8. Балко А.Б. Способы раздельного получения бактериоцинов Erwinia carotovora // Тезисы 9-ой Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых “Биология - наука XXI века”. - Пущино, 18-22 апреля 2005г.

9. Балко А.Б., Максименко Л. А., Товкач Ф. И. Множественность киллерных факторов Erwinia carotovora // Тези Міжнародної конференції ”Фітопатогенні бактерії. Фітонцидологія. Алелопатія”. - Київ, 4-6 жовтня 2005 р.

10. Балко О.Б. Ідентифікація каротоворіцинів з допомогою індукції тимінових мутантів Erwinia carotovora // Тези наукової конференції молодих вчених "Сучасні проблеми фізіології рослин і біотехнології". - Ужгород, 1-3 грудня 2005 р.

11. Балко А.Б. Эндонуклеазная активность, ассоциированная с бактериоцинами Erwinia carotovora // Тезисы 10-ой Пущинской школы-конференции молодых учених, посвященной 50-летию Пущинского научного центра РАН "Биология - наука XXI века". - Пущино, 17-21 апреля 2006 г.

АНОТАЦІЯ

Балко О.Б. Структурно-функціональна організація каротоворіцинів та їх роль в мікробному антагонізмі. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.06 - вірусологія. - Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України, Київ, 2007.

Дисертація присвячена дослідженню фізико-хімічних, біологічних, літичних та нуклеазних властивостей різних типів бактеріоцинів Erwinia carotovora, особливостям їх лізогенної індукції, виділення і кілерної дії, а також вивченню поліпептидного складу, структурної організації та ролі даних кілерних факторів в процесах антагонізму між бактеріями.

В модельних експериментах показано, що в процесі міжбактеріального антагонізму важливу роль відіграють бактеріоцини.

Лізогенна індукція E. carotovora призводить до утворення трьох типів каротоворіцинів: макромолекулярних часток типів В і К та коліциноподібних кілерів типу С. Виділення бактеріоцинів усіх типів має хвилеподібний характер.

Коліциноподібні каротоворіцини (тип С) впливають виключно на близькоспоріднені штами E. carotovora, асоційовані із неспецифічною ендонуклеазною активністю, яка доповнює їх кілерну дію шляхом лізогенної індукції бактеріофагів. Макромолекулярні каротоворіцини (типи В і К) характеризуються ширшим спектром кілерної активності і лізують штами E. carotovora і E. coli. Часткам даних типів нуклеазні властивості не притаманні.

Високомолекулярні каротоворіцини побудовані із 7 поліпептидів - трьох мажорних (23, 25, 46 кДа) та чотирьох мінорних (31, 54, 58, 91 кДа). До складу коліциноподібних кілерів входить лише один мажорний поліпептид (54 кДа).

Бактеріальні лізати E. carotovora J2 містять структури типу фагових базальних пластинок, які характеризуються сферичною формою та чотирьохосьовим типом симетрії. Дані частки не мають аналогів серед відповідних утворів фагової природи.

Ключові слова: Erwinia carotovora, каротоворіцини, лізогенна індукція, кілерні властивості, ендонуклеазна активність.

Балко А.Б. Структурно-функциональная организация каротоворицинов и их роль в микробном антагонизме. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.06 - вирусология. - Институт микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного НАН Украины, Киев, 2007.

Диссертация посвящена изучению физико-химических, биологических, литических и нуклеазных свойств разных типов бактериоцинов Erwinia carotovora, особенностям их лизогенной индукции, выделения и киллерного действия. В работе приведены результаты исследования полипептидного состава, структурной организации и роли киллерных факторов в процессах антагонизма между бактериями.

Показано, что в процессе междубактериального антагонизма важная роль принадлежит бактериоцинам, которые выделяются клетками E. carotovora в ответ на синтез бактериями Escherichia coli клеточных метаболитов и осуществляют активное влияние на конкурирующие микроорганизмы.

С использованием двух методов голодания Thy^- мутантов E. carotovora и влияния митомицина С и налидиксовой кислоты на прототрофные штаммы этих бактерий установлено, что при лизогенной индукции клеток E. carotovora происходит образование трех типов каротоворицинов: макромолекулярных частиц типа В и К, а также колициноподобных киллеров типа С. Выделение этих бактериоцинов носит волнообразный характер с поэтапным выходом в среду частиц каждого типа.

Колициноподобные каротоворицины влияют исключительно на близкородственные штаммы E. carotovora и ассоциированы с неспецифической эндонуклеазной активностью, которая усиливает их литическое воздействие с помощью лизогенной индукции умеренных бактериофагов. Макромолекулярные бактериоцины обладают более широким спектром киллерной активности и, по-видимому, лизируют штаммы как E. carotovora, так и E. coli методом "лизиса извне". Частицы этого типа нуклеазными свойствами не обладают. При совместном воздействии каротоворицинов обоих типов на клетки E. coli К12 наблюдается усиление спонтанной индукции фага л приблизительно в 4 раза.

Установлено, что высокомолекулярные частицы E. carotovora J2 являются сложноорганизованными структурами и состоят из 7 полипептидов - трех мажорных (23, 25, 46 кДа) и четырех минорных (31, 54, 58, 91 кДа) компонентов. В состав колициноподобных бактериоцинов входит один мажорный полипептид (54 кДа), тогда как четыре других отнесены к минорным компонентам.

Показано, что в составе индуцированных налидиксовой кислотой бактериальных лизатов E. carotovora J2 обнаруживаются структуры типа фаговых базальных пластинок. Эти частицы отличаются сферической формой и четырехкратным типом симметрии и не имеют аналогов среди соответствующих образований фаговой природы.

Ключевые слова: Erwinia carotovora, каротоворицины, лизогенная индукция, киллерные свойства, эндонуклеазная активность.

Balko O.B. Structural and functional organization of carotovoricins and their role in bacterial antagonism. - Manuscript.

The candidate degree thesis by speciality 03.00.06 - virology. Zabolotny Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv, 2007.

The thesis is dedicated to investigation of biological, physical-chemical, lytic and nuclease properties of different types of Erwinia carotovora bacteriocins, features of their lysogenic induction, isolation and killer action as well as polypeptide composition studying, structural organization and the role of the presented killer factors in antagonism processes between bacteria.

In the model experiments it was shown that in the process of interbacterial antagonism bacteriocins play an important role.

Lysogenic induction of E. carotovora is resulting to formation of three types of carotovoricins: macromolecular killers of types В and К and colicin-like killers of type С. The process of carotovoricins excretion possesses the wavelike nature.

Colicin-like carotovoricins (of type C) influence especially on closely related strains of E. carotovora, associated with non-specific endonuclease activity, which increases their killer action by the help of bacteriophage lysogenic induction. Macromolecular carotovoricins (of types B and K) are characterized by a broad spectrum of killing action and lyse E. carotovora and Escherichia coli strains. Nuclease properties are not peculiar to the particles of the mentioned types.

High-molecular-weight carotovoricins contain of 7 polypeptides - three major (23, 25, 46 kDa) and four minor (31, 54, 58, 91 kDa). Colicin-like carotovoricins consist of the only one major polypeptide (54 kDa).

The bacterial lysates of E. carotovora J2 include structures of baseplate-like type with spherical shape and fouraxis symmetry. Baseplate-like particles don't possess analogues among the similar phage structures.

Key words: Erwinia carotovora, carotovoricin, lysogenic induction, lytic property, endonuclease activity.

Размещено на Allbest.ru