Адсорбция высокомолекулярных белков плазмы на эритроцитах и ее влияние на микрогемоциркуляцию

По данным статистического анализа вязкости концентрированных суспензий нативных эритроцитов на следующий день после субпредельной нагрузки не имели статистически значимых различий с покоем. Однако величина разницы вязкостей суспензиий нативных и отмытых эритроцитов обусловленная взаимодействием между красными клетками крови была выше уровня покоя 83 (69:102) мПас (р = 0,028). Динамика этого параметра оказалась очень сходной с динамикой показателя адсорбции. Таким образом, улучшение текучести суспензий отмытых клеток, обусловленное их лучшей деформируемостью, компенсировало повышение агрегационных взаимодействий и позволило сохранить текучесть суспензий нативных эритроцитов на уровне покоя.

Резюме

Оба вида наблюдаемых мышечных нагрузок приводили к повышению вязкости плазмы и крови при высоком напряжении сдвига. Агрегационные взаимодействия между эритроцитами оцениваемые и по разнице вязкостей суспензий нативных и отмытых клеток и по предельному напряжению сдвига во время выполнении нагрузок не имели статистически значимых отличий от состояния покоя. Таким образом, изменения концентраций белковых фракций под влиянием нагрузок и восстановлении после них не сопровождались повышением взаимодействия междуэритроцитами, за исключением состояния восстановления после субпредельной нагрузки.

Исследование осмотической стойкости эритроцитов у спортсменов в различных состояниях

Изменения возрастного состава эритроцитов у спортсменов было изучено на ограниченной группе из 4 человек, обследование которых было выполнено на протяжении года в состоянии покоя и после различных вариантов нагрузок.

Выявлены существенные различия по содержанию клеток с различной осмотической стойкостью, в зависимости от состояния спортсмена. Построение диаграмм распределения эритроцитов по осмотической стойкости показало закономерные сдвиги в содержании отдельных фракций. Как правило, нагрузки вызывали повышение доли высокостойких клеток или смещали пик диаграммы в их сторону. Статистически значимые различия зафиксированы по количеству низко- и высокостойких клеток у спортсменов после субпредельных (р = 0,015 и р = 0,023, соответственно) и после тяжёлых нагрузок (р = 0,018 и р = 0,028, соответственно) по отношению к состоянию покоя. Содержание среднестойких форм клеток в исследуемых состояниях статистически значимых различий не имело.

Резюме

Проведённое наблюдение позволило подтвердить наличие изменений возрастного спектра циркулирующих эритроцитов при выполнении нагрузок и использовать его при интерпретации динамики адсорбции высокомолекулярных белков плазмы на эритроцитах.

Влияние мембранных белков и связанных с ними сиаловых кислот на процессы адсорбции макромолекул на эритроцитарных мембранах

Динамика показателя адсорбции при мышечных нагрузках поставила вопрос об участии в процессе адсорбции не только плазменных факторов, но и структур клеточных мембран эритроцитов. В литературе указывается, что адсорбция к наружной поверхности клетки может осуществляться либо к мембранным белкам, либо к фосфолипидам. Однако конкурентный характер адсорбции (Покидышева Е.Н.и др., 2000) белков плазмы свидетельствует о наличии ограниченного числа мест адсорбции. Количество молекул фосфолипидов значительно превышает количество молекул мембранных белков. Исходя из этого, мы предположили, что местом адсорбции для белков плазмы являются белковые структуры на наружной поверхности мембраны. Для выявления структурных компонентов клеточных мембран, ответственных за адсорбцию белков плазмы, мы провели исследования на суспензиях клеток (n=27), подвергнутых ферментативной обработке, в результате которой молекулы мембранных белков подвергаются частичному протеолизу. Использовали трипсин, который имеется в плазме крови.

Обработка суспензии эритроцитов трипсином приводит к увеличению количества концевых карбокси- и аминогрупп вследствие протеолиза мембранных белков. Влияние таких группировок на процесс адсорбции должно проявляться увеличением числа адсорбированных молекул по двум причинам увеличение мест адсорбции и удаление сиаловых кислот. Изменения формы клеток, способных свидетельствовать о повреждении мембраны после обработки трипсином при биомикроскопии клеток мы не выявили. Различия в агрегации эритроцитов при этом выражены достаточно ярко. Клетки, обработанные трипсином, образовывали более крупные агрегаты и гораздо чаще формировали трёхмерные структуры.

Результаты измерений на суспензиях клеток, ресуспендированных в собственной плазме, показали значительное повышение коэффициента адсорбции у клеток, обработанных трипсином по сравнению с просто отмытыми клетками (р = 0,013). Таким образом, после обработки клеток трипсином, местом адсорбции на наружной поверхности эритроцитарных мембран могут служить заряженные группировки, формируемые как за счет диссоциации ионизируемых групп мембранных белков, так и карбоксильные и аминные группировки разорванных трипсином пептидных связей белковых макромолекул. Появление дополнительных мест, способных обеспечивать адсорбцию, может быть причиной повышенной адсорбции после обработки данным ферментом. О наличии на их поверхности большего количества заряженных группировок можно судить по результатам определения коэффициента дисперсии для отмытых клеток, и клеток обработанных трипсином.

Величина коэффициента дисперсии суспензии эритроцитов, после обработки трипсином статистически достоверно возрастала (р = 0,007) по сравнению с суспензией клеток трижды отмытых в фосфатном буферном растворе. Причины такого увеличения коэффициента дисперсии могут быть связаны с тем, что трипсин, разрушая пептидные связи, образованные карбоксильной группой лизина и аргинина, приводит к увеличению количества точечных зарядов на поверхности красных клеток крови.

При действии раствора трипсина на суспензии эритроцитов происходит удаление с поверхности клеток части сиаловых кислот. Используемый нами фермент может удалять только те молекулы кислоты, которые связаны с белками. Следовательно, на показатель адсорбции способно влиять не только появление дополнительных положительно заряженных группировок на поверхности клеток за счет протеолиза пептидных связей, к которым впоследствии будет осуществляться адсорбция, но и сам факт удаления отрицательно заряженных сиаловых кислот. Корреляционный анализ выявил отрицательную взаимосвязь r_s= -0,676 (р = 0,006) между количеством удаляемых протеолизом сиаловых кислот и величиной показателя адсорбции нативных эритроцитов. Следовательно, чем больше сиаловых кислот связанных с белками имеется на поверхности красных клеток крови, тем меньше возможность адсорбции высокомолекулярных белков.

Однако если только наличие сиаловых кислот было бы определяющим фактором адсорбции, то положительная взаимосвязь должна была бы проявиться и при ресуспендировании клеток обработанных трипсином, и таким образом лишённых около половины имеющихся на поверхности молекул сиаловой кислоты. По результатам наших измерений такой взаимосвязи с показателем адсорбции клеток обработанных трипсином не было. Следовательно, важнейшим фактором при адсорбции в подобных условиях является наличие мест связывания. Обработка трипсином приводит к протеолизу наружных фрагментов мембранных белков и образованию дополнительно 1 или 2 заряженных группировок на поверхности мембраны на каждый разрыв пептидной связи. По-видимому, именно поэтому величина показателя адсорбции для эритроцитов, подвергнутых обработке трипсином и ресуспендированных в аутоплазме, оказывалась значительно выше (р = 0,004 по тесту Вилкоксона) по сравнению с эритроцитами ресуспендированными без обработки трипсином. Для клеток, не подвергавшихся воздействию протеолитического фермента, при ресуспендировании не выявлено статистически значимого изменения показателя адсорбции.

После обработки трипсином характерно появление трехмерных эритроцитарных агрегатов. Данное влияние хорошо согласуется с тем фактом, что ответственными за повышения показателя адсорбции при ресуспендировании после обработки трипсином стали концентрации в плазме фибриногена r_s = 0,492 (р = 0,012) и глобулинов r_s = 0,600 (р = 0,023).

Ресуспендирование клеток в аутоплазме приводило к возвращению вязкости суспензий к уровню суспензий нативных эритроцитов. После обработки трипсином и повышения показателя адсорбции на 10,8% текучесть суспензий снизилась более чем в 3 раза (р = 0,0001 по тесту Вилкоксона), притом, что непосредственно сама обработка трипсином не приводила к повышению вязкости суспензий (р = 0,447). Из этого следует, что за столь выраженное повышение вязкости суспензий эритроцитов, обработанных трипсином, могут быть ответственны именно адсорбированные белки плазмы. При этом причиной этого повышения стало не столько удаление сиаловых кислот (корреляция с количеством удаляемых протеолизом сиаловых кислот с вязкостью суспензий выявлена только для нативных клеток r_s = 0,657 при р = 0,020), сколько появление дополнительных мест связывания после обработки трипсином.

Резюме

Таким образом, мы можем говорить о том, что наличие свободных мест связывания на мембранных белках определяет количество адсорбируемых белков плазмы. Наличие сиаловых кислот, связанных с мембранными белками блокирует адсорбцию. Изменение адсорбционных характеристик эритроцитов в процессе циркуляции осуществляется в первую очередь за счёт потери сиаловых кислот.

Исследование влияния кровообращения в коже на результаты импедансметрии мышц голени

Для исследования объёма сосудистого русла скелетной мускулатуры нами применён метод импедансной спектроскопии. Для того, что бы оценить возможное влияние кожного кровотока на результаты импедансметрии, проведено параллельное измерение кожного кровотока методом лазерной допплеровской флоуметрии. Метод лазерной допплеровской флоуметрии при обследовании на поверхности кожи дает информацию о количестве и скорости движущихся в поверхностных сосудах эритроцитов, и таким образом связывается с кровообращением в коже и ближайших подлежащих тканях. Это обусловлено малой глубиной проникновения используемого красного излучения. Анализ результатов измерений не выявил наличия корреляций между данными импедансной спектроскопии и лазерной доплеровской флоуметрии, что позволяет нам считать влияние кровоснабжения кожи на результаты импедансметрии слабым.

Исследование импеданса мышц голени

Значения величин импеданса и коэффициента дисперсии у больных РА имели существенные отличия от группы контроля. Величина импеданса на частоте 5 кГц увеличена на 47,8% и 47,5% на правой и левой ноге соответственно, а на частоте 500 кГц - на 76,7% и 74,8%. Величина же коэффициента дисперсии, напротив, оказалась сниженной: на 22,8% для правой и на 23,2% для левой ноги (рисунок 4).

Значительный разброс индивидуальных значений коэффициентов дисперсии в контрольной группе мужчин привёл к тому, что, несмотря на значительные различия в величине их медиан между спортсменами и контролем, мы не можем говорить о статистически значимых различиях.

Импедансметрические измерения, выполненные перед нагрузкой и сразу после неё, продемонстрировали снижение величин импедансов (р = 0,001 по Вилкоксону) и повышение коэффициентов дисперсии (р = 0,001), что свидетельствует об увеличении объёма сосудистого русла в мышцах под влиянием нагрузки и соответствует известным данным литературы.

Рисунок 4. Коэффициенты дисперсии мышц голени в группах женщин. Все три группы женщин статистически значимо различались между собой и по тесту Манна-Уитни

При сопоставлении коэффициента дисперсии, характеризующего объём сосудистого русла, и показателя адсорбции мы получили статистически значимые взаимосвязи и по группам женщин и по группам мужчин (рисунки 5 и 6).

Рисунок 5. Связь показателя адсорбции с коэффициентом дисперсии в группах женщин

Рисунок 6. Связь показателя адсорбции и коэффициента дисперсии в группах мужчин

Из приведённых рисунков следует, что имеется закономерная, отрицательная связь между показателем адсорбции и объёмом сосудистого русла, как в группах женщин, так и в группах мужчин. При корреляционном анализе мы, действительно, обнаружили достаточно тесные связи ряда реологических параметров с объёмом сосудистого русла оцениваемом по коэффициенту дисперсии. В группах женщин такие связи выявлены для вязкости крови при напряжении сдвига 0,1 Па, вязкости плазмы и предельного напряжения сдвига. Коэффициенты корреляции и их значимость представлены в таблицах 7 и 8.

Наличие связи между процессами адсорбции высокомолекулярных белков плазмы на эритроцитах и сопутствующими изменениями объёма сосудистого русла ставят вопрос о возможных механизмах таких связей.

Таблица 7. Коэффициенты корреляции реологических параметров с коэффициентом дисперсии мышц голени в группах женщин

Таблица 8. Коэффициенты корреляции реологических параметров с коэффициентом дисперсии мышц голени в группах мужчин.

Исследование состояния кровотока в микрососудах бульбарной конъюнктивы глазного яблока

Основное внимание при анализе микрофотографий нами было уделено состоянию потока в венулярных сосудах с диаметром более 30 мкм. Использованные режимы съёмки позволяли регистрировать зернистость потока крови практически у всех обследованных. Однако при повышении показателя адсорбции высокомолекулярных белков плазмы на эритроцитах, мы фиксировали наличие в потоке выраженных конгломератов клеток сопоставимых по размерам с диаметром сосуда не зависимо от того к какой из обследованных групп относился данный индивид.

В исследуемых группах, которые не подвергались непосредственному воздействию экстремальных нагрузок, мы отметили зависимость показателя адсорбции от концентрации медленных электрофоретических фракций. Из этого следует, что наличие конгломератов красных клеток в венулярных сосудах может быть следствием изменения концентраций белков плазмы, с сопутствующей ему интенсификацией агрегационных взаимодействий между клетками. При оценке вероятности процесса агрегации эритроцитов, в отдельном сосудистом сегменте, важным фактором оказывается пролетное время. Именно из-за его малой величины отрицается возможность агрегации эритроцитов в артериальных сосудах. Анализ структуры потока в области слияния венул и их линейных отделов позволяет утверждать, что условия для сближения клеток на расстояния, обеспечивающие возможность образования связей, имеют место в области слияния сосудов. Просмотр замедленной видеозаписи движения крови при слиянии венул демонстрирует возможность сближения эритроцитов и их конгломератов либо в области бифуркации, либо в области искривления венулы, где дополнительно действуют центробежные силы. Эти наблюдения позволяют предполагать, что важным условием формирования агрегатов в венулах является структура потока в предшествующих сосудах. Значительное перемещение отдельных эритроцитов по поперечному сечению сосуда способное привести к формированию агрегата в венулярных сосудах возможно только в области кривизны сосуда под действием гидродинамических сил. В линейной части сосуда движение эритроцитов и их конгломератов осуществляется с практически равными скоростями, что невозможно при параболическом профиле. При этом иногда наблюдается сохранение структуры потока предшествующего сегмента на протяжении относительно линейной части сосуда. Рассматривая последовательность событий в микроциркуляторной сети по ходу движения крови, мы можем констатировать, что за гетерогенность потока крови в венулярных сосудах ответственна структура потока в капиллярах, которая является гетерогенной практически у всех людей. В свою очередь формирование капиллярного потока определяется процессами, происходящими в областях бифуркации артериальных сосудов (Чернух А.М. 1986). Наряду с сосудистыми факторами новые математические модели формирования потоков крови в разветвляющихся сосудистых сетях предполагают и учёт взаимодействия клеток между собой (King M.R. et. al. 2005, Kim S. et al. 2006).

Наличие гетерогенного потока в артериолах очевидно является следствием его неоднородности в предшествующих генерациях сосудов. При этом формирование конгломератов клеток в сосудах микроциркуляторного русла за счёт их поперечных перемещений обусловленных силами взаимодействия невозможно, вследствие малого пролётного времени и больших сил инерции. Таким образом, формирование гетерогенности потока крови должно осуществляться в предшествующих достаточно крупных артериальных сосудах. При использовании для анализа условия наличия параболического профиля потока, признать возможность формирования и сохранения конгломератов клеток в этом отделе затруднительно. Однако результаты исследования профилей потока в аорте (Педли Т. 1983) и наши исследования профилей потока в общей сонной артерии демонстрируют значительное отличие профиля скоростей от параболического. В центральной части сосудов имеются области с малыми различиями скорости движения даже в систолу, и тем более в диастолу (Смирнов И.Ю., Позин А.А., 2006). Аналогичные результаты получены при анализе потока в стеклянных капиллярах методом лазерной доплеровской микроскопии (Приезжев А.В., Степанян А.С. 1997). Эти наблюдения позволяют нам говорить о том, что в центральной части крупных артериальных сосудов имеют место малые скорости сдвига, при которых разрушения конгломератов клеток не происходит. Основные сдвиговые воздействия в сосудах имеют место в области их стенки. Важным фактором, влияющим на структуру потока в венулах является их нелинейность. На видеозаписях при замедленном просмотре наблюдается изменение в распределении эритроцитов по диаметру сосуда в области изгиба или сужения. При повышении силы взаимодействия между эритроцитами и, как следствие, наличии достаточно крупных агрегатов, они оказывают существенное влияние на распределение красных клеток не только в капиллярах, но и в других отделах микрососудистой сети. Наши видеосъёмки показывают, что движение может осуществляться слоями, скорость движения и размеры которых определяются наиболее крупными структурами потока. При условии, что конгломерат клеток не перекрывает просвет сосуда полностью, возможно обтекание его клеточными элементами и плазмой с более высокими скоростями. При отсутствии крупных конгломератов наблюдается сохранение структуры потока предшествующего сосуда на достаточно протяжённой линейной части сосуда.

На основании проведённого исследования возможно рассмотрение следующей последовательности явлений в системе кровообращения определяющих эффективность её функционирования при различных состояниях организма.

1. Повышение концентрации высокомолекулярных фракций белков в плазме вследствие патологии или воздействия мышечных нагрузок. Как правило, это белки, относящиеся к малоподвижным электрофоретическим фракциям бета и гамма глобулинов.

2. Повышенная адсорбция высокомолекулярных белков на эритроцитах в зависимости от их абсолютной концентрации в плазме и от содержания сиаловых кислот связанных с гликопротеинами мембран эритроцитов.

3. Следствием более активной адсорбции высокомолекулярных белков плазмы на эритроцитах становится повышение электростатических сил взаимодействия между эритроцитами в потоке. Данный эффект обусловлен наличием заряженных группировок в составе молекул белков. Степень проявления его определяется количеством имеющихся заряженных группировок и геометрией молекул. Молекулы с большими геометрическими размерами оказывают более сильное влияние на взаимодействие между клетками.

4. Следствием повышенного содержания на поверхности эритроцитов заряженных группировок и повышения сил взаимодействия между ними является формирование конгломератов клеток в центральной части магистральных артериальных сосудов. Возможность формирования конгломератов обусловлена наличием уплощённого профиля скоростей движения потока по поперечному сечению сосуда. Скорости сдвига в центральной части сосуда минимальны. Конгломераты красных клеток крови могут перемещаться по линейной части сосудов вплоть до бифуркаций. При этом формирование пристеночного слоя с малым содержанием клеток способствует снижению сопротивления потоку. В области бифуркации конгломераты эритроцитов разделяются по дочерним сосудам в зависимости от их положения в потоке и от действующих электростатических сил взаимодействия между клетками.

5. Формирование гетерогенного заполнения капилляров с различным содержанием эритроцитов (от плазматических капилляров до капилляров с максимально возможным заполнением просвета красными клетками крови) является следствием неоднородности заполнения приносящих артериол красными клетками крови и взаимодействия между ними. Гетерогенное заполнение капилляров эритроцитами формирует гетерогенность гидродинамических условий в отдельно взятых капиллярах, которая определяется скоростью движения потока и перепадом давления на артериальном и венозном концах сосуда. Это в свою очередь, оказывает влияние на количество функционирующих капилляров.

6. Наличие неравномерного заполнения капилляров красными клетками крови приводит к формированию конгломератов эритроцитов при слиянии капилляров в венулярных сосудах. В венулах силы взаимодействия между эритроцитами в сливающихся потоках приводят к тому, что на значительном протяжении линейной части венул с диаметром более 40-50 мкм наблюдаются несмешивающиеся потоки.

7. Выявленное наличие «поршневого» движения крови или слоевой структуры потока в венулярных сосудах свидетельствует о существенном отличии профиля потока крови в микрососудах от параболического. Этот факт приводит к тому, что традиционная экстраполяция результатов вискозиметрии крови in vitro на систему микрогемоциркуляции in vivo оказывается не вполне корректной.

Выводы

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Смирнов И.Ю. Гемореологические аспекты выносливости в спорте. Кострома, изд-во Костромского государственного технологического университета. 2006. 101 с.

2. Смирнов И.Ю. Викулов А.Д., Карпов Н.Ю., Некоторые закономерности кровообращения у высококвалифицированных спортсменов-пловцов // Физиология человека. 2002. т. 28. N1. С. 87 94.

3. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А. Измерение осмолярности растворов электролитов по их электропроводности // Вестник Костромского государственного университета. 2003. №1. С. 39 42.

4. Смирнов И.Ю., Левин В.Н. Влияние адсорбированных протеинов на реологические характеристики эритроцитов // Физиология человека. 2004. т. 30. №2. С. 117 121.

Smirnov I. Ju., Levin V.N. Effect of adsorbed Proteins on the rheological Properties of Erythrocytes // Human Physiology (English Translation of Fiziologiya Cheloveka) // МАИК/INTERPERIODICA /Pleiades Publishing /Distributer by Springer. 2004. v. 30. №2. P.230 234.

5. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Здюмаева Н.П. Адсорбция белков на эритроцитарных мембранах у спортсменов при выполнении соревновательных нагрузок и её влияние на реологические параметры клеток // Физиология человека. 2004. т. 30. №3. С. 148-154.

Smirnov I. Ju., Levin V.N., Zdumaeva N.P. Protein adsoption on erythrocytic membranes and its Effect on Erythrocyte Rheology in Athletes during Competition Exercise // Human Physiology (English Translation of Fiziologiya Cheloveka) // МАИК/INTERPERIODICA /Pleiades Publishing /Distributer by Springer. - 2004. v. 30. №3. P.364 368.

6. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Здюмаева Н.П. Метод сравнительной оценки адсорбированных белков на поверхности эритроцитов по данным импедансной спектроскопии // Клиническая лабораторная диагностика. 2004. №11. С. 42 45.

7. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Чирикова О.А. Роль ионных каналов в обеспечении осмотической стойкости эритроцитов // Вестник Костромского государственного университета. 2006. т. 12. №8. С. 18-22.

8. Смирнов И.Ю., Левин В.Н Взаимосвязь реологических параметров крови с объемом сосудистого русла в скелетных мышцах // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. 2007. №1. С. 137-139.

9. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Чирикова О.А. Факторы, определяющие адсорбцию белков плазмы крови на эритроцитах // Тромбоз, гемостаз и реология. 2004. №4 (20). С. 64-68.

10. Смирнов И.Ю., Позин А.А. Потоковые характеристики крови в артериальных сосудах и электростатические взаимодействия между эритроцитами // Функциональная диагностика. 2006. №1. С. 76 80.

11. Смирнов И.Ю. Левин В.Н., Муравьев А.В., Сулоев Е.П., Гущин А.Г., Болдина В.И., Морфология и реология крови при срочной адаптации к мышечной нагрузке // Новости медицинской и спортивной антропологии. Москва. 1991. в. 1. С. 3637.

12. Смирнов И.Ю. Динамика реологических свойств крови при лазерной рефлексотерапии на фоне высокоинтенсивных мышечных нагрузок и дезадаптации после них // Экспериментальные и клинические аспекты адаптации микроциркуляции. Сборник научных трудов. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 1995. С. 7983.

13. Смирнов И.Ю., Сулоев Е.П. Изменения реологических свойств и кислородотранспортной функции крови при долговременной адаптации к силовым статическим мышечным нагрузкам // Современные проблемы естествознания. Медицина. Материалы конференции. Ярославль. изд-во Ярославского гос. университета 1997. С. 151 154.

14. Смирнов И.Ю., Титовский А.В., Сулоев Е.П. Измерение показателя гематокрита по электропроводности крови // Современные проблемы естествознания. Медицина. Материалы конференции. Ярославль. изд-во Ярославского гос. университета 1997. С. 147 150.

15. Смирнов И.Ю., Сулоев Е.П., Изменения реологических свойств и кислородотранспортной функции крови при адаптации к мышечным нагрузкам // Современные проблемы естествознания. Медицина. Материалы конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. университета. 1997. С. 154157.

16. Смирнов И.Ю. Позин А.А., Соколова Т.В., Мач Э.С., Состояние кожного кровотока у больных деформирующим остеоартрозом и ревматоидным артритом по данным лазерно-доплеровской флоуметрии // Микроциркуляция. Материалы международной конференции. Ярославль-Москва, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 1997. С. 156157.

17. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Позин А.А. Модель полуавтоматического капиллярного вискозиметра // Микроциркуляция. Материалы международной конференции. Ярославль-Москва, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 1997. с. 199200.

18. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Позин А.А. Измерение показателя гематокрита по электропроводности крови // Микроциркуляция. Материалы международной конференции. Ярославль-Москва, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 1997. С. 201202.

19. Смирнов И.Ю., Викулов А.Д., Муравьев А.В., Бурухин С.Ф., Кожухова В.К., Мельников А.А. Динамика текучести крови у человека и животных как общебиологическая закономерность адаптации к мышечным нагрузкам // Материалы 17 съезда физиологов России.Ростов-на-Дону. 1998. С. 167.

20. Смирнов И.Ю., Левин В.Н., Здюмаева Н.П., Рыхлова А.С. Оценка роли адсорбированных на мембранах белков в реологическом поведении эритроцитов // Медицина. Биология. Спорт. Материалы межвузовской конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 2000. С. 3032.

21. Смирнов И.Ю., Здюмаева Н.П., Дюкова А.С. Влияние агрегационно-электростатических взаимодействий между эритроцитами на потоковые харатеристики крови в артериальных сосудах // Гемореология. Материалы международной конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 2001. С. 26.

22. Смирнов И.Ю., Здюмаева Н.П., Левин В.Н. Применение импедансного метода в оценке адсорбции белка на мембранах эритроцитов при патологии // Гемореология. Материалы международной конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 2001. С. 27.

23. Смирнов И.Ю., Дюкова А.С., Левин В.Н. Взаимосвязь реологических характеристик крови и особенностей кровоснабжения скелетной мышцы // Гемореология. Материалы международной конференции. Ярославль. изд-во Ярославского гос. пед. университета 2001. С. 101 102.

24. Смирнов И.Ю., Влияние агрегационно-электростатических взаимодействий между эритроцитами на потоковые харатеристики крови в артериальных сосудах // Современные проблемы практической ангиологии и сосудистой хирургии. Сборник научных работ. Кострома, ДиАр. 2001.-С. 99102.

25. Смирнов И.Ю., Здюмаева Н.П., Дюкова А.С. Состояние поверхности эритроцитарных мембран при ревматоидном артрите // Современные проблемы практической ангиологии и сосудистой хирургии. Сборник научных работ. Кострома, ДиАр. 2001. С. 340 344.

26. Смирнов И.Ю., Кузнецов Э.Н., Чирикова О.А. Изменение адсорбционных характеристик эритроцитов в процессе соревновательной деятельности у спортсменов // Проблемы физкультурного образования детей и учащейся молодежи. Материалы международной научно-практической конференции. Шуя, изд-во Шуйского гос. пед. университета. 2002. С. 73.

27. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А., Богданов М.В. Changes of membranous properties of erythrocytes in sportsmen under making a large physical loads // Гемореология и микроциркуляция. Материалы международной конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 2003.

28. С. 113.

29. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А., Дюкова А.С. Влияние реологических параметров крови на кровоснабжение скелетных мышц // «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии». Сборник научных работ - Томск, изд-во Томского гос. университета. Т. 3. №1. - 2004.

30. С. 153 155.

31. Смирнов И.Ю., Позин А.А. Потоковые характеристики крови и электростатические взаимодействия между эритроцитами в артериальных сосудах // Современные методы ультразвуковой диагностики заболеваний сердца, сосудов и внутренних органов. Материалы конференции. Москва. 2004. С. 38 39.

32. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А., Левин В.Н. Влияние реологических параметров крови на кровообращение в скелетных мышцах // Материалы XIX съезда физиологического общества им. И.П. Павлова. Екатеринбург, ГСП 169. 2004. С. 201 203.

33. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А., Ткачук А.П. Роль поверхностных структур эритроцитарных мембран в процессах адсорбции биополимеров // Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии. Всероссийская научная конференция. Москва, изд-во НЦССХ им. А.Н. Бакулева. 2005. С. 304.

34. Smirnov I. Ju., Chirikova O.A. Plasma protein patterns and their adsorption at the erythrocyte membrane during muscular activity // Biorheology, IOS Press. 2005. v. 42. №1 2. P. 91 92.

35. Смирнов И.Ю., Влияние агрегационно-электростатических взаимодействий между эритроцитами на структуру потока крови в микрососудах // Гемореология в микро- и макроциркуляции. Материалы международной конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 2005. С. 37

36. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А. Роль структурных элементов мембран эритроцитов в процессах адсорбции белков плазмы // Гемореология в микро- и макроциркуляции. Материалы международной конференции. Ярославль, изд-во Ярославского гос. пед. университета. 2005. С. 202.

37. Смирнов И.Ю., Чирикова О.А., Левин В.Н. Адсорбция белков плазмы крови на эритроцитах у спортсменов // Научные труды I съезда физиологов СНГ. Сочи. 2005. т. 1. С. 205.

38. Смирнов И.Ю. Дюкова А.С. Изменение реологических параметров крови, как механизм компенсации сосудистых нарушений у больных ревматоидным артритом // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии. Материалы Российской научной конференции с междунар. участием в 2х томах. Курск, изд-во Курской мед. академии. 2006. С. 283-287.

Размещено на Allbest.ru