Создание оптимальных условий для культивирования биомассы дрожжей Saccharomices сerevisiae
Заполнение матрицы планирования эксперимента. Приготовление среды Чапека. Заполнение матрицы реализации эксперимента. Снятие показаний с культуральной жидкости. Расчет коэффициентов регрессии. Анализ математической модели. Оценка дисперсии адекватности.
Рубрика | Биология и естествознание |
Вид | лабораторная работа |
Язык | русский |
Дата добавления | 10.12.2012 |
Размер файла | 15,4 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Цель работы: создание оптимальных условий для культивирования биомассы дрожжей Saccharomices сerevisiae по 2 факторам на 2 уровнях.
Ход работы:
Заполнили матрицу планирования эксперимента
N |
X0 |
X1 , г/л |
X2, г/л |
Y |
|
1 |
-1 |
-1 |
|||
2 |
+1 |
-1 |
|||
3 |
-1 |
+1 |
|||
4 |
+1 |
+1 |
где X0 - мнимый фактор
X1 - концентрация глюкозы, г/л
X2 - концентрация NaNO3
Y - титр клеток
Подготовили культуру Saccharomices сerevisiae для посева и стерильную воду.
Приготовили среду Чапека
Сахароза - 30,0 г/л
NaNO3 - 2,0 г/л
MgSO4 * 7 H2O - 0,5 г/л
FeSO4 - 1,0 г/л (10,0 мл водопроводной воды)
KH2PO4 - 1,0 г/л
KCl - 0,5 г/л
Заполнили матрицу реализации эксперимента
N |
X0 |
X1 , г/л |
X2, г/л |
Y |
|
1 |
25 |
1,7 |
4,25*106 |
||
2 |
35 |
1,7 |
5,27*106 |
||
3 |
25 |
2,3 |
4,38*106 |
||
4 |
35 |
2,3 |
5,27*106 |
где X0 - мнимый фактор
X1 - концентрация глюкозы, г/л
X2 - концентрация NaNO3
Y - титр клеток
Приготовили суспензию Saccharomices сerevisiae.
Просчитали титр суспензии Saccharomices сerevisiae в камере Горяева.
Сделали посевы и поставили в термостат.
Через 3 дня сняли показания с культуральной жидкости.
№ Пробирки |
Количество клеток дрожжей |
Среднее значение |
|
1-1 |
17, 17, 19, 18, 17 |
4400000 |
|
1-2 |
16, 15, 17, 17, 19 |
4200000 |
|
1-3 |
15, 18, 20, 15, 15 |
4150000 |
|
?= 4250000 |
|||
2-1 |
22, 20, 19, 23, 20 |
5200000 |
|
2-2 |
19, 19, 23, 24, 20 |
5250000 |
|
2-3 |
22, 20, 23, 19, 23 |
5350000 |
|
? = 5266666,667 |
|||
3-1 |
18, 20, 19, 16, 16 |
4450000 |
|
3-2 |
19, 15, 18, 19. 16 |
4350000 |
|
3-3 |
19, 17. 19, 17, 15 |
4350000 |
|
? = 4383333,333 |
|||
4-1 |
22, 19, 22, 23, 18 |
5200000 |
|
4-2 |
23, 20, 23, 22, 19 |
5350000 |
|
4-3 |
19, 22, 22, 23, 19 |
5250000 |
|
? = 5266666,667 |
Заполнили расчетную матрицу эксперимета:
N |
X0 |
X1 , г/л |
X2, г/л |
Y |
|
1 |
+4,25 |
-4,25 |
-4,25 |
4,25*106 |
|
2 |
+5,27 |
+5,27 |
-5,27 |
5,27*106 |
|
3 |
+4,38 |
-4,38 |
+4,38 |
4,38*106 |
|
4 |
+5,27 |
+5,27 |
+5,27 |
5,27*106 |
где X0 - мнимый фактор
X1 - концентрация глюкозы, г/л
X2 - концентрация NaNO3
Y - титр клеток
Провели расчет коэффициентов регрессии
bi = [Уn xi] / n
b0 = [4,25+5,27+4,38+5,27] / 4 = 4,8
b1 = [-4,25+5,27-4,38+5,27] / 4 = 0,5
b2 = [-4,25-5,27+4,38+5,27] / 4 = 0,13
y = 4,8 + 0,5x1 + 0,13x2
Коэффициенты b1 и b2 имеют положительный знак, значит положительно влияют на функцию отклика.
Получив математическую модель провели её анализ.
Анализ математическиой модели:
Рассчитали построчные дисперсии по формуле:
эксперимент культуральный жидкость среда
S2U = (1/m-1) * [Уmk=1 (Yuk - Yu ) 2]
S21 = 0,5 [ (4,4*106 - 4,25*106)2 + (4,2*106 - 4,25*106)2 + (4,15*106 -4,25*106 )2] = 0,0175*1012
S22 = 0,5 [ (5,2*106 -- 5,27*106)2 + (5,25*106 -- 5,27*106)2 + (5,35*106 -5,27*106 )2] = 0,00585*1012
S23 = 0,5 [ (4,45*106 -- 4,38*106)2 + (4,35*106 -- 4,38*106)2 + (4,35*106 -4,38*106 )2] = 0,0016*1012
S24 = 0,5 [ (5,2*106 -- 5,27*106)2 + (5,25*106 -- 5,27*106)2 + (5,35*106 -5,27*106 )2] = 0,00585*1012
Проверили однородность дисперсии по критерию Кохрена
Gp = (S2u max) / Уnu=1 S2u
Gp = 0,0175 / (0,0175 + 0,00585 + 0,0016 + 0,00585) = 0,5687
Gi = 0,7679 (критерий Кохрена)
Gp < Gi
0,5687 < 0,7679
Гипотеза об однородности дисперсии принимается.
Усреднили построчные дисперсии по формуле
S2о = {1/ [n(m-1)]} Уnu=1 Уmk=1 (Yuk - Yu ) 2
S2о = {1/ [4(3-1)]} * (((4,4*106 - 4,25*106)2 + (4,2*106 - 4,25*106)2 + (4,15*106 -4,25*106 )2) + ((5,2*106 -- 5,27*106)2 + (5,25*106 -- 5,27*106)2 + (5,35*106 -5,27*106 )2) + ((4,45*106 -- 4,38*106)2 + (4,35*106 -- 4,38*106)2 + (4,35*106 -4,38*106 )2) + ((5,2*106 -- 5,27*106)2 + (5,25*106 -- 5,27*106)2 + (5,35*106 -5,27*106 )2)) = 0,034*1012
Нашли дисперсию коэффициентов регрессии
S2bi = S20 / N
S2bi = 0,034/4 = 0,0085
Провели оценку значимости коэффициентов по критерию Стьюдента
1 способ:
tip = |bi| / Sbi
tt =2,31(табличное значение критерия Стьюдента)
tip >tt
Для коэффициента x1
tip = 0,5/0,0085=58,28
58,28>2.31
Для коэффициента x2
tip = 0,13/0,0085=15,29
15,29>2.31
2 способ:
|bi| > ^bi
Для коэффициента x1
0,5 > 0,0085
Для коэффициента x2
0,13> 0,0085
Оба коэффициента регрессии признаются значимыми
Рассчитали дисперсию адекватности по формуле
S2ад = [m/(n-l)] (Уnu=1 (Yu-Yu)2)
Yu1=1,5+0,5*25+0,13*1,7=0,1405
Yu2 =1,5+0,5*35+0,13*1,7=0,1905
Yu3 =1,5+0,5*25+0,13*2,3=0,1406
Yu4 =1,5+0,5*35+0,03*2,3=0,1905
S2ад = [3/(4-2)] ((0,1405-0,0175)2 +(0,1905-0,00585)2 +(0,1406-0,0016)2 +(0,1906-0,00585)2 =0,1540125
Fp = S2ад / S20
Fp ==0,1540125/0,034 = 4,529779
Ft=5,32(значение критерия Фишера)
Fp<Ft
4,53<5.32
Линейное уравнение регрессии является адекватным.
Вывод
Проделав лабораторную работу и проанализировав расчеты мы выявили, что плотность популяции Saccharomices cerevisiae в 4 вариантах неодинакова, избыточное количество сахарозы катализирует рост популяции. Лучшие концентрации факторов 1 и 2 (сахарозы и соли NaNO3) во втором и четвертом варианте, так как концентрация соли не показала видимых изменений. Анализ результатов полного факторного эксперимента показал адекватность линейного уравнения регрессии.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Классификация непрерывного культивирования микроорганизмов. Концентрации биомассы и лимитирующего рост субстрата. Критическая скорость разбавления. Хемостатный реактор с рециклом по биомассе и культуральной жидкости. Специальные цели хемостатной культуры.
курсовая работа [334,2 K], добавлен 20.12.2012Виды биологически активных веществ. Характеристика продуктов липидной природы, области применения. Микроорганизмы - продуценты липидов, способы их культивирования. Технологическая схема экстракционного выделения биожира из биомассы дрожжей, его стадии.
курсовая работа [86,5 K], добавлен 21.11.2014Оптимальный поиск физиологически активных компонентов питательной среды (нутриентов) и условий культивирования, необходимых разнообразным живым системам для интенсивного роста и синтеза биологически активных соединений: ферментов, антигенов, антибиотиков.
научная работа [379,9 K], добавлен 21.03.2012Схемы выделения целевого продукта в биотехнологическом производстве. Первый этап очистки продукта - разделение культуральной жидкости и биомассы - сепарация. Методы гомогенизации. Физические и химико-ферментативные способы. Флотация и мембранные процессы.
реферат [27,2 K], добавлен 15.02.2009Твердое основание для аффинной матрицы. Активированные матрицы и спейсеры. Лиганды с индивидуальной и групповой специфичностью. Преимущество ферментов, закрепленных на хроматографической матрице. Использование аффинной хроматографии, иммунная система.
реферат [22,3 K], добавлен 13.12.2009Значение влажности среды при выращивании ферментов на сыпучих средах. Влияние степени аэрирования культур микроскопических грибов. Воздействие состава среды и длительности культивирования на биосинтез липазы. Способы обработки и выращивания культуры.
презентация [734,7 K], добавлен 19.03.2015Особенности морфологии и физиологии грибов. Извлечение питательных веществ всей поверхностью тела. Классы плазмидов в зависимости от структуры молекулы и наличия гомологии с мтДНК. Преимущества дрожжей в сравнении с прокариотическими микроорганизмами.
презентация [5,0 M], добавлен 27.03.2014Роль дрожжей в природных экосистемах, перспективы их использования в различных разработках. Морфология и метаболизм дрожжей, вторичные продукты. Методы приготовления препаратов микроорганизмов. Биотехнологии, промышленное использование дрожжей.
курсовая работа [1,5 M], добавлен 26.05.2009Извлечение гранул рогоза пропитанных нефтью из полевого эксперимента. Проверка на фитотоксичность почвы, в которую вносились гранулы, пропитанные нефтью и гранулы без нефти. Показатели пригодности воды из полевого эксперимента для жизни личинок комаров.
презентация [3,4 M], добавлен 30.11.2014Реакции кворум–сенсинга у грамположительных микроорганизмов. Влияние биологически-активных веществ на физико-химические характеристики клетки. Определение метаболитов в клетках и культуральной жидкости методом 1H-ЯМР-спектроскопии, ее результаты.
дипломная работа [2,4 M], добавлен 25.03.2017Изучение метода получения моноклональных антител путем слияния клеток мышиной миеломы с В-лимфоцитами. Основные среды, употребляемые при получении гибридов. Приготовление отдельных компонентов сред для культивирования. Процесс клонирования гибридом.
контрольная работа [40,6 K], добавлен 22.01.2015Антибиотики – продукты жизнедеятельности микроорганизмов, их модификации, обладающие высокой физиологической активностью по отношению к бактериям: классификация, химическое строение, группы. Методы выделения антибиотиков из культуральной жидкости.
контрольная работа [24,6 K], добавлен 12.12.2011Принятие решения о научном исследовании. Формулирование гипотезы, выбор методологии. Составление программы и плана исследования. Обработка результатов эксперимента. Подтверждение или опровержение гипотезы. Составление модели явления, ее верификация.
реферат [225,5 K], добавлен 10.01.2014Культивирование продуцентов биомассы: теоретические основы, принципы. Выделение продуцентов биомассы. Схема аппаратурного оформления процесса фильтрации на вакуум-барабанном фильтре с намывным слоем. Особенности процесса высаливания ферментных препаратов.
дипломная работа [712,2 K], добавлен 23.12.2012Структура научного метода. Сбор фактических данных. Создание гипотез или моделей. Составные части гипотезы, процесс элиминации. Проверка гипотезы путем спланированного лабораторного эксперимента. Роль сравнительного метода в эволюционных исследованиях.
реферат [61,8 K], добавлен 19.09.2009Изучение физико-химических и биологических процессов почвообразования, пространственно-временной организации почв. Методы определения микробной биомассы почвы. Оценка содержания микробной биомассы и газопродукционной активности чернозема разных экосистем.
отчет по практике [3,6 M], добавлен 16.05.2016Основные способы заражения куриных эмбрионов вирусом. Этапы получения субкультур: снятие клеточного слоя, отделение и посев клеток, методика заражения клеточных культур вирусом, учет результатов. Полуперевиваемые культуры клеток человека и животных.
презентация [4,2 M], добавлен 29.01.2015Современный ареал семейства Helicidae. Реакция брюхоногих моллюсков на изменение условий среды. Изменчивость рисуночно-окрасочных форм Cepaea nemoralis в периферийных популяциях Бреста. Методика культивирования Cepaea nemoralis в лабораторных условиях.
курсовая работа [1,7 M], добавлен 11.11.2012Представлены данные по биосинтезу дейтерий-меченных аминокислот L-фенилаланин-продуцирующим штаммом факультативных метилотрофных бактерий B. methylicum. В культуральной жидкости накапливаются и аланин, валин и лейцин (изолейцин).
статья [2,3 M], добавлен 23.10.2006История, распространение дрожжевых грибов в природе, их жизненные формы, промышленное использование. Дрожжевая клетка и ее компоненты. Морфология дрожжей, половое размножение и жизненные циклы, дифференциация. Дрожжи как возбудители заболеваний человека.
реферат [61,6 K], добавлен 21.10.2009