Размещено на http://www.allbest.ru/

Федеральное агентство по рыболовству федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

"Мурманский государственный технический университет"

Кафедра микробиологии и биохимии

Контрольная работа

на тему: Биохимический анализ мочи

Мурманск 2016

Введение

Моча - самый доступный биологический материал. Анализ мочи является обязательным не только при различных заболеваниях, но и при диспансеризации и профилактических осмотрах. Какую же информацию дает врачу эта биологическая жидкость организма?

Анализ мочи - один из древнейших способов выявления объективных признаков болезни. Первые письменные свидетельства об исследовании мочи содержатся в древнеиндийском медицинском трактате "Аюрведа" (Х-VI вв. до н.э.).

В эпоху Возрождения в медицинской практике было уже обязательным анализировать у всех пациентов количество мочи и такие ее свойства, как цвет, запах, вкус. С середины XIX в., когда появились первые медицинские лаборатории, для исследования мочи стали применять различные химические методы.

Наиболее распространенным и наиболее часто проводящемся исследованием мочи является клинический анализ мочи. Он предусматривает исследование цвета, прозрачности, удельного веса, показателя кислотности, а также присутствия в моче ряда веществ - белка, желчных пигментов, глюкозы, кетоновых тел, гемоглобина, неорганических веществ и форменных элементов крови - эритроцитов, лейкоцитов, также клеток, выстилающих мочевые пути (эпителиальные клетки или их остатки - цилиндры).

Существует также и биохимическое исследование мочи, при котором определяют уровень таких веществ как мочевина, креатинин, креатин, мочевая кислота, аминокислоты, а также ферментов - амилазы, лактатдегидрогеназы.

Моча является вторым по значимости биоматериалом для клинических лабораторных исследований после венозной крови.

Анализируя состав и свойства мочи в динамике, можно получить информацию о состоянии различных органов и систем пациента, оценить степень тяжести заболевания, а также сделать заключение об эффективности проводимого лечения.

Анализы мочи являются незаменимым методом исследования при диагностике большинства патологий МВС. Также они могут помочь в уточнении диагноза и при многих других заболеваниях.

Общие сведения

Моча - биологическая жидкость, в составе которой из организма выводятся продукты обмена веществ.

Моча - это биологическая жидкость, которая непрерывно образуется в почках в результате сложных взаимосвязанных процессов фильтрации жидкой части крови в клубочках и реабсорбции необходимых для организма веществ в канальцах. В процессе образования мочи через почки проходит около четверти крови от минутного объема сердечного выброса.

Мочеобразование - это процесс, посредством которого из организма животных выводятся многие конечные продукты обмена и распада веществ, излишки жидкости и соли, а также гормоны, ферменты, витамины и другие биологически активные вещества. Кроме того, большинство лекарственных средств, используемых для лечения, либо метеболизируются в почках, либо выводятся из организма в составе мочи.

Исследование мочи

Условно все анализы мочи можно подразделить на 2 группы:

· специфические;

· неспецифические.

Специфические исследования мочи

В данную группу можно отнести следующие анализы мочи:

· общий (клинический);

· по Нечипоренко;

· по Зимницкому;

· на глюкозу;

· на белок;

· пробу Реберга;

· на мочевую кислоту;

· на определение уровня ХГЧ;

· пробу по Сулковичу;

· бактериологический посев.

Неспецифические исследования мочи

Если говорить о том, какие бывают неспецифические исследования мочи, то в нашей стране применяются всего два метода:

· иммунохроматографический;

· химико-токсикологический.

Результат исследования в значительной степени зависит от того, как и в каком виде собран и доставлен в лабораторию исследуемый материал.

Для обычного общеклинического метода достаточно собрать первую утреннюю порцию мочи в количестве 100-200 мл. В мочу, предназначенную для клинического исследования, не следует прибавлять консервирующие вещества.

Для бактериологического исследования мочу собирают в стерильную посуду, обмыв предварительно наружные половые органы.

Общеклиническое исследование мочи

Цвет

Цвет мочи зависит от наличия и количества в ней окрашенных веществ (пигментов). Обычно моча здорового человека имеет цвет от соломенно-желтого до насыщенно желтого и окраска мочи обусловлена на 90% урохромом, придающим моче янтарный цвет, а также другими пигментами (розово-красного цвета) - уроэритрин, урозерин, уропорфирины и др.

При стоянии на воздухе моча обычно темнеет, в результате окисления стеркобилиногена.

Интенсивность окраски зависит от плотности мочи и величины суточного диуреза. При полиурии и низкой плотности моча почти бесцветна - это явление называется ахромурия. При олигурии и повышенной плотности она приобретает интенсивно желтый цвет -гиперхромурия.

Необычно темный цвет (насыщенно желтый, коричневый) мочи зависит от присутствия в ней желчных пигментов - билирубина, что наблюдается при печеночно-клеточных и обтурационных желтухах.

Цвет мочи в норме и при патологии

Свежевыпущенная моча имеет нерезкий специфический запах. При стоянии на воздухе запах становится аммиачным вследствие наступившего щелочного брожения. моча креатинин фермент

Аммиачный запах при мочеиспускании может быть при тяжелых циститах, распадающихся опухолях.

Гнилостный запах свидетельствует о процессах гниения или гангренозном процессе в мочевом пузыре.

Каловый запах может указывать на наличие пузырно-ректального свища.

Фруктовый запах наблюдается при кетозе (голодание, сахарный диабет), зависит от присутствия в моче ацетоновых тел (ацетона, ацетоацетата, в-оксибутирата).

Зловонный запах моча приобретает после приема с пищей больших количеств чеснока, хрена, спаржи.

Количество

Суточный диурез колеблется в пределах 60-80 % выпитой жидкости, что соответствует 1,5-2 литра, при обычном питании.

- Полиурия - увеличение суточного диуреза.

- Олигурия - уменьшение суточного диуреза.

- Анурия - отсутствие мочи в течение суток.

Патологическое состояние: острая почечная недостаточность, тяжелые нефриты, менингиты, отравления, закупорка мочевыводящих путей камнем, опухолью, спазм мочевыводящих путей.

- Поллакиурия - частое мочеиспускание.

- Олакизурия - редкое мочеиспускание.

- Дизурия - болезненное мочеиспускание.

- Никтурия - превышение ночного диуреза над дневным.

- Энурез - недержание мочи.

Относительная плотность мочи

Относительная плотность мочи - отражает общую концентрацию растворенных в ней веществ (прежде всего мочевины). У взрослого человека в течение суток этот показатель колеблется в пределах от 1,015 до 1,025 г/см 3.

Наибольшее влияние на плотность мочи оказывают растворенные в ней вещества: мочевина, глюкоза и др.

Прозрачность мочи

В норме свежевыпущенная моча прозрачна. По степени мутности различают мочу мутноватую, мутную, молочно-мутную. При стоянии моча мутнеет за счет выпадения в осадок уратов или фосфатов. Прозрачность мочи нарушается от присутствия в ней большого количества солей, клеточных элементов, бактерий, слизи и капель жира, белка, крови, гноя.

Реакция мочи

рН-мочи колеблется в пределах от 4,5-8,0 и в норме при смешанном питании равна 5,5-6,5 (слабокислая среда). Реакция мочи зависит от характера пищи: при преобладании в пище животных белков с мочой в больших количествах выделяются соли серной и фосфорной кислот; моча закисляется (рН 4,5-5,5).

Итак, рН мочи характеризует выделение почками ионов водорода. Длительный сдвиг реакции мочи в сторону кислой или щелочной среды является неблагоприятным фактором.

При постоянно кислой реакции выпадают в осадок ураты, мочевая кислота, что может привести к образованию уратных и мочекислых камней. При постоянной щелочной реакции могут образоваться фосфатные камни.

Резко кислая реакция мочи встречается при декомпенсированном сахарном диабете (при наличии ацетоновых тел), лихорадочном состоянии, голодании.

Щелочная реакция мочи характерна для циститов и пиелитов, сильной рвоты, введения бикарбоната натрия и употребления больших количеств щелочных минеральных вод.

Химический состав мочи.

В течение суток с мочой из организма выделяются около 60 г веществ: 35-45 г органических и 15-25 г минеральных.

Химические компоненты мочи представлены веществами как органической, так и минеральной природы. К первым относятся мочевина, креатинин, пептиды, аминокислоты, мочевая кислота, гиппуровая кислота, органические сульфаты. Ко вторым - ионы Na+, K+, Ca2+, Mg2+, NH4+, Cl-, HCO3-, H2PO4-, PO43-, HPO42-, неорганические сульфаты.

Сведения о выделении этих веществ с мочой здорового взрослого человека приведены в таблице.

Средний состав суточной мочи здорового человека

N, S - содержание вещества в моче в расчете на азот, серу соответственно.

Органические составные части мочи

1. Мочевина-главный органический азотсодержащий компонент мочи. На долю мочевины приходится 80-90% азотосодержащих конечных продуктов обмена, выводимых с мочой. В среднем за сутки из организма взрослого человека выводится около 20-35г мочевины или 333-583 ммоль/сутки, что в пересчете на азот составляет 6-18г.

2. Мочевая кислота - конечный продукт катаболизма пуриновых нуклеотидов. За сутки у здорового человека с мочой выделяется около 0,3-0,6 г мочевой кислоты или 1,6-3,54 ммоль/сут.

3. Креатинин - также является конечным продуктом азотистого обмена. Образуется в мышечной ткани из креатина. Креатинин попадает в мочу преимущественно путем клубочковой фильтрации и в небольшом количестве за счет активной канальцевой секреции. Суточное выделение креатинина индивидуально и постоянно для каждого человека, отражая преимущественно объем мышечной массы организма и составляя в среднем 4,4-17,7 ммоль/сут. (0,5-2г/сут

4. Общий азот- сумма всех азотосодержащих компонентов мочи, в норме составляет 10-16г/сут.

Патологические компоненты мочи

1. Глюкоза - присутствует в моче здоровых людей в следовых количествах (в норме 0,06 - 0,083 ммоль/л), не определяемых обычными лабораторными методами. Глюкоза практически полностью реабсорбируется из ультрафильтрата и относится к пороговым веществам. При увеличении ее содержания в крови свыше 8,8 ммоль/л - тубулярный максимум, глюкоза начинает выделяться с мочой вследствие неполной реабсорбции. Появление глюкозы в моче - глюкозурия, может быть обусловлена различными причинами.

Определение глюкозы в моче:

В норме глюкозы в моче нет (точнее сказать, в моче есть её следы, которые обычными рутинными методами не определяются, поэтому, чтоб не путать врачей-клиницистов, в бланке анализа пишут "глюкоза не обнаружена").

Качественные реакции на глюкозу в моче:

1. Проба Гайнеса. Учёт результата: переход голубого цвета растора в желтый, затем в красный говорит о наличии глюкозы.

2. Проба Ниландера. Учёт результата: появление коричневого осадка говорит о наличии глюкозы.

3. Экспресс-метод (глюкозооксидазная проба). Используется "Глюкотест"- это специальная индикаторная полоска, пропитанная раствором ферментов. Изменение цвета полоски, после взаимодействия её с мочой, говорит о присутствии глюкозы.

Количественное определение глюкозы в моче:

1. Поляриметрический метод. Он основан на свойстве глюкозы вращать плоскость поляризованного света: определяют угол отклонения луча, а по нему уже определяют содержание глюкозы. Сейчас этот метод используется редко.

2. Колориметрический метод. Основан на появлении цветной реакции: глюкозу нагревают со щелочью, после кипячения цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой Альтгаузена, в ней каждый оттенок соответствует определённому уровню содержания глюкозы.

3. Экспресс-метод тест полосками Глюкотест, Глюкофан и др. Изменение цвета на полоске сравнивают со стандартной шкалой, и выражают содержание глюкозы в ммоль/л.

2. Белок (протеинурия, альбуминурия). У здоровых людей моча практически не содержит белка. Небольшое количество низкомолекулярных плазменных белков, которые проникают через неповрежденный почечный фильтр и полностью не реабсорбируются в канальцах (около 5-8 мг/л), не обнаруживается качественными пробами.

3. Кетоновые тела(кетонурия). Наличие в моче кетоновых тел: ацетона, ацетоацетата, в-оксибутирата. Кетоновые тела образуются у здоровых людей в печени из ацетил-СоА при усиленном использовании в качестве энергетического материала высших жирных кислот или из кетогенных аминокислот. У здоровых людей выведение кетоновых тел с мочой не превышает 20 - 50 мг в сутки и в моче они общепринятыми методами не определяются.

4. Креатин в моче у здоровых взрослых людей практически отсутствует. Выделение креатина - креатинурия у взрослых людей наблюдается при беременности, в раннем послеродовом периоде, при голодании, сахарном диабете, гипертиреозе, лихорадке, при состояниях, сопровождающихся атрофией мышц, миопатией и прогрессирующей мышечной дистрофией, инфекционных заболеваниях, переломах костей, красной волчанке, ожогах, недостатке витамина Е.

5. Желчные пигменты(билирубинурия).В норме билирубин в моче отсутствует. При печеночно-клеточной и обтурационной желтухах, как следствие повышения прямого билирубина в крови, он фильтруется в мочу, моча окрашивается в темный цвет (цвет пива), коричневый или зеленый.

6. Кровь (гематурия и гемоглобинурия).У здорового человека при микроскопии осадка мочи встречаются единичные эритроциты в поле зрения.

7. Индолу здорового взрослого человека в моче отсутствует, положительная индолурия наблюдается при нарушении обезвреживающей функции печени.

8. Индикан в норме выделяется с мочой в небольших количествах, которые не определяются обычными лабораторными методами. Положительная индиканурия наблюдается при усиленном гниении белков в толстом кишечнике (запоры, большое поступление белка с пищей, рак прямой кишки).

Методы определения белка в моче

1. Унифицированный метод Брандберга--Робертса--Стольникова:

В основу метода положена кольцевая проба Геллера, заключающаяся в том, что на границе азотной кислоты и мочи при наличии белка происходит его коагуляция и появляется белое кольцо.

Необходимый реактив: 30%-ный раствор азотной кислоты (относительная плотность 1,2) или реактив Ларионовой. Приготовление реактива Ларионовой: 20--30 г хлорида натрия растворяют при нагревании в 100 мл дистиллированной воды, дают остыть, фильтруют. К 99 мл фильтрата приливают 1 мл концентрированной азотной кислоты.

2. Количественное определение белка в моче по помутнению, образующемуся при добавлении сульфосалициловой кислоты:

Принцип метода: интенсивность помутнения при коагуляции белка сульфосалициловой кислотой пропорциональна его концентрации.

Необходимые реактивы:1. 3%-ный раствор сульфосалициловой кислоты.2.0,9%-ныйрастворхлориданатрия.3. Стандартный раствор альбумина - 1%-ный раствор (1 мл раствора, содержащий 10 мг альбумина): 1 г лиофилизированного альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9%-ного раствора хлорида натрия в колбе вместимостью 100 мл, а затем доводят до метки тем же раствором. Реактив стабилизируют прибавлением 1 мл 5%-ного раствора азида натрия (NaN3). При хранении в холодильнике реактив годен в течение 2месяцев. Специальное оборудование - фотоэлектроколориметр.

3. Обнаружение в моче белка Бенс-Джонса:

Белок Бенс-Джонса может выделяться с мочой при миеломной болезни, макроглобулинемии Вальденстрема.

Принцип: основан на реакции термопреципитации. Методы, с помощью которых оценивают растворение белка Бенс-Джонса при температуре 100 °С или повторное осаждение при последующем охлаждении, ненадежны, так как далеко не все белковые тела Бенс-Джонса обладают соответствующими свойствами. Наиболее достоверно выявление этого парапротеина осаждением его при температуре 40--60 °С, но и в этих условиях осаждение может не произойти в слишком кислой (рН < 3,0--3,5) или слишком щелочной (pH > 6,5) моче, при низкой относительной плотности мочи и при низкой концентрации белка Бенс-Джонса.

Необходимый реактивы:2 М ацетатный буфер рН 4,9.

Список литературы

1. О.В. Новоселова, М.Б. Пятигорская, Ю.Е. Михайлов, "Клинические аспекты выявления и оценки протеинурии", Справочник заведующего КДЛ, № 1, январь 2007 г.

2. А.В. Козлов, "Протеинурия: методы ее выявления", лекция, Санкт-Петербург, СПбМАПО, 2000 г.

3. В.Л. Эмануэль, "Лабораторная диагностика заболеваний почек. Мочевой синдром", - Справочник заведующего КДЛ, № 12, декабрь 2006 г.

4. В.И. Пупкова, Л.М. Прасолова - Определение белка в моче и спинномозговой жидкости. Кольцово, 2007 г.

5. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е.А. Кост. Москва, "Медицина", 1975 г.

Размещено на Allbest.ru