Особенности строения и дифференциации половых клеток

Размещено на http://www.allbest.ru

Размещено на http://www.allbest.ru

Введение

Животные и растительные организмы размножаются половым и бесполым способами. При бесполом размножении новая особь возникает из отдельной части тела (сомы) взрослого животного путем почкования. При половом размножении особь развивается из половой клетки, обладает потенцией к формированию новых половых клеток и множества соматических клеток. Ли такое многообразие потенций исключительным свойством половой клетки или тотипотентною может быть и соматическая клетка? Бесполое размножение у некоторых животных и растений свидетельствует о том, что в принципе соматические клетки могут воспроизвести все части тела взрослой особи. Однако при вегетативном размножении новая особь развивается не из отдельной клетки, а из большой группы клеток, поэтому в данном случае не приходится говорить о тотипотентность отдельной клетки.

Вопрос о сходстве и различиях между половых и соматических клеток была поставлена в конце XIX века, став предметом дискуссий и многочисленных исследований на протяжении последующих десятилетий. Такой большой интерес к этой проблеме понятен, так как в ней нарушены основы наследования, и сама эта проблема касается области, в которой эмбриология прикасается к науки о наследственности - генетики. В генетическом плане суть этой проблемы заключается в том, чтобы понять, каким образом разнообразие признаков и свойств многоклеточного организма определено (продетерминоване) в половых клетках и каким путем эти наследственные задатки реализуются в виде признаков и свойств и передаются половым клеткам потомства. В эмбриологическом плане сущность проблемы заключается в выяснении происхождения половых клеток в процессе индивидуального развития, их взаимоотношений с соматическими клетками, в изучении их тонкой морфологической структуры и особенностей их биохимических и физиологических свойств.

Период собственного развития половых клеток называют гаметогенеза (gametes - мужчина, gamete - жена) или предзародышным развитием. Развитие яйцеклетки назван оогенезом, развитие сперматозоида - сперматогенезом.

Развитие половых клеток включает следующие этапы:

1. Отделение первичных половых клеток (гоноциты) от других (соматических) клеток организма.

2. Период размножения половых клеток, называемых на этой стадии Гонио (женские половые клетки - оогонии, мужские - сперматогонии).

3. Период роста, в ходе которого женские половые клетки именуются ооцитами I порядка, а мужские половые клетки - сперматоциты I порядка; в это время хромосомы обоих типов клеток проходят стадии профазы мейоза.

4. Период созревания, в ходе которого мейотического деления: после первого деления образуются ооциты и сперматоциты II порядка, после второго - соответственно зрелая яйцеклетка (яйцо) и сперматиды.

1. История

В 1880 г. Нуссбаум указал на различие между половыми и соматическими клетками и высказал идею об особом для половых клеток «зародышевый» (зачаточный) путь их образования в онтогенезе, которая была развита А. Вейсманом.

Из идеи зачаточного пути следовало, что линии развития половых и соматических клеток в онтогенезе должны разъединиться очень рано, есть предшественники половых клеток отделяются на самых ранних этапах эмбрионального развития. И действительно, были описаны случаи, когда будущие половые клетки эмбриона (первичные половые клетки) очень рано отличались по ряду признаков от других (соматических) клеток. Первичные половые клетки (их называют также гоноциты) обладают характерными морфологическими признаками: имеют несколько более крупные размеры, чем размеры окружающих соматических клеток, большое ядро, более выраженную базофилия, отличаются по некоторым гистохимическими показателям (реакция на ЩФ). В цитоплазме гоноциты были обнаружены характерные ультраструктуры, получивших название эктосом («половых детерминант», по терминологии А. Вейсмана). В дальнейшем именно их присутствие стало основным признаком первичных половых клеток. Возникла гипотеза, согласно которой эктосомы определяют тотипотентные свойства половых клеток. Эти структуры были детально исследованы на широком круге объектов с применением электронного микроскопа и цитохимических методов. В их составе была обнаружена РНК, кислые белки. Оказалось, что структуры типа «половых детерминанте» не встречаются в соматических клетках, за исключением низших животных, в которых они обнаружены в особых видах клеток взрослого, способных превратиться в половые.

В последние годы большинство исследователей склонны считать, что структуры, известные как «половые детерминанты», можно использовать как признаки («маркеры») для идентификации первичных половых клеток, но вряд ли их следует рассматривать как сами факторы, определяющие (детерминуют) потенции этих клеток (их тотипотентность). Вопрос о том, какие клеточные компоненты гоноциты ответственные за их тотипотентность, пока не решен.

Основываясь на цитологических характеристиках и на результатах экспериментов по удалению, выжиганию, пересадкой участков эмбриона, содержащих клетки с такими признаками, в ряде случаев удалось найти места возникновения гоноциты в эмбрионе и проследить их последующее развитие. В любом случае половые клетки возникают довольно рано, то есть проделывают сложный путь развития, прежде чем станут способны к оплодотворению и дадут начало новой особи.

Отделение первичных половых клеток (гоноцитов) от других (соматических) клеток организма.

2. Предзародышевое развитие

У некоторых организмов на самых ранних стадиях развития удается обнаружить участки яйца, из которых в дальнейшем разовьются половые клетки. Так, у многих насекомых, например у двукрылых, на заднем полюсе яйца еще до начала развития зародыша видны скопления эктосом («половых детерминант»). Этот участок ооплазмы (половая плазма) в результате следующих распределений яйца проявляется в первичных половых клетках.

В яйцах лошадиной аскариды (круглые червиы) первичная половая клетка полностью отделяется от других - соматических - клеток уже после четвертого разделения яйцеклетки, в веслоногие рака (циклопа) половую клетку, развивающейся можно виддкремиты очень рано: по присутствию в ней гранул - эктосом - после первого раздела яйцеклетки. При последующих разделах эти гранулы каждый раз попадают только в одну из клеток зародыша, а после 6-го деления эктосомы распределяются между двумя дочерними клетками, и представляют собой первичные половые клетки, уже четко отличаются от соматических.

У позвоночных первичные гоноциты отделяются на несколько более поздних стадиях. Однако у бесхвостых амфибий, как и у насекомых, половая плазма отделяется очень рано, у неоплодотворенных яйце.

У хвостатых амфибий в отличие от бесхвостых в неоплодотворенные яйце не удается найти структур типа «половых детерминант». Гоноциты этих животных впервые оказываются значительно позже, чем у бесхвостых амфибий, - только после формирования основных систем органов и незадолго до вылупления личинки. Очевидно, они дифференцируются из мезодермы так называемой боковой пластинки.

У высших позвоночных (рептилий, птиц и млекопитающих) гоноциты были найдены на границе зародышевой и позазародковои областей эмбриона, на стадиях, когда он состоит из нескольких тысяч клеток. У млекопитающих, согласно последним данным, гоноциты отделяются значительно раньше.

Были обнаружены в раннем эмбриогенезе первичные гоноциты единственным источником половых клеток половозрелой особи, или половые клетки дополнительно возникают из соматических на более поздних стадиях? У низших животных - губок, кишечнополостных, плоских и кольчатых червей - запас половых клеток пополняется в течение всего жизненного цикла. Так, хотя у кольчатых червей первичные гоноциты рано отделяются, удаления гонад даже у взрослых животных не делает их стерильными, поскольку половые клетки возникают из особых мало дифференцированных «резервных» клеток - необластив. В ресничных червей раннего образования половых клеток не наблюдается; клетки типа необластив, пополняемые течение всей жизни животного, могут формировать новые половые клетки. У кишечнополостных также резервные клетки типа необластив, способных перемещаться между дифференцированными эпителиально-мышечными клетками экто-и энтодерма. Их называют интерстициальными (i-клетками). Из этих клеток образуются различные типы специализированных клеток, в том числе половые. Как видно i-клетки сначала рассеяны, но потом концентрируются на вершине почки и превращаются в половые клетки. Процесс образования половых клеток происходит в течение всей жизни животного. Удаление гонад или даже целых половых особей медуз у взрослого полипа никогда не приводят к его стерильности: удаленные части быстро регенерируют.

У губок половые клетки образуются на всю жизнь. Очевидно, они возникают из двух источников: из подвижных амебоидных археоцитов, сходных с i-клетками кишечнополостных и необластомы червей, и из специализированных воротничковых жгутиковых клеток - хоаноциты. Полагают, что хоаноциты, которые превращаются в половые клетки, сначала проходят стадию археоцитов.

Долгое время оставалось спорным вопрос о том, есть ли у более высокоорганизованных животных - моллюсков, членистоногих, иглокожих, позвоночных - первичные гоноциты единственным источником половых клеток: или как у низших форм, гоноциты могут возникать на более поздних стадиях развития из соматических клеток. На этот вопрос можно ответить лишь экспериментально, выяснив, будет организм иметь половые клетки после удаления (разрушения) первичных гоноциты, например, после локального обжига областей, содержащих гоноциты, или соответствующие области ооплазмы. Так, облучением удается выжечь половую плазму в яйцах насекомых и зону первичных гоноциты в яйцах птиц. Зародыши после таких операций развиваются, но неизменно лишены половых клеток (стерильные).

Проводились также опыты по пересадке первичных гоноциты от одной генетической расы шпорцев лягушки к другой; у реципиента перед этим собственные гоноциты были удалены. Все развитые у реципиента половые клетки носили: признаки гоноциты донора. У мышей описана мутация локуса-т, что приводит к гибели всех гоноциты во время их миграции. В таких мышей половые клетки в гонады отсутствуют.

Половой зачаток, или гонобласты (blаstos - зачаток, росток), образуется до возникновения зародышевых листков. Клетки гонобласты сначала наблюдаются среди клеток внутреннего и среднего зародышевых листков. После образования зачатка гонады из среднего зародышевого листка в ней не наблюдается первичных половых клеток.

Эти опыты показали, что единственный источник половых клеток у позвоночных и у беспозвоночных, кроме губок, кишечнополостных, плоских и кольчатых червей, - первичные гоноциты, отделяющиеся на ранних стадиях развития. Иными словами, клетки зародыша дифференцируются на половые и соматические однократно, на ранних стадиях.

Некоторые авторы и сейчас допускают возможность образования половых клеток (например, у рыб) на поздних стадиях развития или даже у взрослого организма из эпителия гонады, что в литературе часто именуется неудачным термином «герминативный» или зачаточный, эпителий. В ряде случаев описывалось «выселения» из этого слоя половых клеток. Рассматривая эти данные, трудно полностью исключить возможность, что авторы имели дело не с первичными половыми клетками, а с потомками первичных гоноциты, которые вселились в эпителий гонады.

3. Миграция первичных половых клеток

Каким бы ни был источник половых клеток, они проходят долгий путь развития, прежде чем стать зрелыми, способными к оплодотворению половыми клетками. Во всех случаях, в том числе и у позвоночных, зачатки гонад возникают значительно позже, чем гоноциты, и последние (подобно гоноциты губок и кишечнополостных) перед этим блуждают в теле эмбриона. Как первичные гоноциты высших животных, так и резервные клетки типа интерстициальных (i-клетки кишечнополостных) способны к самостоятельным передвижений.

Гоноциты куриного зародыша часть пути проходят вместе с током крови по эмбриональных кровеносных сосудах; позже, оказавшись поблизости от места возникновения зачатка гонады, они начинают двигаться активно, проползая через стенки сосудов и зачатка половой железы. По данным французских эмбриологов Э. Вольфа и Ф. Дюбуа, к этому этапу движения их привлекают химические вещества (по некоторым последним данным - белковой природы), выделяемые зачатками гонад. Неясно, однако, идет ли речь о прямом привлечения клеток - хемотаксис, или же просто об активации их движений.

Течение второго месяца эмбрионального развития человека первичные половые клетки проникают в кровеносные сосуды желточный мешок, переносятся током крови и активно мигрируют в закладки гонады. В гонадах первичные половые клетки окружаются поддерживающими или фолликулярными клетками, что относительно них выполняют трофическую функцию. Первичные половые клетки отличаются от других клеток большим количеством гликогена и щелочной фосфатазы.

Фазы овогенеза подобные фаз сперматогенеза. В развитии женских половых клеток выделяют три периода: размножение, рост и созревание.

У млекопитающих и человека периоды размножения и роста яйцеклеток происходят в фолликулах. Зрелый фолликул заполненный жидкостью, внутри его находится яйцеклетка. Во время овуляции стенка фолликула лопается, яйцеклетка попадает в брюшную полость, а затем, как правило, в трубы матки. Период созревания яйцеклеток происходит в трубах, именно здесь они и оплодотворяются.

4. Период размножения половых клеток

Период размножения женских половых клеток у человека наблюдается только в эмбриогенезе, в плодном периоде развития. После формирования яичника, имеет место в конце второго месяца эмбрионального развития, первичные половые клетки перестают размножаться и начинают дифференцироваться в оогонии. Подсчитано, что в настоящее время в двухмесячного эмбриона человека в яичнике находится около 600 тыс. половых клеток. Их количество увеличивается до пятого месяца развития, и в пятимесячного плода в яичнике насчитывается около 7 млн. оогониями. На последних месяцах внутриутробного развития, когда оогонии начинают дифференцироваться в ооциты, наблюдается массовая дегенерация оогоний, что ведет к уменьшению их количества. Этот процесс идет настолько интенсивно, что в новорожденной девочки в яичнике насчитывается около 1 млн. ооцитов. Из этого количества в семилетней девочки в яичнике остается около 300 - 400 тыс. ооцитов, а другие погибают и рассасываются.

Период размножения, интенсивно делятся митомитично овогонии - мелкие клетки с относительно крупным ядром и незначительным количеством цитоплазмы.

У млекопитающих и человека этот период заканчивается еще до рождения. Сформированы первичные овоциты сохраняются без изменений долгие годы.

5. Период роста

С наступлением половой зрелости организма отдельные ооциты первого порядка получают возможность продолжать рост, но большинство из них дегенерирует, погибает и рассасывается.

В период роста клетки увеличиваются, в цитоплазме клетки, в ее органоидах и мембранах происходят сложные морфологические и биохимические превращения. Каждый овоциты окружен мелкими фолликулярными клетками, которые обеспечивают его питания.

При оогенеза интенсивно синтезируется иРНК. Значительная часть его поступает в рибосомы и транслируется, обеспечивая белковые синтезы, непрерывно происходящие в это время, другая часть депонируется.

В период цитоплазматического роста (малый рост) в ооците синтезируется тот же набор белков, уже имелся в начале, есть в это время не появляется новые виды белков (за исключением желтка и, возможно, регуляторных белков в период трофоплазматичного роста ), а увеличивается количество самих белков ядра и компонентов цитоплазмы. В соматических клетках гистоны не накапливаются, потому что они синтезируются строго скоординировано с репликацией ДНК. Оогенез - уникальный случай накопления в цитоплазме больших запасов гистонов.

Во время роста ооцит накапливает большое количество органелл, запасы питательных веществ и источников энергии. Размеры ооцита возрастают и могут достигать огромных размеров (например, у птиц нагруженное желтком яйца в миллионы раз превышает исходные размеры ооцита).

Желток, - сложный комплекс, состоящий из липофосфопротеидив, что, Кристаллизуя, откладываются в ооплазмы в форме крупных гранул и иногда пластинок. Хорошо изучено строение компонентов желтка в желточный пластинках амфибий.

Структурной единицей желтка является комплекс из двух сочетаний: липовителина и фосвитина. При оогенеза интенсивно синтезируется иРНК. Определенная часть его поступает в рибосомы и транслируется, обеспечивая белковые синтезы, непрерывно происходящие в это время, другая часть депонируется.

В зрелом ооците Xenopus laevis белки рибосом составляют 4 мкг от общего содержания белков ооплазмы, или 16% от всех белков, синтезируемых ооцитом. В период наиболее активного синтеза рРНК в ядрышке доля рибосомного белка от всего белка, синтезируемого ооцитом, может превышать 30%. В состав желтка накапливается в ооците, входит примерно 90% всего белка.

Другой важный для клетки белок, накапливающийся ооцитом - тубулина. Его количество возрастает пропорционально росту ооцита, достигая 1% всего растворимого белка ооплазмы. В ходе оогенеза увеличивается также количество цитоплазматических мембран и митохондрий. Примерно 90% белков, входящих в состав митохондрий, синтезируется вне их, на полисомах цитоплазмы, а иРНК для них образуется в ядре. В процессе оогенеза отмечен значительный синтез этих белков в цитоплазме, что, очевидно, используются для построения новых митохондрий. В ооците синтезируется и многие другие виды белка, однако конкретных сведений о темпах и соотношение этих синтезов пока мало.

У лягушки диаметр молодого ооцита около 50 мкм, а зрелого - до 2000 мкм, что соответствует увеличению объема в 64000 раз. Рост ооцита в ней идет сравнительно медленно: только двухлетние особи достигают половозрелости. Несравненно быстрее растет яйцо у птиц. Например, у курицы за последние шесть дней перед выпадением ооцита из яичника объем яйца увеличивается в 200 раз. Яйца млекопитающих меньше по размеру; диаметр яйца мыши возрастает от 20 до 70 мкм, что соответствует увеличению объема более чем в 40 раз.

Во время роста ооцита первого порядка отчетливо видны две фазы роста: превителогенез, или фаза малого роста, и вителогенез, или фаза большого роста.

6. Превителогенез

Превителогенез, или цитоплазматический рост характеризуется увеличением массы ядра и цитоплазмы ооцита первого порядка. Превителогенез начинается с момента вступления оогонии в мейоз и протекает на фоне его профазы. В настоящее время ооцит растет за счет собственного синтеза, в цитоплазме синтезируется и накапливается много белков и РНК, вследствие чего цитоплазма половой клетки делается базофильной, т.е. интенсивно красится щелочными красителями. В клетке образуются многочисленные рибосомы, пузырьки эндоплазматической сети, наблюдается значительный развиток комплекса Гольджи и резко увеличивается количество митохондрий. Все эти органоиды концентрируются около ядра. Они получили наименование митохондриальной облака, поскольку в этом скоплении органоидов впервые было обнаружено присутствие митохондрий.

Если до начала превителогенеза фолликулярные клетки располагались параллельно вителиновий оболочке, то с началом роста они занимают радиальное положение. Такие образования называются первичными или Примордиальная фолликулами. Наблюдаются изменения и в локализации первичных фолликулов, что до начала фазы малого роста находятся в поверхностных слоях коркового вещества яичника, а с началом роста перемещаются в более глубокие слои.

7. Вителогенез

Важная особенность малого роста - пропорциональное увеличение массы ядра и цитоплазмы, сохранения типичного для обычных клеток ядерно-цитоплазматического соотношения. Вителогенез характеризуется резкой интенсификацией процессов роста цитоплазмы ооцита и изменением ядерно-цитоплазматического соотношения. В этот период продолжается (большая или малая) синтетическая активность ооцита, но в целом масса цитоплазмы нарастает за счет поступления веществ извне. В период вителогенеза в ооплазмы накапливаются запасные питательные вещества: белки (желток), углеводы, жиры, липиды, витамины, минеральные соли. Хотя РНК (и их компоненты), митохондрии, мембраны и другие цитоплазматические структуры также откладываются в резерв, тогда как в основе большого роста лежит накопление желтка. Все запасы затем используются на ранних стадиях развития эмбриона. В некоторых случаях их хватает на значительный отрезок эмбрионального развития животного.

Есть в отличие от соматических клеток ооциты не используют огромную часть рибосом, которые накапливаются в цитоплазме, тРНК, 5S РНК, иРНК, а резервируют их для эмбриона.

Интенсивный синтез желтка имеет место в фазе вителогенеза, трофоплазматичного роста проходит при участии как фолликулярных клеток, так и клеток всего организма. Все органоиды клетки, принимающие участие в синтезе желтка, накапливаются в периферическом слое цитоплазмы, т.е. ближе к фолликулярных клеток, поставляющих ооцитов питательные вещества, необходимые для синтеза. Особенно ярко эти изменения видны при синтезе желтка в полилецитальних яйцеклетках, где отложение его происходит с поразительной быстротой. Естественно, что столь быстрое отложение желтка не под силу ни самому ооцита, ни окружающим его фолликулярным клеткам. В синтезе желтка участвует весь организм, и в первую очередь его печень, а желток образуется, переносится кровью к ооцитов.

С наступлением фазы вителогенеза ооциты первого порядка постепенно перемещаются в середину коркового слоя яичника, а клетки фолликулярного эпителия с плоских превращаются в кубические и цилиндрические. Ооцит, окруженный одним слоем цилиндрических фолликулярных клеток, называют однослойным фолликулом. В дальнейшем количество фолликулярных клеток вокруг ооцита увеличивается, они располагаются в два слоя, и возникает двухслойный фолликул. Уже начиная с формирования однослойного фолликула вокруг яйцеклетки заметны блестящая зона и лучистый венец.

Когда количество слоев фолликулярных клеток вокруг ооцита возрастает до трех и более, возникает многослойный фолликул. Фолликулярные клетки, которые размножаются, не только образуют многослойную вторичную оболочку ооцита, но и накапливаются по периферии. Эти клетки формируют зернистый слой фолликула, а вокруг их снаружи соединительная ткань дает начало оболочке фолликула. Между зернистым слоем и с оболочкой фолликула отделяется базальная мембрана.

Есть некоторые структурные различия между функционирующими и резервированными структурами. Например, активные рибосомы только в полисома представлены в форме 80S частиц - вне полисом они находятся в виде отдельных субъединиц (40S и 60S). Резервируемые рибосомы ооцита сохраняются в виде 80S частиц (каким-то образом заблокированных). Резервные формы 5S РНК и тРНК представляют собой нуклеопротеиды, тогда как функционирующие формы этих РНК не содержат прочно связанных с ними белков.

8. Формы обеспечения ооцита

Существуют следующие формы обеспечения ооцита питательными веществами: фагоцитарный, нутриментарный (с участием питательных клеток - трофоцитов, расположенных в гонадах и родственных ооцита) и экстрагонадный (поступление в ооцит веществ из других органов через фолликулярный эпителий).

При отсутствии гонад (в низкоорганизованных форм - губок, кишечнополостных, ресничных червей) ооциты развиваются в различных участках тела (диффузный оогенез), активно перемещая и фагоцитируя другие клетки. Фагоцитоз - основной путь поступления веществ, необходимых для роста ооцитов этих животных.

В губки Petrobionia обнаружены первые признаки использования других клеток в качестве питательных: ооцит присоединяет к себе так называемую клетку-носительницу, что захватывает и поглощает хоаноциты ближайшего жгутикового канала. Продукты их распада проникают в ооцит.

У кишечнополостных (пресноводная гидра) оогонии, сформировавшиеся из i-клеток, располагаются тесными группами, и только одна из них превращается в ооцит: она растет, поглощая сестринские клетки Позже немного ооцитов сливаются в один, и все их ядра, кроме одного, дегенерируют. Такой способ питания, уже не связанный с передвижением «ооцита-хищника», представляет собой переход к нутриментарного типа распространенного среди различных групп червей и членистоногих.

Ооцитов и трофоциты образуют систему семейных (происходящих из оогонии), структурно и физиологически тесно связанных между собой клеток. Они хорошо изучены у насекомых, где расположены группами в яйцевых трубочках (овариолах). Различают овариолы паноистичного и мероистичного типов, В последних по соседству с ооцитами есть группа питательных клеток - трофодитов, поставляющих ооцит продуктами синтетической активности, главным образом РДНК.

В гонадах улиточной пиявки на один растущий ооцит приходится около 2000 вспомогательных клеток, которые связаны с ооцитом специальной зоной (рахис).

Наиболее распространенный тип питания яйцеклеток связан с функцией фолликулярных клеток, окружающих ооцит. У насекомых этот тип питания соединяется с нутриментарным, в их яичниках фолликулярные клетки окружают ооцит вместе с его питательными клетками. У позвоночных питания при участии фолликулярных клеток является единственным источником экзогенных веществ. В отличие от трофоцитов фолликулярные клетки по своему происхождению соматические.

Экстрагонадный синтез веществ для обеспечения роста ооцита характерен для ряда беспозвоночных (главным образом, насекомых) и для позвоночных животных. У насекомых эти вещества синтезируются в жировом теле у птиц и млекопитающих - в печени. С этих органов вещества поступают в гемолимфу (у беспозвоночных) или в кровь (позвоночные), а оттуда через фолликулярный эпителий в ооцит. Фолликулярный эпителий, выполняет множество функций (защитных, барьерных, регуляторных), обеспечивает также перенос в ооцит веществ, синтезированных вне гонады.

половой эмбриональный цитоплазматический

Список литературы

1. Газарян К.Г., Белоусов Л.В. Биология индивидуального развития животных. М: "ВШ" - 1983.

2. Антипчук Ю.П. Гистология с основами эмбриологию. М: "Просвещение" 1983.

3. Слюсарев А.А., Жукова С.В. Биология. К: "ВШ" 1992.

4. Сингер М., Берг П. Гены и геномы. М: «Мир» 1998.

5. Гилберт С. Биология разрития М: «Мир» 1994.

Размещено на Allbest.ru