Жизненный цикл и морфофизиологические адаптации Namanereis littoralis (grube 1872) (polychaeta, nereididae) в заливе посьета японского моря

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК

ЗООЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Жизненный цикл и морфофизиологические адаптации Namanereis littoralis (grube 1872) (polychaeta, nereididae) в заливе посьета японского моря

03.00.08 - зоология

Ежова Елена

Санкт-Петербург 2007

Работа выполнена в Зоологическом институте РАН и Атлантическом отделении института океанологии им. П. П. Ширшова РАН

Научный руководитель: доктор биологических наук,

профессор, В.В. Хлебович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор Ю.В. Мамкаев

кандидат биологических наук

С.М. Чивилев

Ведущая организация Санкт-Петербургский государственный университет, кафедра зоологии беспозвоночных

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Полихета Namanereis littoralis (Grube, 1872) (Nereididae, Namanereidinae) распространена в прибрежной зоне морей Атлантического и Тихого океанов, преимущественно в субтропических, но также в бореальных водах. Японское и Охотское моря - самая северная часть ареала данного вида. В российских дальневосточных морях значительные скопления этих мелких полихет наблюдаются в супралиторали.

Приливно-отливная зона морей с резкими колебаниями абиотических факторов, и, прежде всего - солености и температуры, нетипичное местообитание для полихет. В условиях с меняющейся соленостью обитают менее 2 % от известных видов полихет (Ушаков, 1972; Williams, 2004). Вид N. littoralis отмечен как единственная массовая литоральная полихета в заливе Посьета Японского моря (Бужинская 1967, 1971). В настоящее время в литорали Японского моря накоплены огромные запасы отмершей водной растительности (Пешеходько, Вышкварцев, 1982; Лебедев, Вышкварцев, 1990) и массовый супралиторальный вид N. littoralis, может играть существенную роль в переработке органического вещества. В то же время, изученность N. littoralis недостаточна. Литературные данные о биологии объекта исследования в Японском море ограничиваются в основном сведениями, приведенными в систематических работах.

N. littoralis - одна из немногих полихет, легко содержащихся в лабораторных условиях. Знание биологии, физиологии и жизненного цикла этого вида имеет не только самостоятельную научную ценность, но также важно с точки зрения дальнейшего использования N. littoralis при исследованиях физиологии гидробионтов. В связи с высокой степенью эврибионтности, присущей представителям подсемейства, и приуроченностью к солоноватым водам и эстуарным местообитаниям, возможность их случайного вселения в новые акватории очень велика и предполагаемые случаи ненамеренной антропогенной интродукции нескольких видов наманереидин были отмечены (Gibbs, Saiz Salinas 1996; Glasby, 1999). Знание диапазонов толерантности к факторам среды и понимание жизненных циклов этих видов необходимо для оценки последствий возможных инвазий.

Вид относится к подсем. Namanereidinae, систематика которого запутана и вызывает дискуссии на протяжении многих лет. Вопросы размножения и раннего онтогенетического развития не были прежде изучены в достаточной степени ни у одного из 35 представителей подсемейства, хотя дальнейший прогресс в вопросах филогении и систематики группы, по мнению специалистов, проблематичен без изучения размножения и развития отдельных видов. Большинство видов подсемейства являются характерными обитателями литоральной и супралиторальной зоны морей, речных берегов в устьевых районах, отмечены в некоторых совершенно пресных водоемах и в подземных водах (Glasby, 1999). Успех в освоении подобных местообитаний предполагает наличие комплекса специализированных адаптаций. Изучение характера этих адаптаций представляет несомненный теоретический интерес, поскольку разработка основ теории адаптации от клеточного до экосистемного уровня является актуальной проблемой современной биологии.

Действительное понимание того, каким образом конкретная видовая популяция достигает функционирования, адекватного условиям среды, или выяснение стратегии жизненного цикла вида, возможно лишь с учетом морфологических, физиологических, экологических и поведенческих адаптаций на разных уровнях организации и стадиях жизненного цикла (Charmantier, Wolcott, 2001). За последние два десятилетия в мировой литературе не появилось новых работ, освещающих эти вопросы применительно к представителям подсем. Namanereidinae.

Из изложенного выше вытекает необходимость выяснить адаптивную стратегию N. littorals, оценивая его приспособленность к условиям местообитания на разных уровнях организации и стадиях жизненного цикла, что определило цели и задачи исследования.

Цель и задачи исследования

Целью работы было изучение биологии и жизненного цикла полихеты N. littoralis и тех морфологических, физиологических, экологических и поведенческих адаптаций, которые способствуют успешному освоению видом биотопа, характеризующегося нестабильностью условий и экстремальными значениями некоторых факторов среды.

Работа была направлена на решение следующих задач:

1. Выявление связи популяционных характеристик N. littoralis с факторами среды.

2. Изучение морфофизиологических и экологических адаптаций N. littoralis на разных стадиях жизненного цикла.

3. Исследование особенностей репродуктивной биологии N. littoralis, включая половой цикл и онтогенез.

Научная новизна

Данная работа - первое комплексное исследование биологии N. littoralis. Для представителя подсем. Namanereidinae впервые выявлены особенности развития, размножения и осморегуляторных процессов. Впервые описано раннее онтогегетическое развитие вида, обнаружено прямое непелагическое развитие без свободноподвижной личинки, что является редким для нереидид. Получены кривые и уравнение, описывающие рост N. littoralis; изучены осморегуляторные способности N.littoralis; показана возможность дополнительного питания растворенными органическими веществами (РОВ). Выявлено влияние солености, температуры и ионного состава воды на размножение, развитие, осморегуляцию и поглощение РОВ N. littoralis.

Теоретическое и практическое значение

Результаты исследования, расширяющие представления о малоизученном подсем. Namanereidinae, могут быть использованы в дальнейшем для решения вопросов систематики и филогении этой группы полихет. Данные о характере соленостных отношений N. littoralis в области высоких и низких соленостей и поглощении растворенных низкомолекулярных органических соединений вносят вклад в понимание осморегуляторных процессов у водных беспозвоночных. Описанные адаптации N. littoralis позволяют на конкретном примере понять, как вид приспосабливается к условиям среды на разных уровнях организации. Полученные результаты полезны для развития теории адаптации и теории стратегий жизненного цикла.

Результаты диссертационного исследования могут быть использованы для оценки биологической продуктивности литоральной зоны. Предложенный способ культивирования N. littoralis в лабораторных условиях дает большие возможности для широкого использования вида при изучении физиологии, биохимии и гаметогенеза нереид, а также позволит использовать N. littoralis в качестве лабораторного объекта в учебном процессе и для получения высокоценного живого корма в морской аквариумистике. Удобство и целесообразность культивирования N. littoralis были подтверждены долговременной практикой в Музее Мирового океана (Калининград) и на кафедре зоологии Калининградского Государственного Университета. Материалы, полученные в результате исследований, были использованы автором при чтении курса лекций и проведении практических занятий по общей гистологии с основами эмбриологии в Калининградском техническом институте рыбной промышленности и хозяйства (1989, 1990 гг.).

Апробация работы

Основные результаты работы доложены на 1 Всесоюзном совещании по зоокультуре (Москва, 1986), на 13-й конференции профессорско-преподавательского состава Калининградского технического института рыбной промышленности и хозяйства (Калининград, 1987), на семинаре отделения эстуариев лаборатории морских исследований Зоологического института РАН (1988, 2006), на V семинаре Европейском междисциплинарном семинаре (European Marine Interdisciplinary Network) (Литва, Клайпеда, 1996), а также были представлены на международной конференции «Проблемы гидроэкологии на рубеже веков» (Санкт-Петербург, 2000) и IX съезде Гидробиологического Общества РАН (Тольятти, 2006).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 8 работ в Зоологическом журнале, Трудах Зоологического института РАН, трудах различных международных конференций и материалах IX съезда ГБО РАН.

Структура и объём диссертации

Диссертация изложена на 160 печатных страницах, состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, списка литературы, содержит 43 рисунка и 12 таблиц. Список литературы включает 190 источников, в том числе 100 на иностранном языке.

Благодарности

Автор выражает глубокую признательность своему научному руководителю д.б.н., профессору В.В. Хлебовичу (ЗИН РАН) за идейную, методологическую и организационную поддержку, к.б.н. А.Ю. Комендантову (ЗИН РАН) за помощь в проведении экспериментальных и полевых работ, а также благодарит д.б.н. Н.В. Аладина (ЗИН РАН), к.б.н. Д.Д. Габаева, Н.А. Шепель и А.В. Кучерявенко (ТИНРО) за помощь при выполнении некоторых этапов обработки или сбора материалов, д.б.н., профессора С.М. Никитину (РГУ им. И. Канта) и к.б.н. Ф.Ф. Литвинова (АтлантНИРО) за теоретические консультации. Автор признателен за постоянную поддержку руководству АО ИОРАН в лице директора д.ф.-м.н. В.Т. Паки и зам. директора В.М. Слободяника.

КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Введение

Приводятся общие сведения о работе: актуальность темы, цели и задачи исследования, научная новизна, основные защищаемые положения, теоретическое и практическое значение, апробация результатов, структура и объем диссертации.

Глава 1. Материал и методы

Основной материал, использованный в диссертации, был собран автором в 1986-1992 гг. в мелководных бухтах залива Посьета Японского моря. Материал для изучения особенностей пространственного распределения собран в августе-сентябре 1986 г., мае-сентябре 1987 г. и июне-июле 1988 г. Пробы за сентябрь 1987 г. были отобраны Д.Д. Габаевым (ТИНРО) по нашей просьбе. Сезонную динамику популяции изучали на материалах 1987 г. Сборы для анализа размерно-возрастной структуры популяции N. littoralis за 1984 г. из залива Посьета предоставлены автору для обработки В.В. Хлебовичем и А.Ю. Комендантовым (ЗИН РАН). Материал для экспериментальных работ в 1986-1988 и 1992 гг. доставляли из Посьета самолетом, в термостатированных условиях, и в дальнейшем содержали в лабораторной культуре, используя естественный субстрат и морскую воду из естественного местообитания или искусственную.

Всего за период исследования было собрано и обработано 524 пробы различного характера, поставлено 18 экспериментов, исследовано более 8000 особей N. littoralis. Сведения о характере и общем объеме материала приведены в таблице 1.

Количественные сборы для изучения распределения, сезонной динамики и состава биоценозов выполняли на восьми станциях в литорали бухт Экспедиции, Постовая и Новгородская (рис. 1) ежемесячно с мая по сентябрь 1987 г. и в июне-июле 1988 г. Придерживались схемы вертикальной зональности литорали, используемой отечественными исследователями: нижняя, средняя и верхняя литораль и супралитораль (Кусакин, 1977; Кафанов и др., 2003). Использовали ограниченно рандомизированный отбор (Максимович, Погребов, 1986): на типичных участках побережья, различающихся грунтами и степенью прибойности, были заложены трансекты в середине зон супралиторали, верхней, средней и нижней литорали, где точки взятия проб располагались случайным образом. Для выяснения характера размещения особей в пространстве отбирали пробы на всех перечисленных трансектах выбранных станций. Для определения средних величин количественных параметров и их сезонной динамики на станциях ежемесячно отбирали 6-12 проб в супралиторали и верхней литорали, поскольку именно в этих зонах встречался N. littoralis в период исследования.

Таблица 1.

Материал диссертационного исследования

. Изучаемый аспект	Материал	Коли-чество	Метод, прибор
Популяционная динамика	Пробы	172	Зубчатый дночерпатель, 1/20 м2; трубчатый пробоотборник 1/250 м2
Половой цикл	Гистологические препараты	305	Окраска железным гематоксилином по Генденгайну; фотомикроскоп NICON-Eclipse 80i
Онтогенез	Эмбрионы	более 1500	Искусственное осеменение; микроскоп Д-1 с МФН-10, рисовальный аппарат РА-5
Осморегуляция	Опыты/ особи	3/360	Криоскопия, микрокриоскоп модификации Аладина (1979)
Поглощение РОВ	Пробы/ особи	45/450	Авторадиография, счетчик сцинтилляционный БЕТА-1
Теплоустойчивость	Пробы/ особи	4/60	Метод критического теплового максимума (Cowles, Bogert,1944; Becker, Genoway,1979)
Соленостная резистентность гамет, эмбрионов	Опыты	12	Метод определения соленостной устойчивости сперматозоидов (Хлебович, Луканин, 1970)
Постэмбриональный рост	Особи	7419	Методы размерно-частотных диаграмм, "вероятностной бумаги" (Максимович, Погребов, 1986)

Пробы в супралиторали отбирали трубчатым пробоотборником с площадью захвата 1/250 м2, не менее чем в шести повторностях на каждой станции. В литоральной зоне использовали ручной зубчатый дночерпатель с площадью захвата 1/20 м2. Пробы промывали на стандартном наборе почвенных сит с размером отверстий конечного сита 1 мм, фиксировали 4% формалином и обрабатывали в лаборатории по общепринятым методикам (Салазкин, Алимов и др., 1984). Определяли средние значения плотности и биомассы основных видов и групп, частоту их встречаемости, долю в общей биомассе. Сообщества выделяли по индексу плотности (Воробьев, 1949) или по доминированию по биомассе и называли по названию доминантного вида.

Экспериментальные работы по изучению осморегуляторных процессов N. littoralis включали определение: осмотической концентрации целомической жидкости при изменении солености среды у взрослых особей; соленостной толерантности и ее изменений под воздействием факторов среды у взрослых особей; резистентности различных онтогенетических стадий. Отбирали одноразмерных животных, которых перед началом опытов акклимировали к воде с различной температурой, соленостью и составом солей в течение 7 суток. Использовали воду двух типов: океаническую и аральскую. Определение осмотической концентрации целомической жидкости производили на микрокриоскопе Виноградова-Бобовича (Виноградов, Бобович, 1970) в модификации Аладина (Аладин, 1979). Для получения пробы у тщательно обсушенных на фильтровальной бумаге полихет прокалывали покровы тела и в образовавшееся отверстие вводили стеклянный капилляр диаметром 20-30 мкм, набирали 2-3 столбика жидкости, наружное отверстие после взятия пробы запечатывали пластилиновой пробкой.



Рис. 1. Схема расположения станций отбора проб в заливе Посьета. Цифрами обозначены станции. Горизонтальными черточками показан заболоченный берег.

Соленостную зависимость поглощения растворенных органических веществ N. littoralis исследовали авторадиографически с использованием меченых аминокислот D,L-глицин 2Hі в конечной концентрации 20 мг л -1 и D,L-лейцин 2Hі в конечной концентрации 22,5 мг л -1. Радиоактивность проб определялась на сцинтилляционном счетчике БЕТА-1 с использованием жидкого сцинциллятора ЖС-105. Результаты обрабатывались статистически, достоверность различий между полученными рядами данных определяли по критерию Колмогорова-Смирнова.

Онтогенез изучали в лабораторных условиях, использован метод искусственного осеменения. Зародышей содержали при шести различных соленостях и двух различных температурах в ежедневно сменяемой воде. Развивающихся эмбрионов измеряли, зарисовывали и фотографировали через каждые 2-4 часа. Опыты поставлены в четырех-семи повторностях.

Размерно-возрастной состав популяции и характер роста N. littoralis рассмотрели на пробах с одной и той же станции, взятых в июле и августе 1984 г. Измеряли длину тела и массу червя, подсчитывали число сегментов. Использовали метод размерно-частотных диаграмм и метод "вероятностной бумаги" (Максимович, Погребов, 1986). Всего проанализировано более 7456 особей, фиксированных 4% формалином.

Весь период работы полихеты были необходимы для экспериментов и наблюдений. Поэтому были разработаны методы их лабораторного содержания и культивирования (Хлебович, Ежова, 1986). Успешное ведение культуры в течение многих лет было достигнуто с помощью аквариумной установки оригинальной конструкции, позволяющей поддерживать оптимальный режим солености.

Глава 2. Район и объект исследования

Характеристика района исследования

Залив Посьета расположен в Южном Приморье, в юго-западной части залива Петра Великого, вдается в сушу на 33 км и простирается от 42є31?с.ш. и 130є52? в.д. до 42є33?с.ш., 131є13? в.д. Изрезанные берега образуют многочисленные бухты, две из них, бухты Экспедиции и Новгородская, мелководные и полузакрытые.

Своеобразие условий района исследования заключается в сочетании бореальных и субтропических черт климата. Здесь выражены как ясные признаки континентальности, так и черты типично муссонного климата.

Годовая норма осадков составляет 591 мм/год, максимальное количество осадков приходится на июль-август, во время тайфуна за несколько дней может выпасть половина годовой нормы (Барабашкина, Лескова, 1958). Существенны изменения солености в сезонном аспекте. Соленость снижается летом от 32-33 ‰ до 22-27‰, во время тайфунов - до 12-18 ‰, а в верхнем 0.5 м слое бухт Новгородская и Экспедиции даже до 5 ‰ (Скарлато и др., 1967; Вышкварцев, 1984). При затяжных дождях в прибрежных мелководьях распреснение до 12.2-12.4 ‰ может длиться 2-3 месяца (Григорьева и др., 2002). Зимняя температура вод отрицательна, она сохраняется во внутренних бухтах 106 суток, во внешних - 85-92 суток. Прочный ледовый покров удерживается в полузакрытых бухтах с ноября по апрель. С таянием льда начинается устойчивый подъем температуры, годовой максимум отмечен в августе (рис. 2).

Рис. 2. Среднемесячная температура и соленость поверхностных вод залива Посьета по данным ГМС «Посьет», 1970-1990 гг.

В поверхностном слое прибрежных участков вода прогревается до 29-30С. Особенностью температурного режима является большая амплитуда суточных колебаний в теплый период года. В супралиторальных биотопах этот перепад может составлять 24єС (Комендантов, 1986).

Таким образом, гидрологический режим в районе исследования определяется зимним выхолаживанием, интенсивным и сильным прогревом летом и периодом муссонных летних дождей, резко снижающих соленость прибрежных вод. Период максимального прогрева вод совпадает с периодом наименьшей солености.

Берега полузакрытых бухт образованы в основном гравийно-галечными и гравийно-песчаными пляжами. Почти все пляжи покрыты штормовыми выбросами из отмерших водорослей и морской травы. Они простираются по пляжу вдоль уреза воды полосой 2-4 м в ширину и 0,1-0,7 м в высоту, достигая максимального развития в бухте Экспедиции, где все берега, за исключением скалистых мысов, покрыты слоем выбросов из отмерших листьев морской травы. В период исследования выбросы были постоянным элементом берегового ландшафта полузакрытых бухт и одним из характерных биотопов супралиторали. Постоянство выбросов как элемента ландшафта в супралиторальной зоне связано с развитием обширных полей морских трав и водорослей на дне мелководных бухт. Органическое вещество морских трав - важный фактор, поддерживающий высокий трофический уровень полузакрытых бухт залива Посьета, морские травы залива поставляют в среду 19 т Сорг/сут. или 37 мкгС/л сут. в пересчете на концентрацию (Вышкварцев, Пешеходько, 1982). Большое влияние на концентрацию растворенного органического вещества оказывает терригенный сток. Совокупный вклад водной растительности и органического загрязнения в поставку растворенной органики определил в период исследования высокую (0.25-9.12 мг/л) концентрацию РОВ в прибрежной зоне мелководных бухт зал. Посьета.

Систематическое положение и таксономические признаки N. littoralis

Объект исследования, Namanereis littoralis (Grube, 1872) (Nereididae, Namanereidinae) относится к группе полихет, систематика которой не является устоявшейся до настоящего времени. В данной работе принята систематика по последней таксономической ревизии подсем. Namanereidinae (Glasby, 1999).

Вид N. littoralis описан Грубе (Grube, 1872) в роде Lycastis. Современный номенклатурный статус вида был установлен К. Гласби (Glasby, 1999), обобщившим сведения по видам подсемейства и ревизовавшим взгляды своих предшественников. Список синонимов Namanereis littoralis по Гласби включает: Lycastopsis beumeri Augener, 1922, Lycastis littoralis Grube, 1872, Lycastopsis augeneri Okuda 1937, Lycastoides pontica - Greca, 1949 (non Bobretzky), Lycastopsis pontica - Pettibone, 1963 (non Bobretzky) и Namanereis quadraticeps. Гласби выделили также видовую группу N.littoralis., поскольку образцы, включенные в описание вида, хотя и очень близко соответствуют лектотипу Lycastis littoralis Grube, однако вариации между ними намного больше, чем обычно приписываются видам в подсемействе Namanereidinae.

Особенности морфологии N. littoralis

На основании собственных данных указаны некоторые морфологические особенности N. littoralis, не отмечавшиеся ранее.

Максимальная длина тела особей из залива Посьета - 33-36 мм, ширина - 1,5 мм, число щетинковых сегментов - 107 мм. Зрелые ооциты достигают 546х260 мм. Это одни из самых крупных яйцеклеток, известных у нереидид. Зрелые яйцеклетки - бледно-желтые, имеют правильную овальную форму, равномерно заполнены крупными желтковыми гранулами и окружены плотной наружной оболочкой. Через некоторое время после оплодотворения наружная поверхность этой оболочки ослизняется, образуется толстая слизистая капсула, имеющая клейкие свойства. Зародыш развивается внутри яйцевой капсулы до ювенильного червя. Капсула всегда открывается одинаковым образом - «крышечкой» на одном из концов длинной оси.

На параподиях N. littoralis расположены многоклеточные слизистые железы. Железистые клетки собраны в группы, могут открываться наружу одним или несколькими протоками. Отмечено, что слизистые железы параподий вырабатывают обильный секрет во время нереста, обеспечивая успешное оплодотворение вне водной среды и защищая от высыхания. N. littoralis, часто находящийся в толще штормовых выбросов, выше уреза воды, способен к дыханию атмосферным воздухом. Присутствие слизистого секрета является необходимым условием кожного дыхания, обеспечивая диффузию кислорода через покровы (Догель, 1923; Гиляров, 1970).

Глава 3. Распределение N. littoralis в заливе Посьета Японского моря

Закономерности пространственного распределения N.littoralis

N. littoralis не был обнаружен нами в сублиторали, нижней и средней литорали. В верхних горизонтах литорали, он присутствовал редко и в незначительных количествах. В то же время, почти со 100 % встречаемостью вид отмечали в различных биотопах в зоне заплеска: в грунте на галечно-песчаных пляжах и под крупными камнями каменистых пляжей, в штормовых выбросах морских трав и водорослей (повсеместно). Последний биотоп можно считать постоянным и наиболее характерным для вида в условиях Южного Приморья.

Размещение N. littoralis в супралиторальных выбросах является достаточно стабильным. Наряду с олигохетами, изоподами и амфиподами, вид обитает в выбросе не только в зоне постоянного увлажнения, но и на некотором удалении от воды, причем в средней зоне выброса (0,5-1 м от уреза) он доминирует по биомассе. На протяжении исследованного периода года (май-сентябрь) животные не покидают выбросы, не совершают суточных миграций или миграций за урезом воды из супралиторали в литоральную зону. Типичной является концентрация червей в средней по высоте части выброса (табл. 2.). Плотность поселений и биомасса N. littoralis варьируют в широких пределах в зависимости от условий (30-48700 экз/м2 и 0,4-202 г/м2), составляя в среднем 7290 экз/м2 и 57 г/м2. Отмечена значительная пространственная неоднородность распределения N. littoralis (рис.3).

Таблица 2.

Вертикальное распределение температуры внутри штормового выброса морских трав и приуроченность N.littoralis к различным горизонтам выброса, бухта Экспедиции, 1988 г.

Горизонт, см	Температура,є С	Присутствие N. littoralis
	31.05.88	5.06.88
0-3	12.8	16.7	-
5-10	13.7	17.5	+
15-20	14.0	20.3	+
20-поверхность	-	23.0	-
25-поверхность	14.6	-	-

Вид представлен в незначительных количествах или отсутствует на илистых и илисто-песчаных грунтах в кутковых частях залива, у низких подболоченных берегов, а также вблизи устьев ручьев и речек. Биомасса N. littoralis максимальна в супралиторали полузакрытых бухт на гравийно-песчаных грунтах, обогащенных гниющей органикой (ст. 1, 2, 4).

Таким образом, N. littoralis может обитать в заливе Посьета в широком спектре условий: от морских до почти пресных вод, на каменистых, галечных и галечно-песчаных грунтах, в районах обогащенных органикой. Однако не достигает высоких количественных показателей в условиях, где органическое загрязнение сопровождается застойной гидродинамикой.

Рис.3. Среднелетняя биомасса в супралиторальных сообществах залива Посьета, 1987 г.

Сезонная динамика биомассы и численности N.littoralis

Плотность поселения и биомасса N. littoralis претерпевают значительные изменения в течение вегетационного сезона (рис. 4). Возрастание биомассы к середине лета согласуется с сезонным ходом температуры, и объясняется ростом животных и созреванием половых продуктов. Резкий спад биомассы совпадает по времени с годовым максимумом температуры и минимумом солености вод залива (рис.2). По нашему предположению, снижение биомассы связано с гибелью родительского поколения после нереста, происходящего в заливе Посьета обычно в июле. В пользу того, что за нерестом следует смерть родительского поколения, свидетельствует изменение размерно-возрастной структуры популяции и строение половой системы.

Пик плотности совпадает с минимумом биомассы, свидетельствуя о том, что популяция представлена, главным образом, ювенильными особями. Пополнение вносит свой вклад в показатели плотности не сразу, поскольку ювенилы начинают улавливаться орудиями сбора по достижении определенного размера.

Рис.4. Средняя плотность поселений и биомасса N. littoralis на станциях 1, 2 и 4 в заливе Посьета, 1987 г.

Супралиторальные сообщества штормовых выбросов

В районе исследования мы выделили четыре супралиторальных сообщества, N. littoralis присутствовал в трех из них. Сообщество N. littoralis приурочено к мощным супралиторальным выбросам на гравийно-песчаном пляже бухты Экспедиции (ст. 1), сообщество N. littoralis+Amphipoda развито на гравийно-галечных пляжах бухты Экспедиции и в каменистой супралиторали с небольшими выбросами на мысе Шелеха (ст. 2 и 4). Сообщество Amphipoda+N. littoralis было найдено в супралиторали бухты Новгородской залива (ст. 6 и 7). В бедных сообществах илистой и илисто-песчаной супралиторали (ст. 5, 8), характерной для кутовой части бухты Экспедиции, доминировали олигохеты, а N. littoralis отсутствовал, либо отмечался единично.

В первых двух сообществах N.littoralis создает значительную биомассу - в среднем 107,1 г•м-2 и 63,6 г•м-2 за вегетационный сезон, внося 89 и 42 % в общую биомассу, и имеет высокую частоту встречаемости - 91 и 77 % соответственно. В сообществе, приуроченном к каменистой супралиторали, где выше степень прибойности, меньше развиты выбросы и не столь существенно влияние терригенных стоков, субдоминантами являются амфиподы. На илистых и илисто-песчаных грунтах полузакрытых бухт вблизи устьев рек и ручьев, где сильно выражено опреснение, доминируют амфиподы и субдоминантом является N. littoralis. В этом сообществе общая биомасса заметно ниже - 43,3 г•м-2, доля наманереиса не достигает 25 %, частота встречаемости около 40%.

В период наших работ состав, структура, доминирующие виды и количественные показатели для супралиторальных сообществ залива заметно отличаются от таковых в 60-70-х гг. прошлого века (Скарлато и др. 1967; Бужинская 1967, 1971). Доля N. littoralis в биомассе сообществ верхней литорали и супралиторали возросла на несколько порядков и вид может быть охарактеризован как доминантный или субдоминантный.

Постоянное обитание N. littoralis в биотопе, во многом напоминающем почвенный, где пространство хоть и насыщено водяными парами, но не является водной средой, требует способности противостоять осушению и наличия атмосферного дыхания, а также приспособлений к оплодотворению вне водной среды. Как показано в гл.2, N. littoralis имеет для этого морфологические приспособления, обеспечивающие при необходимости процесс воздушного дыхания и облегчающие осеменение и развитие зародышей при недостатке влаги: наличие слизистых желез на переднем конце тела и мощную слизистую оболочку у развивающихся зародышей. Таким образом, N. littoralis имеет признаки специализации к обитанию в амфибиотичной среде супралиторальных выбросов.

Глава 4. Физиологические и экологические адаптации N. littoralis

Соленостная толерантность и осморегуляция N. littoralis

Взрослые особи N. littoralis толерантны к изменению солености в широком диапазоне, неограниченно долго выживая в воде от пресной до 73‰. Соленость 6 разделяет два физиологических состояния - гиперосмотическую конформность и гиперосмотическую регуляцию. Показано, что в области высоких соленостей добавление оформленной пищи либо аминокислоты в среду инкубации не влияет на осмотическую концентрацию целомической жидкости (табл. 3). Во всех трех вариантах опыта (голодание, с аминокислотой, с водорослями) при обеих температурах целомическая жидкость изотонична инкубационной среде либо слегка гипертонична. littoralis репродуктивный экологический адаптация

При низких соленостях экспериментальных сред характер питания существенно влияет на осмотическую концентрацию жидкостей внутренней среды. Добавление оформленной пищи вызывало заметное повышение осмолярности целомической жидкости. У червей, инкубировавшихся в растворе аминокислоты, повышение осмолярности внутренней среды по сравнению с контролем меньше, чем в случае с добавлением водорослей. Влияние аминокислоты в опытах не однозначно. Добавление к среде водорослей вызывает повышение осмолярности во всех случаях.

Изменение температуры сдвигает границы соленостного толерантного диапазона. При 10°С черви выживали в средах с соленостью до 90,56‰. При температурах 2 и 25°С верхняя граница соленостного толерантного диапазона значительно снижалась, черви гибли уже при солености 77‰.

Таблица 3.

Осмолярность целомической жидкости N. littoralis при акклимации к морской воде разной степени разведения, содержащей оформленную пищу и РОВ

Среда	Соленость среды, ‰	Осмолярность среды, мОсМ	Осмолярность целомической жидкости, мОсМ
			3°С	25°С
Балтийская вода (1:10)	1,17	35	68±2	81±14
Балтийская вода (1:10) с водорослями	1,02	31	94±10	96±10
Балтийская вода (1:10) с аминокислотами	1,46	44	84±4	69±7
Балтийская вода	9,19	275	281±4	279±7
Балтийская вода с водорослями	9,92	297	308±6	330±14
Балтийская вода с аминокислотами	10,06	301	306±5	305±6
Вода Штерба	32,37	969	967±13	979±3
Вода Штерба с водорослями	32,66	978	978±5	996±5
Вода Штерба с аминокислотами	32,81	982	982±9	996±5

Нижняя граница соленостного толерантного диапазона также может изменяться под влиянием температуры. При 2, 10, 25°С полихеты гибли во всех разведениях воды Куршского залива и заметно набухали в балтийской воде, разведенной в 10 и 20 раз. При температуре 18°С они выживали в воде Куршского залива, разбавленной в 4, 6 и 10 раз не менее девяти суток. Таким образом, очевидно, что температура существенно влияет на осморегуляторные способности изучаемого вида - толерантный соленостный диапазон при 2 и 25°С значительно уже, чем при 10 и 18°С.

В воде с океаническим составом солей черви нормально жили при солености 53,33‰ и погибали при 77,00‰. В воде Аральского моря они оставались живыми при солености 80,20‰ и погибали при 103,54‰. Таким образом, соленостный толерантный диапазон N. littoralis в области высоких соленостей существенно шире в морской воде аральского состава, чем в океанической. В океанической воде значительно выше концентрация ионов натрия и хлора, но ниже - катионов кальция и анионов сульфатов и гидрокарбонатов (Океанографические таблицы, 1975). Вода океанического состава с соленостью 53,33‰ и аральская вода соленостью 80,20 ‰ имеют одинаковую концентрацию ионов хлора.

Соленостные отношения в онтогенезе

Выявлена четкая зависимость времени активного поступательного движения сперматозоидов от солености среды. Максимальное время движения - 8,750,80 ч, наблюдается при солености 25-27‰ (среда М9). В более концентрированной среде, при солености 28-30‰ (среда М) это время уменьшается и составляет 6,54,5 ч (рис.5). В интервале соленостей от 25-27‰ до 7-9‰ (среды от М9 до М3) время активности сперматозоидов постепенно, но незначительно уменьшается, в водах с меньшей соленостью резко падает. Способность сперматозоидов к оплодотворению в воде 1-3‰ (среда М1) сохраняется менее 5 минут.

Рис. 5. Активность сперматозоидов N.littoralis в средах различной солености. По оси абсцисс - среды инкубации (М1=1-3‰, М2=4-6‰, М3=7-9‰, М4=10-12‰ ‰, М5=13-15‰, М6=16-18‰, М7=19-21‰, М8=22-24‰, М9=25-27‰, М = 28-30‰; по оси ординат - время, часы.

Яйцеклетки изучаемого вида обладают достаточно высокой соленостной резистентностью. Показано, что вода от 28-30 до 10-12‰ не вызывает заметного изменения размеров клеток. Яйцеклетки могут оставаться жизнеспособными в течение нескольких суток, сохраняя способность к оплодотворению. В диапазоне солености 1-9‰ (среды М1, М2, М3) происходит набухание яйцеклеток. Уже через час большая часть клеток гибнет. Клеточное содержимое зрелых яйцеклеток изотонично морской воде соленостью около 15‰.

Оплодотворение и развитие зародышей оказалось возможным в экспериментальных средах от морской воды до разведения М3, однако доля зародышей, успешно завершивших развитие, и его скорость заметно отличались в разных разведениях экспериментальных сред: раньше всего каждая из отмеченных стадий наступала в средах с соленостью 16 - 21‰ и процент выхода ювенилов был близок здесь к 100 %.

Зона оптимума для N. littoralis достаточно широка, чтобы обеспечить оплодотворение в условиях меняющейся солености. Максимальное время активности сперматозоидов приходится на 25-27‰, что ниже преобладающей в течение года солености мелководных бухт. Поэтому летнее распреснение обычное для залива Посьета благоприятно для процесса оплодотворения у N. littoralis.

Влияние температуры на онтогенез N. littoralis

Скорость раннего развития N. littoralis зависит от температуры. При температуре 25-27°С развитее протекает быстрее чем при 20-22°С. При температуре воды 20-22°C завершение первого деления происходит во всех соленостях примерно через 4-4,5 часа после оплодотворения, при температуре 25-27°C первое деление ускоряется примерно вдвое. Закономерность сохраняется и при дальнейшем развитии - при высокой температуре ювенилы выходят из кладок на 1-2 суток раньше. При дальнейшем дроблении интервал солености, в котором скорость клеточных делений наибольшая, выделяется более четко - от 16-18‰ до 22-24 ‰ для обоих температурных режимов. Минимальное время между делениями клеток наблюдается в среде 22-24‰, которая, очевидно, и является соленостным оптимумом раннего развития.

Поглощение растворенного органического вещества

N. littoralis способен к поглощению растворенных органических веществ. Показано наличие активного транспорта глицина и лейцина в широком диапазоне соленостей. Резкое падение поглощения обоих аминокислот при понижении солености свидетельствует о том, что процесс является соленостнозависимым (рис. 6А, Б). Обращает на себя внимание наличие второго пика при 12‰. Появление этого пика не ясно, однако данный результат представляется не случайным, поскольку он воспроизвелся во всех повторностях эксперимента. При этой же солености возрастает и поглощение лейцина. Можно предположить, что эта величина солености среды является оптимальной для активности некоторых биохимических процессов N. littoralis.

Голодающие животные поглощают метку более интенсивно. У полихет, получавших в избытке листья зостеры, отмечены значительно более низкие уровни поглощения обеих аминокислот, эта разница особенно заметна в высоких соленостях. Обнаружено взаимное ингибирование поглощения глицина и лейцина. После двухнедельной акклимации в растворе глицина черви снижали уровень накопления этой аминокислоты на порядок, сохраняя тенденцию к усилению поглощения с ростом солености. Лейцин животные этой группы не поглощают. Сходная картина наблюдается при акклимации к раствору лейцина - глицин поглощается ничтожно слабо и не всегда достоверно отлично от нуля, лейцин же не поглощается вовсе. Можно заключить, что система транспорта лейцина у N. littoralis легко насыщаема, в отличие от «глициновой» системы. Очевидно, это свидетельствует о различной роли двух аминокислот в биохимических процессах. Интересно, что глицин вызывает у N. littoralis четкий положительный таксис, лейцин - реакцию избегания. Имея в виду, что исследуемый вид обитает в условиях повышенного содержания растворенных низкомолекулярных веществ, причем основу пула свободных аминокислот в естественных условиях составляет глицин, мы полагаем, что растворенные аминокислоты играют для N. littoralis информационную роль, указывая на источник гниющей органики, являющейся его обычной пищей.

Однако возможно, что поглощение растворенных аминокислот может частично компенсировать недостаток оформленной пищи - рассчитанный вклад поглощенных аминокислот в бюджет энергии N. littoralis составил 1,7 и 0,1% для глицина и лейцина соответственно.

Рис.6. Поглощение глицина (А) и лейцина (Б) N. littoralis: 1 - голодающие полихеты, 2 - с листьями зостеры, 3 - с глицином, 4 - с лейцином. Горизонтальный пунктир - контроль. По оси абсцисс - соленость среды акклимации, ‰; по оси ординат - интенсивность накопления метки, процент от максимума.

Организменная теплоустойчивость N.littoralis

В эксперименте показана высокая степень организменной теплоустойчивости. Критический тепловой максимум (КТМ) для N. littoralis составил 42,6±0,51°С, а летальная температура (ЛТ100 ) - 46,31±0,21°С. Эти значения близки к пороговым величинам 43-46°С, при которых происходит денатурация структуры сложных белковых молекул (Хлебович, 2004). Возможно, это свидетельствует о значительной конформационной пластичности белковых комплексов у данного вида. Экологическим следствием высокой организменной теплоустойчивости N. littoralis является возможность успешного освоения супралиторального биотопа штормовых выбросов где в летние месяцы температура может часто подниматься до 35єС и выше.

Глава 5. Жизненный цикл и размножение N. littoralis

Гаметогенез и нерест N. littoralis

Строение половой системы характеризуется примитивностью. Морфологически оформленные гонады отсутствуют. Половые клетки, собранные в группы, свободно плавают в целоме, начиная с оо- и сперматогониев. Половые клетки образуются во всех сегментах, за исключением первых 8-10. Количество групп половых клеток в сегменте возрастает по направлению к заднему концу тела. Мужские половые клетки на протяжении всего периода сперматогенеза развиваются в группах. Яйцеклетки в начальный период также развиваются в группах, затем среди них выделяются более крупные, опережая других в развитии. Вителлогенные ооциты N. littoralis имеют отчетливо амебоидную форму.

Цикл развития половых клеток до созревания длится не менее одного года.

В конце августа - начале сентября у большей части особей половые клетки в целоме отсутствуют либо неразличимы. Часть червей имеет немногочисленные ооциты и сперматоциты на начальных стадиях развития. Единично встречаются самки со зрелыми яйцеклетками.

В январе половые клетки на разных стадиях присутствуют у большинства особей, встречаются разноразмерные ооциты малого роста, реже - трофоплазматические. Зрелых гамет нет.

В мае - половые клетки различимы у всех особей. Встречаются самки у которых созрели отдельные ооциты, при этом присутствуют также и мелкие ооциты. У большинства в целоме - разноразмерные многочисленные ооциты или группы сперматоцитов, этап можно охарактеризовать как “активный гаметогенез”

В июле у всех встреченных самок яйцеклетки достигли зрелости - присутствуют в каждом сегменте одноразмерные, правильной овальной формы, заполненные желтковыми гранулами, кроме них у многих самок имеются немногочисленные мелкие ооциты. У всех самцов целом заполнен пакетами сперматид, у некоторых присутствуют сперматозоиды. Популяция готова к нересту.

В августе зрелые яйцеклетки отмечены у единичных самок, основная часть самцов и самок имеют гаметы в начальных стадиях развития.

Раннее онтогенетическое развитие N. littoralis

Яйцеклетки богаты желтком (рис.7.1), развитие лецитотрофное. Дробление гомо-квадрантное, что нехарактерно для большинства полихет и сходно с развитием низших трохофорных животных. Первые два деления внешне равномерны, бластомеры первого квартета одинаковы по размерам (рис.7.2, 7.3). В результате третьего, резко неравномерного деления образуется четыре очень крупных, богатых желтком макромера и квартет микромеров почти совершенно лишенных желтка, продолжаюих быстро дробиться.

Бластула без внутренней полости. Гаструляция эпиболически-иммиграционная. Быстро делящиеся мелкие микромеры обрастают крупные макромеры. Края обрастания сближаются, и остается незамкнутым небольшой, четко оформленный, бластопор. Вскоре можно наблюдать усиленное размножение клеток в этом районе, а затем бластопор вытягивается в узкую щель и замыкается посередине. Такое явление характерно для наиболее примитивных трохофорных личинок (Беклемишев, 1964). На 2-3 сутки на поверхности яйцевой капсулы становится видна толстая студенистая оболочка, обладающая сильными адгезивными свойствами, приклеивающая зародыш к субстрату. На 2-3 сутки зародыш приобретает черты трохофорной личинки, однако ресничные образования склеены в стекловидные неподвижные образования (рис. 7.4, 7.5).

Характерной также является стадия временной «приостановки развития» (3-4 сутки) когда в течение многих часов с зародышем не происходит видимых изменений (рис.7.6). На 4-5 сутки начинается быстрая дифференцировка органов и тканей: появляется сократимость, закладывается пигидиальный и 3 параподиальных сегмента, пальпы, 2 пары тентакулярных усиков, 2 пары глаз. (рис.7.7). Затем образуются челюсти, 3 пара тентакулярных усиков, быстро появляются закладки новых сегментов, ацикул и щетинок в закладках параподий. Примечательной является двуветвистость параподий на этой стадии. Вылупление личинок происходит на 6-7 день, ювенильная полихета выходит наружу, сразу же приступая к активному питанию органическим детритом и водорослями. Ювенильные черви практически не отличаются от взрослых строением тела, параподии одноветвисты. Размер ювенильных червей - около 1 мм.

Все фазы личиночного развития, после оплодотворения, происходят внутри плотной яйцевой капсулы, прикрепляющейся к субстрату в том же биотопе, где обитают взрослые особи. Стадия свободноподвижной личинки отсутствует.

Рис. 7. Стадии развития N. littoralis: 1 - оплодотворенное яйцо; 2 - два бластомера, 4 часа от оплодотворения; 3 - четыре бластомера, 6 часов от оплодотворения; 4, 5 - стадии «эмбрионизированной трохофоры» с различной степенью развития ресничных структур, 2-3 сутки; 6 - стадия «временной остановки развития», 3-4 сутки; 7 - стадия экто-мезодермальной сегментации, 5-6 сутки; 8 - ювенил перед выходом из яйцевой капсулы, 5-7 сутки от оплодотворения

Постэмбриональный рост N. littoralis

Изучена зависимость массы от длины тела особи, рассчитано уравнение этой зависимости: W=0,036 L1,94 (рис. 8).

Рис.8. Зависимость между длиной и массой тела у N. littoralis из залива Посьета, 1984 г. (n=367).

Анализ размерно-возрастной структуры популяции N.littoralis в летние месяцы позволил установить наличие 2 возрастных групп (когорт) в составе популяции. В июле на гистограммах отчетливо выделяются группа ювенильных червей (3,0 ± 1,5 мм) и более старшая размерная группа (17,0 ± 6,5 мм). В августе также присутствуют эти две группы, их модальные размеры составляют соответственно 7,5 ± 3,5 и 23,0 ± 3,5. В выборках встречаются особи и большего размера, однако отчетливой размерной группировки на гистограммах они не образуют. Метод «вероятностной бумаги» позволил выделить третью когорту, представленную очень небольшим количеством особей, модальный размер этой группы в августе составил 33,0 ± 3,5 мм.

Абсолютный возраст когорт, установили по данным полевых наблюдений. Выделенные размерные группы определены как пополнение текущего года (0+), годовики (1+) и двухгодовики (2+). Двухгодовики составляют значительную долю в популяции до размножения, в мае-июне, и представлены единичными особями после нереста. Таким образом, для вида характерен двухгодичный жизненный цикл. Особи приступают к размножению в возрасте 2 лет. Отнерестившиеся особи погибают.

Заключение

Организация N. littoralis характеризуется многими признаками морфологической и физиологической примитивности. Сюда могут быть отнесены такие черты как отсутствие дифференцированных гонад и структур для выведения половых клеток, амебоидная форма вителогенных ооцитов и сам способ солитарного оогенеза - без специализированных вспомогательных клеток, с поступлением предшественников желтка в ооцит из целомической жидкости. Достаточно редким явлением для полихет является гомоквадрантное дробление. Так же, как и отмеченное у N. littoralis образование щелевидного бластопора с последующим смыканием краев посередине и образованием дефинитивного рта и ануса на его концах, оно характерно для личинок наиболее примитивных трохофорных животных. Некоторые из этих признаков более характерны для низших многоклеточных, чем для полихет, и, несомненно, свидетельствуют о древности группы, к которой принадлежит изучаемый вид.

В то же время, имеются черты специализации, в частности, развитие слизистых эпителиальных желез, обеспечивающих возможность атмосферного дыхания и защиту от высыхания в амфибионтных условиях, образование клейких слизистых капсул, защищающих развивающийся зародыш. Наличие в онтогенезе стадии эмбрионизированной трохофоры и двуветвистость закладывающихся параподий свидетельствуют об утрате в филогенезе некоторых онтогенетических стадий и морфологических структур.

Приспособления данного вида к условиям нестабильного амфибионтного биотопа с экстремальными значениями некоторых факторов обеспечивается:

высокой степенью эвригалинности и эвритермности, устойчивостью к обсыханию, способностью к атмосферному дыханию;

защитой ранних онтогенетических стадий от неблагоприятных воздействий путем перехода к лецитотрофному непелагическому прямому развитию в слизистых кладках, характеризующемуся высокой скоростью;

синхронизацией нереста в популяции и приуроченностью его к наиболее благоприятным соленостным и температурным условиям

ВЫВОДЫ

N. littoralis - амфибионтный вид верхней литорали и супралиторали, доминирующий в супралиторальных сообществах. Максимальной биомассы и плотности поселений достигает в выбросах водной растительности на гравийно-песчаных пляжах полузакрытых бухт. Самые высокие значения биомассы и плотности отмечены в середине лета, когда температура вод максимальна, а соленость достигает годового минимума.

Эвригалинность N. littoralis, толерантного к изменению солености в диапазоне от пресной воды до 73‰, обусловлена гиперосмотической регуляцией при солености ниже 6‰ и гиперосмотической конформностью в области более высоких соленостей. Наличие пищи способствует поддержанию гиперосмии целомической жидкости при низких соленостях. Границы соленостного толерантного диапазона зависят от температуры, обеспеченности пищей и ионного состава воды, а также изменяются в онтогенезе. Соленостные требования ранних стадий жизненного цикла ограничивают возможность распространения вида в сторону пресных вод.

N. littoralis поглощает аминокислоты глицин и лейцин в широком диапазоне соленостей. Обнаружено взаимное ингибирование поглощения глицина и лейцина. Растворенные аминокислоты играют для N. littoralis информационную роль, указывая на источник гниющей органики, являющейся его обычной пищей, однако могут частично компенсировать недостаток оформленной пищи. Рассчитанный вклад поглощенных аминокислот в бюджет энергии N. littoralis составил 1,7 и 0,1% для глицина и лейцина соответственно.

N.littoralis - раздельнополый вид, половой диморфизм не выражен. Морфологически оформленных гонад нет, половые клетки развиваются в целоме, оогенез солитарный. Нерест в популяции синхронизирован факторами среды и происходит без эпитокии, в том же биотопе, где обитает вид. Жизненный цикл длится два года, отнерестившиеся особи погибают.

Развитие лецитотрофное, непелагическое, достигает высокой степени эмбрионизации. Стадия свободноподвижной личинки в жизненном цикле отсутствует, из слизистых кладок, развивающихся в том же биотопе, где обитают взрослые особи, выходит сформированный ювенил. Развитие длится 6-7 суток. Расселение на небольшие расстояния может происходить на эмбриональной и имагинальной стадиях при разрушении биотопа выбросов штормами.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Хлебович В.В., Ежова Е.Е. О перспективах культивирования полихеты Lycastopsis augeneri Okuda (Polychaeta, Nereidae) // Тез. докл. 1 Всесоюз. совещ. по зоокультуре. - М., 1986 . - Т.1. - С.87-88.

2. Комендантов А.Ю., Аладин Н.В., Ежова Е.Е. Зависимость осморегуляторных способностей полихеты Lycastopsis augeneri (Polychaeta, Nereidae) от факторов среды // Зоол. журн. - 1989.- Т. 68 - С.137-140.

3. Комендантов А.Ю., Ежова Е.Е. Соленостная зависимость поглощения растворенных в воде аминокислот Lycastopsis augeneri (Polychaeta, Nereididae) // Биология солоноватых и гипергалинных вод : Тр. Зоол. инст.- Л., 1989.- Т. 196. - С. 91- 98.

4. Комендантов А.Ю., Ежова Е.Е. Влияние солености cреды на размножение и развитие Lycastopsis augeneri Okuda (Polychaeta, Nereididae) // Систематика и экология беспозвоночных дальневосточных морей и эстуариев: Тр. Зоол. инст.- Л., 1990. - Т. 218. - C. 130-139.

5. Ezhova L. Supralitoral nereid Lycastopsis augeneri Okuda (Polychaeta, Nereidae) reproduction and development in the Sea of Japan // EMIN Bull. - 1996 - № 13.- P.5-6.

6. Ежова Е.Е. Особенности репродуктивной биологии Lycastopsis pontica Bobtersky, 1882 (Polychaeta, Nereidae) // Тез. докл. Межд. конф.посв. 40-летию пребывания КГТУ на Калининградской земле и 85-летию рыбохозяйственного образования в России, 17-19 ноября 1998. - Калининград, 1999.- C. 11-12.

...