Полученные результаты свидетельствуют о том, что не установлено различий в интерпретации результатов, полученных в рамках одной серии ИФА-набора и при использовании наборов разных серий.

Величина К.В. значений Ксв. при исследовании положительных проб (n=5) наборами разных серий не превышала 6,76%, а при исследовании отрицательных (n=11) - 4,76%, что соответствует рекомендуемым параметрам и не превышает 10%. При этом коэффициент корреляции результатов при исследовании положительных проб составил 0,9, а при исследовании отрицательных - 0,97.

Анализ полученных данных, позволил нам сделать общее заключение о том, что, разработанная тест-система можно применяться для массовых скрининговых исследований в благополучных хозяйствах и осуществлять, таким образом, мониторинг респираторных инфекции, а также оценивать эффективность вакцин в тех хозяйствах, которые проводят целенаправленную специфическую профилактику. Кроме того, данный набор может служить дополнительным средством исследований в системе комплексной диагностики.

2.2.4 Получение протеина А

Иммуноглобулины класса G выделяли из цельной сыворотки крови аффинной хроматографией на протеин А-Сефарозе 4В в один этап.

Для глубинного культивирования штамма золотистого стафилококка с целью отработки оптимальных условий для получения биологически активного протеина А использовали биореактор АК-210. Культуру стафилококка выращивали при температуре 37 ^оС, скорости перемешивания 100об/мин., рН поддерживали на уровне 7,2, автоматически добавляя 1 N NaOH.

Для культивирования микроорганизма в биореакторе использовали питательную среду на основе перевара Хоттингера и мясо-пептонный бульон (МПБ). Посевную дозу определяли по оптическому стандарту мутности Государственного НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича. Клетки золотистого стафилококка инактивировали прогреванием при 60^оС 30 мин. Динамику роста s.aureus изучали с помощью спектрометрического анализа с интервалом 1 час. Аэрацию осуществляли начиная со 2 часа культивирования до окончания процесса с расходом воздуха 1,4 л/мин. Биологическую активность протеина А определяли в реакции прямого твердофазного ИФА.

Фаза логарифмического роста начиналась с 2 ч и заканчивалась к 5 ч культивирования. К 6 ч культура стафилококка вступала в стационарную фазу роста.

Протеин А получали из инактивированной и обработанной ультразвуком микробной массы золотистого стафилококка на колонках, заполненных аффинным сорбентом - Ig G крупного рогатого скота, иммобилизованным на сефарозе 4В. Так как штамм А 676 продуцирует значительную часть белка А питательную среду, то и осветленную центрифугированием, инактивированную прогреванием культуральную среду после выращивания стафилококка в биореакторе, обработанную ультразвуком использовали для проведения аффинной хроматографии.

Белоксодержащий материал пропускали через колонки, заполненные иммуносорбентом, размером 3,0х15,0 см со скоростью 5-10 мл/ч см³ при +4 ^оС в режиме замкнутого реактора. Сорбцию белка проверяли методом прямого ИФА. Колонку промывали двадцатикратным объемом фосфатно-буферного раствора 0,15 М, содержащим 0,15 М NaCl, рН 7,2. Затем элюировали ацетатным буферным раствором рН 3,0. Фракции немедленно нейтрализовали 0,5 н NaOH и исследовали в ИФА на биологическую активность протеина А. Затем белок А диализовали против дистиллированной воды (2 суток) и лиофилизировали на установке КС-30. Препарат выдерживали 2 суток при среднем остаточном давлении 50-70 мкм рт. ст. и температуре конденсатора от -55 до -65 ^оС и затем в течение 6-8 часов при температуре +24 ^оС.

Полученный препарат белка А проверяли на гомогенность по результатам электрофореза в 7% ПААГ в трис-глициновом буфере рН 8,9 по методике Davis J.B. на приборе фирмы «Reanal».

Антитела из гипериммунных антивидовых сывороток крови выделяли методом аффинной хроматографии. Специфические сорбенты получали ковалентной иммобилизацией иммуноглобулинов класса G или протеина А на активированных глутаровым альдегидом смешанном полиакриламид-агарозном геле АсА 34 (фирмы «ЛБК», Швеция) и акрилексе П-300 (фирмы «Реанал», ВНР) по методике, описанной Т.Ternynck и S.Avrameas , на BrGN -сефарозе 4 В (фирмы «Фармация», Швеция и BrCN -агарозе отечественного производства - в соответствии с рекомендациями фирмы «Фармация».

Хроматографически очищенный белок А золотистого стафилококка, конъюгированный с ферментами (пероксидазой), микроносителями, сорбентами использовали в «Инструкции по изготовлению и контролю глобулина флуоресцирующего для диагностики бешенства животных», утвержденной 22.01.2006 г. директором ВНИТИБП и в «Инструкции по изготовлению и контролю набора компонентов иммуноферментной тест-системы для определения уровня антирабических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства животных».

Выводы

1. Усовершенствована схема получения активной антирабической сыворотки. Применение эффективных современных отечественных полиэлектролитов в качестве адъювантов и иммуномодуляторов (полиоксидония и вегетана), при сравнении с применяемым ранее, способом получения антирабической сыворотки, выявило следующие преимущества: повышение активации иммунокомпетентных клеток, увеличения антителообразования у животных-продуцентов и повышение выхода и специфической активности антирабической сыворотки, сокращение сроков иммунизации с 90 до 62 дней, за счет исключения этапа подготовки животных к иммунизации и применения одновременных инъекций антигена и полиэлектролитов, и уменьшения расхода антигенного материала.

2. Клонирование ДНК штамма ВГНКИ-6 серогруппы Pomona позволило создать клонотеку рекомбинантных плазмид, содержащую 67 фрагментов бактериального генома лептоспир. Получен банк препаратов нуклеиновых кислот лептоспир, содержащий 42 препарата ДНК референтных штаммов, 6-производственных, а также семь образцов ДНК штаммов серогруппы Pomona, изолированных от больных сельскохозяйственных животных и человека в различных регионах страны. Разработан метод выделения высокоочишенных препаратов ДНК из биомасcы лептоспир.

3. В результате реакций ДНК-ДНК гибридизации полученной клонотеки с нуклеиновыми кислотами лептоспир была выделена рекомбинантная плазмида pLp 41 размером 3 880 пар нуклеотидов, содержащая фрагмент ДНК L. interrogans серовара pomona, нуклеотидная последовательность которого пригодна для использования в качестве видоспецифического гибридизационного зонда. Установлено, что плазмидный зонд гибридизуются только с ДНК лептоспир вида L. interrogans, и не гибридизуются с препартами суммарных нуклеиновых кислот сапрофитных лептоспир, иерсиний, кишечной палочки, бруцелл, микоплазм и других бактерий.

4. В хромосомных ДНК сероваров tarassovi, sejroe, pomona, kabura, polonica, whitcombi, grippotyphosa, panama, castellonis, sarmin, szwajizak, bratislava, djatzi, louisiana, сynopteri присутствуют области, гомологичные фрагменту ДНК L. pomona в составе рекомбинартной плазмиды pLp 41. Показано, что ДНК-зонд pLp 41 позволяет выявлять образцы ДНК штаммов лептоспир, представляющих основные серогруппы Pomona, Tarassovi, Sejroe, Grippotyphosa, которые вызывают заболевание у свиней и крупного рогатого скота на территории России и других стран СНГ.

5. Показана возможность использования фрагмента ДНК L. pomona. из рекомбинантиой плазмиды pLp 41 в качестве ДНК-зонда для дифференциации производственных штаммов лептоспир в реакции блот-гибридизации. Установлено, что в хромосоме производственных штаммов лептоспир присутствуют различные по молекулярной массе области, несущие участки ДНК, гомологичные фрагменту ДНК

L. роmопа, входящего в состав плазмиды pLp 41.

6. Определены молекулярно-генетические характеристики указанного фрагмента, обеспечивающие его идентификацию. При этом установлено, что клонированный фрагмент ДНК имеет размер 1 200 пар нуклеотидов, ограниченный сайтами рестриктазы EcoR I, a также не содержит сайты следующих рестриктаз: Pst I, Sma I, Xba I и EcoR V. Плазмида содержит ген bla, детерминирующий синтез бетта-лактомазы, что обеспечивает устойчивость к ампициллину штамма Е. coli, несущего данную плазмиду. Плазмида мультикопийна и неконъюгативна.

7. Разработана комплексная иммуноферментная тест-система для выявления антител к антигенам респираторных вирусов в биологических жидкостях организма животных и оптимизированы условия проведения ИФА при исследовании сывороток крови КРС, взятых в одном разведении (1:50).

8. Определен критерий дифференциации положительных и отрицательных результатов ИФА (Ксв.) равный 20.

9. При исследовании сывороток крови КРС установлено, что диагностическая чувствительность разработанной тест-системы по отношению к реакции нейтрализации составила 98,46%, специфичность - 94,02%. Результаты ИФА и РН совпадали в 96,8% случаев, коэффициент корреляции результатов составил 0,9; Р < 0,05. Разработанная иммуноферментная комплексная тест-система сопоставима по специфичности и чувствительности с РН и вследствие дополнительных своих преимуществ (экспрессность и простота проведения анализа, наличие инструментального учета реакции и возможность автоматизации всех ее этапов, стабильность при хранении всех необходимых реагентов и воспроизводимость результатов) может быть использована в качестве основного скринирующего теста при массовом обследовании животных.

10. При исследовании молозива иммунных коров совпадение результатов двух методов (ИФА и РН) зарегистрировано в 92,16% случаев, при г = 0,82, Р < 0,05.

11. Показана возможность одноэтапной препаративной очистки антигенов РС-вируса и ПГ-3 из вирус-содержащих суспензий с помощью препаративной аффинной хроматографии на анти-РС IgG Сефарозе 4В и анти-ПГ-3 IgG Cефарозе 4В соответственно.

12. При изучении состава белков вируса ПГ-3 КРС, штамма «3КСМ», полученных при обработке вирус-содержащей суспензии тритоном Х-100 выявлено 8 структурных белков с ММ от 14 до 180 кД. По результатам иммуноблотинга все восемь белков индуцировали выработку анти-ПГ-3 антител в организме восприимчивых к ПГ-3 животных.

13. При изучении состава белков РС-вируса, штамм «Randall», репродуцированного в культуре клеток ЛЭК, полученных при обработке вирус-содержащей суспензии Тритоном Х-100, выявлено 9 структурных белков с ММ от 28 до 180 кД. По результатам иммуноблотинга 6 белков с ММ от 42 до 180 кД индуцируют выработку анти-РС антител в организме восприимчивых к РС-инфекции животных.

14. Усовершенствованы способы получения и очистки специфических антител при промышленной технологии производства диагностикумов для практического применения.

15. Изучены оптимальные условия промышленного культивирования и инактивации штамма Staphilococcus aureus с целью получения биологически активного протеина А.

16. В результате проведенной работы, разработан одноэтапный метод получения высокоактивных специфических положительных и отрицательных референс-сывороток (заявки на изобретение №200813290 и №200813287).

17. Использование современных автоматизированных биореакторов и методов оптимизации технологического процесса позволило при суспензионном и псевдосуспензионном культивировании клеток ПТ-80 увеличить получение их концентрации до 3 млн. кл в мл.

18. Использование гибких и блочно-модульных систем культивирования позволило получать в высоких концентрациях вирусы ИРТ, ПГ-3, ВД-БС, АВ и РС, обладающих достаточной инфекционной активностью.

Практические предложения

На основании проведенных исследований предлагаются для практики:

1. Получена рекомбинантная плаамида pLp 41, используемая в качестве источника молекулярного зонда, разработанного для идентификации патогенных лептоспир и дифференциации производственных штаммов лептоспир.

2. Разработаны «Методические рекомендации по идентификации производственных штаммов и дифференциации Leptospira interrogans от Leptospira biflexa в реакции ДНК-ДНК гибридизации», утвержденные научно-методической комиссией ВНИиТИБП от 17.09.93, протокол N2; Методические рекомендации по определению уровня специфических антител к антигенам вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3), респираторно-синцитиальной инфекции (РС), вирусной диареи-болезни слизистых (ВД-БС), аденовирусной инфекции (АВИ) крупного рогатого скота в комплексной тест-системе иммуноферментного анализа (ИФА)», рассмотренные и одобренные 21 сентября 2007 года на методической комиссии ВНИТИБП и на секции «Ветеринарная биотехнология» ОВМ РАСХН, протокол №1, утвержденные 18.03.2007 г. академиком РАСХН А.М. Смирновым.

3. Полученные результаты внесены в «Инструкцию по изготовлению и контролю глобулина флюоресцирующего для диагностики бешенства животных», выпускаемых ВНИТИБП по Госконтракту с Департаментом ветеринарии МСХ РФ; в «Инструкцию по изготовлению и контролю набора компонентов иммуноферментной тест-системы для определения уровня антирабических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства животных».

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Тюрина И.Н., Артюшин С.К., Белоусов В.И., Быкова Н.Н. ДНК-зонд для идентификации и дифференциации лептоспир//Ветеринария.-1993.-№8.-С.53.

2. Матвеева И.Н. Тест-система ИФА для дифференциальной диагностики респираторных болезней крупного рогатого скота //Ветеринария и кормление.- 2006. №3.- С. 14-15.

3. Матвеева И.Н. Тест-система ИФА для серологического мониторинга заболеваний крупного рогатого скота// Ветеринария и кормление.-2006. №5.- С. 26-27.

4. Матвеева И.Н. Иммуноферментный анализ в диагностике вирусной диареи-болезни слизистых оболочек (ВД-БС) крупного рогатого скота Ветеринария.-2007. №6 .-С.54-57 .

5. Матвеева И.Н. ИФА для определения уровня антител к вирусу ВД-БС//Ветеринария.-2008.№ 4 .-С. 54-56.

6. Матвеева И.Н. Получение антигена респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота для использования в ИФА // Ветеринария.- 2007.№ 11.-С. 49-51.

7. Матвеева И.Н. Оздоровление стад от массовых респираторных заболеваний //Ветеринария.-2008.-№ 12 .-С. 54.

8. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Филиппов С.Ю., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю. Тест-система ИФА для определения антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота //Ветеринария и кормление.-2006. № 6.-С.28-29.

9. Матвеева И.Н. Разработка компонентов иммуноферментной тест-системы для определения уровня антител к вирусу диареи-болезни слизистых оболочек в сыворотке крови, молоке крупного рогатого скота.// Ветеринария и кормление.- 2007. № 2- С.24-25.

Другие публикации

1. Быкова Н.Н., Белоусов В.И., Лукина В.А., Самуйленко А.Я., Тюрина И.Н. // Сравнительная оценка методов определения вируса парагриппа-3 крупного рогатого скота при разработке тест-системы ИФА. // Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов /Мат.докладов четвертой Всесоюз. конф.-М.- 23-25 апреля 1991.-C.112

2. Тюрина И.Н., Быкова Н.Н., Лукина В.А., Белоусов В.И., Самуйленко А.Я. Сравнительная оценка методов очистки вируса парагриппа-З крупного рогатого скота при разработке диагностического ИФА-набора. Актуал.вопр.вет.вирусологии. -Владимир, 1990.-С. 63-64

3. Белоусов В.И.; Тюрина И.Н. Дифференциация штаммов ВГНКИ-1 и Moskva-5 возбудителя лептоспироза серогруппы Grippotyphosa на субсеровариантном уровне с помощью ДНК-зондов в реакции блот-гибридизации. - Науч.основы технологии пром. пр-ва вет. биол. препаратов. -Щелково, 1996.-С. 132

4. Белоусов В.И.; Тюрина И.Н. Использование твин-альбуминовой питательной среды при производстве вакцины против лептоспироза животных. - Науч.основы технологии пром. пр-ва вет. биол. препаратов. -Щелково, 1996.-С. 116-117

5. Филиппов С.Ю., Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П. Изучение репродукции вируса ПГ-3 крупного рогатого скота в первично-трипсинизированной культуре клеток почки теленка // Сб. докладов междунар. конф. молодых ученых «Научные основы технологии производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково- 5-6 декабря 2002. - С. 36.

6. Филиппов С.Ю., Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П.Очистка и концентрирование вируса ПГ-3 крупного рогатого скота// Сб. докладов междунар. конф. молодых ученых «Научные основы технологии производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково- 5-6 декабря 2002 - С. 39.

7. Матвеева И.Н., Кузнецова С.В., Лунин В.Г., Воронина О.Л., Кузнецов Д.П. Репродукция вируса диареи в культуре клеток ПЭК.//Сб. докладов междунар. конф. молодых ученых «Научные основы технологии производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково- 5-6 декабря 2002 - С. 42.

8. Матвеева И.Н., Кузнецова С.В., Лунин В.Г., Воронина О.Л., Кузнецов Д.П. Очистка вируса диареи крупного рогатого скота.//Сб. докладов междунар. конф. молодых ученых «Научные основы технологии производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково- 5-6 декабря 2002 - С. 45.

9. Меньшенин В.В., Яковлев Т.Е., Самуйленко А.Я., Шкварук Т.Я., Быкова Н.Н., Тюрина И.Н. // Получение антивидового конъюгата анти-IgG утки, меченого ферментом пероксидазой, для использования в иммуноферментном анализе (ИФА)./ Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов /Мат. докладов четвертой Всесоюз. конф.-М.- 23-25 апреля 1991.-С.141.

10. Матвеева И.Н., Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Мальгин Ю.А., Мальгина Т.А. Получение биологически активного протеина А из золотистого стафилококка //Материалы междунар.научно-практич.конференции, посвященной 35-летию института 26-27 мая 2005 г. «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов»- Щелково.-С. 423.

11. Матвеева И.Н., Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Мальгин Ю.А., Мальгина Т.А. Выделение биологически активного протеина А для использования в биологических исследованиях //Материалы междунар. научно-практич. конференции, посвященной 35-летию института 26-27 мая 2005 г.» Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.421.

12. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Гринь С.А. Промышленный способ получения биологически активного протеина А //Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Коваленко Я.Р. 16-17 мая 2006 г. «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных».-Москва «ИзографЪ» .-С.275

13. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А. Изучение репродукции респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота// Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Коваленко Я.Р. 16-17 мая 2006 г. «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных».-Москва «ИзографЪ».-2006.- С.277

14. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А. Разработка тест-системы для детекции антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота в ИФА //Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Коваленко Я.Р. 16-17 мая 2006 г. «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных».-Москва «ИзографЪ» .-2006.-С.279

15. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А. Очистка и концентрирование респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота //Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Коваленко Я.Р. 16-17 мая 2006 г. «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных».-Москва «ИзографЪ».-2006.-С.282

16. Матвеева И.Н., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Гринь С.А. Разработка тест-системы для детекции антител к вирусу парагриппа-3 крупного рогатого скота в ИФА //Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Коваленко Я.Р. 16-17 мая 2006 г. «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных».-Москва «ИзографЪ» .-2006.-С.284

17. Матвеева И.Н., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Филиппов С.Ю., Кузнецов Д.П. Очистка и концентрирование респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота// Материалы Междунар научно- производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А., 22-23 июня 2006 года, «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» Воронеж, «Научная книга».-2006 г.- С. 327-330.

18. Матвеева И.Н. Кузнецов Д.П. Промышленный способ получения биологически активного протеина А// Материалы Междунар. научно- производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А., 22-23 июня 2006 года, «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных».- Воронеж, «Научная книга».-2006 г.- С. 330.-332.

19. Матвеева И.Н., Кузнецова С.В., Филиппов С.Ю., Кузнецов Д.П. Разработка тест-системы для детекции антител к вирусу диареи крупного рогатого скота в ИФА // Материалы Междунар. научно- производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А., 22-23 июня 2006 года, «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных».- Воронеж, «Научная книга».-2006 г.- С. 333-337.

20. Матвеева И.Н., Кузнецов С.В., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Филиппов С.Ю., Кузнецов Д.П. Разработка тест-системы для детекции антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота в ИФА // Материалы Междунар. научно- производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А., 22-23 июня 2006 года, «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных».- Воронеж, «Научная книга».-2006 г.- С. 337-342.

21. Матвеева И.Н., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Филиппов С.Ю., Кузнецов Д.П. Изучение репродукции респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота // Материалы Междунар. научно- производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А., 22-23 июня 2006 года, «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных».- Воронеж, «Научная книга».-2006 г.- С. 342-345.

22. Матвеева И.Н. Результаты серологического мониторинга вирусной диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах//Материалы Междунар. научно- практической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения И.А. Хорькова,15 декабря 2006 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.86-87.

23. Матвеева И.Н., Филиппов С.Ю. Оценка эффективности иммуноферментной тест-системы для выявления антител к вирусу диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота//Материалы Междунар. научно- практической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения И.А. Хорькова,15 декабря 2006 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.88-93.

24. Матвеева И.Н., Кузнецов С.В., Кочиш Т.Ю., Кочиш И.И., Филиппов С.Ю., Кузнецов Д.П. Набор реагентов для определения уровня антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота в ИФА // Материалы Междунар. научно- практической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения И.А. Хорькова, 15 декабря 2006 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.97-100.

25. Матвеева И.Н. Биологические микрочипы -это диагностика будущего// Материалы Междунар. научно- практической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения И.А. Хорькова,15 декабря 2006 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.126-128.

26. Кочиш И.И., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Филиппов С.Ю., Чулков А.К., Кржижановская Е.В. Разработка тест-системы ИФА для диагностики респираторно-синцитиальной инфекции Ветеринарная медицина Научно-практическая конференция «Актуальные проблемы молекулярной диагностики ветеринарной медицины и биологии» 22-25 мая 2007 г - Феодосия, Крым. Выпуск, 88 с.116-119

27. Кочиш И.И., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Филиппов С.Ю., Чулков А.К., Кржижановская Е.В. Тест-система ИФА для диагностики парагриппа-3 Ветеринарная медицина Научно-практическая конференция «Актуальные проблемы молекулярной диагностики ветеринарной медицины и биологии» 22-25 мая 2007 г - Феодосия, Крым, выпуск 88.- с.120-122.

28. Cамуйленко А.Я., Рубан Е.А., Еремец В.И., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Клюкина В.И., Люлькова Л.С., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В., Павленко В.С., Ломакина Т.А., Лихашерстова С.В. Современные биологические процессы и иммунобиологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов Материалы Междунар. научно- практической конференции, 20-21 декабря 2007 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.6-10.

29. Матвеева И.Н., Сивков Г.В., Гринь С.А., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю. Изучение репродукции вируса аденовирусной инфекции крупного рогатого скота Материалы Междунар. научно- практической конференции, 20-21 декабря 2007 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.126-129.

30. Матвеева И.Н., Сивков Г.В., Гринь С.А., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю. Чулков А.К., Крыжановская Е.В. Концентрирование и очистка вируса аденовирусной инфекции крупного рогатого скота //Материалы Междунар. научно- практической конференции, 20-21 декабря 2007 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов».- Щелково.-С.129-132.

31. Матвеева И.Н., Сивков Г.В., Гринь С.А., Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю. Чулков А.К., Крыжановская Е.В. Разработка компонентов тест-системы ИФА для определения уровня антител к возбудителю аденовирусной инфекции крупного рогатого скота //Материалы Междунар. научно-практической конференции, 20-21 декабря 2007 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.132-137.

32. Кочиш И.И., Кочиш Т.Ю., Гринь С.А., Матвеева И.Н., Кржижановская Е.В. Чулков А.К. Разработка тест-системы ИФА для изучения иммунологической активности вакцин против пастереллеза животных определения //Материалы Междунар. научно- практической конференции, 20-21 декабря 2007 года, «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов «.- Щелково.-С.234-238.

33. Матвеева И.Н. Разработка тест-системы иммуноферментного анализа для выявления специфических антител к вирусу аденовирусной инфекции крупного рогатого скота по одному разведению сывороток// Материалы Всероссийской научной конференции, 20-21 ноября 2008 года, «Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология».- 2008.-Киров.-С.125-127

34. Матвеев И.Н., Еремец Н.К. Усовершенствование методов получения специфических антител при производстве биологических препаратов// Материалы Всероссийской научной конференции, 20-21 ноября 2008 года, «Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология».- Киров.-С. 127-128.

35. Тюрина И.Н., Артюшин С.К., Белоусов В.И., Быкова Н.Н. Идентификация и дифференциация производственных штаммов лептоспир методом ДНК-ДНК гибридизации// Профилактика и меры борьбы с инфекц. заболеваниями животных: -Тез. докл. научно-практ. конф. 21-22 апреля 1993 г.-М., 1993.

36. Artushin S., Belousov V., Bikova N., Turina I. Development of DNK-hybridization probe for identification of Leptospira interrogans serovar pomona//VII European and IX USSR leptospirosis research conference Moskov, February 20-22.-M., 1991.-P.53

37. Тюрина И.Н., Артюшин С.К., Белоусов В.И., Быкова Н.Н. // Молекулярное клонирование ДНК Leptospira Pomona// Науч. основы технологии пром. пр-ва вет. биол. препаратов: Тез. докл. всесоюз. науч. конф. 23-25 апреля 1991 г. - М., 1991.-С. 106

Размещено на Allbest.ru