Микробиология с основами вирусологии

Размещено на http://www.allbest.ru//

Размещено на http://www.allbest.ru//

1. Какие методы исследования используются в микробиологии?

Микробиологический метод (бактериологический, культурный) - посев материала на питательные среды для выделения чистой культуры и определения ее вида;

микроскопический метод - изучение микробов в окрашенном и неокрашенном (нативном) состоянии с помощью различных типов микроскопов. Метод позволяет определить форму, размеры, расположение, структурные элементы и отношение к окраске микробов. По характерным морфологическим особенностям можно определить вид микроба (грибов, простейших, некоторых бактерий);

серологический метод (иммунологический) - основан на выявлении специфических иммунных антител в сыворотке крови больного с использованием иммунологических реакций;

биологический метод (экспериментальный) -заражение микробами лабораторных животных. Метод позволяет:выделить чистую культуру микробов, плохо растущих на питательных средах, изучить болезнетворные свойства микроба, получать иммунобиологические препараты для специфической профилактики, диагностики и лечения;

молекулярно-генетический метод - позволяет анализировать фрагменты ДНК, находить и изолировать отдельные гены и их сегменты, устанавливать в них последовательность нуклеотидов.

2. Как происходит спорообразование у бактерий? Перечислите спорообразующие бактерии

Споры (эндоспоры) бактерий -- особый тип покоящихся репродуктивных клеток, характеризующихся резко сниженным уровнем метаболизма и высокой резистентностью.

Бактериальная спора формируется внутри материнской клетки и называется эндоспорой. Внутри бактериальной клетки образуется только одна спора.

Основная функция спор -- сохранение бактерий в неблагоприятных условиях внешней среды. Переход бактерий к спорообразованию наблюдается при истощении питательного субстрата, недостатке углерода, азота, фосфора, накоплении в среде катионов калия и марганца, изменении рН, повышении содержания кислорода и т. д.

От вегетативных клеток споры отличаются репрессией генома, почти полным отсутствием обмена веществ (анабиозом), малым количеством свободной воды в цитоплазме, повышением в ней концентрации катионов кальция и появлением дипиколиновой (пиридин-2,6-дикарбоновой) кислоты в виде Са-хелата, с которыми связывают пребывание спор в состоянии покоя и их термоустойчивость.

Основными стадиями спорообразования являются:

1. Подготовительная стадия. Процессу предшествует перестройка генетического аппарата клетки: ядерная ДНК вытягивается в виде нити и концентрируется у одного из полюсов клетки либо в центре в зависимости от вида бактерий. Эта часть клетки называется спорогенной зоной.

2. Образование проспоры.В спорогенной зоне происходит обезвоживание и уплотнение цитоплазмы и обособление этой зоны с помощью перегородки, образующейся из цитоплазматической мембраны.

Проспора - структура, располагающаяся внутри клетки и отделенная от нее двумя мембранами.

3. Формирование оболочек споры. Между мембранами формируется кортикальный слой (кортекс), сходный по составу с клеточной стенкой вегетативной клетки. Помимо пептидогликана - муреина, в кортексе содержится кальциевая сольдипиколиновой кислоты, которая синтезируется клеткой в процессе спорообразования. Затем сверху мембраны синтезируется оболочка споры, состоящая из нескольких слоев. Число и строение слоев различны у разных видов бактерий. Оболочка малопроницаема для воды и растворенных веществ и обеспечивает большую устойчивость спор к внешним воздействиям

Заканчивается образование всех структур споры, она становится термоустойчивой, приобретает характерную форму и занимает определенное положение в клетке.

4. Выход споры из клетки. После созревания споры разрушается оболочка, и спора выходит наружу.

Процесс спорообразования длится несколько часов.

Таким образом, спора - это обезвоженная клетка, покрытая многослойной оболочкой, в состав которой входит кальциевая соль дипиколиновой кислоты. Споры бактерий устойчивы к действию высоких температур, химических соединений, в том числе органических растворителей и поверхностно-активных веществ; могут длительное время (десятки, сотни лет) существовать в покоящемся состоянии.

Попадая в благоприятные условия, спора прорастает. Процесс превращения споры в растущую (вегетативную) клетку начинается с поглощения воды и набухания. При этом происходят глубокие физиологические изменения: усиливается дыхание и активизируются ферменты. В этот же период спора теряет свою термоустойчивость. Затем внешняя оболочка ее разрывается, и из образовавшейся структуры формируется вегетативная клетка. На месте разрыва оболочки споры возникает ростовая трубка и формируется вегетативная клетка. Прорастание спор длится около 4--5 ч.

Способностью к образованию спор обладают преимущественно палочковидные грамположительные бактерии родов Bacillus и Clostridium, из шаровидных бактерий лишь единичные виды, например Sporosarcinaureae.Баектерии, образующие споры, называются бациллами.

Наиболее известными видами бацилл являются: Bacillusanthracis -- возбудитель сибирской язвы и Bacillussubtilis, называемая также сенной палочкой.

К роду клостридии относится более 100 видов, в частности: C. acetobutylicum, C. aerotolerans, C. beijerinckii, C. bifermentans, C. botulinum (см. на рисунке справа), C. butyricum, C. cadaveris, C. chauvoei, C. clostridioforme, C. colicanis, C. difficile, C. fallax, C. formicaceticum, C. histolyticum, C. innocuum, C. ljungdahlii, C. laramie, C. lavalense, C. novyi, C. oedematiens, C. paraputrificum, C. perfringens, C. phytofermentans, C. piliforme, C. ramosum, C. scatologenes, C. septicum, C. sordellii, C. sporogenes, C. tertium, C. tetani, C. tyrobutyricum.

3. Каково значение грибов для человека?

Грибы (Mycetes) -- низшие растительные организмы, не имеющие хлорофилла. Играют важную роль в круговороте веществ в природе, а также в жизни человека: в пищевой промышленности (при изготовлении хлеба, вина, пива), фармацевтической промышленности и других производствах. Среди грибов имеются возбудители заболеваний человека и животных.

Грибы рода Penicillium применяются для получения антибиотика пенициллина, грибы рода Aspergillus -- в производстве лимонной кислоты и многих ферментных препаратов.

Химические соединения, полученные из грибов, совершили революции в фармакологии и медицине. С появлением пенициллина стало возможным лечить болезни, ранее считавшиеся абсолютно летальными, такие как, например, перитонит и гангрена. В результате селекционных работ, проведенных, в частности в СССР под руководством С. И. Алиханяна, были получены генетически измененные штаммы гриба, повысившие выход пенициллина во много раз.

Через несколько лет после массового использования пенициллина, его эффективность начала падать в связи с появлением резистентных к пенициллину штаммов стафилококков и стрептококков. Это заставило усилить поиск новых антибиотиков, увенчавшийся созданием нового антибиотика цефалоспорина, выделенного из гриба, относящегося к роду Cephalosporium. Несмотря на открытие и применение в медицине десятков антибиотиков, полученных из почвообитающихмицелиальных бактерий, актиномицетов, пенициллины и цефалоспорины остаются наиболее востребованными антибиотиками.

Один из выделенных грибов, относящийся к роду Tolypocladium, показал слабую антибиотическую активность, которая была ниже, чем у коммерческих штаммов актиномицетов и грибов, поэтому его хотели отбраковать. Но в процессе исследований этого штамма у него был обнаружен побочный эффект -- способностью вызывать иммуносупрессию, избирательно ингибируя высвобождение интерлейкина-2 из Т-4 лимфоцитов. С помощью цитокинов иммунные клетки обмениваются информацией о появлении в организме чужеродных бактерий, вирусов, молекул или даже целых тканей и органов, после чего принимается решение о способах нейтрализации чужого. Иммуномодулятор из гриба Tolypocladium был очищен. Он оказался циклическим пептидом, содержащим 11 аминокислот, замкнутых в кольцо, и получил название циклоспорина.

Также в 80-е годы в клиническую практику был введен и другой продукт жизнедеятельности грибов -- специфический ингибитор синтеза холестерина ловастатин, который, вместе с его полусинтетическими аналогами статинами, широко используются в клинике для лечения заболеваний, связанных с отложением холестериновых бляшек на сосудах.

Открытие циклоспорина и статинов стимулировало поиск фармакологических соединений, не обладающих антибиотической активностью, то есть эти грибные препараты открыли новое направление в фармакологии природных соединений -- лечение не только инфекционных, но и функциональных болезней.

Кроме лекарственных веществ, грибы используют для получения витаминов и антиоксидантов. Гриб Eremotheciumashbyi, паразитирующий на томате, хлопчатнике, цитрусовых и других южных растениях, образует огромное количество витамина В2 (рибофлавина).

Грибы -- легко возобновляемый источник хитина, который используется как прекрасный адсорбент, более эффективный, чем активированный

уголь; хитиновые повязки, накладываемые на раны или ожоги, способствуют ускорению заживления и снижают риск загноения ран.

4. Перечислите методы стерилизации. От чего зависит выбор метода?

Существует три основных метода стерилизации:

термический - применяются сухой горячий воздух, текучий пар, пар под давлением. Стерилизуют: ГЛФ, инъекционные и инфузионные растворы, аппаратуру, упаковку для стерильной продукции, текстиль, применяемый в медицине.

лучевой - при помощи гамма-лучей или УФ-лучей применяется для стерилизации больших объемов одноразовых шприцев и систем для переливания.

химический - применяются газы (окись этилена и ее смеси) и химические растворы (перекись водорода, хлоргексидинабиглюконат, надуксусная кислота). Стерилизуют: полимерные изделия, изделия из резины, коррозионно-стойкие металлы(газовый или химическими растворами).

Еще одним способом стерилизации является фильтрование. Микроорганизмы, их споры и продукты жизнедеятельности являются нерастворимыми образованиями, которые могут быть отделены от жидкости чисто механическим путем -- фильтрованием сквозь микропористые фильтры. Фильтрацию обычно используют при стерилизации растворов термолабильных веществ, а также в качестве предварительной операции перед термической стерилизацией (для уменьшения содержания частиц убитых микроорганизмов в объекте).

Выбор метода стерилизации изделий зависит от:

их устойчивости к методам стерилизационного воздействия (термостойкость, радиостойкость); допускается их разложение не более, чем на 1-2%;

эффективности воздействия на различные микроорганизмы и их удаления из объекта;

сохранения полноценности, не допускается образование токсичных веществ;

максимальной гарантии безопасности для персонала и пациентов;

наличия технологических установок для стерилизации и экономической целесообразности.

5. С какой целью используются дифференциально-диагностические среды? Примеры и принципы их работы

Дифференциально-диагностические среды -- специальные смеси питательных веществ, применяемые для определения видовой принадлежности микробов и изучения их свойств. При росте бактерий на дифференциально-диагностических средах протекают химические процессы, обусловленные наличием у микробной клетки различных ферментов. Одни из них способны расщеплять белки, другие --углеводы, третьи -- вызывать реакции окисления и восстановления и т. д. Благодаря действию ферментов в дифференциально-диагностической среде происходят соответствующие изменения. Дифференциально-диагностические среды можно разделить на четыре основные группы.

1. Среды, содержащие белок и выявляющие способность микробов расщеплять белки (протеолитические Свойства): мясо-пептонная желатина «столбиком», свернутая лошадиная или бычья сыворотка, молоко, кровяной агар. При посеве бактерий проколом в мясо-пептоннуюжелатину, «столбиком» в случае расщепления белка наблюдают разжижение среды. При посеве на среду со свернутой сывороткой расщепление белка определяют по разжижению среды и образованию углублений на ее поверхности. Расщепление микробом молока выявляется просветлением или растворением первоначально свернувшегося молока. Наличие гемолитической активности исследуемой культуры проверяют посевом ее в чашку Петри на специальный кровяной агар. В результате разрушения эритроцитов вокруг колоний (например, гемолитического стрептококка или стафилококка) образуются зоны просветления.

2. Среды для выявления способности микробов расщеплять углеводы и высокоатомные спирты (Эндо среда, Левина среда, Расселла среда, Дригальского -- Конради среда, Рапопорт -- Вайнтрауба среда, Шустовой среда). Для выявления этих свойств микроорганизмов применяют также «пестрый» ряд, т. е. серию пробирок, содержащих питательные среды, включающие различные углеводы, многоатомные спирты и индикатор. В качестве индикаторов пользуются лакмусовой настойкой или бромтимоловым синим. Разложение какого-либо из углеводов с образованием кислоты выявляют по изменению цвета индикатора, образование газа-- по заполнению газом и всплыванию специального стеклянного поплавка в жидкой среде. Или применяют полужидкие Гисса среды (см.) с 0,5% агара с соответствующими сахарами и индикатором Андраде. После посева микроба на эти среды образование кислоты выявляют покраснением среды, а образование газа -- по появлению его пузырьков в агаре или по разрыву и сдвигу вверх агарового столбика. К дифференциально-диагностическим средам второй группы относят также крахмальный агар, служащий для определения способности микробов расщеплять крахмал, среду Кларка и др.

3. Среды, на которых выявляется способность микробов обесцвечивать красители, добавленные к бульону: метиленовый синий, тионин, лакмус, индигокармин, нейтральный красный или другие (среда Ротбергера, среда Омелянского). К третьей группе относят также среды с нитратами, служащие для определения способности микробов восстанавливать соли азотной кислоты (нитраты) в соли азотистой кислоты (нитриты) и далее в аммиак или свободный азот.

4. Среды, выявляющие способность микробов усваивать вещества, которые не усваиваются другими микробами, например среда с лимоннокислым натрием (цитратный агар Симонса) для отличия кишечной палочки, которая лишена способности ассимилировать эту среду, от других бактерий кишечной группы или среда с олеиновокислым натрием для дифференциации дифтерийной палочки от ложно дифтерийной и дифтероидов (агарЭнжеринга).

К дифференциально-диагностическим средам относят также среды для дифференциации анаэробов, теллуритовые среды для дифференциации дифтерийных бактерий, среды с мочевиной, щелочные среды (Дьедоннеагар) для культивирования холерного вибриона и др.

6. Какие Вы знаете формы иммунитета?

Существует несколько форм и видов иммунитета. Такое разнообразие обусловлено значительным многообразием защитных свойств и механизмов иммунитета.

I -- естественный иммунитет:

а) врожденный, видовой;

б) приобретенный.

К естественному иммунитету относится также пассивный иммунитет новорожденных;

II -- искусственный иммунитет:

а) активный, возникающий после вакцинации;

б) пассивный, когда в организм вводят лечебные сыворотки или иммуноглобулины.

Как отдельную форму А. М. Безредка предложил выделить местный иммунитет органов и тканей.

Естественный иммунитет. Врожденный, видовой, иммунитет является наиболее прочной формой невосприимчивости, которая обусловлена врожденными, биологическими особенностями данного вида. Например, человек не болеет чумой рогатого скота, куриной холерой, рожей свиней. Животные, наоборот, невосприимчивы к заболеваниям человека: гонорее, сифилису, дифтерии, холере. Эти свойства невосприимчивости к тем или иным заболеваниям передаются потомству по наследству. По-видимому, врожденный, видовой, иммунитет является следствием естественной невосприимчивости тканей организма к паразитированию определенных микробов. Большое значение в естественной невосприимчивости, очевидно, имеют биохимические процессы, происходящие в клетке. Врожденный иммунитет неспецифичен, так как действителен против возбудителей различных заболеваний. Однако он не абсолютен и может быть снижен при охлаждении, перегревании, авитаминозах, действии кортизона.

Приобретенный иммунитет возникает после того, как человек перенес инфекционную болезнь, поэтому его называют также постинфекционным. Приобретенный иммунитет индивидуален, потомству не передается. Он специфичен, так как предохраняет организм только от перенесенной болезни. Длительность постинфекционного иммунитета различна. При одних заболеваниях, например чуме, туляремии, коклюше, кори, эпидемическом паротите, он пожизненный. Повторные заболевания при них возможны крайне редко. Длительный приобретенный иммунитет возникает также после заболевания брюшным тифом, холерой, натуральной и ветряной оспой, дифтерией, сыпным тифом, сибирской язвой. При некоторых инфекциях продолжительность приобретенного иммунитета невелика и человек может несколько раз болеть одной и той же болезнью. Например, при бруцеллезе продолжительность постинфекционного иммунитета равна 8--12 мес. Невосприимчивость к той или иной инфекционной болезни возникает не только при выраженной форме заболевания, но и при легких стертых и даже бессимптомных формах.

При большинстве инфекционных заболеваний развитие невосприимчивости к данному возбудителю идет параллельно освобождению организма от микробов, и после выздоровления человек освобождается от возбудителя. Иногда эту форму иммунитета называют стерильной. Существует также нестерильный, или инфекционный, иммунитет. Он заключается в том, что невосприимчивость человека к повторному заражению микробом связана с наличием в организме того же возбудителя. Как только организм освобождается от него, человек снова становится восприимчивым к данному инфекционному заболеванию. Инфекционный иммунитет существует при туберкулезе, сифилисе, глубоких микозах, малярии.

Различают антибактериальный иммунитет, когда защитные реакции организма, направлены на уничтожение микробов, и антитоксический, когда происходит обезвреживание токсических продуктов микроорганизмов. Особенно большое значение антитоксический иммунитет имеет при столбняке, ботулизме, дифтерии, газовой гангрене, при которых экзотоксины возбудителей поражают различные органы и системы.

Пассивный иммунитет новорожденных также является естественной формой иммунитета. Он обусловлен передачей особых веществ -- антител -- из организма матери плоду через плаценту или через молоко матери новорожденному. Продолжительность такого иммунитета невелика (всего несколько месяцев), но роль его очень важна. Обычно дети, обладающие таким иммунитетом, маловосприимчивы к заражению и заболеваниям в первые 6 мес жизни.

Искусственный иммунитет. Его создают в организме искусственно, чтобы предупредить возникновение инфекционной болезни, а также используют для лечения.

Различают активную и пассивную формы искусственного иммунитета.

Активный искусственный иммунитет создают у человека при введении ему препаратов, которые получают из убитых или ослабленных микробов (вакцины) либо обезвреженных токсинов возбудителей (анатоксины). Продолжительность активного искусственного иммунитета при использовании вакцин из живых ослабленных микробов и анатоксинов 3--5 лет, а в случае применения вакцин из убитых микробов -- до 1 года.

Пассивный искусственный иммунитет возникает при введении в организм человека специальных защитных веществ, которые получили название иммунных антител. Они содержатся в сыворотках переболевших людей. Антитела (иммунные сыворотки) можно получить, специально иммунизируя (заражая) животных определенными видами возбудителей.

Пассивный искусственный иммунитет сохраняется недолго, около месяца, до тех пор, пока существуют антитела в организме. Затем антитела разрушаются и выводятся из организма.

Местный иммунитет как отдельная форма иммунитета был выделен А. М. Безредкой, который считал, что существует местная невосприимчивость различных органов и тканей к возбудителю. Современные достижения иммунологии во многом подтверждают правомерность теории местного иммунитета Безредки, однако механизмы возникновения местной невосприимчивости тканей намного сложнее, чем он предполагал.



7. Где локализуется аутомикрофлора и какова ее численность?

Микрофлора организма человека(аутомикрофлора)- это эволюционно сложившаяся качественно и количественно относительно постоянная совокупность микроорганизмов, всех биоценозов, отдельных биотопов организма.

Ребенок рождается стерильным, но еще проходя через родовые пути, захватывает сопутствующую микрофлору. И к возрасту 1-3 месяцев микрофлора ребенка становится сходной с микрофлорой взрослого.

Количество микроорганизмов взрослого человека составляет 1014 особей

(на 1 см2 кожи может присутствовать несколько сотен тысяч бактерий; с каждым вдохом поглощается 1500-14000 и более микробных клеток; в 1 мл слюны - до 100 млн. бактерий; общая биомасса микроорганизмов в толстом кишечнике около 1,5 кг).

Основные биотопы организма:

Заселяемые биотопы - в этих биотопах бактерии живут, размножаются и выполняют определенные функции (кожа, воздухоносные пути, ЖКТ, наружные половые органы, уретра, наружный слуховой проход, конъюктива).

Стерильные биотопы - в этих биотопах в норме бактерии отсутствуют, выделение бактерий из них имеет диагностическое значение (кровь, ликвор, лимфа, перитонеальная жидкость, плевральная жидкость, моча в почках, мочеточниках и мочевом пузыре, синовиальная жидкость).

Микрофлора кожи - эпидермальный и сапрофитическийстафилококки, дрожжеподобные грибы, дифтероиды, микрококки.

Микрофлора верхних дыхательных путей - стрептококки, дифтероиды, нейссерии, стафилококки.

Полость рта - стафилококки, стрептококки, дрожжеподобные грибы, лакто бактерии, бактероиды, нейссерии, спирохеты и др.

Пищевод - в норме не содержит микроорганизмов.

В желудке - лактобактерии, дрожжи, единично стафилококки и стрептококки микробиология спорообразование гриб диагностический

Концентрация микроорганизмов кишечника, их видовой состав и соотношение меняется в зависимости от отдела кишечника.

У здоровых людей в 12-ПК количество бактерий не более 104 - 105КОЕ/мл.

Видовой состав - лактобактерии, бифидобактерии, бактероиды, энетрококки, дрожжеподобные грибы и др. С приемом пищи количество бактерий может значительно увеличиваться, но в короткий срок, возвращается к исходному уровню.

В верхних отделах тонкой кишки - количество микроорганизмов - 104 -105КОЕ/мл, в подвздошной кишке до 108 КОЕ/мл.

В толстой кишке у здорового человека количество микроорганизмов - 1011 - 1012КОЕ/г. Преобладают анаэробные виды бактерий - 90-95% всего состава. Это бифидобактерии, бактероиды, лактобактерии, вейлонеллы, пептострептококки, клостридии.

Около 5-10% - факультативные анаэробы - и аэробы - кишечная палочка, лактозонегативная энтеробактерия, энтерококки, стафилококки, дрожжеподобные грибы.

Виды кишечной микрофлоры: пристеночная (постоянная по составу, выполняет функцию колонизационной резистентности) и просветная (менее постоянная по составу, выполняет ферментативные и иммунизирующие функции).

Наиболее значимые представители облигатных бактерий в кишечнике:

Бифидобактреии - большая часть располагается в толстой кишке, являясь ее основной пристеночной и просветной микрофлорой. Содержание бифидобактерий у взрослых - 109 - 1010КОЕ/г.

Лактобактерии удается обнаружить ещев молоке человека и животных. Содержание в толстой кишке - 106 - 108КОЕ/г.

Эшерихия колли - кишечная палочка. Количество - 107 - 108КОЕ/г.

Биологическое равновесие нормофлоры легко нарушается факторами экзогенной и эндогенной природы. Такое явление называется дисбактериозом - изменение качественного и количественного состава микрофлоры а также мест ее нормального обитания.

8. Какие признаки заболевания у человека, которое вызвано токсинами Clostridiumtetani?

Clostridiumtetani - столбнячная палочка, грамположительная спорообразующая облигатно анаэробная бактерия рода Clostridium, возбудитель столбняка.

Столбняк -- зооантропонозное бактериальное острое инфекционное заболевание с контактным механизмом передачи возбудителя, характеризующееся поражением нервной системы и проявляющееся тоническим напряжением скелетной мускулатуры и генерализованными судорогами.

Инкубационный период столбняка может составлять от нескольких дней до месяца. Иногда заболевание начинается с продромальных явлений (напряжение и тремор мышц в области проникновения инфекции, головная боль, потливость, раздражительность), но, как правило, первым признаком столбняка является боль тупого, тянущего характера в месте попадания в организм возбудителя, даже если рана полностью зажила. Затем развиваются характерные симптомы столбняка: тризм (судорожное сокращение и напряжение жевательной мускулатуры, затрудняющее отрывание рта), дисфагия (затруднение глотания), ригидность затылочных мышц (не сопровождающаяся другими менингеальными симптомами), «сардоническая улыбка» (специфическое напряжение мимической мускулатуры: наморщенный лоб, суженные глазные щели, губы растянуты, уголки рта опущены).

Сочетания тризма, дисфагии, «сардонической улыбки» и напряженности затылочных мышц является специфическим исключительно для столбняка симптомокомплексом.

Разгар заболевания характеризуется тоническими, довольно болезненными судорогами мышц туловища и конечностей. Напряжение мускулатуры становится постоянным (даже во сне). На третий-четвертый день заболевания происходит одеревенение мышц брюшной стенки, движение в конечностях ограничено (ноги вытянуты), дыхание учащенное, приобретает поверхностный характер за счет спазма межреберных мышц и диафрагмы. Дефекация и мочеиспускание затруднены, что также связано с напряжением мышц тазового дна, кишечника и мочевыводящих путей.

В результате тотального болезненного напряжения мышц спины развивается опистотонус: больной выгибается в положении на спине с запрокинутой головой.

При этом в напряженных мышцах периодически возникают внезапные тетанические судороги.

9. Вакцина для профилактики туберкулеза

БЦЖ (Бацилла Кальметта -- Герена) -- вакцина против туберкулёза, приготовленная из штамма ослабленной живой коровьей туберкулёзной палочки, выращенной в искусственной среде. Компоненты вакцины сохраняют достаточно сильную антигенность, чтобы придать вакцине должную эффективность в отношении развития бычьего туберкулеза.

На месте в/к введения вакцины развивается специфическая реакция в виде папулы размером 5-10 мм в диаметре. У новорожденных нормальная прививочная реакция появляется через 4-6 нед. Реакция подвергается обратному развитию в течение 2-3 мес иногда и в более длительные сроки. У ревакцинированных местная реакция развивается через 1-2 нед. У 90-95 % вакцинированных на месте введения образуется поверхностный рубец до 10 мм в диаметре.

Живые микобактерии штамма БЦЖ-1, размножаясь в организме привитого, приводят к развитию длительного иммунитета к туберкулезу. Ревакцинации подлежат дети 7 и 14 лет.

Диагностическим тестом на реакцию на туберкулез является туберкулиновая проба (реакция Манту). Для пробы применяют очищенный туберкулин в стандартном разведении и сухой очищенный туберкулин.

10. Какие свойства изучают для дифференциации шигелл различных видов?

Для дифференциации различных видов шигелл изучают их культуральные свойства. Шигеллы хорошо культивируются на простых питательных средах. На плотных средах образуют мелкие гладкие, блестящие, полупрозрачные колонии. В жидких средах образуют помутнение. Жидкой средой обогащения является селенитовый бульон. У S.sonnei при росте на плотных средах отмечена SR-диссоциация.

11. Что такое болезнь Брилля? Опасен ли больной болезнью Брилля для окружающих?

Болезнь Брилля - рецидив эпидемического сыпного тифа, проявляющийся через многие годы после первичного заболевания, характеризуется более лёгким течением, но типичными для сыпного тифа клиническими проявлениями.

Заболевание сводится к активизации риккетсий, сохранившихся в организме человека после ранее перенесённого эпидемического сыпного тифа. Риккетсии сохраняются длительное время в клетках лимфатических узлов, печени, лёгких. Повторный (во время рецидива) выход риккетсий в кровь, вызывает поражения, аналогичные первичному сыпному тифу. Однако такие больные могут быть источниками новых заражений при наличии завшивленности.

12. Какие методы диагностики используют при острой гонорее?

Для диагностики гонореи применяют бактериоскопический, бактериологический и серологический методы.

Основным методом диагностики Гонорея является бактериоскопия. У мужчин исследуют отделяемое уретры, у женщин -- отделяемое уретры, шейки матки и прямой кишки, у девочек -- отделяемое влагалища, уретры, прямой кишки. Реже у больных изучают отделяемое из парауретральныхходов, предстательной железы, семенных пузырьков, больших желёз преддверия и прочее. При заболевании суставов исследуют синовиальную жидкость. В послеродовом периоде исследуют лохии. При бленнорее исследуют гной конъюнктивы.

Материал для исследования берут после обмывания наружных мочеполовых органов ватным тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. Лучше всего брать свободно стекающий из уретры гной. Краем предметного стекла или бактериологических петлёй захватывают гной и размазывают по предметному стеклу. У женщин берут отделяемое из мочеиспускательного канала,из цервикального канала, из прямой кишки -- методом промывных вод. Если не находят гонококков, то берут материал из шейки матки, лучше на 2--3-й день менструации.

Материал для бактериоскопического исследования наносится на два стекла. Препараты высушивают на воздухе и фиксируют над пламенем. Окрашивание производят по Граму. Для ориентировки можно красить мазки метиленовым синим или эозином и метиленовым синим, чтобы одновременно выявить и эозинофилы, количество которых при хронической гонорее часто повышено.

Культуральная диагностика необходима во всех случаях, когда при бактериоскопии гонококки не обнаруживаются. Посевы позволяют выявлять гонококки в 1Ѕ--4 раза чаще, чем метод непосредственной микроскопии. Особенно показаны посевы при хронический формах, гонорейном проктите и контроле на излечение. В течение недели не проводят противогонорейного лечения. Перед взятием для посева отделяемого из уретры больной должен 3--4 часа воздерживаться от мочеиспускания.

Лучшая среда для роста гонококка -- 2,5% мясопептонный агар или среда БейлиpH 7,4--7,6 с добавлением асцитической жидкости.

Широко используют безасцитные среды (например, среда КДС-1 с гидролизатом казеина, дрожжевым аутолизатом и нативной сывороткой). Через 24 часа после посева гонококк вырастает в виде прозрачных рисовидных колоний, слегка желтоватых, с ровной, гладкой, блестящей поверхностью. Величина колоний зависит от качества среды. Постепенно колония увеличивается и темнеет, центр её становится желтовато-коричневатым. Иногда через 72--96 часов по окружности появляется валик или дочерние колонии.

Иммунобиологические методы диагностики гонореи имеют лишь вспомогательное значение. Реакция определения гонококкового антигена и внутрикожная проба с гонококковой вакциной полностью утратили свою ценность. РСК (в частности, реакция Борде-Жангу) при острой гонорее не применяют, так как она становится положительной обычно лишь через 3--4 недель после заболевания. Однако она может иметь некоторое значение для выяснения этиологии осложнённой и хронической гонореи (в сомнительных случаях).



13. Каково значение актиномицетов для фармации?

Актиномицеты - это многоклеточные бактерии, прокариоты. Актиномицеты не имеют ядра (вместо ядра имеется одна замкнутая нить ДНК), имеют сложный цикл развития.

Всего имеется 12 тысяч природных антибиотиков, из них 9 тысяч антибиотиков продуцируют актиномицеты. Актиномицеты продуцируют антибиотики, ингибирующие синтез белка на рибосомах бактериальных клеток. Такой же механизм у противогрибковых и противоопухолевых антибиотиков. Актиномицеты продуцируют следующие группы антибиотиков:

1) Аминогликозиды - ингибируют синтез белка у бактерий, связываясь с малой рибосомной субъединицей, нарушая правильность считывания кодонов информационной РНК (иРНК) антикодонами транспортной РНК (тРНК).

-канамицин - Actinomyceskanamycetus

-неомицин - Actinomycesiracie.

2) Тетрациклины ингибируют белковый синтез, связывая аминоацил -тРНК с рибосомно-матричным комплексом,

-окситетрациклин - Actinomycesninesus

3) Макролиды гр. эритромицина - связываются с большой субъединицей рибосомы.

4) Пиранозиды (группы линкомицина - сходны с макролидами, они связываются с большой субъединицей рибосомы.

- линкомицин - Streptomyceslinconiensis

5) Левомицетин (получают химическим путем) - ингибирует пептилтрансферазу большой рибосомальной субъединицы.

Природный левомицетин (хлорамфеникол) продуцируется Streptomycesvenezuelae.

6) Рифамицин - Streptomycesmediterranei, на основе рифамицина получен рифампицин.Рифампицин подавляет активность ДНК-зависимую РНК-полимеразу и тем самым блокирует синтез белка на уровне транскрипции.

7) Противогрибковые - (полиеновые) антибиотики - образуют поры в цитопластической мембране грибов, взаимодействуя с ее стерольным компонентом (эргостеролом). (рис.)

- нистатин - Streptomycesnoursei

- леворин - Actinomyceslevorus

- амфотерцин - Streptomycesnodosus

8) противоопухолевые антибиотики - угнетают синтез нуклеиновых кислот клеток микро- и макроорганизмов.

- брунеомицин - Actinomycesalbusvarbruneomycini

- митомицин - Streptomycescaespitosus.

14. Какие антигены комплексы содержит вирус гриппа? Что служит основой для выявления типов вируса гриппа: А, В, С? На основании, каких антигенов вирусы гриппа А классифицируют на подтипы?

Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены.Внутренние сердцевидные антигены являются типоспецифическими, на основании чего вирусыгриппа подразделяются на типы А, В и С, поверхностные представлены гемагглютинином (Н) инейраминидазой (N). Н - основной специфический антиген, вызывающий образование вирус-нейтрализующих антител и обеспечивающий адсорбцию вируса на клетках, в том числеэритроцитах человека или животных, в результате чего происходит их склеивание(гемагглютинация). N вызывает образование антител, частично нейтрализующих вирусы;являясь ферментом, N участвует в освобождении вирусов из клетки.Характерной особенностью вирусов гриппа, в основном типа А, является изменчивостьантигенов Н и N. Известны три разновидности Н и две разновидности N. В зависимости от ихсочетания выделяют три подтипа вируса гриппа А человека: H1N1, H2N2, H3N2,соответственно Al, A2, A3. Внутри подтипов имеется множество антигенных вариантов,отличающихся по структуре Н- и N-антигенов.

Типы вируса гриппа А, В и С идентифицируют по изменчивости поверхностных антигенов, которая связана с фрагментарным строением РНК вируса иможет происходить в виде дрейфа и шифта.

Дрейф - постоянноосуществляющиесянезначительные изменения Н- и N-антигенов в результате точечных мутаций, приводящие квозникновению новых антигенных вариантов вируса.

Шифт (скачок) - редко встречающиесязначительные изменения Н- и N-антигенов в результате рекомбинаций, приводящие кпоявлению новых подтипов вируса.

По сравнению с вирусами гриппа типа А антигенная структура вирусов гриппа типа Визменяется только по типу дрейфа, а тип С не имеет N-антигена и мало изменчив.

Типовые антигены вирусов гриппа типа А -- гемагглютинин и нейраминидаза; на сочетании этих белков основана классификация вирусов гриппа. В частности, у вируса гриппа А выделяют 13 антигенов различных типов гемагглютинина и 10 типов нейраминидаз. Антигенные различия среди вирусов гриппа типов А, В и С определяют различия в структурах NP- и М-белков. Все штаммы вирусов типа А имеют групповой (S-) антиген, выявляемый в РТГА. Типоспецифические антигены вирусов гриппа -- гемагглютинин и нейраминидаза; варьирование их структуры приводит к появлению новых серологических вариантов, часто в динамике одной эпидемической вспышки.

ПРЕПАРАТ №37. ЛИЗОЦИМ.

Группа: антибактериальный агент, фермент класса гидролаз; сыворотка лечебная антибактериальная и антисептическая.

Содержит протеолитический фермент.

Принцип получения: лизоцим получают из белка куриных яиц.

Единицы измерения активности е*мКл/мин.

Назначение препарата для: больных.

Применяется местно в виде таблетированных лекарственных форм сублингвально или в ротовой полости.

Фермент атакует пептидогликаны (в частности, муреин), входящие в состав клеточных стенок бактерий (особенно много его в клеточных стенках грам-положительных бактерий -- до 50-80 %). Таким образом, клеточная стенка бактерий разрушается. При процессе разрушения клеточных стенок происходит выделение мурамилдипептида - естественного стимулятора иммунной системы. Мурамилдипептид помогает поглощать и переваривать чужеродные микроорганизмы, является цитотоксичным по отношению к инфицированным клеткам.

Препараты, содержащие лизоцим, выпускаются в таблетированной форме, поэтому показателями непригодности препарата будут являться: изменение цвета, намокание, разбухание, истечение срока годности. Хранить препараты, содержащие лизоцим, можно при температуре, не превышающей 20°С.

Размещено на Allbest.ru

...