Пробиотические свойства лактобактерий выделенных из шубата и верблюжьего молока
Исследование морфо-биохимических, культуральных и антагонистических свойств перспективных штаммов молочнокислых бактерий, выделенных из верблюжьего молока и шубата. Значение физиологических свойств микроорганизмов при создании пробиотических препаратов.
Рубрика | Биология и естествознание |
Вид | статья |
Язык | русский |
Дата добавления | 25.05.2018 |
Размер файла | 77,3 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.Allbest.ru/
Казахский национальный аграрный университет
Пробиотические свойства лактобактерий выделенных из шубата и верблюжьего молока
Ниязбекова Ж.Н., Хусаинов Д.М.,
Ахметсадыков Н.Н., Батанова Ж.М.,
Джанабекова Г.К., Шамеева У.Г.
г. Алматы
Аннотация
В работе проведено исследование морфо-биохимических, культуральных и антагонистических свойств перспективных штаммов молочнокислых микроорганизмов, выделенных из верблюжьего молока и шубата.
Изучены морфологические, физиологические, культуральные и антагонистические свойства микроорганизмов, выделенных из верблюжьего молока и шубата. Установлено, что наибольшей антагонистической активностью по отношению к St. aureus обладает штамм Lactacoccus lactis (17,3 ± 0,62), низкая чувствительность наблюдалась у данного представителя патогенной микрофлоры к Pseud. аeruginosa (14,2 ± 0,44), наиболее активными антагонистами Bacillus cereus оказались штаммы Leuconostoc mesenteroides (17,7 ± 0,65).
Ключевые слова: молочнокислые бактерий, пробиотики, антагонизм, пробиотические свойства
Njazbekova Zh.N., Akhmetsadykov N.N., Khusainov D.M., Batanova Zh.M., Dzhanabekova G.K., U.G. Shameyeva. Probiotic properties of lactic acid bacteria isolated from camel milk and shubat
Tо studied morphological, physiological, cultural and antagonistic properties of microorganisms isolated from camel milk and shubat.
It has been established that the greatest antagonistic activity again St. aureus strain has Lactacoccus lactis (17,3 ± 0,62), low sensitivity observed in this representative of pathogenic microflora to pseud. aeruginosa (14,2 ± 0,44), the most active antagonists were Bacillus cereus strains Leuconostoc mesenteroides (17,7 ± 0,65).
Введение
В последнее время возрос интерес к изучению молочнокислых бактерий, производству новых кисломолочных продуктов, а также к поиску новых штаммов молочнокислых бактерий, пригодных для использования в составе заквасок.
С этой целью молочнокислые бактерии выделяют из различных источников, чаще из самоквасных кисломолочных продуктов. Далее можно проводить направленный отбор микроорганизмов, обладающих нужным комплексом биотехнологических свойств.
Впервые внимание исследователей к использованию антагонистических свойств молочнокислых бактерий в борьбе с гнилостной микрофлорой кишечного тракта привлек И.И. Мечников. С этой целью он рекомендовал систематическое употребление в пищу простокваши, приготовленной на штаммах болгарской палочки. В настоящее время кисломолочную продукцию вырабатывают предприятия молочной отрасли [1].
Кроме того, кисломолочные продукты широко применяют для профилактики и лечения многих заболеваний, особенно желудочно-кишечного тракта, малокровии, истощении организма, так как микроорганизмы, содержащиеся в них, вырабатывают антибиотикоподобные вещества и витамины [2].
Воздействуя на секреторную деятельность желудка и кишечника, молочнокислые продукты способствует выделению ферментов железами пищеварительного тракта, ускоряя переваривание пищи, приэтом сами кисломолочные продукты содержат уже частично распавшиеся белки на аминокислоты [3].
Молочнокислые продукты широко используются и в животноводстве, в частности для профилактики и лечения диспепсии и диареи различной этиологии. Таким образом, молочнокислые микроорганизмы являются активными антагонистами но отношению к представителям патогенной и условно - патогенной микрофлоры - возбудителям кишечных инфекций, улучшают пищеварение и обменные процессы, стимулируют иммунный ответ организма. Их использование в рационах кормления животных существенно повышает приросты живой массы молодняка, а также снижает случаи заболевания желудочно-кишечными инфекциями.
Материалы и методы исследований
В экспериментах использовались 6 штамма молочнокислых бактерий Lactacoccus lactis, Leuconostoc mesenteroides, Lactacoccus lactis subsp Lactis, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus sakei, Lactobacillus casei, выделенных из верблюжьего молока и шубата, хранящихся в музее микроорганизмов (НПП «Антиген»).
При определении морфологических свойств молочнокислых бактерий нами были изучены следующие показатели -- форма и расположение клеток, их подвижность, размеры, наличие спор, отношение в окраске по Граму. Изучение культуральных или макроморфологических свойств отобранных штаммов молочнокислых микроорганизмов проводили на плотной питательной среде - агаре MRS
Культуральные признаки микроорганизмов опрелеляли характером их роста на питательных средах. Они являются важными диагностическими признаками так как постоянны для каждого вида бактерий. В ходе изучения культуральных свойств определяли диаметр колонии н миллиметрах, описывали их форму; характер контура края; поверхность; рельеф; цвет; структуру и консистенция.
Изучение антагонистической активности молочнокислых бактерий Lactacoccus lactis, Leuconostoc mesenteroides, Lactacoccus lactis subsp Lactis, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus sakei, Lactobacillus casei, выделенных из верблюжьего молока проводили с использованием 7 условно-патогенных тест-штаммов Listeria inocula, Eshirichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa (коллекция культур института Пастера, Франция)
Антагонистическую активность местных штаммов лактобактерий изучали методом диффузии в агар. С этой целью на поверхности агаризованной питательной среды в чашках Петри сплошным тоном производили посев условно-патогенных бактерий, затем пробочным сверлом вырезается лунка диаметром 5-7 мм и в нее помещали 0,2 см3 жидкой среды с выросшей культурой исследуемого штамма лактобактерий. Чашку выдерживали в холодильнике для диффузии ингибиторных веществ из лунки в толщу агара, далее - в термостате для роста тест-штамма, после чего измеряли зону ингибирования тест-штамма вокруг лунки.
физиологический молочнокислый микроорганизм пробиотический
Результаты и обсуждение
Результаты исследований по определению морфологических свойств отобранных штаммов молочнокислых микроорганизмов представлены в таблице 1.
Таблица 1
Морфологические свойства изучаемых штаммов бактерий
Изучаемые штаммы |
Форма, расположение, споры клеток |
Окраска по Грамму |
подвижность |
|
Lactacoccus lactis |
Клетки шаровидной формы, соединяются в пары или в цепочках, без спор |
+ |
- |
|
Leuconostoc mesenteroides |
Мелкие кокки, диплококк и в цепочках, без спор |
+ |
- |
|
Lactacoccus lactis subsp lactis |
Сфера образные кокки, диплококки, без спор |
+ |
- |
|
Lactobacillus fermentum |
Клетки палочкавидной формы, отдельные и в цепочках, без спор |
+ |
- |
|
Lactobacillus sakei |
Короткие цепочки палочек с прямоугольными концами, без спор |
+ |
- |
|
Lactobacillus casei |
Разновидные палочки, без спор |
+ |
- |
По данным микроскопии из отобранных штаммов микроорганизмов 3 культуры (Lactacoccus lactis, Leuconostoc mesenteroides, Lactacoccus lactis subsp lactis) имеют шарообразную форму клеток, остальные 3 штамма (Lactobacillus fermentum, Lactobacillus sakei, Lactobacillus casei) относятся к палочковидным бактериям.
Все испытуемые микроорганизмы грамположительные, неподвижные, наличие спор ни у одного из исследуемых штаммов лактобактерий обнаружено не было.
Определение размеров клеток испытуемых культур микроорганизмов проводили с использованием окулярной липейки по общеприятной методике. Полученные результаты на определению размеров клеток изучаемых штаммов лактобактерий представлены в таблице 2.
Таблица 2
Результаты определения размеров клеток
Изучаемые штаммы |
Число измеряемых клеток |
Размер клеток, мкм |
|
Lactacoccus lactis |
10 |
0,8±0,02Ч4,0±0,02 |
|
Leuconostoc mesenteroides |
10 |
1,0±0,02 |
|
Lactacoccus lactis subsp lactis |
10 |
0,9±0,03Ч3,0±0,03 |
|
Lactobacillus fermentum |
10 |
0,5±1,0Ч2,0±8,0. |
|
Lactobacillus sakei |
10 |
1,1±0,03Ч3,2±0,02 |
|
Lactobacillus casei |
10 |
0,6±0,02Ч2,7±0,02 |
Из анализа данных, приведенных в таблице 2, следует, что диамерт клеток кокков колеблется от 0,8 до 1,0 мкм, а размеры палочек колебались в пределах 0,6-1,1 x 2,7-6,0 мкм.
Полученные результаты при изучении культуральных свойств отобранных штаммов микроорганизмов приведены в таблице 3.
Таблица 3
Характеристика колоний штаммов изучаемых микроорганизмов
№ штамма |
Характеристика колоний |
||||||||
размер |
форма |
характер контура края |
рельеф |
поверх-ность |
цвет |
Структура |
консистенция |
||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
|
Lactacoccus lactis |
1 мм |
Круглая, точечная |
ровный |
плоский |
гладкая, блестящая |
белый |
однородная |
жидкий |
|
Leuconostoc mesenteroides |
2 мм |
Круглая, зернистая |
ровный |
плоский |
гладкая, мутная |
бесцветный |
однородная |
пастообразная |
|
Lactacoccus lactis subsp lactis |
1 мм |
Круглая, точечная |
ровный |
плоский |
гладкая, блестящая |
белый |
однородная |
пастообразная |
|
Lactobacillus fermentum |
1-2 мм |
Круглая, точечная |
ровный |
плоский |
гладкая, блестящая |
сороватый |
однородная |
жидкий |
|
Lactobacillus sakei |
1 мм |
Круглая, точечная |
ровный |
выпуклый |
гладкая, блестящая |
сероватый |
однородная |
мазеобразная |
|
Lactobacillus casei |
1 мм |
Круглая, точечная |
ровный |
плоский |
гладкая, блестящая |
белый |
однородная |
пастообразная |
Данные таблицы 3 свидетельствуют о том что размер колонии молочнокислых бактерий форма круглая, характер контура края - ровный, выпуклый -- Lactobacillus sakei, поверхность - гладкая; блестящая; цвет- белый у штаммов - Lactacoccus lactis, Lactacoccus lactis subsp lactis, Lactobacillus casei; сероватый отмечен у штаммов- Lactobacillus fermentum, Lactobacillus sakei и бесцветный у штамма - Leuconostoc mesenteroides; структура однородная, .зa исключением штамма Leuconostoc mesenteroides - зернистая; консистенция пастообразная у штаммов - Leuconostoc mesenteroides, Lactacoccus lactis subsp lactis, Lactobacillus casei, мазеобразная у Lactobacillus sakei.
Результаты исследования физиолого-биохимических свойств культур изучаемых штаммов бактерий приведены в таблице 4.
Таблица 4
Физиолого-биохимических свойств культур изучаемых штаммов бактерий
Изучемые штаммы |
Рост в питательной среде, % |
|||||||
Желчь |
NaCl |
Фенол |
||||||
20 |
30 |
40 |
2 |
4 |
6 |
0,2 |
||
Lactacoccus lactis |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
Leuconostoc mesenteroides |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
Lactacoccus lactis subsp lactis |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
Lactobacillus fermentum |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+- |
+ |
|
Lactobacillus sakei |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+- |
+ |
|
Lactobacillus casei |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
При концентрации желчи в гидролизованном молоке 20, 30, 40% отмечен положительный результат у всех изучаемых штаммов.
При содержании о молоке 0,2% фенола растут все исследуемые штаммы.
Физиологические свойств молочнокислых бактериий имеют большое значение при создании пробиотических препаратов
Результаты исследования антагонистической активности испытуемых культур местных штаммов лактобактерий приведены в таблице 5 и диаграмме 1.
Таблица 5
Антагонистическая активность штаммов молочнокислых бактерий
Изучемые штаммы |
Зона - стерильности, мм |
|||||||
Listeria inocula |
Eshirichia coli |
Bacillus subtilis |
Bacillus cereus |
St. aureus |
Salmonella typhimurium |
Pseud. aeruginosa |
||
Lactacoccus lactis |
16,5±0,54 |
14,4±0,46 |
16,7±0,58 |
14,8±0,48 |
17,3±0,62 |
15,4±0,52 |
14,2±0,44 |
|
Leuconostoc mesenteroides |
13,9±0,40 |
14,7±0,47 |
12,8±0,38 |
17,7±0,65 |
14,5±0,45 |
15,9±0,53 |
13,9±0,40 |
|
Lactacoccus lactis subsp lactis |
12,9±0,39 |
15,8±0,54 |
18,4±0,72 |
13,9±0,40 |
10,3±0,28 |
14,8±0,48 |
13,5±0,39 |
|
Lactobacillus fermentum |
16,7±0,58 |
16,5±0,54 |
17,7±0,57 |
15,8±0,48 |
14,9±0,47 |
16,9±0,56 |
17,3±0,62 |
|
Lactobacillus sakei |
17,3±0,62 |
18,5±0,73 |
14,8±0,48 |
16,8±0,59 |
12,8±0,38 |
16,5±0,54 |
13,9±0,40 |
|
Lactobacillus casei |
12,8±0,38 |
14,5±0,45 |
12,9±0,39 |
14,4±0,46 |
15,8±0,54 |
18,4±0,72 |
13,7±0,39 |
Диаграмма 1. Антагонистическая активнось штаммов молочнокислых бактерий
По анализу данных таблицы 5 и диаграммы 1 можно сделать заключение о том, что антагонистическая активность местных штаммов молочнокислых бактерий по отнашению к патогенным и условно- патогенным микроорганизмам достаточно высокая.
Наибольшей антагонистической активностью по отношению к St. aureus обладает штамм Lactacoccus lactis, с зоной стерильности (17,3±0,62), Полюс низкая чувствительность наблюдалась у данного представителя патогенной микрофлоры к Pseud. аeruginosa (14,2±0,44). Наиболее активными антагонистами Bacillus cereus оказались штаммы Leuconostoc mesenteroides (17,7±0,65)
Список использованных источников
1. Иркитова А.Н., Каган Я.Р., Сергеева И.Я. Свойства, экологические аспекты и практическое значение ацидофильной палочки. Антагонистическая активность. / Сб. науч. тр. СибНИИС СО РАСХН, в.8, «Актуальные проблемы техники и технологии переработки молока», Барнаул, 2011, С. 216-222..
2. Г.Н. Крусь, А.М. Шалыгина, Э.В. Волокитина. - М.: Колос. Методы исследования молока и молочных продуктов: учебник для вузов по спец. "Технология молока и молочных продуктов" / 2002. - 367 с. - (Учебники и учебные пособия для студентов вузов). - ISBN 5953200200: 2750.00 р.
3. Л.И. Степанова, Справочник технолога молочного производства. Технология и рецептуры. Т. 1. Цельномолочные прдукты.-2-е изд. СПб: ГИОРД, 2003. - 984с. ISBN 5-901065-14-Х
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Понятие и значение селекции как науки о создании новых и улучшении существующих пород животных, сортов растений, штаммов микроорганизмов. Оценка роли и значения микроорганизмов в биосфере, и особенности их использования. Формы молочнокислых бактерий.
презентация [1,1 M], добавлен 17.03.2015Влияние пробиотиков на здоровье человека. Иммуностимулирующие, антимутагеные свойства пропионовокислых бактерий. Влияние йода на биохимические свойства бактерий-пробиотиков. Качественная характеристика йодированных препаратов, биохимические показатели.
статья [15,7 K], добавлен 24.08.2013Изучение способности некоторых микроорганизмов деструктировать жировые вещества различной химической природы. Исследование морфолого-культуральных и физиологических свойств аборигенных микроорганизмов, анализ и особенности их деструктивной активности.
дипломная работа [410,7 K], добавлен 11.10.2010Свойства прокариотных микроорганизмов. Методы определения подвижности у бактерий. Участие микроорганизмов в круговороте азота в природе. Нормальная и анормальная микрофлора молока. Культивирование анаэробных микроорганизмов в условиях лаборатории.
шпаргалка [50,2 K], добавлен 04.05.2009Пробиотики как непатогенные для человека бактерии, обладающие антагонистической активностью в отношении патогенных микроорганизмов. Знакомство с особенностями пробиотических лактобацилл. Анализ кисломолочных продуктов с пробиотическими свойствами.
реферат [1,2 M], добавлен 17.04.2017Биологическая характеристика культур Yersinia enterocolitica. Изучение биохимических особенностей и лизогенности у культур йерсиний выделенных в лечебных учреждениях Чеченской Республики. Изучение морфологии бактерий методом световой микроскопии.
контрольная работа [30,8 K], добавлен 20.11.2014Основные свойства молока и причины возникновения патогенной микрофлоры. Сущность биохимических процессов брожения и гниения. Фазы изменения микрофлоры парного молока. Характеристика кисломолочных продуктов, особенности их использования человеком.
курсовая работа [19,0 K], добавлен 12.04.2012Гидролиз жировых оболочек молока (прогоркание) - нарушение структуры под действием нативных и бактериальных липаз при хранении и транспортировке. Изменение структуры и свойств белков молока в процессе гомогенизации при механической и тепловой обработке.
реферат [19,2 K], добавлен 13.02.2012Листерия как род грамположительных палочковидных бактерий. Факторы вирулентности Listeria monocytogenes. Характеристика культуральных свойств бактерий. Способность листерий размножаться в почве. Резистентность и патогенность для животных и человека.
презентация [989,0 K], добавлен 05.06.2013Изучение морфолого-физиологических свойств чистых культур целлюлозолитических микроорганизмов. Изучение усвоения углеводов: сорбита, сахарозы, маннита, лактозы, мальтазы, глюкозы. Посев на среду Гисса. Методы выделения культуры бактерий из короедов.
реферат [1012,3 K], добавлен 11.03.2012Изучение предмета, основных задач и истории развития медицинской микробиологии. Систематика и классификация микроорганизмов. Основы морфологии бактерий. Исследование особенностей строения бактериальной клетки. Значение микроорганизмов в жизни человека.
лекция [1,3 M], добавлен 12.10.2013Изучение морфологии, ультраструктуры, физиологических свойств и таксономического положения термофильных метанобразующих бактерий. Анализ особенностей дыхания, питания, размножения и энергетических процессов. Влияние температуры на активность бактерий.
реферат [215,6 K], добавлен 31.01.2015Схожесть и отличия прокариотических и эукариотических клеток. Строение муреина у бактерий. Характеристика микроорганизмов по способам питания. Химическое строение, структурная организация вирусов, морфология, особенности взаимодействия с клеткой-хозяином.
шпаргалка [3,2 M], добавлен 23.05.2009Понятие и принципы биологии как научного направления, история ее развития и значение. Значение в организме ДНК и РНК, описание их свойств и структуры. Исследование свойств генов и развитие генетики, сферы практического применения современных достижений.
контрольная работа [26,7 K], добавлен 16.06.2014Анализ закономерностей динамики численности отдельных физиологических групп почвенных микроорганизмов в зависимости от антропогенной нагрузки на примере серой лесной почвы и чернозема выщелоченного. Определение соотношения аэробных и анаэробных бактерий.
курсовая работа [452,1 K], добавлен 23.01.2011История изучения бактерий, изучение их физиологии и метаболизма, открытие болезнетворных свойств. Общие принципы определения возбудителя болезни (постулаты Коха). Формы, строение и свойства бактерий, их размеры, распространение, питание и размножение.
презентация [661,8 K], добавлен 16.09.2011Механизм воздействия прокариотических микроорганизмов на спав и липазу. Щелочные протеиназы рода Bacillus. Методика выделения, изучение свойств концентрированного ферментного препарата и порядок его применения в процессе обезжиривания меховой овчины.
дипломная работа [169,7 K], добавлен 27.11.2010Характеристика силикатных бактерий, их морфологические признаки. Потребность в кремнии живыми организмами и растениями. Методы и материалы выделения. Исследование морфологических свойств колоний. Влияние температуры среды на жизнедеятельность колоний.
курсовая работа [1,1 M], добавлен 25.12.2012Общие понятия о молочнокислых бактериях, их классификация и разновидности, морфология. Особенности генома молочнокислых бактерий, их историческая перспектива, размножение и рост. Типы стрептококков. Механизм гомоферментативного молочнокислого брожения.
реферат [267,8 K], добавлен 04.04.2015Задачи физиологии микроорганизмов. Анализ химического состава бактериальной клетки. Особенности и механизмы питания аутотрофных и гетеротрофных бактерий, их ферменты, процесс дыхания и размножения. Наследственность и генетические рекомбинации у бактерий.
реферат [21,1 K], добавлен 29.09.2009