C.albicans обладают антиопсонической активностью в системе альтернативного пути активации комплемента, которая детерминируется термолабильными компонентами клеточной стенки грибов. Присутствие кандид в кровяном русле приводит к торможению направленной миграции нейтрофилов в очаги воспаления.

C. albicans и эпителиоциты слизистых оболочек активно взаимодействуют друг с другом на этапе адгезии кандид. Контакт C. albicans с буккальными клетками зависит от белок-синтезирующей активности кандид, а также усиливается при различных видах метаболической и цитоскелетной активности эпителиоцитов. Существенный вклад в антиадгезивный эффект ротовой жидкости и сыворотки крови вносят антитела, а также температурозависимые факторы, вызывающие необратимые изменения адгезинов C. albicans.

Активация в нейтрофилах внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нуклеарным фактором kB и митогенактивированными киназами (ERK1/2 и р38), опосредуется специфическими контактами с C.albicans и ведет к увеличению продукции активных форм кислорода фагоцитами. Кандида-индуцированная активация нуклеарного фактора kB в эпителиоцитах усиливает их адгезивность в отношении C.albicans.

Высокоэнергетические импульсные искровые разряды миллисекундной длительности, генерирующие некогерентное излучение (НКИ), вызывают дестабилизирующий эффект, приводящий к гибели C.albicans. Деструктивный эффект НКИ селективен: он более выражен в отношении кандид, чем в отношении клеток макрорганизма.

Апробация материалов диссертации

Диссертация апробировалась на расширенном заседании кафедры микробиологии и иммунологии ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г. Нижний Новгород) 6 ноября 2008г.; протокол № 3.

Основные результаты диссертации докладывались и обсуждались на:

IV всесоюзном совещания «Люминесцентный анализ в медицине и биологии и его аппаратурное обеспечение» (Москва, 1992), 5-й Пущинской конференции молодых ученых (Пущино, 2001), международной конференции “Proceeding of the Scanning Probe Microscopy-2001 Workshop” (Нижний Новгород, 2001), 1-м, 2-м, 3-м и 4-м Всероссийских конгрессах по медицинской микологии (Москва, 2003; 2004; 2005; 2006), III конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004); 3-м съезде биофизиков России (Воронеж, 2004), научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии» (Уфа, 2004), международном научном семинаре «Высокоинтенсивные физические факторы в биологии, медицине, сельском хозяйстве и экологии» (Саров, 2004), VI Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Озон в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2005), симпозиуме национального альянса дерматологов и косметологов (Санкт-Петербург, 2007),VI, VII, VIII, IX и XI научно-практической конференции по медицинской микологии (Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2003; 2004; 2005; 2006; 2008), Первом и Втором съездах Микологов России «Современная микология в России» (Москва, 2002; 2008).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 55 печатных работ, в том числе 19 - в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки, в материалах съездов, конгрессов, симпозиумов, Всероссийских, международных и региональных конференций и совещаний. Издано 3 учебно-методических пособия для студентов медицинских ВУЗов, рекомендованных УМО. Одна работа выполнена на уровне изобретения (получено положительное решение о выдаче патента РФ).

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 253 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 6 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы. Диссертация иллюстрирована 39 таблицами и 40 рисунками. Библиографический указатель включает 432 источника литературы, в том числе 106 отечественных и 326 зарубежных авторов.

Содержание диссертации

нейтрофильный фагоцитоз слизистый импульсный

Материалы и методы исследования

Использовали живые культуры Candida аlbicans - штаммы 44_1, 67/846, 201, 258, 290, 601, 852, Candida kefyr 17 и Candida guillermondii 6530-2055, Staphylococcus aureus (штаммы 86М, 66М, 7Н, 1971) и Staphylococcus epidermidis (51-1, 310-2, 178, ССМ 885), Escherichia coli штамм 18М (из коллекций кафедры микробиологии и иммунологии ГОУ ВПО НижГМА Росздрава, НИИ гигиены и профпатологии МЗ РФ (г. Нижний Новгород) и Всесоюзного центра глубоких микозов (г. С.-Петербург)). Свежевыделенные клинические изоляты (19 штаммов) получали из бактериологических лабораторий НИИ детской гастоэнтерологии МЗ РФ (г. Нижний Новгород) и Нижегородской областной клинической больницы.

Эксперименты выполнены на 593 белых беспородных крысах, самках и самцах, массой 230 30 г и на 104 самках линии Wistar массой 200 10 г, полученных из питомника «Моховая» (Московская обл.). Животные содержались в стационарных условиях вивария на стандартном рационе. Все манипуляции с животными проводили с применением эфирного наркоза.

В работе были исследованы нейтрофилы 523 крыс и 81 человека, а также эпителиоциты слизистых оболочек 254 человек. Секрет ротовой полости/слюну и сыворотку крови получали от здоровых доноров-добровольцев 18-25 лет (415 человек). Проведено свыше 3000 анализов с использованием различных методов (табл.1)

Культуру C. albicans получали в дрожжевой фазе на агаре Сабуро (24 часа, 37С) (ННПЦ ГИП, г. Оболенск). Посевы смывали, дважды отмывали (1000g, 15 мин) десятикратным объемом забуференного (рН 7,2-7,4) физиологического раствора (ЗФР), удаляли клеточные агрегаты центрифугированием (40 g, 2 мин) и ресуспендировали в ЗФР в концентрации 10⁷ - 10⁹ клеток/мл (в зависимости от эксперимента). Концентрацию кандид определяли спектрофотометрически.

Мицелиальную форму кандид получали по методу Заславской М.И и соавт. (2006) (рис. 1а). Гифальные элементы кандид использовали в концентрации, эквивалентной по сухому весу дрожжевой фазе.

Таблица 1. Методы оценки реактивности / функциональной активности клеток, использованные при выполнении диссертационной работы

Выделение чистой фракции нейтрофилов крови проводили по методу Подосинникова И.С. и соавт. (1981).

Первичную 18-часовую чистую культуру нейтрофилов крови получали при культивировании в среде ДМЭМ ранее описанным способом (Маянский Н.А., Заславская М.И., Маянский А.Н, 2000).

Опсонизацию кандид и зимозана проводили цельной сывороткой, а также в режиме сорбции C3b/iC3b- и IgG-молекул (Маянский А.Н. и соавт., 1989; Заславская М.И., Маянский А.Н.; 2006)

Топографию нейтрофилов исследовали с помощью сканирующего зондового микроскопа TopoMetrix SPMLab (США) в НИОЦ СЗМ (Н.Новгород). Работа на сканирующем зондовом микроскопе выполнена совместно с научным сотрудником центра - Гущиной Ю.Ю.

Изучение активности кандид и зимозана в системе альтернативного пути активации комплемента (АПАК) проводили с сывороткой, где был возможен только альтернативный путь активации (Kozel T. R, et al., 1987).

Искусственную колонизацию кандид на эпителиоцитах осуществляли способом, описанным ранее (Маянский А.Н. и соавт.,2002). Определяли индекс адгезии, т.е. среднее количество кандид в пересчете на один эпителиоцит (канд/эп) после просмотра 100 эпителиальных клеток. Эксперименты по оценке адгезивных реакций в системе «Candida albicans - эпителиоциты» выполнены совместно с сотрудниками ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г.Нижний Новгород): асс. Махровой Т.В., доц. Салиной Е.В., асс. Луковой О.А. (каф. микробиологии и иммунологии) и асс. каф. госпитальной педиатрии Абаджиди М.А. при непосредственном участии автора.

Оценку влияния различных факторов на адгезию в системе «C.albicans- буккальные эпителиоциты» определяли после предварительной обработки клеток соответствующими реактивами с последующей отмывкой ЗФР. Нековаленто связанные компоненты удаляли с поверхности клеток раствором 0,1% додецилсульфата натрия (ДДС) (Kozel T.R. et al., 1987).

Экстракт нейтрофилов, стандартизованный по миелопероксидазе, получали, используя обработку клеток 0,1% тритоном Х-100 (Suzuki K. et al., 1983).

Сыворотку и слюну, истощенные по антителам к кандидам получали способом, описанным ранее (Махрова Т.В. и соавт.; 2005). Полноту истощения субстрата (слюны, сыворотки) по антителам к кандидам оценивали в реакции энзим-меченых антител по методу Астафьева Д.Г. (1987).

Оценку естественной колонизации проводили путем подсчёта бактериальных клеток, адгезированных на эпителиоцитах. Для этого из суспензии эпителиоцитов готовили мазки, фиксировали метанолом (10 мин) и окрашивали 0,25% водным раствором азура А (“Sigma”, США). Индекс естественной колонизации оценивали по числу бактериальных клеток в пересчёте на один эпителиоцит (бакт/эп). Учитывали средний результат после подсчета 100 эпителиоцитов.

Блокаду нуклеарного фактора kB и внутриклеточных митоген-активированных киназ ERK1/2 и p38 в нейтрофилах и эпителиоцитах проводили путем инкубации клеток с соответствующими ингибиторами (Заславская М.И., 2005; Заславская М.И., Маянский А.Н., 2007).

Моделирование орального кандидоза у крыс осуществляли по методу Samaranayake Y.H. et al. (2001).

Некогерентное импульсное излучение (НКИ) инфракрасного, видимого и ультрафиолетового диапазона получали с помощью генератора высокоэнергетических импульсов (ВНИИЭФ, г. Саров) (Спиров Г.М., и соавт., 2005). Напряженность электромагнитного поля между электродами достигала 100 кВ/м, ток в канале искрового разряда - 1 кА. Источник генерации искровых разрядов работал с заданным распределением импульсов во времени в режиме с частотой 1 Гц (1 имп/сек). Длительность каждого разряда составляла 5-20 мсек, энергия - 5Дж в одном разряде. Объекты помещали в зоне излучения на расстоянии 2,0-2,5 см от электродов генератора НКИ. В экспериментах in vitro (16 серий экспериментов) использовали суспензию кандид (5·10⁴ кл/мл) или эпителиоцитов в ЗФР. Толщина слоя клеточной суспензии при обработке НКИ составляла 2-3 мм. Жизнеспособность клеток после воздействия НКИ определяли по трипановому тесту, а также сравнивая количество КОЕ кандид, выросших при посеве из опытных и контрольных образцов. Для оценки эффекта НКИ in vivo были проведены испытания (5 серий исследований) на лабораторных крысах линии Wistar.

Подсчет лейкоцитарной формулы крови осуществляли по общепринятой методике (Меньшиков В.В.; 1987).

Уровень сиаловых кислот в суспензии клеток определяли с помощью набора реагентов «Сиалотест-100» (НПО Экосервис, С.-Петербург) согласно рекомедациям фирмы-производителя.

Уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) мембран клеток C. albicans эритроцитов и плазмы крови человека определяли методом хемилюминесценции (Кузьмина Е.И.,1983).

Статистическую обработку данных проводили по общепринятой методике (Реброва О.Ю., 2003). Рассчитывали среднюю арифметическую и ее стандартную ошибку (М ± m). Достоверность различий оценивали при помощи критериев Стьюдента (t) или Вилкоксона-Манна-Уитни. Различия расценивали как статистически значимые при р<0,05. Взаимосвязь параметров оценивалась методом корреляционного анализа, определяя коэффициент ранговой корреляции Спирмена (r_s). Результаты исследования обрабатывались с использованием прикладных программ EXEL и «STADIA 4..51».

Результаты исследования и их обсуждение

Нейтрофил-стимулирующая активность дрожжевой и мицелиальной форм Candida albicans

Сравнивали способность дрожжевой и мицелиальной форм C.albicans стимулировать продукцию нейтрофилами активных форм кислорода, цитокинов (ИЛ-8, ИЛ-6) и образование растворимых форм мембранных антигенов HLA-I класса.

Все тест-культуры C.albicans (штаммы №№ 258, 290, 852, 601) в дрожжевой фазе вызывали более сильную люминол-зависимую хемилюминесценцию (ХЛ) нейтрофилов по сравнению с мицелиальными элементами (табл.1).

Таблица 1. Показатели кандида-индуцированной ХЛ нейтрофилов в системах с дрожжевой и мицелиальной формами Candida albicans, M m

* - достоверные отличия относительно дрожжевой формы (p <0,05)

Так как уровень индуцированной ХЛ нейтрофилов коррелирует со способностью фагоцитов вступать в адгезивные реакции (Bellavite P. et. al., 1994), была исследована вовлеченность специфических и неспецифических адгезинов разных морфологических форм в стимуляцию кислород-зависимых реакций нейтрофилов. После термической обработки (70°С, 40 мин) дрожжевые элементы тест-культуры C.albicans штамм 601 значительно слабее, чем мицелиальные, индуцировали ХЛ нейтрофилов (0,6 0,2·10³ имп/мин против 9,6 3,2·10³ имп/мин; р<0,05). Это указывало на то, что C. albicans в дрожжевой фазе обладают более широким набором термолабильных адгезинов (предположительно, белковой природы), обеспечивающих контакт с нейтрофилами. После обработки кандид трипсином (1мг/мл, 1ч, 37°С; “Spopha”,Чехия) наблюдалось снижение нейтрофил-стимулирующей активности дрожжевой формы в 1,3 ± 0,1 раза (p <0,05); такая же обработка не влияла на стимулирующую активность псевдомицелия.

Формирование нейтрофилами псевдоподий после контакта с кандидами исследовали с помощью атомного силового микроскопа TopoMetrix SPMLab (США) в НИОЦ СЗМ (Н.Новгород). Было показано, что образование псевдоподий нейтрофилами наступало через 5 мин после контакта с C. albicans, и не зависело от морфологической формы кандид.

Ингибирование активности микротрубочек нейтрофилов колхицином (1мкг/мл, 30 мин, 37°С; “Sigma”, США) приводило к достоверному (p<0,05) снижению нейтрофил-стимулирующей активности C. albicans - в 1,71 0,03 для дрожжевой формы и в 1,44 0,04 раз для псевдомицелия. Подавление активности микрофиламентов цитохалазином В (1мкг/мл, 30 мин, 37°С; “Sigma”, США) не меняло реактивности нейтрофилов в системе с кандидами.

Сравнивали способность нейтрофилов активироваться опсонизированными дрожжевыми и гифальными элементами кандид. Дрожжевую или мицелиальную форму C. albicans штамм 601 обрабатывали цельной сывороткой, а также в режиме сорбции C3b/iC3b-компонента комплемента или молекул IgG (Заславская М.И., Маянский А.Н.,2006). После обработки цельной сывороткой или ее субкомпонентами (iC3b/C3b-, IgG-) мицелиальная и дрожжевая формы индуцировали сходную ХЛ нейтрофилов (p0,05).

Была исследована способность дрожжевых элементов и псевдомицелия C. albicans вызывать продукцию провоспалительных цитокинов ИЛ-8 и ИЛ-6 нейтрофилами in vitro (Заславская М.И., Маянский А.Н., 2006). Отмечен более высокий синтез ИЛ-8 и ИЛ-6 в системах с мицелиальной формой C. albicans штамм 601 (p<0,05) (табл.2).

Инактивация кандид (70^оС, 40 мин) не влияла на лидирующие позиции гифальных элементов по синтезу ИЛ-8, но нивелировала их различие в способности индуцировать ИЛ-6. Можно предположить, что более интенсивная продукция нейтрофилами провоспалительных цитокинов в присутствии псевдомицелия может служить дополнительным механизмом сдерживания инвазии и диссеминации кандид.

Таблица 2. Продукция нейтрофилами ИЛ-8, ИЛ-6 и sHLA- I в системах с дрожжевыми (ДФ) или мицелиальными (МФ) формами Candida albicans штамм 601, M m

Оценивали вклад альтернативного пути активации комплемента (АПАК) в опсонин-зависимые взаимодействия нейтрофилов с C.albicans. Использовали кандиды в дрожжевой фазе - нативные или опсонизированные в системе АПАК (Заславская М.И., и соавт., 2004). Для сравнения использовали зимозан (“Sigma”, CША), представляющий собой полисахарид клеточных стенок Saccharomyces cerevisiae, сходный с углеводными компонентами клеточных стенок кандид (Vazquez-Torres A., Balish E., 1997; Cannon R.D., Chaffin W.L.,1999) и известный как классический активатор АПАК (Pillemer L. et al., 1956). Зимозан использовали в концентрации, эквивалентной сухому весу C. albicans.

Нативные C. albicans сильнее стимулировали ХЛ нейтрофилов, чем зимозан (табл. 3). Для разных штаммов C.albicans показатели варьировали от 8,7 ± 1,4 ·10⁴ имп/мин (штамм 44₁) до 30,8 ± 4,1· 10⁴ имп/мин (штамм 67/846). Нейтрофил

стимулирующая активность C. kefyr и C. guillermondii была соответственно 11,3 ± 4,3 · 10⁴ имп/мин и 6,6 ± 3,0 · 10⁴ имп/мин. В системе с неопсонизированным зимозаном ХЛ нейтрофилов была самой слабой - 5,5 ± 0,7 · 10⁴ имп/мин.

Таблица 3. Опсоническая активность кандид и зимозана в системе АПАК, M m

* - достоверность различий относительно зимозана (р<0,05)

** - достоверность различий между живыми и убитыми кандидами (р<0,05)

После опсонизации в системе АПАК живые кандиды имели более низкую (р<0,05) нейтрофил-стимулирующей активность по сравнению с зимозаном, опсонизированным в том же режиме. Это не было связано с различием в поглощении C.albicans и зимозана нейтрофилами, разрушением опсонических молекул комплемента экзоферментами кандид или различной способностью исследуемых субстратов запускать АПАК (р0,05).

Опсонизация гретых (убитых) культур С. albicans, приводила к значительному усилению активности нейтрофилов (см. табл. 3). Это указывало на то, что термолабильные компоненты клеточной стенки кандид ответственны за низкую эффективность АПАК-зависимой опсонизации и могут блокировать сорбцию опсонических молекул на поверхности кандид или вызывать деградацию опсонинов системы комплемента.

Острая воспалительная реакция на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза, индуцированного Candida albicans

Процесс нарушения внутрисосудистого гомеостаза был смоделирован внутривенным введением белым беспородным крысам зимозана (10 мг/мл; “Sigma”, США) или живых C.albicans штамм 601 (5·10⁸ кл/мл) в 0,2 мл ЗФР (Заславская М.И., Маянский А.Н., 2004; 2006). Спустя 0,5-1-4-24 ч у крыс вызывали асептическое воспаление путем введения в брюшную полость 5 мл стерильного изотонического 10% раствора пептона. Через 4 часа после внутрибрюшинной инъекции (время максимального накопления нейтрофилов в экссудате) животных декапитировали, промывали брюшную полость 20 мл ЗФР, отбирали перитонеальное содержимое и оценивали гистологические показатели.

Обнаружен феномен, который был обозначен как «острая мобилизационная блокада» нейтрофилов. Он проявлялся в резком сокращении количества нейтрофилов, эмигрировавших в брюшную полость спустя 30-60 мин после внутривенного введения зимозана или C.albicans по сравнению с контролем (инъекция ЗФР) (р<0,05). Феномен не зависел от природы индуктора местного воспаления: он был также воспроизведен при введении в брюшную полость лиофилизированных клеточных стенок Staphylococcus aureus, штамм ССМ 885 (5мг/мл) в 5 мл ЗФР (р<0,05).

Для проверки системности реакции была изучена миграционная активность нейтрофилов на модели острой воспалительной реакции, в подушечках лап у крыс. В качестве раздражителя использовали агрегированный (63°С, 30мин) иммуноглобулин человека. Наблюдали снижение интенсивности острой интраплантарной воспалительной реакции в 1,5 раза в на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови (р>0,05).

Феномен «мобилизационной блокады» нейтрофилов не было связан с сокращением внутрисосудитстого пула циркулирующих нейтрофилов (р0,05). Кроме того, нейтрофилы сохраняли способность прикрепляться к объектам, несущим специфические (C3b/iС3b-, IgG-) и неспецифические лиганды, а также способность к спонтанной миграции in vitro (р0,05).

Изучено функциональное состояние очага острого воспаления на фоне нарушения внутрисосудистого гомеостаза, индуцированного C.albicans. Сокращение притока нейтрофилов в очаг воспаления не сопровождалось изменением общего уровня спонтанной и латекс-индуцированной ХЛ (иХЛ) перитонеального экссудата. В то же время спонтанная ХЛ (сХЛ) отдельных нейтрофилов в экссудате резко усиливалась: 11,1 ± 4,9 ·10³ имп/мин у экспериментальных крыс и 2,9 ± 0,1 ·10³ имп/мин в контрольной группе животных (р<0,05). Уровень удельной иХЛ эксудативных нейтрофилов также повышался и составлял 36,9 ± 13,2 ·10³ имп/мин в контроле и 151,9 ± 69,8 ·10³ имп/мин в опыте (р<0,05). Повышение иХЛ отдельных фагоцитов говорило о том, что внутрисосудистая циркуляция кандид оказывает стимулирующий эффект на нейтрофилы, усиливая их реактивность (кислород-зависимую биоцидность).

Адгезивные реакции в системе «Candida albicans - эпителиоциты»

На предварительном этапе была разработана экспериментальная тест-система для изучения адгезии C. albicans на эителиоцитах. Эксперименты показали отсутствие достоверных различий адгезивных реакций с буккальными эпителиоцитами человека между музейными культурами C. albicans и штаммами, выделенными из разных источников (язык, кишечник, влагалище). Для проведения дальнейших исследований был выбран штамм C. albicans 601, который отличался средними, но наиболее постоянными показателями адгезии (рис.2). Была определена оптимальная экспозиция кандид с эпителиоцитами (37°С, 30 мин), при которой результаты эксперимента не зависели от жизнеспособности C. albicans, не давали ко-адгезии кандид и обеспечивали прочность связывания по фиколл-верографиновому тесту 60,8 ± 9,0%.

Значение метаболической активности клеток для реализации адгезии в системе «Candida albicans-буккальные эпителиоциты». Опыты проводили с подавлением метаболизма буккальных клеток (4°С), блокадой гликолиза (фторид натрия; 200мМ, 15 мин, 37°С), ингибированием синтеза белка (циклогексимид, “Sigma”,США; 16 мкг/мл, 30 мин, 37°С), при выключении реакций цитоскелета (микротрубочек или микрофиламентов) колхицином и цитохалазином В (“Sigma”,США; 1 мг/мл, 30 мин, 37°С). Эсперименты выявили снижение адгезивности эпителиоцитов на холоду, при торможении гликолиза, подавлении синтеза белка и реакций цитоскелета, что говорило об активной роли эпителиальных клеток при взаимодействии с кандидами (табл.4).

Таблица 4. Уровень адгезии C.albicans штамм 601кандид на эпителиоцитах при различных вариантах метаболической активности клеток, М ± m

* - достоверность различий относительно контроля (интактные эпителиоциты) (р<0,05)

** - достоверность различий относительно эксперимента с живыми кандидами (р<0,05)

Установлено, что адгезия кандид на буккальных клетках складывается из двух механизмов. Один из них не зависит от уровня метаболической и цитоскелетной активности эпителиоцитов. Взаимодействие между эпителиальными клетками и кандидами, в этом случае носящее пассивный характер, не связано с рецепторами кандид, а определяется неспецифическим механизмами, такими как: гидрофобные, вандерваальсовы и электростатические взаимодействия. Второй механизм является результатом взаимодействия метаболически активных клеток и лучше всего проявляется в физиологичных условиях (37°С).

Эксперименты позволили установить, что блокада цитоскелета эпителиоцитов не меняла уровень адгезии убитых кандид на буккальных клетках, но, в то же время, вызывала существенное снижение адгезии живых кандид в системе (см. табл.4). Это позволило думать о том, что сам процесс закрепления живых кандид способен усиливать адгезивность эпителиоцитов через изменение реактивности элементов цитоскелета буккальных клеток.

Значение метаболической активности кандид для реализации адгезии в системе «Candida albicans-буккальные эпителиоциты». Исследовали значение метаболической активности самих кандид для реализации их адгезии на эпителиоцитах. В отличие от клеток человека, адгезивная активность кандид снижалась только при ингибировании синтеза белка. В этом случае предварительная обработка живых кандид циклогексимидом уменьшала показатель адгезии почти наполовину (42,1 5,2% от уровня эксперимента с нативными кандидами). Это указывало на то, что адгезивные реакции C.albicans могут определяться как механизмами, не зависящими от метаболизма клеток, так и связанными с белок-синтезирующей активностью самих кандид.

Влияние факторов слюны на адгезивные реакции в системе «Candida albicans-буккальные эпителиоциты». Цельная слюна вызывала снижение адгезии кандид на буккальных клетках в 2,8 раза (р<0,05) (табл.5). Это показывало, что адгезия кандид включает два компонента, один из которых блокируется слюной, а другой не подвержен ее влиянию.