Современные методы диагностики токсоплазмоза
Исследование специфики возбудителя токсоплазмоза, распространение токсоплазмозной инвазии. Описание и использование метода непрямой иммунофлюоресценции, выявление особенностей полимеразной цепной реакции. Характеристика реакции Сейбина-Фельдмана.
Рубрика | Биология и естествознание |
Вид | контрольная работа |
Язык | русский |
Дата добавления | 27.02.2019 |
Размер файла | 15,5 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Современные методы диагностики токсоплазмоза
Зыков А.Е.
ВВЕДЕНИЕ
В последние годы проблема заболеваемости населения токсоплазмозом остается весьма актуальной. Число лиц, страдающих токсоплазмозом растет с каждым годом не только в нашей стране, но и во всем мире [1].
ЭТИОЛОГИЯ
Возбудитель был впервые описан в 1909 году Nicolle et Manceaux при обнаружении его у североафриканских грызунов. В 1914 году на территории ШриЛанки был впервые описан случай заболевания у человека. Жизненный цикл токсоплазм был расшифрован лишь в 1970 году.
Возбудитель токсоплазмоза -- Toxoplasma gondii - облигатный внутриклеточный паразит из класса Sporozoa, относится к типу простейших и имеет 5 сложный цикл развития. Заражение происходит через фекалии кошек и при употреблении сырого мяса. Инфекция нередко протекает бессимптомно, но может проявляться лихорадкой, спленомегалией, увеличением лимфоузлов. У больных с иммунодефицитами токсоплазмоз проявляется тяжелыми миокардитом, пневмонией, энцефалитом, менингитом или менингоэнцефалитом. Острая инфекция во время беременности может привести к врожденному токсоплазмозу. Диагноз токсоплазмоза обычно ставят по результатам серологического исследования. Чаще всего используются метод непрямой иммунофлюоресценции и реакция непрямой гемагглютинации. Диагностически значимым считается не менее чем четырехкратное повышение титра антител. Для выявления IgM к возбудителю применяются методы прямой и непрямой иммунофлюоресценции и твердофазный ИФА. Антитела к возбудителю появляются через 1--2 нед после начала заболевания, их титр возрастает в течение примерно 6 нед (до 1:600 и выше), затем снижается в течение 6--8 мес. IgG к токсоплазмам могут сохраняться на протяжении всей жизни [2].
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ
Токсоплазмозная инвазия имеет широкое, практически повсеместное распространение: на земном шаре от 500 млн до 1,5 млрд человек инфицировано токсоплазмами. Возбудитель встречается повсеместно. Пораженность населения в разных странах зависит от санитарно- гигиенических условий, особенностей питания населения, влияния экологических факторов, частоты иммунодефицитных состояний и др. В развивающихся странах высока инфицированность детского населения. Распространенность токсоплазмоза в России в возрасте от 20 до 40 лет составляет по различным данным от 7-10% до 22%. Жители сельской местности заболевают гораздо чаще, чем городское население.
ДИАГНОСТИКА ТОКСОПЛАЗМОЗА
Метод непрямой иммунофлюоресценции -- наиболее распространенный метод диагностики токсоплазмоза, который позволяет выявить IgG и IgM к Toxoplasma gondii. Титр антител, выявляемых с помощью этого метода, соответствует титру антител, выявляемых в реакции Сейбина--Фельдмана. Диагностически значимым считается титр 1:64 и выше. возбудитель токсоплазмоз иммунофлюоресценция цепной
Реакция Сейбина--Фельдмана. Суть метода заключается в следующем. Ядро и цитоплазма клеток Toxoplasma gondii, не покрытых антителами, в присутствии метиленового синего окрашиваются в темно-синий цвет. Клетки возбудителя, обработанные сывороткой, содержащей антитела к нему, не окрашиваются этим красителем. Диагностически значимым считается не менее чем четырехкратное повышение титра антител. В период разгара инфекции титр антител, выявленных в реакции Сейбина--Фельдмана, обычно достигает 1:1000 и более. Эту реакцию в настоящее время почти не применяют, т.к. она проводится с живыми возбудителями [1].
Реакция непрямой гемагглютинации -- точный и недорогой серологический метод, который часто применяется для выявления IgG к токсоплазмам. В большинстве лабораторий диагностически значимым считается титр 1:256 и более. Эта реакция может оставаться положительной в течение нескольких лет [4].
Реакция иммунофлюоресценции - позволяет обнаружить антигены токсоплазм в исследуемом материале: крови, спинномозговой жидкости, биоптате, пат. материале по наличию специфического свечения, выявляемого с помощью люминесцентного микроскопа. Чаще обнаруживаются эндозоиты, имеющие форму полумесяца с закругленным задним концом и размер 2-4 мкм на 4 мкм, что указывает на острую стадию токсоплазменного процесса [5].
Полимеразная цепная реакция обладает уникальной чувствительностью и специфичностью. С ее помощью можно анализировать различные клинические образцы. Суть полимеразной цепной реакции заключается в идентификации специфического участка молекулы ДНК с последующим копированием или амплификацией этого участка с целью получения достаточного количества копий, которые могут быть выявлены доступными методами детекции. Позволяет обнаружить ДНК токсоплазм в крови, ликворе и биоптатах; обладает более высокой чувствительностью и специфичностью. Метод полимеразной цепной реакции имеет высокое диагностическое значение, особенно при остром и врожденном токсоплазмозе. Ограничения связаны с кратковременной паразитемией. Полимеразно цепная реакция преимущественно используется для установления активности инфекционного процесса у лиц с позитивными серологическими реакциями, а также для диагностики приобретенного и врожденного токсоплазмоза. Использование его для скрининга беременных нецелесообразно. Иммуноферментный анализ - широко используется для эпид. исследований, при перинатальном скрининге и с диагностической целью. Имеет высокую чувствительность и специфичность. Иммуноферментный анализ является универсальным методом и позволяет выявлять в сыворотке и в спинномозговой жидкости специфические антитела различных классов.
Для учета результатов требуется иммуноферментный анализ -анализатор. Определение суммарных антител при диагностике оппортунистических инфекций имеет низкую диагностическую ценность, дает лишь предварительную информацию о наличии инфекции и требует дальнейшего лабораторного уточнения [5].
Список литературы
1. Клиническая иммунология и аллергология / Лолор-младший Т., Фишер Т., Адельман Д. / Перевод с английского: М. В. Пащенков, Н. Б. Гамалея. Редакторы перевода: к. м. н. Е. Н. Образцова, В. М. Нечушкина. - М.: Изд. « Практика», - 2000, - 806 стр.
2. Клиническая медицина: цветной атлас и учебник / Ч.Д. Форбс, У.Ф. Джексон ; пер. с англ. ; под ред. В.А. Кокорина, Е.Т. Разумовой. - Москва :
Логосфера, 2009. - 544с. : ил. : 21,0 см. - Перевод изд. Color Atlas and Text of Clinical Medicine, 3nd edition / Charles D. Forbes, William F. Jackson. - ISBN 9785-98657-015-0.
3. Медицинская паразитология: учебное пособие для студентов медицинских вузов / Чебышев Н. В. и др. ; под ред. Н. В. Чебышева. - М. : Медицина, 2012. - 304 с. : ил. - (Учебная литература для студентов медицинских вузов)
4. Наглядная иммунология / Г.-Р. Бурместер, А. Пецутто; пер. с англ. - 3-е изд. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2014. - 320 с.: ил.- (Наглядная медицина).
5. Прозоровский С.В., Тартаковский И.С. Возбудители оппортунистических инфекций - роль в инфекционной патологии человека и методы лабораторной диагностики. // Клиническая лабораторная диагностика.- 1998. - № 2. - С. 24, 33 - 35.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Сущность и содержание метода полимеразной цепной реакции, особенности его использования в реальном времени для диагностики различных, в том числе и вирусных, заболеваний. Актуальность и этапы разработки быстрых и эффективных диагностических тестов.
статья [686,1 K], добавлен 26.07.2013- Эффективность и качество использования полимеразной цепной реакции в лабораторной диагностике гриппа
Рассмотрение сути метода полимеразной цепной реакции. Понятие амплификации как процесса увеличения числа копий дезоксирибонуклеиновой кислоты. Основные принципы подбора праймеров при создании тест-системы. Подготовка пробы биологического материала.
курсовая работа [610,8 K], добавлен 14.11.2014 Метод полимеразной цепной реакции в реальном времени, его использование в диагностике мутаций в генах, приводящих к возникновению рака молочной железы и яичника. Действие генов-супрессоров на формирование опухолевого процесса. Наследственные формы рака.
дипломная работа [306,1 K], добавлен 09.10.2013Выявление трансформантов среди растений Т2 поколения. Выявление инсерционных мутантов, имеющих фенотипические изменения. Идентификация трансгенной природы трансформированных растений Arabidopsis thaliana. Использование метода полимеразной цепной реакции.
контрольная работа [380,4 K], добавлен 25.03.2016Коннекторный и рестриктазно-лигазный методы конструирования рекомбинантных молекул ДНК in vitro, их применение в генной инженерии. Реакция лигирования; рестриктазные операции. Использование метода амплификации сегментов ДНК в полимеразной цепной реакции.
презентация [985,3 K], добавлен 17.08.2015Методы обнаружения нуклеотидных замен в геномной ДНК. Обнаружение мутации в геномной ДНК при помощи блот-гибридизации с помощью меченых олигонуклеотидов в качестве гибридизационных зондов. Исследование фрагментов ДНК при полимеразной цепной реакции.
учебное пособие [2,5 M], добавлен 11.08.2009Фенотипические последствия гибридизации животных. Молекулярные методы определения видов. Молекулярно-генетические исследования видов рода Aquila. Разработка специфических праймеров для полимеразной цепной реакции. Особенности секвенирования по Сэнгеру.
дипломная работа [3,7 M], добавлен 25.06.2017Изготовление микропланшетов. Определение спектра поглощения. Электрофоретическое разделение нуклеиновых кислот в образцах ПЦР-смеси после амплификации. Протокол полимеразной цепной реакции с использованием TaqMan. Система детекции результатов анализа.
дипломная работа [873,4 K], добавлен 15.12.2008История открытия полимеразной цепной реакции (ПЦР). Разновидности ПЦР, ее проведение. Наличие в реакционной смеси ряда компонентов. Циклический и температурный режим. Основные принципы подбора праймеров. Подготовка пробы биологического материала.
курсовая работа [51,0 K], добавлен 16.06.2014Механизм действия и модификация антисмысловых олигонуклеотидов. Физико-химические аспекты взаимодействия олигонуклеотида и РНК-мишени. Буферные растворы, использовавшиеся в работе. Электрофорез нуклеиновых кислот. Проведение полимеразной цепной реакции.
курсовая работа [1,3 M], добавлен 18.01.2013Сущность полимеразной цепной реакции, ее сопоставление с реакцией атомного взрыва. Последовательность операций включения ДНК в плазмиду. Комплекс мер по умножению количества индивидуального белка и его подлинность. Физические основы электрофореза.
реферат [62,1 K], добавлен 11.12.2009Общая характеристика инвазионных заболеваний животных. Изучение путей проникновения в организм возбудителей и особенностей протекания бабезиоза собак. Инкубационный период при заражении. Описание клинических признаков токсоплазмоза у собак и кошек.
реферат [24,4 K], добавлен 07.12.2015Дефицит кислорода как стрессовый фактор для растений. Энергетическое состояние клетки в условиях гипоксии. Проведение полимеразной цепной реакции в реальном времени. Динамика активности фумаратгидротазы в зеленых листья кукурузы в условиях гипоксии.
курсовая работа [325,9 K], добавлен 09.08.2016Методы определения аффинности антител. Способы расчета констант комплексообразования реакции антиген—антитело, ее кинетические закономерности. Сущность метода равновесного диализа. Экспериментальные методы и определения кинетических констант реакции.
контрольная работа [744,7 K], добавлен 19.09.2009Изучение реакции физической работоспособности детей, занимающихся спортом. Обзор особенностей крови и кровообращения у детей школьного возраста. Исследование методики для определения частоты сердечных сокращений, расчет показателей сердечной деятельности.
курсовая работа [65,2 K], добавлен 23.04.2012Природа константы К в уравнении. Преобразование уравнения Михаэлиса-Ментен. Влияние концентрации субстрата на кинетику реакции, образование устойчивого комплекса. Факторы, от которых зависит скорость ферментативной реакции, устройства для их определения.
курсовая работа [278,9 K], добавлен 23.02.2012Химическая классификация углеводов: полигидроксикарбонильные соединения. Свойства и структура моносахаридов, их химические свойства. Реакции брожения и их применение. Биосинтетические реакции углеводов. Производные моносахаров, гликозиды и их биосинтез.
реферат [5,4 M], добавлен 27.08.2009Систематическое положение и географическое распространение тарани. Исследование морфологических признаков, особенностей размножения и питания. Оценка влияния рыбоядных птиц на численность популяции тарани и распространение гельминтозных заболеваний рыб.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 09.10.2013Понятие и направления исследования реакции связывания комплемента, ее главные этапы и фазы. Сущность и значение иммунофлюоресцентного метода как способа выбора для быстрого выявления и идентификации неизвестного микроорганизма в исследуемом материале.
презентация [184,5 K], добавлен 31.05.2015Современные представители отряда Химерообразных рыб. Описания внешнего вида, особенностей строения, питания, размножения, образа жизни. Зубной аппарат слитночерепных рыб. Распространение морских глубоководных форм. Промысловое значение европейской химеры.
презентация [638,2 K], добавлен 27.03.2013