Размещено на http://www.allbest.ru/

Устройство светового микроскопа

Основные понятия по теме

Микроскоп -- оптико-механический прибор, позволяющий увеличивать рассматриваемый объект и изучать отдельные его детали размером менее 0,15 мм, что недоступно невооруженному глазу даже при хорошем освещении.

При работе с лучшими оптическими приборами расстояние между двумя точками или линиями, на котором они четко видны, равняется десятым долям микрометра. Способность микроскопа давать раздельные изображения двух соседних элементов называется его разрешающей способностью. Она в 300--500 раз выше разрешающей способности глаза.

Увеличение микроскопа ограничено пределом полезного увеличения, который у современных микроскопов достигает 1400 раз. Проецируя изображение объекта под микроскопом на экран, можно получить увеличение предмета в десятки тысяч раз. Это так называемое бесполезное увеличение, поскольку никакие новые детали строения объекта при этом не проявляются.

Оптическая система микроскопа состоит из двух частей: осветительной и наблюдательной.

Осветительная часть микроскопа (рисунок 1.1) состоит из конденсора 14 с ирисовой диафрагмой и зеркала 15.

Конденсор располагается на кронштейне 16, который перемещается с помощью рукоятки 17, состоит из двух линз в цилиндрической оправе и служит для наилучшего освещения объекта.

Подъем кронштейна с конденсором ограничен упором. В крайнем верхнем положении конденсора между его фронтальной линзой и плоскостью предметного столика остается зазор 0,03-0,2 мм. Откидная рамка в нижней части оправы конденсора предназначена для светофильтра дневного света или для матового стекла.

Ирисовая диафрагма двухлинзового конденсора представляет собой систему многочисленных тонких пластинок, подвижно укрепленных в круглой оправе. С помощью рукоятки можно изменять размеры отверстия диафрагмы и регулировать пучок света, идущий от зеркала в конденсор. Под диафрагмой находится дополнительная откидная линза 18 в оправе. Ее включают при работе с объективами малого увеличения.

Рисунок 1.1 - Устройство микроскопа: 1 - основание штатива, 2 - коробка с механизмом микрометрической фокусировки, 3 - микровинт, 4 - предметный столик, 5 и 6 - винты предметного столика, 7 - тубусодержатель, 8 - макровинт, 9 - головка, 10 - револьвер, 11 - тубус, 12 - гнездо для моно- или бинокулярной насадки, 13 - винт фиксации тубуса, 14 - конденсор, 15 - зеркало, 16 - кронштейн, 17 - рукоятка кронштейна, 18 - откидная линза, 19 - окуляр, 20 - объектив (из Г. А. Бавтуто, Л. М. Ерей, 2002)

Зеркало 15 в оправе устанавливается под конденсором. Оно подвижно соединено со штативом микроскопа при помощи вилки и имеет две отражающие поверхности: плоскую и вогнутую. Его назначение -- направлять лучи, идущие от источника света, в конденсор. Плоская сторона зеркала используется при работе с объективами большого увеличения (60Ч, 90Ч), которые дают малые поля зрения и всегда требуют применения конденсора. Вогнутая сторона используется при работе без конденсора с объективами малых увеличений (8Ч, 10Ч, 20Ч, 40Ч). Лучи света, пройдя через конденсор и преломившись в его линзах, освещают препарат, размещенный на предметном столике, проходят сквозь него и входят в объектив.

Наблюдательная часть микроскопа представлена следующими элементами (рисунок 1.1):

Объектив 20 - важнейший элемент оптической системы микроскопа. Он состоит из нескольких линз, вправленных в металлическую гильзу, и дает обратное изображение предмета, выявляя особенности его строения, недоступные невооруженному глазу. Оптические свойства объектива зависят от количества и качества линз. Большое значение имеет и его рабочее положение, т.е. расстояние от нижней (фронтальной) линзы до верхней поверхности предметного стекла. Поэтому при работе рекомендуется пользоваться покровными стеклами, толщина которых меньше рабочего расстояния объектива (0,17-0,18 мм).

Окуляр 19 состоит из линз и диафрагмы, заключенных в цилиндрическую оправу. Верхняя линза служит для наблюдения, нижняя («коллектив») - фокусирует изображение; переданное объективом.

Диафрагма определяет границы поля зрения.

Оптическая система микроскопа строго центрирована и вмонтирована в штатив, представляющий собой механическую часть микроскопа (рисунок 1.1).

Штатив состоит из основания 1 прямоугольной формы, на котором снизу расположены три опорные площадки (обеспечивают устойчивость микроскопа на рабочем столе). Сверху к основанию крепится коробка 2 с механизмом микрометрической фокусировки. С одной стороны коробки располагается направляющая, по которой перемещается кронштейн конденсора, а с другой - паз для перемещения направляющей с тубусодержателем.

Механизм микрометрической (тонкой) фокусировки состоит из системы зубчатых колес и рычага, приводящихся в действие вращением рукояток 3. Справа на оси рукояток укреплен барабан со шкалой, состоящей из 50 делений. Каждое пятое деление обозначено цифрами - от «0» до «9». Один оборот барабана соответствует перемещению тубуса на 0,1 мм. Общее расстояние перемещения тубуса от упора до упора 2 мм.

С помощью механизма микрометрической фокусировки тубус вместе с механизмом грубой фокусировки может перемещаться. При вращении рукояток по часовой стрелке тубус опускается, против часовой стрелки - поднимается.

Сменные предметные столики фиксируются на кронштейне, укрепленном на коробке механизма микрометрической фокусировки. Верхний диск круглого предметного столика 4 можно вращать рукой, взявшись за накатанную часть, для чего необходимо опустить винт 5. При помощи винтов 5 и 6 столик можно центрировать, что позволяет привести в поле зрения нужный участок препарата. На столиках имеются механизм координатного перемещения препарата, а также отверстия для установки пружинных клемм (прижимают препарат) и для крепления накладного препаратоводителя.

Тубусодержатель (дуга) 7 имеет прямоугольную форму. В нижней его части находятся направляющая и трубка с двумя рукоятками 8 для грубой фокусировки микроскопа. В верхней части тубусодержателя укреплена головка 9 с направляющей типа «ласточкин хвост» для револьвера 10 и с гнездом для наклонной моно- или бинокулярной насадки, которая крепится винтом 12.

На револьвере есть четыре отверстия с резьбой для ввинчивания объективов. Центрированное положение объективов обеспечивается фиксатором (защелкой), расположенным внутри револьвера. Правильное положение револьвера относительно оси тубуса фиксируется винтом 13, закрепленным контргайкой.

Тубус (труба) 11 представляет собой полый цилиндр, в верхнее отверстие которого вставляются окуляры, в нижнем - закреплен револьвер.

Во время работы с микроскопом необходимо соблюдать следующие правила:

- работают с микроскопом всегда сидя. Сидеть следует на удобном стуле или табурете, не напрягаясь;

- микроскоп устанавливается напротив левого плеча, чтобы было удобно рассматривать объект левым глазом. С правой стороны на столе располагают инструменты (оборудование), необходимые для занятия, и альбом для зарисовок;

- для подготовки микроскопа к работе следует: а) протереть зеркало и оптические линзы; б) фронтальную линзу конденсора установить на 5 мм ниже столика микроскопа; в) отодвинуть кольцо со светофильтром, находящееся под конденсором; г) открыть ирисовую диафрагму; д) установить объектив малого увеличения на расстоянии 1 см от предметного столика; е) глядя в окуляр левым глазом, не закрывая правый, движением зеркала направить свет на объектив и добиться равномерного освещения поля зрения; микроскоп оптический осветительный элодея

- положить препарат на предметный столик так, чтобы объект изучения находился напротив фронтальной линзы конденсора, опустить объектив до предметного стекла (не касаясь его!) и, глядя в окуляр, осторожно вращать кремальеру на себя до появления четкого изображения;

- для работы при большом увеличении необходимо объект или нужную для изучения часть его расположить в центре поля зрения и с помощью микровинта добиться четкого изображения. Затем, не поднимая тубуса, повернуть револьвер для смены объектива. О правильной установке последнего судят по легкому щелчку. Ясность изображения фокусируют вращением макровинта, резкость регулируют с помощью диафрагмы;

- по окончании работы микроскоп снова переводят на малое увеличение и после этого снимают препарат с предметного столика;

Следует помнить, что микроскоп - тонкий оптический прибор. Переносить его следует двумя руками (одной - берут микроскоп за «ручку», другой - поддерживают основание). Ни в коем случае нельзя пытаться силой устранить какие-либо затруднения. Части микроскопа (особенно линзы) необходимо вытирать только мягкой хлопчатобумажной тряпочкой. Хранить микроскоп следует в футляре или под чехлом, стеклянным колпаком.

Практическое занятие

Цель: ознакомиться с устройством светового микроскопа и правилами работы с ним. Изучить строение клеток листа элодеи канадской.

Материалы и оборудование: листья элодеи канадской, микроскопы, пинцеты, лезвия, препарировальные иглы, предметные и покровные стекла, чашечки с водой и пипеткой, фильтровальная бумага.

Строение клетки листа элодеи канадской (Elodea canadensis Michx.)

Ход работы

1 Снять пинцетом лист с веточки элодеи, положить его верхней стороной на предметное стекло в каплю воды, накрыть покровным стеклом.

2 Под микроскопом при малом увеличении изучить форму листа, выявить среднюю жилку, обратить внимание на общую конфигурацию клеток листа и межклетников. В клетках хорошо видны беспорядочно располагающиеся хлоропласты, погруженные в бесцветную цитоплазму. Схематично зарисовать внешний вид листа (рисунок 1.2, А), передать на рисунке его форму, зубчики по краям, прозенхимные клетки жилки и паренхимные - мякоти, а также межклетники, заполненные воздухом.

3 При большом увеличении рассмотреть и зарисовать краевую клетку-зубчик (рисунок 1.2, Б). На рисунке отметить клеточную оболочку, цитоплазму, ядро, вакуоль, пластиды. Обратить внимание на форму и положение ядра в клетке.

Рисунок 1.2 - Лист элодеи канадской (Elodea canadensis). А - общий вид листа при малом увеличении; Б - клетка-зубчик (1 - зубчик, 2 - ядро, 3 - вакуоль, 4 - хлоропласт) (из Г. А. Бавтуто, Л. М. Ерей, 2002)

Вопросы для самоконтроля

1 Каковы основные системы микроскопа?

2 Каков порядок настройки микроскопа на свет?

3 Как вы понимаете выражение «рассмотрите объект в оптическом сечении»?

Литература

1 Бавтуто, Г. А. Практикум по анатомии и морфологии растений: учеб. пособие / Г. А. Бавтуто, Л. М. Ерей. - Мн. : Новое знание, 2002. - С. 5 - 28.

2 Хржановский, В. Г. Практикум по курсу общей ботаники: учеб. пособие / В. Г. Хржановский, С. Ф. Пономаренко. - М. : Высш. школа, 1979. - С. 5 - 15.

Размещено на Allbest.ru