Методы утилизация музейных штаммов в условиях кафедры

Размещено на http://www.allbest.ru

Нормативные ссылки

СТРК 1.5-2000 - Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержащую стандартов.

СТ РК 1.12-2000 - Документы, нормативные, текстовые. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию.

ФССМК 1.1.06-2004 - Правила оформления учебно-методической литера-туры для издания в КазАТУ.

ГОСТ 10444.2-94 - Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества Staphylococcus aureus

ГОСТ Р 50454-92 - обнаружение и учет предполагаемых Е.coli.

ГОСТ 30726-2001 - Методы выявления и определения количества бактерий вида Е.coli.

ГОСТ 31659-2012 - Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода Salmonella.

ГОСТ 30519-97 - «Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода «Salmonella».



Определения

Утилизация - переработка - повторное использование или возвращение в оборот отходов производства или мусора.

Бактерии - группа (тип) микроскопических, одноклеточных организмов, обладающих клеточной стенкой, но не имеющих оформленного ядра (роль его выполняет молекула дезоксирибонуклеиновой кислоты - нуклеоид), лишенных хлорофилла и пластид, размножающихся делением. Бактерии широко распространены в природе (вызывают гниение, брожение и т. д.); некоторые бактерии используются в сельском хозяйстве (например азотобактер), для микробиологического синтеза, в бродильном, кожевенном производстве и другие; болезнетворные (патогенные) бактерии - возбудители многих болезней человека, животных и растений (тифа, холеры, туберкулеза, чумы, бактериоза риса, гоммоза хлопчатника в пр.)

Микроорганизмы, (микробы) - собирательное название группы живых организмов, которые слишком малы для того, чтобы быть видимыми невооружённым глазом (их характерный размер - менее 0,1 мм). В состав микроорганизмов входят как безъядерные (прокариоты: бактерии, археи), так и эукариоты: некоторые грибы, протисты, но не вирусы, которые обычно выделяют в отдельную группу. Большинство микроорганизмов состоят из одной клетки, но есть и многоклеточные микроорганизмы, точно также как и есть некоторые одноклеточные микроорганизмы, видимые невооружённым взглядом, например Thiomargarita namibiensis, представители рода Caulerpa (являются гигантскими поликарионами). Изучением этих организмов занимается наука микробиология.

Культивирование - разведение, выращивание растений, злаков, растительных клеток, тканей, микроорганизмов, животных или органов в искусственных условиях.



Обозначения

г - грамм

М - молярность раствора

Мг - миллиграмм

Мкг - микрограмм

Мкл - микролитр

Мл - миллилитр

Мм - миллиметр

Нм - нанометр

об/мин. - количество оборотов в минуту

рН - водородный показатель - величина, характеризующая концентрацию ионов водорода и кислотность среды

С - градус



Сокращения

мин. - минута

сек. - секунда

др. - другие

пит.ср. - питательные среды

дист.вода. - дистиллированная вода



Введение

Утилизация - использование ресурсов, не находящих прямого применения по назначению, вторичных ресурсов, отходов производства и потребления.

Бактерии (от греч. bacteria -- палочка) - одноклеточные организмы, характеризующиеся разнообразной формой и довольно сложной структурой, отвечающей многообразию их функциональной деятельности. Термин «бактерия» употребляется для обозначения всех одноклеточных микроорганизмов, относящихся к шизомицетам, и в более узком смысле - для наименования бесспоровых палочковидных форм. Бактерии бывают различной формы: шаровидные - кокки, палочковидные - собственно бактерии или бациллы, извитые - вибрионы и спириллы. Размножаются простым поперечным делением. Бактерии являются гаплоидными клетками. В состав бактериальной клетки входит капсула, клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, цитоплазма, где располагаются мезосомы, рибосомы, нуклеоид, и включения. Некоторые бактериальные клетки имеют жгутики и образуют споры. В отличие от животных клеток такие внутренние структуры бактериальной клетки, как мезосомы, рибосомы, нуклеоид, не имеют мембран, отграничивающих их от цитоплазмы. По способу питания бактерий делят на автотрофов и гетеротрофов, по способу дыхания - на аэробов и анаэробов.

Тема моей курсовой работы « методы утилизация музейных штаммов в условиях кафедры ». Я работаю с такими штаммами как Е.coli, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus.

При культивировании микроорганизмов важным этапами является:

- стерильность;

- правильный подбор питательной среды;

- приготовление питательной среды;

- правильно произвести посев;

- обеспечение температуры;

- утилизация.

Существуют следующие методы утилизации:

- утилизация автоклавированием;

- утилизация химическими реагентами.

Целью данной курсовой работы является:

- закрепление и углубление знаний;

- изучение различных методов утилизации музейных штаммов.

Задачей данной курсовой работы является:

- применение различных методов утилизации музейных штаммов в условиях кафедры;

- показать знания и состояние изученности избранной темы;

- соблюдение правил техники безопасности.



1. Основная часть

1.1 Характеристика Е.coli

Кишечная палочка (Е.coli) является грамотрицательные , факультативно анаэробные, палочковидные бактерии, которые обычно встречаются в нижнем кишечнике из теплокровных организмов (эндотерм).

Кишечная палочка и другие факультативные анаэробы составляют около 0,1% кишечной флоры. Клетки могут жить вне организма в течение ограниченного периода времени, что делает их идеальным индикатором организмов для тестирования проб окружающей среды для фекального загрязнения . Существует, все больше исследований, экологически стойких Е.coli , которые могут выживать в течение длительных периодов времени вне хозяина.

Бактерия может быть легко и недорого, выращена в лабораторных условиях, и интенсивно исследуют уже более 60 лет. Е. coli является наиболее изученным прокариотически модельным организмом , и важным видом в области биотехнологии и микробиологии , где он служит в качестве организма-хозяина для большинства работы с рекомбинантной ДНК .

Роль в биотехнологии.

Из-за своей долгой истории лабораторной культуры и простоты манипуляций, Е. coli также играет важную роль в современной биологической инженерной и промышленной микробиологии. Работа Стэнли Норман Коэн и Герберт Бойер в Е. coli , с помощью плазмиды и ферментов рестрикции для создания рекомбинантных ДНК , стал основой биотехнологии [1].

Кишечная палочка очень универсальный штамм для производства гетерологичных белков, и были разработаны системы различных экспрессии белка которые позволяют производить рекомбинантные белки в кишечной палочке . Одним из первых полезных применений рекомбинантной ДНК в биотехнологии было - Е.coli для производства человеческого инсулина .

Е. coli используют в развитии вакцин, биологической очистки, в производстве биотоплива, в производстве иммобилизованных ферментов.

Долговременный эксперимент по эволюции E. coli -- уникальный эксперимент по эволюции бактерии E. coli в искусственных условиях, проведённый группой под руководством Ричарда Ленски в университете штата Мичиган. В процессе эксперимента прослежены генетические изменения, происходившие в 12 популяциях E. Coli на протяжении 50 000 поколений. Эксперимент начался 24 февраля 1988 года и продолжается более 20 лет [6]. лаборатория музейный штамм кишечный

За время эксперимента обнаружен широкий спектр генетических изменений. Наиболее поразительной адаптацией стала появившаяся у одной из популяций способность усваивать цитрат натрия.

Патогенность.

Непатогенные бактерии E. coli, в норме в больших количествах населяющие кишечник, могут, тем не менее, вызвать развитие патологии при попадании в другие органы или полости человеческого тела. Если бактерия попадает через отверстие в ЖКТ в брюшную полость, может возникнуть перитонит. Попав и размножившись во влагалище женщины, бактерия может вызвать или осложнить кольпит. Попадание бактерии в предстательную железу мужчины может быть патогенезом острого или хронического бактериального простатита. В таких случаях в лечение включается применение антибиотиков, проводимое таким образом, чтобы не подавлять нормальную микрофлору кишечника, иначе возможно развитие дисбактериоза.

E. coli очень чувствительна к таким антибиотикам, как стрептомицин или гентамицин. Однако, E. coli может быстро приобретать лекарственную устойчивость [1].



1.2 Характеристика Staphylococcus aureus

Стафилококки делятся по пигментообразованию:

- стафилококк золотистый;

- стафилококк белый;

- стафилококк лимонно-желтый [2].

Стафилококк золотистый (лат. Staphylococcus aureus) -- шаровидная грамположительная бактерия рода стафилококк. Порядка 20 % населения являются постоянными носителями этой бактерии, которая может сохраняться на кожных покровах и слизистых оболочках верхних дыхательных путей.

Стафилококк золотистый может вызывать широкий диапазон заболеваний, начиная с лёгких кожных инфекций: угри, импетиго (может быть вызван также и Streptococcus pyogenes), фурункул, флегмона, карбункул, стафилококковый ожогоподобный кожный синдром (англ.) и абсцесс -- до смертельно опасных заболеваний: пневмония, менингит, остеомиелит, эндокардит, инфекционно-токсический шок и сепсис. Диапазон заболеваний простирается от кожных, мягких тканей, респираторных, костных, суставных и эндоваскулярных до раневых инфекций. Он до сих пор является одной из четырех наиболее частых причин внутрибольничных инфекций, часто вызывая послеоперационные раневые инфекции.

Стафилококки характеризуются сравнительно высокой устойчивостью к высушиванию, замораживанию, действию солнечного света и химических веществ (в высушенном состоянии жизнеспособны более 6 месяцев, в пыли -- 50 -100 дней). Повторное замораживание и оттаивание не убивает стафилококков, они не погибают в течение многих часов от действия прямых солнечных лучей. Стафилококковая инфекция может выдерживать нагревание при температуре 70 более одного часа. При температуре 80 стафилококки погибают через 10-60 минут, от кипячения -- мгновенно; 5% раствор фенола убивает стафилококков в течение 15-30 минут [2].

Впервые обнаружен в 1880 году в Шотландском городе Абердине Александром Огстоном в гное из хирургических абсцессов. Впервые описан в 1884 году Оттомаром Розенбахом .

Название бактерия получила благодаря своему внешнему виду под микроскопом: в отличие от большинства бактерий, которые бесцветны, Staphylococcus aureus имеет золотистый цвет, обусловленный пигментами из группы каротиноидов.

S. aureus -- бактерия-комменсал; она колонизирует кожу и поверхности слизистых (носа, глотки и влагалища). Приблизительно 25--40 % людей являются носителями S. aureus. Простое наличие микроба в носу или на коже не вызывает ответа организма.

Микроб золотистого стафилококка - это неподвижная грамположительная бактерия круглой формы. Такие бактерии поселяются на коже и слизистых оболочках человека и, ослабляя защитные силы организма, становятся причиной развития множества заболеваний, от легких до смертельно опасных [1].

1.3 Характеристика Salmonella Typhimurium

Сальмонеллы (лат. Salmonella) -- род неспороносных бактерий, имеющих форму палочек (длина 1--7 мкм, ширина около 0,3--0,7 мкм). Род назван в честь американского ветеринара Д. Э. Салмона (англ. Daniel Elmer Salmon; 1850--1914). Сальмонеллы являются грамотрицательными подвижными факультативно анаэробными палочками, которые, как правило, не ферментируют лактозу и патогенны для людей и животных при пероральном введении.

Грамотрицательны; факультативные анаэробы; большинство подвижно (благодаря перитрихиально, то есть по всей поверхности бактерии, расположенным жгутикам). На плотных питательных средах образуют круглые колонии серовато-белого цвета, при росте на бульоне -- помутнение и осадок. В мазках располагаются беспорядочно. Не образуют спор, имеют микрокапсулу, перитрихи. При отсутствии гравитации сальмонеллы объединяются в тонкую плёнку. Сальмонеллы сбраживают углеводы (глюкозу, маннозу, ксилозу, декстрин) и спирты (инозит, дульцит) с образованием кислоты, а иногда и газа. Сальмонеллы -- факультативные анаэробы. Оптимальными для роста являются температура 37 °С, рН среды 7,2--7,4. Они неприхотливы и растут на простых питательных средах [7].

Сальмонеллы могут выжить в течение недели вне живого организма. Они могут находиться в высушенных экскрементах более 2,5 лет. Ультрафиолетовое излучение и тепло ускоряет их смерть, они погибают при нагревании до 55 °C (131 °F) за полтора часа или до 60 °C (140 °F) в течение 12 минут. Для защиты от заражения сальмонеллой рекомендуется подогревать пищу по крайней мере десять минут при 75 °C (167 °F). Сальмонеллы не погибают при замораживании.

Поселяясь на стенках кишечника, «новоприбывшие» сальмонеллы выделяют токсин TTSS-1, который уничтожает конкурентов. При этом гибнет и часть самих сальмонелл. В просвете кишечника только 15 % производят этот яд, а на стенках кишечника -- почти все.

Salmonella typhimurium палочка Бреслау штамм бактерий, вызывающий у человека пищевые отравления при употреблении термически необработанной пищи [3].

1.4 Методы охраны труда и окружающей среды

Под охраной окружающей среды понимают совокупность международных, государственных и региональных правовых актов, инструкций и стандартов, доводящих общие юридические требования до каждого конкретного загрязнителя и обеспечивающих его заинтересованность в выполнении этих требований, конкретных природоохранных мероприятий по претворению в жизнь этих требований.

Основные современные задачи охраны окружающей среды - рациональное и плановое использование природных ресурсов, защита окружающей среды от загрязнения.

Охрана окружающей среды складывается из:

- правовой охраны, формулирующей научные экологические принципы в виде юридических законов, обязательных для исполнения;

- материального стимулирования природоохранной деятельности, стремящегося сделать ее экономически выгодной для предприятий.

В результате сложившейся неблагоприятной экологической обстановкой в Республике Казахстан, перед государством стала задача - разработка нормативных документов в области экологии. Одним из таких документов стала концепция экологической безопасности на 2004-2015 годы.

Концепция экологической безопасности представляет собой систему признанных государством принципов и приоритетов, на основании которых формируется внешняя и внутренняя политика, правовые и экономические механизмы, а также направления деятельности, необходимые для обеспечения и сохранения благоприятной окружающей среды и устойчивого экономического и человеческого развития, предупреждения стихийных бедствий и промышленных аварий .

Настоящая Концепция экологической безопасности разработана исходя из приоритетов Стратегии «Казахстан-2030» в соответствии со Стратегическим планом развития Республики Казахстан до 2010 года.

Обеспечение оптимального уровня экологической безопасности с достижением нормативных показателей состояния окружающей среды предполагает поэтапную реализацию положений данной Концепции.

В ходе проведения работ была максимально предотвращена возможность попадания лабораторного материала в окружающую среду.

Также для улучшения окружающей среды согласно имеющемуся законодательству РК в лаборатории проводятся следующие мероприятия:

1. Воздух после использования в лабораториях очищается воздушными фильтрами

2. Питательные среды и посевной материал после использования подвергаются автоклавированию, и лишь после этого утилизируются.

3. Лабораторная посуда перед утилизацией обрабатывается формалином или автоклавируется.

4. Зараженная лабораторная одежда сжигается.

Таким образом, для обеспечения здоровья населения и предотвращения заражения окружающей среды лаборатория действует в соответствии с установленными внутренними правилами и инструкциями.

Развитие человеческого общества и совершенствование сельскохозяйственного производства происходит в тесном взаимодействии с природой, так как материальной базой для сельского хозяйства является земля, вода, растительный мир, т.е. природные ресурсы.

Конституция Республики Казахстан в качестве одного из основных прав граждан закрепило право на охрану здоровья. Естественным производным из этого является и право работника на здоровые и безопасные условия труда, которые также в качестве отдельных принципов и в форме субъективного права закреплены в статьях Конституции, право на труд, на отдых, на обеспечение в старости и в случаи болезни .

Охрана труда - система обеспечения безопасности жизни и здоровья работников в процессе трудовой деятельности, включающая правовые, социально-экономические, организационно-технические, санитарно-гигиенические, лечебно-профилактические, реабилитационные и иные мероприятия .

Иными словами, охрана труда включает в себя неукоснительное соблюдение требований законодательства по охране труда, технике безопасности и производственной санитарии. Последние включает в себя, систему организационных, технических, гигиенических и санитарно-технических мероприятий, средства предотвращающие воздействия на работающих в опасных и вредных производственных условиях.

Правила по технике безопасности и производственной санитарии.

Все производственные помещения, оборудование, технологические процессы должны отвечать требованиям обеспечения здоровых и безопасных условий труда.

Требования к производственному оборудованию, равно как и к его размещению и организации рабочих мест, а также требования безопасности, предъявляемые к организации производственных процессов и направленные на предупреждение производственного травматизма, закрепляются в правилах по технике безопасности. Перечень допускаемых стандартами (санитарными нормами) уровней концентрации и других параметров, опасных и вредных производственных факторов, свойственных производственным процессам, содержит нормы производственной санитарии, предотвращающие возникновение профессиональных заболеваний работников.

Чтобы требования охраны труда соблюдались работниками, на администрацию возложено проведение инструктажа.

Помимо инструктажа рабочие (в зависимости от сложности профессии) знакомятся с правилами по охране труда применительно к своей профессии. В случае их нарушения или применения неправильных, опасных методов и приемов работы работник проходит внеплановый инструктаж.

Охрана труда включает обязательные предварительные при поступлении на работу и периодические медицинские осмотры и является в своей основе предупредительной мерой для предохранения здоровья сотрудников от воздействия вредных и опасных факторов.

При работе с химическими веществами соблюдают следующие правила предосторожности:

а) сухие реактивы надо брать только чистой фарфоровой ложкой или шпателем;

б) едкие щелочи (КОН, NаОН) берут тигельными щипцами. При измельчении кусков щелочи надевают перчатки и предохранительные очки;

в) химические реактивы подлежат хранению в сосудах с этикетками, на которых указаны названия веществ;

г) работая с кислотами и щелочами, нельзя допускать попадания их на руки, одежду и стол.

Требования по безопасному обращению с электрооборудованием:

* электроаппаратура в лаборатории устанавливается и заземляется специалистами-электриками.

* в помещении, где установлены приборы, должны храниться инструкции по их эксплуатации с кратким описанием каждого прибора.

* на полу перед каждым электроприбором должен лежать резиновый коврик.

* к электроприборам и установкам, находящимся под током, необходим свободный доступ.

* запрещается работать с электроприборами и приближаться к ним в темноте, хранить вблизи них одежду, легковоспламеняющиеся материалы.

* электроприборы должны находиться под техническим наблюдением специалиста-электрика .

Меры пожарной безопасности

Для предупреждения возникновения пожара воспрещается:

* курить в производственных помещениях (для курения необходимо выделить оборудованное место);

* оставлять бумагу и другие легковоспламеняющиеся материалы на шкафах и за шкафами, на радиаторах центрального отопления, вблизи электропроводов и электроприборов;

* оставлять не выключенными электроприборы, плитки и электроосвещения;

* нарушать электропроводку, заставлять шкафами и завешивать плакатами, газетами и.т.д., электропровода и электровыключатели;

* пользоваться неисправными или с открытой спиралью электронагревательными приборами (плитками, электропечами, рефлекторами);

* в лаборатории на видном и доступном месте должны находиться противопожарные средства: огнетушитель, кошма;

* администрация лаборатории обязана регулярно проверять знание сотрудниками правил техники безопасности, и вести запись об этом в специальном журнале, где указаны фамилия, имя, отчество сотрудника, дата проведения ознакомления с правилами техники безопасности и противопожарной безопасности и подпись сотрудника.

Охрана труда направлена на обеспечение условий для выполнения работы человеком без последствий для здоровья, сохранение жизни работников в процессе трудовой деятельности.

Закон РК «Трудовой кодекс» от 15 мая 2007 года, которым определены следующие основные принципы в области охраны труда:

* приоритет жизни и здоровья работника по отношению и результатам производственной деятельности;

* недопущение необратимых процессов вредного воздействия производственных факторов на жизнь и здоровье работника;

* установление единых требований в области охраны труда посредством принятия нормативных правовых актов;

* государственное регулирование вопросов безопасности и охраны труда;

Данный закон обеспечивает гарантии прав работников на безопасность и охрану труда, определяет обязанности работодателей и работников, устанавливает систему правовых взысканий за нарушение законодательства [4].

Для работы в лаборатории персонал носит специальную одежду - халаты. При процедурах, которые могут сопровождаться прямыми или случайными контактами с микроорганизмами, обязательно надевают специальные одноразовые резиновые перчатки. После использования перчатки снимают и моют руки. Каждый раз после различных манипуляций, а также в конце рабочего дня работники лаборатории моют руки. При необходимости предохраняют глаза и лицо от брызг кислот, щелочей, дезинфицирующих растворов, попадания инфицированного материала и источников искусственной и ультрафиолетовой радиации, во всех случаях надевают защитные очки, марлевые или ватные повязки и другие защитные средства. Защитную одежду вне лабораторных помещений, а именно в столовой, буфете, служебных помещениях, библиотеках, комнатах персонала не носят. В лабораторной зоне не принимает пищу, не пьют, не курят. Защитная лабораторная одежда не хранится в тех же шкафчиках или ящиках, что и личная.

В лабораторных помещениях всегда поддерживается порядок и чистота. Перед работой и после в ламинар-боксе гибридомной технологии, рабочие поверхности дезинфицируют и, обязательно, включают на 30 минут УФЛ лампы. После работы отработанный материал подвергается автоклавированию.

Примером правильного экологического подхода в решении производственных задач на этом предприятии можно отметить зеленые насаждения вокруг здания лаборатории [5].

1.5 Экологически опасные работы в лаборатории

1.5.1 Стерилизация ультрафиолетовым излучением

Ультрафиолетовые лампы используются для стерилизации (обеззараживания) воды, воздуха и различных поверхностей во всех сферах жизнедеятельности человека. В наиболее распространённых лампах низкого давления почти весь спектр излучения приходится на длину волны 253,7 нм, что хорошо согласуется с пиком кривой бактерицидной эффективности (то есть эффективности поглощения ультрафиолета молекулами ДНК). Этот пик находится в районе длины волны излучения равной 253,7 нм, которое оказывает наибольшее влияние на ДНК, однако природные вещества (например, вода) задерживают проникновение УФ.

Бактерицидное УФ излучение на этих длинах волн вызывает димеризацию тимина в молекулах ДНК. Накопление таких изменений в ДНК микроорганизмов приводит к замедлению темпов их размножения и вымиранию. Ультрафиолетовые лампы с бактерицидным эффектом в основном используются в таких устройствах, как бактерицидные облучатели и бактерицидные рециркуляторы.

Ультрафиолетовая обработка воды, воздуха и поверхности не обладает пролонгированным эффектом. Достоинство данной особенности заключается в том, что исключается вредное воздействие на человека и животных. В случае обработки сточных вод УФ флора водоемов не страдает от сбросов, как, например, при сбросе вод, обработанных хлором, продолжающим уничтожать жизнь ещё долго после использования на очистных сооружениях.

Ультрафиолетовые лампы с бактерицидным эффектом в обиходе часто называют просто бактерицидными лампами. Кварцевые лампытакже имеют бактерицидный эффект, но их название обусловлено не эффектом действия, как у бактерицидных лампах, а связано с материалом колбы лампы - кварцевым стеклом [9].

1.5.2 Воздействие на здоровье человека

Воздействие ультрафиолетового излучения на кожу, превышающее естественную защитную способность кожи к загару, приводит к ожогам.

Ультрафиолетовое излучение может приводить к образованию мутаций (ультрафиолетовый мутагенез). Образование мутаций, в свою очередь, может вызывать рак кожи, меланомукожи и преждевременное старение.

Ультрафиолетовое излучение средневолнового диапазона (280-315 нм) практически неощутимо для глаз человека и в основном поглощается эпителием роговицы, что при интенсивном облучении вызывает радиационное поражение - ожог роговицы (электроофтальмия). Это проявляется усиленным слезотечением, светобоязнью, отёком эпителия роговицы, блефароспазмом. В результате выраженной реакции тканей глаза на ультрафиолет глубокие слои (строма роговицы) не поражаются т. к. человеческий организм рефлекторно устраняет воздействие ультрафиолета на органы зрения, поражённым оказывается только эпителий. После регенерации эпителия зрение, в большинстве случаев, восстанавливается полностью. Мягкий ультрафиолет длинноволнового диапазона (315-400 нм) воспринимается сетчаткой как слабый фиолетовый или серовато-синий свет, но почти полностью задерживается хрусталиком, особенно у людей среднего и пожилого возраста. Пациенты, которым имплантировали искусственный хрусталик ранних моделей, начинали видеть ультрафиолет; современные образцы искусственных хрусталиков ультрафиолет не пропускают. Ультрафиолет коротковолнового диапазона (100-280 нм) может проникать до сетчатки глаза. Так как ультрафиолетовое коротковолновое излучение обычно сопровождается ультрафиолетовым излучением других диапазонов, то при интенсивном воздействии на глаза гораздо ранее возникнет ожог роговицы (электроофтальмия), что исключит воздействие ультрафиолета на сетчатку по вышеуказанным причинам. В клинической офтальмологической практике основным видом поражения глаз ультрафиолетом является ожог роговицы (электроофтальмия)

1.6 Методы утилизации музейных штаммов

Существуют следующие методы утилизации бактерии:

- утилизация автоклавированием;

- утилизация химическими реагентами (белизна, диохлор) ;

Утилизацию автоклавированием проводят следующим образом, использованные штаммы погружают в автоклав на 1,5 часа при 1 атмосфере. Утилизация автоклавированием является наиболее практичным и часто используемым методом.

Утилизацию химическими реагентами (белизна, диохлор) проводят следующим образом, 100 мл белизны разводят в 1 л дистиллированной воде. Затем питательные среды с посевами бактерии заливают белизной на 45-60 минут, после этого белизну выливают, а питательные среды с посевами бактерии выкидывают в целлофановый пакет. Утилизацию диохлором проводят следующим образом, питательные среды с посевами бактерии заливают раствором диохлора на 45-60 минут. После 45-60 минут раствор диохлора выливают, а питательные среды выкидывают в целлофановый пакет.

В данной курсовой работе, в дальнейшем музейные штаммы будут утилизировать белизной.

1.7 Экономическая эффективность

Экономическая эффективность показывает конечный полезный эффект от применения средств, производства и живого труда, отдачу совокупных вложений.

Основные задачи экономической эффективности:

- достижение максимального эффекта при заданном уровне затрат

- достижение заданного эффекта при минимальных затратах.

Расчеты затрат

№	Наименование	Ед.изм.	Кол - во	Цена, тг	Стоимость, тг
1	Спитр этиловый	л	2	130	550
2	Вата медицинская	кг	0,2	100	1000
3	Агар	гр	27	1500 за кг	1500
4	Моющие средства	-	-	-	500
5	Чашки Петри	шт	32	90	2880
6	Спиртовка	кг	1	605	605
7	Пипетки	кг
8	Пробирки	л
	Итого:				7035

Вывод: согласно данной таблице, на работу проводимой мною в лаборатории было затрачено 7035тг. Эти данные важны для проведения дальнейшей дипломной работы.



2. Собственные исследования

2.1 Стерилизация лабораторной работы

Материалом послужили: детергент, 70% спирт.

Стерилизация лабораторной посуды состоит из 2 этапов:

1) подготовка к стерилизации;

2) стерилизация.

1. Перед мытьем из пробирок и чашек инфицированную питательную среду выливают в канализацию. Затем загрязненную посуду моют в горячей воде с использованием детергента. Посуду со следами агара, желатина или другой питательной среды за сутки перед мытьем заливают 2-2,5% раствором едкого натра или едкого кали.

Лабораторную посуду стерилизуют:

а) сухим жаром при температуре 150°С соответственно 3ч.

б) в автоклаве при давлении 1,5 атм. в течение 60 минут, для уничто-жения споровой микрофлоры - 90 минут при 2 атм.

Стерилизация металлических инструментов. Металлические инструменты (ножницы, скальпели, пинцеты и пр.) стерилизуют в 70% растворе спирта, а затем в пламени спиртовой горелки. Такой способ стерилизации получил название прокаливания или фламбирования.

2.2 Наблюдение за ростом музейных штаммов - Е.coli, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus

Материалы и оборудование:

- штаммы Е.coli,

- Salmonella typhimurium,

- Staphylococcus aureus,

- чашки Петри,

- дист.вода,

- электронные весы,

- питательные среды - Бактагар Плоскирева,

- Стафилоккагар,

- Эндо,

- ламинар шкаф,

- термостат,

- петля,

- колбы,

- сушильный шкаф

Приготовление питательных сред - Бактагар Плоскирева, Стафилококагар, Эндо.

Варка питательной среды осуществлялась на электроплите в стеклянной колбе. При приготовлении данной среды не используется потенциально опасных химических веществ. После приготовления питательной среды, с целью стерилизации ее автоклавируют при 0,7-0,9 атм. К работе с автоклавом допускаются сотрудники лаборатории, ознакомленные с правилами работы и достигшие 18 лет.

Следующим этапом работы является работа за ламинар боксом. При такой работе необходимо надеть халат, собрать волосы, снять с рук все присутсвующие украшения, желательно маску, для того чтоб нежелательные микроорганизмы не проникали на участок работы, следовательно снизить процент появления инфекции. Перед работой в ламинар боксе включается на 30 мин ультрафиолет, после того как пройдет 30 мин можно приступать к работе. Далее разливаем питательные среды в чашки Петри. После того как питательные среды застыли делаем посев. На питательной среде Бактагар Плоскирева делали посев - Salmonella typhimurium, на Стафилококагар делали посев - Staphylococcus aureus, на питательной среде Эндо делали посев - Е.coli. Затем поставили в термостат.

Спирт в спиртовую горелку нужно наливать только потушив спиртовку, иначе выделяемые спиртом пары могут воспламениться. Поджигать спиртовку исключительно спичками, запрещается поджигать одну спиртовку от другой, так же гасить спиртовку только посредством колпачка, не в коем случае нельзя дуть на нее, так как изначально перед работой все обрабатывается спиртом, как руки работающего так и поверхность всего ламинар бокса. Топлива в спиртовку можно наливать не больше половины, потому что сосуд может перегреться и разбиться, что может нанести вред персоналу.

Заведомо в ламинар бокс подаются все необходимые стерильные приборы (пинцет, игла) и посуда ( колба с питательной средой , чашки Петри) и биологический объект. Затем приступаем к выполнению работы.

По окончании работы убирают рабочее место.

2.4 Результаты

Через три дня был рост в чашках Петри со штаммами Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus. Среда Эндо была приготовлена не правильно, т.к она не застыла и не было роста.



Заключение

В лаборатории, где выполняется данная работа рабочим персоналом соблюдаются все правила работы в лаборатории и техника безопасности. В целом задачи данной курсовой работы рассмотрены. В дальнейшем по данной работе планируется сделать посевы с данными штаммами на других средах (МПА, МПБ), анализировать росты, как правильно хранить, проводить утилизацию с помощью химических реагентов. Утилизация с помощью белизны окружающей среде ни какого вреда не наносит. Белизна является также антибактериальным веществом, и с помощью него проводят различные дезинфицирующие мероприятия в учебных заведениях, в детских садах, в больницах и т.д.



Список использованной литературы

1. Материал из сайта http://ru.wikipedia.org/wiki

2. Материал из сайта http://narmed24.ru/zolotistyj-stafilokokk/

3. Материал из сайта http://www.coolreferat.com

4. Материал из сайта http://online.zakon.kz/Document/?doc_id=31112996

5. Т.Ф.Михнюк «Охрана труда и основы экологии» Минск Высшая школа Год: 2007. -35 с.

6. 2 Егорова, Клунова, Живухина. «Основы биотехнологии»; М. 2003.- 136 с.

7. «Атлас микробиологии, вирусологии и иммунологии» Воробьёв А.А., Быков А.С.-87 с.

Размещено на Allbest.ru

...