Гемостаз корів у перші три місяці тільності

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Сумський національний аграрний університет

Гемостаз корів у перші три місяці тільності

Д. Матвейчук

м. Суми

Анотація

Отримання здорового молодняку та високої продуктивності від корів залежить від фізіолого-біохімічного статусу організму тварин. Значна роль в цьому процесі належить системі гемостазу, формуванню фетоплацентарного комплексу, максимального забезпечення плода поживними речовинами та Оксигеном. Тромбоцитарний гемостаз корів під час тільності набуває значних змін. Вони свідчать, що впродовж періоду виношування плоду стан судинно-тромбоцитарного гемостазу тварини набуває відповідних закономірностей у динаміці. Встановлено, що період нідації плоду супроводжується зниженням кількості кров'яних пластинок в крові корів в 1,16 рази, у порівнянні з показником не тільних тварин (р <0,05.У вищезазначений період першого триместру тільності корів першої групи кількість кров'яних пластинок в крові виявилась в 1,17 - 1,16 рази (р < 0,05) менше, ніж у контрольних корів. Кількість тромбоцитів в крові корів від першого триместру тільності, до кінця третього триместру знижується відповідно в 1,17 (р<0,05), 1,28 (р<0,05) та в 1,33рази (р<0,01), а за весь період тільності в 1,27 рази (р<0,01) У тільних корів в кінці першого триместру тільності протромбіновий час, виявся в 1,21 рази (р<0,05), коротше, у порівняні з даним показником корів контрольної групи. У тільних корів протромбіновий час гемостазу скорочувався від першого триместру тільності. В середньому, за весь період тільності у корів протромбіновий час виявився в 1,34 рази менше, ніж у не тільних корів (р<0,01). Подібна ж динаміка змін нами виявлена і за протромбіновим індексом гемостазу корів. У корів впродовж першого триместру протромбіновий індекс послідовно знижувався (р<0,05). Значні зміни нами виявлені за вмістом фібриногену в крові корів. У тільних тварин вміст фібриногену в крові поступово підвищився і в кінці першого триместру тільності був більше, ніж на початку тільности. Зміна динаміки показників протромбінового та тромбінового часу гемостазу, вмісту фібриногену у крові корів за цей період тільності впливає на властивості крові. До кінця першого триместру тільності в'язкість крові корів підвищувалась, швидкість згортання крові тільних корів підвищувалась.

Ключові слова: корова, тільність, гемостаз, триместр, перший.

Abstract

молодняк корова фетоплацентарний гомеостаз

Hemostasis of cows in the first three months of pregnancy

D. Matveychuk

Obtaining healthy young animals and high productivity from cows depends on the physiological and biochemical status of the animal organism. A significant role in this process belongs to the system of hemostasis, the formation of the feto-placental complex, the maximum supply of nutrients and oxygen to the fetus. Platelet hemostasis of cows undergoes significant changes during pregnancy. They testify that during the period of bearing the fetus, the state of vascular and platelet hemostasis of the animal acquires the corresponding regularities in the dynamics. It was established that the period of fetal nidation is accompanied by a decrease in the number of blood platelets in the blood of cows by 1.16 times, compared to the indicator of non-calving animals (p < 0.05. in the blood was found to be 1.17 - 1.16 times (p < 0.05) less than in control cows. The number of platelets in the blood of cows from the first trimester of pregnancy to the end of the third trimester decreases by 1.17 (p < 0.05), 1.28 (p<0.05) and 1.33 times (p<0.01), and 1.27 times (p<0.01) during the entire calving period. In calving cows at the end in the first trimester of pregnancy, the prothrombin time was 1.21 times (p<0.05), shorter, compared to this indicator of cows of the control group. In pregnant cows, the prothrombin time of hemostasis decreased from the first trimester of pregnancy. On average, over the entire period of pregnancy in cows, the prothrombin time was 1.34 times less than in non-calving cows (p<0.01). it is also shown by the prothrombin index of hemostasis of cows. In cows, the prothrombin index consistently decreased during the first trimester (p<0.05). We found significant changes in the content offibrinogen in the blood of cows. In pregnant animals, the content of fibrinogen in the blood gradually increased and at the end of the first trimester of pregnancy was more than at the beginning of pregnancy. Changes in the dynamics of indicators of prothrombin and thrombin time of hemostasis, the content of fibrinogen in the blood of cows during this gestation period affect the properties of blood. By the end of the first trimester of pregnancy, the viscosity of the cows' blood increased, and the coagulation rate of the blood of pregnant cows increased.

Key words: cow, weight, hemostasis, trimester, first.

Основна частина

Постановка проблеми у загальному вигляді. Зв'язок з важливим науковим і практичним завданням. Проведені дослідження були складовою частиною тематичного плану «Розробка мультипараметричної системи виробництва молока на основі секретоутворюючої функції молочної залози, пре - та постнатального розвитку тваринного організму і методів їх корекції» № державної реєстрації 0108U010281 (Розділ 2. «Фізіолого-біохімічні параметри пре - та постнатального розвитку тварин та їх корекція», а також госдоговорної тематики №1/8 від 01.08.2019 р. по темі: «Корекція судинно-тромбоцитарного гемостазу у корів».

Аналіз літературних даних, в яких започатковано розв'язання проблеми. Стан внутрішнього середовища організму віддзеркалює всі процеси, які відбуваються у неї. Вони протікають в організмі постійно. Характеризують гомеостаз, гомеокінез та пристосувальні реакції при зміні показників внутрішнього середовища та при взаємодії організму з зовнішнім середовищем [1].

Фізико-хімічні властивості крові характеризується наявністю багатьох констант, які можуть бути дуже стабільними (відхилення їх навіть у незначних межах призводить до порушення життєдіяльності). Також є і нестабільні показники. Вони коливаються у досить широких межах, не призводячи до серйозних змін у життєдіяльності. Вони характеризують об'єм циркулюючої крові (ОЦК), кількість формених елементів, вміст гемоглобіну, в'язкість крові, швидкість осідання еритроцитів (ШОЕ). Густина крові коливається у вузьких межах від 1,058 до 1,062 і залежить від умісту в ній формених елементів (головним чином еритроцитів), білків плазми, кількості гемоглобіну та газового складу крові [2]. Кров є складною сумішшю взаємодіючих між собою клітин, білків, електролітів в водному середовищі з мінливою своєрідною структурою яка змінюється під час руху. Швидкість руху крові в організмі залежить від сили серцевого викиду, опору судинного русла, взаємодії між компонентами крові [3]. Підтримання усіх констант крові здійснюється згідно з принципом саморегуляції, при якому відхилення константи від її нормального рівня є стимулом для повернення до її початкового рівня [4].

Гемостаз - це процес, завдяки якому забезпечується попередження й припинення кровотечі в організмі за рахунок трьох взаємодіючих між собою функціонально-структурних компонентів, а саме: стінок кровоносних судин, клітин крові та плазмової ферментної системи згортання крові [5,6].

Система гемостазу містить морфологічні (структурні) й функціональні компоненти. До числа морфологічних компонентів включають судинну стінку, тромбоцити та клітини крові, плазміні компоненти, а саме, пептиди, білки, небілкові медіатори гемостазу, гормони, цитокіни; органи кровотворення - білий, червоний кістковий мозок, селезінка, печінка. До функціональних компонентів належать прокоагулянти, антикоагулянти, інгібітори коагуляції; інгібітори фібринолізу, профібрінолітіки [7,8].

Взаємодія компонентів гемостазу може здійснюватися у формі прямого та зворотнього зв'язку. Підтримкагемостатичного балансу передбачає

збереження загальної активності гемостазу в фізіологічних межах. У випадку зміщення гемостатичного балансу за рамки фізіологічних норм створюються умови для розвитку тромбозів чи патологічних кровотеч [9]. У разі відсутності пошкодження система є інтактною, а значитьперешкоджає

згортанню крові [10]. Дослідники в один і той же час презентовали каекадну модель згортання крові, коли кожна попередня протеаза згортання активує наступну [10, 11]. Даний механізм спричиняє незначне підсилення початкового стимула ініціації згортання і швидке формування тромбіна [12]. У останні рокі була взята за основу клітинна модель гемостазу. Відповідно до цій моделі різноманітні реакції каскаду згортання здійснюються на мембранах різних клітин. Каскад має такі послідовні стадії як ініціацію, підсилення й розповсюдження [13].

Розрізняють два основні шляхи запуску згортання крові, серед яких зовнішній шлях пов'язують з надходженням із тканин до крові тканинного тромбопластичного фактору III, а внутрішній шлях активації згортання здійснюється за рахунок ферментних факторів, які містить кров чи плазма [14].

Зміни, що відбуваються у системі гемостазу вагітної, є фізіологічною адаптацією організму, пов'язаною з появою матково-плацентарного кола кровообігу [15]. Нині встановлено, що важливу роль у підтримці фізіології фетоплацентарної системи відіграє система гемостазу [16]. У міру прогресування вагітності, що протікає фізіологічно, відбувається зміна активності та рівня факторів згортання крові. У свою чергу і сама плацента є регулятором гемостазу матері: у ній відбувається синтез як прокоагулянтних, так і антикоагулянтних факторів [17] Гемостатична система змінюється протягом усього росту та розвитку плода. Багато коагуляцій них білків в ембріональний період вже синтезовані, але з середини внутрішньоутробного періоду росту та розвитку плоду продукція цих білків призупиняється до пологів. Причини всіх цих процесів залишаються нез'ясованими [18].

Здатність до відтворення у корів є однією з важливих функцій, яка у значної кількості тварин зазнає негативних змін протягом усього репродуктивного періоду. Це веде до зниження темпів виробництва молока та м'яса, чим завдаються суттєві економічні збитки державі. Насамперед, це зміни в системі гемостазу при вагітності [19]. На сучасному етапі процеси активації згортання крові широко досліджені. Однак, недостатньо вивченими залишаються початкові етапи згортання крові та можливості інгібітору ТФ в стримуванні внутрішньо судинного згортання крові при вагітності. Існує думка, що надлишкова активація на початкових етапах гемо коагуляції може викликати як тромбози, так і клінічні ускладнення під час вагітності [20].

Проблема потребує поглибленого вивчення, що сприятиме розробці обґрунтованих методів корекції параметрів первинного гемостазу, недопущення порушення умов росту та розвитку плоду та отримання життєздатного приплоду, що і було метою наших досліджень.

Матеріали та методи досліджень. Експериментальна частина роботи проведена в умовах господарства ПРАТ «Радгосп «Шевченківський», с. Шевченкове, Конотопський район, в СФГ «Віталія». Дослідження зразків крові проводили в умовах клініко-діагностичної лабораторії «Сехмет», м. Суми, Інституту біохімії ім. О.В. Паладина НАН України, м. Київ.

За для досліджень динаміки показників судинно - тромбоцитарного гемостазу у корів першої, другої та третьої тільності, за триместрами та впродовж всього періоду тільності корів після осіменіння брали на облік. В кінці першого місяця після першого осіменіння проводили відбір проб крові. В тому випадку, якщо корова приходила в охоту повторно її осіменяли повторно і через місяць після другого осіменіння знов відбирали проби крові (рахуючи це першим місяцем тільності). Такий прийом використовували до запліднення корів. В кожну групи досліду відбирали по 5 корів першої, другої та третьої тільності (n= 5), які запліднились за два осіменіння. Корів, що не запліднились впродовж двох осіменінь без ознак порушення гомеостазу (n=5) відносили до тварин контрольної групи. Таким чином формували дослідні групи корів першої, другої та третьої лактації. До кожної дослідної групи формували контрольну групу тварин відповідної лактації і в цілому дослід проводили на 30 коровах.

З метою виключення впливу добової динаміки на показники тромбоцитарного гемостазу, кров відбирали з під хвостової артерії від тварин вранці до годівлі, після доїння, в кінці кожного місяця тільності. Визначали параметри показників первинного гемостазу корів за триместрами тільності та впродовж всього періоду тільності.

Зразки крові від тварин відбирали одноразовими стерильними голками з дотриманням правил асептики і антисептики, в пробірки з вакуумною системою, що містять антикоагулянт.

У зразках крові, з використанням приладу коагулометр «К 3002 ОРТІС» визначали наступні показники тромбоцитарного гемостазу: протромбіновий час, протромбіновий індекс, тромбіновий час, активований частково тромбопластиновий час (АЧТЧ), вміст фібриногену, кількість тромбоцитів (PLT), міжнародне нормалізоване відношення (МНВ), вміст гемоглобін (НОВ), гематокрит (НСТ), середній об'єм тромбоцитів (MPV), тромбокрит (РСТ), ширина розподілу тромбоцитів за об'ємом (РІ)'), кількість лейкоцитів (WBC), кількість еритроцитів (RBC), середній об'єм еритроцитів (MCV), середній вміст гемоглобіну в одному еритроциті (MCH), середню концентрацію гемоглобіну в еритроцитах (MCHC), ширину розподілу еритроцитів за об'ємом (RDW), швидкість осідання еритроцитів (ШОЕ).

Під час проведення експериментальних досліджень дотримувалися міжнародних вимог «Європейської конвенції захисту хребетних тварин, що використовуються в експериментальних та інших наукових цілях» (Страсбург, 1986 р.) та відповідного Закону України «Про захист тварин від жорстокого поводження» № 3447-IV від 21.06.2006 р.

Отриманий цифровий матеріал оброблений статистично за допомогою комп'ютерної програми з визначенням середньої арифметичної (М), статистичної помилки середньої арифметичної (m), вірогідності різниці (р) між середніми арифметичними двох варіаційних рядів за критерієм вірогідності (t) Стьюдента. Різницю між двома величинами вважали вірогідною за р<0,05; р<0,01; р<0,001.

Результати власних досліджень та їх обговорення. Показники тромбоцитарної ланки гемостазу корів за місяцями тільності у першому триместрі та в середньому за цей період мали наступну динаміку.

Період нідації плоду (табл. 1) супроводжується зниженням кількості кров'яних пластинок в крові корів в 1,16 рази, у порівнянні з не тільними тваринами (р < 0,05). В послідуючому, до кінця першого триместру тільності їх кількість в крові корів суттєво не змінювалася у порівнянні з попереднім, першим місяцем розвитку вагітності. В наступні місяці, (другий та третій місяць тільності) їх кількість в крові корів становила 245,53±15,99 тис/мкл та 242,27±21,51 тис/мкл. У вищезазначений період першого триместру тільності, у корів першої групи кількість кров'яних пластинок в крові виявилась в 1,17 - 1,16 рази (р < 0,05) менше, ніж у контрольних корів. В той же час, у тварин другої та третьої контрольної групи кількість тромбоцитів у крові виявилась на рівні 282,53±4,34 та 285,43±4,48 тис /мкл. Дані показники були більше кількості тромбоцитів в крові тварин дослідних груп.

В середньому, в кінці першого триместру тільності корів кількісні показники тромбоцитів в крові зменшились. Тобто, кількість тромбоцитів в крові корів першої дослідної групи виявилася в 1,17 рази (р < 0,05) менше, ніж у корів контрольної групи. Середній об'єм тромбоцитів в крові корів першої дослідної групи в кінці першого місяця тільності був на рівні 7,19±0,11 фл. У не тільних корів, в цей період, СОТ був в 1,04 рази менше. В послідуючому, до кінця першого періоду досліджень у корів середній об'єм тромбоцитів коливався незначно. В середньому, даний показник тромбоцитів крові тільних корів першої групи становив 7,05±0,10 фл, що не вірогідно менше, ніж у не тільних корів.

У дослідних тварин другої та третьої групи (дослідні групи) середній об'єм тромбоцитів крові був також не вірогідно більше. Тромбокрит у тільних корів першої групи впродовж першого періоду тільності коливався незначно. У не тільних корів тромбокрит в кінці третього місяця першого періоду досліджень становив 0,155±0,02%, що в 1,11 рази більше (р < 0,05), ніж в кінці першого місяця та не вірогідно більше, ніж в кінці другого місяця досліду. Однак, в середньому, тромбокрит крові корів усіх дослідних груп за перший період досліду практично не відрізнявся. За першій період досліджень не виявлено вірогідних змін у показниках ширини розподілу тромбоцитів в крові тільних корів.

Таблиця 1. Тромбоцитарна ланка гемостазу корів впродовж першого періоду тільності (M±m, n = 5)