Окисна модифікація білків у сироватці крові щурів за умов експериментального остеоартрозу та тривалого введення мультипробіотика

Размещено на http://www.allbest.ru/

Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Київ, Україна

Окисна модифікація білків у сироватці крові щурів за умов експериментального остеоартрозу та тривалого введення мультипробіотика

А. Вовк, асп.

О. Короткий, канд. біол. наук

Л. Кот, канд. біол. наук

К. Дворщенко, д-р біол. наук

Анотація

Метою роботи було дослідити мультипробіотик на вміст продуктів окисної модифікацій' білків та рівень сульфгідрильних груп у сироватці крові щурів за умов монойодацетат-індукованого остеоартрозу.

Дослідження проведені на білих нелінійних статевозрілих щурах-самцях масою 180-240 г із дотриманням загальних етичних принципів експериментів на тваринах. Усіх тварин розділяли на чотири експериментальні групи. Перша група - контроль: тваринам у перший день уводили в колінну зв'язку 0,0 мл 0,9-відсоткового розчину NaCl та щоденно протягом 14-ти діб із 8-ої до 22-ої доби вводили пергастрально 1 мл питної води в перерахунку на 1 кг маси тіла тварини. Друга група - мультипробіотик: тваринам у перший день уводили в колінну зв'язку 0,05 мл 0,9-відсоткового розчину NaCl та щоденно протягом 14-ти діб, із 8-ої по 22-гу добу вводили пергастрально мультипробіотик "Симбітер®" С'Пролісок", Україна) у дозі 140 мг/кг, розведений в 1 мл питної води на 1 кг маси тварини. Третя група - модель остеоартрозу: щурам у перший день уводили в колінну зв'язку 1 мг монойодацетату натрію, розчиненого у 0,05 мл 0,9-відсоткового розчину NaCl та щоденно протягом 14-ти діб уводили пергастрально 1 мл питної води в перерахунку на 1 кг маси тварини. Четверта група - остеоартроз+мультипробіотик: тваринам уводили в перший день у колінну зв'язку 1 мг монойодацетату натрію, розчиненого у 0,05 мл 0,9-відсоткового розчину NaCl, та пергастрально мультипробіотик у дозі 140 мг/кг, розведений в 1 мл питної води на 1 кг маси тварини. Тварин умертвляли на 30 добу після початку експерименту згідно з протоколом етичного комітету, після чого швидко робили забір крові. Уміст продуктів окисної модифікації білків (ОМБ) та олігопептидів визначали за рівнем карбонільних похідних, які виявляються в реакції із 2,4-динітрофенілгідразином. Рівень загальних, білокзв'язаних та небілкових сульфгідрильних (ЭН)-груп вимірювали за методом Елмана.

Установлено, що при монойодацетат-індукованому остеоартрозі у сироватці крові щурів зростає вміст продуктів окисної модифікації білків та знижується вміст сульфгідрильних груп. Показано, що при тривалому введенні мультипробіотика тваринам із монойодацетат-індукованим остеоартрозом вищезазначені показники відновлювались.

Ключові слова: монойодацетат-індукований остеоартроз, мультипробіотик, окисна модифікація білків, сироватка крові.

Аннотация

Целью работы было исследовать действие мультипробиотика на содержание продуктов окислительной модификациии белков и уровень сульфгидрильных групп в сыворотке крови крыс при монойодацетат-индуцированном остеоартрозе.

Исследования проведены на белых нелинейных половозрелых крысах-самцах массой 180-240 г с соблюдением общих этических принципов экспериментов на животных. Всех животных разделяли на четыре экспериментальные группы. Первая группа - контроль: животным в первый день вводили в коленную связку 0,05 мл 0,9-процентного раствора NaCl и ежедневно на протяжении 14-ти суток с 8¬го по 22-й день вводили пергастрально 1 мл питьевой воды в перерасчете на 1 кг массы тела животного. Вторая группа - мультипробиотик: животным в первый день вводили в коленную связку 0,05 мл 0,9-процентного раствора NaCl и ежедневно на протяжении 14-ти суток с 8-го по 22-й день вводили пергастрально мультипробиотик "Симбитер®" С'Пролисок", Украина) в дозе 140 мг/кг, разведенный в 1 мл питьевой воды на 1 кг массы животного. Третья группа - модель остеоартроза: крысам в первый день вводили в коленную связку 1 мг монойодацетата натрия, разведенного в 0,05 мл 0,9-процентного раствора NaCl и ежедневно на протяжении 14-ти суток вводили пергастрально 1 мл питьевой воды в пересчете на 1 кг массы животного. Четвертая группа - остеоартроз + мультипробиотик: животным в первый день вводили в коленную связку 1 мг монойодацетат натрия, растворенного в 0,05 мл 0,9-процентного раствора NaCl и пергастрально мультипробиотик в дозе 140 мг/кг, разведенный в 1 мл питьевой воды на 1 кг массы животного. Животных умертвляли на 30 сутки после начала эксперимента согласно протокола этичного комитета, после чего быстро делали забор крови. Содержание продуктов окислительной модификации белков (ОМБ) и олигопептидов определяли по уровню карбонильных производных, которые проявляются в реакции с 2,4-динитрофенилгидразином. Уровень общих, белок-связанных и небелковых сульфгидрильных (ЭН)-групп измеряли по методу Элмана.

Установлено, что при монойодацетат-индукованом остеоартрозе в сыворотке крови возрастает содержание продуктов окислительной модификации белков и снижается содержание сульфгидрильных групп. Показано, что при длительном введении мультипробиотика животным с монойодацетат-индукованым остеоартрозом вышеуказанные показатели восстанавливались.

Ключевые слова: монойодацетат-индуцированный остеоартроз, мультипробиотик, окислительная модификация белков, сыворотка крови.

Summary

мультипробіотик окисний модифікація білок

The aim of the study was to investigate the effect of multiprobiotics on the content of products of oxidative modification of proteins and the level of sulfhydryl groups in blood serum of rats during monoiodoacetate-induced osteoarthritis.

The study was carried out on white non-linear, sexually mature male rats (weight 180-240 g), according to general ethical principles of experi¬ments on animals. All animals were divided into four experimental groups. The first group - Control: animals got injection into knee ligament 0.05 ml of 0.9% NaCl solution on the first day of the experiment and then got intragastric administration 1 ml of drinking water per 1 kg of the animal weight daily for 14 days from the 8th to 22nd days. The second group - Multiprobiotic: animals got injection into knee ligament 0.05 ml of 0.9% NaCl solution on the first day of the experiment and then got intragastric administration 140 mg/kg of multiprobiotic Symbiter® (Prolisok ", Ukraine) diluted in 1 ml of drinking water per 1 kg of animal weight. The third group, MIA-induced OA: animals got injection into knee ligament 1 mg of sodium mo- noiodacetate, dissolved in 0.05 ml of 0.9% NaCl on the first day of the experiment and then got intragastric administration 1 ml of drinking water per 1 kg of the animal weight daily for 14 days from the 8th to 22nd days. The fourth group - MIA-induced OA + Multiprobiotic: animals got injection into knee ligament 0.05 ml of 1 mg of sodium monoiodacetate, dissolved in 0.05 ml of 0.9 % NaCl on the first day of the experiment and then got intra-gastric administration 140 mg/kg of multiprobiotic diluted in 1 ml of drinking water per 1 kg of animal weight. All animals were killed on day 30 of the experiment, according to the protocol of the ethics committee with rapid blood sampling. The content of the products of oxidative modification of proteins (OMP) and oligopeptides was determined by the level of carbonyl derivatives that were detected in reaction with 2,4-dinitrophenylhydrazine. The level of total, protein-bound and non-protein sulfhydryl (SH) -groups was measured by the Elman method.

It has been established that MIA-induced OA disturbed oxidative-antioxidant balance of the rat serum: the content of the products of oxidative modification of proteins increases and the content of sulfhydryl groups decreases in the serum. It was shown that with the long-term administration of multiprobiotics in animals with MIA-induced OA, the above indicators were restored.

Key words: monoiodoacetate-induced osteoarthritis, multiprobiotic, oxidative modification of proteins, blood serum.

Провідне місце серед захворювань займають патології опорно-рухової системи, серед яких найбільш розповсюдженими є хвороби суглобів, які призводять до деградації хрящової тканини та розвитку запалення. Наслідком цих змін є системні ускладнення, прогресуюча інвалідність, що в цілому спричинює високі соціально-економічні витрати [1].

Захворювання суглобів, зокрема остеоартрози та остеоартрити, мають поліетіологічну природу. Їхнє ви никнення та розвиток може відбуватись унаслідок інфекційних захворювань, надмірних фізичних навантажень, метаболічних порушень, генетичних факторів, автоімунних процесів, хронічного стресу тощо [2].

Дослідження останніх років показали, що ключовим елементом у виникненні та розвитку багатьох захворювань (ожиріння, діабет, артрит тощо) є порушення мікробіому організму. Крім того, ученими було показано, що при використанні пробіотиків спостерігається зниження вияву симптомів захворювань [3]. Таким чином, склад, структура та функціональні можливості кишкової мікробіоти прямо пов'язані із виникненням та розвитком багатьох захворювань. Тому актуальним є проведення досліджень у даному напрямі для встановлення зв'язків і шляхів бактеріальних взаємодій із системами організму хазяїна за різних патологічних станів.

Аналітичний огляд літератури та отримані нами результати свідчать, що мультипробіотичний препарат "Симбітер®" здатен підтримувати й відновлювати нормобіоз шлунково-кишкового тракту (ШКТ) на різних експериментальних моделях [4, 5]. Здатність мультипробіотика ліквідувати колонізацію ШКТ умовно-патогенною мікрофлорою запобігає утворенню джерел запалення. Відповідно цікавим є дослідження дії цього пробіотика на розвиток остеоартрозу, формування якого безпосередньо пов'язано із запаленням.

Метою нашої роботи було дослідити дію мультипробіотика на вміст продуктів окисної модифікаціії білків та рівень сульфгідрильних груп у сироватці крові щурів за умов монойодацетат-індукованого остеоартрозу.

Об'єкт та методи досліджень. Усіх тварин розділяли на чотири експериментальні групи. Перша група - контроль: тваринам у перший день уводили в колінну зв'язку 0,05 мл 0,9 % розчину NaCl та щоденно протягом 14 діб із 8-ої до 22-гої доби вводили пергастрально 1 мл питної води в перерахунку на 1 кг маси тіла тварини. Друга група - мультипробіотик: тваринам у перший день уводили в колінну зв'язку 0,05 мл 0,9 % розчину NaCl та щоденно протягом 14-ти діб із 8-ої до 22-гої доби вводили пергастрально мультипробіотик "Симбітер®" ("Пролісок", Україна) у дозі 140 мг/кг, розведений в 1 мл питної води на 1 кг маси тварини. Третя група - модель остеоартрозу: щурам у перший день уводили в колінну зв'язку 1 мг монойодацетату натрію (МЙА), розчиненого у 0,05 мл 0,9% розчину NaCl [6] та щоденно протягом 14 діб вводили пергастрально 1 мл питної води в перерахунку на 1 кг маси тварини. Четверта група - остеоартроз+мультипробіотик: тваринам уводили в перший день у колінну зв'язку 1 мг монойодацетату натрію, розчиненого у 0,05 мл 0,9 % розчину NaCl та пергастрально мультипробіотик у дозі 140 мг/кг, розведений в 1 мл питної води на 1 кг маси тварини. Тварин умертвляли на 30 добу після початку експерименту згідно з протоколом етичного комітету, після чого швидко робили забір крові. Кров інкубували в термостаті за температури 37° С протягом 30 хв, після чого центрифугували 1000 g протягом 15 хв. Сироватку відбирали у пластикові мікропробірки та зберігали при -71° С не більше трьох місяців до початку подальших досліджень. Загальна кількість тварин, залучених до експериментальних досліджень, становила 20 особин.

Уміст продуктів окисної модифікації білків (ОМБ) та олігопептидів визначали за рівнем карбонільних похідних, які виявляються в реакції із 2,4-динітрофенілгідразином [7]. Рівень загальних, білокзв'язаних та небілкових сульфгідрильних (S^-груп вимірювали за методом Елмана [8]. Статистичну обробку результатів дослідження проводили загальноприйнятими методами варіаційної статистики.

Результати та їх обговорення. Надмірне утворення різних активних форм окислювачів сприяє розвитку окисного стресу, що призводить до значних біологічних наслідків. В останні роки з'явились докази того, що окисний стрес відіграє вирішальну роль у розвитку та збереженні запалення і, таким чином, сприяє патофізіології багатьох захворювань, включаючи хвороби суглобів. Зокрема, при розвитку та прогресуванні запалення у суглобах розвивається оксидативний стрес, який виникає внаслідок постійної генерації вільних радикалів активованими фагоцитами та за рахунок гіпоксичних процесів при роботі суглобів, що призводить до пошкодження всіх структурних елементів суглобу (хрящової, кісткової, присуглобової тканини, синовіальної рідини). Крім того, при надмірному утворенні вільних радикалів спостерігається виснаження антиоксидантної системи, що додатково сприяє інтенсифікації вільнорадикальних процесів [9, 10].

Білки є основними мішенями для радикалів та двох електронних окислювачів у біологічних системах [1112]. Вільні радикали атакують білки по всій довжині поліпептидного ланцюга, порушуючи не тільки первинну, але і вторинну та третинну їх структуру, що призводить до агрегації або фрагментації білкової молекули. Інтенсивність окисної модифікації білків визначається особливостями їх амінокислотного складу. Акцепторними групами, що здатні перехоплювати електрони, взаємодіючи з активними формами кисню та утворювати аніон-радикали, можуть бути дисульфідні, сульфгідрильні, карбонільні, карбоксильні та аміногрупи білків. Модифікація білків може призвести до підвищення гідрофільності бічного ланцюга, фрагментації бічного та основного ланцюга, агрегації за рахунок ковалентних поперечних зв'язків або гідрофобних взаємодій, розгортанню білка та зміни конформації, зміненим взаємодіям з біологічними партнерами та зміненому оберту. Утворення й накопичення таких модифікованих білків порушує їхнє функціонування, що призводить до розвитку різних патологічних станів та формуванню захворювань [13].

У ході проведених експериментальних досліджень установлено, що у щурів при монойодацетатіндукованому остеоартрозі у сироватці крові вміст продуктів окисної модифікації білків зростає (табл. 1). Зокрема, збільшується рівень нейтральних альдегідних продуктів (макс. абсорбції при 356 нм) - у 2,4 рази та нейтральних кетонних продуктів (E max = 370 нм) відповідно - у 2,2 рази порівняно з контролем. За тих самих умов експерименту в сироватці крові кількість основних альдегідних продуктів (максимум поглинання при 430 нм) збільшується в 1,6 рази стосовно контрольної групи тварин, при цьому вміст основних кетонних продуктів (E max = 530 нм) зростає в 1,5 рази порівняно з показниками контрольної групи тварин (табл. 1).

Таблиця 1. Уміст продуктів окисної модифікації білків у сироватці крові щурів за умов остеоартрозу та введення мультипробіотика, ум. од. х мг білка-1 (M ± m, n = 5)

* - р < 0,05 стосовно контролю; # - р < 0,05 щодо групи тварин із остеоартрозом

За тривалого введення мультипробіотика тваринам із експериментальним остеоартрозом у сироватці крові спостерігається зниження ступеня окиснення білкових молекул (табл. 1). Установлено зниження вмісту нейтральних альдегідних продуктів - в 1,5 рази, нейтральних кетонних продуктів - в 1,6 рази, основних альдегідних та кетонних продуктів - в 1,4 рази стосовно групи тварин із моделлю остеоартрозу (табл. 1).

Виявлено, що введення щурам мультипробіотика не впливає на вміст продуктів окисної модифікації білків у сироватці крові контрольної групи щурів (табл. 1).

Рівень білкової модифікації оцінюють за ступенем окиснення сульфгідрильних груп білків. Сульфгідрильні групи входять до складу як високомолекулярних білків (білокзв'язані SH-групи), так і низькомолекулярних пептидів (небілкові SH-групи), переважно у складі цистеїнових залишків. Процеси окисної модифікації білків можуть відбуватись як прямим, так і ферментативним шляхом за участі ферменту глутатіонпероксидази та гідроперекисей ліпідів [14-15]. У першу чергу, окисненню піддаються саме сульфгідрильні групи білків, що оберігає від окиснення інші функціональні групи та молекули.

Виявлено, що у щурів при монойодацетат- індукованому остеоартрозі у сироватці крові вміст сульфгідрильних груп знижується: небілкових SH-груп - в 1,4 рази, білкових та загальних SH-груп - в 1,7 рази щодо контролю (табл. 2). Установлене зниження вмісту сульфгідрильних груп у сироватці крові щурів за умов експериментального остеоартрозу свідчить про накопичення ковалентних зв'язків за участі цистеїну та метіоніну, а також про окисненні SH-груп.

Таблиця 2. Уміст сульфгідрильних (SH-) груп у сироватці крові щурів за умов остеоартрозу та введення мультипробіотика, мкмоль х мг білка-1 (M ± m, n = 5)

* - р < 0,05 стосовно контролю; # - р < 0,05 щодо групи тварин із остеоартрозом

За тривалого введення мультипробіотика тваринам із експериментальним остеоартрозом у сироватці крові спостерігається часткове відновлення рівня сульфгідрильних груп: зростає вміст небілкових, білкових та загальних SH-груп - в 1,3 рази щодо групи щурів із патологією (табл. 2).

Виявлено, що введення щурам мультипробіотика призводить до зростання у сироватці крові вмісту небілкових сульфгідрильних груп в 1,3 рази порівняно з даним показником контрольної групи тварин (табл. 2).

Згідно з отриманими нами результатами встановлено, що при монойодацетат-індукованому остеоартрозі у сироватці крові щурів активуються вільноради- кальні процеси. Оскільки білки є високочутливими до вільнорадикального окиснення, тому рівень їх окиснення відображає про-/антиоксидантний баланс в організмі. Відповідно виявлене нами зростання вмісту продуктів окисної модифікації білків може призвести до цілої низки негативних наслідків: порушення структурної організації білків, зміни заряду білкової молекули, трансформації чутливості до протеолізу, що може призвести до порушення або втрати функціональної активності білкових молекул (структурної, каталітичної, регуляторної, транспортної, сигнальної, рецепторної тощо). Крім того, утворений пул модифікованих білків робить їх більш чутливими до протеолізу, що сприяє подальшій інтенсифікації деструктивних процесів. Окиснені білки здатні виступати як джерела вільних радикалів, виснажувати запаси клітинних антиоксидантів (глутатіон, аскорбінова кислота). У молекулярних механізмах вільнорадикальних процесів окиснення білків може спричинити деструкцію інших молекул (ліпіди, ДНК), що сприятиме прогресуванню патологічних станів та розвитку захворювань [16-17].

Виявлене зниження утворення окиснених білкових молекул у сироватці крові за тривалого введення мультипробіотика щурам при експериментальному остеоартрозі пов'язано із широким спектром біологічної активності досліджуваного препарату. Механізм дії мультипробіотика "Симбітер®" базується на його здатності ефективно ліквідовувати мікроекологічні порушення та зменшувати запальні процеси на локальному й системному рівнях організму. Крім того, бактеріальні штами у складі мультипробіотика "Симбітер®" є активними продуцентами фізіологічно активних метаболітів: вітамінів, коротколанцюгових жирних кислот, антиоксидантів та імуномодуляторів, що розширює спектр біологічної активності даного препарату [4-5, 18, 19].

Висновки. Установлено, що при монойодацетатіндукованому остеоартрозі у сироватці крові щурів зростає рівень окисно-модифікованих білків та знижується вміст сульфгідрильних груп, що свідчить про загальний зсув окисно-антиоксидантного балансу крові у прооксидантний бік. Тривале введення мультипробіотика щурам із експериментальною моделлю остеоартрозу призводить до часткового зниження вмісту продуктів окиснення білкових молекул у сироватці крові.

Список використаних джерел

1. O'Neill T.W. Update on the epidemiology, risk factors and disease outcomes of osteoarthritis / T.W. O'Neill, P.S. McCabe, J. McBeth // Best Pract Res Clin Rheumatol. - 2018 Apr; 32(2):312-326. doi: 10.1016/j.berh.2018.10.007.

2. Hunter D.J. Osteoarthritis / D.J. Hunter, S. Bierma-Zeinstra // Lancet. - 2019 Apr; 27; 393(10182):1745-1759. doi: 10.1016/S0140- 6736(19)30417-9.

3. Vitetta L. The gastrointestinal microbiome and musculoskeletal diseases: a beneficial rolefor probiotics and prebiotics / L. Vitetta, S. Coulson, A.W. Linnane and others // Pathogens. 2oi3. Nov 14; 2(4): 606-26. doi: 10.3390/pathogens2040606.

4. Baragi V.M. A new class of potent matrix metalloproteinase 13 inhibitors for potential treatment of osteoarthritis: Evidence of histologic and clinical efficacy without musculoskeletal toxicity in rat models / V.M. Baragi, Becher, A.M. Bendele and others // Arthritis. Rheum. - 2009. - Vol. 60(7). - P. 2008-2018.

5. Дубинина Е.Е. Окислительные модификации белков сыворотки крови человека, метод ее определения / Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров, Д.А. Ходов и др. // Вопросы медицинской химии. - 1995. - № 1. - С. 24-26. Available from: http://pbmc.ibmc.msk.ru/ index.php/ru/article/PBMC-1995-41-1-24-ru.

6. Ellman G. Tissue sulfhydryl groups / G. Ellman // Arch. Biochem. Biophys. - 1959. - Vol. 82, № 1. - P. 70-77. Available from: http://aufsi.auburn.edu/recommendedmethods/01B06.pdf.

7. Lugrin J. The role of oxidative stress during inflammatory processes / J. Lugrin, N. Rosenblatt-Velin, R. Parapanov and others // Biol Chem. - 2014 Feb; 395(2):203-30. doi: 10.1515/hsz-2013-0241.

8. Drevet S. Reactive oxygen species and NADPH oxidase 4 involvement in osteoarthritis / S. Drevet, G. Gavazzi, L. Grange and others // Exp. Gerontol. - 2018. - Vol. 111. - P. 107-117. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

9. Dahl J.U. Protein quality control under oxidative stress conditions / J.U. Dahl, M.J. Gray, U. Jakob // J. Mol. Biol. - 2015. - Vol. 427, № 7. - P. 1549-1563. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.

10. Pajares M. Redox control of protein degradation / M. Pajares, N. Jimйnez-Moreno, I.H. Dias and others // Redox. Biol. - 2015. - Vol. 6. - P. 409-420. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

11. Breusing N. Biomarkers of protein oxidation from a chemical, biological and medical point of view / N. Breusing, T. Grune // Exp. Gerontol. - 2010. - Vol. 45, № 10. - P. 733-737. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

12. Vazquez-Torres A. Redox active thiol sensors of oxidative and nitrosative stress / A. Vazquez-Torres // Antioxid. Redox. Signal. - 2012. - Vol. 17, № 9. - P. 1201-1214. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

13. Meyer A. Glutathione homeostasis and redox-regulation by sulfhydryl groups / A. Meyer, R. Hell // Photosynth. Res. - 2005. - Vol. 86. - P. 435-457. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

14. Davies M.J. Protein oxidation and peroxidation / M. J. Davies // Biochem. J. - 2016 Apr 1; 473 (Pt 7): 805-825. doi: 10.1042/BJ20151227.

15. Domingues R.M. Lipoxidation adducts with peptides and proteins: deleterious modifications or signaling mechanisms? / R.M. Domingues, P. Domingues, T. Melo and others // J. Proteomics. - 2013. - Vol. 92. - P. 110-131. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

16. Дворщенко К.О. Вплив окисного стресу на рівень експресії генів TGF-Я і HGF у печінці щурів в умовах тривалої шлункової гіпохло- ргідрії та за введення мультипробіотика Симбітер / К.О. Дворщенко та ін. // Укр. біохім. журн. - 2013. - Т. 85, № 5. - С. 114-123.

17. Azad M.A.K. Immunomodulatory effects of probiotics on cytokine profiles / M.A.K. Azad, M. Sarker, D. Wan // Biomed. Res. Int. - 2018: 8063647. doi: 10.1155/2018/8063647.

Reference (Scopus)

1. O'Neill T.W., McCabe P.S., McBeth J. Update on the epidemiology, risk factors and disease outcomes of osteoarthritis // Best Pract Res Clin Rheumatol. 2018 Apr; 32(2):312-326. doi: 10.1016/j.berh.2018.10.007.

2. Hunter D.J., Bierma-Zeinstra S. Osteoarthritis // Lancet. 2019 Apr 27;393(10182):1745-1759. doi: 10.1016/S0140-6736(19)30417-9.

3. Vitetta L., Coulson S., Linnane A.W., Butt H. The gastrointestinal microbiome and musculoskeletal diseases: a beneficial rolefor probiotics and prebiotics // Pathogens. 2013 Nov 14;2(4):606-26. doi:10.3390/pathogens2040606.

4. Baragi V.M., Becher G., Bendele A.M., et al. A new class of potent matrix metalloproteinase 13 inhibitors for potential treatment of osteoarthritis: Evidence of histologic and clinical efficacy without musculoskeletal toxicity in rat models // Arthritis. Rheum. - 2009. - Vol. 60(7). - P. 2008-2018.

5. Dubinina E.E., Burmistrov S.O., Hodov D.A., Porotov I.G. Okislitelnyie modifikatsii belkov syivorotki krovi cheloveka, metod ee opredeleniya // Voprosyi meditsinskoy himii. - 1995. - № 1. - С. 24-26. Available from: http://pbmc.ibmc.msk.ru/index.php/ru/article/PBMC-1995-41-1-24-ru.

6. Ellman G. Tissue sulfhydryl groups / G. Ellman // Arch. Biochem. Biophys. - 1959. - Vol. 82, № 1. - P. 70-77. Available from: http://aufsi.auburn.edu/recommendedmethods/01B06.pdf/.

7. Lugrin J., Rosenblatt-Velin N., Parapanov R., Liaudet L. The role of oxidative stress during inflammatory processes // Biol Chem. 2014 Feb; 395(2): 203-30. doi: 10.1515/hsz-2013-0241.

8. Drevet S., Gavazzi G., Grange L. et al. Reactive oxygen species and NADPH oxidase 4 involvement in osteoarthritis // Exp. Gerontol. - 2018. - Vol. 111. - P. 107-117. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

9. Dahl J.U., Gray M.J., Jakob U. Protein quality control under oxidative stress conditions // J. Mol. Biol. 2015. - Vol. 427, №7. - P. 1549-1563. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

10. Pajares M., Jimйnez-Moreno N., Dias I.H. et al. Redox control of protein degradation // Redox. Biol. - 2015. - Vol. 6. - P. 409-420. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.

11. Breusing N., Grune T. Biomarkers of protein oxidation from a chemical, biological and medical point of view // Exp. Gerontol. - 2010. - Vol. 45, № 10. - P. 733-737. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.

12. Vazquez-Torres A. Redox active thiol sensors of oxidative and ni- trosative stress // Antioxid. Redox. Signal. - 2012. - Vol. 17, № 9. - P. 1201-1214. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

13. Meyer A. Glutathione homeostasis and redox-regulation by sulfhydryl groups / A. Meyer, R. Hell // Photosynth. Res. - 2005. - Vol. 86. - P. 435-457. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

14. Davies M.J. Protein oxidation and peroxidation // Biochem. J. 2016 Apr 1; 473(Pt 7): 805-825. doi: 10.1042/BJ20151227.

15. Domingues R.M., Domingues P., Melo T. et al. Lipoxidation adducts with peptides and proteins: deleterious modifications or signaling mechanisms? // J. Proteomics. - 2013. - Vol. 92. - P. 110-131. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

16. Vplyv okysnoho stresu na riven ekspresii heniv TGF-Я i HGF u pechintsi shchuriv v umovakh tryvaloi shlunkovoi hipokhlorhidrii ta za vvedennia multyprobiotyka Cymbiter / K.O. Dvorshchenko [et al.] // Ukr. biokhim. zhurn. - 2013. - Т. 85, № 5. - С. 114-123.

17. Azad M.A.K., Sarker M., Wan D. Immunomodulatory effects of probiotics on cytokine profiles // Biomed. Res. Int. - 2018:8063647. doi: 10.1155/2018/8063647.

Размещено на Allbest.ru