Состав лейкоцитов периферической крови и иммунокомпетентных органов краснухоустойчивой породы карпа в преднерестовый период

Размещено на http://www.Allbest.Ru/

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии внутренних вод им. И.Д. Папанина Российской академии наук

Всероссийский научно-исследовательский институт ирригационного рыбоводства

Состав лейкоцитов периферической крови и иммунокомпетентных органов краснухоустойчивой породы карпа в преднерестовый период

Суворова Т.А., научный сотрудник

Пронина Г.И., д.б.н.; г.н.с.

Микряков Д.В., к.б.н.; зав. лабораторией

Петрушин А.Б., к. с.-х. н., в.н.с.

Аннотация

В статье представлены результаты изучения состава лейкоцитов периферической крови и иммунокомпетентных органов ангелинской краснухоустойчивой породы карпа и карпов, восприимчивых к возбудителям заболевания. Установлено, что в лейкоцитарной формуле периферической крови и селезенки краснухоустойчивых особей достоверно выше содержание лимфоцитов и ниже моноцитов/макрофагов, а в головной почке - меньше процент лимфоцитов и больше макрофагов, чем у карпов других изученных селекционных групп. Статистически достоверных различий индекса обилия лейкоцитов выявлено не было. Полученные данные могут служить основой мониторинга состояния здоровья рыб и проведения селекционно-племенной работы с отбором по иммунной устойчивости.

Ключевые слова: краснуха, кровь, почка, селезенка, лейкоциты, зеркальные карпы, чешуйчатые карпы, краснухоустойчивые карпы

Summary

Composition and correlation of peripheral blood leukocytes and immunocompetent organs of red-resistant carp breed inpre-sparryperiod

Suvorova T.A., researcher, immunology laboratory

Pronina G.I., Doctor of biological sciences; chief researcher

Mikryakov D.V., Candidate of biological sciences; head of the laboratory.

Petrushin A.B.; candidate of agricultural sciences; leading researcher; Deputy Head of the

D. Papanin Institute for biology of inland waters Russian academy of sciences

Federal state budget scientific institution all-Russian research institute of irrigation fish culture

The article presents the results of studying the composition of peripheral blood leukocytes and immunocompetent organs of the angelic rubel resistant breed of carp and carps susceptible to the causative agents of the disease. It has been established that the content of lymphocytes and lower monocytes/macrophages was significantly higher in leukocyte formula of peripheral blood and spleen of rubella-resistant individuals, and the percentage of lymphocytes and more macrophages in the head kidney was lower than in other studied breeding groups. No statistically significant differences in the leukocyte abundance index were found. The obtained data can serve as a basis for monitoring the health status of fish and carrying out selection and breeding work with selection for immune resistance.

Key words: rubella, blood, kidney, spleen, leukocyte, mirror carp, scaly carp, rubella resistant carp

Введение

Краснуха - полиэтиологическое заболевание рыб, вызываемое различными возбудителями: вирус весенней виремии, аэромонады, псевдомонады [1]. Краснуха наносит большой экономический ущерб за счет гибели рыб и затрат на оздоровление рыбоводных хозяйств. Одно из решений данной проблемы - селекция на иммунную устойчивость к возбудителям заболевания. В России выведена ангелинская краснухоустойчивая порода карпа [6]. Исследование этой породы, позволит понять механизмы, обеспечивающие невосприимчивость рыб к инфекционным заболеваниям. Особый интерес представляет изучение клеточного звена иммунной системы, т.к. по количеству, структуре и соотношению лейкоцитов можно судить о функциональном состоянии и характере влияния на организм рыб биотических и абиотических факторов [2; 3; 5; 7; 9].

Ранее были показаны отличия некоторых гематологических показателей между краснухоустойчивыми и восприимчивыми к заболеванию карпами [4; 10]. Сведения о морфологическом составе и соотношении лейкоцитов в гемопоэтических органах карпов ангелинской породы отсутствуют. Проведение дополнительных исследований позволит выявить особенности краснухоустойчивой породы и получить данные, которые могут быть использованы в аквакультуре для повышения устойчивости рыб к инфекционным заболеваниям. На практике это поможет снизить экономический ущерб от гибели, выбраковки больной и переболевшей рыбы, затрат на оздоровление рыбоводного хозяйства.

Цель работы - сравнительное изучение состава лейкоцитов периферической крови и иммунокомпетентных органов краснухоустойчивых и восприимчивых к возбудителям заболевания карпов.

Материал и методы исследований

Исследования проводили в середине мая - начале июня 2018 г. на двухгодовиках карпов. Материал отбирали у 5 особей ангелинской чешуйчатой краснухоустойчивой породы, содержавшихся на экспериментальной прудовой базе «Сунога» ИБВВ им. И.Д. Папанина РАН Ярославской обл. Для сравнения использовали карпов из рыбоводного хозяйства «Киря» Чувашской республики. Пробы отбирали от 10 экземпляров чешуйчатых и 10 зеркальных карпов, восприимчивых к возбудителям краснухи. У исследуемых рыб проводили отбор периферической крови и тканей органов (селезёнка и головная почка). Кровь отбирали из хвостовой вены. Каплю крови наносили на обезжиренное предметное стекло, делали мазок. Мазки-отпечатки головной почки и селезенки делали со среза исследуемого органа. После этого препараты сушили и фиксировали в 96% этаноле 30 мин. Подсохшие мазки и мазки-отпечатки окрашивали по Романовскому-Гимза. Препараты просматривали под световым микроскопом «Биомед-6ПР1-ФК» (*360), анализируя на каждом мазке 200 клеток белой крови. Лейкоциты идентифицировали согласно классификации Н.Т. Ивановой (1983).

Для определения индекса обилия лейкоцитов, или частоты встречаемости клеток белой крови, в мазке просматривали 100 полей зрения на различных участках препарата при увеличении 400x. В каждом поле зрения подсчитывали количество встреченных лейкоцитов, полученные данные суммировали и делили на 100, получая среднее число в одном поле зрения [8].

Статистическую обработку результатов исследования проводили по стандартным алгоритмам, реализованным в пакете программ Statistica V6.0, с использованием t-теста. Различия считали значимыми при p < 0.05.

лейкоцит краснухоустойчивый возбудитель заболевание карп

Результаты исследований

В лейкоцитарных формулах периферической крови и иммунокомпетентных органов карпов выявлены характерные для данного вида клетки: лимфоциты, моноциты, нейтро-, базо-, эозинофилы и бластные формы.

Анализ содержания отдельных пулов лейкоцитов показал, что их уровень зависит от вида исследуемой ткани и варьирует у разных селекционных групп (табл. 1). Однако достоверные различия отмечены в содержании лимфоцитов и моноцитов. В периферической крови зеркальных карпов процентное содержание этих клеток выше, чем у других групп. В пронефросе краснухоустойчивой породы содержание лимфоцитов ниже, а моноцитов/макрофагов выше, чем у чешуйчатых и зеркальных карпов, тогда как в селезенке соотношение этих форм лейкоцитов носит противоположный характер.

Таблица 1

Состав лейкоцитов в периферической крови и иммунокомпетентных органах карпов, %

Примечание:

¹ - достоверные отличия от краснухоустойчивых;

² - достоверные отличия от чешуйчатых карпов.

Сходные результаты получены Прониной с соавт. (2015) при изучении лейкограмм периферической крови краснухоустойчивых карпов в хозяйствах разных зон рыбоводства.

Исследования индекса обилия лейкоцитов не показали достоверных различий среди селекционных групп. Более высокий показатель зафиксирован у краснухоустойчивых карпов (табл. 2).

Таблица 2

Индекс обилия лейкоцитов, (ед./п.зр)

Обсуждение результатов