Мікробіологічне обгрунтування розробки та медичного застосування антисептичного супозиторію на основі декаметоксину і овуциру

Размещено на http://www.allbest.ru/

ДЕРЖАВНА УСТАНОВА

«інститут мікробіології та імунології ім. І.І.Мечникова АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ»

Мікробіологічне обгрунтування розробки та медичного застосування антисептичного супозиторію на основі декаметоксину і овуциру

03.00.07 - мікробіологія

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук

Коваленко Ірина Миколаївна

Харків - 2010

Дисертацією є рукопис

Робота виконана в Вінницькому національному медичному університеті ім. М.І.Пирогова МОЗ України.

Науковий керівник: доктор медичних наук, доцент, Палій Віктор Гордійович, Вінницький національний медичний університет ім. М.І.Пирогова МОЗ України, доцент кафедри загальної хірургії

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор Мінухін Валерій Володимирович, Харківський національний медичний університет МОЗ України, професор кафедри мікробіології, вірусології та імунології;

доктор медичних наук, професор, Климнюк Сергій Іванович, Тернопільський державний медичний університет ім. І.Я. Горбачевського МОЗ України, завідувач кафедри медичної біології, мікробіології, вірусології та імунології.

Захист дисертації відбудеться « 3 » червня 2010 р. о 10.00 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 64.618.01 ДУ «Інститут мікробіології та імунології ім. І.І.Мечникова АМН України» за адресою: 61057, вул. Пушкінська, 14-16, м. Харків-57.

З дисертацією можна ознайомитись в бібліотеці ДУ «Інститут мікробіології та імунології ім. І.І.Мечникова АМН України» за адресою: 61057, вул. Пушкінська, 14-16, м. Харків-57.

Автореферат розісланий « 30 » квітня 2010 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради кандидат медичних наук, ст.н.с. Бруснік С.В.

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Запальні захворювання жіночих статевих органів фертильного віку є важливою проблемою, яка впливає на здоров'я жінок. Інфікування умовно патогенними мікроорганізмами посилює місцевий запальний процес, погіршує умови для відновлення здоров`я. (Шостак В. А., 2005; Подольський В. В. та ін., 2005). Збудники гнійно-запальних захворювань статевих органів у жінок мають високий рівень резистентності до антибіотиків, антисептиків (Ершов Г. В., Бочкарев Д. Н., Смолянов И. В., 2004; Дзісь Н. П., Прокопчук З. М., Зарицький О. М., 2006; Прокопчук З. М. та ін., 2008). Основними причинами виникнення гнійно-запальних захворювань є стафілококи, стрептококи, ешерихії та ін.

Антибіотикорезистентність, з одного боку, і недоліки старих препаратів, пов'язані з обмеженим спектром дії та відсутністю активності стосовно природностійких видів збудників, незадовільною фармакокінетикою, високою частотою ускладнень стимулюють дослідження та створення нових антибіотиків та антисептиків (Казмирчук В. В. и др., 2007).

Вітчизняні антисептичні препарати декаметоксин, мірамістин, етоній в багатьох лікарських формах застосовують для профілактики і лікування інфекційних гнійно-запальних захворювань, в тому числі жіночих статевих органів. Названі вище лікарські антисептичні препарати проявляють до збудників захворювань високу протимікробну дію та сприятливо впливають на організм пацієнтів (Paliy G. K., 1987; Палій Г. К. та ін., 2008; Большакова Г. М., Бірюкова С. В., 2006; Авдєєва Л. В. та ін., 2007). Супозиторії з субстанціями сучасних антисептиків займають до 38 % ринку м'яких лікарських форм (Дзісь Н. П. та ін., 2006; Листопад А. А., 2000).

Застосування супозиторіїв дозволяє знизити рівень алергічних реакцій, пролонгувати терапевтичний ефект, особливо у вогнищі запалення, збільшити швидкість всмоктування лікарських речовин, а в деяких випадках зменшити дозу (Дзісь Н. П. та ін., 2008). Супозиторії характеризуються м`якою консистенцією при кімнатній температурі, не подразнюють слизових оболонок і не взаємодіють з діючою речовиною. Створення якісно нових антисептичних супозиторіїв на новій основі напівсинтетичних гліцеридів, в тому числі овуциру 3264 відкриває сприятливу перспективу для насичення фармацевтичного ринку вітчизняними антимікробними препаратами.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота є фрагментом планових науково-дослідних робіт кафедри мікробіології, вірусології та імунології Вінницького національного медичного університету ім. М. І. Пирогова: «Дослідження багатовекторності фармакодинамічних проявів, властивостей нових лікарських засобів, що містять декаметоксин і фторхінолони» (№ державної реєстрації 0103U003114); «Експериментальне, клінічне дослідження багатовекторності фармакодинамічних проявів, властивостей нових антисептичних препаратів» (№ державної реєстрації 0104U006406). Автор провела експериментальне дослідження нових антисептичних супозиторіїв на основі декаметоксину та овуциру.

Тема дисертації затверджена Проблемною комісією зі спеціальностей вірусологія - 03.00.06 та мікробіологія - 03.00.07 (протокол № 84 від 01.06. 2009 р.).

Мета і завдання дослідження. Мета - Мікробіологічно обґрунтувати властивості нових антисептичних супозиторіїв з декаметоксином на основі напівсинтетичних гліцеридів.

Для досягнення поставленої мети вирішували наступні завдання:

1. Визначити рівень протимікробної активності нових антисептичних супозиторіїв, антибіотиків на музейні та клінічні штами мікроорганізмів.

2. Вивчити протимікробну дію нових антисептичних супозиторіїв за несприятливих фізико-хімічних та біологічних умов.

3. Означити швидкість і особливості формування стійких варіантів мікроорганізмів до нових антисептичних супозиторіїв.

4. Дослідити вплив нових антисептичних супозиторіїв на адгезивні властивості мікроорганізмів.

5. Визначити вплив антисептичних супозиторіїв десептолу, еротексу, фарматексу на макроорганізм в експерименті.

Предмет дослідження: мікроорганізми, лікарські антисептичні препарати, антибіотики.

Об'єкт дослідження: інфекційні та гнійно-запальні процеси.

Методи дослідження: мікробіологічні, морфологічні, фізико-хімічні, статистичні.

Наукова новизна одержаних результатів. У роботі вперше на штамах мікроорганізмів з природною і набутою стійкістю до антимікробних препаратів визначено ступінь впливу антисептичних супозиторіїв з декаметоксином на напівсинтетичних гліцеридах, десептолу, еротексу, фарматексу, гексікону, бетадину, досліджено їх антимікробні властивості залежно від різних несприятливих умов. У процесі дослідження антисептичних супозиторіїв встановлено їх залежність від мікробного навантаження, вмісту білків, різного рН поживного середовища.

Вперше вивчено вплив антисептичних супозиторіїв на основі овуцир WL 3264 на адгезивну здатність збудників бактеріальних інфекцій; досліджено особливості формування резистентності мікроорганізмів у присутності антисептиків. Вперше визначено вплив антисептичних супозиторіїв на структуру серця, печінки, нирок, легенів, селезінки, прямої кишки тварин.

Практичне значення одержаних результатів. Результати виконаних мікробіологічних досліджень є доповнюючим етапом визначення антимікробної активності протимікробних препаратів. Результати всебічного експериментального дослідження декаметоксину включено до Аналітичної нормативної документації на субстанцію лікарського антисептика декаметоксину (Decamethoxinum), яка затверджена наказом МОЗ України (реєстраційне посвідчення № П. 10.02/05401).

Результати мікробіологічних досліджень представляють собою первинний етап вивчення антисептичних супозиторіїв з декаметоксином. Одержані результати експериментального дослідження супозиторіїв включено до проекту тимчасової фармакопейної статті, технологічного регламенту на виготовлення цієї лікарської форми з декаметоксином з застосуванням напівсинтетичних гліцеридів на фармацевтичному заводі «Монфарм». Отримано позитивне рішення Фармакологічного комітету МОЗ України для проведення клінічних досліджень (протокол № 10 від 25.12.1997 року). Одержані результати досліджень впроваджено в навчальні програми на кафедрах мікробіології, вірусології, імунології; акушерства і гінекології; хірургії Вінницького національного медичного університету ім. М.І. Пирогова, Івано-Франківського національного медичного університету, Національного фармацевтичного університету України, Луганського державного медичного університету, Львівського національного медичного університету ім. Д. Галицького, Кримського державного медичного університету ім. С.І. Георгієвського.

Особистий внесок здобувача. Автором самостійно обрано напрямок досліджень, проведено пошук та аналіз наявних літературних джерел з обраного напрямку, з участю наукового керівника визначено мету і задачі досліджень.

Здобувачем самостійно проведено всі мікробіологічні дослідження: визначено спектр мікроорганізмів, які спричиняють захворювання геніталій у жінок, вивчено їх біологічні властивості та чутливість до протимікробних засобів. Дисертант провела всі експериментальні дослідження 5 антисептичних супозиторіїв, вивчила їх протимікробні властивості in vitro і на експериментальних тваринах. Автор самостійно дослідила вплив антисептичних супозиторіїв на морфологічну структуру паренхіматозних органів тварин.

Автором самостійно зроблено аналіз результатів досліджень, розроблено основні теоретичні і практичні положення роботи, особисто написані всі розділи дисертаційної роботи, зроблені висновки і практичні рекомендації. В опублікованих працях здобувач є автором або, у випадках співавторства, співвиконавцем досліджень і автором основної ідеї.

Апробація результатів дисертації. Основні положення дисертації було обговорено і позитивно оцінено на міжнародній науково-практичній конференції «Актуальні питання стратегії, тактики застосування та дослідження антибіотиків, антисептиків, дезінфектантів»; міжнародних науково-практичних конференціях студентів та молодих вчених (Вінниця, 2008, 2009, 2010); Всеукраїнських науково-практичних конференціях «Довкілля і здоров'я» (Тернопіль, 2008, 2009); на міжнародному конгресі «Актуальні питання акушерства, гінекології та перинатології» (Судак, 2008); на науково-практичній конференції «Шпитальні інфекції: сучасний стан проблеми» (Харків, 2008); на ХІІ з'їзді товариства мікробіологів України (Ужгород, 2009); на 3-й міжнародній українсько-польській Вейглівській конференції «Мікробіологія служить людині» (Одеса, 2009), ІV науково-практичній конференції Кримського державного медичного університету ім. С. І. Георгієвського «Людина і мікроорганізми - паралельні світи», 2009.

Публікації. По темі дисертації опубліковано 23 наукові праці (9 одноосібно), з них 5 статей у фахових виданнях визначених ВАК України та 18 робіт в збірках матеріалів з'їздів, симпозіумів, конференцій. Отримано один патент України на корисну модель.

Обсяг та структура дисертації. Робота викладена на 192 сторінках комп'ютерного тексту, містить вступ, огляд літератури, розділ матеріалів і методів досліджень, 4 розділи власних досліджень, розділ аналізу та узагальнення одержаних результатів, висновки, практичні рекомендації, список використаної літератури, який нараховує 239 джерел на 29 сторінках (174 кирилицею і 65 латиною). Робота ілюстрована 31 таблицею (27 стор.) та 44 рисунками (на 31 стор.).

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ ДИСЕРТАЦІЇ

У вступі обґрунтовано актуальність проблеми, визначені мета, завдання, об'єкт і предмет дослідження, сформульовано наукову новизну, розкрито теоретичне і практичне значення роботи, визначено особистий внесок автора, наведено дані про апробацію отриманих результатів.

В огляді літератури подано мікробіологічну характеристику антисептичних лікарських препаратів для місцевого застосування та їх ефективність в процесі комплексного лікування жінок з запальними захворюваннями органів малого тазу.

Матеріали і методи досліджень. У даній роботі приведено результати вивчення антимікробної активності 5 антисептичних супозиторіїв (десептол, фарматекс, еротекс, гексикон, бетадин) на музейних і свіжевиділених штамах мікроорганізмів. Дослідження антимікробних властивостей антисептичних супозиторіїв проводили на 169 музейних та виділених від хворих штамах мікроорганізмів. Мікробіологічна діагностика включала мікроскопічний, культуральний, біохімічний методи дослідження. Мікроскопічний метод полягав у виготовленні мазків-препаратів із досліджуваного матеріалу та їх мікроскопії. Метод дозволив орієнтовно встановити склад мікробного пейзажу досліджуваних матеріалів, морфологічні особливості бактерій. Культуральний метод полягав у посіві взятого від хворих матеріалу на штучні поживні середовища з метою виділення чистої культури та подальшої ідентифікації збудника. Біохімічні методи ідентифікації мікроорганізмів полягали у вивченні їх здатності утилізувати відповідні субстрати.

Для вивчення протимікробних властивостей препаратів та кількісного аналізу їх активності використовували метод послідовних серійних розведень у рідких поживних середовищах; диско-дифузійний метод. Антимікробну активність супозиторіїв в умовах різної концентрації іонів водню вивчали на середовищах з рН 6,0, 7,2, 8,0. Протимікробну активність супозиторіїв вивчали при додаванні в поживне середовище 5 %, 10 % білкового навантаження. Визначали кратність зміни активності препарату до контролю. Залежність антимікробної активності та властивостей препарату від посівної дози мікроорганізмів вивчали шляхом додавання дози інокулята тест-мікроорганізму. В дослідах використовували мікробне навантаження 103; 106; 109 КУО/мл. Паралельно ставили контроль стерильності середовища, контроль росту культури, контроль досліджуваного препарату.

Дослідження формування резистентності мікроорганізмів до антисептичних супозиторіїв вивчали на клінічних культурах S. aureus та C. albicans in vitro методом пасажів. Всього було проведено 30 пасажів мікроорганізмів у присутності суббактеріостатичних (субфунгистатичних) концентрацій антисептичних супозиторіїв.

Адгезивні властивості бактерій досліджували на формалінізованих еритроцитах людини О (І) групи Rh (+) у присутності десептолу, фарматексу, еротексу. У виготовлених мазках-препаратах на 100 еритроцитах визначали індекс адгезивності (ІА) мікроорганізмів - число адгезованих бактерій на одному еритроциті, який приймав участь в адгезивному процесі.

Вплив на морфологічну структуру деяких внутрішніх органів (серце, легені, печінка, селезінка, нирки, пряма кишка) антисептичних супозиторіїв з різноманітними лікарськими субстанціями було вивчено на 12 кролях, які не приймали участь в інших наукових експериментах, по 3 в кожній групі. Контрольну групу складали 3 тварини. Дослідній групі тварин вводили антисептичні супозиторії десептол, фарматекс, еротекс, в якості контролю застосовували у тварин супозиторну основу овуцир. По завершенню досліду для гістологічного матеріалу брали шматочки тканин серця, легенів, печінки, селезінки, нирок, прямої кишки. Досліджувані препарати вводили ректально протягом 10 днів. Після завершення експерименту тварин виводили з досліду шляхом передозування препаратів для наркозу. Гістологічний матеріал готували за методикою М.Я. Суботіна.

Після взяття матеріалу для мікроскопічного дослідження його фіксували в 10 % розчині формаліну.

Для приготування зрізів, зневоднені шматочки матеріалу заливали у загустаюче середовище, виходячи з того, що целоїдин є самим розповсюдженим і зручним матеріалом.

Просичування целоїдином розпочинали з розміщення шматочків тканин в суміші рівних частин абсолютного спирту та ефіру, в якій витримували матеріал 24 години. Потім шматочки досліджуваних органів проводили через розчини целоїдину збільшеної концентрації.

Результати досліджень та їх обговорення. Результати власних досліджень викладено у третьому - шостому розділах. Встановлено, що штами S. aureus, виділені від пацієнток з гнійно-запальними захворюваннями, найбільшу чутливість проявляли до нетілліну (91,67 %), моксіфлоксацину (86,67 %), до пефлоксацину, ципрофлоксацину, ріфампіцину - по 83,33 %.

Дещо менш активними виявились неоміцин та цефтріаксон (80,00 %), левофлоксацин та лінкоміцин - 78,33 %. Високоактивними препаратами щодо штамів S. epidermidis виявились нетіллін (100,00 %), неоміцин, ріфампіцин, ципрофлоксацин - по 88,89 %. Штами E. coli найбільш чутливими були до ципрофлоксацину та цефтріаксону - 100,00 %, нетілліну - 90,00 %, левофлоксацину та пефлоксацину - по 80,00 %. Резистентними штами E. сoli були до амоксіциліну та карбеніциліну - 70,00 % і 80,00 % відповідно.

Бактерії P. aeruginosa володіли мультирезистентністю до всіх досліджуваних антибіотиків. P. aeruginosa мала високу резистентність (90- 100,00 %) до природних пеніцилінів. Серед цефалоспоринів різних поколінь до цефазоліну та цефуроксиму штами виявились стійкими в 100 % випадків, дещо менше до цефокситину (90,00 %), цефепіму (80,00 %) Лише 50,00 % штамів малим чутливість до тобраміцину.

Проаналізувавши протимікробні властивості 5 досліджуваних антимікробних препаратів встановлено, що музейні і клінічні штами бактерій виявились чутливими до супозиторіїв десептол у межах 0,12 мкг/мл - 1,95 мкг/мл; фарматекс - 0,48 мкг/мл - 31,25 мкг/мл; еротекс - 7,8 мкг/мл - 250 мкг/мл; гексикон - 3,12 мкг/мл - 50 мкг/мл; бетадин - 2,5 мг/мл - 5,0 мг/мл. МБцК для ешерихії встановлено у десептолу (7,8 мкг/мл - 31,25 мкг/мл), фарматексу (125 мкг/мл - 250 мкг/мл), еротексу (250 мкг/мл - 500 мкг/мл), гексикону (12,5 мкг/мл - 200 мкг/мл), бетадину (2,5 мг/мл - 5,0 мг/мл) (табл. 1).

Концентрація рН обумовлює ступінь іонізації середовища і впливає на швидкість дії препаратів на мікробну клітину. Взаємодія мікроорганізмів і протимікробних препаратів в присутності факторів, які можуть впливати на активність антимікробних сполук, може змінюватись. У зв'язку з цим було досліджено антимікробні властивості антисептичних супозиторіїв десептол, фарматекс, еротекс, гексикон, бетадин. Антистафілококова бактерицидна активність десептолу, фарматексу, еротексу, гексикону, бетадину при рН 6,0 та 8,0 поживного середовища зменшувалась у 2-4 рази в порівнянні з контролем. Зокрема, десептол при рН 6,0 діяв на стафілококи у концентрації 0,24 мкг/мл- 3,9 мкг/мл (р<0,05); рН 8,0 - 0,24 мкг/мл - 1,95 мкг/мл (р<0,05). МБцК фарматексу при рН 6,0 складала 1,95 мкг/мл - 62,5 мкг/мл (р<0,05), при рН 8,0 - 0,97 мкг/мл - 15,6 мкг/мл (р<0,05). Супозиторії еротекс при рН 6,0 діяли на мікроорганізми в концентрації 15,6 мкг/мл - 500 мкг/мл (р<0,05), при рН 8,0 - 7,8 мкг/мл - 250 мкг/мл (р<0,05).

Протимікробна активність антисептичних супозиторіїв гексикон щодо клінічних штамів стафілококів при зміні рН в кислу сторону була в межах 3,12 мкг/мл - 50 мкг/мл (р<0,05); МБцК супозиторіїв гексикон, при концент-рації в поживному середовищі водневих іонів 8,0 знаходилась в межах 1,56 мкг/мл - 25 мкг/мл (р<0,05). Протимікробні супозиторії бетадин були однаково активними при зміні рН у слабко-кислу або слабко-лужну сторону, яка залишалась в межах 2,5 мг/мл - 5,0 мг/мл (р<0,05).

Важливо було визначити антимікробну дію антисептичних супозиторіїв десептол, фарматекс, еротекс при наявності 5 %, 10 % сироватки в МПБ, оскільки білки крові здатні по різному зв'язувати лікарські препарати в поживному середовищі. Встановлено, що антимікробна концентрація десептолу при навантаженні поживного середовища 5 % сироватки крові дорівнювала 0,24 мкг/мл - 3,9 мкг/мл (р<0,05); 10 % - 0,48 мкг/мл - 7,8 мкг/мл (р<0,05). Для фарматексу МБцК, при наявності в середовищі 5 %, 10 % білків крові, складала 1,95 мкг/мл - 62,5 мкг/мл (р<0,05) і 3,9 мкг/мл - 125 мкг/мл (р<0,05) відповідно.

Таблиця 1. Мінімальна бактерицидна концентрація антисептичних супозиторіїв щодо клінічних штамів S. aureus (мкг/мл)

Штами стафілококу	Препарати
	десептол	фарматекс	еротекс	гексикон	бетадин
S. aureus 2380	1,95	3,9	31,25	6,25	5000
S. aureus 6	0,48	15,6	15,6	25	2500
S. aureus 2289	0,97	0,97	31,25	50	5000
S. aureus 27	0,24	3,9	125	3,12	2500
S. aureus 24	0,48	1,95	125	12,5	5000
S. aureus 72	1,95	1,95	31,25	12,5	5000
S. aureus 129	0,12	0,97	125	6,25	5000
S. aureus 2531	0,24	1,95	125	12,5	5000
S. aureus 31	1,95	31,25	125	6,25	5000
S. aureus 2212	0,97	15,6	250	3,12	5000
S. aureus 2261	1,95	3,9	62,5	3,12	5000
S. aureus 2228	0,97	7,8	62,5	50	2500
S. aureus 2532	0,48	1,95	31,25	3,12	5000
S. aureus 3	0,12	1,95	15,6	12,5	5000
S. aureus 1100	1,95	15,6	250	6,25	5000
S. aureus 171	1,95	1,95	15,6	3,12	5000
S. aureus 71	0,97	3,9	15,6	25	5000
S. aureus 75	1,95	15,6	15,6	6,25	5000
S. aureus 9	1,95	3,9	7,8	3,12	2500
S. aureus 1247	0,48	7,8	125	12,5	5000
M ± m	1,1±0,17	7,12±1,75	79,29±16,7	11,87±2,61	4500±229,42

МБцК еротексу в присутності 5 % та 10 % білкового навантаження в МПБ становила 15,6 мкг/мл - 250 мкг/мл (р<0,05) та 62,5 мкг/мл - 500 мкг/мл (р<0,05) відповідно. Кратність зміни МБцК до контролю десептолу складала 2-4 рази, фарматексу та еротексу - 2 - 8 разів. Наведені результати дослідів засвідчили, що білки сироватки крові зв'язували протимікробні препарати і знижували їх активність.

Збільшення концентрації бактеріальних клітин в одиниці об'єму призводить до зменшення кількості молекул і діючих центрів антимікробного препарату, що може впливати на рівень чутливості мікроорганізмів. Тому було досліджено властивості антисептичних супозиторіїв десептол, фарматекс, еротекс при мікробному навантаженні 103, 106, 109 КУО/мл.

Результати досліджень дозволяють стверджувати, що по мірі зростання кількості бактерій в інокуляті відбувалось зменшення чутливості тест-мікроорганізмів до десептолу. Вивчення активності супозиторіїв десептол при 106 і 109 КУО/мл супроводжувалось зниженням антимікробної дії в 2 рази для штамів стафілококу. При такому мікробному навантаженні клінічні штами стафілококів залишались чутливими в концентрації, яка складала 0,48 мкг/мл - 3,9 мкг/мл (р<0,05). МБцК фарматексу для полірезистентних штамів стафілококу при 103 КУО/мл виявилась в межах 1,95 мкг/мл - 15,6 мкг/мл (р<0,05). При збільшенні мікробного навантаження до 106 та 109 в присутності фарматексу, підвищення мінімальної інгібуючої концентрації препарату спостерігали більше, ніж вдвічі, МБцК при 109 КУО/мл була 7,8 мкг/мл - 62,5 мкг/мл (р<0,05). При посівній дозі мікроорганізмів 103 МБцК еротексу суттєво не змінювалась порівняно з МБцК при кількісті колонієутворюючих одиниць 106 в 1 мл. МБцК еротексу визначили також для стафілококів при 109 КУО/мл, яка складала 31,25 мкг/мл - 500 мкг/мл (р<0,05).

Швидкість формування резистентності у мікроорганізмів до антисептичних препаратів вивчали шляхом тривалого пасажування тест-культур в присутності суббактеріостатичних концентрацій антисептичних супозиторіїв. Вивчення формування стійкості у клінічних штамів бактерій проводили протягом 30 пасажів присутності антисептичних супозиторіїв десептол, фарматекс, еротекс.

Результати дослідження дозволили встановити, що формування резистентності у S. аureus 71 відбувалось повільно. Після п'яти пасажів в присутності декаметоксину МБцК його становила 1,95 мкг/мл і зберігалася на одному рівні протягом 15 пасажів; після 20 пасажів МБцК збільшувалась в 4 рази, після 25 пасажів - у 8 разів, після 30 пасажів - у 16 разів (рис. 1, 2).

При вихідній МФцК для C. albicans 127 7,8 мкг/мл, після 5 пасажів у присутності зростаючих концентрацій десептолу її величина не змінювалась. Після 10 пасажів спостерігали її збільшення до 15,6 мкг/мл, а через 30 пасажів - до 62,5 мкг/мл. Стійкість S. aureus 71 до десептолу розвивалася досить повільно. Так, вихідна МБцК становила 0,97 мкг/мл. При подальшому культивуванні стафілококу в середовищі в присутності десептолу МБцК зросла в 2 рази і становила 1,95 мкг/мл. Після 30 пасажу спостерігали різке наростання резистентності S. aureus в 8 разів, МБцК при цьому становила 7,8 мкг/мл.

Рис. 1. Характеристика швидкості формування стійкості до декаметоксину штамів стафілокока та C. Albicans

бетадин протимікробний еротекс антисептичний



Рис. 2. Швидкість формування резистентних варіантів S. aureus 71, C. albicans 127 до декаметоксину

Досить повільним відмічалося формування резистентності до десептолу у клінічного штаму C. albicans 127. Так, вихідна МФцК препарату для C. albicans 127 становила 3,9 мкг/мл. Після 10 пасажів МФцК зростала в 2 рази і становила 7,8 мкг/мл.

Після 25 пасажу МФцК десептолу збільшувалася у 8 разів, досягаючи 31,25 мкг/мл. Такий рівень фунгіцидної концентрації не змінювався і після 30 пасажів. У присутності антисептичних супозиторіїв фарматекс чутливість стафілококу до препарату зменшилась після 10 пасажу, МБцК складала 7,8 мкг/мл. Після 15 пасажів МБцК збільшувалась у 4 рази (15,6 мкг/мл), після 20 пасажів - у 8 разів (31,25 мкг/мл), після 25 пасажів - у 16 разів (62,5 мкг/мл).

Стійкість до фарматексу у C. albicans 127 розвивалась за наступним порядком. Після 5 пасажів чутливість до фарматексу не змінилась в порівнянні з контролем. При цьому фунгіцидна концентрація дорівнювала 15,6 мкг/мл. Починаючи з 10 пасажу МФцК зросла в 2 рази і досягла 31,25 мкг/мл в порівнянні з контролем; після 20 пасажів у 4 рази (62,5 мкг/мл). Тридцятикратне культивування C. albicans 127 супроводжувалось зниженням чутливості її в 16 разів. При цьому МФцК зросла до 250 мкг/мл. МБцК для стафілококу була 15,6 мкг/мл. Після 10 пасажів МБцК складала 31,25 мкг/мл та утримувалась протягом 5 наступних пасажів, після 20 - МБцК фарматексу відповідала 62,5 мкг/мл. Після 30 пасажу МБцК відповідала 250 мкг/мл.

Формування резистентності до еротексу у C. albicans 127 спостерігали після 10 пасажу. Так, кратність МФцК становила 500 мкг/мл. Протягом наступних 5 пасажів чутливість C. albicans 127 до препарату не змінилась. МФцК після 20 пасажу відповідала 1000 мкг/мл і утримувалась до 30 пасажу.

Після відкриття і впровадження в медичну практику антибіотиків, не зупиняються пошуки нових препаратів, для лікування гнійно-запальних захворювань. У багатьох країнах світу науковці досліджують значення адгезії мікроорганізмів у виникненні інфекційних хвороб. Адгезія бактерій на клітинах тварин, людей детермінується адгезинами, які чутливі до дії протимікробних засобів. Очевидно, на даний процес можна впливати за допомогою протимікробних препаратів. Для дослідження нами було взято антисептичні супозиторії десептол, фарматекс, еротекс (рис. 3, 4).

Аналіз адгезивних властивостей грампозитивних і грамнегативних бактерій дозволив встановити, що клінічні штами мають більшу адгезивну здатність, ніж музейні представники даного виду. Отримані дані дозволяють припустити, що розвиток інфекційного процесу може бути обумовлений формуванням резистентності у збудників до лікарських засобів та їх адгезивністю.

Встановлено, що антисептичні препарати десептол, фарматекс, еротекс впливають на адгезивну здатність як музейних, так і клінічних штамів стафілококу та ешерихій.

Рис. 3. Вплив антисептичних супозиторіїв на адгезивні властивості S. aureus

Рис. 4. Вплив антисептичних супозиторіїв на адгезивні властивості Е. coli

Індекс адгезивності клінічних штамів стафілококів знижувався під дією десептолу (21,9%), фарматексу (23,6%), еротексу (25,7%). Індекс адгезивності клінічних штамів ешерихій зменшується під впливом десептолу (16,2%), фарматексу (27,7%), еротексу (30,1%).

На процес адгезії найбільш активно впливають антисептичні супозиторії десептол, які містять в своєму складі антисептик декаметоксин та супозиторну основу овуцир.

У гістологічних препаратах після використання десептолу з основою овуцир з боку морфологічної структури серця, легенів, печінки, селезінки, нирок не виявлено відхилень від норми.

Проведене дослідження антисептичних супозиторіїв десептол показало, що після їх застосування в прямій кишці кровоносні судини слизової оболонки та підслизового шару були з помірним кровонаповненням, не розширені. Підслизовий шар без ознак набряку, клітинна запальна інфільтрація відсутня. В слизовій оболонці та підслизовому шарі накопичення еозинофілів не спостерігали. Епітелій слизової оболонки розташований на тонкій базальній мембрані. Цитоплазма епітеліальних клітин мутна, містить дрібні еозинофільні зерна, ядра нормохромні, звичайного вигляду. М'язова пластинка слизової оболонки та м'язовий шар стінки прямої кишки звичайного вигляду, без помітних патологічних змін. На поперечному зрізі слизової оболонки крипти мають звичайний вигляд, просвіт їх вільний, епітеліальні клітини не збільшені. В окремих криптах просвіт був звужений або відсутній за рахунок збільшення в розмірі епітеліальних клітин. Цитоплазма таких клітин мутна, неоднорідна, містить багато еозинофільних гранул, ядра нормохромні або гіпохромні. В прилеглій до прямої кишки шкірі епідерміс та дерма мають звичайну будову, без патологічних змін, кровоносні судини помірного кровонаповнення. Додатки шкіри - сальні залози та волосяні фолікули мали звичайний вигляд.

Після використання фарматексу і еротексу в слизовій оболонці прямої кишки спостерігали незначні явища порушення кровообігу у вигляді повнокров'я, нерівномірного кровонаповнення судин, діапедезних крововиливів, помірний набряк підслизового шару, вогнищеву лімфоїдну інфільтрацію та накопичення невеликих груп поодиноких еозинофілів.

Таким чином, дослідження впливу антисептичних супозиторіїв на структуру внутрішніх органів показало, що в них не відбувалось патологічних змін.

Всебічне вивчення антимікробних властивостей, особливостей формування резистентності, впливу антисептичних препаратів на адгезію та на морфологічну структуру внутрішніх органів дозволяє нам зробити позитивну оцінку супозиторіїв з декаметоксином на основі овуцир та рекомендувати до подальшого клінічного дослідження для профілактики та лікування гнійно-запальних захворювань у жінок.

ВИСНОВКИ

У дисертаційній роботі наведено теоретичне узагальнення і вирішення наукового завдання по створенню, дослідженню високоефективних антисептичних супозиторіїв з декаметоксином на сучасній супозиторній основі овуцир, які володіють бактерицидними, фунгіцидними властивостями. Досліджено особливості формування резистентності до лікарських протимікробних супозиторіїв десептолу на основі овуциру, фарматексу, еротексу у музейних і клінічних штамів стафілококів, ешерихій. Вивчено вплив антисептичних супозиторіїв на адгезивну здатність бактерій. Доведено, що супозиторії на сучасній супозиторній основі овуцир з декаметоксином не впливають на морфологічну структуру серця, легенів, печінки, нирок, селезінки, прямої кишки тварин.

1. Антисептичні супозиторії на новій основі овуцир проявляють високу антимікробну активність до музейних та клінічних штамів стафілококу. Так, на клінічні штами стафілококу супозиторії десептол діє бактерицидно у межах 0,12 мкг/мл - 1,95 мкг/мл, фарматекс - 0,48 мкг/мл - 31,25 мкг/мл, еротекс - 7,8 мкг/мл - 250 мкг/мл, гексикон - 3,12 мкг/мл - 50 мкг/мл, бетадин - 2,5 мг/мл - 5,0 мг/мл.

2. Антисептичні супозиторії десептол, фарматекс, еротекс, гексикон, бетадин проявляють високу протимікробну активність до грампозитивних, грамнегативних мікроорганізмів. МБцК для ешерихії проявляються у десептолу (7,8 мкг/мл - 31,25 мкг/мл), фарматексу (125 мкг/мл - 250 мкг/мл), еротексу (250 мкг/мл - 500 мкг/мл), гексикону (12,5 мкг/мл - 200 мкг/мл). Бетадин має низьку бактерицидну активність на ешерихії (2,5 мг/мл - 5,0 мг/мл).

3. Антисептичні супозиторії десептол на новій основі овуцир, фарматекс, еротекс у різних умовах зберігають наступну протимікробну активність. Так, наявність 5 %, 10 % сироватки у поживному середовищі знижує бактерицидну концентрацію десептолу, фарматексу, еротексу у 2-8 разів. Антимікробна концентрація десептолу при навантаженні поживного середовища 5 % сироватки крові дорівнює 0,24 мкг/мл - 3,9 мкг/мл; 10 % - 0,48 мкг/мл - 7,8 мкг/мл (р<0,05). Для фарматексу МБцК, при наявності в середовищі 5 %, 10 % білків крові, складає 1,95 мкг/мл - 62,5 мкг/мл і 3,9 мкг/мл - 125,0 мкг/мл відповідно (р<0,05). МБцК еротексу в присутності 5% та 10% білкового навантаження в МПБ становить 15,6 мкг/мл - 250,0 мкг/мл та 62,5 мкг/мл - 500,0 мкг/мл відповідно (р<0,05).

4. Встановлено, що десептол, фарматекс, еротекс, гексикон, бетадин у слабко-кислому (pH 6,0) та слабко-лужному (рН 8,0) нативних середовищах зберігають високу бактерицидну дію на клінічні штами стафілококу. Десептол при рН 6,0 діє на стафілококи у концентрації 0,24 мкг/мл- 3,9 мкг/мл; рН 8,0 - 0,24 мкг/мл - 1,95 мкг/мл (р<0,05). МБцК фарматексу при рН 6,0 складає 1,95 мкг/мл - 62,5 мкг/мл, при рН 8,0 - 0,97 мкг/мл - 15,6 мкг/мл (р<0,05). Супозиторії еротекс при рН 6,0 діють в концентрації 15,6 мкг/мл - 500,0 мкг/мл, при рН 8,0 - 7,8 мкг/мл - 250,0 мкг/мл (р<0,05); при рН 6,0 МБцК супозиторіїв гексикон дорівнює 3,12 мкг/мл - 50,0 мкг/мл, при рН 8,0 - 1,56 мкг/мл - 25,0 мкг/мл (р<0,05). Супозиторії бетадин мають стабільну МБцК при рН 6,0 і рН 8,0 (2500 мкг/мл - 5000 мкг/мл). Мікробне навантаження клінічних штамів стафілококу ( 103, 106, 109, КУО) зменшує МБцК фарматексу, еротексу у 2 рази (р<0,05).

5. У присутності антисептичних супозиторіїв десептол, фарматекс, еротекс повільно формується резистентність у S. aureus, C. albicans. Резистентні варіанти S. aureus, C. albicans зберігають високу чутливість до антисептиків. У резистентних варіантів S.aureus, C.albicans спостерігається уповільнення їх росту на поживних середовищах, явище поліморфізму. В присутності десептолу, фарматексу, еротексу резистентність стафілококу зросла після 30 пасажів у 16 разів (р<0,05), у C. albicans зросла у 4-16 разів (р<0,05) відповідно.

6. Встановлено, що індекс адгезивності клінічних штамів стафілококів статистично вірогідно знижується під дією десептолу - 21,9 % (р<0,05), фарматексу - 23,6 % (р<0,05), еротексу - 25,7 % (р<0,05). Індекс адгезивності клінічних штамів ешерихій статистично вірогідно зменшується під впливом десептолу - 16,2 % (р<0,05), фарматексу - 27,7 % (р<0,05), еротексу - 30,1 % (р<0,05).

7. Антисептичні супозиторії десептол на сучасній супозиторній основі овуцир не викликають морфологічних змін в тканинах серця, легенів, печінки, нирок, прямої кишки тварин в процесі тривалого застосування, що свідчить про їх безпечність та можливість застосування в медичній практиці після завершення клінічних досліджень.

Практичні рекомендації

1. Розроблені проект Тимчасової Фармакопейної статті Suppositoria Deseptolum, технологічний регламент на супозиторії десептол, надано для використання на фармацевтичному заводі «Монфарм» (Україна).

2. Супозиторії десептол рекомендовано застосовувати для лікування неспецифічних грибкових кольпітів; вагінітів, цервіцитів, вульвітів грибкового, бактеріального та змішаного генезу; метритів, параметритів, сальпінгітів; а також для санації в перед- та післяопераційному періодах при гінекологічних оперативних втручаннях; для допологової санації породіль з метою профілактики післяпологових запальних ускладнень.

список опублікованих праць за темою дисертації

1. Коваленко І. М. Дослідження властивостей штамів мікроорганізмів в процесі лікування хворих з безпліддям / І. М. Коваленко, М. Д. Боцюра // Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биологических наук и практического здравоохранения. Труды Крымского государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского. - Судак, 2008. - Т. 144, Ч. ІІІ. - С. 156 - 157. (І.М. Коваленко вивчила чутливість клінічних штамів бактерій до препарату антимікробних препаратів, підготувала матеріали до друку).

2. Оцінка протимікробних властивостей антисептиків і деяких хінолінів / В. М. Бойко, А. Ю. Волянський, А. В. Крижановська, О. М. Зарицький, І. М. Коваленко // Biomedical and biosocial anthropology. - 2008. - № 11. - С. 17 - 22. (І.М. Коваленко провела вивчення властивостей антисептичногоо препарату декаметоксину).

3. Отличительные особенности лечения условно-патогенной грибковой патологии в условиях эволюции инфекционных заболеваний / С. А. Иванова, Ю. В. Кордон, И. Н. Коваленко, Е. И. Жорняк, Н. С. Фомина // Biomedical and biosocial anthropology. - 2008. - № 11. - С. 62 - 64. (Дисертант вивчала вплив антисептиків на властивості C. albicans).

4. Прокопчук З. М. Вивчення можливостей застосування супозиторіїв з антисептиками в лікуванні гнійно-запальних захворювань у жінок / З. М. Прокопчук, Н. П. Дзісь, І. М. Коваленко, О. І. Жорняк // Biomedical and biosocial anthropology. - 2008. - № 11. - С. 100 - 103. (І.М. Коваленко самостійно вивчила антимікробну активність супозиторіїв).

5. Коваленко І. М. Вплив антисептичних супозиторіїв на морфологічну структуру внутрішніх органів / І. М. Коваленко // Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биологических наук и практического здравоохранения. Труды Крымского государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского Судак, 2009 Т. 145, Ч. ІІІ. - С. 118 120.

6. Пат. 33335 Україна, МПК (2006), А61К 9/02, А61К 31/14. Контрацептивні супозиторії з профілактичною дією до захворювань, що передаються статевим шляхом / Палій Г. К., Ковальчук В. П., Палій В. Г., Палій Д. В., Коваленко І. М. - № 200711539; заявл. 18.10.2007 ; опубл. 25.06.2008, Бюл. № 12. - 8 с. (І. М. Коваленко самостійно підготувала матеріал до друку).

7. Коваленко І. М. Вивчення чутливості клінічних штамів мікроорганізмів до антибіотиків, антисептиків / І. М. Коваленко, Ю. В.Кордон // Молодь та медицина майбутнього : Матеріали V-ої міжнародної науково-практичної конференції студентів та молодих вчених, 2-3 квітня 2008 р. - Вінниця, 2008. С. 250. (Дисертантом самостійно проведено бактеріологічне дослідження, підготовлено матеріал до друку).

8. Коваленко І. М. Вивчення чутливості клінічних штамів мікроорганізмів до антибіотиків, антисептиків / І. М. Коваленко // Довкілля і здоров'я : матеріали всеукраїнської науково-практичної конференції, 24-25 квітня 2008 р. - Тернопіль, 2008. - С. 45.

9. Прокопчук З. М. Дослідження антимікробних властивостей супозиторіїв, що містять гідрофільні напівсинтетичні гліцериди / З. М. Прокопчук, І. М. Коваленко // ХІV Університетська (ХХХХV вузівська) науково-практична конференція молодих вчених і фахівців, 14 травня 2008р. - Вінниця, 2008. - С. 106. (Здобувачем особисто проведено пошук та аналіз літературних джерел по даній темі, бактеріологічне дослідження, експерименти та підготовлено матеріал до друку).

10. Бойко В. М. Мікробіологічні аспекти вивчення первинних механізмів патогенності стафілококів, та дії на них декаметоксину та препаратів фторхінолонового ряду / В. М. Бойко, І. М. Коваленко, Ю. В. Кордон // Шпитальні інфекції: сучасний стан проблеми : матеріали науково-практичної конференції, 11-12 грудня 2008. - Харків, 2008. - С. 26 - 27. (Здобувачем особисто проведено пошук та аналіз літературних джерел по даній темі, бактеріологічне дослідження).

11. Коваленко І. М. Мікробіологічна оцінка антисептичних супозиторіїв в лікуванні госпітальних інфекцій / І. М. Коваленко // Шпитальні інфекції: сучасний стан проблеми : матеріали науково-практичної конференції, 11-12 грудня 2008. - Харків, 2008. - С. 52 - 53.

12. Прокопчук З. М. Застосування антисептичних супозиторїв в лікуванні гнійно-запальних захворювань в умовах госпітальної клініки / З. М. Прокопчук, І. М. Коваленко, О. М. Зарицький // Шпитальні інфекції: сучасний стан проблеми : матеріали науково-практичної конференції, 11-12 грудня 2008. - Харків, 2008. - С. 150 - 151. (І.М. Коваленко самостійно провела вивчення антисептичних супозиторіїв з різними субстанціями)

13. Палий Г. К. Иммуногенные и защитные свойства полисахарида пневмозана / Г. К. Палий, А. А. Чеснокова, И. Н. Коваленко // Ліки людині. Сучасні проблеми створення, дослідження та апробації лікарських засобів : Матеріали ХХVI науково-практичної конференції з міжнародною участю, 12 березня 2009р. - Харків, 2009. - С. 82. (Здобувачем самостійно проведено аналіз літературних джерел).

14. Прокопчук З. М. Оцінка впливу рН середовища на антимікробні властивості декаметоксину у складі супозиторіїв десептол / З. М. Прокопчук, І. М. Коваленко // Ліки людині. Сучасні проблеми створення, дослідження та апробації лікарських засобів : матеріали ХХVI науково-практичної конференції з міжнародною участю, 12 березня 2009 р. - Харків, 2009. - С. 92. (І. М. Коваленко особисто провела експеримент та підготувала матеріал до друку).

15. Бойко В. М. Дослідження чутливості госпітальних штамів бактерій до протимікробних препаратів / В. М. Бойко, І. М. Коваленко // Ліки людині. Сучасні проблеми створення, дослідження та апробації лікарських засобів : матеріали ХХVI науково-практичної конференції з міжнародною участю, 12 березня 2009 р. - Харків, 2009. - С. 164 - 167. (Здобувачем особисто проведено виділення та вивчення біологічних властивостей мікрофлори, підготовлено матеріал до друку).

16. Коваленко І. М. Дослідження впливу антисептичних супозиторіїв з бензалконієм хлоридом, декаметоксином на морфологічну структуру внутрішніх органів / І. М. Коваленко // Сьогодення та майбутнє медицини : матеріали VІ-ої міжнародної наукової конференції студентів та молодих вчених, 9-10 квітня 2009 р. - Вінниця, 2009. - С. 56.

17. Коваленко І. М. Вплив несприятливих умов на протимікробні властивості декаметоксину / І. М. Коваленко // Вісник ВНМУ. - 2009. - № 13. С. 272 - 273.

18. Коваленко І. М. Вплив зміни рН середовища на протимікробні властивості декаметоксину / І. М. Коваленко // Довкілля і здоров'я : матеріали всеукраїнської науково-практичної конференції, 24-25 квітня 2009 р. - Тернопіль, 2009. - С. 35.

19. Коваленко І. М. Вплив антимікробних супозиторіїв на морфологічну структуру внутрішніх органів тварин / І. М. Коваленко // ХІІ з'їзд товариства мікробіологів України ім. С.М. Вернадського, 25 - 30 травня 2009 р. : тези доповідей - Ужгород, 2009. - С. 204.

20. Бойко В. М. Чутливість госпітальних штамів мікроорганізмів до протимікробних засобів та їх вплив на патогенні механізми / В. М. Бойко, І. М. Коваленко, Ю. В. Кордон // ХІІ з'їзд товариства мікробіологів України ім. С.М. Вернадського, 25 - 30 травня 2009 р. : тези доповідей - Ужгород, 2009. С. 150. (здобувачем особисто проведено пошук та аналіз літературних джерел по даній темі, бактеріологічні дослідження).

21. Палий Г. К. Инвазивные грибковые инфекции у больных злокачественными новообразованиями / Г. К. Палий, С. А. Иванова, И. Н. Коваленко, Ю. В. Кордон, Н. С. Фомина // ХІІ з'їзд товариства мікробіологів України ім. С.М. Вернадського : тези доповідей, 25 - 30 травня 2009 р. - Ужгород, 2009. - С. 233. (Здобувачем особисто проведено пошук та аналіз літературних джерел по даній темі, бактеріологічні дослідження та підготовлено матеріал до друку).

22. Kovalenko I. M. Investigation of antimicrobial properties of antiseptic suppositoria and the influence of unfavourable factors / I. M. Kovalenko // Microbiology on service for human : 3rd Ukrainian-Polish Weigl conference, September 14 - 17, 2009. - Odessa, 2009. - Р. 212.

23. Коваленко І. М. Дослідження протимікробних властивостей декаметоксину при зміні рН середовища / І. М. Коваленко // Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биологических наук и практического здравоохранения. Труды Крымского государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского. - Симферополь, 2009. - Т. 145, Ч. V. - С. 127.

анотація

Коваленко І.М. Мікробіологічне обгрунтування розробки та медичного застосування антисептичного супозиторію на основі декаметоксину і овуциру. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 03.00.07 - мікробіологія. - ДУ «Інститут мікробіології та імунології ім. І.І.Мечникова АМН України». - Харків, 2010.

Дисертація присвячена мікробіологічному дослідженню та експериментальному обґрунтуванню застосування антисептичних супозиторіїв з декаметоксином на новій супозиторній основі овуцир, супозиторіїв фарматекс, еротекс гексикон, бетадин. Наведено результати дослідження чутливості бактерій до антибіотиків, швидкості формування резистентності госпітальних ізолятів стафілококу та C. albicans до лікарських антисептичних препаратів. Вивчено вплив слабко-кислого та слабко-лужного середовища, білкового навантаження, а також різного мікробного навантаження на антимікробні властивості антисептичних супозиторіїв, що досліджувались.

Проведено експериментальне обґрунтування дії антисептичних препаратів на адгезивну здатність стафілококів та ешерихій. Вивчено вплив протимікробних препаратів на гістологічну структуру тканин внутрішніх органів тварин. Отримані результати досліджень вказують на гарну перспективу застосування нових лікарських антисептичних супозиторіїв для лікування, профілактики гнійно-запальних захворювань.

Ключові слова: декаметоксин, антисептики, супозиторії, адгезія, резистентність, морфологія,внутрішні органи.

АННОТАЦИЯ

Коваленко И.Н. Микробиологическое обоснование разработки и медицинского использования антисептического суппозитория на основе декаметоксина и овуцира. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 03.00.07 - микробиология. - ГУ «Институт микробиологии и иммунологии им. И.И.Мечникова АМН Украины». - Харьков, 2010.

Диссертация посвящена микробиологическому исследованию, экспериментальному обоснованию использования новых антисептических суппозиториев с декаметоксином на новой суппозиторной основе овуцир, суппозиториев фарматекс, эротекс, гексикон, бетадин. В исследованиях использовано 169 музейных и выделенных от больных микроорганизмов. В работе приведены результаты исследования антимикробной активности антисептических суппозиториев, антибиотиков по отношению к грамположительным и грамотрицательным бактериям. Установлено, что музейные и клинические штаммы высокочувствительны к десептолу, фарматексу, гексикону; менее чувствительны к эротексу и бетадину. В диссертационной работе изучены физико-химические свойства исследуемых соединений, а именно проведены исследования влияния неблагоприятных факторов: изменение концентрации ионов водорода (рН 6,0, 7,2, 8,0), белковой нагрузки (5 %, 10 % сыворотки в питательной среде) и микробной нагрузки (103, 106, 109 КОЕ/мл). Доказано, что изменение реакции среды существенно не влияло противостафилококковое действие изучаемых суппозиториев. Белковая нагрузка уменьшала антимикробную активность исследуемых суппозиториев, но она оставалась на достаточно высоком уровне по отношению к клиническим штаммам стафилококка. Результаты исследований показали, что по мере возрастания количества бактерий в инокуляте активность суппозиториев снижалась.

Исследование формирования устойчивости микроорганизмов к изучаемым препаратам показало, что клинические концентрации изучаемых препаратов во много раз превышают МБцК для резистентных штаммов микроорганизмов.

Изучено влияние антимикробных препаратов на адгезию клинических штаммов грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Исследования показали, что антисептические препараты изменяли адгезию бактерий. Самый низкий индекс адгезивности наблюдали в присутствии десептола - 13,1% у музейного штамма стафилококка и 21,9% у клинического, что в 7,6 и 4,5 раз меньше по сравнению с контролем.

В процессе исследования проведен анализ морфологической структуры внутренних паренхиматозных органов (сердце, легкие, печень, селезенка, почки, прямая кишка). После использования суппозиториев десептол на суппозиторной основе овуцир у подопытных животных не наблюдали в ткани прямой кишки признаков нарушения кровообращения, воспалительных, некротических, аллергических явлений. Со стороны морфологической структуры сердца, легких, печени, селезенки, почек не выявлено отклонений от нормы. Полученные результаты исследований указывают на хорошую перспективу применения новых лекарственных антисептических суппозиториев на суппозиторной основе овуцир для лечения, профилактики гнойно-воспалительных заболеваний

Ключевые слова: антисептики, декаметоксин, суппозитории, адгезия, резистентность, морфология, внутренние органы.

SUMMARY

Kovalenko I.M. Microbiological grounding of development and medical use of antiseptic suppository based decamethoxin and ovuсir. - Manuscript.

Thesis for obtaining the Academic Degree of a Candidate of Medical Sciences in specialty 03.00.07 - Microbiology. - SE “I.I. Mechnikov Institute of Microbiology and Immunology Academy of Medical Sciences. - Kharkiv, 2010.

This Thesis is dedicated to the microbiological research and experimental grounding of antiseptical suppository with decamethoxin usage on the new suppository basis ovucir, pharmatex suppository, erotex, hexikon, betadin. Research results of bacteria sensitivity to antibiotics, resistance forming speed of hospital staphylococcus isolates and C. albicans to medicinal antiseptic preparation were carried out. An influence of light - acid and light - alkaline environment, protein load was studied and also different microbial load on antimicrobial properties of antiseptic suppository that were studied.

An experimental grounding of antiseptic preparations action on the staphylococcus and Escherichia adhesive ability was led. An influence of antimicrobial preparations on histological structure of animal internal organs tissues was studied.

Research results that we have got, point to great perspective of new medicinal antiseptic suppository usage for inflammatory-purulent diseases treatment and prophylaxis.

Key words: decamethoxin, antiseptics, suppository, adhesion, resistance, morphology, internal organs.

Размещено на Allbest.ur

...