Чувствительность плесневых грибов Alternaria spp. к новым производным 1,3-диазинона-4 и их ациклическим предшественникам

Размещено на http://www.allbest.ru/

Чувствительность плесневых грибов Alternaria spp. к новым производным 1,3-диазинона-4 и их ациклическим предшественникам

Евгения Васильевна Утяганова1, Екатерина Исаевна Исаева1

Аннотация

Исследована антимикотическая активность новых производных 1,3-диазинона-4 и их ациклических предшественников под лабораторными шифрами ПЯТ1, ПЯТ2, ПЯТ3, ПЯТ4, ПЯТ5, ПЯТ6, ПЯТ7, ПЯТ8, ПЯТ9, ПЯТ10, ПЯТ11, ПЯТ12, ПЯТ13, ПЯТ14, ПЯТ15, полученных путем компьютерного прогнозирования на кафедре органической химии Пятигорского медикофармацевтического института - филиале Волгоградского государственного медицинского университета. Установлено, что исследованные соединения обладают антимикотическими свойствами, что подтверждается выявленными бактерицидным (отсутствием колоний после экспозиции спор микро- мицета с соединением) и бактериостатическим (снижение количества выросших колоний в сравнении с контролем) эффектами, а также изменением культурально-морфологических характеристик. Степень их активности сопряжена с конкретной химической структурой вещества и используемой концентрацией. Полученные результаты актуализируют дальнейшее изучение данного ряда соединений в направлении разработки новых средств с высокой активностью в отношении плесневых грибов.

Ключевые слова: Alternaria spp, новые производные 1,3-диазинона-4 и их ациклические предшественники, фунгицидная активность, фунгистатическое действие, минимальная фунгицидная концентрация, спорообразование, пигментация

Abstract

THE SENSITIVITY OF THE FUNGI ALTERNARIA SPP. NEW 1,3-DIAZINONE-4 DERIVATIVES AND THEIR ACYCLIC PRECURSORS

Ekaterina A. Yurtayeva1, Evgeniya V. Utyaganova1, Ekaterina I. Isaeva1

The antimycotic activity of new derivatives of 1,3-diazinone-4 and their acyclic precursors under the laboratory ciphers ПЯТ1, ПЯТ2, ПЯТ3, ПЯТ4, ПЯТ5, ПЯТ6, ПЯТ7, ПЯТ8, ПЯТ9, ПЯТ10, ПЯТ11, ПЯТ12, ПЯТ13, ПЯТ14, ПЯТ15 obtained by computer prediction at the department of organic chemistry of the Pyatigorsk medical and pharmaceutical Institute-branch of the Volgograd State Medical University. It was found that the studied compounds have antimycotic properties, which is confirmed by the revealed bactericidal (absence of colonies after exposure of micromycete spores with the compound) and bacteriostatic effect (reduction in the number of grown colonies in comparison with the control), as well as changes in cultural and morphological characteristics. The degree of their activity is associated with the specific chemical structure of the substance and the concentration used. The results obtained update the further study of this series of compounds in the direction of developing new agents with high activity against mold fungi.

Keywords: Alternaria spp., new derivatives of 1,3-diazinone-4 and their acyclic precursors, fungicidal activity, fungistatic action, minimal fungicidal concentration, spore formation, pigmentation

Введение

Alternaria spp. - повсеместно распространенные плесневые грибы [1, 2, 3], паразитические виды которых способны продуцировать более 20 токсинов различных по химическому составу: липидной, белковой природы и др. Альтеротоксины способны развивать отдаленные эффекты, проявляя генотоксичность, влияя на репродуктивность, индуцируя развитие опухолевых процессов, гематологических заболеваний [4, 5].

Споры Alternaria являются этиологическим фактором возникновения аллергий у лиц, предрасположенных к IgE-зависимым аллергиям [1]. Отмечается высокое содержание данных грибов в большинстве регионов России, в Европе уровень сенсибилизации данным объектом составляет до 9%, что является триггером в развитии аллергического ринита и астмы [6].

Метаболиты, образующиеся при прорастании спор Alternaria spp., токсичность которых показана рядом исследователей [7, 8] для различных млекопитающих, являются пищевыми и кормовыми контаминантами [9, 10, 11, 12], которые ассоциируются с рядом заболеваний: дерматомикозами, фео- гифомикозами, инвазивными инфекциямии др. [13, 14, 15]. К группе риска относятся иммуноком- проментированные лица, у которых отмечаются токсикозы, аллергии, кератиты, дерматомикозы, этиологической причиной которых являются Alternaria spp. [14, 15].

Результаты исследований и их обсуждение. ДМСО, используемый в качестве растворителя для исследуемых веществ, при высоких концентрация (128; 64; 32 мкг/мл) оказывал на Alternaria spp. незначительное фунгистатическое действие. Ингибирование относительно контроля (рис. 1) под действием ДМСО составляло 57,4; 50,7 и 24,6 %, соответственно. Дальнейшее снижение концентрации вещества не влияло на рост и развитие микромицетов, культурально-морфологических изменений под действием ДМСО не выявлено (рис. 2).

Новые производные 1,3-диазинона-4 и их ациклические предшественники, полученные путем компьютерного прогнозирования на кафедре органической химии Пятигорского медикофармацевтического института - филиале Волгоградского государственного медицинского университета^], проявляют широкий спектр антимикробной активности [17, 18, 19] и являются практически нетоксичными соединениями [20, 21].

Цель: исследовать чувствительность плесневых грибов рода Alternaria к новым производным 1,3-диазинона-4 и их нециклическим предшественникам для выявления соединений с фунгицидной активностью, перспективных для создания эффективных и безопасных противомикотических средств.

Материалы и методы исследования

плесневые грибы бактерицидный

Предметом исследования стали новые производные 1,3-диазинона-4 и их ациклические предшественники под лабораторными шифрами ПЯТ1, ПЯТ2, ПЯТ3, ПЯТ4, ПЯТ5, ПЯТ6, ПЯТ7, ПЯТ8, ПЯТ9, ПЯТ10, ПЯТ11, ПЯТ12, ПЯТ13, ПЯТ14, ПЯТ15, полученные путем компьютерного прогнозирования на кафедре органической химии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиале Волгоградского государственного медицинского университета [16].

Влияние синтетических веществ на ростовые характеристики микромицетов исследовали путем экспозиции спор микромицетов в мясопептонный бульон (МПБ) в течение суток с различной концентрацией изучаемых веществ (128; 64; 32; 16; 8; 4; 2 мкг/мл) с дальнейшим высевом спор на питательную среду Чапека [22]. Контролем служили пробы, культивируемые в МПБ и МПБ + димексид (ДМСО), высеваемые на аналогичную питательную среду. Культуральные изменения микромицетов устанавливали через 5 суток [22].

Рис. 1. Контроль Alternaria spp. (чистая культура без воздействия)

Морфологические изменения под действием изучаемых соединений определяли путем микро- скопирования («OPTIKA microscopes», В-182, Italy) препаратов при увеличении х 40.

Рис. 2. Влияние ДМСО на рост Alternaria spp. Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Соединение под лабораторном шифром ПЯТ1проявляло выраженную активность в отношении Alternaria spp.: минимальная фунгицидная концентрация (МФК) составила 4 мкг/мл.

При снижении концентрации активного вещества в 2 раза выявлено фунгистатическое действие, ингибирование составило 98,5 % (рис. 3).

Рис. 3. Активность ПЯТ1 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

При этом развивающийся мицелий гриба демонстрировал значительные изменения морфологических признаков (рис. 4). Ростовые трубки были неполноценно развиты, на кончиках растущих гиф выявлялись сфероподобные структуры. Данные изменения приводили к формированию часто септи- рованного бусоподобного мицелия. Выявлено отсутствие спорообразования и пигментации (рис. 4).

Рис. 4. Морфологические видоизменения Alternaria spp. под действием ПЯТ1 при концентрации 2 мкг/мл. Увеличение я 40

Сопоставимо с ПЯТ1 действовали соединения под лабораторными шифрами ПЯТ11 и ПЯТ8.Соединение ПЯТ11 в условиях 4 мкг/мл и выше полностью подавляло рост тест-объекта. Концентрация 2 мкг/мл подавляла рост микроорганизма на 96 % (рис. 5), при этом наблюдалось формирование сильно разветвленного мицелия, отсутствие спорообразования и вакуол изация. Мицелий гриба утолщался, сливался, образуя своеобразные тяжи, что, возможно, являлось следствием лизиса его клеточной стенки.

Рис. 5. Активность ПЯТ11 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Фунгицидное действие производного диазинона ПЯТ8 наблюдали при концентрациях 8 мкг/мл и выше. Ингибирование роста микромицетов в условиях концентрации 4 мкг/мл составило 98,5 %, 2 мкг/мл - 97 % (рис. 6). При этом выявлено отсутствие пигментации колоний и спорообразования.

Рис. 6. Активность ПЯТ8 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл.

МФК соединений ПЯТ3, ПЯТ13, ПЯТ4, ПЯТ9 составляла 32 мкг/мл. При понижении содержания ПЯТ3 до 4 мкг/мл выявлено подавление роста микромицета на 97 %, отсутствие пигментации и ослизнение колоний. В условиях концентрации 2 мкг/мл ингибирующего действия не наблюдали, однако колонии микромицета приобретали дрожжеподобную структуру с ярко выраженной пигментацией (рис. 7). При этом формировался сильно разветвленный мицелий, отсутствовало спорообразование, вакуолизация. Мицелий гриба утолщался, сливался, образуя своеобразные тяжи, что, возможно, явилось следствием лизиса клеточной стенки: наблюдалось старение гриба на 5 стуки культивирования.

Рис. 7. Активность ПЯТ3 в отношении Alternaria spp. Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

При снижении концентрации ПЯТ4 до 16; 8; 4 мкг/мл степень подавления роста Alternaria spp. составляла 97; 96; 54 %, соответственно. В условиях применения 2 мкг/мл фунгистатического действия не выявлено (рис. 8).

Рис. 8. Активность ПЯТ4 в отношении Alternaria spp. Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Под действием данного вещества отсутствовала видимая пигментация колоний. Видоизменение морфологии (рис. 9) микромицета наблюдалось в результате действия 16 и 8 мкг/мл: присутствовало формирование «неправильных» гиф, образование утолщения стенки мицелия на отдельных участках гиф, вакуолизация, образование сфероподобных участков нитей мицелия.

Рис. 9. Морфологические видоизменения Alternaria spp. под действием ПЯТ4 при концентрации 16 мкг/мл

В изученном диапазоне концентраций 16-2 мкг/мл вещество ПЯТ13 подавляло рост микромицета на 96-76,5 %. При этом мицелий гриба был умеренно разветвлен с ярко выраженной вакуолизацией (рис. 10).

Рис. 10. Активность ПЯТ13 в отношении Alternaria spp. Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Соединение ПЯТ9 при концентрациях 16; 8; 4 мкг/мл ингибировало рост тест-объекта на 92,6; 89,7; 61,8 %, соответственно. Колонии были мелкими, без видимой пигментации. В условиях 2 мкг/мл интенсивность роста была вдвое ниже, чем в контроле, но колонии соответствовали последнему морф о- логически. Во всех случаях отсутствовало спорообразование (рис. 11).

Рис. 11. Активность ПЯТ9 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

МФК соединения под лабораторным шифром ПЯТ6 составила 64 мкг/мл. При снижении концентрации вещество оказывало фунгистатическое действие, ингибируя рост микромицета на 98,5 % (при 16 мкг/мл) - 60,3% (при 2 мкг/мл). Наблюдали снижение видимой интенсивности пигментации и отсутствие спорообразования (рис. 12).

Рис. 12. Активность ПЯТ6 в отношении Alternaria spp. Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Соединения ПЯТ5, ПЯТ12, ПЯТ14, ПЯТ15 фунгицидно действовали только в условиях 128 мкг/мл. При понижении концентрации ПЯТ5 наблюдали ингибирование роста тест-объекта на 97-48,5 %. При этом выявлено отсутствие пигментации (до дозы внесенного вещества - 2 мкг/мл). Наблюдалось формирование сильно разветвленного и септированного мицелия, его вакуолизация, отсутствие спорообразования (рис. 13).

Рис. 13. Активность ПЯТ5 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Соединение ПЯТ12 при концентрации ниже 128 мкг/мл действовало фунгистатически. Минимальная степень ингибирования составила 48,5 % (2 мкг/мл). Соединение вызывало стерилизацию, сильное разветвление мицелия, вакуолизацию гиф (рис. 14).

Рис. 14. Активность ПЯТ12 в отношении Atternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

При инкубации спор Alternaria spp. с веществом ПЯТ14 в концентрации 64 мкг/мл наблюдали ингибирование роста гриба до 99 % (соединение действовало практически фунгицидно), при этом отсутствовало спорообразование. Дальнейшее снижение концентрации не вызывало изменения культурально-морфологических признаков тест-объекта, степень ингибирования при более низких концентрациях составила 91,2 % (32 мкг/мл) - 64,7 % (2 мкг/мл) (рис. 15).

Рис. 15. Активность ПЯТ14 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Для микромицета Alternaria spp. под действием ПЯТ15 было характерно отсутствие спорообразования и вакуолизации мицелия. Фунгистатическое действие выявлено для концентраций 64; 32; 16; 8; 4; 2 мгм/мл и соответствовало 98,5; 95,2; 97,1; 94,6; 94,1 и 25 %. Под действием вещества наблюдали отсутствие пигментации (рис. 16).

Рис. 16. Активность ПЯТ15 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Соединения ПЯТ10, ПЯТ7 и ПЯТ2 в отношении Alternaria spp. были менее активны: проявляли только фунгистатическое действие.

Соединение ПЯТ2, оказывая фунгистатическое действие при всех примененных концентрациях, приводило к отсутствию (128-16 мкг/мл) или снижению пигментации (8-2 мкг/мл) у тест-объекта. Применение всех концентраций соединения способствовало формированию излишне разветвленного мицелия и отсутствию спорообразования (рис. 17).

Рис. 17. Активность ПЯТ2 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Для ПЯТ10 в ряду разведений ингибирование составило 94,1-44,1 %. При этом со снижением концентрации наблюдали увеличение диаметра колоний; в условиях 8 мкг/мл и меньше сохранялась пигментация, для доз вещества 32 мкг/мл и выше было характерно ослизнение колоний. Морфологические изменения характеризовались увеличением степени разветвленности мицелия в прямой зависимости от уровня концентрации соединения, спорообразование отсутствовало у всех экспериментальных образцов (рис. 18).

Рис. 18. Активность ПЯТ10 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Фунгистатическое действие ПЯТ7 выявлено в диапазоне концентраций 128-32 мкг/мл. Дальнейшее снижение концентрации не влияло на рост микромицета. Видимых изменений культуральноморфологических признаков не наблюдалось, за исключением некоторого снижения степени пигментации (рис. 19).

Рис. 19. Активность ПЯТ7 в отношении Alternaria spp.

Концентрация в ряду от 128 (а) до 2 (g) мкг/мл

Заключение

Проведенные исследования показали, что новые производные 1,3-диазинона-4 и их ациклические предшественники под лабораторными шифрами ПЯТ1, ПЯТ2, ПЯТ3, ПЯТ4, ПЯТ5, ПЯТ6, ПЯТ7, ПЯТ8, ПЯТ9, ПЯТ10, ПЯТ11, ПЯТ12, ПЯТ13, ПЯТ14, ПЯТ15 обладают антимикотическими свойствами, что подтверждается выявленными бактерицидным (отсутствием колоний после экспозиции спор микромицета с соединением) и бактериостатическим (снижение количества выросших колоний в сравнении с контролем) эффектами, а также изменением культуральноморфологических характеристик. Степень их активности сопряжена с конкретной химической структурой вещества и используемой концентрацией.

Наиболее эффективными из представленных соединений являются ПЯТ1, ПЯТ8, ПЯТ11 с ми-нимальной фунгицидной концентрацией 4 мгк/мл, менее активны в отношении Alternaria spp. оказались ПЯТ10, ПЯТ7 и ПЯТ2, проявляющие при использованных концентрациях только фунгистатиче- скую активность.

Таким образом, производные 1,3-диазинона-4 и их ациклические предшественники под лабора-торными шифрами ПЯТ1, ПЯТ2, ПЯТ3, ПЯТ4, ПЯТ5, ПЯТ6, ПЯТ7, ПЯТ8, ПЯТ9, ПЯТ10, ПЯТ11, ПЯТ12, ПЯТ13, ПЯТ14, ПЯТ15 являются перспективными для дальнейшего изучения в направлении разработки новых средств с высокой активностью в отношении плесневых грибов.

Список источников

1. Ганнибал Ф. Б. Виды рода Alternaria, обнаруженные в России и на некоторых соседних территориях // Микология и фитопатология. 2015. Т 49, № 6. C. 374-385.

2. Christensen K. B., Van Klink J. W., Wearers R. T., Larsen T. O., Andersen B., Phipps R. K. Novel chemotax- onomic markers of the Altemariainfectoria species-group // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2005. Vol. 53, no. 24. P. 9431-9435.

3. Liu, D. Alternaria. In: Molecular Detection of Foodborne Pathogens, edited by Dongyou L., CRC Press, Taylor & Francis Group. USA, 2010. 879 p.

4. Muller M. E. H., Korn U. Alternaria mycotoxins in wheat - A 10 years survey in the Northeast of Germany // Food Control. 2013. Vol. 34, no. 1. Р 191-197.

5. Solfrizzo M. Recent advances on Alternaria mycotoxins // Current Opinion in Food Science. 2017. Vol. 17. Р. 57-61.

6. Bush R. K., Prochnau J. J. Alternaria-induced asthma // The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 2004. Vol. 113, no. 2. P 227-234.

7. Walravens, J. Validated UPLC-MS/MS methods to quantitate free and conjugated Alternaria toxins in commercially available tomato products and fruit and vegetable juices in Belgium / Walravens J., Micula H., Rychlik M., Asam S., Devos T., Ediage E. N., Mavungu J. D. D., Jacxsens L., Van Landschoot A., Vanhaecke L., De Saeger S. // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2016. Vol. 64, no. 24. P. 5101-5109.

8. Wenderoth M., Garganese F., Schmidt-Heydt M., Tobias S. S., Ippolito A., Sanzani S. M., Fischer R. Alter- nariol as virulence and colonization factor of Alternaria alternate during plant infection // Molecular Microbiology. 2019. Vol. 112, no. 1. P 131-146.

9. Джатдоева А. А., Селимов Р Н., Грачева Т. С., Метальников П. С., Комаров А. А. Исследование загрязненности микотоксинами кормов и кормового сырья на территории Российской Федерации // Успехи меди-цинской микологии. 2018. Т. 19. С. 297-298.

10. Папуниди К. Х., Тремасов М. Я., Фисинин В. И., Никитин А. И., Семенов Э. И. Микотоксины (в пищевой цепи) // Издание второе, переработанное и дополненное. Казань : ФЦТРБ-ВНИВИ, 2017. 188 с.

11. Hickert S., Bergmann M., Ersen S., Cramer B., Hump H-U. Survey of Alternaria toxin contamination in food from the German market, using a rapid HPLC-MS/MS approach // Mycotoxin Research. 2016. Vol. 32, no. 1. Р. 7-18.

12. Yekeler H., Bitmis K., Ozcelik N., Doymaz M. Z., Calta M. Analysis of toxic effects of Alternaria toxins on esophagus of mice by light and electron microscopy// Toxicologic pathology. 2001. Vol. 29, no. 4. P 492-497.

13. Lopez P, Venema D., Rijk T., Kok A., Scholten J. M., Hans G. J., Nijs M. M. Occurrence of Alternaria toxins in food products in the Netherlands // Food Control. 2016. Vol. 60. Р 196-204.

14. Romano C., Vanzi L., Massi D., Difonzo E. M. Subcutaneous alternariosis // Mycoses. 2005. Vol. 48, no. 6. P. 408-412.

15. Sood N., Gugnani H. C., Guarro J., Palival-Joshi A., Vijayan V. K. Subcutaneous phaeohyphomycosis caused by Alternariaalternata in an immunocompetent patient/ // International Journal of Dermatology. 2007. Vol. 46, no. 4. P. 412-413.

16. Кодониди, И. П. Молекулярное конструирование и целенаправленный синтез N-производных

1.3- диазинона-4 : дис. ... д-ра фармац. наук. Пятигорск, 2011. 365 с.

17. Лужнова С. А., Воронков А. В., Кодониди И. П., Габитова Н. М., Храпова А. В., Биллель Суда Активность новых производных 1,3-диазинона-4 и их нециклических предшественников в отношении Staphilococcus aureus // Астраханский медицинский журнал. 2017. Т. 12, № 2. С. 56-63.

18. Лужнова С. А., Воронков А. В., Кодониди И. П., Габитова Н. М., Биллель Суда Исследование активности новых производных 1,3-диазинона-4 и их ациклических предшественников в отношении Escherichia coli // Фармация и фармакология. 2018. Т. 6, № 1. С. 73-85.

19. Luzhnova S. A., Voronkov A. V., Gabitova N. M., Billel S. Investigation of the activity of new derivatives of

1.3- diazinone-4 and their acyclic precursors with respect to bacteria of the genus Рroteus // Research Results in Pharmacology. 2018. Vol. 4, no. 1. P. 11-16.

20. Воронков А. В., Оганесян Э. Т., Кодониди И. П., Лужнова С. А., Аджиенко В. Л., Черников М. В., Поздняков Д. И. Пат. 2683573 Рос. Федерация Противотуберкулезное средство на основе n-[4-(4-аминобензсульфанил)-фенил]-2-бензоиламинобензамида, обладающее низкой токсичностью. Заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России. № 2018107007; заявл. 26.02.2018; опубл. 29.03.2019. Бюл. 10.

21. Лужнова С. А., Юшин М. Ю., Воронков А. В., Осыченко С. А., Габитова Н. М., Юртаева Е. А. Экспериментальное исследование специфической активности производного 1,3-диазинона-4 соединения пяtd1 in vivo // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2016. № 5. С. 18-22.

22. Еремеева, С. В. Плесневые грибы. Методы выделения, идентификации, хранения: учебное пособие. Астрахань : АГТУ, 2011. 112 с.

References

1. Gannibal Ph. B. Species of the genus Altemaria revealed in Russia and some neighboring territories. Miko- logiya i fitopatologiya = Mycology and Phytopathology. 2015; 49 (6): 374-385. (In Russ.).

2. Christensen K. B., Van Klink J. W., Wearers R. T., Larsen T. O., Andersen B., Phipps R. K. Novel chemotax- onomic markers of the Alternariainfectoria species-group. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2005; 53 (24): 9431-9435.

3. Liu D., Pruett S. B., Coyne C. Altemaria. In: Molecular Detection of Foodborne Pathogens. Dongyou L., editor. USA: CRC Press, Taylor & Francis Group Publ.; 2010. 879 p.

4. Muller M. E. H., Korn U. Altemaria mycotoxins in wheat - A 10 years survey in the Northeast of Germany. Food Control. 2013; 34 (1): 191-197.

5. Solfrizzo M. Recent advances on Alternaria mycotoxins. Current Opinion in Food Science. 2017; 17: 57-61. doi: 10.1016/j.cofs.2017.09.012.

6. Bush R. K., Prochnau J. J. Alternaria-induced asthma. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 2004; 113 (2): 227-234.

7. Walravens J., Micula H., Rychlik M., Asam S., Devos T., Ediage E. N., Mavungu J. D. D., Jacxsens L., Van Landschoot A., Vanhaecke L., De Saeger S. Validated UPLC-MS/MS methods to quantitate free and conjugated Alter- naria toxins in commercially available tomato products and fruit and vegetable juices in Belgium. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2016; 64 (24): 5101-5109. doi: 10.1021/acs.jafc.6b01029.

8. Wenderoth M., Garganese F., Schmidt-Heydt M., Tobias S. S., Ippolito A., Sanzani S. M., Fischer R. Alter- nariol as virulence and colonization factor of Alternaria alternate during plant infection. Molecular Microbiology. 2019; 112 (1): 131-146.

9. Dzhatdoeva A. A., Selimov R. N., Gracheva T. S., Metal'nikov P. S., Komarov A. A. Investigation of my- cotoxin contamination of feed and feed raw materials on the territory of the Russian Federation. Uspekhi meditsinskoy mikologii = Advances in medical mycology. 2018; 19, pp. 297-298. (In Russ.).

10. Papunidi K. Kh., Tremasov M. Ya., Fisinin V I., Nikitin A. I., Semenov E. I. Mycotoxins (in food chain). 2nd ed. Kazan': FTsTRB-VNIVI Publ.; 2017. 188 p. (In Russ.).

11. Hickert S., Bergmann M., Ersen S., Cramer B., Hump H-U. Survey of Alternaria toxin contamination in food from the German market, using a rapid HPLC-MS/MS approach. Mycotoxin Research. 2016; 32 (1): 7-18. doi: 10.1007/s12550-015-0233-7.

12. Yekeler H., Bitmis K., Ozcelik N., Doymaz M. Z., Calta M. Analysis of toxic effects of Alternaria toxins on esophagus of mice by light and electron microscopy. Toxicologic pathology. 2001; 29 (4): 492-497.

13. Lopez P., Venema D., Rijk T., Kok A., Scholten J. M., Hans G. J., Nijs M. M. Occurrence of Alternaria toxins in food products in the Netherlands. Food Control. 2016; 60: 196-204.

14. Romano C., Vanzi L., Massi D., Difonzo E. M. Subcutaneous alternariosis. Mycoses. 2005; 48 (6): 408-412. doi: 10.1016/j.foodcont.2013.04.018.

15. Sood N., Gugnani H. C., Guarro J., Palival-Joshi A., Vijayan V. K. Subcutaneous phaeohyphomycosis caused by Alternaria alternata in an immunocompetent patient. International journal of dermatology. 2007; 46 (4): 412-413. doi: 10.1111/j.1365-4632.2006.03053.x.

16. Kodonidi I. P. Molecular design and targeted synthesis of N-derivatives of 1,3-diazinone-4. Dissertation of the Doctor of Pharmaceutical Sciences. Pyatigorsk; 2011. 365 p. (In Russ.).

17. Luzhnova S. A.,Voronkov A. V., Kodonidi I. P., Gabitova N. M., Khrapova A. V., Billel Suda. Activity of new 1,3-diazinone-4 derivatives and their non-cyclic precursors against Staphilococcys aureus. Astrakhanskiy meditsin- skiy zhurnal = Astrakhan Medical Journal. 2017; 12 (2), pp. 56-63. (In Russ.).

18. Luzhnova S. A., Voronkov A. V., Kodonidi I. P., Gabitova N. M., Billel Suda. Investigation of the activity of new 1,3-diazinone-4 derivatives and their acyclic precursors against Escherichia coli. Farmatsiya i farmakologiya = Pharmacy and Pharmacology. 2018; 6 (1): 73-85. (In Russ.).

19. Luzhnova S. A.,Voronkov A. V., Gabitova N. M., Billel S. Investigation of the activity of new derivatives of

1,3- diazinone-4 and their acyclic precursors with respect to bacteria of the genus Proteus. Research Results in Pharma-cology. 2018; 4 (1): 11-16.

20. Voronkov A. V., Oganesyan E. T., Kodonidi I. P., Luzhnova S. A., Adzhienko V. L., Chernikov M. V., Pozdnyakov D. I. Antituberculosis agent based on n - [4 - (4-aminobenzesulfanyl) - phenyl] - 2- benzoylaminobenzamide, withlowtoxicity. Patent RF, no. 2683573, 2019. (In Russ.).

21. Luzhnova S. A., Yushin M. Yu., Voronkov A. V., Osychenko S. A., Gabitova N. M., Yurtaeva E. A. Experimental study of the specific activity of the 1,3-diazinone-4 derivative of the compound ptd1 in vivo. Zhurnal mikrobi- ologii, epidemiologii i immunobiologii = Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. 2016; (5): 18-22. (In Russ.).

22. Eremeeva S. V Mold fungi. Methods of allocation, identification, storage. Astrakhan': Astrakhan State Technical University, 2011. 112 p. (In Russ.).

Размещено на Allbest.ru