РНК-содержащий вирус штриховатой мозаики ячменя как мутагенный агент

Размещено на http://www.allbest.ru/

3

1

Научный журнал КубГАУ, №161(07), 2020 год

РНК-СОДЕРЖАЩИЙ ВИРУС ШТРИХОВАТОЙ МОЗАИКИ ЯЧМЕНЯ КАК МУТАГЕННЫЙ АГЕНТ

Плотников Владимир Константинович

д.б.н., доцент

Насонов Андрей Иванович

к.б.н.

Салфетников Анатолий Алексеевич

д.c.-х.н., профессор

К «Кубанский государственный аграрный университет им И.Т. Трубилина»,

Краснодар, Россия

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Северо-Кавказский Федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия», Краснодар, Россия

В обзорной статье рассматривается краткая история и содержание вирусологии. Пандемия корона-вируса 2020 года совпала со 100-летием смерти Дмитрия Иосифовича Ивановского (1864-1920), открывшего первый вирус - вирус томатной мозаики (ВТМ) и таким образом, основавшим новую отрасль науки - вирусологию. Особое внимание уделяется РНК-содержащему вирусу штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ), обладающему уникальными свойствами проникать в апикальную меристему растений (ячмень, овёс, пшеница и кукуруза) и локализоваться в генеративных органах и в зерне. Это определяет высокую мутагенную активность ВШМЯ, которую возможно использовать на практике для получения исходного материала в селекции сельскохозяйственных культур. Представлены результаты исследований усиления мутагенной активности ВШМЯ на ячмене в присутствии экзогенных нуклеиновых кислот овса, а также характеристики Северо-Кавказского штамма ВШМЯ, выделенного из листьев ячменя, электронной микроскопией, электрофорезом и ионообменной хроматографией РНК вируса. Методами генной инженерии показано, что мутагенная активность ВШМЯ определяется его способностью усиливать передвижение по геному мигрирующих генетических элементов и вызывать посттраскрипционное молчание многих белоксинтезирующих генов

Ключевые слова: ВИРУСОЛОГИЯ, ЯЧМЕНЬ, ВШМЯ, МУТАГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ, СЕВЕРО-КАВКАЗСКИЙ ШТАММ, ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ, ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ, ГЕННО-ИНЖЕНЕРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

RNA-CONTAINING BARLEY STRIPE MOSAIC VIRUS AS A MUTAGENIC AGENT

Plotnikov Vladimir Konstantinovich

Dr.Sci.Biol., Associate Professor

Nasonov Andrey Ivanovich

Cand.Biol.Sci.

Salfetnikov Anatoliy Alexeevich

Dr.Sci.Agr., Professor Kuban State Agrarian University named after

I.T.Trubilin, Krasnodar, Russia

Federal State Budgetary Scientific Institution «North Caucasian Federal scientific center for horticulture, virticulture, winemaking», Krasnodar, Russia

The review article discusses the brief history and content of Virology. The corona virus pandemic of 2020 coincided with the 100th anniversary of the death of Dmitry Iosifovich Ivanovsky (1864-1920), who discovered the first virus - the tomato mosaic virus (TMV) and thus founded a new branch of science - Virology. Special attention is paid to the RNA-containing Barley stripe mosaic virus (BSMV), which has unique properties to penetrate the apical meristem of plants (barley, oats, wheat and corn) and localize in the generative organs and in the grain. This determines the high mutagenic activity of BSMV, which can be used in practice to obtain the source material in the selection of agricultural crops. The results of studies enhance mutagenic activity BSMV on barley in the presence of exogenous nucleic acids of oats, and characteristics of the North-Caucasian BSMV strain isolated from barley leaves, electron microscopy, electrophoresis and ion-exchange chromatography RNA. Genetic engineering methods have shown that the mutagenic activity of BSMV is determined by its ability to enhance the movement of migrating genetic elements through the genome and cause the silence of many protein-synthesizing genes

Keywords: VIROLOGY, BARLEY, BSMV, MUTAGENIC ACTIVITY, NORTH CAUCASIAN STRAIN, ELECTRON MICROSCOPY, ION EXCHANGE CHROMATOGRAPHY, GENETIC ENGINEERING RESEARCH

штамм вирус ячмень нуклеиновая кислота

Введение

РНК-содержащие вирусы доставляют наибольшие проблемы для человечества. Это вирусы гриппа, иммунодефицита (СПИД) и, наконец, корона-вирус. РНК - удивительное вещество, поражающее разнообразием своих типов и функций, красотой и согласованностью клеточных процессов, в которых оно принимает участие. РНК обладает рибозимными свойствами, т.е. она способна катализировать биохимические реакции подобно белкам-ферментам. Но самое главное - различные виды РНК (мРНК, рРНК и тРНК) составляют структурные и функциональные компоненты белоксинтезирующей системы живой клетки, которая и является основной целью «молекулярного паразитирования» вирусов.

Однако некоторые РНК-содержащие вирусы интересны человеку, когда их функционирование приводит к полезным практическим приложениям. Одним из таковых является вирус штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ), обладающий уникальными особенностями, позволяющими ему вызывать мутации многих генов через усиление активности передвижения мигрирующих генетических элементов (например, в геноме человека они составляют 40 %) и одновременно вызывать сайленсиг (посттранскрипционное молчание) многих белоксинтезирующих генов (например, в геноме человека они составляют 1,6 %) [11, 12, 20, 21].

Зарождение вирусологии связано с вирусом растений, а конкретно - с открытия РНК-содержащего вируса табачной мозаики (ВТМ). Вирусология - одна из самых стремительно развивающихся областей биологии. Это объясняется тем, что вирусы позволили обнаружить новые, неизвестные ранее формы нуклеиновых кислот, в составе некоторых из них - необычные органические основания. Они сыграли выдающуюся роль в доказательстве генетических функций нуклеиновых кислот, расшифровке генетического кода, понимании важнейших механизмов регуляции синтеза клеточных макромолекул и позволили обнаружить новые способы передачи генетической информации от клетки к клетке.

В связи с пандемией вирусного происхождения, вирусы стали главной темой 2020 года. Но полезно вспомнить, что вирусы открыты были в России, в Санкт-Петербургском университете. И первым вирусом, попавшим в поле зрения человека, стал РНК-содержащий вирус табачной мозаики (ВТМ). Вирусология как самостоятельная отрасль науки ведёт свой отсчёт с февраля 1892 года, когда 27-летний Дмитрий Иосифович Ивановский (1864-1920) опубликовал статью «О двух болезнях табака» в журнале «Сельское хозяйство и лесоводство». Краткая её версия на немецком языке появилась в «Трудах Императорской Академии Санкт-Петербурга». Отчёт о своих пятилетних экспериментах молодой человек представил на заседании Академии наук 12 февраля 1892 года. Так виновник неурожайности табака стал популярным объектом исследователей.

Таким образом, пандемия корона-вируса совпала со 100-летием смерти Д. И. Ивановского, который установил, что некий патоген проходит сквозь мельчайшие поры фарфорового фильтра, разработанного в 1884 году сотрудником Луи Пастера Шарлем Шамберланом и считавшегося надёжной преградой для бактерий. И фильтрат сока листьев сохранял свою заразность.

В 1939 году ВТМ впервые увидели в электронный микроскоп. Строение вируса было разгадано в 1955 году с помощью кристаллографии одним из самых талантливых кристаллографов XX века Розалиндой Франклин (Великобритания). Той самой, благодаря данным которой Уотсон и Крик смогли понять структуру ДНК. Она предсказала внутреннюю пустоту вируса и поняла, что его РНК была одноцепочечной. В это же время Ханс Френкель-Конрад и Робли Уильямс из университета Беркли (США) показали, что в вирусе нет ничего, кроме белка и РНК.

В 1946 году Нобелевская премия присуждена американскому исследователю Уэнделу Стэнли за работы по химическому составу вирусов. Он сумел изолировать кристаллы вируса табачной мозаики из заражённых листьев, получивших название «кристаллы Ивановского», и доказать их корпускулярные свойства. В своих статьях и нобелевской лекции лауреат отметил приоритет исследований русского учёного и оценил их роль в зарождении новой науки о фильтрующихся вирусах (к середине XX века уже были известны вирусы ящура, жёлтой лихорадки, бешенства, полиомиелита, кори, гриппа, клещевого энцефалита). Всего же более 20 нобелевских лауреатов обязаны своими открытиями в области вирусологии Д. И. Ивановскому [13].

В целом, вирусы содержат только один вид нуклеиновой кислоты - либо ДНК, либо РНК. Вирусные нуклеиновые кислоты бывают одно- и двухцепоченые, а вирусный геном может состоять из одной или нескольких молекул нуклеиновой кислоты, и если он состоит из одной молекулы, она может быть линейной или кольцевой. Белковый чехол, или белковая трубка, вирусов со спиральной симметрией называется капсидом. Он может быть "голым" или заключённым в липопротеидную оболочку (пеплюс), образующуюся из клеточных мембран.

Для вирусов характерно исключительное разнообразие структурной и функциональной организации генома. Геном может быть представлен одной молекулой нуклеиновой кислоты или, напротив, фрагментами, каждый из которых содержит один или несколько генов. Геномная РНК может быть двунитчатой или однонитчатой.

Размножение вирусов представляет собой тесное взаимодействие клеточных и вирусных молекул. Инфицированная клетка в одно и тоже время является и внешней средой, и как бы частью собственной организации вируса, без которой невозможна реализация его генетической информации. Особенность системы вирус-клетка заключается в наличии двух геномов. В первом случае вирусная нуклеиновая кислота реплицируется, подчиняясь собственным контрольным механизмам. Во втором синтез вирусной нуклеиновой кислоты контролируется клеточным геномом.

Вирусы растений, животных и бактерий обладают многими общими свойствами, но нет доказательств, что тот или иной вирус способен проходить свой полный цикл в растениях и позвоночных или в растениях и бактериях [6].

Все изученные вирусы растений содержат РНК, за исключением вируса мозаики цветной капусты, который содержит двухцепочечную ДНК. Вирусы растений обычно проникают в организм хозяина только через травмы, ибо плотная наружная оболочка растительной клетки непроницаема для них. Репликация вирусов растений, по-видимому, катализируется специфическими репликазами (РНК-зависимыми РНК-полимеразами) [8].

Одним из интереснейших представителей вирусов растений является вирус штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ), который привлёк внимание исследователей ещё в 1963 году, когда было обнаружено, что инфицирование этим вирусом растений кукурузы приводит к изменению соотношения доминантных и рецессивных признаков при расщеплении в F₂ - вместо ожидаемого отношения 3:1 было получено - 2:1 [24]. Мутагенный эффект в значительной мере объясняется способностью ВШМЯ, в отличие от большинства вирусов растений, проникать в апикальную меристему и локализоваться в генеративных клетках растений, и соответственно - в семенах.

Перенос вирусов семенами наблюдается редко, а перенос пыльцой ещё реже. Особенности процесса морфогенеза цветка, очевидно, таковы, что они препятствуют проникновению вирусов в гаметы. Вообще же клетки апикальных меристем, заражённых вирусом растений, как правило, содержат мало вирусных частиц или свободны от них [1, 4, 5].

В настоящей обзорной статье рассматриваются генетические эффекты и молекулярно-биологические характеристики Северо-Кавказского штамма ВШМЯ.

Исследования генетических эффектов ВШМЯ

Молекулярно-биологические характеристики Северо-Кавказского штамма ВШМЯ

Как и у всех представителей Hordeivirus геномная РНК ВШМЯ кодируют семь основных белков: метилтрансферазная/хеликазная и полимеразная субъединицы РНК-зависимой РНК-полимеразы, белок оболочки, три белка TGB, обеспечивающие передвижение вируса локально и от клетки к клетке, и белок патогенности. Возможно, для функционирования белкового комплекса РНК-зависимой РНК-полимеразы необходимы также несколько хозяйских белков, но эти белки еще не идентифицированы [10].

Выделение ВШМЯ и получение его РНК. Для эффективного препаративного выделения вируса большое значение имеет правильный выбор растения-хозяина, в котором он накапливался бы в наибольшем количестве. Использованный сорт ярового ячменя "Каскад" оказался в этом отношении удачным. Вирус накапливался в нём в большом количестве с хорошими проявлениями симптомов болезни.

Выделение вирусов основывается на использовании специфических свойств, отличающих их от компонентов клеток-хозяев. Обычно первая стадия выделения сводится к разрушению клеток и экстракции клеточного сока, в котором он локализуется. Сок представляет собой сложную смесь, содержащую различные ингредиенты клетки, в том числе ферменты, способные разрушать некоторые компоненты экстракта или инактивировать некоторые вирусы. Большинство крупных компонентов клеточного сока (пластиды, митохондрии, фрагменты клеточной стенки и др.) быстро оседают и от них можно легко избавиться низкоскоростным центрифугированием. В соке присутствуют и низкомолекулярные растворимые вещества - сахара, соли, аминокислоты. Наконец, в состав сока входят растительные белки, рибосомы, микросомы, занимающие промежуточное положение между рассмотренными выше группами. Они наиболее близки к вирусам по размерам, составу и стабильности и от них труднее всего освободиться при очистке. Эти компоненты можно отделить от целевого объекта температурной денатурацией (при условии температурной стабильности вирусных частиц) с последующей процедурой низкоскоростного центрифугирования, а также дифференциальным центрифугированием. Сок растений имеет, как правило, довольно низкое значение рН, а большинство вирусов стабильны при рН близком к нейтральному, поэтому рекомендуется некоторое подщелачивание экстракта и проводить выделение в забуференных растворах.

Для определения степени чистоты полученного препарата обычно используются данные электронной микроскопии и спектрофотометрического анализа ВШМЯ. Отсутствие видимых примесей в поле зрения электронного микроскопа (Рисунок 1), а также отношение величин абсорбции ультрафиолета при длинах волн 260 и 280 нм равное единице (А₂₆₀/А₂₈₀=1,0), говорят о достаточной очистке вируса от полирибосом (для которых А₂₆₀/А₂₈₀=1,3) и других субклеточных структур.

Рисунок 1. Электронная микрофотография вируса штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ, увеличение 60 000 раз) [11].

ВШМЯ в отличие от большинства вирусов растений содержит очень мало РНК - всего лишь 4 % от массы вируса. Для сравнения ВТМ содержит 50 % РНК. Тем не менее, выделение РНК ВШМЯ вполне успешно осуществляли классическим фенольно-детергентным методом.

Изучение компонентного состава РНК ВШМЯ. Известно, что вирус штриховатой мозаики ячменя относится к группе многокомпонентных вирусов, полный геном которых состоит из нескольких обособленных друг от друга единиц. Различные штаммы ВШМЯ могут иметь два, три или четыре геномных компонента, различающихся по молекулярной массе и функциональным особенностям. При электрофорезе в 3 %-ом ПААГ РНК было показано, что местный Северокавказский штамм ВШМЯ оказался трёхкомпонентным (Рисунок 2) с характерно специфическим соотношением компонентов РНК (1:2:1), т.е. преобладающим является РНК компонент №2.

Рисунок 2. Электрофорез суммарной РНК вируса штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ), штамм Северо-Кавказский [11].

Для сравнения на рис. 2 показаны электрофореграммы РНК ВШМЯ штаммов Русский, Норвич и Аргентинский мягкий, взятые из литературы [4, 5].

Хроматографическое исследование РНК ВШМЯ. Ионообменная хроматография на МАК - метилированном сывороточном альбумине, сорбированном на кизельгуре (разновидность SiO₂), является действенным способом изучения нуклеиновых кислот вирусов. Однако характер разделения РНК ВШМЯ оказался иным, чем в случае электрофореза. В отличие от электрофореза, где разделение РНК происходит только по молекулярному весу, ионообменная хроматография позволяет разделить нуклеиновые кислоты ещё и по особенностям нуклеотидного состава и вторичной структуры.

Нуклеиновые кислоты являются полианионами и поэтому с метилированным альбумином (поликатион) они связываются ионными связями. Прочность этих связей зависит от концентрации солей в водной фазе колонки. При постепенном увеличении концентрации хлористого натрия в растворе нуклеиновые кислоты элюируются с колонки. Причём порядок элюции коррелирует с их молекулярной массой. Молекулы с меньшей молекулярной массой элюируют с колонки первыми, а более крупные - позже. Двухцепочечные нуклеиновые кислоты связываются с МАК менее прочно, чем их одноцепечечные компоненты.

Некоторые нуклеиновые кислоты плохо элюируются с колонки градиентом солей. К их числу относят мРНК эукариот и вирусоспецифические многоцепочечные РНК. Эти нуклеиновые кислоты можно элюировать с колонки МАК при повышении температуры до 98^оС.

Фракционирование на колонке МАК показало, что половина препарата РНК ВШМЯ сходила с колонки при концентрации хлористого натрия 0,75 - 1 М. Это свидетельствует о том, что выделенная РНК ВШМЯ является высокомолекулярной. Однако РНК элюировалась одним ассимитричным пиком, без подразделения на отдельные фракции (рис. 3). По-видимому, различия по молекулярному весу нивелировались особенностями нуклеотидного состава. Аналогичный профиль элюции в солевом градиенте имела РНК вируса полиомиелита [5].

Другая половина препарата РНК ВШМЯ прочно связывалась с МАК и элюировалась с колонки только при 98^оС (Рисунок 3). Это свидетельствует о том, что РНК ВШМЯ состоит из двух субпопуляций РНК, различающихся по особенностям нуклеотидного состава и вторичной структуры.

Рисунок 3. Фракционирование на колонке МАК (метилированный альбумин-кизельгур) препарата суммарной РНК вируса штриховатой мозаики ячменя (ВШМЯ), штамм Кавказский [11]

Известно, что РНК ВШМЯ имеет поли (А)-последовательности (от 8 до 40 нуклеотидов), которые локализованы внутри молекулы [4, 5]. Это позволяет фракционировать РНК ВШМЯ аффинной хроматографией на поли-(У)-сефарозе, подразделяя поли-(А)⁺ и поли-(А)- фракции РНК. Этот метод позволил получить информацию о характерной особенности нуклеотидного состава солевой и температурной фракции вирусной РНК. Оказалось, что солевая фракция на 15 % представлена поли-(А)⁺ РНК, а температурная - только на 3 %. Это говорит о том, что прочность взаимодействия с МАК температурной фракции определяется не нуклеотидным составом, поскольку известно, что поли-(А) усиливает связь с МАК, а особенностями вторичной структуры РНК. Менее закрытая вторичная структура (большое количество свободных фосфатных групп) обеспечивает более прочное связывание с МАК.

Заключение

Палочковидные спиральные частицы ВШМЯ имеют большое внешнее сходство с вирионами вируса табачной мозаики (ВТМ), однако существенно отличаются от них по параметрам спирали (шаг, внешний диаметр и диаметр внутреннего канала). Сравнение первичной структуры белков оболочки ВШМЯ и ВТМ, ставшее возможным после секвенирования генома ВШМЯ, показало, что эти белки не являются близкородственными (гомология 17 %) [17].

Итак, ВШМЯ относится к группе многокомпонентных вирусов с функционально фрагментированным геномом. Полный геном вируса представлен "плюс" цепями РНК и состоит из четырёх (штаммы Аргентинский мягкий, Северная Дакота 161), трёх (Норвич, Северная Дакота 18), двух (Типичный, Русский, Северная Дакота 129) компонентов.

Индивидуальные РНК вируса заключены в отдельные капсиды и различаются по молекулярной массе: РНК 1 - 1,35х10⁶; РНК 2 - 1,10х10⁶; РНК 3 - 1,00х10⁶; РНК 4 - 0,85х10⁶. С примерной длиной цепи соответственно 4200, 3650, 3250 и 2950 нуклеотидов. Кроме того, показано, что РНК 2 функционально делится на два типа молекул: РНК 2а и РНК 2б, имеющие одинаковые молекулярные массы, но различные первичные последовательности.

Для нормального функционирования вируса в заражённом растении необходимо присутствие в инокуляте всех типов геномных РНК. Исключение составляет РНК 4, утрата которой не приводит к потере инфекционности (что и наблюдается в Северо-кавказском штамме ВШМЯ). Кроме РНК 4 в смеси вирусных РНК было обнаружено два типа субгеномных РНК с молекулярными массами 0,25х10⁶ и 0,70х10⁶. Первая из них составляет менее 1% препарата РНК, а вторая содержится ещё в меньшем количестве.

ВШМЯ обладает ещё одной интересной способностью: соотношение индивидуальных РНК может изменяться в зависимости от условий размножения штамма. РНК 4, а затем и РНК 3 способны утрачиваться при пассировании вируса. Предполагается, что неблагоприятные условия приводят к преимуществам двухкомпонентного варианта ВШМЯ, но остаётся открытым вопрос о том, является ли утрата РНК 4 и 3 истиной трансформацией трёх- и четырёхкомпонентных изолятов в двухкомпонентный или происходит отбор минорной примеси двухкомпонентого штамма, загрязняющего исходный препарат.

На 5'-конце вирусная РНК несёт метилированный и инвертированный гуанозин - так называемую КЭП-структуру подобно мРНК эукариотических клеток, а на 3'-конце тРНК-подобную структуру, способную акцептировать тирозин. Уникальной особенностью РНК ВШМЯ является внутренняя поли-(А)-последовательность, делящая РНК вируса на кодирующую L-область и некодирующую Sh-область, содержащую тРНК-подобную структуру. В зависимости от длины поли(А)-последовательности РНК вируса может сорбироваться на колонке с аффинным сорбентом, образуя поли-(А)- и поли-(А)⁺ фракции. Инфекционность фракций одинакова, но соотношение индивидуальных геномных компонентов в них представлены сильно изменёнными по сравнению с тотальной вирусной РНК. У всех изученных штаммов большая часть РНК 1 присутствовала в поли-(А)⁺ фракции, а поли-(А)- фракция содержала основную часть РНК 2. РНК 3 и распределялась между этими фракциями примерно поровну, а РНК 4 была основным компонентом фракции поли-(А)⁺ РНК.

Индивидуальные РНК вируса имеют значительные области гомологии. Транслируются геномные компоненты ВШМЯ подобно мРНК эукариот как моноцистронные матрицы [5] при этом РНК вируса являются очень эффективными матрицами, предпочтительно связываясь с рибосомами клетки растения-хозяина. В этом они схожи с мРНК запасных белков, преимущественно инициирующих трансляцию в созревающем зерне в присутствии мРНК других белков [11].

Первые этапы исследований молекулярно-биологических характеристик ВШМЯ (1970-1980-е годы) проводились с применением бесклеточной системы синтеза белка [1, 4, 5] и позволили оценить экспрессию РНК вируса. Методами генной инженерии [17, 20, 21], удалось установить роль ВШМЯ в перемещении мобильных генетических элементов и в явлении вирус-индуцированного сайленсинга генов (молчания генов) [11,17], что и является причиной выраженной мутационной активности ВШМЯ.

Главной причиной того, что наука оказалась плохо готова к пандемии корона-вируса, по-видимому, является то, что последние десятилетия развивалось в основном генно-инженерное направление (так называемый «майн-стрим») в ущерб исследованиям белоксинтезирующего аппарата клетки, который является основной мишенью вируса.

Литература

1.Аграновский, А. А. Изучение особенностей концевых структур РНК вируса штриховатой мозаики ячменя: автореф. дисс. … канд. биол. наук / Аграновский Алексей Анатольевич. - М.: МГУ, 1981. - 22 с.

2.Бурдун, А.М. Методические указания по получению рекомбинаций пшеницы с помощью вируса штриховатой мозаики ячменя / А.М. Бурдун, И.В. Панарин, Е.С. Забавина. - Краснодар, 1984.

3.Гершензон, С.М. Мутагенное действие ДНК и вирусов у дрозофилы / С.М. Гершензон, Ю.Н. Александров, С.С. Малюта. - Киев: Наукова думка, 1975. - 68 с.

4.Доля, В. В. Изучение продуктов трансляции отдельных компонентов генома вируса штриховатой мозаики ячменя: автореф. дисс. … канд. биол. наук / Доля Валерьян Владимирович. - М: МГУ, 1980. - 21 с.

5.Доля, В. В. Структура и экспрессия генома гордеивирусов: автореф. дисс. … докт. биол. наук / Доля Валерьян Владимирович. - М: МГУ, 1987. - 53 с.

6.Лурия, С. Общая вирусология / Лурия С. и др. - М.: Мир, 1981. - 680 с.

7.Мухсинов, В.Х. К вопросу о мутагенном эффекте вируса штриховатой мозаики ячменя у ярового ячменя / В.Х. Мухсинов, И.В. Панарин, Е.О. Монастырская // Биохимическая оценка белков зерновых культур в связи с задачами на качество. Сб. науч. тр. КНИИСХ им. П.П. Лукьяненко. - Краснодар, 1985. - С. 48-52.

8.Мэтьюз, Р. Вирусы растений / Р. Мэтьюз. - М.: Мир, 1973. - 600 с.

9.Насонов, А.И. Взаимосвязь содержания катионов магния (Mg++), стабильности РНК и интенсивности метаболизма в клетках эукариот / А.И Насонов, С.Л. Полежаев, А.П. Радуль, В.Г. Рядчиков, В.К. Плотников // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2008, 2(11). - С.104-110.

10.Печникова, Е. В. Структура вируса штриховатой мозаики ячменя и гигантских бактериофагов ЕL и Lin68 по данным криоэлектронной микроскопии: дисс. … канд. биол. наук / Печникова Евгения Викторовна. - М.: МГУ, 2015. -138 с.

11.Плотников, В.К. Биология РНК зерновых культур / В.К. Плотников - Краснодар: ЭДВИ, 2009. - 375 с.

12. Плотников, В.К. Евгений Витальевич Ананьев (1947-2008). Письма в Вавиловский журнал / В.К. Плотников. - 2016. http: //www.bionet.nsc.ru/vogis/download/history_of_Genetics/appx_4.pdf

13.Соснов, А. Разглядевший невидимок (приоритет российского учёного в открытии вирусов неоспорим) / А. Соснов // Газета «Поиск». - 2020, № 16-17, 24 апреля. - С. 13.

14.Уманский, К.Г. Роль вирусов в природе / К.Г. Уманский - М.: Знание, 1981. - 64 с.

15.Шеуджен, А.Х. На службе земли Кубанской / А.Х. Шеуджен, Е.М. Харитонов, Т.Н. Бондарева. - Майкоп: РИПО «Адыгея», 1999. - 552 с.

16.Chirgvin, J.N. Isolation of biologically active ribonucleic acid from sources enriched in ribonuclease / J.N. Chirgvin, A.E. Praybia, R.J. MacDonald, W.J. Rutter // Biochemistry. - 1979. - V.18. - P. 5294-5299.

17.Jackson, A.O. Hordeivirus replication, movement and pathogenesis / A.O. Jackson, H.S. Lim, J. Bragg, U. Ganessum, M.J. Lee // Ann. Rev. Phytopathol. - 2009. - V. 47 - P. 385-422.

18.Jagota, S.K. A new technique for the quicker separation of undamaged microsomes using ascorbic acid / S.K. Jagota, H.M. Danl // Curr. Sci. - 1980. - V. 49. - № 18. - P. 694- 696.

19.Holzberg, S. Barley stripe mosaic virus-induced silencing in monocot plant / S. Holzberg, P. Brosio, C. Gross, G. Pogue // The Plant Journal. - 2002. - V. 30(3). - P. 315- 327.

20.Mottinger, J.P. Mutations of the Adh 1 gene in maize folloving infection with barley stripe mosaic virus / J.P. Mottinger, M.A. Johnes, M. Freeling // Mol. Gen. Genet. - 1984. - V. 195. - P. 367-369.

21.Mottinger, J.P. Stable and unstable mutation in abberant ratio stocks of maize / J.P. Mottinger, S.G. Dellaporte, P.B. Keller // Genetics. - 1984. - V. 106. - P. 751-767.

22.Sandfaer, J. The influence of barley stripe mosaic virus on the frequency of triploids and aneuploids in barley / J. Sandfaer // Barley Genet. Newsletter. - 1972. - V. 2. - P. 72-73.

23.Sandfaer, J. Barley stripe mosaic virus and frequency of triploids and aneuploids in wheat / J. Sandfaer // Genetics. - 1973. - V.73. - P. 4-6.

24.Sprague, G. Virus as mutagenic agent in maize / G. Sprague, H.H. McKinney, I. Greely // Science. - 1963. - V. 67. - P. 1052-1053.

References

1.Agranovskij, A. A. Izuchenie osobennostej koncevyh struktur RNK virusa shtrihovatoj mozaiki jachmenja: avtoref. diss. … kand. biol. nauk / Agranovskij Aleksej Anatol'evich. - M.: MGU, 1981. - 22 s.

2.Burdun, A.M. Metodicheskie ukazanija po polucheniju rekombinacij pshenicy s pomoshh'ju virusa shtrihovatoj mozaiki jachmenja / A.M. Burdun, I.V. Panarin, E.S. Zabavina. - Krasnodar, 1984.

3.Gershenzon, S.M. Mutagennoe dejstvie DNK i virusov u drozofily / S.M. Gershenzon, Ju.N. Aleksandrov, S.S. Maljuta. - Kiev: Naukova dumka, 1975. - 68 s.

4.Dolja, V. V. Izuchenie produktov transljacii otdel'nyh komponentov genoma virusa shtrihovatoj mozaiki jachmenja: avtoref. diss. … kand. biol. nauk / Dolja Valer'jan Vladimirovich. - M: MGU, 1980. - 21 s.

5.Dolja, V. V. Struktura i jekspressija genoma gordeivirusov: avtoref. diss. … dokt. biol. nauk / Dolja Valer'jan Vladimirovich. - M: MGU, 1987. - 53 s.

6.Lurija, S. Obshhaja virusologija / Lurija S. i dr. - M.: Mir, 1981. - 680 s.

7.Muhsinov, V.H. K voprosu o mutagennom jeffekte virusa shtrihovatoj mozaiki jachmenja u jarovogo jachmenja / V.H. Muhsinov, I.V. Panarin, E.O. Monastyrskaja // Biohimicheskaja ocenka belkov zernovyh kul'tur v svjazi s zadachami na kachestvo. Sb. nauch. tr. KNIISH im. P.P. Luk'janenko. - Krasnodar, 1985. - S. 48-52.

8.Mjet'juz, R. Virusy rastenij / R. Mjet'juz. - M.: Mir, 1973. - 600 s.

9.Nasonov, A.I. Vzaimosvjaz' soderzhanija kationov magnija (Mg++), stabil'nosti RNK i intensivnosti metabolizma v kletkah jeukariot / A.I Nasonov, S.L. Polezhaev, A.P. Radul', V.G. Rjadchikov, V.K. Plotnikov // Trudy Kubanskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - 2008, 2(11). - S.104-110.

10.Pechnikova, E. V. Struktura virusa shtrihovatoj mozaiki jachmenja i gigantskih bakteriofagov EL i Lin68 po dannym kriojelektronnoj mikroskopii: diss. … kand. biol. nauk / Pechnikova Evgenija Viktorovna. - M.: MGU, 2015. -138 s.

11.Plotnikov, V.K. Biologija RNK zernovyh kul'tur / V.K. Plotnikov - Krasnodar: JeDVI, 2009. - 375 s.

12. Plotnikov, V.K. Evgenij Vital'evich Anan'ev (1947-2008). Pis'ma v Vavilovskij zhurnal / V.K. Plotnikov. - 2016. http: //www.bionet.nsc.ru/vogis/download/history_of_Genetics/appx_4.pdf

13.Sosnov, A. Razgljadevshij nevidimok (prioritet rossijskogo uchjonogo v otkrytii virusov neosporim) / A. Sosnov // Gazeta «Poisk». - 2020, № 16-17, 24 aprelja. - S. 13.

14.Umanskij, K.G. Rol' virusov v prirode / K.G. Umanskij - M.: Znanie, 1981. - 64 s.

15.Sheudzhen, A.H. Na sluzhbe zemli Kubanskoj / A.H. Sheudzhen, E.M. Haritonov, T.N. Bondareva. - Majkop: RIPO «Adygeja», 1999. - 552 s.

16.Chirgvin, J.N. Isolation of biologically active ribonucleic acid from sources enriched in ribonuclease / J.N. Chirgvin, A.E. Praybia, R.J. MacDonald, W.J. Rutter // Biochemistry. - 1979. - V.18. - P. 5294-5299.

17.Jackson, A.O. Hordeivirus replication, movement and pathogenesis / A.O. Jackson, H.S. Lim, J. Bragg, U. Ganessum, M.J. Lee // Ann. Rev. Phytopathol. - 2009. - V. 47 - P. 385-422.

18.Jagota, S.K. A new technique for the quicker separation of undamaged microsomes using ascorbic acid / S.K. Jagota, H.M. Danl // Curr. Sci. - 1980. - V. 49. - № 18. - P. 694- 696.

19.Holzberg, S. Barley stripe mosaic virus-induced silencing in monocot plant / S. Holzberg, P. Brosio, C. Gross, G. Pogue // The Plant Journal. - 2002. - V. 30(3). - P. 315- 327.

20.Mottinger, J.P. Mutations of the Adh 1 gene in maize folloving infection with barley stripe mosaic virus / J.P. Mottinger, M.A. Johnes, M. Freeling // Mol. Gen. Genet. - 1984. - V. 195. - P. 367-369.

21.Mottinger, J.P. Stable and unstable mutation in abberant ratio stocks of maize / J.P. Mottinger, S.G. Dellaporte, P.B. Keller // Genetics. - 1984. - V. 106. - P. 751-767.

22.Sandfaer, J. The influence of barley stripe mosaic virus on the frequency of triploids and aneuploids in barley / J. Sandfaer // Barley Genet. Newsletter. - 1972. - V. 2. - P. 72-73.

23.Sandfaer, J. Barley stripe mosaic virus and frequency of triploids and aneuploids in wheat / J. Sandfaer // Genetics. - 1973. - V.73. - P. 4-6.

24.Sprague, G. Virus as mutagenic agent in maize / G. Sprague, H.H. McKinney, I. Greely // Science. - 1963. - V. 67. - P. 1052-1053.

Размещено на Allbest.ru