Размещено на http://www.allbest.ru/

Оглавление

• 1. Кометаболизм
• 2. Влияние природы (структуры) основного питательного субстрата на образование и количество тех или иных продуктов метаболизма (на примере культивирования тиамингетеротрофных дрожжей в условиях дефицита витамина В1)
• 3. Экзо-, и эндометаболиты. Выбор способов разрушения клеточных стенок в зависимости от природы эндометаболита
• 4. Достоинства и недостатки непрерывного способов культивирования
• 5. Протопласты. Способы получения. Особенности культивирования
• 6. Мутагенез. Основные типы мутагенезов. Мутагенез в селекции
• 7. Основные типы векторов
• 8. Иммуноферментный (иммуносорбентный) анализ. Достоинства и недостатки метода
• 9. Задача
• Список литературы

1. Кометаболизм

Кометаболизм (соокисление) - расщепление некоторых соединений микроорганизмами только совместно с хорошо утилизируемыми субстратами (косубстратами).

Кометаболизм впервые наблюдал Фостер в 1962 году у бактерий, утилизирующих углеводороды. Эти бактерии могут расти на метане, как на единственном источнике углерода, то есть они являются метанотрофами. Однако, они не могут утилизировать такие алканы, как этан или пропан, в качестве единственного источника углерода. Когда бактерии росли на смеси метана, этана и пропана, клетки использовали метан, а также этан и пропан, которые окислялись до продуктов, таких как ацетальдегид, уксусная кислота, пропионовая кислота и ацетон соответственно. Фостер предложил термин соокисление для описания подобного типа трансформации субстратов. Позднее другие исследователи наблюдали подобное явление с другими типами микробной трансформации; они включают не только окисление, но также и гидролиз, дегалогенирование и так далее, то есть термин "кометаболизм" было предложено использовать в более широком смысле.

На основе разных механизмов трансформации неростового субстрата, а также в зависимости от того, является косубстрат ростовым или неростовым, условно можно выделить четыре типа кометаболизма.

Первый тип - трансформация неростового субстрата до продукта при использовании в качестве косубстрата ростового субстрата.

Второй тип - трансформация неростового субстрата без использования ростового субстрата. Неростовой субстрат используется не как источник углерода, а только как источник энергии, необходимой для осуществления реакций кометаболизма. В обоих рассмотренных случаях трансформация ростового субстрата должна обеспечивать энергией метаболизм другого субстрата, и этот процесс осуществляется только до определенного продукта, который дальше не ассимилируется клетками.

К третьему типу кометаболизма относятся процессы ассимиляции неростовых субстратов, что сопряжено с использованием ростовых субстратов, в результате чего соединения углерода включаются в компоненты клетки. Сначала подобные процессы были описаны как миксотрофия, однако поскольку один из субстратов не является ростовым, этот термин в данном случае является некорректным. Включение углерода неростовых субстратов или продуктов их трансформации в конструктивный метаболизм, который приводит к увеличению биомассы, предложено называть дополнительным метаболизмом. Поскольку данные процессы осуществляются только при ассимиляции ростового субстрата, их можно отнести к кометаболизму. В этом случае продукты трансформации неростовых субстратов являются компонентами клеток.

Четвертый тип кометаболизма - синтаболизм - способность микроорганизмов расти на смеси двух или больше неростовых субстратов. Синтаболизм был выявлен у облигатных метанотрофов. Показано, что в определенных условиях они способны расти при наличии двух субстратов одновременно, каждый из которых сам по себе не является ростовым. В основе синтаболизма лежит способность метанотрофных бактерий сооокислять (вследствие неспецифичности метанмонооксигеназы) С 2Н 6 или СО. Установлено, что для прохождения реакции монооксигенирования С 2Н 6 необходима энергия, источником которой может служить окисленные производные метана или этана (метанол, формиат, этанол). Соответствующие эксперименты показали, что метанотрофы способны расти на этане (неростовой субстрат) в присутствии названных выше дополнительных неростовых субстратов.

Конечные продукты трансформации могут использоваться другими микроорганизмами в сообществе. Конечные продукты кометаболизма сложно прогнозировать, но несколько типов эффектов можно представить: если косубстрат исходно токсичен, то в результате кометаболизма будет происходить его детоксикация. Конечные продукты кометаболизма будут поставлять питательные вещества для каких-нибудь других микроорганизмов и это может привести к большему биологическому разнообразию. Конечные продукты могут быть токсичными для данных продуцентов или других микроорганизмов и результатом этого может быть эффект ингибирования. Конечные продукты кометаболизма могут быть устойчивыми и это может быть результатом увеличения устойчивости конечных продуктов.

2. Влияние природы (структуры) основного питательного субстрата на образование и количество тех или иных продуктов метаболизма (на примере культивирования тиамингетеротрофных дрожжей в условиях дефицита витамина В1)

По типу питания дрожжи Saccharomyces cerevisiae относятся к гетеротрофным организмам, т.е. утилизируют уже готовый органический субстрат, преобразуя его, и получая необходимый строительный материал и энергию для потребности клетки. Как и все одноклеточные организмы, к которым относятся рассматриваемые грибы, транспорт веществ в клетку происходит из раствора - среды, в которой обитают дрожжи, путем переноса различными механизмами внутрь клетки.

Для технологии бродильного производства - один из ключевых вопросов это потребность культивируемого микроорганизма в различных соединения, возможность их замены, условия потребления из среды.

Существуют различия в потреблении питания и факторов роста различными штаммами дрожжей.

Однако в производственных условиях необходимо принимать среднюю величину потребления при разработке комплекса дополнительного питания, активатора брожения как впрочем, и других расходных материалов. Здесь необходимо учитывать, что в производстве, как пива, так и спиртовом, и производстве хлебопекарных дрожжей, идет постоянное изменение состава среды, в которой культивируются дрожжи. Задача элементов питания для естественных сред отличается от абсолютных значений, выведенных для культуры при выращивании на искусственных средах. В большинстве случаев расход дополнительного питания отрабатывается непосредственно на производстве, исходя из применяемой технологии, сырья, производственного штамма дрожжей.

Потребность в витаминах: дрожжи требуют в качестве факторов роста, как и любой другой организм определенного количества витаминов. Для Saccharomyces cerevisiae это витамины группы В. Рассмотрим потребности в витаминах, которые активно используют в дрожжевых подкормках, т.е. кормовые формы которых в настоящее время производятся в промышленных масштабах.

Тиамин или витамин В 1, образуется при конденсации пиримидинового ядра и ядра тиазола. Сульфит расщепляет тиамин на две составляющие и разрушает витаминную активность. Тиаминдифосфат (кокабоксилаза) представляет собой кофермент, требующийся для многих реакций декарбоксилирования, в частности - при протекании спиртового брожения для декарбоксилирования пировиноградной кислоты в ацетальдегид. Кроме того, тиамин регулирует конденсацию ацетоина и образование бутандиола-2,3. Тиамин действует как активатор брожения в отношении Saccharomyces cerevisiae. Добавление тиамина в сусло ограничивает процесс образования пировиноградной кислоты и, следовательно, степень связывания сернистого ангидрида.

3. Экзо-, и эндометаболиты. Выбор способов разрушения клеточных стенок в зависимости от природы эндометаболита

Завершающей стадией любого микробиологического производства является выделение целевого продукта из культуральной среды и его очистка. Таким целевым продуктом может быть либо биомасса клеток, либо какой-то продукт клеточного метаболизма. Если целевой продукт находится внутри клетки (накапливается или входит в состав клеточных структур или оболочки), то он является эндометаболитом, если выделяется клеткой в культуральную жидкость - экзометаболитом.

В большинстве случаев извлечения эндометаболитов необходимо предварительное разрушение клеток. Однако этот процесс удобнее проводить не непосредственно в культуральной среде, извлекаемой из реактора, а с концентратом клеток после удаления культуральной жидкости. Поэтому первым этапом выделения большинства продуктов микробиологического синтеза является отделение биомассы микроорганизмов продуцентов из культуральной жидкости. При этом в зависимости от типа используемых микроорганизмов могут применяться самые различные методы.

Для разрушения (дезинтеграции) клеток применяют целый набор методов, которые можно отнести к трем основным группам: физико-механические, химические и энзиматические (ферментные) методы. Все процедуры должны быть достаточно жесткими, чтобы разрушить клеточную стенку, и в то же время достаточно мягкими, чтобы исключить денатурацию или разрушение целевого продукта. А поскольку клеточные стенки у разных микроорганизмов состоят из различных полимеров (иногда сопоставимых или превосходящих по прочности лучшие сорта сталей), то никакого универсального метода их разрушения не существует.

К физическим методам относятся: разрушение клеток баллистическим способом с применением бус баллотини, кварцевого песка, растирание клеток в дисковой мельнице, дробление замороженных в жидком азоте или в сухом льде клеток; экструдирование клеток под высоким давлением (2-5 атм) через узкую щель или отверстие; газодекомпрессионная дезинтеграция, основанная на создании в камере с разрушаемым материалом высокого давления и быстрым сбросом его, приводящим к разрыву клеточных стенок; ультразвуковая дезинтеграция.

Энзиматические методы основаны на применении литических ферментов, разрушающих клеточную стенку: лизоцима, выделяемого из белка куриных яиц и разрушающего главным образом оболочки бактериальных клеток; ферментного комплекса, содержащегося в желудочном соке улитки Helix pomatia или продуцируемого некоторыми видами актиномицетов, лизирующего оболочки эукариотических клеток, в частности грибов.

Химические методы дезинтеграции основаны на разрушении клеточной оболочки под воздействием щелочей, кислот, детергентов, ингибиторов синтеза оболочки клетки.

Выбор метода дезинтеграции определяется целью работы: для получения внутриклеточных ферментов наиболее приемлемы баллистические и экструзионные способы; энзиматические методы широко применяют в научных исследованиях для выделения в целости различных субклеточных структур (органелл, мембран и т.д.), а так же для получения протопластов. Применение химических методов дезинтеграции микроорганизмов ведет к нарушению целостности клеточных структур, инактивации ферментов. Поэтому химические методы обычно применяют для получения пищевого белка и биожира из дрожжей.

4. Достоинства и недостатки непрерывного способов культивирования

При непрерывном способе культивирования микроорганизмы постоянно получают приток свежей стерильной питательной среды, а из аппарата непрерывно отбирается биомасса вместе с образуемыми метаболитами (такой способ культивирования можно назвать "открытой" системой). При непрерывном культивировании микроорганизмы не должны испытывать недостатка в питательном субстрате, так как скорость его притока сбалансирована со скоростью выхода биомассы. Кроме того, культура не отравляется продуктами обмена веществ - в этом большое преимущество непрерывного способа культивирования по сравнению с периодическим, преимущество "открытой" системы по сравнению с "закрытой". Непрерывное культивирование может осуществляться в один этап или многостадийно.

Недостатками непрерывного культивирования являются: требование более сложного и дорогого оборудования, а также обрастание труб и стенок ферментера при работе в таком режиме и как следствие потеря штаммами продуцентов своих полезных свойств.

Достоинства непрерывного метода культивирования: непрерывное культивирование позволяет получать большее количество биомассы.

5. Протопласты. Способы получения. Особенности культивирования

Протопласт - клетка, лишенная целлюлозной оболочки, окруженная цитоплазматической мембраной, сохраняющая все свойства, присущие растительной клетке.

Впервые протопласты в 1892 г. выделил Дж. Клеркер, который использовал механический способ. При этом способе у плазмолированных клеток разрезают клеточную стенку, протопласты выходят в среду. Другой метод выделения протопластов - энзиматический, с использованием ферментов. В 1952 году Салтон с помощью фермента лизоцима впервые разрушил клеточную стенку бактерий. В 1960 году Коккинг обработал кончики корней томата гидролитическим ферментом из культуральной жидкости плесневых грибов (Myrothecium verrucaria) и впервые получил изолированные протопласты высших растений энзиматическим способом.

Для удаления клеточной стенки используют ферменты трех типов: целлюлазы, гемицеллюлазы и пектиназы. Комбинация ферментов и их соотношение специфично для каждого типа клеток.

Выделение протопластов проводят в три этапа:

1. обработка ферментами,

2. выделение протопластов из клеточных стенок,

3. отделение интактных протопластов от клеточных осколков.

Метод флотации предложен О. Гамборгом с сотрудниками в 1981 году, и предназначается для ослабленных протопластов. Он основан на том, что протопласты имеют более низкую плотность, чем органеллы или остатки клеточных стенок. К исходной смеси добавляют раствор сахарозы и центрифугируют при скорости от 40 - 80 до 350 g. Чистые протопласты плавают, осколки оседают на дно.

Протопласты можно выделять также из суспензионных и клеточных культур. Лучше всего - в поздней стадии логарифмического роста, когда клеточные стенки легче поддаются разрушению, протопласты наиболее жизнеспособны.

Далее протопласты культивируют в тех же условиях, что и клетки. Состав солей может быть несколько изменен. Среда состоит из осмотического стабилизатора, неорганических соединений, источника углерода, азота, витаминов, фитогормонов. Условия культивирования: рН среды 5,4 - 5,8, температура 22 - 28оС, невысокая освещенность (не более 2000 лк).

Существуют два способа культивирования протопластов: метод жидких капель и метод платирования.

В первом случае суспензию протопластов в виде капель помещают на пластиковые чашки Петри. Вариацией этого способа является культивирование единичных изолированных протопластов в микрокаплях объемом 1 мкл, предложенное Ю. Глебой в 1978 г.

Во втором - суспензию протопластов наливают в пластиковые чашки Петри, добавляют равный объем той же среды с 1% агаром при температуре не выше 45оС. После остывания чашки Петри переворачивают и культивируют при 28оС. В данном случае протопласты фиксированы в одном положении и физически отделены друг от друга. Это дает возможность наблюдать за развитием интактного протопласта: формированием клеточной стенки, делением, ростом и развитием растения. Вариантом этой техники является использование кормящих протопластов или клеток, подвергнутых воздействию рентгеновского или г-излучения, что блокирует их способность к делению. Такие протопласты или клетки смешивают с жизнеспособными протопластами и они поддерживают и стимулируют их рост.

Сразу после удаления раствора фермента начинается образование клеточной стенки. Труднее добиться деления клеток и регенерации растений. Регенерация растений осуществляется либо через эмбриогенез, либо через развитие каллуса с дальнейшей индукцией морфогенеза. Добиваются этого добавлением в среду ауксинов или сочетания ауксинов с цитокининами.

6. Мутагенез. Основные типы мутагенезов. Мутагенез в селекции

Мутагенез (от латинского muto - меняю и греческого - происхождение) - возникновение наследственных изменений - мутаций. В основе мутагенеза лежат явления повреждения в молекуле дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК).Условно различают мутагенез спонтанный, или естественный, и мутагенез индуцированный, или искусственный.

Спонтанный (естественный) мутагенез возникает под влиянием физиолого-биохимических изменений в самом организме, естественного радиационного фона, ошибок репликации и др. Частота возникновения спонтанного мутагенеза зависит от физиологического состояния организма, возраста, генотипа и других факторов.

Индуцированный(искусственный) мутагенез вызывается различными мутагенами; для человеческих популяций особенно опасен. Экспериментальные разработки в области индуцированного мутагенеза у человека являются основой оценки вредных факторов внешней среды с генетических позиций и их гигиенического нормирования. Мутагенез определяет возможность спонтанных абортов, врождённых пороков развития, наследственных болезней с чёткими клиническими проявлениями, хромосомных болезней и др.

Искусственный мутагенез, т. е. контролируемый человеком процесс возникновения мутаций, успешно применяется в селекции растений и микроорганизмов. Использование этого метода оказалось особенно эффективным применительно к разнообразным микроорганизмам: грибам, дрожжам, водорослям, бактериям. Микроорганизмы широко используются в пищевой промышленности, в производстве лекарств, биологически активных веществ, а также в производстве кормов для животных. Области их применения постоянно расширяются. С помощью искусственного мутагенеза, в частности, получены плесневые грибки, продуцирующие антибиотики в тысячи раз эффективнее, чем исходные формы. Значение антибиотиков общеизвестно: они сохраняют жизнь миллионам людей. Использование искусственного мутагенеза в селекции привело к созданию высокопродуктивных штаммов микроорганизмов - продуцентов витаминов, аминокислот, белков, которые активно используются в медицине и сельском хозяйстве. В будущем роль микроорганизмов в различных отраслях человеческой жизни неизбежно возрастет, что еще больше повысит значение селекции и генетики микроорганизмов.

7. Основные типы векторов

Биологические (биотехнологические) векторы - это биологические структуры, способные вносить чужеродный генетический материал в клетку: плазмиды, бактериофаги, вирусы.

Плазмиды (эписомы) - это отдельные кольцевые молекулы ДНК у бактерий, которые определяют внехромосомную наследственность бактериальной клетки и предсталяют собой генетический элемент, способный к длительному автономному существованию и репликации. Обычно это двухцепочечная кольцевая ДНК длиной 1-200 т.п.н. (тысяч пар нуклеотидов). Количество плазмид у бактерии может быть разное, и чем больше плазмид, тем они мельче.

Плазмиды передают генетическую информацию от "своих" бактерий всем другим бактериям, даже если эти бактерии относятся к другим семействам. Они содержат информацию о ферментах, обеспечивающих приспособление к использованию конкретного субстрата в качестве источника питания или о ферментах, обеспечивающих устойчивость бактерий к различным неблагоприятным факторам среды: антибиотикам, ксенобиоикам и пр.

Обычно плазмиды захватываются бактериями из окружающей среды и используются ими уже в качестве своих собственных дополнительных источников генетической информации. Т.к. бактерии в норме захватывают плазмиды из окружающей среды, то плазмиды используются в биотехнологии в качестве векторов: в них встраивают нужные гены и таким образом эти гены вместе с плазмидой внедряются в бактерию и начинают в ней действовать.

Бактериофаки как биовекторы

Особенно удачный вектор был сконструирован на основе такого бактериофага, как колифаг л.

Фаг л - умеренный колифаг с длинным несократительным хвостовым отростком и днДНК геномом размером 48 502 п.н. Центральная часть генома фага несущественна для его функционирования и используется для заместительной вставки клонируемой ДНК по единственному сайту узнавания для рестриктазы EcoRI. Сам по себе этот вектор короток для упаковки в головку фага (размеры головки накладывают ограничение не только на максимальную, но и на минимальную длину генома). Таким образом, чтобы получить фаг, способный размножаться с образованием зрелых фаговых частиц, в разрезанный родительский вектор должен быть непременно встроен фрагмент чужеродной ДНК. Это приводит к образованию автоматической селективной системы для отбора химерных фаговых геномов. Для удобства отбора рекомбинантных фагов в несущественную область генома, используемую для вставки, введен ген lacZ. Рекомбинантные фаги отбирают из зон лизиса бактериального газона, имеющих белый цвет.

Фаг M13 - нитевидный колифаг, имеющий кольцевой ДНК-геном. Для получения рекомбинантных ДНК используют репликативную форму фага, представляющую собой кольцевую двухнитевую ДНК размером 6400 п.н., в которую вставлен ген lacZ, содержащий полилинкер сайтов для целого ряда рестриктаз. Рекомбинантные фаги отбирают из зон лизиса бактериального газона, имеющих белый цвет. Использование векторов на основе фага M13 имеет ряд положительных моментов. Так, одно клонирование дает два вида фагов с однонитевым ДНК-геномом. Каждый вид фага содержит только одну из нитей вставки ДНК, которые могут находиться в разных ориентациях. В связи с этим, клонирование с использованием фага M13 удобно для создания однонитевых ДНК-зондов и секвенирования ДНК.

Попытка объединить преимущества плазмидных и фаговых векторов привела к созданию космид. Это плазмиды со встроенными специфическими последовательностями ДНК (cos - сайтами), отвечающими за Упаковку ДНК фага л в фаговой частице. Такие векторы могут существовать в бактерии в виде плазмид, но могут быть выделены в чистом виде путем их упаковки в фаговые частицы in vitro. Ценность космидных векторов заключается в их большой емкости - то есть в возможности клонирования вставок большого размера. На длину этих векторов также накладываются ограничения, обусловленные размером головки фага, но в таком геноме не обязательно присутствие генов, необходимых для литического цикла.

8. Иммуноферментный (иммуносорбентный) анализ. Достоинства и недостатки метода

субстрат метаболизм культивирование витамин

Иммуноферментный (иммуносорбентный) анализ (ИФА) - определение низких концентраций разнообразных биологически активных веществ (лекарственных препаратов, гормонов и т.п.) по их иммунохимическим свойствам. Главной особенностью является применение в качестве метки - фермента - функционально активной биологической молекулы.

Процедура включает следующие этапы (Рис.1):

А. Фиксация (закрепление) компонентов анализируемого образца (сыворотка крови, образцы ткани, клетки микроорганизмов) на поверхности твердой подложки (лунки, планшетки).

Б. Добавление раствора антитела (первого антитела) специфичного к определенному, искомому антигену. Если он имеется в анализируемом образце, то произойдет его связывание с антителами. Далее лунку промывают с целью удаления несвязавшихся молекул первого антитела.

В. Добавление раствора другого антитела (второго антитела), способного специфически связываться с первым антителом. Лунку опять промывают для удаления несвязавшихся с первым антителом вторых антител. Второе антитело обычно представляет собой коньюгат (комплекс) с некоторыми ферментами, способными катализировать химические превращения определенных бесцветных веществ (субстратов), которые сопровождаются появлением цветной окраски или свечением (люминисценцией) при облучении УФ-лучами.

Г. Добавление раствора бесцветного субстрата. Если в лунке присутствует комплекс антиген-первое-второе антитела, то наблюдается окраска или свечение, по интенсивности которых судят о содержании искомого антигена и степени протекания болезни.

Основной принцип ELISA - специфическое связывание первого антитела с определенной молекулой-мишенью. В качестве такой мишени обычно выступает какой либо имуногенный белок патогенного микроорганизма или специфические белки человека, например антитела, свидетельствующие о протекании определенного паталогического процесса в организме. Очищенный препарат таких белков-антигенов используют для получения специфических антител, при помощи которых затем и выявляют данную мишень. Однако антитела, которые образуются в сыворотке (антисыворотке) крови иммунизированного животного (обычно кролика или мыши), могут связываться с разными антигенными детерминантами (участками, эпитопами) такой молекулы-мишени. Поэтому такую смесь антител называют поликлональным препаратом.

Использование поликлональных антител имеет два недостатка, существенных для методов имунодиагностики: 1) содержание отдельных антител в поликлональном препарате может варьировать от одной партии к другой, что не обеспечивает однозначности и воспроизводимости анализов; 2) поликлональные антитела нельзя применять, если необходимо различить две сходные мишени, т.е. когда имуногенный белок патогенной формы микроорганизма, например coli-бактерий, вызывающих кишечные инфекции, и непатогенных (E.coli) форм различаются единственной детерминантой. Однако эти проблемы вполне разрешимы, поскольку сейчас научились получать чистые препараты антител, выработанных к одной специфической антигенной детерминанте, т. е. препараты моноклональных антител. Применение моноклональных антител позволяет существенно повысить специфичность метода ELISA, поскольку они связываются с одним, строго определенным антигенным сайтом. К настоящему времени получен целый ряд моноклональных антител, на основе которых созданы диагностические системы, которые можно использовать для обнаружения различных соединений и патогенных микроорганизмов.

Рис. 1. Обнаружение антигена - мишени с помощью ELISA.

Достоинствами ИФА являются:

1) высокая специфичность, присущая реакциям АГ - АТ, т.е. иммунореагентам;

2) высокая чувствительность, обеспечиваемая ферментом, т.к. молекулы конъюгированного фермента, как и фермента свободного, способны расщеплять множество молекул соответствующего субстрата с образованием легко обнаруживаемых продуктов.

Результаты анализа оцениваются визуально и инструментально по оптической плотности окрашенных продуктов реакции. Для измерения оптической плотности используют спектрофотометрами, или так называемыми ИФА-ридерами.

9. Задача

Известно, что в условиях биотехнологического производства природные продуценты БАВ должны быть генетически модифицированы.

· Как решается данная проблема в плане эффективности и безопасности получаемых ЛС?

Ответ

Данная проблема решается на основе нормативных документов, в которых регламентируется правило оформления лекарственного препарата, на этикетке которого должна располагаться информация, что данный лекарственный препарат создан на основе генетически модифицированных источников. В частности таким документом, регламентирующим данное направление является Письмо от 20 марта 2000 г. N 293-22/47 О введении в действие изменения N1 к МУ 9467-015-05749470-98 "Графическое оформление лекарственных средств. Общие требования".

Лекарственные средства гомеопатические, для детей, для клинических исследований, ветеринарии, полученные на основе генетически модифицированных источников должны содержать специальные надписи

Лекарственные средства, полученные на основе генетически модифицированных источников, имеют надписи:

- генетически модифицированные;

- на основе генетически модифицированных источников;

- содержащие компоненты, полученные из генетически модифицированных источников.

Список литературы

1. Биотехнология, в 8-ми томах. Под ред. Н.С. Егорова, В.Д. Самуилова. М.: "Высшая школа", 1987-1988

2. Бирюков В.С. Основы промышленной биотехнологии. М.: КолосС, 2004.

3. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. М.: "Мир", 2002.

4. Интернет портал по биотехнологии http://bio-x.ru/

5. Катлинский А.В.. Курс лекций по биотехнологии. Издательство: Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова,2005

6. Сазыкин Ю.О., Орехов С.Н., ЧекалиеваИ.И.. Биотехнологя. Издательский центр "Академия", М. 2006

7. Учебно-методическое пособие для студентов фармацевтического факультета. - Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2006.

8. Электронная библиотека bibliotekar.ru

Размещено на Allbest.ru