, не образующие спор, что характерно для E. coli.

Для изучения гемолитических свойств культур и дифференциации отёчной болезни поросят полученные культуры E. coli дополнительно пересевали с агара Эндо 5-6 колоний на кровяной агар в чашке Петри. Засеянные чашки отправлялись в термостат на 16-20 часов при температуре 37 ⁰С. При посеве на кровяной агар выявили гемолитические штаммы E. coli, дающие полный а-гемолиз (рисунок 1).

Рисунок 1 а-гемолиз на кровяном агаре

Все полученные культуры эшерихий были проверены на чувствительность к антибактериальным препаратам. Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1

Устойчивость E. coli к антибактериальным препаратам. Всего 93 культуры

В таблице мы видим, что многие культуры E. coli оказались устойчивыми к антибактериальным препаратам, тем самым сведя результаты лечения практически к нулю.

В последующие дни проводили РА на определение серотиповой принадлежности E. coli, биопробу на белых мышах и определение ферментативных свойств культур.

В результате проведенных бактериологических и серологических исследований выделили от поросят патогенные штаммы Escherichia coli следующих серогрупп: О157; О137; О138; О139; О142; О147; О149; О115; О20; О35; О117; О102; О141; К88; А20.

Иммунитет при колибактериозе поросят пассивный, молозивный. Повышения концентрации иммуноглобулинов в молозиве и молоке добиваются путем иммунизации глубокосупоростных свиноматок. В нашей стране применяется несколько фабричных вакцин против эшерихиоза поросят. Для неблагополучных свиноферм по колибактериозу, а также сопровождающейся колиэнтеротоксемией (отечной болезни) у поросят-отъемышей, целесообразно проводить иммунизацию супоросных свиноматок двукратно с интервалом 10 дней: в первый раз в 70-80, второй раз в 80-90 день супоросности. С учетом этиологической структуры колибактериоза в хозяйстве, необходимо применять формолвакцину поливалентную гидроокисьалюминиевую против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, в состав которой входит взвесь инактивированных формалином и адсорбированных гидроокись алюминием эшерихий серогрупп О8, О9, О138, О139, О78, О141 и О147.

Иммунизацию поросят проводить по схеме: на 20-25 день жизни - первый раз, в 25-30 день - второй раз. Внутримышечно, в область шеи - по 1,5-2,0 мл.

Комплексная иммунизация свиноматок и поросят до отъема позволит уменьшить заболеваемость колибактериозом новорожденных и поросят-отъемышей.

Терапия поросят должна быть направлена на восстановление нарушенного пищеварения; подавление патогенной микрофлоры, профилактику дисбактериоза и токсикоза; установление водно-солевого равновесия и повышение резистентности организма.

Этиотропная терапия предусматривает применение антибиотиков, фторхинолонов и других антибактериальных препаратов. Для этого мы и проводили исследования на чувствительность к различным препаратам штаммов E. coli. Наибольшую эффективность показали такие препараты, как: цефтазидим, цефтриаксон, цефотаксим, амикацин, норфлоксацин, ципрофлоксацин, азтреонам, полимиксин, фуразолидон, гентамицин, фурадонин, тобрамицин, цефоперазон, цефепим, офлоксацин, меропенем, фурагин, энрофлоксацин. Из 47 антибактериальных препаратов сработало только 18, что составило 38,3 %.

С целью восстановления нормальной микрофлоры кишечника после антибактериальной терапии необходимо применять пробиотики - биологические препараты, представляющие собой культуры симбионтных микроорганизмов или продукты их ферментации. Из пробитиков поросятам рекомендуется выпаивать с водой бифидумбактерин 2 раза в сутки, в течение 5 дней.

Выводы

После проведенных эпизоотологических, клинических, патологоанатомических и бактериологических исследований у новорожденных поросят и поросятсосунов (2-3-недельного возраста) установили колибактериоз, у поросят-отъемышей в послеотъемный период - колиэнтеротоксемическую форму (отечную болезнь).

Появлению колибактериоза способствовали многие факторы: нарушение технологии кормления супоросных и лактирующих свиноматок, нарушения технологии подготовки маток к осеменению и опоросу; несоблюдение ветеринарно-санитарных правил проведения опороса, приёма новорожденных, выращивания поросят; нарушение санитарного режима содержания животных; недоброкачественные корма.

Беспорядочное применение антибиотиков приводит к увеличению резистентных штаммов. Возникновение резистентности усложняет лечение и приводит к увеличению количества заболевших животных и, как следствие, летальных исходов. Все это неблагополучно сказывается на экономической составляющей хозяйств.

Библиографический список

1. Антибиотикорезистентность клинических изолятов Escherichia coli, выделенных от животных / М. Н. Исаков [и др.] // Ветеринария сегодня. 2022. № 11 (1). С. 14-19.

2. Антибиотикоиндуцированная морфологическая пластичность кишечной палочки, изолированной от животных / Р. Б. Корочкин, И. А. Красочко, С. Н. Гвоздев, Р. А. Кривонос, О. Ю. Черных, А. А. Лысенко // Ветеринария Кубани. 2019. № 5.

3. Ассоциативные желудочно-кишечные и респираторные заболевания свиней в Краснодарском крае / Н. Н. Кружнов, И. А. Болоцкий, В. И. Семенцов, Е. В. Иванасов // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. 2015. № 2. С. 53-54.

4. Значение факторов вирулентности эшерихий при получении вакцин против колибактериоза / А. П. Медведев, А. А. Вербицкий, В. Н. Алешкевич, В. М. Меньшиков // Ученые записки УО ВГАВМ. 2016. Т 52. Вып. 2. С. 53-54.

5. Исследование резистентности бактериальных возбудителей желудочно -кишечных и респираторных болезней поросят к антимикробным препаратам / А. Г. Шахов, Л. Ю. Сашнина, М. И. Лебедев, Е. В. Лебедева // Доклады РАСХН. 2011. № 2. С. 53-55.

6. Колибактериоз и меры борьбы с ним в свиноводческих комплексах / Е. Солдатенко, О. Черных, Е. Сазонова [и др.] // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2022. № 3. С. 22-25.

7. Мониторинг инфекционных болезней у крупного рогатого скота на Северном Кавказе / Л. В. Шевченко, Ю. Д. Дробин, О. Ю. Черных [и др.] // Тенденции развития науки и образования. 2019. № 55-3. С. 40-44.

8. Новикова Е. Н., Тищенко А. С., Мартыненко Я. Н. Распространение колибактериоза свиней в Краснодарском крае // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2018. № 136. С. 201-210.

9. Профилактика колибактериоза и сальмонеллеза свиней в условии промышленных комплексов / Н. А. Солдатенко, Ю. Д. Дробин, А. В. Коваленко, Е. А. Сазонова // Актуальные проблемы и методические подходы к диагностике, лечению и профилактике болезней животных: материалы международной научно-практической конференции. Донской государственный аграрный университет, 2018. С. 149-153.

10. Сазонова Е. А. Антибиотикорезистентность и ее альтернативы // Ветеринария Северного Кавказа. 2021. № 2. С. 49-52. https://www.eHbrary.ru/item.asp?id=47420847.

11. Сазонова Е. А., Солдатенко Н. А. Устойчивость к лекарственным препаратам выделенных патогенов // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса: наука и высшее профессиональное образование. 2021. № 4 (64). С. 238-246. http s: //www.elibrary.ru/item.asp?id=47597028.

12. Скориков А. В., Новикова Е. Н., Иванасова Е. В. Мониторинг заболеваемости свиней колибактериозом в Краснодарском крае // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2018. № 1. С. 124-129. https://e.lanbook.com/joumal/issue/306409.

13. Солдатенко Н. А., Сазонова Е. А. Комплексная диагностика при заболеваниях свиней // Тенденции развития науки и образования. 2019. № 55-3. С. 36-39.

14. Солдатенко Н. А. Распространение возбудителей бактериальных инфекций в свиноводческих хозяйствах юга России // Тенденции развития науки и образования. 2019. № 54-2. С. 51-53.

15. Шевченко А. А., Торопыно А. В., Шеченко Л. В. Бактериологическое исследование при эшерихиозе // Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2018. № 71. С. 97-102. https://www.elibrary.ru/item.asp?id=35359012.

Размещено на Allbest.ru