Одержання, характеристика і використання ферментів отрути щитомордника звичайного
Розробка методів виділення з отрути щитомордника й очищення фібрин(оген)олітичного ферменту активатора протеїну С та інгібітора агрегації тромбоцитів. Дослідження фізико-хімічних властивостей ферментів, визначення їх дії на компоненти системи гемостазу.
| Рубрика | Биология и естествознание |
| Вид | автореферат |
| Язык | украинский |
| Дата добавления | 22.06.2014 |
| Размер файла | 45,0 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Выделен, очищен и охарактеризован активатор протеина С, содержащийся в яде щитомордника обыкновенного. Показано, что для активации протеина С активатором не требуются тромбин, тромбомодулин и кальций, что совпадает со свойствами активаторов протеина С, выделенных из яда змей других видов. Отмечена высокая скорость активации протеина С полученным ферментом, что позволяет использовать его в клинической практике для определения уровня протеина С.
Показано, что активатор протеина С, выделенный из яда Agkistrodon halys halys, также, как и фирменный препарат активатора протеина С - “Рrotac” (“Pentapharm”, AG, Швейцария), выделенный из яда Agkistrodon contortrix contortrix, эффективно активирует протеин С в тесте АЧТВ. Для точного определения уровня протеина С используют и хромогенный субстрат протеина С - Хромозим 236. Основные преимущества данного метода заключается в легком и быстром тестировании больших количеств образцов с использованием микропланшетов. На основе препарата активатора протеина С разработан диагностический тест для определения уровня протеина С в плазме крови в норме и в случае нарушения функционирования системы гемостаза
Из яда щитомордника обыкновенного выделен и частично охарактеризован ингибитор агрегации тромбоцитов. Проверено действие ингибитора агрегации тромбоцитов на АДФ-стимулируемую агрегацию тромбоцитов. Показано значительное замедление скорости агрегации при введении полученного препарата в обогащенную тромбоцитами плазму крови.
На основе ферментов яда щитомордника создан комплекс диагностических тестов для определения состояния системы гемостаза при патологиях. Разработан алгоритм диагностики состояния системы гемостаза при сахарном диабете и тест, позволяющий прогнозировать тромботические осложнения при регматогенном отслоении сетчатки глаза в постоперационный период. Тесты, созданные на основе ферментных препаратов яда змей, являются информативными, высокочувствительными, простыми в использовании.
Ключевые слова: яд щитомордника обыкновенного, фибриногенолитический фермент, активатор протеина С, ингибитор агрегации тромбоцитов, ДВС-синдром, гемостаз, диагностические тесты.
SUMMARY
Gornitskaya O.V. Isolation, characteristic and utilization of the enzymes from Agkistrodon halys halys venom. - Manuscript.
Thesis for a scientific degree of candidate of biological sciences by speciality 03.00.20 - Biotechnology. - A.V. Palladin Institute of Biochemistry of National Academy of Sciences of Ukraine. Kyiv, 2002.
The thesis is devoted to isolation, characteristic and utilization of the enzymes from Agkistrodon halys halys venom.
It is found that its venom contains the enzymes which act on the blood coagulation system and fibrinolysis, such as the thrombin-like enzyme Ancistron-H, protein C activator, fibrinogenolytic enzyme and inhibitor of the platelet aggregation. The simple and effective methods of isolation and purification of these enzymes have been developed. The possible fields of utilization of these enzymes have been investigated.
It is shown that fibrinogenolytic enzyme is -fibrinogenase. It digests A-chain of fibrinogen. According to its properties this enzyme corresponds to fibrinogenases from other species of Agkistorodon. It is possible that this enzyme may be used for study of structural and functional interactions of blood coagulation and fibrinolysis systems and for medical needs, as well.
Protein C activator has been characterized. It is shown that thrombin, thrombomodulin and calcium are not necessary for protein C activation by activator. It is correlated with properties of protein C activators from snake venom of other species. The rate of protein C activation is high under protein C activator action. It allows utilization of this enzyme for protein C level determination in blood plasma.
The diagnostic test for protein C level determination in blood plasma is developed on the base of protein C activator preparate.
The action of platelet aggregation inhibitor on ADP-dependent platelet aggregation is examined. It is shown that the rate of platelet aggregation became slow after addition of inhibitor to platelet-rich blood plasma.
Complex of diagnostic tests for determination of haemostasis system parameters under different pathologies is developed on base of snake venom enzymes. Tests are informative, high-sensitive and simple for use. Algorithm of the diagnostic of the haemostasis system state with diabetes is created. The test for prognosis of thrombotic complications at eye's regmatogenic retinal detachment in postoperative period is elaborated.
Key words: Agkistrodon venom, fibrinogenolytic enzyme, protein C activator, platelet aggregation inhibitor, DIC, haemostasis system, diagnostic tests.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Історія дослідження і вивчення ферментів. Структура і механізм дії ферментів. Крива насичення хімічної реакції (рівняння Міхаеліса-Ментен). Функції, класифікація та локалізація ферментів у клітині. Створення нових ферментів, що прискорюють реакції.
реферат [344,3 K], добавлен 17.11.2010Особливості та основні способи іммобілізації. Характеристика носіїв іммобілізованих ферментів та клітин мікроорганізмів, сфери їх застосування. Принципи роботи ферментних і клітинних біосенсорів, їх використання для визначення концентрації різних сполук.
реферат [398,4 K], добавлен 02.10.2013Участь супероксиддисмутази в адаптаційних процесах рослинних організмів. Пероксидаза як компонент ферментативного антиоксидантного захисту. Активність каталази в рослинних об'єктах за дії стресорів. Реакція антиоксидантних ферментів на стрес-чинники.
дипломная работа [1,7 M], добавлен 11.02.2014Історія розвитку та застосування біотехнології - комплексу наук, технічних засобів, спрямованих на одержання і використання клітин мікроорганізмів, тварин і рослин, а також продуктів їх життєдіяльності: ферментів, амінокислот, вітамінів, антибіотиків.
реферат [27,9 K], добавлен 07.12.2010Застосування ферментів в промисловості. Протеїнази, амілази і амілоглікозидази. Іммобілізовані ферменти. Добування хімічних речовин з біологічної сировини. Добування металів за допомогою біотехнологій. Біогеотехнологія.
реферат [196,6 K], добавлен 04.04.2007Антиоксидантна система як захист проти вільних радикалів. Гістамін:історія вивчення, структура, шляхи синтезу і вивільнення. Визначення активності супероксиддисмутази, каталази, глутатіонпероксидази, вплив на неї наявності гістаміну в нирці щура.
курсовая работа [1,7 M], добавлен 22.06.2014Фундаментальні принципи, методи, перспективи розвитку і застосування нанотехнологій з використанням мікроорганізмів та продуктів їх життєдіяльності. Виробництво наноматеріалів за допомогою мікроорганізмів, використання їх специфічних властивостей.
курсовая работа [1,2 M], добавлен 21.01.2016Основні види павуків та павукоподібних. Зовнішня будова павука. Нервова, травна, видільна, кровоносна, дихальна та статева системи павуків. Протоки павутинних залоз. Живлення напіврідкою їжею. Виготовлення різноманітних ліків з отрути павуків.
курсовая работа [2,6 M], добавлен 22.01.2015Изучение особенностей герпетофауны Новосибирской области. Предубежденное отношение людей к амфибиям и рептилиям. Места обитания представителей класса Пресмыкающиеся: прыткой и живородящей ящериц, узорчатого полоза, обыкновенного ужа, щитомордника, гадюки.
презентация [1,5 M], добавлен 21.12.2013Сутність та завдання генної інженерії. Використання ферментів рестрикції у методі рекомбінантних ДНК. Механізми клонування генів і трансформації еукаріот. Методи гібридизації соматичних клітин. Структура та функції гена. Протиріччя критеріїв алелізму.
презентация [3,1 M], добавлен 04.10.2013Гістамін: історія вивчення, властивості, структура, шляхи синтезу і вивільнення. Активність супероксиддисмутази, каталази, глутатіонпероксидази у нирках інтактних тварин. Зміна активності у нирках щура за дії гістаміну у концентраціях 1 та 8 мкг/кг.
курсовая работа [1,5 M], добавлен 20.07.2014Теоретичні основи отруєння і взаємодія зоотоксинів на організм живих істот. Проблеми і науковий пошук шляхів вирішення морфолого–біологічних особливостей гадюки степової та вплив отрути на організм людини. Перша допомога від укусів отруйних тварин.
контрольная работа [691,6 K], добавлен 26.07.2014Основні джерела антропогенного забруднення довкілля. Вплив важких металів на фізіолого-біохімічні процеси рослин, зміни в них за впливу полютантів. Структура та властивості, функції глутатіон-залежних ферментів в насінні представників роду Acer L.
дипломная работа [950,6 K], добавлен 11.03.2015Дослідження фізичних, хімічних і біологічних чинників, що впливають на мутагенез. Огляд перших уявлень про стрибкоподібні зміни спадкових властивостей. Аналіз проблем мутаційної мінливості рослин. Характеристика хвороб, викликаних соматичними мутаціями.
реферат [3,2 M], добавлен 17.10.2012Характеристика фізико-географічних умов району дослідження. Флора судинних рослин правобережної частини долини р. Малий Ромен, народогосподарське значення та охорона. Використання результатів дослідження в роботі вчителя біології загальноосвітньої школи.
дипломная работа [48,4 K], добавлен 21.07.2011Біотехнологічні процеси з використанням ферментів. Характеристика грибів Penicillium funiculosum, їх морфолого-культуральні ознаки, біохімічні властивості. Синтез вортманніну, що може бути використаний як протипухлинний засіб. Методи рекомбінантних ДНК.
курсовая работа [607,3 K], добавлен 22.03.2015Накопичення продуктів вільнорадикального окислення ліпідів і білків. Ефективність функціонування ферментів першої лінії антиоксидантного захисту. Вільнорадикальні процеси в мозку при експериментальному гіпотиреозі в щурів при фізичному навантаженні.
автореферат [84,7 K], добавлен 20.02.2009Стан забруднення атмосферного повітря у Рівненський області. Оцінка екологічного стану озера Басів Кут. Вимоги до якості води і методи гідрохімічних досліджень визначення органолептичних властивостей води. Дослідження якості поверхневих вод озера.
учебное пособие [739,8 K], добавлен 24.10.2011Загальна характеристика та життєві форми комах. Ряд Одноденки (Ephemeroptera): опис властивостей та специфічні ознаки, поширення та особливості біології. Личинки одноденок, їх життєві форми. Використання личинок одноденок для визначення якості води.
контрольная работа [901,0 K], добавлен 21.09.2010Біологічне значення процесів виділення. Анатомічна будова, структурна і функціональна одиниця нирки. Фільтраційно-реабсорбційна теорія утворення сечі нирками, механізм канальцевої реабсорбції та виведення сечі. Гормональна регуляція діяльності нирок.
реферат [14,5 K], добавлен 29.11.2009
